Laboratorio

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PRÁCTICA No.

5 (continuación de la práctica anterior)


TEMA: Mediciones microscópicas
¿Cómo se utiliza un microscopio?
 Utilizar adecuadamente cada uno de los lentes de enfoque para obtener una optimación
del diámetro del campo óptico
 El objeto que se desea observar se coloca en un vidrio transparente llamado
portaobjetos, y se cubre con otro vidrio más fino al que se denomina cubreobjetos.
 El enfoque del objeto se realiza con el tornillo macrométrico, y después se afina con el
tornillo micrométrico, hasta conseguir una visión perfecta. Una vez enfocado el objeto,
se pasa al objetivo inmediatamente superior, hasta obtener el aumento deseado. Cada
vez que cambie de objetivo cuide de no tocar la preparación, el vidrio se puede romper.
Observación con el lente de 10x.
 Poner una muestra de sal sobre el portaobjetos, cubrir y sujetarlo en la platina con las
pinzas.
 Iniciar la observación utilizando el lente de menor aumento 4x y luego pasar al de 10x
 Mirar por el ocular y regular la imagen mediante el uso del macro y micrométricos. Tal
vez se necesite mover el portaobjetos para ver más trozos, utilizar para ello el mando
del carro móvil.
 Dibujar lo que observa y pintar de amarillo el campo óptico.

5. Calcular el diámetro del campo visual del microscopio:

a)con el lente de menor aumento


 Colocar el papel milimetrado en el centro de la placa portaobjetos.
 Añadir una gota de agua y cubrir.
 Enfocar, con el objetivo de 4X, ubicando la placa de manera que coincidan los milímetros
con el diámetro del campo óptico.
 Contar el número de mm y reducir a micras.
 Dibujar lo observado
b) con el lente de observación media
 Enfocar con el lente objetivo de 10X
 Proceder de igual manera que en la observación anterior.
 Dibujar lo observado.
 Realizar los cálculos matemáticos.
c) con el lente de observación amplificada
 Enfocar con el lente objetivo de 40X
 Proceder de igual manera que en las observaciones anteriores.
 Dibujar lo observado.
 Realizar los cálculos matemáticos.
CUESTIONARIO
1. Elabore un cuadro de doble entrada con 4 diferencias entre los lentes objetivos del
microscopio que utilizó.
2. Realizar los ejercicios de reducciones siguientes:
a) 5,35 µm a Å b) 1,65 mm a nm c) 253,19 nm a µm d) 32,22 µm a
nm
3. Explique lo que usted siempre debe hacer, después de ocupar el microscopio (manera
correcta de guardarlo)

EVALUACIÓN:
Se evaluará en base al informe presentado

BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA:
 Karp, G. (2013). Biología Celular y Molecular. 7ª. Ed. España McGraw-Hill.
 Solomon, E; Berg, L; Martin, D. (2011). Biología. 5ª. Ed. México. Editorial McGrawHill.
 Meneses, F; Delgado, C. (2012) Prácticas de Laboratorio. Departamento de Medicina
Veterinaria, Facultad de Ciencias Pecuarias, Universidad de Nariño, Ciudad
Universitaria Torobajo, Pasto, Nariño, Colombia.

BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA
 Sánchez, G. & Trejo, B. (2006) Biología Celular y Molecular. México. Editorial Alfil, S.A.
de C.V. Retrieved from htpp://www.ebrary.com
 Campbell, Neil; Reece, Jane. (2007). Biología. 6ª.Ed. España. Editorial Panamericana.
 Miller, K.  Levine, J. (2010).”Biología”. Editorial Pearson.

Materiales para la próxima clase


Caja de materiales, 2 palillos, mechero de alcohol, yogurt pequeño
(voluntario), tráquea fresca de pollo (individual).
PRÁCTICA No. 6

TEMA: Observación de células procarióticas (bacterias)


OBJETIVO: Identificar correctamente las bacterias observadas al seguir las instrucciones
de la guía de laboratorio y utilizando la técnica de observación mediante el uso del
microscopio compuesto.

INTRODUCCIÓN:
La célula se define como la unidad anatómica, funcional y de origen de los seres vivos.
Aunque todos los organismos están conformados por una o varias células, éstas presentan
algunas diferencias. De esta forma se tienen dos grandes tipos de células, procarióticas y
eucarióticas. (Biggs, 2000)
Desde 1970, Carl Woese, de la Universidad de Illinois, al analizar las secuencias de

nucleótidos de varias moléculas de ARN ribosomal, pudo inferir la existencia de tres


grandes divisiones o dominios en los que se podían agrupar todas las especies biológicas.
Los dominios Bacteria y Archaea incluyen a todos los procariontes y el dominio Eukarya
agrupa a los protistas, los hongos, las plantas y los animales. (UNAM‐Siglo XXI, 2010)
La célula procariótica carece de núcleo celular, son pequeñas que varían desde 0,25 x
1,2 hasta 1,5 x4 µm; visibles al MO y sus subestructuras al ME. Su genoma es una única
molécula de DNA de doble cadena, circular, haploide; tiene ribosomas
http://objetos.uhttp://objetos.unam.mx/biologia/celulaProcariota/index.htmlnam.mx/biologia/celulaProcariota/index.html

de 70S y casi no existe organelos membranosos. (Solomon, 2011)


