AGLUTINACION

UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA
AGLUTINACION EN LATEX
PCR, ASO, FR
CATEDRTICO: Lic.TM. : ENRIQUE SOTELO TASAYCO
CATEDRA: INMUNOLOGA ESPECIAL
ESPECIALIDAD: LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGIA
PRESENTADO POR:
MIRANDA MACAVILCA, George C.
CICLO: VI
TURNO: NOCHE
HUANCAYO -2010
AGLUTINACIN
Es la interaccin entre un anticuerpo y una partcula antignica que se visualiza por la formacin de
agregados o grumos macroscpicos. En este proceso, el anticuerpo es conocido como aglutinina y el antgeno
como el aglutingeno.
Las reacciones de aglutinacin utilizan el mismo principio de las reacciones de precipitacin. Cuando el
anticuerpo est en exceso inhibe la reaccin de precipitacin, lo mismo ocurre en las reacciones de
aglutinacin. Esta inhibicin es llamada el efecto
prozona.
Esta tcnica es ampliamente usada para la identificacin rpida de bacterias, hongos, grupos
sanguneos y otros antgenos; tambin es utilizada para la deteccin de anticuerpos que pueden ser indicativos
de un estado de enfermedad.
La temperatura, el pH, la concentracin de electrolitos, son importantes para la realizacin de la prueba. La
reaccin final se evidencia por la formacin de malla o grumos visibles macroscpicamente.
La unin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una interaccin reversible en la que estn involucrados enlaces
no-covalentes. En la interaccin in Vitro de un Ag con su correspondiente Ac se distinguen 2 etapas: la
interaccin primaria no visualizable y la interaccin secundaria, que sigue a la anterior y se caracteriza por la
aparicin de un fenmeno visible como la aglutinacin o la precipitacin. Por otro lado, no siempre que se
produce la interaccin primaria Ag-Ac, se produce la interaccin secundaria, ya que, para conseguir fenmenos
visibles, son indispensables determinadas concentraciones y caractersticas de los Ags y Acs.
a) Reacciones de Aglutinacin
Las reacciones de aglutinacin, involucran una interaccin secundaria entre Ag-Ac (Fig, 2b) que llevar
a la aparicin de un aglutinado que se visualiza como grumos. Los principios fsico-qumicos que gobiernan la
formacin de estos aglutinados son los mismos que gobiernan la formacin de un precipitado. La gran
diferencia entre las reacciones de precipitacin y de aglutinacin son las caractersticas del antgeno: mientras
que en las reacciones de precipitacin se emplean antgenos solubles, en las reacciones de aglutinacin el Ag
es particulado. (Fig, 2a)
Con un Ag soluble, tambin es posible disear una reaccin de aglutinacin gracias a que es posible
utilizar distintas partculas (partculas inertes glbulos rojos) y realizar un pegado qumico o fsico-qumico
del Ag soluble a dichas partculas, generando de esta manera un Ag particulado til para fines diagnsticos.
Las ventajas de las reacciones de aglutinacin desde el punto de vista de su utilidad en el laboratorio es
que son muy sencillas de realizar, no requieren ningn equipamiento para su lectura, son rpidas y fciles de
implementar. Sin embargo, cabe mencionar, que las reacciones de aglutinacin presentan menor sensibilidad
que las reacciones de interaccin primaria tales como ELISA e Inmunofluorescencia indirecta
AGLUTINACIN EN LATEX
Es un mtodo de laboratorio para examinar ciertos anticuerpos o antgenos
Los anticuerpos o antgenos conocidos son unidos a partculas de ltex, con el objeto de facilitar la
visualizacin de la prueba. Se pueden emplear otras partculas insolubles como el poliestireno o la bentonita.
Las partculas de ltex son esferas de poliestireno que se unen fcilmente al fragmento cristalizable (Fc) de
molculas de inmunoglobulina G (IgG) o inmunoglobulina M (IgM), esta ltima es mucho ms eficiente en
aglutinar partculas naturales.
Los fragmentos de unin del anticuerpo (FAb) quedan expuestos y son capaces de unirse al antgeno que se
encuentra en la muestra. Cuando los antgenos tienen varios eptopes (o estructuras antignicas repetitivas),
los anticuerpos multivalentes acoplados a mltiples partculas de ltex se unen al antgeno y se produce un
entramado de las partculas de ltex que dan como resultado una aglutinacin visible.
a) Tipos de reactivo de ltex:
1. Para deteccin de antgenos: son aquellas partculas unidas a anticuerpos especficos que sern
sometidas al suero y estas interactan unindose a antgenos propias del anticuerpo
2. Para la deteccin de anticuepos : son aquellas partculas de poliestireno adosadas a antgenos que al
someter con el suero interactuaran con anticuerpos propias de los antgenos especficos.
b) VENTAJAS Y DESVENTAJAS:
a. DE FCIL USO: kits de reactivos (goteros)

b. MUY RPIDO : 2 a 8 minutos obtencin de resultados
c. MUY CMODO : tapas de colores y controles + y -
d. CUALITATIVO Y SEMICUANTITATIVO
e. SENSIBLE Y ESPECIFICO
f. PRESUNTIVO
c) PROCEDIMIENTO: para todo test de aglutinacin en ltex

