Manual Laboratorio Bacilos PDF

Ni el Ministerio de Salud y Deporte, ni ninguna persona que acte en su
nombre se responsabiliza del uso que pudiera darse a est informacin.
Ficha Bibliogrfica
R-BO Bolivia. Ministerio de Salud y Deportes. Programa Nacional de Control de la Tuberculosis
WF200 Manual tcnico de la red de laboratorios de tuberculosis: Baciloscopa./Ministerio de Salud
M665m y Deportes. La Paz : Print Artes Grficas, 2011
No. 215
2011 114p. : ilus. (Serie: Documentos Tcnico-Normativos No.215)
Depsito legal: 4- 2 - 209 - 11 P.O.

I. TUBERCULOSIS
II. LABORATORIOS DE SALUD PBLICA
III. RED DE LABORATORIO
IV. ESTANDARES DE REFERENCIA
V. BACILOSCOPA
VI. MANUAL
VII. BOLIVIA
1. t.
2. Serie.
Manuel Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis
Puede obtenerse informacin en la siguiente direccin de Internet

http://www.sns.gov.bo
R. M: 580 del 30 de mayo de 2011
Depsito Legal: 4-2-209-11 P.O.
Elaboracin: Equipo Tcnico Red Nacional de laboratorios de Tuberculosis
La Paz, Programa Nacional de Control de Tuberculosis - Unidad de

Epidemiologa - Direccin General de Servicios de Salud - Comit de
Identidad Institucional - Ministerio de Salud y Deportes - 2011
Ministerio de Salud y Deportes, 2011
Esta publicacin es propiedad del Ministerio de Salud y Deportes de Bolivia,

se autoriza su reproduccin total o parcial, a condicin de citar la fuente y
la propiedad.
Impreso en Bolivia
AUTORIDADES NACIONALES
MINISTRA DE SALUD Y DEPORTES

Dra. Nila Heredia Miranda
VICEMINISTRO DE SALUD Y PROMOCIN

Dr. Martn Maturano Trigo
VICEMINISTRO DE MEDICINA
TRADICIONAL E INTERCULTURALIDAD
Alberto Camaqui Mendoza
VICEMINISTRO DE DEPORTES
Miguel ngel Rimba Alviz
DIRECTOR GENERAL DE SERVICIOS DE SALUD

Dr. Johnny Veda Rodrguez
JEFE UNIDAD DE EPIDEMIOLOGA

Dr. Jos Antonio Zambrana Torrico
RESPONSABLE PROGRAMA NACIONAL DE

CONTROL DE TUBERCULOSIS
Lic. Mara Lourdes Carrasco Flores
DIRECTOR INLASA
Dr. Walter Agreda
RESPONSABLE LABORATORIO NACIONAL

DE REFERENCIA Y RED DE LABORATORIOS DE
TUBERCULOSIS
Dra. Mirtha Camacho
NDICE
RESOLUCIN MINISTERIAL
Captulo 1
Estructura y Organizacin
Introduccin............................................................................................ 9
Estructura Orgnica............................................................................... 9
Funciones................................................................................................ 10
Captulo 2
Procedimientos Bacteriolgicos
Condiciones para la realizacin de baciloscopa........................... 26
Material necesario ............................................................................... 27
Obtencin de la muestra de esputo................................................ 27
Conservacin de la muestra ............................................................. 29
Transporte de las muestras ............................................................... 30
Recepcin de la muestra ................................................................... 31
Preparacin del extendido ................................................................ 31
Fijacin del extendido ........................................................................ 33
Coloracin (Tcnica Ziehl Neelsen) ............................................... 33
Observacin microscpica ................................................................ 36
Lectura ................................................................................................... 36
Reporte de resultados ....................................................................... 38
Limpieza del microscopio................................................................... 38
Errores de resultado de baciloscopa.............................................. 39
Captulo 3
Gua de control interno de baciloscopas
Introduccin.......................................................................................... 41
Objetivo.................................................................................................. 42
Sistema de aseguramiento de la calidad.......................................... 42
Metodologa........................................................................................... 43
Captulo 4
Supervisin indirecta control de calidad externo
Supervisin indirecta administrativa................................................. 49
Supervisin directa de laminas.......................................................... 50
Control de calidad externo del Laboratorio Nacional a los
laboratorios Departamentales.......................................................... 51
Preparacin de paneles de frotis para control de calidad
externo del laboratorio nacional a los laboratorios
Departamentales.................................................................................. 53
Descentralizacin del control de calidad........................................ 54
Evaluacin de resultados..................................................................... 56
Conducta a seguir frente a discordancias....................................... 57
Captulo 5
Supervisin directa administrativa - tcnica
Definicin............................................................................................... 59
Requisitos para realizar la supervisin............................................ 59
Objetivos................................................................................................ 60
Mtodos de supervisin...................................................................... 60
Captulo 6
Normas bsicas para laboratorios de nivel I
Finalidad.................................................................................................. 65
Definicin............................................................................................... 65
Laboratorio de nivel I.......................................................................... 66
Estructura de laboratorio................................................................... 66
Normas de bioseguridad para el laboratorio................................. 66
Normas para uso de vestimenta....................................................... 68
Recepcin conservacin y transporte de muestras..................... 68
Recepcin de pacientes....................................................................... 68
Transporte.............................................................................................. 69
Cuidados Especficos........................................................................... 72
Anexos......................................................................................................... 75
Bibliografa..............................................................................................113
CAPTULO I
ESTRUCTURA Y ORGANIZACIN
1. INTRODUCCIN
La Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis es el conjunto

de servicios de laboratorio dependientes del Estado, entidades
de la Seguridad Social, de Organizaciones No Gubernamenta-
les (ONG), Universidad, servicios de salud privados y otros que
efectan diagnstico bacteriolgico de Tuberculosis y que estn
establecidos en todos los Servicios de Salud del pas, que ejecu-
tan tcnicas y procedimientos normalizados dirigidos a apoyar el 9
diagnostico y control de la tuberculosis en todos los niveles de
atencin en salud.
2. ESTRUCTURA ORGNICA
a) Estructura Administrativa Gerencial
Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

Para su funcionamiento la Red de Laboratorios de Tuberculosis des-
de el punto de gerencia y gestin tiene la siguiente estructura:
1 Laboratorio de Referencia Nacional de control de la Tuber-

culosis.
9 Laboratorios de Referencia Departamental de control de Tu-
berculosis ubicados en cada capital de Departamento.
Laboratorios operativos
b) Estructura Tcnico Operativa
De acuerdo a la complejidad, equipamiento, material y disponibilidad

de recursos humanos se tiene los siguientes niveles de organizacin.
Laboratorio de Nivel III, Establecido en el Instituto Nacional de

Laboratorios de Salud (INLASA).
Laboratorios de Nivel II, laboratorios que tienen capacidad
para realizacin de cultivo en Lowenstein Jensen, Stonebrink y
realizacin de baciloscopas, establecidos en rea urbana, peri-
frica o rea rural.
Laboratorios de Nivel I, urbanos y rurales que efectan baci-
loscopas, y/o siembra para aislamiento de micobacterias en
medio de Ogawa.
Puestos de Diagnstico, que corresponden a servicios que
efectan solo baciloscopas.
Puestos de extendido y fijacin de muestras, que realizan
extendido y/o coloracin de muestras de esputo para
baciloscopa.
c) Estructura Orgnica de la Red de Laboratorios de

Tuberculosis
10
Cada nivel de gestin y gerencia cuenta:
Nivel Nacional Una Jefatura.

Nivel Departamental: Jefatura de Laboratorio en cada Laborato-
rio Departamental.
3. FUNCIONES
a) Funciones Tcnico - Gerenciales del Laboratorio de

Referencia Nacional
Serie: Documentos Tcnico - Normativos
Cumple las funciones de Direccin de la Red Nacional de Laborato-

rios de Tuberculosis, ejecutando funciones de normalizacin tcnica
y administrativa, que incluye consolidacin y anlisis de informacin
generada por la Red de Laboratorios adems de investigacin bsica
y epidemiolgica.
Funciones Tcnico - Operativas
FUNCIONES TCNICAS
Estandarizacin y validacin de nuevas pruebas de diagnstico

Realizacin de Pruebas de sensibilidad y resistencia.
Tipificacin de micobacterias.
Pruebas bioqumicas.
Pruebas enzimticas.
Investigacin.
PERSONAL
Deber contar con:
3 Bioqumicos
2 Tcnicos superiores
2 Tcnicos medios
2 Auxiliares de laboratorio
1 Secretaria
1 Mensajero
11
Las funciones especficas del personal son:
Bioqumicos:
Organizacin de la red y el servicio.

Validacin de tcnicas.
Elaboracin de normas tcnicas y documentacin del sistema de
aseguramiento de la calidad.
Elaboracin de normas administrativas.
Monitoreo de la Red departamental de Laboratorios de tuber-
culosis.
Evaluacin peridica interna.
Anlisis de la informacin de nivel nacional.
Formulacin de proyectos de investigacin.
Ejecucin de sistemas de control de calidad interno y externo
de baciloscopas.
Ejecucin de sistemas de control de calidad interno y externo
de cultivos.
Supervisin interna.
Supervisin nacional a los Laboratorios Departamentales de Tu-
berculosis y Laboratorios de rea urbana y rural.
Planificacin de revisiones bibliogrficas.
Revisin de avances y actualizaciones.
Diseo de Programas de capacitacin.
Diseo de Sistemas de Evaluacin Nacional.
Formulacin de recomendaciones.
Elaboracin de informes escritos para nivel nacional y departa-
mental.
Programacin de actividades nacionales e internacionales.
Programacin gestin y distribucin de requerimientos e insu-
mos para la Red de Laboratorios y sus componentes.
Tcnicos Superiores
Cumplimiento y aplicacin de disposiciones internas emanadas

de la Jefatura del Laboratorio.
Realizacin de Tcnicas validadas y normalizadas.
Preparacin y organizacin del material de laboratorio.
12 Recepcin de muestras.
Registro de datos.
Acmulo de informacin.
Elaboracin de resultados.
Anlisis de la informacin de nivel nacional.
Elaboracin de normas tcnicas.
Participar en actividades de investigacin.
Capacitar a recursos humanos de puestos de diagnstico y ex-
tendido.
Cumplimiento del sistema de control de calidad interno y ex-
terno.
Revisin de avances y actualizaciones.

Colaborar en la elaboracin de informes nacional y departa-
mental.
Monitorear el programa MAREMI
Tcnicos Medios
Krdex de materiales y reactivos

Preparacin de material.
Esterilizacin de material.
Preparado de material para reactivos.
Limpieza y control de los equipos.
Acondicionamiento de los ambientes.
Auxiliar de Laboratorio
Limpieza de los ambientes de laboratorio.

Quemado del material contaminado.
Lavado de material.
Preparacin de material utilizado en laboratorio.
Esterilizacin de material.
Eliminacin de desechos de laboratorio de acuerdo a clasifica-
cin y previo tratamiento.
Preparacin de bateras para procesos de muestras.
Almacenamiento adecuado del material.
Ordenamiento del material y ambientes de laboratorio.
Acondicionamiento de la ropa utilizada en laboratorio; Ropa de
proceso de muestras y ropa de uso externo.
Secretaria 13
Envo y elaboracin de correspondencia.

Transcripcin de resultados de laboratorio
Procesamiento de datos.
Organizacin del material bibliogrfico.

Organizacin del material de escritorio.
Acmulo de documentacin sobre: Actividades del Laboratorio
en capacitacin, Supervisin, Evaluacin y Normalizacin.
Acondicionamiento de material y equipo de escritorio.
Recepcin de mensajes.
Mensajero
Envo de material de laboratorio.

Envo de correspondencia.
Franqueo de cartas, documentos, etc.
Seleccin de documentacin.
Control de envo y recepcin.
Seguimiento de envo de insumos.
DEPENDENCIA Y OBLIGACIONES
Depende directamente del Instituto Nacional de Laboratorio de

Salud y efecta actividades coordinando en forma estrecha con el
Programa Nacional de Control de Tuberculosis y los Laboratorios
Departamentales de Tuberculosis.
FUNCIONES ADMINISTRATIVAS
Organizacin y Direccin de la Red Nacional

Capacitacin
Supervisin
Evaluacin y Monitoreo
Programacin de actividades
Programacin y gestin de insumos y materiales
14 Recoleccin y proceso de informacin
Anlisis de datos
Envo de resultados de pruebas complejas a los Laboratorios
Departamentales.
b) Funciones Tcnico - Gerenciales

de los Laboratorios de Referencia Departamental
en el Control de la Tuberculosis
Llevan adelante la conduccin, organizacin, implementacin, inclu-

sin y asistencia tcnica a los laboratorios integrantes de la Red de
Laboratorios de Tuberculosis de cada Departamento, cumpliendo,

facilitando y garantizando el cumplimiento de las normas y procedi-
mientos establecidos en el presente manual. Instaurando coordina-
cin a niveles de Programa Departamental y Laboratorio Nacional
en acciones que coadyuven la vigilancia epidemiolgica de la tuber-
culosis.
Funciones Tcnico - Operativas
FUNCIONES TCNICAS
Gestin y gerencia de la Red de Laboratorios de Tuberculosis de

cada Departamento
Gestin, administracin y distribucin de insumos, materiales y
reactivos para garantizar el desarrollo y cumplimiento de funcio-
nes de la Red Departamental.
Capacitacin permanente al personal de la red de laboratorios
Supervisin: Directa e indirecta y aplicacin de los programas de
control de calidad interno y externo.
Evaluacin.
Programacin.
Coordinacin con el Laboratorio Nacional de Referencia y el
Programa Departamental de Control de la Tuberculosis
Consolidacin, anlisis y envo de informacin, al Laboratorio
Nacional de Referencia y al Programa Departamental de Con-
trol de la Tuberculosis.
Envo de cepas de Mycobacterium tuberculosis en medio de culti-
vo para la realizacin de Pruebas de Sensibilidad y Resistencia al
Laboratorio Nacional. 15
Envo de cepas micobacterianas al Laboratorio de nivel II para
su identificacin.
Programacin de requerimientos de insumos para la realizacin
de baciloscopa, cultivo, Prueba de la Niacina, Catalasa y Nitrato
reduccin.

