Determinación de Cafeína Por UV

Determinacin de cafena por UV-VIS
Objetivos
Manejar con seguridad un espectrofotmetro uv-vis
Determinar la concentracin de sustancias orgnicas en muestras problema por medio de una
curva de calibracin, aplicando la ley de lambert-beer
Introduccin
a medicin de la absorcin y emisin de luz de los materiales se llama
L espectrofotometra.los trminos absorcin y emisin tienen el mismo significado que

en el uso cotidiano: la absorcin significa tomar algo, en trminos ms precisos se
define como el logaritmo decimal de la relacin entre la intensidad de la radiacin no
absorbida (It) y la intensidad de la radiacin incidente (Io).
y la emisin significa desprenderlo.

Cuando se emplea la palabra luz en el lenguaje cotidiano, se hace referencia a la luz visible,
sin embargo la luz visible solo es una pequea parte de de todo el espectro electromagntico.
El espectro electromagntico incluye ondas de radio, microondas, radiacin infrarroja, visible,
ultravioleta, rayos x y rayos gamma. El siguiente esquema muestra la longitud de las ondas del
espectro electromagntico.
Los componentes esenciales de un instrumento usado en un mtodo absorciomtrico son:

Una fuente de radiacin. Las fuentes de radiacin en la zona uv-vis del espectro pueden ser de
dos tipos: fuentes trmicas, en las que la radiacin es el resultado de altas temperaturas y
fuentes de descargas elctricas en atmosfera gaseosa.
Un sistema monocromador para resolver o separar la radiacin policrmica, bandas de
longitudes de onda o longitudes de onda
Un compartimento de muestra y/o referencia (blanco), transparente, que les sirva de transporte.
Un detector de energa transmitida
Un amplificador de la corriente elctrica generada.
Un sistema de medida: de escala, digita
Antes de comenzar a usar un espectrofotmetro es necesario calibrarlo, para evitar errores en
las determinaciones. El primer paso debe ser la limpieza y la alineacin del sistema ptico,
despus se realiza la calibracin de la longitud de onda, y al final se verifica la respuesta de la
absorbencia En un anlisis espectrofotomtrico la absorcin selectiva de una longitud de onda
de cierta sustancia es aprovechada de una regin del espectro. Todos los compuestos
orgnicos pueden absorber una parte de la radiacin electromagntica dado que sus
electrones de valencia pueden ser excitados al absorber y pasar a niveles energticos
mayores.
Material y equipo
Matraz aforado de 500 ml
Matraz aforado de 100 ml
5 matraces aforados de 10 ml
1 pipeta de 1 ml
Balanza analtica
Espectrofotmetro uv-vis
Celdas de cuarzo de 1 cm
Desarrollo experimental
Preparacin de soluciones
Resultados
Se determin la absorbancia de soluciones para la curva tipo cuyas concentraciones fueron de
25, 30, 35, 40 y 50 ppm arrojando los siguientes resultados.
curva tipo de cafena

concentraciones
absorbancia
ppm
25 1.07
30 1.09
35 1.3
40 1.86
50 2.5
Tabla no. 1 absorbancias de
las soluciones para curva tipo
Al graficar los puntos obtenidos experimentalmente y al realizar la regresin lineal se obtuvo la

ecuacin y = 0.061X 0.657 con un coeficiente de correlacin de 0.937. La presente ecuacin
nos permiti calcular la concentracin en ppm de las muestras problema que a continuacin se
presentan.
Determinacin de la concentracin de cafena para Afrinex active y refresco de cola (pepsi)
Afrinex:
Tableta completa: 0.6438 g
Tableta macerada: 0.5851 g
Absorbancia registrada: 0.586
Concentracin de cafena:
De la ecuacin y = 0.061X 0.657 despejamos X (la concentracin)
Se obtuvo una concentracin de 20.3770 ppm equivalentes a 10.49 *10^-5 mol / l

De la concentracin inicial se tenan 25 mg en 0.6438g de los cuales se trabaj con 0.5851g
siendo una cantidad inicial de cafena de 22.7205 mg.
La concentracin inicial en mg/ml de cafena es.
22.721 mg/10 ml = 2.27 mg/ml
Clculo.
20.38 ppm = 20.38 mg/mL
Si 1 mol de cafena equivale a 194.19 g entonces:
Pepsi
De la ecuacin y = 0.061X 0.657 despejamos X (la concentracin)
Se obtuvo una concentracin de 15.3278 ppm equivalentes a 78.93 mol/l
Clculo.
Si 1 mol de cafena equivale a 194.19 g entonces:
Investigar que es el coeficiente de extincin de la ecuacin de Lambert-Beer y de que