1. SUSPENDER Una gota de suero el la lamina
2. Suspender una gota de reactivo al costado de la gota muestra.
3. Lentamente homogenizbamos las dos gotas con suaves movimientos de rotacin en el modo
que interacten antgeno anticuerpo
d) INTERPRETACIN Y LECTURA: para todo test de aglutinacin en ltex.
Si vemos grumos en la superficie es positivo, si solo hay una turbidez es no concluyente y si no hay nada es
negativo.
e) TIPOS DE TEST DE AGLUTINACIN EN LTEX
Si bien es cierto hay una gran gama de pruebas de aglutinacin en ltex sin embargo en el presente trabajo
nos bocaremos a las pruebas de:
A. Protena C reactiva (PCR)

B. Antiestreptolisina-O (AS0)
C. Factor reumatoide (FR)
A. PROTENA C REACTIVA (PCR)

a. OTROS NOMBRES
CRP,
Reactantes de fase aguda.
b. DEFINICIN
La protena C reactiva se produce en el hgado cuando hay una infeccin o inflamacin aguda en el cuerpo.
Su importancia es que reacciona con el sistema del complemento que es un sistema de defensa contra
agresiones externas del cuerpo humano.
c. PARA QU SE REALIZA?
Se utiliza para evaluar la presencia de enfermedades infecciosas bacterianas, enfermedades inflamatorias

(fiebre reumtica, artritis reumatoide, etc..) pero no se eleva de forma habitual en enfermedades
producidas por virus.
La Protena C reactiva se eleva ante un problema infeccioso o inflamatorio antes que la VSG y comienza a
disminuir antes que ella ante la recuperacin de la enfermedad.
Si se trata la enfermedad con Aspirina o antiinflamatorios desaparece su elevacin.

La protena C reactiva aparece elevada en el infarto de miocardio.
Tambin puede ser de ayuda tras una intervencin de ciruga, ya que aparece elevada durante 3 4 das,
para luego disminuir, si persiste elevada es que hay alguna infeccin o complicacin post-quirrgica.
En la meningitis bacteriana aparece elevada y no as en la producida por virus, lo que puede servir para
indicar el origen y tratamiento de un proceso de meningitis.
d. TCNICA DE REALIZACIN
Para realizar este anlisis No se precisa estar en ayunas.
Pueden aumentar la Protena C reactiva los anticonceptivos orales y el DIU. Y puede disminuir sus valores la
Aspirina, los antiinflamatorios esteroideos o no esteroideos.
Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en ocasiones se realiza en
el propio domicilio del paciente.
Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en
la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con
una jeringa o tubo de extraccin).
Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre y aparezcan
ms visibles y accesibles.
Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la vena apropiada y
acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor.
Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin (mediante la jeringa o mediante la
aplicacin de un tubo con vaco).
Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodn o similar para
favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el brazo y mantenga la zona presionada con un
esparadrapo durante unas horas.
La sangre extrada se traslada al laboratorio de anlisis en un tubo especial para bioqumica, que contiene
un producto anticoagulante. En general no suelen ser necesarios ms de 10 mililitros de sangre para una
batera estndar de parmetros bioqumicos.
e. PROBLEMAS Y POSIBLES RIESGOS
1. La obtencin mediante un pinchazo de la vena puede producir cierto dolor.
2. La posible dificultad en encontrar la vena apropiada puede dar lugar a varios pinchazos
3. Aparicin de un hematoma (moratn o cardenal) en la zona de extraccin, suele deberse a que la vena
no se ha cerrado bien tras la presin posterior y ha seguido saliendo sangre produciendo este
problema.
4. Inflamacin de la vena (flebitis), a veces la vena se ve alterada, bien sea por una causa meramente
fsica o por que se ha infectado. Se deber mantener la zona relajada unos das Si el problema persiste
o aparece fiebre deber consultarlo con su mdico.
f. VALORES NORMALES DE PROTENA C REACTIVA EN SUERO
Niveles normales de PCR en adultos menores de 1 mg/ml
g. VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES
Los niveles aumentados de PCR pueden indicar:
Artritis aguda
Artritis reumatoide
Fiebre reumtica
Otras enfermedades autoinmunes (Sndrome de Reiter, Enfermedad de Crohn, vasculitis, LED, etc...)
Infarto de miocardio
Infarto pulmonar
Problemas de rechazo de transplantes
Traumatismos
Infecciones bacterianas (urinarias, tuberculosis, etc...)
Cncer.
h. Tcnica de PCR
PCR-Latex
Determinacin de la protena C-reactiva
PRUEBA EN PORTA
1. FUNDAMENTO
El PCR-Latex Test es una prueba rpida de aglutinacin en porta basada para la deteccin directa y la
semicuantificacin de la protena C-reactiva (PCR) en suero. La determinacin se efecta ensayando una
suspensin de ltex recubierto con anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La presencia de
aglutinacin es indicativa de un aumento del nivel de PCR por encima del lmite superior del intervalo de
referencia de las muestras ensayadas.
2. COMPOSICION DE LOS REACTIVOS
R Reactivo PCR-Latex. Suspensin estabilizada y tamponada de partculas de ltex recubiertas