Participacin activa en investigaciones nacionales
Participacin en la elaboracin de Planes y estrategias del
Programa Departamental.
Elaboracin y gestin de P.O.A.
Verificacin de P.O.E.S. de baciloscopas y cultivos de
Mycobacterium tuberculosis en los laboratorios de la red.
PERSONAL
3 Bioqumicos
1 Tcnico superior
1 Secretaria
1 Mensajero
DEPENDENCIA
Dependen tcnicamente del Laboratorio Nacional de Referencia y

administrativamente de acuerdo al organigrama vigente de cada Ser-
vicio Departamental de Salud, debiendo cumplir actividades en coor-
dinacin estrecha con el PROGRAMA REGIONAL DE CONTROL
DE TUBERCULOSIS.
c) Funciones Laboratorios de Nivel II
Son aquellos servicios que cuentan con capacidad instalada, ambien-

tes y reas especficas para realizar adems de la baciloscopa, cultivo
y pruebas de identificacin micobacteriana: Prueba de la Niacina, Ni-
trato reduccin y Catalasa para la identificacin de Mycobacterias.
FUNCIONES TCNICAS
Recepcin, identificacin y registro de muestras.

Realizacin de extendido, fijacin, tincin, lectura e interpreta-
16 cin (segn normas establecidas)
Cumplir normas de bioseguridad en todo el proceso de la baci-
loscopa y desecho de las muestras.
Capacitacin de recursos humanos.
Supervisin directa a los laboratorios de nivel I a requerimiento
del laboratorio Departamental.
Realizacin de cultivos e identificacin del complejo
Mycobacterium tuberculosis.
Cumplimiento y aplicacin de control interno y externo de Ca-
lidad.
Investigacin operativa a requerimiento del laboratorio depar-
tamental.
Reporte y entrega de resultados.

Envo de informes mensuales y trimestrales a la cabecera de red
y/o laboratorio departamental.
Envo trimestral de lminas para Control de Calidad acompaa-
do con el formulario correspondiente correctamente llenado.
Solicitud de insumos y materiales de laboratorio de acuerdo a
produccin.
Coordinar con el Laboratorio de Referencia Departamental.
Los Laboratorios de nivel II tcnicamente dependen del Laboratorio
de Referencia Departamental de Tuberculosis y administrativamente
del Servicio o institucin donde se encuentran instalados.
PERSONAL
El Laboratorio de Nivel II deber contar con el siguiente plantel pro-

fesional:
2 Bioqumicos.
2 Tcnicos Superiores de Laboratorio.
2 auxiliares de limpieza.
1 secretaria.
OBLIGACIONES
17
Cumplir las disposiciones del presente reglamento tanto en el
mbito administrativo como tcnico.
Ejecutar las tcnicas y procedimientos del laboratorio de acuer-
do a las normas de aplicacin establecidas por el Laboratorio de
Referencia Nacional de Tuberculosis.

Cumplir con las regulaciones propias de su nivel respecto al
control de calidad.
Envo de cepas para la realizacin de pruebas de sensibilidad y
resistencia, tipificacin de cepas de Mycobacterias al Laborato-
rio Nacional de Referencia.
Coordinar con el Laboratorio de Referencia Departamental de
Tuberculosis.
Material y Equipos
Equipos Materiales / Sistema de Reactivos

Insumos Registro
Microscopio Tubos de vidrio Cuadernos de Fosfato de
binocular. con tapa de Registro de potasio
rosca de 16 x Laboratorio
125 mm (cultivo y baci-
loscopa).
Coagulador (no Morteros pe- F o r m u l a r i o s Sulfato de mag-
necesariamente) queos para envo de nesio heptahi-
lminas y reque- dratado
rimiento de ma-
terial.
Incubadora Bac- Envases para Formularios de L-Asparagina
18 teriolgica recoleccin de reporte de re-
muestras esputo sultados de baci-
loscopa.
Determinador Pipetas Pasteur Formularios de Glicerina
de pH solicitud de test
de sensibilidad y
resistencia
Cabina de Segu- Pipetas gradua- Formularios de Verde de Mala-
ridad Biolgica das solicitud de cul- quita
Clase II tivo
Destilador de Matraces Erlen- Formularios de Piruvato de so-
Agua meyer reporte de cul- dio
tivo
Balanza Digital Vasos de preci- Ficha de segui- Hidrxido de
pitado miento de cul- sodio
tivos
Centrifugadora Probetas de vi- Rojo fenol
drio
Refrigerador Mecheros Bun- cido Sulfrico
sen
Pupinel Embudos Bromo
Asa de platino Bencidina
Gradilla Alcohol metlico
Propipetas Agua destilada
Insumos Registro
Peras de goma Glutamato de so-
dio
Indicador de auto- Nitrato de sodio
clave
Termmetro Fosfato monopo-
tasico
Barbijos Fosfato disodico
Guantes de goma Fucsina bsica
Ropa de Trabajo; Azul de metileno
batas largas para
procesado de cul-
tivo.
Ollas de aluminio cido clorhdrico
para material con- 19
taminado
Toallas Alcohol etlico de
96
Papel madera Aceite de inmer-
sin
Algodn Hipoclorito

de sodio
Pita
Gasa
Papel filtro
Papel estaado
Marcadores
Cuadernos
Canastillas
Arena fina estril
d) Funciones Laboratorios de Nivel I
Son aquellos servicios que realizan baciloscopa o examen microsc-

pico de esputo, cuentan con equipo, ambientes adecuados, material y
personal; su ubicacin est en funcin de la necesidad, accesibilidad y
disponibilidad de recursos humanos, ellos efectan:.
FUNCIONES TCNICAS

Realizacin de extendido, fijacin, tincin, lectura e interpretacin
(segn normas establecidas)
Cumplimiento de normas de bioseguridad en todo el proceso de la
baciloscopa y desecho de las muestras.
Supervisin directa a los puestos de diagnstico a requerimiento del
laboratorio Departamental.
Realizacin de cultivos por el mtodo de Ogawa Kudoh (si corres-
ponde)
20 Reporte y entrega de resultados.

Recepcin, anlisis y consolidacin de informes mensuales pro-
venientes de puestos de diagnostico.
Envo de informes mensuales y trimestrales a la cabecera de red
y/o laboratorio departamental.
Envo de lminas para Control de Calidad trimestralmente
acompaado con el formulario correspondiente correctamente
llenado.
produccin.
Dependen directamente del servicio de salud donde estn estableci-

dos y tcnicamente del Laboratorio Departamental de Tuberculosis
y del Programa de Control de Tuberculosis del Servicio Departa-
mental de Salud respectivo, con los que debern trabajar en estrecha
coordinacin, para cumplir sus funciones en forma ptima.
OBLIGACIONES DE LOS SERVICIOS DE NIVEL I
Brindar atencin permanente a los pacientes de su rea.

Cumplir las disposiciones tcnicas que rigen los laboratorios
del Nivel I, tanto en medidas de Bioseguridad y procedimientos
tcnicos y administrativos garantizando la buena calidad de eje-
cucin de estos.
Cumplir con el envo de lminas positivas y negativas, de diag-
nstico y control para el Control de Calidad.
Enviar trimestralmente la solicitud de requerimientos para el
cumplimiento de sus funciones, al momento de la entrega de la
informacin trimestral.
Participar en las actividades de capacitacin e informacin de-
terminadas por el Laboratorio y el Programa de Control de Tu-
berculosis Departamental.
Capacitar a recursos humanos de puestos de extendido y fija-
cin de lminas.
PERSONAL
Debe contar con personal bioqumico y/o profesional calificado, de-

pendiente de cada servicio de salud donde se encuentre ubicado.
21
MATERIAL NECESARIO PARA LA BACILOSCOPIA

Insumos Registro
Microscopio Envases para Cuadernos de Fucsina Fenicada

binocular recoleccin de Registro de La- (preparada)
muestras esputo boratorio (baci-
loscopa).
P o r t a o b j e t o s F o r m u l a r i o s Solucin para
esmerilados para llenado de d e c o l o r a c i n
informacin y (preparado)
requerimiento
de materiales.
Algodn F o r m u l a r i o s Azul de metile-
para envo de l- no (preparado)
minas para con-
trol de calidad.
Mechero Formularios de Aceite de in-
reporte de re- mersin.
sultados de baci-
loscopa.
Aplicadores de Alcohol blanco Bandeja Hipo-
madera clorito de sodio
al 1%
Soporte de
madera
Varilla de tin-
cin
Frascos para
guardar reactivo
Papel absor-
bente
Papel filtro
Embudo
Guardapolvos
e) Puestos de diagnstico
22 Estn encargados de realizar la recepcin de la muestra, diagnstico

y seguimiento bacteriolgico por baciloscopa de esputo, cumpliendo
las normas establecidas.
FUNCIONES TCNICAS

Realizacin de extendido, fijacin, tincin, lectura e interpreta-
cin (segn normas establecidas)
Cumplir normas de bioseguridad en todo el proceso de la baci-
loscopa y desecho de las muestras.
Reporte y entrega de resultados.

Envo de informes mensual al laboratorio del municipio y/o ca-
becera de Red correspondiente
Envo de lminas para Control de Calidad trimestralmente
acompaado con el formulario correspondiente correctamente
llenado.
produccin.
e) Puestos de extendido y fijacin
Estn encargados de realizar la toma de muestra, extendido, fijacin

y/o coloracin de la misma en un portaobjeto y envo al laboratorio
y/o puesto de diagnostico ms prximo para la realizacin del diag-
nostico microscpico.
FUNCIONES TCNICAS
Recoleccin de muestras.
Realizacin de extendido, fijacin de la muestra y/o coloracin
(segn normas establecidas)
Envo de lminas fijadas para coloracin y lectura, acompaado
del formulario N1 (solicitud de baciloscopa) correctamente
llenado.
Desecho de la muestra de acuerdo a normas de bioseguridad. 23
Exigir el reporte y entrega del resultado.
PERSONAL
Debe contar con un Responsable que recibi capacitacin en nor-

mas tcnicas de diagnstico y seguimiento bacteriolgico de la tu-
berculosis.
CAPTULO II
PROCEDIMIENTOS BACTERIOLGICOS -
BACILOSCOPA
1. ASPECTOS GENERALES
La identificacin del Mycobacterium tuberculosis, bacilo de Koch o

bacilo de la tuberculosis, causante de la enfermedad, se lo realiza
mediante la baciloscopa que permite diagnosticar a las personas que
eliminan bacilos al exterior que constituyen la fuente de infeccin y
diseminacin de la enfermedad.
25
La baciloscopa es el examen bsico para el diagnstico de la tu-
berculosis humana, especialmente en su forma bronco pulmonar as
como para el seguimiento bacteriolgico del tratamiento especfico
antituberculoso, por su ejecucin rpida, sencilla, econmica y re-
producible, permite lograr una amplia cobertura de diagnstico y
control del tratamiento, aun en regiones alejadas.

Ejecutada en condiciones adecuadas permite visualizar a la bacteria
causante de la enfermedad, que tiene la forma de bastoncillo delga-
do, ligeramente curvo y mide de 2 a 4 micras de largo por 0.3 a 1.5
micras de ancho. La composicin lipdica de la pared de las micobac-
terias les confiere la caracterstica de BAAR (bacilo cido alcohol
resistente), puesta de manifiesto en la coloracin de Ziehl Neelsen,
que es el mtodo de coloracin usado en microscopa para el diag-
nstico directo, en muestras de esputo. Las micobacterias se colo-
rean con la fucsina fenicada en caliente y resisten la decoloracin, a
pesar de la accin del alcohol cido. Al microscopio se observa a la
bacteria teida de rojo sobre un fondo azul.
Las otras especies de Micobacterias, tambin pueden presentar

cido-alcohol-resistencia, aunque ms dbil.
Los Sintomticos Respiratorios constituyen el grupo prioritario en la
localizacin de casos, ya que entre ellos se encuentra la mayor parte
de los enfermos baciliferos, que son la principal fuente de transmi-
sin de la enfermedad, la mayora concurre a los centros de salud,
por distintas causas, oportunidad en que es posible su deteccin.
Es importante el diagnstico oportuno de la enfermedad ya que los

pacientes enfermos con tuberculosis eliminan en el esputo gran can-
tidad de bacilos y las partculas de esputo secas, son capaces de flotar
con el polvo en el aire constituyendo una fuente de infeccin.
2. CONDICIONES PARA LA REALIZACIN DE LA

BACILOSCOPA
a) Ambientes de Laboratorio
26
Los detalles del acondicionamiento del laboratorio variaran de
acuerdo a que se realice all otro tipo de exmenes; al tamao de la
habitacin disponible y tambin de acuerdo a la necesidad de electri-
cidad o de luz natural para el examen al microscopio, siendo impor-
tante que el mismo cuente con los servicios bsicos y el sistema de
desage correspondiente.
Se debe acondicionar el laboratorio de manera que incluya mnima-

mente tres reas:
Un rea para registro y reporte de resultados.

Un rea bien iluminada y ventilada para la preparacin del ex-
tendido y coloracin.
Un rea para microscopa.
El laboratorio debe contar adems con:
Una pileta o cubeta con agua corriente en lo posible.

Una mesa o mesn cubierto con cermica.
Un guardarropa o armario cerrado.
b) Material necesario
Un microscopio binocular, que est en buenas condiciones con

objetivo de inmersin.
Aceite de inmersin dispuesto en frasco gotero.
Porta objetos esmerilados.
Aplicadores de madera.
Mechero.
Lpiz corriente negro.
Un soporte de madera para colocar las lminas.
Frascos goteros para la batera de tincin.
Un frasco o envase de plstico con agua para lavado de lminas.
Bandeja de metal para la recepcin de muestras.
Una olla de aluminio para desechar material contaminado.
Libro de registro.
Formulario de reporte de resultados. 27
Guardapolvo.
Jabn lquido y agua para lavarse las manos.
Toalla.
Papel peridico u otro de desecho para la bandejas de recep-
cin.

