Laboratorio 2. Manejo Del Microscopio - Diversidad Celular

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UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDESFACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, FSICAS Y NATURALES

BIOLOGA CELULAR -16142

Laboratorio 2: MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO

Objetivos

Identificar las partes y funcionamiento del microscopio ptico compuesto.


Identificar las diferencias estructurales en diversas formas eucariotas.

Materiales

Microscopio compuesto
Portaobjetos
Cubreobjetos
Elementos de bioseguridad
Cada estudiante debe traer:
o Agua estancada
o Fruta en descomposicin (guayabas, maracuy, limones, naranjas o mandarinas)

Introduccin
El estudio de la biologa celular es inseparable del desarrollo del microscopio. En la segunda mitad
del siglo XV, Da Vinci insisti en la importancia del empleo de las lentes para observar objetos
pequeos. Durante el siglo XVII, los progresos de la microscopa de luz permitieron adelantos
paralelos de la biologa celular. Estos nuevos descubrimientos fueron obra principalmente de Antoni
Van Leeuwenhoek, el cual construa sus propios microscopios y cortaba y pula sus lentes. En las
notas que public Van Leeuwenhoek se encuentran descripciones de protozoarios, bacterias y
espermatozoides. Tambin haba observaciones sobre clulas musculares, descripciones
histolgicas de msculo, nervio, piel y dientes. Robert Hooke utiliz un microscopio semejante al de
Van Leeuwenhoek para estudiar las clulas de la superficie de una hoja, y las paredes celulares de
las clulas del corcho. En el siglo XVIII hubo poco avance en el microscopio de luz. En el siglo XIX,
se emple el microscopio de luz intensamente, para el estudio de la estructura celular, tanto
animales como vegetales. Los detalles microscpicos de la clula se hicieron ms evidentes al
mejorar la construccin y el diseo del microscopio. Las lentes acromticas se remontan a 1830;
alrededor de 1870, existan lentes de inmersin para mayores aumentos. En 1878, Abb construa
el primer microscopio moderno, con la adicin ulterior de un condensador debajo de la platina,
como ltima mejora importante del microscopio ordinario de laboratorio.
Los microscopios son aparatos importantes para el estudio de las clulas, pues tienen las
caractersticas del aumento y del poder de resolucin. El microscopio permite resolver, o sea
distinguir, dos objetos muy vecinos uno de otro. Mientras menor sea la distancia que puede
reconocerse o medirse entre dos puntos en un campo microscpico, mayor es el poder de
resolucin. La capacidad del microscopio, de aumento y resolucin, depende del tipo de luz que se
emplea.
En la actualidad existen varios tipos de microscopios, el ms sencillo conocido como microscopio
simple, consta de una sola lente convergente tambin conocida como lupa de capacidad
amplificadora muy reducida.
El aparato ms utilizado es el microscopio compuesto u ptico, ste consta de dos sistemas de
lentes, uno de ellos ampla la imagen del objeto observado, que es captada y nuevamente ampliada
por el segundo sistema, consiguiendo con esto un mayor poder de resolucin. El poder de
resolucin es la capacidad para distinguir dos puntos muy prximos, de modo que puedan verse

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separados. El microscopio ptico consta de tres sistemas: el mecnico, el ptico y el de
iluminacin, cada uno de los cuales presentan una funcin y cuidados especficos. Al ser el
microscopio un aparato de precisin, requiere que se maneje y cuide de manera muy especial y
rigurosa.
PRESABERES: responda las siguientes preguntas.

Cules son los sistemas que conforman a un microscopio?


Explique la funcin de cada parte que conforma cada sistema.
A qu se llama poder de resolucin?
Cmo se determina el nmero de veces que se aumenta una imagen del objeto que
observamos?
Explique cmo se puede tener una buena iluminacin en una observacin.
Resuma los cuidados fundamentales que se deben tener al manejar un microscopio.
Qu funcin tiene el aceite de inmersin cuando se observa con el objetivo de l00x?
Explique cmo se debe enfocar una preparacin a menor y mayor aumento.
Cul es la importancia de la diferenciacin celular?
Cul es la importancia de los organismos estudiados desde el punto de vista de la
Bacteriologa y Laboratorio Clnico y la Microbiologa Industrial? Cite ejemplos (mnimo
dos de cada uno.

RECUERDE QUE EL PREINFORME ES UN MAPA MENTAL

Recomendaciones de trabajo
1. Lea cuidadosamente el texto de cada prctica antes de realizar el laboratorio
2. Debe revisar el microscopio antes de empezar la prctica. S detecta alguna anormalidad
avise inmediatamente al docente para registrar el desperfecto.
3. Cuide el microscopio, evite que los colorantes manchen los lentes de los objetivos, limpie
estos con papel especial antes y despus de cada prctica.
4. Racionalice el uso de los reactivos, debido a que ellos son costosos
5. Perctese de la limpieza del material que va a utilizar en la prctica. Vigile que est
limpio.
6. Atienda las normas de precaucin universal para reactivos custicos y/ o corrosivos.
Solicite ayuda al docente, s tiene dudas en la manipulacin de los mismos.