con anticuerpos especficos anti-PCR humana. Contiene 0,95g/L de azida sdica.
CONTROL + Suero humano con una concentracin de PCR > 15 mg/L. Contiene 0,95 g/L de azida
sdica.
CONTROL - Suero animal, con una concentracin mxima de 1 mg/L de PCR humana. Contiene 0,95 g/L
de azida sdica.
Precauciones: En la preparacin de reactivos de origen humano, intervienen solamente materiales que, frente
a tcnicas probadas, han mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos anti- HCV y
HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente infecciosos.
3. TECNICA
I. Prueba cualitativa
1. Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Nota 1).
2. Resuspender el vial de ltex con suavidad. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para
asegurar su homogeneidad antes del ensayo.
3. Depositar 1 gota (50 L) de suero problema en uno de los crculos de la tarjeta visualizadora. En
crculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.
4. Aadir a cada crculo 1 gota del Reactivo PCR-Latex, prxima a la muestra a analizar.
5. Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable, extendindola de forma que cubra por
completo la superficie interior de cada anillo. Emplear palillos distintos para cada mezcla.
6. Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos (Nota 2).
7. Observar de inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparicin de cualquier signo de
aglutinacin.
Lectura
Reaccin negativa: Suspensin uniforme sin cambio visible alguno, tal como se presenta en el control
negativo (Nota 3).
Reaccin positiva: Aglutinacin dbil o intensa, fcilmente visible macroscpicamente (Nota 4).
II. Prueba semi-cuantitativa
1. Para cada muestra a analizar se utilizan 6 crculos de una tarjeta pipeteando 50 L de solucin salina
(0,9%) en cada uno de ellos.
2. Pipetear sobre el diluyente del primer crculo 50 L de muestra, y empleando la misma punta, mezclar
mediante aspiraciones y expulsiones repetidas, transfiriendo 50 L de la mezcla resultante sobre el
diluyente del segundo crculo.
3. Continuar con la serie de dobles diluciones hasta el sexto crculo, desechando los 50 L provenientes
del mismo. Las diluciones finales obtenidas sern: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32,1:64.
4. Ensayar cada una de las diluciones tal como se describe en los pasos 4-7 de la Prueba cualitativa.
Lectura
Como en la Prueba cualitativa. El ttulo de la muestra corresponde a la mxima dilucin que presenta
reactividad. La dilucin siguiente debe ser negativa.
En el caso de resultar positiva la dilucin ms alta ensayada, repetir el ensayo comenzando con una
dilucin inicial al 1:16.
Como diluyente de esta nueva serie de dobles diluciones se emplear control negativo diluido al 1:50 con
solucin salina, en vez de la solucin salina empleada anteriormente.
La tasa aproximada (mg/L) de PCR presente en la muestra puede obtenerse multiplicando la unidad
mnima detectable (sensibilidad analtica) por el ttulo de la ltima dilucin positiva.
4. CONTROL DE CALIDAD
Incluir diariamente controles positivo y negativo para confirmar el correcto funcionamiento del reactivo,
siguiendo los pasos descritos para la Prueba cualitativa.
El control positivo debe producir una clara aglutinacin. Si no se obtiene el resultado esperado, no
utilice el kit.
5. VALORES ESPERADOS
Mientras en las personas sanas la concentracin de protena Creactiva en el suero es inferior a 5 mg/L,
durante algunas enfermedades, dentro de las 4-8 horas subsiguientes a un episodio agudo, estos valores
aumentan y la concentracin de PCR en suero puede llegar hasta 500 mg/L. Dado que un nivel elevado de
PCR siempre esta ligado a cambios patolgicos, la determinacin de la PCR tiene un gran valor para la
confirmacin del diagnstico, el tratamiento y el control de la evolucin de las enfermedades
inflamatorias.
6. SIGNIFICADO CLINICO
La protena C-reactiva es una protena de fase aguda presente normalmente en el suero, que aumenta
significativamente en una gran diversidad de lesiones tisulares, infecciones bacterianas y vricas,
inflamaciones, as como en las neoplasias malignas. La PCR contribuye a la defensa inmunolgica
inespecfica de varias formas, entre ellas, mediante la activacin del complemento y la aceleracin de la
fagocitosis. En el diagnstico clnico, el resultado de la determinacin de la PCR debe ser considerado
siempre en relacin a los hallazgos clnicos y otras pruebas de laboratorio.
7. CARACTERISTICAS FUNCIONALES
- La unidad mnima detectable (sensibilidad analtica) es de aproximadamente 6 mg/L (5-10 mg/L),