depende.
Lambert y Beer demostraron que la absorbancia (A), tambin llamada densidad ptica (D.O.)
de una sustancia es directamente proporcional a la concentracin (c) de la sustancia
absorbente, la longitud del paso de luz (l) (espesor de la solucin) y una constante denominada
coeficiente de extincin o coeficiente de absorcin (a), que es caracterstico para cada
sustancia a una longitud de onda () determinada.
A = al c
Las unidades del coeficiente de extincin dependen de las unidades de concentracin y de
longitud del paso de luz. Generalmente la unidad de longitud es el centmetro y la longitud del
paso de luz es 1,0 cm. Si las unidades de concentracin son moles L-1 o milimoles L-1, se hace
referencia al coeficiente de extincin molar (o milimolar, respectivamente
Si la concentracin est expresada en g/100 mL (% peso / volumen) se obtiene el coeficiente
de extincin especfico (E1%).
A = l c + Ao
El coeficiente de extincin se determina realizando una serie de diluciones de la sustancia de

interes. Luego se mide la absorbancia de cada muestra de dilucin a un largo de onda
determinado. Los valores de absorbancia son graficados en funcin de la concentracin. El
resultado debe ser una linea recta.
La pendiente de la linea (y/x) es el coeficiente de extincin (K). Si las unidades de
concentracin son en moles, entonces la constante es llamada coeficiente de extincin molar y
se mide en unidades de M/ cm.
Representa a cada longitud de onda la capacidad que tiene una sustancia de absorber la
radiacin electromagntica.
Tambin se puede calcular mediante la frmula:
Y debe de arrojar un resultado aproximado al obtenido de la pendiente de la regresin lineal.

Calculo del coeficiente de extincin molar a partir de los datos de las soluciones estndar.
De la ecuacin:
Donde b = longitud de la trayectoria que atraviesa la luz por la muestra (1cm)

C = concentracin del material que absorbe luz (50 ppm)
A = absorbancia (2.5)
Se realiza el despeje correspondiente
El coeficiente de extincin molar (272) es aproximadamente 0.05 (cm*ppm)-1
Por lo tanto la ecuacin final es:
Calculo de la concentracin de de la muestra problema a partir del coeficiente de extincin

molar.
Afrinex active.
La concentracin de cafena en la tableta de Afrinex active es de aproximadamente 11.12 ppm.

Equivalentes a 57.26 * 10^-6
Pepsi.
La concentracin de cafena el refresco de cola es de aproximadamente 5.56 ppm.

Equivalentes a 28.63*10^-6
Aplicaciones industriales de la cafena
Uso del caf como pesticida
El caf puede ser tambin un repelente de los caracoles y las babosas respetuoso con el
medio ambiente. Los jardineros saben desde hace tiempo que los cultivos de caf pueden
ahuyentar a las babosas, supuestamente por su aspereza; sin embargo, el simple vertido de
una jarra llena de caf (fro) sobre la base de los rosales quizs sea una solucin ms
permanente. La cafena acta como una potente neurotoxina para estas plagas viscosas,
segn aseguran los cientficos el Departamento de Agricultura de EE.UU. en Hawai.
Dado que no est permitido utilizar ningn sistema qumico convencional de control de babosas
y caracoles, hay que recurrir urgentemente a una solucin alternativa. La fumigacin de cafena
en una concentracin del 1-2 por ciento ha resultado ser una solucin efectiva para la
eliminacin de los bichos. Sin embargo, se trata de una disolucin bastante concentrada (una
taza de caf instantneo contiene alrededor de un 0,05 por ciento de cafena) y podra llegar a
daar la flora. Afortunadamente, con la concentracin que contiene una taza de caf, las
babosas parecen perder su apetito, por lo que supone un mtodo eficaz de proteccin de las
plantas.
Los usos de la cafena en el mercado
La cafena est siendo utilizada dentro de las tres principales reas de mercado, que son
evidentes: los refrescos, bebidas energticas, farmacuticas y en menor medida en los
complementos alimenticios. Sin embargo, otras reas se encuentran utilizando la cafena. Solo
por mencionar algunas aplicaciones, la cafena se utiliza en los dulces, chocolates, jabones,
shampoo, licores, cosmticos, inhaladores, etc.
Principales usos de la cafena
Bebidas Farmacuticos
Bebidas energticas Medicamentos OCT
Jugos de frutas Analgsicos
Agua cafeinada Diurticos
Bebidas de cola Remedios para el resfriado
Sodas Medicamentos de prescripcin
Medicamentos de energa
Medicamentos para prdida de peso
Aplicaciones de la espectroscopia uv-vis

La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin cuantitativa de
soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos orgnicos muy conjugados.
Soluciones de iones metlicos de transicin
Las soluciones de iones metlicos de transicin pueden ser coloreadas (es decir, absorben la
luz visible) debido a que los electrones en los tomos de metal se pueden excitar desde un
estado electrnico a otro. El color de las soluciones de iones metlicos se ve muy afectado por
la presencia de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una
solucin diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco se intensifica el color y
cambia la longitud de onda de absorcin mxima.
Compuestos orgnicos
Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugacin, tambin
absorben luz en las regiones del espectro electromagnticovisible o ultravioleta. Los
disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles
en agua, o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes orgnicos pueden
tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados
para su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente en la mayora de
longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la absorcin del
espectro de un compuesto orgnico. La tirosina, por ejemplo, aumenta su mximo de absorcin
y su coeficiente de extincin molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando disminuye la
polaridad de los disolventes.
Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores, stos son a
menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas.
La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es directamente

proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la espectrometra UV/VIS puede
usarse para determinar la concentracin de una solucin. Es necesario saber con qu rapidez
cambia la absorbancia con la concentracin. Esto puede ser obtenido a partir de referencias
(las tablas de coeficientes de extincin molar) o, con ms exactitud, determinndolo a partir de
una curva de calibracin.
El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la Cromatografa Lquida de