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Microscopio y sus partes


Para ampliar sus conocimientos sobre el microscopio y sus partes visite los siguientes link, estudie y
analice detenidamente:
http://recursos.cnice.mec.
es/biosfera/alumno/1ESO/
clasica/microsco.htm

a) Zona mecnica:
Revolver: contiene los
sistemas de lentes
Platina: lugar donde se
deposita la preparacin
Soporte: mantiene la parte
ptica. Tiene dos partes: el pie
o base y el brazo
Brazo: soporte vertical
mecnico
Base: base metlica del
microscopio
Tornillos: macromtrico y
micromtrico
Macromtrico: movimiento
rpido, mueve la platina hacia
arriba y abajo
Micromtrico: movimiento
lento, para un enfoque fino y
ntido

b) Zona ptica:
Ocular: situado cerca al ojo del observador y ampla la imagen del objetivo
Objetivo: situado cerca a la preparacin pueden estar atornillados o roscados al revolver (4x, 10x,
40x 100x) y se emplean de acuerdo a la preparacin observada
Condensador: su funcin es concentrar los rayos luminosos sobre la preparacin
Diafragma: regula la cantidad de luz que llega a la muestra
Fuente luminosa: dirige los rayos luminosos hacia el condensador

Manejo del microscopio ptico


a. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente.
b. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
c. Comenzar la observacin con el objetivo de menor aumento 4x (ya est en posicin) o colocar
el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias.

Para realizar el enfoque:


a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico.
Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, esto evita incrustar el objetivo en
la preparacin as como el riesgo de daar el montaje o las partes del microscopio.

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b. Observar a travs de los oculares, separando lentamente el objetivo de la preparacin con el
macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un
enfoque fino.

Pasar al siguiente objetivo de aumento.


La imagen debe estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico
para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es
preferible volver a enfocar con el objetivo anterior o de menor aumento y repetir la operacin
desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil
que se rompa la preparacin rayando la lente.

Desarrollo experimental
Para iniciar identifique en el microscopio compuesto, las partes que se mencionaron anteriormente
y revise las funciones de cada una de ellas y realice el montaje de cada una de las preparaciones.
1. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de agua estancada (para las preparaciones
secas ubicar agua NaCl 0,85% o azul de lactofenol), cubra con el cubreobjetos y observa al
microscopio, retira el exceso de agua con el papel filtro.
2. Observa primero con el objetivo de menor aumento (4X 10X) y por ltimo con el objetivo de
(40X).
3. Para observar correctamente, debes tener la muestra a una distancia de aproximadamente de
1 cm. o 1.5 cm. del objetivo, enciende la fuente de luz del microscopio procurando que la
muestra quede centrada en el rayo de luz que pasa por la platina. Posteriormente ve acercando
lentamente la platina hacia el objetivo con el tornillo macromtrico, siempre observando a
travs de los oculares hasta que la imagen sea clara, y finalmente con el tornillo micromtrico
se enfoca ms finamente y aclarando mejor la imagen de lo observado. En caso de no poder
enfocar pida ayuda de su profesor.
4. En los espacios de abajo, dibuja como se observa su preparacin en los diferentes objetivos.
4X, 10X , 40X
5. Repite las operaciones con las dems muestras, cuando realices el cambio de objetivo no
cambies la iluminacin en forma inmediata, hasta que primero observes con la iluminacin
inicial.
6. En esta prctica no vamos a emplear el objetivo 100 x.

Imgenes obtenidas en la prctica

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Muestra 1: 4X

Muestra 1: 10X

Muestra 1: 40X

Muestra 2: 4X

Muestra 2: 10X

Muestra 3: 4X

Muestra 3:40X

Muestra 2: 40X

Muestra 3: 10X

Realizar lo mismo para n muestras

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Resultados y conclusiones:

Presente en el informe las imgenes realizadas durante la prctica de laboratorio, Describa


lo que observo e investigue al respecto en textos de biologa Celular.
Es importante citar la fuente bibliogrfica de acuerdo a las normas Vancouver

Referencias Bibliogrficas

KARP, Gerald. Biologa celular y molecular: conceptos y experimentos. McGraw Hill


interamericana; 2014. ISBN 978-607-15-1137-9.

COOPER, G. M., HAUSMAN R. E,. La Clula. Captulo 1. Visin global de las clulas en
investigacin celular. Marbn. 6 Ed. Espaa. 2014. Pag. 3 13.

PANIAGUA GOMEZ-ALVAREZ, Ricardo. BIOLOGIA CELULAR (3 ED.) (EN PAPEL). S.A.


MCGRAW-HILL / INTERAMERICANA DE ESPAA, 1999. ISBN 9788448155926

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