frente al Material de Referencia
- La especificidad diagnstica es del 96,2% Efecto prozona: No se observa hasta concentraciones de 1600
mg/L.
- Los resultados obtenidos con este reactivo no muestran diferencias significativas al ser comparados con
un reactivo de referencia. Los datos analticos del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud.
- Hemoglobina (<10 g/L), bilirrubina (<20 mg/dL) y lipemia (<10 g/L) no interfieren con el ensayo. Los
factores reumatoideos (100 UI/mL) interfieren. Otras sustancias pueden interferir9.
8. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- La presencia de factores reumatoideos en la muestra problema puede dar origen a falsas positividades.
- Concentraciones marcadamente elevadas de PCR pueden dar lugar a aglutinaciones dbiles o negativas
(efecto prozona).
9. NOTAS
1. La sensibilidad del ensayo puede reducirse a temperaturas bajas. Los mejores resultados se obtienen
trabajando entre 15 y 25C.
2. Retrasos en las lecturas pueden ocasionar una sobrevaloracin de la tasa de PCR presente.
3. Cuando el contenido de PCR en el suero es muy elevado, pueden darse falsas negatividades en
muestras sin diluir. Puede repetirse el ensayo utilizando un volumen de suero de 10 L. En caso de
positividad titular de acuerdo con el procedimiento descrito anteriormente.
4. La intensidad de la aglutinacin no es indicativa de la concentracin de PCR en las muestras ensayadas.
10. CAUSAS DE ERROR

- La contaminacin bacteriana de controles y muestras, as como la congelacin y descongelacin del
reactivo, son causas generales de resultados positivos falsos.
- Trazas residuales de detergentes en las tarjetas visualizadoras pueden ocasionar asimismo falsas
positividades. Lavar las tarjetas bajo el grifo hasta que se hayan eliminado todos los residuos y
enjuagarlas con agua destilada. Secar al aire, evitando el empleo de solventes orgnicos puesto que
modifican el acabado especial de las placas.
- El Reactivo PCR-Latex no debe utilizarse con posterioridad a su fecha de caducidad, puesto que un
almacenamiento ms prolongado puede afectar su sensibilidad.
D. ANTIESTREPTOLISINA-O (AS0)
a. OTROS NOMBRES
Anlisis de antiestreptolisinas O,
Pruebas reumticas ASLO,
ASLO.
b. DEFINICIN
El ttulo de ASLO es la medicin de anticuerpos anti-Estreptococo betahemolticos del tipo A. Esta bacteria
produce una enzima llamada estreptolisina O, que puede destruir los hemates y el cuerpo reacciona contra
ella produciendo anticuerpos especficos antiestreptolisina O.
La medicin de estos anticuerpos es lo que refleja el anlisis de antiestreptolisinas O ASLO.
c. PARA QU SE REALIZA?
La presencia de ttulos altos de antiestreptolisinas O ASLO, indican una infeccin por la bacteria Estreptococo
betahemolticos del tipo A, que puede producir una glomerulonefritis, una fiebre reumtica, una endocarditis
bacteriana o una escarlatina.
La elevacin de ASLO aparece a la semana de la infeccin por el estreptococo, los valores ms elevados se dan
en la tercera semana de la infeccin y es cuando pueden aparecer las enfermedades secundarias a esta
infeccin (glomerulonefritis, una fiebre reumtica, una endocarditis bacteriana o una escarlatina) pero no son
especficos de ninguna de ellas. Deben ser diagnosticadas cada una de ellas por la clnica o por otros estudios
diagnsticos.
El ASLO pueden mantenerse elevado a los 6 meses en el 30% de los casos.
d. PROCEDIMIENTO DE OBTENCIN
Para realizar este anlisis NO se precisa estar en ayunas.
Los niveles de ASLO pueden ser enmascarados por los antibiticos y por los corticoides. Tambin un aumento
de la betalipoprotena puede inhibir la estreptolisina O y producir ttulos falsos de elevacin de ASLO.
Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en ocasiones se realiza en el
propio domicilio del paciente.
Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la
flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con una
jeringa o tubo de extraccin).
Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre y aparezcan ms
visibles y accesibles. Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la
vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor.
La sangre extrada se traslada al laboratorio de anlisis en un tubo especial para bioqumica, que contiene un
producto anticoagulante. En general no suelen ser necesarios ms de 10 mililitros de sangre para una batera
estndar de parmetros bioqumicos.
problema. Puede aplicarse una pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona.
fsica o por que se ha infectado. Se deber mantener la zona relajada unos das y se puede aplicar una
pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona. Si el problema persiste o aparece fiebre deber
consultarlo con su mdico.
f. VALORES NORMALES DE ASLO
Niveles normales de ASLO

en adultos Menores de 160 Unidades/ml
en nios menores de 2 aos Menores de 50 Unidades/ml
en nios entre 2 y 4 aos Menores de 160 Unidades/ml
en nios entre 4 y 12 aos Entre 160 y 300 Unidades/ml
Niveles normales de Saturacin de la transferrina

