Apuntes Biotecnologia

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APUNTES BIOTECNOLOGÍA

PRIMER PARCIAL
Es la modificación de los genes, modificar los genes se puede realizar añadiendo un gen o
interrumpirlo

Biotecnología
Se define como el uso de organismos vivos, o los productos de los mismos, para el
beneficio humano(o el beneficio del entorno) con el fin de desarrollar un producto o resolver
un problema.
TIPO DE BIOTECNOLOGÍA
1. microbiana: implica el uso de microorganismos como bacterias y levaduras. Por
ejemplo, el uso de levadura para hacer cerveza o vino.
2. Agrícola: incluye la modificación de los genes de las plantas para hacer las
resistentes a las plagas o para alimentos de mayor contenido proteico y vitamínico.
3. Animal: los animales pueden usarse como bioreactores para obtener productos
importantes, Por ejemplo, para la producción de anticipos u otras proteínas
terapéuticas (proteína de coagulación) en la leche de la vaca.
4. Acuática: cría de trucha, salmón y el siluro,
Ácidos nucleicos y su función en la célula
Ácido desoxirribonucleico (ADN)
Ácido ribonucleico (ARN)
cadenas poliméricas en la que las unidades monoméricas están conectadas por enlaces
fosfodiéster.
El primer nivel de la estructura del ADN es la secuencia de nucleótidos.
● La estructura primaria hace referencia a la secuencia de los nucleótidos.
● La estructura secundaria hace referencia a la forma helicoidal.
● La estructura terciaria hace referencia superenrollamiento del ADN
El gen es un fragmento del adn que da como producto una proteína.
GENOMA: producto completo que se haya en una célula

Recombinación genética
Homologa Tipo de recombinación genética en la que se intercambian secuencias de entre
do moléculas parecidas o idénticas del ADN
consiste en recombinación heteróloga o sitio específico, proceso mediante el cual se unen
dos segmentos bicatenarios de ADN no relacionados.

Proceso de transposición de fragmentos de ADN : Barbara MCClintock (1902-1992), premio


nobel de medicina en 1983
Consiste en el intercambio de fragmentos de ADN a otro cromosoma.
● TRANSFORMACIÓN: la célula receptora capta del medio ADN libre procedente de
otra célula
● CONJUGACIÓN: se realiza contacto físico entre la célula durante y la receptora
● transinándose un plásmido.
● TRANSDUCCIÓN : El vector de transferencia genética es un bactenofago

Ingeniería genética
Es un proceso que emplea tecnologías de laboratorios para alterar la composición del ADN
de un organismo. Por ejemplo; cambio en un par de bases o deleción de una región del
ADN o adición de uno nuevo.
● Secuencia del ADN
● La reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
● sistema de transposición
● CRISPR / Cas 9
PCR
se necesita una muestra de ADN que se quiera amplificar.

Región pilinque, sistemas de recepción


TRANSFORMACIÓN VEGETAL Y TÉCNICAS DE SELECCIÓN
1. La transformación de plantas se ha definido como las incorporación estable de
genes foráneos y la expresión de estos en las plantas transformadas.
2. Es un proceso que involucra varias etapas:
3. identificación y aislamiento del gen de interés, PUEDE SER ENDÓGENOS O
FORÁNEO.
4. desarrollo del casete de expresión o construcción quimérica, región promotora de
interés -región.
5. vectores apropiados que permitirán el clonaje o transferencia de la construcción
quimérica.Plásmidos
6. Método para instrucción de DNA de manera estable en el genoma de la célula
vegetal (protocolo de transformación)
7. procedimiento para la distribución de los individuos transformados, de aquellos no
transgénicos (selección).
8. Métodos analíticos para detectar el gen foráneo y sus productos en la plata
transformada. PCR (para determinar la inserción del transgen, RT. PCR) para
verificar su transcripción y Western Blot o ELISA (para detener la producción de la
proteína )
Genes Marcadores de seleccion (GMS )
los gms pueden ser aquellos que confieren resistencia herbicidas, antibioticos u otras
condiciones de toxicidad o estres para plantas, lo que permite diferenciar aquellas celulas,
tejidos o plantas sid
MÉTODOS DE TRANSFORMACIÓN
métodos indirectos
Son métodos basados en la utilización de vectores biológicos
Agrobacterium tumefaciens
Las heridas en la célula vegetal liberan compuestos fenólicos y monosacáridos que son
reconocidos por A. tumefaciens.
Mejoras en este método incluye:
1. agroinfiltración. Se emplea tejido floral joven o en desarrollo, sobre el cual se aplica
vacío, mientras se encuentra sumergido en una solución concentrada de
Agrobacterium.
2. Transformación por agrobacterium asistida con sonicación.
3. Trans Bacter.Emplea otros géneros bacterianos Rhizobium sp, Sinorhizobium meliloti
y Mesorhizobium.
VECTORES VIRALES.
deben modificar, Dos métodos:
gen de interés introducción en el virus completo, precedido por el promotor duplicado de la
proteína de la capas de del virus.
El virus es completamente reconstruido y eliminado sustituyendo regiones virales y la
inserción del gen de interés.
Ejemplos:Giminivirus y CAULIMOVIRUS (ADN).
Se han logrado transferir genes con resistencia a antibióticos.
Ventajas:
1. facilidad en la infección.
2. producción ede altos niveles de proteína
3. mayor velocidad en la expresión
4. limitaciones:
5. tamaño del gen limitado
6. provocar enfermedades o fatalidad .
7. El gen de interés no se integra en el genoma de la célula vegetal.
MÉTODOS DIRECTOS
Son métodos basados en procedimientos de naturaleza química, fisicoquímica y mecánica.
LIPOSOMAS
conformados por varias bicapas de lípidos.
Formados por fosfolípidos, dodatidiletonotamina, ácidos grasos o cationes bivalentes.

ventajas:
1. protección contra la degradación por nucleasas
2. capacidad para transportar grandes fragmentos de ADN
3. biocampatin¿bilidad con membranas.
desventajas:
1. frecuencia de transformación muy baja
2. inserción del AD en tander.
3. Preparación de estos lisosomas son costosos y laboriosos
4. Encapsulación del material.
ELECTROPORACIÓN:
ventajas:
● Diez veces mas efectivo que los métodos químicos.
● Muy eficiente, de fácil operación y relativamente simple.
● Desventajas:
● Se requiere protoplastos (células sin pared)
● Otros métodos:
● Sonicación: 20 KH.
● Transferencias mediadas por compuestos químicos:
● polietilenglicol, fosfato de calcio y poli-L-omotina.
● Fibras de carburo de silicona
● microinyección
● microlaser

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