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RIESGOS Y BENEFICIOS EN EL CONSUMO

DE PLANTAS MEDICINALES
MEDICINAL HERBS: RISKS AND BENEFITS IN THEIR USES
MARTA ANA CARBALLO, C.M. CORTADA, A.B. GADANO
CIGETOX - Citogentica Humana y Gentica Toxicolgica. Departamento de Bioqumica Clnica.
Facultad de Farmacia y Bioqumica (FFyB). Universidad de BuenosAires. Argentina.
Autor para correspondencia: Marta Ana Carballo, CIGETOX - Citogentica Humana y Gentica Toxicolgica.
Departamento de Bioqumica Clnica. Facultad de Farmacia y Bioqumica (FFyB). UBA.
Junn 956 (1113). BuenosAires. Argentina. Tel: (++5411) 5950-8707. Fax: (++5411) 5950-8694.
e-mail: [email protected]
RESUMEN
En los ltimos aos se ha vuelto a las plantas en busca de nuevos principios activos, ya que desde el comienzo
de la medicina fueron ellas las que proveyeron las estructuras bases para numerosos medicamentos. Entre los
principios activos de origen vegetal ms utilizados en teraputica se pueden citar ChenopodiummultifidumL.
(Chenopodiaceae).; Lithraea molleoidesVell. Engl. (Anacardiaceae); StyphnolobiumjaponicumL Schott.
(Fabaceae); Prosopisalba Gris (Mimosaceae); Schkuhria pinnata (Lam.) (Asteraceae); Solanumsysimbriifolium
Lam. (Solanaceae). En el presente trabajo se propone realizar un relevamiento de las hierbas medicinales, as
como un screening a nivel genotxico mediante el ensayo de Electroforesis de una sola Clula en las plantas
mencionadas. En el screeningrealizado en este grupo de plantas medicinales argentinas, se determin que
cuatro de ellas, Chenopodiummultifidum(paico); Schkuhria pinnata (canchalagua), Solanumsisymbriifolium
(espino colorado) y Lithraea molleoides(Molle de beber), indujeron dao al ADN, induciendo roturas de
cadena simple y doble. De esta forma se verifica la necesidad de regulacin en el consumo masivo e indiscri-
minado de las plantas medicinales.
PALABRAS CLAVES: Plantas medicinales, etnomedicina, genotoxicidad, ensayo del cometa.
ABSTRACT
Herbal medicines have become a popular form of therapy. Patients who self-medicate with herbs for preventive
and therapeutic purposes may assume that these products are safe because they are natural, but some of
their components can cause adverse effects or have the potential to interact with other drugs. Some common
herbs in traditional Argentine medicine are: ChenopodiummultifidumL.(Chenopodiaceae); Lithraea molleoides
Vell. Engl. (Anacardiaceae); StyphnolobiumjaponicumL Schott. (Fabaceae); Prosopisalba Gris (Mimosaceae);
Schkuhria pinnata (Lam.) (Asteraceae); SolanumsysimbriifoliumLam. (Solanaceae).
In this review, we present the data obtained in the evaluation of the potential genotoxic effects of aqueous
extracts by the Single Cell Gel Electrophoresis as a screening test. Our results show that four of the six plants
evaluated induced double and single strand breaks in DNA. The ones that interact with the genetic material
were: Chenopodiummultifidum(paico); Schkuhria pinnata (canchalagua), Solanumsisymbriifolium(es-
pino colorado) and Lithraea molleoides(Molle de beber). Indiscriminate consumption of medicinal plants
is not innocuous and their regulation is necessary.
KEYWORDS: Medicinal Herbs; Ethno-medicine: Geno-toxicity; Comet Assay.
Recepcin: 06/05/05. Revisin: 25/08/05. Aprobacin: 20/10/05.
Theoria, Vol. 14 (2): 95-108, 2005 ISSN 0717-196X
Revisin
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1. RESEA HISTRICA
El uso de las plantas en medicina tiene una
historia honorable, ya que en determinados
momentos todos los medicamentos se obte-
nan de fuentes naturales. Este evento dio
lugar al establecimiento de una relacin muy
cercana y productiva entre el hombre y su
medio vegetal.
Los primeros herbolarios datan de la po-
ca de los asirios, los babilonios y los fenicios
y constituyen una recopilacin de los cono-
cimientos de la poca sobre las propiedades
curativas de las plantas, comenzando la his-
toria de la fitoterapia. Desde el ao 3.000
a.C. hasta nuestros das, hay numerosas re-
ferencias y escritos como el famoso papiro
egipcio de Ebers (cerca de 1.500 a.C.) que
contiene muchas preparaciones medicamen-
tosas a base de vegetales (Pahlov, 1979).
Homero, en una de sus obras, alaba la
inmensa riqueza de las plantas de Egipto.
