Adn Recombinante

Actualmente existen muchas tcnicas de produccin
de animales transgnicos: por ejemplo tenemos: la
inyeccin pronuclear, el uso de vectores retrovirales y la recombinacin homloga en clulas embrionarias

madres (clulas Eu).
Las protenas participan en todos los procesos de la vida, consecuentemente la industria vinculada a la
produccin de protenas ha ido tomando grandes dimensiones, en la investigacin y desarrollo en este campo
no solo se ha centrado en los mtodos que permiten la expresin de protenas en una forma biolgicamente
activa sino tambin en el diseo de metodologas que permitan incrementar su actividad biolgica, estabilidad,
afinidad, selectividad, etc.
Es un animal genticamente
modificado
al
que
le
transfieren un gen o grupo
de genes con el fin de
obtener un producto de
inters,
para cambiar alguna
caracterstica del animal, sea
para
aadirle
alguna
funcionalidad o para bloquear la
expresin de algn gen.
Existen diferentes mtodos para obtener animales transgnicos, introduciendo ADN extrao en
sus cadenas genticas:
Micro inyeccin pronuclear.

Transferencia del gen empleando retrovirus como vectores
(Vectores virales).
Transgnesis por manipulacin de clulas embrionarias.
Transferencia de ncleos transfectados (clonacin).
Es una tcnica donde el ADN desnudo se inyecta en el proncleo de un ovocito recientemente

fertilizado, posteriormente se transfieren a hembras receptoras sincronizadas (Gordon y col.,1981).
segun Gordon y colaboradores. Con este experimento demostraron que era posible usar un
plsmido recombinante como vector para transferir genes forneos directamente hacia el embrin.
El ADN inyectado de esta forma se integr en el genoma y pudo ser heredado por la descendencia
de los animales transgnicos fundadores.
Es el uso de virus recombinantes

para introducir genes en el
embrin. Los vectores retrovirales
han sido estudiados extensamente
para terapia gnica humana. Estos
vectores han demostrado transferir
eficientemente
genes
en
embriones murinos, bovinos y
porcinos. Sin embargo, los retrovirus
estn sometidos a modificacin
epigentica y la expresin retroviral
se corta durante la embriognesis
o es breve despus del nacimiento.
Es la introduccin de ADN extrao
en clulas embrionarias mediante

diversas tcnicas.
posteriormente
las
clulas
transfectadas son reintroducidas

en
una
blstula
sta
reimplantada en una hembra.
La clonacin tambin llamada transferencia

nuclear, es la tecnologa que permite la
produccin asexuada de un individuo.

Que
consiste
en
extraer
el
material
gentico de un ovocito para posteriormente

introducirle el material gentico de una
clula del animal a clonar.
Se designa as a la protena producida a

partir de ADN recombinante.
Es una forma manipulada de protena, que se
genera de varios modos para producir
grandes cantidades de protena, modificar
secuencias genticas y hacer productos
comerciales tiles.
Permite obtener protenas humanas, o de cualquier

origen, en organismos fcilmente cultivables.
Se obtienen grandes cantidades del producto, de
una forma ms fcil y sobre todo reproducible, en
comparacin con el obtenido por extraccin a partir
de su fuente natural (en el caso de la insulina, se
obtena a partir de pncreas de animales).
Se obtienen productos libres de patgenos y otros

riesgos potenciales.
Pueden producirse protenas que no existen en la
naturaleza, como los anticuerpos de cadena simple,
tiles en el diagnstico y tratamiento de algunas
enfermedades.
DISEO DEL VECTOR:
Numero de copias.
Promotor.
Presin de seleccin.
SELECCIN DE LA CEPA DE PRODUCCION:
Altos niveles de produccin.

Buen desempeo en el proceso.
Modificada para facilitar la purificacin.
PURIFICACION:
Ruptura celular.
Separacin de protenas
bacterianas.
Eliminacin de endotoxinas.
CULTIVO BACTERIANO:
Diseo optimo del medio.

Alta densidad celular.
Estrategias de operacin.
Baneyx, F. (1999). Recombinant protein expression in Escherichia coli. Current Opinion in

Biotechnology 10, 411421.
[ Links ]
Caspeta, L., Flores, N., Prez, N.O., Bolvar, F. y Ramrez, O.T. (2009). The effect of heating rate
on Escherichia coli metabolism, physiological stress, transcriptional response, and production of
temperatureinduced recombinant protein: A scaledown study. Biotechnology and Bioengineering
102, 468482.
[ Links ]
CisnerosRuiz, M. y RitoPalomares. M. (2005). Estrategias de bioingeniera para la recuperacin

primaria de productos biolgicos. Revista Mexicana de Ingeniera Qumica 4,131139.
M. DE LOS NGELES PEARANDA
Piedrahita1996
R. FELMER2004
G. Brem
http://www.ub.es/biocel/wbc/bca/pdf/tema4-bca0506.pdf

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Actualmente existen muchas tcnicas de produccin

de animales transgnicos: por ejemplo tenemos: la

inyeccin pronuclear, el uso de vectores retrovirales y la recombinacin homloga en clulas embrionarias

Micro inyeccin pronuclear.

Es una tcnica donde el ADN desnudo se inyecta en el proncleo de un ovocito recientemente

Es el uso de virus recombinantes

Es la introduccin de ADN extrao

en clulas embrionarias mediante

transfectadas son reintroducidas

reimplantada en una hembra.

La clonacin tambin llamada transferencia

produccin asexuada de un individuo.

gentico de un ovocito para posteriormente

Se designa as a la protena producida a

Permite obtener protenas humanas, o de cualquier

Se obtienen productos libres de patgenos y otros

DISEO DEL VECTOR:

SELECCIN DE LA CEPA DE PRODUCCION:

Altos niveles de produccin.

Diseo optimo del medio.

Baneyx, F. (1999). Recombinant protein expression in Escherichia coli. Current Opinion in

CisnerosRuiz, M. y RitoPalomares. M. (2005). Estrategias de bioingeniera para la recuperacin

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