Un recipiente para desechar placas positivas.
Cubeta con varilla para tincin.
Hipoclorito de sodio.
Papel absorbente suave.
c) Obtencin de la muestra de esputo
i) Calidad
La muestra indicada proviene del rbol bronquial obtenida despus

de un esfuerzo de tos, pudiendo conseguirse muestra mucopurulen-
ta, purulenta o sanguinolenta.
No es til la que se obtiene solo de la faringe o por aspiracin de

secreciones nasales o nicamente saliva.
En este punto desarrolla especial participacin el personal del centro
de salud, que toma contacto por primera vez con el Sintomtico
Respiratorio, quien debe detalladamente explicar la forma correcta
de obtencin de la muestra.
ii) Cantidad
La muestra debe contener un volumen aproximado de 5 a 10 ml. De-

ber solicitarse 3 muestras para la realizacin del examen microsc-
pico a todo Sintomtico Respiratorio de acuerdo al siguiente orden:
La primera muestra debe ser tomada al momento de la consulta,

la segunda corresponde a la muestra matinal del da siguiente, y la
tercera en el momento en que se entrega la segunda muestra.
28 El anlisis de un nmero superior a 3 muestras no tiene ningn apor-

te significativo para el diagnstico de la enfermedad, solo presenta,
desventajas como el uso sin fundamento de materiales e insumos.
En la baciloscopa directa de esputo, por trmino medio, una sola

muestra tan solo dar el 85% de positividad, dos muestras el 95%,
por lo tanto (la segunda muestra incrementa la posibilidad de po-
sitividad en un 10%) y tres el 100%. Es por ello que se recomienda
solicitar tres muestras por paciente. El enviar ms de tres muestras
en un seriado prcticamente no aporta beneficios adicionales.
Para efectuar el control bacteriolgico del tratamiento antituber-

culoso, se efecta una baciloscopa de control mensual a partir del
segundo mes hasta el sexto u octavo mes de acuerdo al esquema de
tratamiento.
iii) Tcnica de recoleccin
La recoleccin de la muestra debe ser realizada en un lugar abierto

y ventilado, utilizando un envase de plstico descartable de 50 ml. de
capacidad, transparente, boca ancha y con tapa a rosca.
La persona encargada de la recoleccin de la muestra debe:
Explicar al paciente la razn del examen y la manera de toser,

de forma que la expectoracin provenga de los bronquios pul-
monares. 29
Pedir al paciente que mantenga el envase muy cerca de la boca y
que deposite el esputo en el interior del mismo.
Se debe dar al paciente el tiempo necesario para que el mismo
sienta que la expectoracin obtenida provenga de una tos pro-
funda.

Verificar la calidad y la cantidad de la muestra.
Recibir el envase correctamente cerrado y si se debe enviar al
laboratorio hacerlo en forma inmediata y adecuada.
Entregar al paciente un envase y asegurarse de que el paciente
haya comprendido que debe traer la segunda muestra al da si-
guiente, momento que deber obtener la tercera muestra.
d) Conservacin de la muestra
La probabilidad de encontrar Mycobacterium tuberculosis, est en re-

lacin directa con la calidad de la muestra que llega al laboratorio.
La temperatura ambiente y el tiempo favorecen la multiplicacin de

grmenes comunes y habituales de la boca, dificultando la eleccin
de la partcula til de la muestra, por desnaturalizacin de las pro-
tenas, con probable destruccin de los bacilos, por lo que una vez
obtenida la muestra esta debe procesarse cuanto antes y evitar la
fermentacin y putrefaccin.
Sin embargo cuando no es posible procesar la muestra de forma
inmediata, se recomienda conservarla mximo por 48 horas, en un
lugar fresco y oscuro para evitar fermentacin o almacenar en re-
frigeracin a 4 C evitando la congelacin, para luego efectuar la
tcnica siguiendo las instrucciones.
En caso de tener que enviarse el extendido a un laboratorio prxi-

mo, efectuar el extendido numerando correctamente la lmina, fijan-
do la misma y observando las recomendaciones tcnicas de exten-
dido, debiendo enviar en el menor tiempo posible al laboratorio que
efectuar la coloracin y lectura.
Luego envolver con papel cada lmina por separado y enviarla al

laboratorio ms cercano, adjuntando el formulario de solicitud co-
rrespondiente.
30
No olvidar rotular las lminas apropiadamente asignando el nmero
correspondiente.
e) Transporte de las muestras
En el transporte de las muestras debe tomarse en cuenta los siguien-

tes aspectos:
Protegerlas del calor excesivo.

Protegerlas de la luz solar.
Se debe verificar el cierre correcto de cada envase

Acondicionar los envases sellando las tapas con esparadrapo
(tela adhesiva) para evitar que se derramen las muestras.
Para el transporte es conveniente disponer de cajas de plasto-
formo termos u otro material resistente.
Toda muestra debe ser enviada con el respectivo formulario
N 1 de solicitud de baciloscopa, correctamente llenado.
Indicar con flecha la posicin en la que debe mantenerse las cajas

o los termos que contienen los envases con muestras de esputo
sealando que se trata de muestra biolgica para su entrega a bre-
vedad posible, colocando una etiqueta con la direccin exacta del
laboratorio.
f) Recepcin de las muestras
Comprobar que los envases que contienen las muestras estn co-
rrectamente rotulados y corresponden a las solicitudes de examen.
Si existe derrame del contenido, proceder a limpiar el envase con so-
lucin de Hipoclorito de sodio al 1%, si el envase llega sin contenido,
mala identificacin, o en malas condiciones (en estado de putrefac-
cin, seco o contaminado con hongos), debe solicitarse una nueva
muestra y notificar al establecimiento que envo las muestras.

Establecer si la muestra es para baciloscopa de diagnostico o de
control, registrar con el nmero correlativo correspondiente ano-
tando en el libro de registro de baciloscopa y en la pared del envase.
Depositar el envase de la muestra en una bandeja que tenga un papel 31

peridico empapado con solucin de hipoclorito de sodio al 1%.
g) Preparacin del extendido
El lugar elegido para la realizacin de los extendidos, debe ser ubi-

cado en un rea alejada de ventanas o puertas abiertas para evitar
corrientes de aire.
Antes de empezar el trabajo, el personal encargado debe lavarse las

manos y ponerse un guardapolvo de proteccin, preparar y verificar
el material necesario.
Todas las etapas de preparacin del extendido deben ser completa-

mente sistematizadas, as como la conservacin del orden en general.
1. Colocar sobre la bandeja una hoja doble de papel peridico hu-

medecido con hipoclorito de sodio al 1 %.
2. Colocar los envases que contienen las muestras de esputo pre-
viamente rotuladas sobre la bandeja.
3. Numerar los portaobjetos nuevos de acuerdo al nmero corre-
lativo del libro de registro de baciloscopas, con un lpiz de color
negro comn.
4. Ubicar el envase de la muestra detrs del mechero encendido y
32 destapar cuidadosamente.
5. Proceder a elegir la partcula til, que es la porcin mucupuru-
lenta de color amarillo verdoso, con un aplicador de madera.
6. Depositar la partcula til sobre el portaobjetos y extenderla
haciendo movimientos circulares, hasta lograr que el extendido
sea homogneo (ni muy fino ni muy grueso), de 1,5 de ancho a 3
cm de largo. No debe llegar a los bordes de la lmina para evitar
que el operador se contamine al manipular.
7. Por ningn motivo debe calentarse la lamina mientras se efectu
el extendido, el calor forma crculos concntricos y precipitados
granulosos.
8. Colocar la lmina con la muestra extendida sobre el mesn, de-

jar secar a temperatura ambiente.
9. Terminado el extendido, descartar los aplicadores en un frasco
que contenga hipoclorito de sodio al 1 %, proseguir de igual
forma para las dems muestras.
h) Fijacin del extendido

33
Una vez secada la lmina fijar el extendido, mediante tres pases rpi-
dos sobre la llama del mechero o con la ayuda de una flama, con el
extendido hacia arriba.
i) Coloracin (Tcnica Ziehl - Neelsen)
La tcnica utilizada es la tincin de Ziehl-Neelsen, que se fundamenta

en la interaccin que se realiza entre los cidos miclicos de la pared
de la micobacteria con la fucsina fenicada, la decoloracin tiene por
objeto decolorar todos los otros elementos que componen la mues-
tra, a excepcin de la micobacteria, para luego utilizar azul de metile-
no como colorante de contraste o de fondo que da la posibilidad de
observar al bacilo teido de rojo sobre un fondo azul.
- Coloracin
Colocar sobre las varillas de tincin, las lminas fijadas, con el exten-
dido hacia arriba, cubrir la totalidad de la superficie del extendido
con fucsina fenicada que debe ser filtrada el momento de su utiliza-
cin.
Calentar suavemente por debajo de la lamina, con un hisopo de al-

godn humedecido en alcohol, hasta la emisin de vapores, repetir el
proceso por tres veces, no debe hervir la preparacin .Si el volumen
del colorante disminuye por evaporacin, cubrir nuevamente con
colorante el extendido.
El tiempo de coloracin con la fucsina fenicada es de 5 minutos, una

vez fra la lmina, lavar la lamina inclinndola hacia delante dejando
34 caer agua corriente a baja presin.
- Decoloracin
Cubrir la totalidad de la superficie del extendido con la solucin de

alcohol cido (cido clorhdrico y alcohol) hasta obtener una colora-
cin rosa plido, de ser necesario aadir ms solucin decolorante,
nuevamente. No exceder de dos minutos.
Eliminar el decolorante, lavar nuevamente la lmina con agua a baja

presin, cuidando de no desprender el extendido.
35
- Coloracin de fondo
Cubrir la superficie del extendido con el colorante azul de metileno,

dejar actuar de 30 segundos a 1 minuto.
Eliminar el azul de metileno y lavar cada lmina a baja presin, por

ambos lados.
36
- Observacin microscpica
La observacin microscpica tiene dos objetivos importantes:

1. Determinar si en el extendido hay bacilos cido alcohol resis-

tente (BAAR).
2. Establecer la carga bacilar
- Lectura
Depositar una gota de aceite de inmersin sobre un extremo

del extendido.
Bajar el objetivo de inmersin hasta visualizar el campo micros-
cpico, enfocar y con el tornillo micromtrico obtener una ima-
gen ntida.
Es aconsejable seguir una pauta uniforme de observacin, avanzan-
do de izquierda a derecha del extendido y observando un mnimo
de 100 campos tiles. Se considera como campo microscpico til,
aquel en el cual se observa elementos celulares de origen bronquial,
(leucocitos, fibras de mucus, clulas epiteliales, etc.) Los campos en
los que no aparecen dichos elementos no deben considerarse como
campo microscpico til.
El observador ira tomando nota del nmero de bacilos observados

y del numero de campos microscpicos a observarse, que variar
segn la concentracin bacilar por ml. en la muestra.
Si en una lmina se encuentra solo 1 a 9 bacilos en 100 campos mi-

croscpicos observados, debe ampliarse la lectura a otros campos
ms.
37
Si persistiese el resultado, realizar otro extendido de la misma mues-
tra e informar lo encontrado y solicitar nueva muestra.
Al trmino de la lectura, retirar la lmina de la platina del microsco-

pio, limpiar el aceite de inmersin del objetivo con papel absorbente

suave.
- Interpretacin de resultados
La observacin microscpica tiene dos objetivos importantes
Resultado Lectura
NEGATIVO Ausencia de BAAR en la lamina , leer un mnimo
de 300 campos.
POSITIVO En un mnimo de 100 campos microscpicos. In-
No. Bacilos :1-9 BAAR formarlos numricamente.
POSITIVO (+) 10-99 BAAR en 100 campos microscpicos
POSITIVO (++) 1-10 BAAR por campo microscpico (es necesa-
rio observar 50 campos)
POSITIVO (+++) 10 BAAR por campo microscpico (es necesario
observar 20 campos)
- Reporte de resultados
El resultado de la lectura de la lmina debe anotarse en el libro de

registro de baciloscopas y transcribirse al formulario No. 2 de re-
38 porte de resultados de baciloscopas, anotando con bolgrafo rojo
los resultados positivos y con negro o azul los resultados negativos.
Una vez finalizado el trabajo se deben eliminar las muestras envuel-

tas en papel peridico, para luego proceder al desecho, segn cual-
quiera de los siguientes procedimientos:
a) Inactivacin mediante el agregado de solucin de hipoclorito de

sodio al 1 % a cada envase.
b) Inactivacin en autoclave de muestras.
c) Incineracin de material contaminado.
d) Aplicacin de cal viva sobre las muestras en cantidad igual al
volumen de muestra.
Las lminas negativas y las lminas positivas deben guardarse cui-

dadosamente, previa limpieza con papel absorbente suave para en-
viarlas al Laboratorio Departamental para su control de calidad
respectivo.
j) Limpieza de microscopio
El Microscopio es un instrumento ptico de alta precisin y debe ser

utilizado con mucho cuidado.
La inspeccin del microscopio antes de su uso y la limpieza des-
pus de su utilizacin, son hbitos que contribuyen a la conser-
vacin del instrumento.
Las partes pticas y las lentes deben limpiarse cuidadosamente
con un trapo de lino fino o papel absorbente suave. Nunca debe
friccionarse el papel sobre la lente.
Se debe cuidar el equipo de la humedad y el polvo ambiental
para evitar la formacin de hongos y la acumulacin de polvo
y pelusas. El microscopio debe estar cubierto con una funda,
alejado de la humedad y reactivos.
La reparacin del microscopio debe ser realizada por perso-
nal especializado con la finalidad de garantizar que el equipo
mantenga su eficiencia y precisin. El personal de laboratorio
nunca debe desarmar el microscopio para realizar limpieza o
reparacin.
La superficie exterior de los oculares debe limpiarse diariamen- 39
te. Recordar que tanto los prpados como las pestaas tienen
grasa y al apoyarnos sobre los oculares, las lentes pueden ensu-
ciarse; para la limpieza debe utilizarse papel suave o un pao de
lino fino.
El objetivo de inmersin debe limpiarse despus de cada lectu-

ra, con papel suave humedecido con alcohol blanco de 96 GL
para eliminar el aceite. Por ningn motivo la lente de inmersin
quedara sin limpiarse.
Se debe verificar el voltaje antes del uso de cada microscopio.
Realizar mantenimiento por lo menos una vez al ao.
3. ERRORES EN RESULTADOS DE BACILOSCOPA
a) Inherentes a la muestra
Muestra no representativa, de mala calidad.