En uno de sus relatos cuenta cmo Helena
vierte en un tazn un jugo estimulante que
da de beber a Telmaco, entristecido por los
recuerdos de su padre. Describe la droga de
forma tal que la podemos identificar con el
jugo de la adormidera, planta de la que se
obtiene el opio. En otros datos curiosos se
sabe que Cleopatra utilizaba aloe barbado para
potenciar su belleza, y hoy esta planta se ha
revelado como el tratamiento adecuado para
las quemaduras por radiacin (Poletti, 1979).
La mayora de las medicinas del reino ve-
getal que ahora usamos no fueron descubier-
tas por las ciencias de las sociedades moder-
nas, sino por pruebas de ensayo y error prac-
ticadas durante milenios, por diferentes cul-
turas. La arqueologa nos informa que algunas
de las drogas actuales ms preciadas son he-
rencia del pasado oscuro de la prehistoria.
Muchas de las plantas alimenticias eran
conocidas tambin por sus propiedades me-
dicinales y, al mismo tiempo, existan otras
cuyos atributos teraputicos las colocaban en
gran estima. Los chamanes (profesionales
ms antiguos de la evolucin social) posean
el conocimiento milenario de diversas plan-
tas psicotrpicas, algunas estimulantes como
la coca o el tabaco; otras alucingenas como
el yag o el yopo. Estas plantas se utilizaban
para producir o acelerar los estados alternos
de conciencia, por los cuales se puede curar
y establecer contacto con el mundo sobre-
natural (Font y Quer, 1983).
La medicina tradicional incluye tres ti-
pos de personal (Gadano et al., 2004):
Curanderos: Estos individuos tienden a es-
pecializarse en el cuidado de un grupo de
enfermedades, tales como el empacho
(considerado como el agente causal de tras-
tornos en el tracto digestivo), el mal aire
(considerado como agente causal de mu-
chos trastornos respiratorios) y el mal de
ojo (considerado como la fuente de los tras-
tornos que afectan a los nios). Entre s-
tos, se incluye tambin a los individuos que
manejan informacin sobre laxantes y
plantas abortivas.
Herboristas: Proveen muchos de los mate-
riales usados en la medicina tradicional. Se
puede aclarar que ciertos curanderos ac-
tan tambin como herboristas. En estos
individuos se concentra el conocimiento
sobre los posibles usos de las hierbas, as
como sus efectos nocivos, siendo los en-
cargados de proveerlas a la poblacin.
Brujos: Su relacin con la salud en la co-
munidad es algunas veces tangencial, y en
muchas comunidades son vistos como cau-
santes de enfermedades y no como bene-
factores. No obstante, en algunos casos son
consultados con la finalidad de desterrar
hechizos que habran sido llevados a cabo
por colegas malignos.
Teniendo en cuenta el uso de las plantas
medicinales, podemos decir que existen cua-
tro tipos generales de medicina. Ellas son:
asitica, europea, indgena y neo-occiden-
tal. Tanto la asitica como la europea datan
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de miles de aos, se encuentran en la farma-
copea y son por lo tanto ms conocidas; en
el caso de la indgena es distinto, ya que es
trasmitida oralmente (DeSmet, 1992).
En Asia las herboristeras ms sistemati-
zadas son las de India, China y Japn. stas
siguen an las ideas de diagnstico y trata-
miento utilizadas por milenios (Kanba et al.,
1998; Wong et al., 1998). La mayora de los
remedios que se preparan son mezclas de
plantas que contienen en algunos casos tam-
bin partes de animales y minerales. Ha sido
descripto que las formulaciones existentes
contienen sustituyentes de los productos
naturales, como ser sustancias txicas de ori-
gen vegetal, frmacos y metales pesados (Ko,
1998; Drew y Myers, 1997).
El desarrollo histrico de la herboristera
europea llev, a partir del siglo XIX, a la in-
corporacin de las plantas a las farmacopeas
de alopata, naturopata u homeopata, y las
bases de su accin teraputica fueron estu-
diadas por qumicos medicinales y farma-
cuticos (De Smet, 1993 y 1997).
La herboristera indgena es muy diversa
y se practica an en sitios donde dichas cul-
turas se encuentran intactas, sin embargo se
halla en continua evolucin debido al con-
tacto con otras culturas aledaas. El conoci-
miento se puede encontrar en este caso aco-
tado a los sanadores tradicionales o puede
ser generalizado y con respecto a la formu-
lacin, existen variaciones regionales, las
plantas seleccionadas pueden ser especficas,
genricas o inadvertidamente adulteradas.
Usualmente, cuando una medicina es difun-
dida como eficiente y segura, suele existir
una base teraputica an no conocida de-
trs (Elvin-Lewis, 2001).
En cuanto a la herboristera neo-occiden-
tal, utiliza preparaciones de plantas nicas o
mezclas, en variadas combinaciones, que han
sido seleccionadas de formulaciones que se
encuentran en antiguas farmacopeas o plan-
tas medicinales de otras culturas, como por
ejemplo la indgena. Pueden obtenerse tam-
bin formulaciones novedosas que no pre-
sentan fundamento en datos provenientes de
herboristeras tradicionales, o representan
una mezcla de plantas utilizadas en distintas
medicinas alternativas (DeSmet, 1995).