Alta Resolucin (CLAR). La presencia de un analito da una respuesta que puede ser
proporcional a la concentracin. Para resultados precisos, la respuesta del instrumento al
analito debe compararse con la respuesta a un estndar, lo que es muy similar al uso de
curvas de calibracin. La respuesta (por ejemplo, el pico de altura) para una concentracin
particular se conoce como factor de respuesta.
Anlisis y discusin
Para que el mtodo de obtencin de una curva tipo de absorbancias contra la concentracin del
analito d buenos resultados, la medicin experimental de la concentracin desconocida de la
sustancia debe de estar dentro del rango sobre el cul se hizo la curva tipo, p. ej. entre 25 y 50
ppm. Tambin debe tratarse de disoluciones diluidas, pues a concentraciones ms elevadas, la
ecuacin de Lambert-Bert adquiere otra forma no lineal y por tanto la curva de calibracin no se
puede interpolar por mnimos cuadrados (vase Chang, 2008, pp. 724). Adems, se debe
escoger la longitud de onda a la cual la absorbancia de la muestra sea mxima, pues ello asegura
que la curva tipo tenga valores ms manejables de absorbancia, es decir, ms cercanos a uno
(Chang, et. al.).
La longitud de onda de absorbancia mxima de la muestra fue de 272 nm, que corresponde a la
zona de luz UV del espectro de luz (Chang, 2010, pp. 657). En este caso, se debe usar una celda
de cuarzo, pues a diferencia de las celdas de vidrio, la de cuarzo no presenta absorcin de luz
en la zona de UV y por ello no interviene con el experimento.
Las concentraciones de cafena obtenidas a partir de las muestras problema no est cerca de la
concentracin que se debi obtener (vanse resultados), ello se debe probablemente al tiempo
de reposo que estuvieron las muestras en el refrigerador, tiempo durante el cual se puedo haber
evaporado etanol o adherido cafena a las paredes del recipiente. Adems, debe marcarse que
las absorbancias obtenidas no estaban dentro de la zona de interpolacin y lo que se hizo fue
una extrapolacin, proceso que como ya se dijo antes no es confiable porque la relacin
absorbancia concentracin no es lineal durante toda la gama de concentraciones.
El mtodo de obtencin de la curva tipo fue bastante bueno porque el coeficiente de correlacin
r2 fue igual a 0.937, un valor muy cercano a 1, lo cual tambin demuestra que al trabajar con
celdas de cuarzo stas no interfieren en los datos de la absorbancia, adems de la lnea recta
horizontal que aparece en el barrido de la celda.
Bibliografa
-Chang, R. (2008). Fisicoqumica (3 ed.). E. U. A.: McGraw-Hill, pp. 768
-Chang, R. (2010). Qumica (10 ed.). E. U. A.: McGraw-Hill
-Day, R. y Underwood, A. (1989). Qumica analtica cuantitativa (5 ed.). Mxico, D.F.: Prentice-
Hall Hispanoamericana. pp. 251-265
-Skoog, D., West, D., Holler, F. y Crouch, S. (2001). Qumica analtica (7 ed.). Mxico, D. F.:
McGraw-Hill. pp. 363-374
-http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/espectrofoto.htm
-http://www.espectrometria.com/espectrometra_ultravioleta-visible

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L espectrofotometra.los trminos absorcin y emisin tienen el mismo significado que

y la emisin significa desprenderlo.

Los componentes esenciales de un instrumento usado en un mtodo absorciomtrico son:

curva tipo de cafena

Al graficar los puntos obtenidos experimentalmente y al realizar la regresin lineal se obtuvo la

Se obtuvo una concentracin de 20.3770 ppm equivalentes a 10.49 *10^-5 mol / l

Si 1 mol de cafena equivale a 194.19 g entonces:

Si 1 mol de cafena equivale a 194.19 g entonces:

Investigar que es el coeficiente de extincin de la ecuacin de Lambert-Beer y de que

El coeficiente de extincin se determina realizando una serie de diluciones de la sustancia de

Y debe de arrojar un resultado aproximado al obtenido de la pendiente de la regresin lineal.

Donde b = longitud de la trayectoria que atraviesa la luz por la muestra (1cm)

Calculo de la concentracin de de la muestra problema a partir del coeficiente de extincin

La concentracin de cafena en la tableta de Afrinex active es de aproximadamente 11.12 ppm.

La concentracin de cafena el refresco de cola es de aproximadamente 5.56 ppm.

Aplicaciones de la espectroscopia uv-vis

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