Determinación de Carbohidratos, Lipidos y Proteinas

PRACTICA No.
4
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS , PROTENAS Y LIPIDOS POR
REACCIONES QUIMICAS, DE COLOR , Y MICROSCOPIA DE LUZ
I. INTRODUCCION.
Los compuestos qumicos del protoplasma se clasifican en dos grandes grupos:
substancias inorgnicas y substancias orgnicas, las primeras se caracterizan por la
ausencia de uniones carbono-carbono en su estructura qumica; pudindose mencionar
entre este grupo: agua, gases y sales disueltas, las segundas se caracterizan por
presentar uniones carbono-carbono y carbono-hidrgeno y tomos de oxgeno en su
estructura qumica, adems de estos elementos, pueden existir tomos de nitrgeno,
fsforo, azufre y algunos metales.
Las principales substancias orgnicas responsables de las caractersticas estructurales
y funcionales del protoplasma son: carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos,
dichas substancias pueden ser identificadas por una gran variedad de pruebas
qumicas y fsicas. En esta prctica se efectuarn algunas de estas pruebas qumicas
para identificar carbohidratos y lpidos, en forma cualitativa.
II. OBJETIVOS.
Al finalizar la prctica cada estudiante ser capaz de:
1. Identificar carbohidratos, protenas y lpidos a travs de reacciones qumicas y
microscopa de luz.
2. Utilizar correctamente el microscopio ptico compuesto.
III. EQUIPO Y MATERIALES NECESARIOS.
Microscopio compuesto
Porta y cubre-objetos
13 tubos de ensayo, resistentes al calor (pyrex o quimax)
2 pipetas
2 goteros
Gradilla para tubos de ensayo
Cuchilla de afeitar nueva*
Orina * 5 cm
Jugo* 5 cm
Leche* 5 cm
Solucin de lugol
20
Solucin de Sudn III IV

Solucin de Benedict
Solucin de Glucosa al 1%
Solucin de Sacarosa al 1 %
Solucin de Almidn al 1%
Una papa pequea*
1 Huevo* (Solucin de clara al 5% y solucin de yema al 5%)
Gelatina sin sabor* (Solucin de gelatina al 5%)
Solucin de CuSO4 al 1%
Solucin de NaOH concentrado
Un trozo pequeo de grasa animal (el gordo de la carne)*
Aceite de cocina*
Agua destilada
Pinza
Bao Mara
Cinta adhesiva*
El material marcado con asterisco (*) lo aportan los estudiantes por grupo.
IV.
PROCEDIMIENTO.
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS: El almidn se identifica con lugol (solucin

de I2/KI) dando un azul o morado intenso y los azcares reductores se identifican con la
solucin de Benedict, los cuales despus de calentarse en bao mara durante 3
minutos, dan un precipitado color rojo ladrillo.
OBSERVACION MACROSCOPICA.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Numere 10 tubos de ensayo de 1 al 10

A los tubos 1 y 2 agregue 1 ml de almidn.
A los tubos 3 y 4 agregue 1 ml de sacarosa
A los tubos 5 y 6 agregue 1 ml de jugo
A los tubos 7y 8 agregue 1 ml de leche
A los tubos 9 y10 agregue 1 ml de orina
A los tubos 1,3,5,7 y 9 agrgueles una gota de solucin de lugol, observe y anote
resultados en el cuadro
8. A los tubos 2,4,6,8 y 10 agregue aproximadamente 10 gotas de solucin de Benedict,
y colquelos en bao mara por 3 minutos ebullicin, observe y anote resultados en
la tabla correspondiente, en el cuadro que se adjunta.
21
TUBO
PRUEBA DE BENEDICT
Color Inicial
Color Final
PRUEBA DE LUGOL
Color Inicial
Color Final
1. Almidn
2. Almidn
3. Sacarosa
4. Sacarosa
5. Jugo
6. Jugo
7. Leche
8. Leche
9. Orina
10. Orina
Compare los resultados obtenidos en los tubos 2,4,6,8 y 10 con el siguiente cuadro y
explquelo
COLOR
Azul
Azul verdoso
Verde
Pardo verdoso
Amarillo
Rojo ladrillo
RESULTADO
Negativo
Ligeros vestigios de glucosa
Aproximadamente 0.5%
Mayor del 2.0%
DETERMINACIN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTENAS
PROCEDIMIENTO:
a. Enumere 3 tubos de ensayo. En el tubo No. 1 Coloque 3 ml de solucin de yema
de huevo. En el tubo No. 2 3 ml de solucin de clara de huevo y en el tubo No. 3, 3 ml
de solucin de gelatina. Agregue en cada tubo 1 ml de la solucin de sulfato de
cobre + 2 ml de Hidrxido de sodio concentrado (Reactivo de Biuret) Agite los tubos
hasta que se produzca una coloracin violeta o prpura, color que indica que la prueba
es positiva. Observe, anote y explique los resultados.
IDENTIFICACION DE LIPIDOS. Los lpidos son identificados usando el reactivo Sudn