CE
FLAGELO
LU En el yogur, que es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche,
LA
R
se observará dos tipos bacterianos distintos como son cocos y bacilos de dos cepas
bacterianas: Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy aromático y el
Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante, además un tipo de agrupación de estreptococos.
(Piña, 2008)

PILI
El sarro dental, es un depósito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los
dientes, constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias junto
con sus productos metabólicos. (Wayne, 2006)
La flora bacteriana de la cavidad bucal y tráquea es muy variable dependiendo de las
condiciones que se den en el momento de realizar la preparación, pero generalmente
abundan saprófitas de una gran variedad de morfologías como, cocos, bacilos, diplococos
etc. (Piña, 2008; Wayne, 2006)

 UNIDAD 1:
La Célula y los Sistemas Membranosos y no Membranosos
 Contenido del Sílabo:
Célula: célula procariota
 Resultado de Aprendizaje de la Unidad:
Adquiere conocimientos teóricos y prácticos que le permiten obtener una visión completa
de la célula, integrando las estructuras de los niveles macromolecular, subcelular y celular
de organización biológica y relaciona con el área de la odontología, a través de un trabajo
colaborativo

Se necesita examinar la estructura de las células y de sus estructuras para diferenciar el


tipo al que pertenecen, por lo tanto el microscopio es la herramienta indispensable para
ello pues la gran mayoría son demasiado pequeñas para ser observadas a simple vista.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Facultad: Guía de la práctica, microscopio compuesto, azul de metileno, violeta


de genciana.
Alumno: Caja de materiales, hoja membretada, 2 palillos, mechero de alcohol, yogurt,
tráquea fresca.

CONTENIDO:
Observar el link: https://www.youtube.com/watch?v=IfeqdObn2H4 (bacterias técnica)

1. Identificar las bacterias del yogur


 Con un gotero tomar una muestra del yogur y depositar 1 gota en uno de los extremos
de un portaobjetos.
 Hacer un frotis y deje secar la placa.
 Añadir unas gotas de alcohol metílico para fijar la preparación.
 Secar la muestra agitándola ligeramente y teniendo la precaución de no poner los dedos
sobre la superficie donde están extendidos los microorganismos.
 Teñir con violeta de genciana por 1 minuto.
 Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
 Deje secar la preparación.
 Observar al microscopio con objetivo de 40X
2. Identificar las bacterias de la cavidad bucal

 Preparar una lámina portaobjetos limpia y sin grasa, para ello pase por los dos lados
con un algodón embebido en alcohol.
 Tomar un palillo desechable y pasar por el borde de la encía en la parte que hace
contacto con los dientes.
 Colocar la muestra obtenida sobre una gota de agua en la lámina portaobjetos.
 Mezclar durante un minuto y extender con el fin de definir el frotis.
 Pasar lentamente el portaobjetos a través de la llama del mechero, con esto se fija el
frotis.
 Deje enfriar y coloree con azul de metileno durante 5 minutos. Elimine el exceso de
colorante.
 Dejar que la placa se seque y colocar en el microscopio.
 Ubicar las células con el objetivo de menor aumento y luego observe con el objetivo de
40X.

3. Identificar las bacterias en tráquea

 Preparar una lámina portaobjetos limpia y sin grasa, para ello pase por los dos lados
con un algodón embebido en alcohol.
 Tomar un palillo desechable y raspar el interior de la tráquea fresca cortada por el medio.
 Extender la muestra obtenida en el portaobjetos, a manera de frotis.
 Pasar lentamente la placa a través de la llama del mechero.
 Deje enfriar y colorear con violeta de genciana, durante 1 minuto. Lavar.
 Dejar que la placa se seque y colocar en el microscopio.
 Ubicar las bacterias con el objetivo de menor aumento y luego observar con el objetivo
de 100X, solicite el aceite de inmersión.

CUESTIONARIO
1. Elabore gráficos de la clasificación morfológica completa de las bacterias.
2. Consulte en que se diferencian las bacterias Gram + de las Gram -, elaborando un
cuadro de doble entrada.
3. Investigue la relación de las bacterias de la boca con las caries y enfermedades
periodontales. (10 líneas máx)

EVALUACIÓN:

Se evaluará en base al informe presentado.

BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA:

 Piña, L, Carmen E. (2008). Curso hipermedia de Biología. Disponible en sitio web de la


UNAD: http://www.unad.edu.co/curso_biologia/index.html.
 Wayne N. Becker, Lewis J. Kleinsmith Y Jeff Hardin. (2006). El Mundo De La Célula.
6a ed. Pearson Educación.
 Solomon, E. Berg, L. Martin, D. (2008). “Biología”. Quinta edición, editorial
McGrawHill.
 Biggs, A. Kapicka, C. (2000). “Biología Dinámica”. 1ª. ed. Editorial McGrawHill.
 Ghershman, E. (2006) Célula Procariota. Recuperado de:
http://galileog.com/ciencia/biologia/celulas/celulas_procariotas.htm.
 UNAM‐Siglo XXI. (2010) Enciclopedia de conocimientos fundamentales Biología / Tema
2 Volumen IV,. México, p: 182‐184. Recuperado de:
http://objetos.unam.mx/biologia/celulaProcariota/pdf/procariontes.pdf

BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA:

 Sánchez, G. & Trejo, B. (2006) Biología Celular y Molecular. México. Editorial Alfil, S.A.
de C.V.
Retrieved from htpp://www.ebrary.com
 Karp, G. (2013). Biología Celular y Molecular. 7ª. Ed. España M.cGraw-Hill.
 Campbell, Neil; Reece, Jane. (2007). Biología. 6ª.Ed. España. Editorial Panamericana.
 Miller, K.  Levine, J. (2010).”Biología”. Editorial Pearson.

Materiales para la próxima clase

Caja de materiales, 2 cotonetes, cebolla paitenia muy coloreada y


pequeña.
planta de elodea (presidente) y tráquea fresca de mamífero (voluntario).
PRÁCTICA No. 7
TEMA: Observación de células eucarióticas
OBJETIVO: Elaborar placas de observación celular al microscopio para la identificación
precisa de orgánulos que caracterizan a las células eucarióticas.

INTRODUCCIÓN:
La célula es el factor anatómico común a todos los organismos vivos, pero aunque los
seres vivos están formados por células, no todos se encuentran constituidos de la misma
manera.
EUCARIOTAS: eu= verdadero, karion = núcleo.
Eucariota o eucarionte es un adjetivo que se utiliza en la Biología para referirse a las
células que presentan un núcleo diferenciado, protegido por una membrana y con
citoplasma organizado. También se conoce como eucariota al organismo constituido por
este tipo de célula. (sd. 2008)
Actualmente, los organismos eucariontes constituyen el dominio Eukarya, que incluye
seres de los cuatro reinos: animal, vegetal, fungi y protista. Son organismos cuyas células
tienen estructuras internas membranosas a las que se denominan organelos u orgánulos.
(Biggs, 2000)

Cada orgánulo tiene una membrana biológica que lo rodea aislándole del resto del
contenido celular, ocasionando que la actividad de cada compartimiento aislado pueda
cumplir con una función especializada. El orgánulo más grande de la célula es el núcleo,
que está limitado por una membrana llamada envoltura nuclear y encierra el ADN, que
coordina las funciones celulares. (Biggs, 2000; Solomon, 2008)
Tomado de Solomon, 2011

Además, se puede mencionar que las células eucariotas poseen una estructura soporte en
el sistema interno formado por una red de proteínas fibrosas llamada citoesqueleto.
(Ghershman, 2006).

En las células eucarióticas se llevan a cabo estos procesos en el interior de


orgánulos. Por ejemplo, están el retículo endoplásmico liso y rugoso, el complejo de Golgi,
las membranas que rodean y delimitan a orgánulos como las mitocondrias, los lisosomas,
peroxisomas etc. (Pedraza, 2000; Campbell, 2007; Solomon, 2008).
Los plastidios son una clase de orgánulos que se encuentran en células vegetales y de
algunos protistas y son los de mayor importancia biológica, ya que por medio de la
fotosíntesis producen gran parte de la energía química aprovechada por los organismos
vivientes. Sin los cloroplastos no existirían los vegetales ni animales, ya que estos últimos
se nutren del material elaborado por los primeros. También en estas células es más
frecuente que en las células animales, la presencia de vacuolas (Usaac, 2011; Pedraza, 2000).
Los eucariotes pueden ser organismos unicelulares o multicelulares (nivel de tejidos,
órganos, aparatos y sistemas biológicos.
El epitelio bucal está formado por una serie de capas de células, por ello se dice que es
estratificado. La capa más externa es de células delgadas algo endurecidas, que se van
desprendiendo continuamente, a la vez que en otra zona del epitelio se van regenerando.
Al raspar, cogemos esas células que se van desprendiendo (Piña, 2011).