Muestra recogida en un momento inadecuado.
Muestra en cantidad insuficiente.
Muestra mal conservada (licuefaccin de la partcula til, bacte-
rilisis).
Muestra en envases reutilizables.
b) Inherentes al operador
- Falsos Negativos
La mala seleccin de la partcula til.
Extendidos finos, gruesos o poco homogneos.
Calentamiento deficiente.
Mala decoloracin de fondo.
Decoloracin excesiva.
Uso de microscopio en mal estado.
Lectura de un nmero insuficiente de campos.
Observacin de un solo nivel de extendido.
Confusin de muestras y/ o extendido.
Errores en transcripcin de resultados.
- Falsos Positivos
40 Uso de porta objetos sucios o rayados.
Fijacin de extendidos hmedos a temperaturas superiores a
60 grados.
Calentamiento excesivo.
Precipitacin de cristales por uso de reactivos no filtrados.
Uso de microscopio en mal estado.
Poca capacidad para diferenciar bacilos de artificios de colo-
racin.
Transferencia de bacilos de un extendido a otro, varilla de aceite
de inmersin.
Confusin de muestras.
Errores de transcripcin de resultados.
b) Inherentes a la tcnica
- Falsos Negativos
Cantidad insuficiente de la muestra (limite de sensibilidad: 5.000
a 10.000 bacilos / ml ).
- Falsos Positivos
Baja especificidad de BAAR que pueden ser no patgenos y No-
cardia.
CAPTULO III
GUA DE CONTROL INTERNO DE BACILOSCOPAS
1. INTRODUCCIN
En Bolivia pas con incidencia elevada de tuberculosis (TB), el exmen

microscpico directo a partir del esputo contina siendo el instru-
mento bsico aplicado para diagnosticar la tuberculosis y efectuar el
seguimiento bacteriolgico al tratamiento especfico.
El Programa Nacional de Control de Tuberculosis, dispone en su es-

tructura de la Red Nacional de Laboratorios, establecida en todo 41
el pas, y constituida por laboratorios que efectan bacteriologa de
Tuberculosis, organizados por niveles, siendo la base de la estructura
los 498 laboratorios operativos, dependientes de los 9 Laboratorios
Departamentales, los que a su vez se encuentran bajo la direccin
tcnica del Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis.

Para cumplir sus funciones se dispone de Manuales Tcnicos y ad-
ministrativos, que garantizan el funcionamiento y calidad tcnica de
cada uno de los componentes.
El mtodo implementado con mayor cobertura a nivel nacional es la

baciloscopa, que permite apoyar las acciones del PNCT, el mismo se
realiza bajo normas tcnicas establecidas, que imponen el desarrollo
de un sistema permanente y sistemtico de la calidad mediante pro-
cedimientos consensuados para su aplicacin a nivel nacional.
Desde la constitucin de la Red Laboratorios se efecta en cada de-

partamento el control de calidad indirecto de las lminas producidas
en todos los laboratorios miembros de la Red, la definicin de me-
todologa aplicada ha surgido de la necesidad de garantizar la calidad
de los resultados. El sistema requiere ajustes para continuar mejo-
rando la calidad de trabajo de bsqueda y control de pacientes con
Tuberculosis, razn por la que se ha visto la necesidad de incorporar
conceptos y procedimientos que logren el objetivo de mantener la
vigilancia del mtodo a nivel nacional, con documentos e instrumen-
tos aprobados por los mismos ejecutores de la actividad.
Por lo que se constituye la presente gua en un instrumento impor-

tante para apoyar las funciones de los diferentes niveles de la Red
de Laboratorio de Tuberculosis que efectan control de calidad de
lminas de baciloscopa.
2. OBJETIVO
Proveer a la Red Nacional de Laboratorios un instrumento que

apoye la garanta de emisin de resultados de baciloscopas en los
servicios operativos que ejecutan la tcnica, mediante la aplicacin
permanente de procesos de vigilancia en la prctica tcnica por los
42 niveles departamentales.
3. SISTEMA DE ASEGURAMIENTO O GARANTA

DE CALIDAD (SAC)
Es un sistema concebido para mejorar la fiabilidad y la eficacia de los

servicios de laboratorio de manera continua, comprende el control
de calidad interno (CCI), control de calidad externo (CCE) y el per-
feccionamiento de la calidad(PC).
a) Control de Calidad Interno (CCI)


b) Control de Calidad Externo (CCE)
Procedimiento que permite a los laboratorios participantes evaluar

sus capacidades mediante la comparacin de sus resultados con
otros laboratorios de la red a travs de la prueba de paneles y de
la relectura a ciegas. Debera incluir la relectura de frotis en el sitio
supervisado.
En Bolivia se efecta desde los niveles departamentales a los labo-
ratorios constituyentes de la Red, y del nivel nacional a los depar-
tamentales, para verificar la calidad de los lectores de control de
calidad de baciloscopa, establecidos en cada nivel departamental.
c) Perfeccionamiento de la Calidad (PC)
Procedimiento por el cual los diferentes componentes de los servi-

cios de baciloscopa son analizados con el objetivo de buscar las for-
mas para eliminar de manera constante los obstculos. Comprende
la evaluacin continua, las medidas correctivas incluyendo los talleres
de reciclaje y actualizacin para evitar recurrencia de problemas. El
PC se apoya en las visitas de evaluacin en el sitio.
4. METODOLOGA
43

a) Control de Calidad Interno (CCI)

i) Condiciones para su aplicacin
Esta metodologa debe ser aplicada bajo condiciones muy especficas,

que van a facilitar la aplicacin del mismo, entre las que tenemos:
Un sistema de laboratorios que dirija y oriente su aplicacin,

beneficio y anlisis de los resultados en forma sistemtica.
Indicadores definidos para efectuar procesos de correccin y
mejoramiento
Conocimiento e informacin del personal del laboratorio.
Poltica de calidad establecida; mtodos estandarizados respal-
dados con documentos gua (manuales aprobados y validados).
Planificacin conjunta de aplicacin del control interno.
Condicin indispensable
Determinacin y aceptacin de participar en sistemas de

aseguramiento y gestin de la calidad consensuada.
ii) Estndares bsicos para control interno de baciloscopa
Se identifican dos aspectos:
Administrativo: relacionado con instrumentos de registro ex-

44 ternos e internos utilizados para la aplicacin del mtodo en el
laboratorio.
Tcnico: Referido a proceso de aplicacin del mtodo en base
a definiciones establecidas.
Calidad del microscopio.
Calidad de los materiales.
Calidad de los reactivos.
Calidad de la tcnica.
Lectura.
Interpretacin.
Bioseguridad.
iii) Estndares mnimos para el control de calidad interno
Control de calidad del microscopio
Limpieza.
Lentes y oculares (limpios y sin dao ).
Verificar la utilidad del microscopio (observar laminas)
Verificar la parte mecnica del microscopio (platina y fuente de
luz y tornillos macro y micromtricos).
Implementacin de la ficha de mantenimiento en cada labora-
torio.
Ubicacin del microscopio.
Indicador = N de microscopios funcionando correctamente
x100
N total de microscopios
Control de calidad de colorantes
Frascos (preferencia color mbar) tapa hermtica.

Identificacin correcta de los frascos.
Almacenamiento de los frascos.
Fecha de preparacin de los reactivos.
Fecha de recepcin y numero de lote de reactivos (cuando el
laboratorio recibe) .
Uso de fucsina filtrada una vez por semana y/o para cada uso.
Prueba de coloracin de colorantes preparados (teir lamina
positiva y lamina negativa ).
N de parmetros cumplidos 45
Indicador = x100
N de parmetros establecidos y evaluados
Control de calidad de la solicitud
Uso del formulario No 1.

Llenado adecuado y con claridad del formulario que consigne

(fecha de solicitud, nombre y apellidos, solicitante, RAZN,
edad y direccin).
N de formularios llenados correctamente
Indicador = x100
N total de formularios controlados
Control de calidad del cuaderno de registro
Debe verificarse las hojas de registro llenadas el da en que se efec-

ta el control interno. Determinado por el Responsable de Calidad
o Responsable de Laboratorio
Llenado de datos completo.

Claridad de la letra.
Uso adecuado de bolgrafos (negro y rojo).
N total de casillas sin errores de llenado
Indicador = x100
N total de casillas de la hoja de registro de cuaderno
Control de calidad de recepcin
Bandeja con antisptico

Envase de recoleccin de muestra correctamente rotulado.
Formulario No 1 Solicitud de examen.
N de parmetros cumplidos
Indicador = x100
Control de calidad de la tcnica
Calidad de lminas.) Limpieza y acondicionamiento

Identificacin clara y legible( lpiz ).
Extendido de 3 x 1,5 cm,
Fijado
Coloracin
46 Lectura,
Registro del resultado en el libro de baciloscopas.
Indicador = N de parmetros cumplidos

x100
Control de calidad del reporte
Llenado del reporte en formulario N 2 (completo y en forma

clara ).
Fecha de reporte y firma.
Entrega de resultados (registro de fecha y destinatario)
N de formularios llenados correctamente

Indicador = x100
N de total de formularios controlados
Control de calidad del desecho de material

Almacenamiento intermedio de muestras procesadas, guardado,
tiempo condiciones ( menor 3 das de refrigeracin )
Auto clavado.
Incineracin.
Inactivacin.
Desecho de acuerdo a normas institucionales.
iv) Programacin
Cada laboratorio debe establecer la realizacin sistemtica de

control interno en cualquier momento que considere el super-
visor, comunicando previamente al tcnico que ejecuta la baci-
loscopa.
Este proceso debe comunicarse por escrito e instituirse en con-
senso para llevar adelante con xito la tarea.
v) Condiciones destacables
Se debe considerar los siguientes aspectos para lograr la implemen-

tacin.
Carga de trabajo del operador.
Carga de muestras procesadas.
Disponibilidad de tiempo: para ejecutar en presencia del super- 47
visado.
Disponibilidad de tiempo para emitir el informe escrito.
Este debe ser archivado con fines de verificacin del cumpli-
miento del aseguramiento de la calidad.

vi) Documentos recomendados
El Laboratorio debe disponer de:

Manuales tcnicos
Formularios estandarizados
Hojas de registro del control interno
Cuaderno de programacin
Archivo de reportes
Certificados de eficiencia y/o recomendaciones formuladas.
IMPORTANTE
DETERMINAR POR LO MENOS UNA VEZ AL MES,
LA REALIZACIN DEL CONTROL DE CALIDAD
INTERNO, EL DA QUE DETERMINE O DISPONGA
EL JEFE DE SERVICIO, O EL SUPERVISOR, O EN SU
CASO EL MISMO OPERADOR.
Tabla de evaluacin de control interno de baciloscopas
en la red de laboratorios de tuberculosis
Servicio de Salud...
Evaluador:..fecha:...
N de muestras de baciloscopas realizadas en el da de realizacin
del control ... . . . . .
Operador ... . . . . . . .
Indicador
Semana 1 Semana 2 Semana 3 Semana 4 Recomendaciones
1. Control de calidad del

microscopio
2. Control de calidad de
colorantes
48
solicitud
4. Control de calidad del
cuaderno de registro
5. Control de calidad
interno de recepcin.
la tcnica.
reporte
eliminacin de desechos.
LOS FORMULARIOS DE REPORTE DE REALIZACIN

DE CONTROL DE CALIDAD INTERNO, DEBEN SER
ENVIADOS AL LABORATORIO DEPARTAMENTAL,
CON EL INFORME TRIMESTRAL.
CAPTULO IV
SUPERVISIN INDIRECTA CONTROL DE CALIDAD

EXTERNO
La SUPERVISIN INDIRECTA puede ser de dos tipos:
1. SUPERVISIN INDIRECTA ADMINISTRATIVA
Consiste en los anlisis cualitativo y cuantitativo de la informacin

estadstica peridica que los servicios envan a nivel intermedio o
central.
49
A continuacin se destaca el anlisis de las variables ms importantes.
Oportunidad de la entrega de la informacin.

Una irregularidad en el envo de informacin puede indicar inte-
rrupcin de las actividades o exceso de trabajo y falta de tiempo
para su envo.

Consistencia de la actividad.
Si bien pueden existir variaciones estacionales que justifiquen
altibajos en las actividades, ellas pueden tambin deberse a pro-
blemas en el servicio tales como disminucin en la bsqueda de
casos o deficiencias en el laboratorio.
Variaciones en la proporcin de positividad en las baciloscopas
de diagnostico.
Un aumento en la proporcin puede significar una bsqueda
muy dirigida, una disminucin, un aumento excesivo del trabajo
en el laboratorio con escaso rendimiento.
Relacin entre positivos de control y enfermos en tratamiento.
En un tratamiento regular la gran mayora de los pacientes nega-
tivizan la baciloscopa en el segundo mes (tratamientos cortos)
o antes del cuarto mes (tratamiento estndar). Un porcentaje
mayor de 40% de baciloscopas de control positivas puede indi-
car fallas en el seguimiento del paciente (supervisin) o presen-
cia de resistencia primaria.
Calidad de las muestras.
Carga bacilar.
Promedio de baciloscopas de diagnstico y de control.
Krdex de materiales e insumos de laboratorio.
La informacin remitida por los servicios debe ser analizada por el

equipo supervisor del programa lo antes posible y es conveniente
que los comentarios que surjan de dicho anlisis se enven pronta-
mente al servicio. No se debera requerir ninguna informacin que
no se vaya a analizar y comunicar adecuadamente.
2. SUPERVISIN DIRECTA DE LAMINAS O

CONTROL EXTERNO
La segunda opcin para efectuar el control de calidad de laminas

50 de baciloscopa es a travs del Control de Calidad Externo que se
efecta a travs del envo trimestral de lminas de baciloscopa, al
Laboratorio de Referencia, para verificar la calidad del proceso y
lectura efectuada por el operador.
Este sistema mide la sensibilidad y especificidad del diagnstico y

determina el error y la eficiencia del RRHH de los niveles operativos
y/o Departamentales.
a) Mtodos
Para el control de calidad externo se pueden aplicar diferentes m-

todos:
1. Evaluacin en el lugar de trabajo (supervisin).