III IV, los cuales al mezclarse dan un color rojo brillante.
22
Coloque en un tubo de ensayo 1 ml. de aceite de cocina y 1 ml. de agua destilada;

agrguele unas gotas de Sudn; agtelo, observe inmediatamente y anote los
resultados; deje reposar el tubo y al cabo de 5 minutos obsrvelo y anote los resultados
OBSERVACION MICROSCOPICA.
Grnulos de Almidn.
1. Por medio de la hoja de afeitar haga un corte muy fino del tubrculo de papa y
colquelo sobre un porta objetos, haga una preparacin utilizando lugol diluido como
medio de montaje y obsrvela al microscopio usando el objetivo 40X para hacer el
esquema de lo observado.
Utilice la hoja de reporte correspondiente y responda el cuestionario que se le
presenta.
2. Observacin de tejido adiposo.

Usando una hoja de afeitar haga un corte delgado de la grasa animal. Mntela en el
portaobjetos y agrguele una gota de Sudn IV cbrala con el cubreobjetos y presione
suavemente, coloque la preparacin sobre la platina del microscopio enfoque y observe
con el objetivo seco dbil (10X), y luego con el objetivo seco fuerte (40X); haga el
esquema de lo observado y descrbalo.
V. DISCUSIN DE RESULTADOS
1. Qu reactivos emple para identificar?
a) almidones
b) azucares reductores
c) Protenas
d) lpidos
2 Que macromolculas pudo identificar microscpicamente?
3. De acuerdo a la coloracin obtenida en la identificacin de protenas Cul de las

muestras estudiadas tiene mayor concentracin de protenas? Explique
4. Escriba la reaccin de: el lugol con los polisacridos, los monosacridos reductores
con Benedict y las protenas con Biuret.
5. Cuales son las caractersticas de los azucares no reductores.
23
VI. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Las plantas habitualmente almacenan reservas energticas en forma de
polisacridos, mientras que en la mayora de los animales los lpidos son la forma
principal de almacenamiento de energa. Por qu es ventajoso para los animales tener
su reserva de energa almacenada como lpidos y no como polisacridos?
2. Cul es la principal propiedad que distingue a los diferentes aminocidos entre s?
Qu papel desempean estas diferencias en la estructura y funcin de las protenas?
3. De qu manera las diferencias de estructuras de grasas neutras
determinan sus funciones en las clulas
y fosfolpidos
VI. BIBLIOGRAFIA.
Moreno A., Ricardo B., Schartzman. Principios de Biologa celular. Buenos
Aires, Edit. EL ATENEO. 1978.
Audesirk T. Audesirk T. Biologa. 4ta. Edic. Mxico, Prentice Hall. 1996.
Gerald Karp. Biologa Celular. 3era. . Edic., Mxico, MACGRAWHILL. 1998.
CURTIS, Helena. BARNES, N. Sur. Et. Al. Biologa. Mxico: 2000. 1490 p.
24
HOJA DE REPORTE
A) Preparacin__________________________________
____________________________________________
Aumento empleado______ X ________= ___________
(Ocular) (Objetivo)
TOTAL
Descripcin___________________________________
_____________________________________________
_____________________________________________
B) Preparacin___________________________________
____________________________________________
Aumento empleado______ X _________ = _______
(Ocular) (Objetivo)
TOTAL
Descripcin___________________________________
____________________________________________
____________________________________________
C) Preparacin__________________________________
____________________________________________
Aumento empleado______ X _________ = _______
(Ocular) (Objetivo)
TOTAL
Descripcin___________________________________
_____________________________________________
__________________________________________
25

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Solucin de Sudn III IV

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DETERMINACIN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTENAS

IDENTIFICACION DE LIPIDOS. Los lpidos son identificados usando el reactivo Sudn

Coloque en un tubo de ensayo 1 ml. de aceite de cocina y 1 ml. de agua destilada;

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3. De acuerdo a la coloracin obtenida en la identificacin de protenas Cul de las

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