Hombres del 20 al 50%
Mujeres del 15 al 50%
En estos valores puede haber ciertas diferencias por la tcnica o por criterios de normalidad propios de
laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace
referencia.
g. VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES
Los niveles aumentados de ASLO pueden indicar:
Infeccin por Estreptococo betahemolticos del tipo A
Glomerulonefritis
Fiebre reumtica
Endocarditis bacteriana
Escarlatina
Pioderma por Estreptococo betahemolticos del tipo A
h. TCNICA DE ASO
ASLO-Latex
Determinacin de anti-estreptolisina O
PRUEBA EN PORTA
1. FUNDAMENTO
El ASLO-Latex Test es una prueba rpida de aglutinacin en porta para la deteccin directa y la semi-
cuantificacin de niveles clnicamente significativos de anticuerpos anti-estreptolisina O (ASLO) en suero.
La determinacin se efecta ensayando una suspensin de partculas de ltex recubiertos con

estreptolisina frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinacin visible es indicativa de
la presencia o ausencia de ASLO en las muestras nsayadas a niveles significativos
R Antgeno ASLO-Latex. Suspensin estabilizada y tamponada de

partculas de ltex recubiertas con estreptolisina O. Contiene 0,95
g/L de azida sdica.
CONTROL +
CONTROL Suero animal con una actividad ASLO inferior a 100 UI/mL.
Contiene 0,95 g/L de azida sdica.
Precauciones: En la preparacin de reactivos de origen humano, intervienen solamente materiales que,

frente a tcnicas probadas, han mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos
anti-HCV y HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente infecciosos.
Aviso: Los reactivos de este kit contienen azida sdica. Evitar el contacto con la piel y mucosas.
3. CONTENIDO DEL ENVASE

2340005, kit 50 tests.
REF 1 vial ASLO-Latex Antgeno, 1x1 mL Control positivo,
1x1 mL Control negativo, 3 Tarjetas visualizadoras y
1x50 palillos desechables.
2340010, kit 100 tests.
REF 2 viales ASLO-Latex Antgeno, 1x1 mL Control positivo,
1x1 mL Control negativo, 3 Tarjetas visualizadoras y
2x50 palillos desechables.
4. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8C. No congelar los componentes del kit ya que podra verse afectada la funcionalidad del
test.
El Antgeno y los Controles son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
5. PREPARACION DE LOS REACTIVOS
El Antgeno y los Controles estn listos para su uso.
6. MUESTRAS
Suero claro, reciente. Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8C durante una semana antes del
ensayo, o por un perodo mayor a 20C.
7. EQUIPO ADICIONAL
1. Pipeta de volumen variable.

2. Solucin salina (NaCl 0,9%, para tcnica semi cuantitativa)
3. Agitador mecnico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
4. Cronmetro.
8. TECNICA
2. Resuspender el antgeno con suavidad. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para
asegurar su homogeneidad antes del ensayo.
3. Depositar 1 gota (50 L) de suero problema en uno de los crculos de la tarjeta visualizadora. En
crculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.
4. Aadir a cada crculo 1 gota de Antgeno ASLO-Latex, prxima a la muestra a analizar
5. Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable, extendindola de forma que cubra por
completo la superficie interior de cada anillo. Emplear palillos distintos para cada mezcla.
aglutinacin
Lectura
negativo.
Reaccin positiva: Aglutinacin dbil o intensa, fcilmente visible macroscpicamente.
(0,9%) en los tres primeros y 25 L en el cuarto.
mediante aspiraciones y expulsiones repetidas, transfiriendo 50 L de la mezcla resultante al tercer
crculo. Mezclar de nuevo y desechar 50 L.
3. Pipetear sobre el segundo crculo 25 L de muestra y empleando la misma punta, mezclar con el
diluyente en la forma indicada. Transferir 25 L de la mezcla sobre el diluyente del cuarto crculo y
mezclar. Las diluciones finales obtenidas sern: 1:2, 1:3, 1:4, 1:6.
Lectura
reactividad. La dilucin siguiente debe ser negativa (Nota 3).
La tasa aproximada (UI/mL) de ASLO presente en la muestra puede obtenerse multiplicando la unidad
El control positivo debe producir una clara aglutinacin. Si no se obtiene el resultado esperado, no utilice
el kit.
Un noventa y cinco por ciento de la poblacin adulta sana posee ttulos de ASLO iguales o inferiores a 200
UI/mL, hallndose tasas de hasta 250 UI/mL en nios de edad escolar o adultos jvenes. Puesto que una
determinacin aislada, a no ser que sea alta, no aporta informacin suficiente, se recomienda en los casos
dudosos y con el fin de seguir la evolucin de la enfermedad, repetir la prueba a intervalos quincenales
durante 4 6 semanas. Los ttulos de ASLO resultantes de infecciones estreptoccicas ordinarias y fiebre
reumtica aguda difieren en que en esta ltima condicin, el ttulo es muy superior y persiste durante un
espacio de tiempo ms prolongado.
Como respuesta a la infeccin por estreptococos hemolticos de los grupos A, C y G, productores de

estreptolisina O (SLO), una protena extracelular de carcter enzimtico y con acusadas propiedades
antignicas, se produce una elevacin de la tasa de anticuerpos anti-estreptolisina O (ASLO) que pueden
ser determinados en el laboratorio. La investigacin inmunoqumica de estos anticuerpos especficos
contra los productos metablicos de los estreptococos proporciona una informacin valiosa para el
diagnstico de infecciones provocadas por estreptococos (fiebre reumtica, glomrulonefritis).
En el diagnstico clnico, los resultados de la determinacin de los anticuerpos anti-estreptolisina O deben