2. Envi de lminas realizadas en cada laboratorio segn normas
establecidas.
3. Prueba de paneles (envo de frotis preparados y estandarizados
por el Laboratorio de Referencia.
b) Modalidad
En la estructura de la Red de Laboratorios de Bolivia se ha esta-

blecido tres niveles administrativos de organizacin el nivel nacional,
nivel departamental y nivel operativo.
El control de calidad externo debe aplicarse en forma peridica a to-
dos los laboratorios de acuerdo a la siguiente modalidad establecida:
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DEL

LABORATORIO NACIONAL A LOS LABORATORIOS
DEPARTAMENTALES
Para calificar la calidad de lectura e interpretacin de control de

calidad ejecutado por los niveles departamentales, el Laboratorio
Nacional efectuar la ronda de control de calidad externo a los ni-
veles departamentales de acuerdo a programacin establecida pre-
viamente.
i) Condiciones
Se efecta mediante el envo de un panel de 10 lminas preparadas 51

de acuerdo a tabla de preparacin de paneles de frotis para control
de calidad externo.
Posteriormente en un periodo de lectura establecido los resultados

deben ser remitidos al Laboratorio Nacional de Tuberculosis, para

su valoracin.
Se aplicar la siguiente valoracin
CADA LMINA CORRECTA =10 PUNTOS

FALSO POSITIVO = 0 PUNTOS
FALSO NEGATIVO = 0 PUNTOS
FALSO POSITIVO DBIL = 5 PUNTOS
FALSO NEGATIVO DBIL = 5 PUNTOS
ERROR DE CUANTIFICACIN = 5 PUNTOS
SE APRUEBA CON 9O PUNTOS
ii) Periodicidad
Se realizar en forma semestral, deben ser notificados todos los

laboratorios de nivel departamental, el tiempo de envo de resulta-
dos ser establecido claramente a fin de un cumplimiento ptimo.
Para este fin cada Laboratorio Departamental enviar al Laboratorio
Nacional de Referencia un panel de diez lminas elaborado para este
propsito, la aplicacin del mismo debe efectuarse en forma semes-
tral.
Se realizara el envo de un juego de 10 lminas preparadas en el

laboratorio bajo parmetros establecidos en paneles conformados
de una de las siguientes formas:
OPCIN 1 OPCIN 2 OPCIN 3 OPCIN 4

1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado
3+ 3+ 2-3+ 2-3+
1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado 2 frotis cuantificados 2 frotis cuantificados
2+ 2+ 1+ 1+
1 frotis cuantificado 2 frotis cuantificados 3 frotis cuantificados 4 frotis cuantificados
1+ 1+ 1-9 /100 campos 1-9 /100 campos
2 frotis cuantificados 3 frotis cuantificados 4 frotis negativos 3 frotis negativos
52 1-9 /100 campos 1-9 /100 campos
5 frotis negativos 3 frotis negativos
Esta prueba es considerada menos efectiva porque no evala la cali-

dad de los resultados de rutina del laboratorio, pero el control con
paneles de frotis es til para:
Suplemento de los programas de relectura.

Proveer datos preliminares de las capacidades de los laborato-
rios perifricos, previamente al programa de relectura.
Evaluar la calidad existente de los resultados o para detectar
rpidamente los problemas asociados a la baja calidad de resul-

tados.
Evaluar el impacto de la capacitacin recibida a los funcionarios
de laboratorio.
Evaluar la calidad de los resultados cuando no hay recursos dis-
ponibles para implementar la relectura.
CERTIFICACIN DE MICROSCOPISTAS
Anualmente el nivel central efectuar en cada departamento la cer-

tificacin de personal que efecta baciloscopas, sujeto a condiciones
establecidas:
Pertenecer a un Laboratorio miembro de la Red.

Contar con la calificacin anual de haber cumplido con el con-
trol de calidad con altos valores de sensibilidad, especificidad y
eficiencia.
La evaluacin se efectuar mediante la metodologa recomendada en

la presente gua, complementada con una evaluacin terica escrita.
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DE NIVEL DEPAR-

TAMENTAL A LABORATORIOS OPERATIVOS 53
Se trata de un tipo de control de calidad de relectura a ciegas, es un

procedimiento que consiste en la relectura de lminas de bacilos-
copa del laboratorio a controlar para evaluar su nivel de calidad. Los
elementos esenciales de un sistema de relectura preciso y prctico

sealados en este manual son los siguientes:
Las lminas de baciloscopas a ser controladas, sern selecciona-

das de manera aleatoria, determinando el nmero en funcin a
la tabla convencional.
El laboratorio supervisor, llamado controlador, no dar a cono-
cer los resultados iniciales de la baciloscopa al profesional que
realizara la lectura de los frotis para evitar un sesgo en los re-
sultados.
Los resultados discordantes son resueltos por un segundo con-
trolador.
Debe existir un sistema que proporcione una continua retroin-
formacin y mejoramiento a los laboratorios supervisados.
Este es el nico mtodo que proporciona un aseguramiento fiable

de la calidad de los laboratorios de la red de microscopa de un pas.
Para la seleccin de las lminas a ser controladas se utilizar la
siguiente tabla de acuerdo al mtodo convencional:
% de lminas
% de lminas
seleccionadas
N de lminas recibidas enviadas
para control
(+) (-) (+) (-)
Menor a 20 100 100 100 100
21 - 50 100 100 50 75
51 - 100 100 100 25 50
101 - 200 100 100 15 20
Mayor a 200 100 100 10 15
DESCENTRALIZACIN DEL CONTROL DE CALIDAD
Cuando se identifique alta carga de baciloscopas producidas en la

Red Departamental el Laboratorio Departamental, delegar funcio-
54 nes como laboratorios de apoyo al Control de Calidad, a servicios
que debern cumplir las siguientes condiciones:
Contar con RRHH calificado, capacitado y comprometido.

Tener calificacin superior a 90% en el control de calidad de
lminas con ndices de sensibilidad, especificidad, y eficiencia
ptimos.
Contar con certificacin de la Red Nacional de Laboratorios
Cada laboratorio delegado, ser evaluado anualmente mediante la

relectura de lminas que hubiera controlado, de acuerdo a parme-
tros establecidos. Estos recibirn anualmente el certificado de parti-

cipacin como laboratorio de apoyo al Control de Calidad, determi-
nndose la siguiente escala:
Laminas controladas anualmente 360 equivalente a una carga ho-

raria de 60 horas. En caso de haberse efectuado un nmero mayor
de lminas se proceder al clculo respectivo. En aquellos casos en
los que el nmero de lminas revisadas sea menor al establecido se
otorgar el certificado respectivo sin especificacin de carga horaria
El Laboratorio de Nivel Departamental enviar anualmente al Labo-
ratorio Nacional de Referencia, la nmina de Operadores Delegados
que cumplieron la meta para la emisin del certificado respectivo.
El Laboratorio delegado es aquel laboratorio nominado
por el Laboratorio Departamental como laboratorio de
apoyo que efecta el control de calidad de lminas de
baciloscopa, el mismo cumple requisitos como: No pre-
sentar discordancias en el control de calidad, disponer
de recursos humanos comprometidos con la Red de La-
boratorios de Tuberculosis.
1. PERIODICIDAD Y PRIORIDAD
Cada nivel departamental efectuar la Programacin anual de Con-

trol de Calidad determinando frecuencia (considerando que cada
laboratorio debe ser controlado mnimamente dos veces al ao) y
nmero de laboratorios a ser controlados priorizando de acuerdo a: 55
Laboratorios con recurso humano nuevo.

Laboratorios que hubieran tenido resultados de control de
calidad con baja sensibilidad, baja especificidad, y error mayor a
1.

Laboratorios con alta o baja carga de trabajo.
Laboratorios con deficiencias tcnicas en el proceso de la ba-
ciloscopa.
2. METODOLOGA
a) Conservacin de las lminas.
Todos los laboratorios que efectan baciloscopa deben con-

servar la totalidad de las baciloscopa realizadas durante un tri-
mestre.
Para conservar las lminas se debe quitar suavemente el aceite
de inmersin con papel absorbente. Posteriormente revisar la
numeracin o identificacin y envolver cada lmina por sepa-
rado.
Antes del da 15 del mes siguiente las lminas se acomodan en
una caja en forma ordenada y se envan junto con el formulario
N 11 de envo de lminas correctamente llenado. ANEXO 3
b) Lectura comparativa de laminas
La lectura debe efectuarse de acuerdo a las normas y descono-

ciendo el resultado del laboratorio supervisado.
El lector debe tener amplia experiencia en lectura de bacilos-
copa.
El nmero de lminas seleccionadas para la relectura se deter-
minar aplicando la tabla convencional.
Simultneamente a la lectura efectuar un anlisis tcnico de la
lmina referido a:
Calidad de la muestra: Salival, Purulenta, Mucupurulenta y
Sanguinolenta.
Calidad del Extendido.
a) Bueno (B)
56 b) Delgado (D)
c) Grueso (G)
d) Corto (C)
e) Extenso (E)
f) No homogneo (NH)
Calidad de la Tincin
a) Precipitado de fucsina (PF)

b) Mala decoloracin. (MD)
c) Exceso o falta de coloracin de contraste. (ECF o FCC)
Comparar los resultados con los enviados por el laboratorio

supervisado.
EVALUACIN DE RESULTADOS
Si se constata una tendencia a efectuar lminas con defectos tcnicos

(muestra, extendido o coloracin) se debe hacer notar con observa-
ciones, sugiriendo la probable razn del error, sus consecuencias y la
forma de solucionarlo.
Si se observa tendencia a informes cuantitativos de lecturas ms ba-

jas o ms altas que las del laboratorio supervisor se debe hacer notar.
En caso de observar discordancia cualitativa (falsos positivos o nega-
tivos) se debe releer minuciosamente la lmina en un nmero mayor
de campos, procurando agotar las posibilidades de error. Si al cabo
de esta segunda lectura persiste la discordancia se guardar la lmina,
o bien se enviar al laboratorio supervisado.
CONDUCTA A SEGUIR FRENTE A DISCORDANCIAS
En el formulario N 12 de Registro de relectura de baciloscopas

se marcara la discordancia solicitando al laboratorio supervisa-
do que revise sus registros, a fin de descartar errores de identi-
ficacin o transcripcin.
En caso de sospecha de falso positivo se debe colorear nueva-
mente la lmina y observarla por dos controladores. Si se man-
tiene el resultado se confirma el falso positivo.
En caso de sospecha de falso negativo debe ser observada por 57
un segundo controlador. Si se mantiene el resultado se confirma
el falso negativo.
Verificada la discordancia comunicar inmediatamente al respon-
sable de laboratorio para el seguimiento respectivo, adjuntando
el formulario N 12 al informe emitido.

La repeticin de discordancias mayores (+), (++), (+++) y negati-
vo debe ser motivo de un inmediato readiestramiento de la per-
sona responsable de la realizacin de baciloscopas, ya sea por
una supervisin como por estada en el laboratorio supervisor.
CAPTULO V
SUPERVISIN DIRECTA TCNICA ADMINISTRATIVA
1. DEFINICIN
La supervisin es un proceso educativo recproco, permanente, re-

gular y planificado, que permite desarrollar conocimientos, capaci-
dades y actitudes, manteniendo la eficacia de una red de servicios
organizados, en este caso los laboratorios que efectan tcnicas
bacteriolgicas para el diagnostico y seguimiento de tratamiento de
la tuberculosis.
59
La actividad de supervisin implica observacin, correccin, ense-
anza, estmulo y nos permite:
Capacitar permanentemente al personal de salud para mejorar

su desempeo
Motivar al trabajador para el desarrollo del trabajo

Mejorar la calidad tcnica de la atencin y la satisfaccin de los
usuarios.
Retroalimentar al equipo de trabajo.
Reorientar la ejecucin de actividades en caso necesario.
2. REQUISITOS PARA REALIZAR SUPERVISIN
La persona que realiza supervisin debe reunir las siguientes carac-

tersticas:
Buenas relaciones personales, motivacin y dedicacin.

Conocimientos slidos y actualizados sobre aspectos tcnicos
y operacionales del Programa de Control de Tuberculosis y en
especial de Bacteriologa.
Experiencia personal en trabajo de terreno.
Flexibilidad para analizar los problemas y sugerir medidas prc-
ticas, adecuadas y sencillas.
Poseer grado acadmico acorde al nivel de supervisin que est
desarrollando.
Para supervisar es preciso tener normas tcnicas y operacionales

establecidas, en las que se haya capacitado el personal y estimaciones
cuantitativas de las actividades a realizar por los establecimientos de
salud.
La supervisin es una actividad prioritaria en el servicio de salud a

fin de mantener la calidad (ver organizacin de los laboratorios de la
Tuberculosis) y constituye una responsabilidad esencial de los niveles
central e intermedio de los mismos.
3. OBJETIVOS
60 Mantener la calidad de las tcnicas y procedimientos estandarizados

en las normas, por medio de la capacitacin permanente, regular y
controlada del personal responsable de la bacteriologa de la tuber-
culosis.
4. MTODOS DE SUPERVISIN
La supervisin puede realizarse en forma directa e indirecta.
SUPERVISIN DIRECTA la cual puede ser tcnica y adminis-

trativa.
a) Supervisin directa Tcnica y Administrativa
Consiste en la visita personal a los servicios de salud que tienen

laboratorio con el fin de observar directamente las condiciones de
trabajo, los procedimientos tcnicos y administrativos.
Este mtodo de supervisin es ms efectivo, pues permite conocer

en terreno los inconvenientes y solucionarlos de acuerdo a la reali-
dad del lugar y con recursos locales.
Los laboratorios Nacional y Departamentales efectuarn una

programacin anual que determinar el nmero de laboratorios
a supervisar, la frecuencia la cual debe ser mnimamente una vez al
ao, ya que esta actividad debe ser regular y sistemtica puesto que
el contacto personal con los ejecutores de las acciones es la mejor
manera de mantener la motivacin y calidad tcnica. Es recomendable
realizar una supervisin coordinada con la supervisin del equipo
supervisor del Programa de Tuberculosis u otros equipos de salud, a fin
de aprovechar mejor los recursos, para tal efecto es conveniente que
el supervisor conozca todas las actividades del programa a supervisar
a fin de reducir el nmero de personas involucradas en la supervisin.
Limitaciones de tiempo, movilizacin y viticos hacen que se debe

utilizar solo en casos de mucha necesidad, en casos de sospecha
o deteccin de problemas a travs de la supervisin indirecta, nos
muestra la necesidad de efectuar una supervisin directa.
METODOLOGA 61
ENTREVISTAS
Aviso previo al servicio sobre la visita. Evita desencuentros y

falsas impresiones de inspeccin.