 UNIDAD 1:
La Célula y los Sistemas Membranosos y no Membranosos
 Contenido del Sílabo:
Célula: célula eucariota
 Resultado de Aprendizaje de la Unidad:
Adquiere conocimientos teóricos y prácticos que le permiten obtener una visión completa
de la célula, integrando las estructuras de los niveles macromolecular, subcelular y celular
de organización biológica y relaciona con el área de la odontología, a través de un trabajo
colaborativo
En esta práctica se identificará a las células eucarióticas, que están conformando tejidos a
nivel de animales y vegetales, utilizando el microscopio para poder observarlas e identificar
sus estructuras.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Facultad: guía de la práctica, microscopio compuesto, azul de metileno, lugol, solución
salina al 5%, alcohol antiséptico y metílico.
Alumno: Caja de materiales, hoja membretada, lanceta sanguínea, algodón, hisopo,
pedazo de cebolla blanca, mechero.

CONTENIDO:

Observar: https://www.youtube.com/watch?v=GSYLoH68Dc8
comentar con los compañeros de la mesa y luego en el aula.

1. Observación de células escamosas epiteliales


 Con un hisopo frotar con suavidad la cara interna dela mejilla (mucosa bucal)
 Extender el material extraído en la placa portaobjetos (frotis)
 Añadir una gota de solución salina y una gota de azul de metileno.
 Dejar en reposo por 3 minutos.
 Cubrir procurando que no queden burbujas de aire.
 Eliminar el exceso de colorante con papel absorbente y aplastar ligeramente.
 Observar la preparación al microscopio utilizando el aumento de 40X.
 Dibujar sus observaciones.
 Rotular las estructuras identificadas.
 Calcular el tamaño de las células al observar con el lente de 40x.

2. Observación de células ciliadas en epitelio de tráquea.


 Con el palillo frotar el interior de una tráquea grande y fresca, cortada al medio.
 Extender en el portaobjeto la muestra obtenida.
 Añadir 2 gotas de violeta de genciana
 Deje reposar por 2 minutos.
 Lave cuidadosamente para eliminar el exceso de colorante.
 Añadir una gota de agua nuevamente y cubrir
 Observar con el lente de mayor aumento.
 Dibuje y rotule estructuras especialmente las planificadas en esta práctica.
3. Observación de cloroplastos en células vegetales de elodea (Anacharis sp.)
 Colocar una hoja de elodea en el centro de un portaobjetos
 Agregar una gota de agua y cubrir
 Eliminar el exceso de agua.
 Observar con el lente de 40 X
 Dibujar y rotular estructuras con el lente de 40x.
 Luego de unos minutos de observación, distinguir el fenómeno de ciclosis.

4. Observación de vacuolas en el tejido epidérmico de cebolla paitenia (Allium cepa


L.)
 Separar con el bisturí una de las capas más coloreada de la cebolla y desprenderla
 Depositar el fragmento en un portaobjetos que contiene unas 1 gota de agua.
 Estirar el trozo de epidermis, con la aguja de disección.
 Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas.
 Retirar el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente.
 Observar, dibujar con el lente de 40X.
 Rotular las estructuras identificadas.
 Calcular el tamaño de las células al observar con el lente de 40x.

CUESTIONARIO
1. Elabore 4 de diferencias entre una célula procariótica y una eucariótica, de acuerdo con
el siguiente formato.
Criterio Célula procariótica Célula eucariótica
Genoma
Núcleo
Mitocondrias
Pared Celular

2. Dibuje y rotule estructuras de una célula eucariotas: animal, vegetal, protista y fungi

EVALUACIÓN:
Se evaluará en base al informe presentado

BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA
 Piña, L, Carmen E. (2011). Guía Componente Práctico. Bogotá. Escuela de Ciencias
Básicas de Tecnología e Ingeniería. Disponible en sitio web de la UNAD:
http://www.unad.edu.co/curso_biologia/index.html.
 (sd) 2008. Definición de Recuperado de: http://definicion.de/eucariota/#ixzz3JorES7aI
 Solomon, E. Berg, L. Martin, D. (2008). “Biología”. Quinta edición, editorial McGrawHill.
 Biggs, A. Kapicka, C. (2000). “Biología Dinámica”. 1ª. ed. Editorial McGrawHill.

BIBLIOGRAFÍA RECOMENDADA:
 Sánchez, G. & Trejo, B. (2006) Biología Celular y Molecular. México. Editorial Alfil, S.A.
de C.V.
Retrieved from htpp://www.ebrary.com.
 Karp, G. (2013). Biología Celular y Molecular. 7ª. Ed. España. McGraw-Hill
 Campbell, Neil; Reece, Jane. (2007). Biología. 6ª.Ed. España. Editorial Panamericana.
 Miller, K.  Levine, J. (2010).”Biología”. Editorial Pearson.

Materiales para la próxima clase


Caja de materiales, flores de tradescancia (Tradescantia virginiana)
lanceta sanguínea, algodón.

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