ser considerados siempre en relacin a los hallazgos clnicos y otras pruebas de laboratorio.
- La unidad mnima detectable (sensibilidad analtica) es de aproximadamente 200 UI/mL ( 50 UI/mL),

frente a un Calibrador Internacional de ASLO (OMS).
- La especificidad diagnstica es del 97%.
- Efecto prozona: No se observa hasta concentraciones de 1500 UI/mL.
- Los resultados obtenidos con este reactivo no muestran diferencias significativas al ser comparados con
- Hemoglobina (<10 g/L), bilirrubina (<20 mg/dL) y lipemia (<10 g/L) no interfieren con el ensayo. Otras
sustancias pueden interferir
- Se han descrito reacciones positivas en afecciones distintas a la fiebre reumtica y a la

glomrulonefritis, como la escarlatina, artritis reumatoidea en perodos tempranos y agudos,
amigdalitis, portadores sanos y en infecciones estreptoccicas diversas.
- Tanto en las infecciones tempranas como en los primeros aos de vida (de seis meses a dos aos)
pueden darse reacciones negativas falsas.
14. NOTAS
2. Retrasos en las lecturas pueden ocasionar una sobre-valoracin de la tasa de anticuerpos presentes.
3. Los ttulos obtenidos con la prueba de ltex se comparan favorablemente con los obtenidos con la
prueba hemoltica en tubo dentro de los margenes de precisin de ambos mtodos
15. CAUSAS DE ERROR
- La contaminacin bacteriana de controles y muestras, as como la congelacin y descongelacin del

antgeno, son causas generales de resultados positivos falsos.
- Trazas residuales de detergentes en las tarjetas visualizadoras pueden ocasionar asimismo falsas
- La suspensin antignica no debe utilizarse con posterioridad a su fecha de caducidad, puesto que un
E. FACTOR REMATOIDEO (FR)
a. OTROS NOMBRES
FR.
RF.
b. DEFINICIN
El factor reumatoide (FR) es una prueba que mide la presencia y nivel de la IgM especfica contra las
inmunoglobulinas IgG anormales, producidas por los linfocitos de la membrana sinovial, de las
articulaciones de personas afectadas por la Artritis Reumatoide.
c. PARA QU SE REALIZA ESTE ESTUDIO?
La Artritis Reumatoide es una enfermedad crnica, que produce la inflamacin de las articulaciones
principalmente de manos y pies.
Cuando se originan estas inmunoglobulinas IgG y se fija la IgM, se forman inmunocomplejos IgG-IgM que
activan el Complemento y otros factores inflamatorios que producen secundariamente la destruccin de las
articulaciones afectadas. Por ello se le llama una enfermedad autoinmune, ya que es el sistema inmunitario
del individuo el que destruye tejidos del propio cuerpo.
No es un anlisis especfico de esta enfermedad, aparece positivo en el 80 % de los pacientes con Artritis
Reumatoide, pero puede aparecer negativo. Inclusive puede aparecer positivo en otras enfermedades no
relacionadas (Lupus Eritematoso Sistmico, Sndrome de Sjogren, etc...).
En personas de la tercera edad pueden aparecer niveles elevados sin repercusin clnica.
d. TCNICA DE REALIZACIN
Para realizar este anlisis No se precisa estar en ayunas.
Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en ocasiones se realiza en
el propio domicilio del paciente.
Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en
la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra utilizar guantes sanitarios, una aguja (con
una jeringa o tubo de extraccin).
Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms sangre y aparezcan
ms visibles y accesibles.
Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la vena apropiada y
acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor.
La sangre extrada se traslada al laboratorio de anlisis en un tubo especial para bioqumica, que contiene
un producto anticoagulante. En general no suelen ser necesarios ms de 10 mililitros de sangre para una
batera estndar de parmetros bioqumicos.
problema. Puede aplicarse una pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona.
fsica o por que se ha infectado. Se deber mantener la zona relajada unos das y se puede aplicar una
pomada tipo Hirudoid o Trombocid en la zona. Si el problema persiste o aparece fiebre deber
consultarlo con su mdico.
f. VALORES NORMALES DE FACTOR REUMATOIDE (FR)
Valores normales o NEGATIVOS:
Menor de 60 U/ ml (por nefelometra).
Ttulo menor de 1:80 (mtodo de aglutinacin)
En estos valores puede haber muy pequeas diferencias por la tcnica o por criterios de normalidad propios
de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las unidades a las que se hace
referencia.
g. VALORACIN DE LOS RESULTADOS ANORMALES
Puede aparecer POSITIVO el Factor Reumatoide (FR) en:
Artritis Reumatoide
Dermatomiositis
Escleroderma
Hepatitis crnica
Infeccin viral crnica
Mononucleosis infecciosa
Leucemia
Lupus Eritematoso Sistmico
Sndrome de Sjogren
Sndrome Nefrtico
Tuberculosis
a. TCNICA
FR-Latex
Determinacin de factores reumatoideos
PRUEBA EN PORTA
1. FUNDAMENTO
El FR-Latex Test es una prueba rpida de aglutinacin basada en una modificacin de la tcnica de Singer1,
para la deteccin directa y la semicuantificacin en porta de los factores reumatoideos (FR) presentes en el
suero.
La determinacin se efecta ensayando una suspensin de partculas de ltex recubiertos con gamma
globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinacin visible es indicativa de
la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas
R Reactivo FR-Latex. Suspensin estabilizada y tamponada de partculas de ltex recubiertas con