Visita al Director del Establecimiento para informar sobre los
objetivos de la visita, este paso debe incluir al Jefe de Laboratorio,
en lo posible tomar contacto con el personal mdico y la encargada
de enfermera a fin de interiorizarse sobre la metodologa de la
localizacin de casos y las relaciones con el laboratorio.
Al trmino de la visita efectuar, con dichas personas, una
evaluacin sobre lo observado, en la misma identificar las
dificultades y plantear soluciones a los problemas. Las soluciones
encontradas en comn con los propios efectores tienen mayores
posibilidades de ser implementadas.
SUPERVISIN DE LABORATORIO
En caso de ser primera supervisin realizar una supervisin minu-

ciosa de ambientes, materiales, equipos, tcnicas, bioseguridad, eva-
luacin de conocimientos del personal, manejo de instrumentos de
registro y otros. En caso de ser supervisin a laboratorios ya super-
visados anteriormente, utilizar la gua de la ltima supervisin con
la finalidad de realizar seguimiento a las recomendaciones escritas y
medir si se consideraron las observaciones y superaron las dificulta-
des encontradas.
El instrumento de supervisin es la GUA DE SUPERVISIN

DIRECTA DE LABORATORIO, debiendo registrarse tambin todas
las observaciones en el libro de laboratorio en la seccin de Super-
visin directa, con firma y sello del supervisor.
LOCAL
Observar las condiciones generales de trabajo y la disposicin para

efectuar:
La Bacteriologa en las mejores condiciones.

62 Lugar de trabajo e iluminacin.
Movimiento de personas.
Luz y agua.
PERSONAL
Disposicin de los responsables para efectuar tareas de tuberculosis,

conocimientos sobre el servicio, disponibilidad real de tiempo, habi-
lidad para el trabajo en bacteriologa conocimientos y cumplimiento
de medidas de bioseguridad.
MATERIAL Y EQUIPOS
Estado de uso de microscopio, autoclave, cmara o estufa de cultivo,

centrifuga, agitador magntico, coagulador, refrigerador, cabinas de
bioseguridad, controles peridicos de su funcionamiento y registro
de los mismos (especialmente para cabina de bioseguridad, autoclave,
estufa de cultivo, refrigerador y coagulador).
Provisin y conservacin de materiales como envases, lminas, apli-

cadores. Reactivos, quien les provee y si la disponibilidad es perma-
nente.
Coordinacin con otros servicios: lugar de procedencia de las mues-
tras, condiciones de recepcin, indicacin al paciente sobre la toma
de muestra, lugar sealado para la toma de muestras, tiempo de
entrega de resultados, recepcin de resultados, conservacin de
muestras, sistema de derivacin de muestras para efectuar tcnicas
ms complejas.
BACILOSCOPA
TCNICA
En general es conveniente observar todas las etapas de la tcnica.
Extendido, identificacin y calidad de laminas eleccin de la par-

tcula til, tamao, grosor homogeneidad y superficie del exten-
dido. 63
Coloracin, preparacin (En servicios que preparan colorantes)
y conservacin de reactivos, proceso de coloracin.
Lectura e informe: Tcnica de observacin numero de campos
observados, informe cuantitativo, relectura de lminas, conser-
vacin para supervisin tcnica directa.

REGISTRO
Llenado correcto de todas las casillas del Libro de laboratorio.

Llenado correcto de los Formularios de solicitud de baciloscopa
Llenado correcto de los Formularios de resultados de bacilos-
copa.
Llenado correcto de los Formularios de solicitud de insumos.
Llenado correcto de los Formularios de envo de control de
calidad indirecto de baciloscopa.
Llenado adecuado de Planillas de control de calidad interno de
equipos.
Recepcin y archivo de los Informes de control de calidad de
baciloscopas.
Recepcin y archivo Informes de supervisin directa.
Entrega oportuna de resultados al paciente, al mdico o la en-
fermera.
LA SUPERVISIN CONSTITUYE UN MTODO DE
CAPACITACIN RECIPROCA ENTRE SUPERVISADO
Y SUPERVISOR CUYO OBJETIVO ES LA OPTIMIZA-
CIN DE LAS ACTIVIDADES EN BENEFICIO DEL EN-
FERMO.
64
CAPTULO VI
NORMAS BSICAS DE BIOSEGURIDAD PARA

LABORATORIO DE NIVEL I
El presente documento establece las normas bsicas de biosegu-

ridad para la red de laboratorios de tuberculosis que facilitaran el
funcionamiento articulado de los laboratorios en cuanto se refiere a
las normas de bioseguridad y harn ms eficiente, confiable y garan-
tizaran los procedimientos a realizarse en el laboratorio.
NINGN ELEMENTO DE PROTECCIN ES TAN NE-

CESARIO COMO LA INFORMACIN, LA ORGANI- 65
ZACIN EN EL TRABAJO, EL ESTADO DE ALERTA
Y LAS MEDIDAS DE PRECAUCIN QUE SON MUY
SIMPLES Y DE MUY BAJO COSTO.
EL ORDEN Y LA SISTEMATIZACIN DEL TRABAJO

ES LA MEJOR MEDIDA DE BIOSEGURIDAD
1. FINALIDAD
Las recomendaciones bsicas de las normas de Bioseguridad es un

aporte para regular diversas acciones desarrolladas en el Labora-
torio del Nivel I, Puesto de Diagnstico Bsico, Puesto de Toma de
Muestra.
El conocimiento del mismo es de carcter obligatorio para todos los

funcionarios de la Red de laboratorios de Tuberculosis.
2. DEFINICIN
La bioseguridad comprende un conjunto de medidas preventivas b-

sicas que tiene como objetivo proteger la salud humana y ambiental
frente a diferentes riesgos producidos por agentes biolgicos, qumi-
cos, fsicos y/o factores humanos en el Laboratorio.
Debe entenderse como una doctrina de comportamiento encami-

nada a lograr actitudes y conductas que disminuyan el riesgo del
trabajador de la salud de adquirir infecciones en el medio laboral.
La seguridad es un proceso de esfuerzo colectivo que funciona en la

medida en que todo el personal cumpla con las normas de biosegu-
ridad establecidas.
3. LABORATORIO DE NIVEL I
a) Estructura del laboratorio
El diseo remodelaciones e instalaciones debe considerar las normas

66 de bioseguridad y ser analizados por el personal que cumple funcio-
nes en dichos establecimientos
Los pisos deben ser lisos e impermeables y con un declive suficiente

que permita asear desde sectores limpios hacia sectores sucios.
Las paredes deben ser lisas e impermeables con unin cncava en

pared-piso, pared-cielo y pared pared
Las instalaciones de agua, luz, aire y otras conexiones deben estar

diseadas de tal modo que impidan la acumulacin de suciedad y fa-
ciliten la limpieza de pisos, paredes y cielos, adems deben funcionar

satisfactoriamente
Contar con sistemas de proteccin que eviten la entrada y/o salida

de animales y/o artrpodos.
b) Normas de bioseguridad para el personal
El personal que trabaja con el bacilo de la Tuberculosis debe

recibir un adiestramiento tcnico previo que incluye una cuida-
dosa enseanza sobre las medidas que deben ser adoptadas para
proteger su seguridad personal y la del grupo, con el cual trabaja.
No permitir el ingreso a un laboratorio o puesto de diagnostico,
de personal que no corresponda a ste, incluso personal de la
misma institucin, prohibir el ingreso de familiares o nios.
No utilizar ventiladores ni acondicionadores que generen movi-
mientos de aire en el rea donde se manipula material potencial-
mente infeccioso, mientras se est trabajando.
El personal nuevo antes de incorporarse al Laboratorio o
puesto de diagnstico de tuberculosis tanto para manipular
muestras como las que comparten el rea fsica de trabajo
deben ser claramente instruido acerca de cmo se transmite la
tuberculosis. (personal administrativo de limpieza).
El personal de laboratorio debe haber sido vacunado con la
BCG.
Evitar el paso innecesario del personal de un ambiente a otro
durante el trabajo de laboratorio.
Utilizar una bandeja con papel empapado en antisptico 67
(Hipoclorito de sodio al 1 %) para el depsito de muestras.
Comprobar que no haya derrames en las muestras; desinfectar
el exterior del envase si los hubiera.
Asegurar que los envases con muestras estn siempre en
posicin vertical.

Sistematizar el procesamiento de las muestras.
Utilizar aplicadores para realizar los extendidos.
Realizar movimientos lentos y suaves cuando se realicen los
frotis.
Disponer siempre de un frasco con hipoclorito de sodio al 1%.
Trabajar con un mechero entre los envases con las muestras y el
operador al realizar los extendidos.
Conservar los bordes de las lminas limpios, sin muestra.
Colorear las lminas tan pronto estn secas y fijadas en la llama.
El personal debe someterse a un examen mdico y radiolgico
una vez al ao.
Prohibido comer, fumar, tomar guardar alimentos aplicarse cos-
mticos ni dejar prendas de vestir dentro del laboratorio.
Evitar hbitos como ser, llevarse las manos a la boca, nariz.
No tocar instalaciones, material de escritorio o equipamiento
del laboratorio sin antes lavarse las manos.
En cualquier interrupcin de trabajo el operador deber lavarse
las manos utilizando abundante agua y jabn germicida.
Trabajar con uas cortas y no usar anillos o pulseras durante el
procesamiento de muestras.
Limpiar los pisos diariamente y las paredes semanalmente con
una solucin de hipoclorito de sodio al 1%. No barrer ni limpiar
superficies en seco, utilizar siempre un pao hmedo. No ence-
rar. No levantar polvo al limpiar.
c) Normas para el uso de la vestimenta
El personal debe utilizar mandil durante todo el proceso del

trabajo dentro del Laboratorio, y dejar la ropa de trabajo en el
ambiente de proceso, una vez terminado ste.
Todo el vestuario debe ser utilizado nicamente dentro el labo-
ratorio, no se deber salir con dicha vestimenta fuera del Labo-
ratorio.
68 Las personas que usan pelo largo deben protegerse o mante-
nerlo recogido y utilizar gorro.
Antes de comenzar a trabajar se deber tener el cuidado de
quitarse: reloj, anillos, brazaletes, etc.
d) Recepcin, conservacin y transporte de las muestras
La manipulacin, el transporte y el envi de muestras a los

laboratorios de la red de tuberculosis indebidamente embala-
das entraan un riesgo de infeccin para todas las personas que
intervienen directamente o entran en contacto con cualquier
pasaje del proceso.

La manipulacin incorrecta dentro del laboratorio pone en
peligro no slo a los trabajadores inmediatamente afectados
sino tambin al personal administrativo o de secretara y a otros
auxiliares.
El transporte de muestras entre laboratorios e instituciones
extiende el riesgo al pblico y al personal de los servicios de
transporte y de correo.
e) Recepcin de los pacientes
La recepcin de los pacientes que entregan sus muestras debe ser

organizada en un lugar de la unidad de salud ventilado o donde el aire
sea renovado por algn sistema.
Debe ser gil de tal manera que el paciente no espere. Debe tenerse
en cuenta que la permanencia prolongada de pacientes que estn
expectorando bacilos en una sala de espera genera riesgo de trans-
misin de la tuberculosis en el centro de salud a otros pacientes y
al personal.
El laboratorio o centro de diagnostico debe recibir las muestras

durante toda la jornada de atencin a los pacientes, y procesarlas
inmediatamente.
En el momento de recibir la muestra se deben completar los siguien-

tes procedimientos:
Disponer de una bandeja exclusiva para la recepcin de muestra

que tenga papel peridico u otro papel embebido en solucin de
hipoclorito de sodio al 1 %. 69
Comprobar que los envases de las muestras estn claramente
identificados en la pared y no en la tapa y cerrados
hermticamente.
Verificar que estn acompaados por el formulario de solicitud
de baciloscopa.

Observar la calidad de la muestra a travs de las paredes de
envase, sin abrirlo. Si se trata de saliva o secrecin nasal es
conveniente recibirla porque, aun cuando no sea una muestra
de buena calidad, puede contener bacilos. Registrar que es saliva
en el formulario.
Insistir en las instrucciones indicando al paciente la forma
correcta para la recoleccin de muestras, hasta completar las
tres muestras.
En caso excepcional de no poder procesar la muestra el mismo
da de la recepcin se recomienda guardar la misma en el
refrigerador a 4 C hasta el da siguiente.
f) Transporte
Cuando el servicio de salud no cuenta con laboratorio, el personal

debe tener conocimiento a que laboratorio debe enviar las muestras.
Tanto para baciloscopa como para el envi de laminas fijadas y/o
teidas, se debe establecer los das de la semana en lo que se efec-
tuaran regularmente los envos, el medio de transporte y el horario
de salida y de llegada.
Para el envi debe considerarse dos condiciones importantes:
Proteccin del calor excesivo y de la luz solar.

Eliminacin del riesgo de derrame.
Traslado de muestras por los medios de transporte pblico.
El recipiente de la muestra se envolver en material absorbente
(por eje. Toallas de papel, o de tela) en cantidad suficiente para
absorber todo el liquido en caso de derrame.
El recipiente de la muestra, muy bien envuelto, se colocara en
otro recipiente resistente (receptculo secundario) pueden
ponerse en este varias muestras envueltas. Es necesario usar
material absorbente u otro material en cantidad suficiente
70 para rellenar los huecos que queden entre los recipientes de
muestras.
El receptculo secundario se embalar con material bastante s-
lido parea proteger el contenido de posibles daos durante el
traslado.
Antes de despachar las muestras, el remitente, el transportista y
el laboratorio o destinatario, habrn hecho los trmites necesa-
rios para el envo, la recepcin, etc.
Todos los formularios, con datos sobre las muestras, cartas y
otra informacin impresa que sirva para identificarlas o descri-
birlas irn pegados en la parte exterior del receptculo secun-
dario.
Por ltimo se pegar en la parte exterior del receptculo secun-
dario las etiquetas correspondientes de material infeccioso, las
flechas que indican la posicin del receptculo secundario, etc.
El transporte de la muestras dentro o entre laboratorios se realizar

de tal modo que, en caso de cada, no se produzcan salpicaduras.
Se aconseja llevarlo a cabo en cajas hermticas o neveras porttiles,

estas cajas o neveras debern ser rgidas y resistentes a los golpes,
contar con materiales absorbentes en su interior y de fcil desinfec-
cin.
Se etiquetarn o identificaran de forma oportuna y no podrn ser
utilizadas para otros fines.
Bajo ningn concepto se transportarn muestras en la mano, debe-

rn utilizarse gradillas o contenedores adecuados.
Todas las muestras deben ser tratadas como altamente infecciosas

para evitar el posible contagio.
Algunas de las fuentes de produccin de aerosoles en los labora-
torios son:
a) La apertura de los envases de expectoracin esto es esencial-

mente peligroso, si el esputo se ha secado entre la tapa y un lado
del envase o si el envase ha sido agitado inmediatamente antes
de su apertura.
b) Una vez llegue la muestra los bordes del envase debern limpiar- 71
se con algodn empapado en fenol.
El funcionario que procesa las muestras es el responsable de desin-