gamma globulina humana. Contiene 0,95 g/L de azida sdica.
CONTROL + Suero humano con una actividad aproximada equivalente a 25 UI/mL. Contiene 0,95 g/L
de azida sdica.
CONTROL - Suero animal con una actividad inferior a 5 UI/mL. Contiene 0,95 g/L de azida sdica.
Precauciones: En la preparacin de reactivos de origen humano, intervienen solamente materiales que,

frente a tcnicas probadas, han mostrado su negatividad frente a anticuerpos anti-HIV 1+2, anticuerpos
anti- HCV y HBsAg. Tratarlos, no obstante, como si fueran potencialmente infecciosos.
Aviso: Los reactivos de este kit contienen azida sdica. Evitar el contacto con la piel y mucosas.
3. CONTENIDO DEL ENVASE
REF 2355005, kit 50 tests. 1 vial Reactivo FR-Latex, 1x1 mL Control positivo, 1x1 mL Control negativo, 3
Tarjetas visualizadoras y 1x50 palillos desechables.
REF 2355010, kit 100 tests. 2 viales Reactivo FR-Latex, 1x1 mL Control positivo, 1x1 mL Control
negativo, 3 Tarjetas visualizadoras y 2x50 palillos desechables.
4. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Conservar a 2-8C. No congelar los componentes del kit ya que podra verse afectada la funcionalidad del
test.
El Reactivo y los Controles son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
5. PREPARACION DE LOS REACTIVOS
El Reactivo y los Controles estn listos para su uso.
6. MUESTRAS
Suero claro, reciente.

Una vez separado, el suero puede guardarse a 2-8C durante una semana antes del ensayo, o por un
perodo mayor a 20C.
7. EQUIPO ADICIONAL
1. Pipeta de volumen variable.

2. Solucin salina (NaCl 0,9%, para tcnica semi cuantitativa)
3. Agitador mecnico rotatorio de velocidad regulable a 100 r.p.m.
4. Cronmetro
8. TECNICA

2. Resuspender el antgeno con suavidad. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para asegurar su
homogeneidad antes del ensayo.
3. Depositar 1 gota (50 L) de suero problema en uno de los crculos de la tarjeta visualizadora. En crculos
adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.
4. Aadir a cada crculo 1 gota de Reactivo FR-Latex, prxima a la muestra a analizar.
5. Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable,extendindola de forma que cubra por completo
la superficie interior de cada anillo. Emplear palillos distintos para cada mezcla.
aglutinacin.
Lectura
negativo.
Reaccin positiva: Aglutinacin dbil o intensa, fcilmente visible macroscpicamente.
(0,9%) en cada uno de ellos.
mediante aspiraciones y expulsiones repetidas, transfiriendo 50 L de la mezcla resultante sobre el
diluyente del segundo crculo.
3. Continuar con la serie de dobles diluciones hasta el sexto crculo, desechando los 50 L provenientes
del mismo. Las diluciones finales obtenidas sern: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64.
Lectura
reactividad. La dilucin siguiente debe ser negativa (Nota 3).
En el caso de resultar positiva la dilucin ms alta ensayada, repetir el ensayo comenzando con una
dilucin inicial al 1:16.
Como diluyente de esta nueva serie de dobles diluciones se emplear control negativo diluido al 1:50
con solucin salina, en vez de la solucin salina empleada anteriormente.
La tasa aproximada (UI/mL) de FR presentes en la muestra puede obtenerse multiplicando la unidad
El control positivo debe producir una clara aglutinacin. Si no se obtiene el resultado esperado, no utilice el
kit.
De aquellos pacientes con diagnstico clnico de artritis reumatoidea, aproximadamente el 70-80% son
seropositivos para el factor reumatoide. Se demostr un resultado positivo para casi todos los pacientes con
variantes de artritis reumatoidea, tales como los sndromes de Felty Sjgren.
Puede esperarse un resultado positivo en menos del 5% de individuos sanos, mientras que en poblacin
adulta de 60 aos y mayores pueden ser seropositivos un 30%, utilizando pruebas de ltex para la deteccin
del factor reumatoideo.
Los factores reumatoideos son un grupo de anticuerpos, mayoritariamente de la clase IgM, dirigidos contra
determinantes de la porcin Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente. Aunque presentes en diversas
enfermedades se hallan elevados principalmente en pacientes con artritis reumatoidea.
En el diagnstico clnico, los resultados de la determinacin de los factores reumatoideos deben ser
considerados siempre en relacin a los hallazgos clnicos y otras pruebas de laboratorio.
La unidad mnima detectable (sensibilidad analtica) es de aproximadamente 8 UI/mL (6-16 UI/mL),