fectar el rea de trabajo antes y despus de cada sesin de trabajo,
con los antispticos comnmente utilizados para este propsito

dejando actuar durante 30 minutos.
Recepcin en el laboratorio que hace baciloscopa:
El personal del laboratorio que recibe las muestras debe:
Abrir la caja sobre la mesa dedicada exclusivamente para este

fin.
Inspeccionar las muestras controlando si se han producido
derrames.
Desinfectar el exterior de los envases con algodn con solucio-
nes de hipoclorito de sodio al 1%, si se han producido pequeos
derrames durante el transporte. Si el derrame ha sido masivo
incinerar.
Comprobar que las muestras estn bien identificadas.
Desinfectar la caja con hipoclorito de sodio al 1%.
Lavarse las manos.
Notificar al servicio que deriv las muestras si se han observa-
do inconvenientes especialmente en la calidad y cantidad de los
esputos y en la forma de envo.
4. CUIDADOS ESPECFICOS
Tuberculosis
Por la alta prevalencia de tuberculosis pulmonar en el pas, los traba-

jadores de salud con frecuencia se encuentran en contacto directo
con pacientes tuberculosos, por lo tanto en riesgo de infeccin.
Qu precauciones se deben tener con respecto a la

tuberculosis?
72 Es necesario que se tenga presente que:
El riesgo de infeccin est en relacin a la exposicin frente al bacilo

de la TBC.
La relacin entre exposicin e infeccin est afectada por las siguien-

tes variables:
Tiempo: a mayor tiempo de estar en contacto con el bacilo, mayor la

posibilidad de infeccin
Carga bacilar: a mayor cantidad de bacilos, mayor posibilidad de in-

feccin.
Ambiente: en ambientes pequeos y con poca ventilacin hay mayor

posibilidad de infeccin.
Eliminacin de envases de expectoracin y otros materiales
Desechar las muestras colocndolas dentro de una bolsa plstica im-

permeable ubicada dentro del recipiente de descarte. Al finalizar las
tareas, cerrar la bolsa anudndola, tapar el recipiente y transportar el
material dentro del recipiente hasta el lugar donde ser incinerado.
Puede ser un incinerador, una fosa al aire libre o un recipiente del
tipo de los de gasolina vaco. All se deposita la bolsa. El operador
debe alejarse cuando se encienda el fuego porque el humo producido
por los envases plsticos es txico y los aerosoles que se generan
peligrosos. Descontaminar el recipiente en el que se transport el
material con hipoclorito de sodio al 1% por fuera y por dentro.
Otra forma de eliminar los envases y las muestras de esputo es a

travs de la adicin de cal viva a las muestras en cantidad igual a la
muestra de esputo para que pueda inactivar la muestra y se pueda
desechar.
73

ANEXOS
ANEXO I
PREPARACIN DE PANELES DE FROTIS PARA

CONTROL DE CALIDAD EXTERNO DEL
LABORATORIO NACIONAL A LOS LABORATORIOS
DEPARTAMENTALES
Se realizara el envo de un juego de 10 lminas preparadas en el

laboratorio bajo parmetros establecidos en paneles conformados
de una de las siguientes formas:
1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado

3+ 3+ 2-3+ 2-3+ 77
1 frotis cuantificado 1 frotis cuantificado 2 frotis cuantificados 2 frotis cuantificados
2+ 2+ 1+ 1+
1 frotis cuantificado 2 frotis cuantificados 3 frotis cuantificados 4 frotis cuantificados
1+ 1+ 1-9 /100 campos 1-9 /100 campos
2 frotis cuantificados 3 frotis cuantificados 4 frotis negativos 3 frotis negativos
1-9 /100 campos 1-9 /100 campos
5 frotis negativos 3 frotis negativos

El control con paneles de frotis, es un mtodo del control de calidad
externo que puede ser usado para determinar si un funcionario
de laboratorio puede realizar adecuadamente la baciloscopa. Este
mtodo evala la capacitacin individual y no la del laboratorio en
general.
Esta prueba es considerada menos efectiva que la relectura porque

no evala la calidad de los resultados de rutina del laboratorio.
El control con paneles de frotis es til para:
Suplemento de los programas de relectura.

Proveer datos preliminares de las capacidades de los laboratorios
perifricos previamente al programa de relectura.
Evaluar la calidad existente de los resultados o para detectar
rpidamente los problemas asociados a la baja calidad de
resultados.
Evaluar la capacitacin de funcionarios de laboratorio luego de
una formacin.
Evaluar la calidad de los resultados cuando no hay recursos dis-
ponibles para implementar la relectura.
Este tipo de control consiste en un panel de frotis coloreados y/o no

coloreados que son enviados por el laboratorio de referencia a los
laboratorios perifricos para su procesamiento, lectura e informe de
los resultados. Existen un cierto nmero de problemas que deben
tenerse en cuenta para la implementacin del control con paneles
de frotis, a saber:
La correcta preparacin de los paneles de frotis.

El numero de frotis a incluir en el panel de frotis.
Los tipos de frotis a incluir (coloreados o no coloreados, positi-
78 vos dbiles, frotis espesos o muy finos, mal coloreados).
Las condiciones de transporte de los frotis a los laboratorios
(correo, servicio de transporte).
Los formularios para registrar los resultados de los laboratorios
examinados.
Tiempo acordado para la lectura e informe de los resultados.
El criterio de evaluacin para una calidad de resultados acepta-
ble.
Planificacin para entregar los informes de los resultados a los
laboratorios evaluados y la implementacin de las eventuales ac-
ciones correctivas.
Los mecanismos para resolver los resultados discrepantes.
Resultados del Resultados originales del controlador

funcionario del
laboratorio 1-9 BAAR/100
Negativo 1+ 2+ 3+
controlado campos
Negativo Correcto FNB FNE FNE FNE

1-9 BAAR /100
FPB Correcto Correcto EC EC
campos
1+ FPE Correcto Correcto Correcto EC
2+ FPE EC Correcto Correcto Correcto
3+ FPE EC EC Correcto Correcto
Valoracin:
Algunos sistemas de puntaje son propuestos aqu. Es importante

considerar el tipo de panel de frotis usado cuando se elige el sistema
de puntaje. Un programa que utiliza frotis bien confeccionados
puede tener un sistema de puntaje ms rgido. Los programas nuevos
pueden optar por un sistema de puntaje centrado en los Falsos
Positivos Elevados (FPE) y los Falsos Negativos Elevados (FNE). Los
programas con experiencia deberan evaluar con ms atencin los
errores menores. El puntaje de aprobacin ser de 80 %.
1. Serie de 10 frotis, cada frotis vale 10 puntos, puntaje total posible

= 100.
a. Cada frotis correcto vale 10 puntos
b. Cada frotis incorrecto (todo tipo de error) vale 0
c. Error de cuantificacin vale 5 puntos 79
d. Puntaje aprobacin = 80
Periodicidad.-
Se realizara en forma semestral, deben ser notificados todos los

laboratorios de nivel departamental, el tiempo de envo de resultados
ser establecido claramente a fin de que los laboratorios intermedios
puedan cumplir en forma optima lo establecido.
ANEXO 2
CONTROL DE CALIDAD DE LABORATORIOS

DEPARTAMENTALES A LABORATORIOS URBANOS Y
RURALES
Se trata de un tipo de control de calidad de relectura a ciegas,

es un procedimiento que consiste en la relectura de lminas de
baciloscopas del laboratorio a controlar para evaluar su nivel de
calidad. Los elementos esenciales de un sistema de relectura preciso
y prctico sealados en este manual son los siguientes:
80 Las lminas de baciloscopas a ser controladas, sern

seleccionadas de manera aleatoria, determinando el nmero en
funcin a la tabla convencional.
El laboratorio supervisor, llamado controlador, no dar a
conocer los resultados iniciales de la baciloscopa al tcnico
que realizara la lectura de los frotis para evitar un sesgo en los
resultados.
Los resultados divergentes son resueltos por un segundo
controlador.
Debe existir un sistema que proporcione una continua
retroinformacin y mejoramiento a los laboratorios
supervisados.
Un apoyo fuerte y contnuo de la parte del PNT es necesario para

implementar programas de relectura funcionales y regulares. Este
es el nico mtodo que proporciona un aseguramiento fiable de
la calidad de los laboratorios de la red de microscopa de un pas.
Todos los PNT deberan esforzarse para incluir un programa de
relectura a ciegas.
MTODO CONVENCIONAL.-
% de lminas
% de lminas
seleccionadas
N de lminas recibidas enviadas
para control
(+) (-) (+) (-)
Menor a 20 100 100 100 100
21 - 50 100 100 50 75
51 - 100 100 100 25 50
101 - 200 100 100 15 20
Mayor a 200 100 100 10 15
De la misma manera los Laboratorios Departamentales, efectuaran

el control anual a los Laboratorios locales, aplicando el mtodo
81
de paneles cumpliendo la metodologa aplicada de nivel nacional a
departamental.
Se utilizaran los formularios 11 y 12 debiendo quedarse en el

Laboratorio supervisor los originales, devolvindose la copia al
Laboratorio supervisado.

ANEXO 3
FORMULARIOS RED DE LABORATORIOS DE
BACILOSCOPIA Y CONTROL DE CALIDAD
82
83
84
FORMULARIO 11
FORMULARIO 12
85
Bueno (B)
Delgado (D)
Grueso (G)
Corto (C)
Extenso (E)
No Homogneo (NH)

Precipitado de Fucsina (PF)
Mala decoloracin (MD)
Exceso o falta de coloracin

de contraste (ECF o FCC)
86
87
88
89
90
91
92
93
ANEXO 4
MODELO DE NOTA DE INFORME DE RETROALIMEN-

TACIN DE CONTROL DE CALIDAD
Documento de envo de resultados discordantes de control de cali-

dad de baciloscopa
Laboratorio SupervisorResponsable
Funcionario Supervisado.Servicio
Lugar ..Fecha
94 De mi mayor consideracin:
A tiempo de agradecerle por la importante actividad que realiza

efectuando baciloscopas en el servicio en el que cumple funciones
, me permito comunicarle que despus de realizado el Control de
Calidad en las laminas de baciloscopas correspondientes al .tri-
mestre, se ha identificado discordancias mayores que disminuyen la
calidad del trabajo que Usted ha estado realizando con dedicacin
y atencin, por lo que solicito a Usted revisar las laminas que ad-
juntamos, a fin de corregir el factor de error que ha provocado el
presente reporte.
Agradeciendo su participacin en el Control de Calidad que efecta la

Red de Laboratorios de Tuberculosis del .
ANEXO 5
CRONOGRAMA DE REALIZACIN DE CONTROL DE

CALIDAD EXTERNO SEGN PRIORIZACIN DE
LABORATORIOS
Lab. RRHH Lab. con dis- Lab. con baja Otros labora-
Nuevos cordancias carga torios
Enero
Febrero
Marzo
Abril
Mayo
95
Junio
Julio
Agosto
Septiembre

Octubre
Noviembre
Diciembre
Debe colocar el Servicio al que corresponde el Laboratorio y anotar

el nmero de lminas y trimestre al que corresponde la lectura de
lminas.
ANEXO 6
TAMAO Y UNIFORMIDAD DEL REA DE TINCIN
POR OBSERVACIN MACRO Y MICROSCPICA
FROTIS REALIZADOS CORRECTAMENTE
Dimensiones adecuadas
consensuadas en la Red
de Laboratorios de
Tuberculosis del pas.
96
Lminas adecuadamente
realizadas, en cuanto a
dimensiones, coloracin e
identificacin.
FROTIS REALIZADOS DE FORMA NO ADECUADA
Frotis demasiado grande,

no recomendable,
incluso invade el rea de
identificacin.
Frotis demasiado grande,
no uniforme, existen
reas del frotis demasiado
gruesas y otras delgadas.
Frotis demasiado delgado

con poca o sin muestra,
donde no es posible
encontrar campos 97
microscpicos tiles.

Frotis demasiado pequeo,
no cumple con las
dimensiones acordadas y
recomendadas en la Red de
Laboratorios.
Frotis no uniforme y
delgado.
IDENTIFICACIN DE LAMINAS
FROTIS IDENTIFICADOS CORRECTAMENTE
98
FROTIS IDENTIFICADOS DE FORMA NO ADECUADA
99

OBSERVACIN MICROSCPICA.-
FROTIS REALIZADOS CORRECTAMENTE
Coloracin realizada
de forma correcta,
se observan campos
microscpicos tiles.
Lectura de lmina de
baciloscopa, se observan
los bacilos teidos de rojo
sobre un fondo azul.
FROTIS REALIZADOS DE FORMA NO ADECUADA
Coloracin deficiente,
100 existe precipitados
de fucsina, y falta de
decoloracin.
Coloracin deficiente,
existe exceso de colorante
de fondo, que no permite
efectuar un diagnstico
correcto.
Lamina mal realizada,

no existen campos
microscpicos tiles, para
efectuar el diagnstico con
certeza y seguridad.
ANEXO 7
PREPARACIN DE REACTIVOS PARA BACILOSCOPIA
Colorante primario
FUCSINA FENICADA
Fucsina bsica 3 gramos
Alcohol etlico 96 GL 100 ml
Disolver por agitacin, agregar 55 ml de fenol acuoso1 y dejar
reposar por 24 horas.
Posteriormente agitar y agregar agua destilada hasta completar a
un litro. 101
Decolorante
SOLUCIN DE ALCOHOL CIDO

cido Clorhdrico p.a. 37% 30 ml.