frente a un Patrn de FR trazable al Material de Referencia de la OMS 64/1.
La especificidad diagnstica es del 98,8%
Efecto prozona: No se observa hasta concentraciones de 800 UI/mL.
Los resultados obtenidos con este reactivo no muestran diferencias significativas al ser comparados con
Hemoglobina (<10 g/L), bilirrubina (<20 mg/dL) y lipemia (<10 g/L) no interfieren con el ensayo. Otras
sustancias pueden interferir
Se han descrito reacciones positivas en condiciones clnicas distintas a la artritis reumatoidea como la
mononucleosis, hepatitis, sfilis, infecciones diversas y en personas de edad avanzada. La mayora de
estos casos, cuando se ensayan cuantitativamente, presentan ttulos de FR muy bajos.
Pueden darse reacciones negativas falsas tanto en la fase temprana como en la fase crnica sub-clnica
de la enfermedad.
14. NOTAS
2. Retrasos en las lecturas pueden ocasionar una sobrevaloracin de la tasa de anticuerpos presentes.
3. Los ttulos obtenidos con la prueba de ltex no son comparables con los ttulos obtenidos mediante la
prueba de Waaler Rose. Las diferencias de ttulos entre tcnicas no reflejan diferencias en cuanto a la
capacidad de ambas para detectar factores reumatoideos.
15. CAUSAS DE ERROR

La contaminacin bacteriana de controles y muestras, as como la congelacin y descongelacin del
Reactivo FR-Ltex, son causas generales de resultados positivos falsos.
Trazas residuales de detergentes en las tarjetas visualizadoras pueden ocasionar asimismo falsas
La suspensin de Ltex no debe utilizarse con posterioridad a su fecha de caducidad, puesto que un

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UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA

CATEDRTICO: Lic.TM. : ENRIQUE SOTELO TASAYCO

CATEDRA: INMUNOLOGA ESPECIAL

ESPECIALIDAD: LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGIA

MIRANDA MACAVILCA, George C.

Es un mtodo de laboratorio para examinar ciertos anticuerpos o antgenos

a) Tipos de reactivo de ltex:

a. DE FCIL USO: kits de reactivos (goteros)

c) PROCEDIMIENTO: para todo test de aglutinacin en ltex

2. Suspender una gota de reactivo al costado de la gota muestra.

e) TIPOS DE TEST DE AGLUTINACIN EN LTEX

A. Protena C reactiva (PCR)

A. PROTENA C REACTIVA (PCR)

Reactantes de fase aguda.

Se utiliza para evaluar la presencia de enfermedades infecciosas bacterianas, enfermedades inflamatorias

Si se trata la enfermedad con Aspirina o antiinflamatorios desaparece su elevacin.

Para realizar este anlisis No se precisa estar en ayunas.

e. PROBLEMAS Y POSIBLES RIESGOS

1. La obtencin mediante un pinchazo de la vena puede producir cierto dolor.

f. VALORES NORMALES DE PROTENA C REACTIVA EN SUERO

Niveles normales de PCR en adultos menores de 1 mg/ml

g. VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES

Los niveles aumentados de PCR pueden indicar:

Problemas de rechazo de transplantes

Infecciones bacterianas (urinarias, tuberculosis, etc...)

2. COMPOSICION DE LOS REACTIVOS

R Reactivo PCR-Latex. Suspensin estabilizada y tamponada de partculas de ltex recubiertas

II. Prueba semi-cuantitativa

- La unidad mnima detectable (sensibilidad analtica) es de aproximadamente 6 mg/L (5-10 mg/L),

8. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

10. CAUSAS DE ERROR

Pruebas reumticas ASLO,

El ASLO pueden mantenerse elevado a los 6 meses en el 30% de los casos.

Para realizar este anlisis NO se precisa estar en ayunas.

e. PROBLEMAS Y POSIBLES RIESGOS

1. La obtencin mediante un pinchazo de la vena puede producir cierto dolor.

f. VALORES NORMALES DE ASLO

Niveles normales de ASLO

Niveles normales de Saturacin de la transferrina

g. VALORACIN DE RESULTADOS ANORMALES

Los niveles aumentados de ASLO pueden indicar:

Infeccin por Estreptococo betahemolticos del tipo A

Pioderma por Estreptococo betahemolticos del tipo A

La determinacin se efecta ensayando una suspensin de partculas de ltex recubiertos con

2. COMPOSICION DE LOS REACTIVOS

R Antgeno ASLO-Latex. Suspensin estabilizada y tamponada de

Precauciones: En la preparacin de reactivos de origen humano, intervienen solamente materiales que,

3. CONTENIDO DEL ENVASE

5. PREPARACION DE LOS REACTIVOS

El Antgeno y los Controles estn listos para su uso.

1. Pipeta de volumen variable.

1. Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente (Nota 1).

4. Aadir a cada crculo 1 gota de Antgeno ASLO-Latex, prxima a la muestra a analizar

II. Prueba semi-cuantitativa

10. VALORES ESPERADOS

11. SIGNIFICADO CLINICO

Como respuesta a la infeccin por estreptococos hemolticos de los grupos A, C y G, productores de

En el diagnstico clnico, los resultados de la determinacin de los anticuerpos anti-estreptolisina O deben