Alcohol etlico 96o GL 970 ml
Dejar escurrir el cido por las paredes lentamente hasta comple-
tar el volumen de un litro (No pipetear el cido).
Colorante de fondo
AZUL DE METILENO
Azul de metileno 1 gramo
Alcohol etlico 96 GL 100 ml
Disolver por agitacin y agregar agua destilada hasta completar
un litro.
Los reactivos deben trasvasarse en frascos de color mbar, debida-

mente rotulados con la fecha de preparacin y nmero de lote.
1
Fenol acuoso se prepara agregando 100 ml de agua destilada a 1000 gramos de fenol
cristalizado, previa fusin en Bao Mara.
ANEXO 8
PREPARACIN DE HIPOCLORITO DE SODIO
(LAVANDINA) AL 1%
Concentracin de Hipoclorito comercial
- 1 = Volumen agua
Concentracin deseada
Ejemplo
Lo que significa que se debe utili-

5
-1=4 zar una parte de hipoclorito para 4
1
partes de agua.
102
Ejemplo
Lo que significa que se debe utilizar

6,5
- 1 = 5,5 una parte de hipoclorito para 5,5
1
partes de agua.
Ejemplo
Lo que significa que se debe utili-

8
-1=7 zar una parte de hipoclorito para 7
1
partes de agua.
ANEXO 9
GUA DE SUPERVISIN DIRECTA A LABORATORIOS
QUE REALIZAN BACILOSCOPIAS
Red: ________________________ N de poblacin: ____________

Nombre del laboratorio: __________________________________
Nombre del responsable del laboratorio: _____________________
Nombre, nivel acadmico y tiempo de permanencia del personal: __
______________________________________________________
El personal del laboratorio est familiarizado con las normas del Pro-
grama Nacional de control de la tuberculosis
______________________________________________________
Nombre del supervisor: ___________________________________ 103
Fecha de la visita: _________________________________________
Telfono, Fax, Frecuencia: __________________________________
1. Ambientes:
Cuntas habitaciones tiene el laboratorio? 1 2 3 >3
Hay una habitacin para el diagnstico de la TB? si no

Agua potable?: si no
Lavaplatos?: si no
Muebles para el almacenamiento de material, reactivos y otros?
si no
La mesa de trabajo es de:
a) azulejo
b) madera
c) metal
d) formica
e) vidrio
f) otros: ____________________________
2. Material de trabajo
Envases para esputo: si no
Porta objetos: si no
Aplicadores de madera: si no
Soporte de lminas: si no
Varilla para tincin de las lminas: si no,
Mechero: si no Bunsen, Alcohol,
Embudo: si no
Papel filtro: si no
Reactivos:
fucsina bsica: si no
azul de metileno: si no
Hcl- alcohol: si no
Dnde almacenan sus reactivos? ___________________________
_______________________________________________________
En que tipo de recipientes? _______________________________
_______________________________________________________
Hay aceite de inmersin? si no
Microscopio: si no
Marca _________________________________________________
104 Aos de uso __________________
Estado en que se encuentra ___________________
Forro de microscopio?: si no
Pao suave para limpiar los oculares?: si no
Caja para guardar los porta objetos?: si no
Basurero? si no, tiene tapa si no, bolsa si no
Calcula la necesidad de material trimestralmente para baciloscopas
si no
3. Pasos de trabajo
Recoleccin del esputo.
Se indica al paciente como debe obtener el esputo? si no

Quin ensea el paciente? _________________________________
Entrega el paciente la muestra? si no
Se reciben muestras o extendidos del esputo de otros sectores?
si no
De qu sector? _________________________________________
Quin las trae? ______________________________
Tiempo de transporte? ___________________
Se rechaza pruebas de esputo? si no,
Si es as, porque? _______________________________________
Cuntas muestras se procesa para el diagnstico?
_____________________
Si son menos de 3, porque? ________________________________
Quin ordena las baciloscopas? ____________________________
Las muestras de control se solicitan de acuerdo al PNCT?
(2, 3, 5, 7, 8,meses) si no
En caso de ser no la respuesta porque? ______________________
Baciloscopa, extendido, tincin y microscopa.

Donde se sealiza el nombre del paciente en el envase de esputo:
a) en la pared si no b). en la tapa si no
Para la identificacin en la lmina utiliza lpiz corriente: si no
La preparacin del extendido la realiza con aplicador de madera
si no
Que parte del esputo se selecciona para el extendido?
________________________
El aplicador de madera, se cambia entre extendido y extendido?
si no
Se seca el extendido antes de la coloracin? 105
si no
Se fija el extendido al calor? si no, cuando ________
como______________ cuantas veces _________
Se filtran que reactivo? ______________________________
a) despus de la preparacin del reactivo? si no b) antes de cada

tincin? si no
Cunto tiempo se colorea? Fucsina:____ min.
Azul de metileno: ___ min.
Se tiene que calentar la fucsina durante la coloracin?
si no
como ___________________________________ cuantas veces
Se hace la decoloracin con HCL- alcohol? si no,
cunto tiempo: ___________ min.
El tiempo de decoloracin puede variar? si no,
Si es as, porque? ________________________
El extendido debe estar seco antes de la microscopa?
si no
Con cul de los objetivos se observa al baciloscopa?
_____________________
Se usa aceite de inmersin? si no
Cunto tiempo se examina el extendido? _________min.
Cuntos campos se observa? ___________
En caso de duda de la lectura de lminas, cuenta usted con alguien
que puede confirmar su resultado? si no
si es as, con quien? ______________________________________
Cundo se limpia el objetivo? ______________________________
4. Control de calidad
Se enva las lminas para el control de calidad indirecto? si no

Cules, que porcentaje y con qu frecuencia? _________________
Se limpia las lminas que se enva? si no,
con qu? ___________________________________
Se separa las lminas positivas de las negativas al guardar?
si no
Cmo se envuelve e identifica la envoltura? ___________________
Cmo se identifica la caja para el envi al control de calidad? _____
106 Calidad del extendido? ___________________________________
Calidad de la tincin? _____________________________________
El FORMULARIO DE ENVO DE LAMINAS PARA CONTROL DE

CALIDAD INDIRECTO esta correctamente llenado? si no
El informe del resultado de control de calidad se encuentra archiva-
do? si no
5. Registros
N de S.R.________________________Pacientes BK(+)_________
Total BK realizadas___________Cumplimiento de BK por

SR.____________BK (+)____________
Calidad de la muestra______________________________________
N de Poblacin:____________________
Se informa en el formulario INFORME TRIMESTRAL DE LABORA-
TORIO DE TUBERCULOSIS el trabajo realizado? si no
Se informa trimestralmente la conversin bacteriolgica? si no
Solicita trimestralmente los insumos con el formulario SOLICITUD
TRIMESTRAL DE INSUMOS DEL LABORATORIO DE TUBERCU-
LOSIS? si no
Sino es as, porque?: ______________________________________
Recibe trimestralmente el pedido completo de insumos? si no
Que falta y porque? ______________________________________
Se lleva el libro de registro de laboratorio segn las normas nacio-
nales? si no
Se califica el resultado segn la escala de las normas nacionales?
si no
Todas las columnas del registro del laboratorio estn llenadas?
si no
Sino, que columna y que informacin est faltando? _____________
Estn correctamente llenadas las secciones del libro de registro?
si no
Sino, que seccin est faltando? _____________________________
Quin registra los resultados? ________________
Quin informa los resultados? ________________
Cunto tiempo se necesita de la recepcin de la muestra hasta: ob-
tener el resultado ______________ entregar el resultado
Se usa el formulario de solicitud la BK para cada paciente? si no
Sino, por qu? __________________________________________ 107
El formulario de solicitud de baciloscopia contiene toda la informa-
cin? si no
Sino, que informacin falta? ________________________________
Quin llena el formulario? _________________________________
Quin entrega los resultados al mdico solicitante?

a. El personal del laboratorio
b. El personal de guardia
c. El paciente
Realiza cruce de informacin con el equipo de salud? si no
Frecuencia_________________
6. Medidas de bioseguridad y desinfeccin.
Se usa: Mandil? si no Barbijo? si no

Guantes? si no
Cundo se cambia los guantes? _____________________________
Se usa anillos, brazaletes etc.? si no.
Se come o bebe en el rea del laboratorio? si no
Hay un desinfectante de manos? si no
Si es as, cul y de que concentracin? ________________________
Cundo se usa? _________________________ Cundo se lava las
manos? ____________________
La mesa para hacer el extendido esta puesta,
a) junto a la ventana si no
b) junto a la puerta si no
Se trabaja con la puerta y/o ventana del laboratorio abierta?
si no
Se recolecta los envases de esputo en bandeja con papel impregnado
con lavandina? si no
Se usa un desinfectante para mesones y material de trabajo? si no
Si es as, cual desinfectante y en que concentracin? _____________
Que mtodo se usa para la eliminacin de los envases de esputo
usados:
ninguno, desinfeccin, quemar, pozo de deshecho,
otro_______________________________
Tienen incinerador si no
se lo utiliza si no por qu_____________________________
Que mtodo se usa para la decontaminacin de los mandiles?
108 a. ninguno .
b. autoclave ..
c. hervir
d. lavado con lavandina
Ingresan los pacientes al rea del laboratorio? si no
7. Calificacin del supervisor
1. Ambiente del laboratorio adecuado: si no

Si la respuesta es no especificar porque ____________________
__________________________________________________
2. Material del trabajo completo: si no

Que falta? __________________________________________
3. Pasos de trabajo sin observacin: si no
Especificar las observaciones? ___________________________
4. Control de calidad indirecto sin observacin: si no
Especificar las observaciones?
___________________________________________________
5. Registro sin observacin: si no
Cul la observacin? _________________________________
6. Se cumplen las medidas de bioseguridad y desinfeccin: si no
En caso negativo especificar porque _______________________
___________________________________________________
8. Evaluacin.
Hay logros con respecto a la anterior supervisin? si no

___________________________________________________
___________________________________________________
Hay la necesidad de hacer un curso de capacitacin? si no
9. Recomendaciones.
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________ 109
_______________________________________________________
_______________________________________________________
______________________ ______________________________
____________________ ____________________
Firma supervisor Firma supervisado
ANEXO 10
GUA DE SEGUIMIENTO DE SUPERVISIN DIRECTA A
LABORATORIOS QUE REALIZAN BACILOSCOPIAS
Nombre del supervisor: Fecha:

Red y nombre del laboratorio:
Nombre del responsable del laboratorio:
Fecha ltima Supervisin:
Recomendaciones de la ltima Observaciones actuales

supervisin
Ambiente:
110 Material de trabajo:
Pasos de trabajo:
Control de calidad:
Registro:
Medidas de bioseguridad y
desinfeccin:
Estadstica:
Observaciones detectadas en la Recomendaciones

supervisin actual:
____________________ ____________________
Firma supervisor Firma supervisado
COMPROMISO DE TRABAJO DURANTE
LA SUPERVISIN DIRECTA
Da Mes Ao
Yo................................................................................ con C.I..........................

del laboratorio de..................................................Red..................................
Realizo el siguiente compromiso de trabajo:
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________
_______________________________________________________ 111
_______________________________________________________
con la finalidad de trabajar con la mejor calidad, cumpliendo las

normas de laboratorio del Programa Nacional de Tuberculosis y
aplicando las recomendaciones e instrucciones recibidas durante
el curso de capacitacin, consiente que el presente ser objeto de

seguimiento por el Laboratorio Regional TBC.
_______________________
Firma
INFORME DE SUPERVISIN DIRECTA DE
LABORATORIO TBC
Nombre del supervisor: Fecha:

Red y nombre del laboratorio:
Nombre del responsable del laboratorio:
Observaciones Recomendaciones
Ambiente:
Material de trabajo:
112
Pasos de trabajo:
Control de calidad:
Registro:
Medidas de bioseguridad y
desinfeccin:
Estadstica:
_______________________
Firma
BIBLIOGRAFA.-
FUJIKY, A. Preparacin de muestras de calidad para Baciloscopa.

Instituto de Investigaciones de Tuberculosis, Japn.
Normas y Gua Tcnica: Manual para el Diagnostico Bacteriol-
gico de la Tuberculosis Baciloscopa. Organizacin Mundial de la
salud.
UICTER, OMS, DCD,KNCV,JATA,APHL, Control externo de la
calidad de la microscopa directa.
OPS/OMS, Manual de Baciloscopa parte I, Organizacin Pana-
mericana de la Salud.
113

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Ni el Ministerio de Salud y Deporte, ni ninguna persona que acte en su

nombre se responsabiliza del uso que pudiera darse a est informacin.

Depsito legal: 4- 2 - 209 - 11 P.O.

Manuel Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

Puede obtenerse informacin en la siguiente direccin de Internet

R. M: 580 del 30 de mayo de 2011

Depsito Legal: 4-2-209-11 P.O.

Elaboracin: Equipo Tcnico Red Nacional de laboratorios de Tuberculosis

La Paz, Programa Nacional de Control de Tuberculosis - Unidad de

Ministerio de Salud y Deportes, 2011

Esta publicacin es propiedad del Ministerio de Salud y Deportes de Bolivia,

MINISTRA DE SALUD Y DEPORTES

VICEMINISTRO DE SALUD Y PROMOCIN

DIRECTOR GENERAL DE SERVICIOS DE SALUD

JEFE UNIDAD DE EPIDEMIOLOGA

RESPONSABLE PROGRAMA NACIONAL DE

RESPONSABLE LABORATORIO NACIONAL

La Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis es el conjunto

a) Estructura Administrativa Gerencial

Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

1 Laboratorio de Referencia Nacional de control de la Tuber-

b) Estructura Tcnico Operativa

De acuerdo a la complejidad, equipamiento, material y disponibilidad

Laboratorio de Nivel III, Establecido en el Instituto Nacional de

c) Estructura Orgnica de la Red de Laboratorios de

Nivel Nacional Una Jefatura.

a) Funciones Tcnico - Gerenciales del Laboratorio de

Cumple las funciones de Direccin de la Red Nacional de Laborato-

Funciones Tcnico - Operativas

Estandarizacin y validacin de nuevas pruebas de diagnstico

Deber contar con:

Organizacin de la red y el servicio.

Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

Cumplimiento y aplicacin de disposiciones internas emanadas

Revisin de avances y actualizaciones.

Krdex de materiales y reactivos

Limpieza de los ambientes de laboratorio.

Envo y elaboracin de correspondencia.

Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

Envo de material de laboratorio.

Depende directamente del Instituto Nacional de Laboratorio de

Organizacin y Direccin de la Red Nacional

b) Funciones Tcnico - Gerenciales

Llevan adelante la conduccin, organizacin, implementacin, inclu-

Laboratorios de Tuberculosis de cada Departamento, cumpliendo,

Funciones Tcnico - Operativas

Gestin y gerencia de la Red de Laboratorios de Tuberculosis de

Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

Dependen tcnicamente del Laboratorio Nacional de Referencia y

c) Funciones Laboratorios de Nivel II

Son aquellos servicios que cuentan con capacidad instalada, ambien-

Recepcin, identificacin y registro de muestras.

Reporte y entrega de resultados.

El Laboratorio de Nivel II deber contar con el siguiente plantel pro-

Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

Equipos Materiales / Sistema de Reactivos

Manual Tcnico de la Red de Laboratorios de Tuberculosis

d) Funciones Laboratorios de Nivel I

Son aquellos servicios que realizan baciloscopa o examen microsc-