El incremento en el uso de productos far-
macuticos ha dado por resultado la dismi-
nucin del consumo de preparados tradicio-
nales de la medicina popular. Sin embargo,
en algunas reas rurales, la medicina tradi-
cional es an utilizada en igual o mayor me-
dida que las formulaciones farmacuticas, y
en algunos casos, como en las enfermedades
menores, los tratamientos tradicionales sus-
tituyen a la medicina acadmica.
En la actualidad hay individuos que pre-
fieren llevar personalmente el control de su
salud, no slo en la prevencin de enferme-
dades, sino tambin en el tratamiento de las
mismas (fallas en los tratamientos alopticos
y efectos colaterales severos provocados por
los mismos). Este comportamiento se presenta
fundamentalmente en gran variedad de en-
fermedades crnicas, sin cura (cncer, diabe-
tes, artritis, entre otras) o enfermedades agu-
das que se tratan fcilmente en forma hoga-
rea (resfro, gripe) (Kincheloe, 1997). Se
hace evidente que no han sido advertidos
de los potenciales riesgos asociados al uso
de hierbas o de las limitaciones en el diag-
nstico (Shaw et al., 1999; Stewart et al.,
1999).
2. ETNOMEDICINA
A pesar de los siglos de tradicin, la fitotera-
pia del griego phyton (planta), tratamiento
de las enfermedades por plantas frescas, se-
cas o sus extractos ha evolucionado y ha
ganado prestigio y eficacia, sobre todo en
los ltimos tiempos, acercndose cada vez
ms a las normas y usos que exige la medici-
na moderna (Poletti, 1979).
Como resultado de ello, actualmente se
posee un mejor conocimiento de las propie-
Riesgosy beneficiosen el consumo de plantasmedicinales/ M.A. CARBALLO ET AL.
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dades medicinales, se ha incrementado su
nmero, se han desentraado cientficamen-
te secretos de sus principios activos y se han
descrito con ms precisin sus propiedades,
contraindicaciones y efectos secundarios, lo
que ha redundado en una ms correcta sis-
tematizacin de su uso y posologa (Pahlov,
1979).
Debido a la mayor informacin sobre el
potencial teraputico del reino vegetal, se ha
desarrollado la investigacin de nuevos pre-
parados obtenidos a partir de plantas en los
que la seleccin de sus ingredientes se reali-
za en laboratorios. Esto ha significado el
nacimiento de la nueva fitoterapia, en que
la preparacin y validacin de las formula-
ciones a base de diversas especies vegetales
las realizan profesionales especializados, ca-
paces de satisfacer las necesidades que el
usuario de la fitoterapia reclama en aspectos
importantes como la prevencin y la salud
(Font y Quer, 1983).
Un relevamiento de datos sobre el uso de
medicinas alternativas realizado en los Esta-
dos Unidos entre 1990 y 1997 mostr que
al menos un tercio de los pacientes usaba
terapias no convencionales, y la mayora las
utilizaba en el tratamiento de patologas cr-
nicas (Eisenberg et al., 1997). A su vez,
muchas hierbas medicinales son utilizadas
con fines profilcticos para mantener o fa-
vorecer un estado de buena salud, o preve-
nir la ocurrencia de ciertas patologas. Mu-
chas de estas hierbas son conocidas popu-
larmente y promocionadas como seguras y
eficaces. Debido a ello, no siempre es fcil
entender, para los consumidores crnicos,
el porqu estas prcticas pueden ser riesgosas.
La creencia del beneficio del uso de la
herboristera por sobre las drogas que con-
tienen un nico ingrediente activo se sus-
cribe a la nocin que los compuestos activos
primarios de las hierbas son sinergizados por
compuestos secundarios, mientras que stos
mitigan simultneamente los efectos colate-
rales producidos por los compuestos prima-
rios (McPartland y Pruitt, 1999). Se presu-
me tambin que la combinacin de extractos
de diferentes plantas podra prevenir el de-
caimiento gradual de la eficiencia que se ob-
serva en el uso de drogas nicas dadas duran-
te largos perodos (Borchers et al., 1997).
Los eventos dainos farmacolgicamente
predecibles son, generalmente, dosis depen-
dientes, y por tanto previsibles disminuyen-
do la dosis, o suspendindose el consumo
en caso de presentar alergia. A su vez, el con-
sumo crnico puede traer efectos retarda-
dos como carcinognesis o teratognesis. Los
usuarios de preparados realizados con plan-
tas medicinales deben considerar que estas
medicinas son usualmente formuladas con
materiales sin tratamiento (crudos), los cua-
les pueden contener un amplio rango de
sustancias que pueden modificar sus carac-
tersticas farmacocinticas y farmacognsicas
(Elvin-Lewis, 2001).
En las distintas regiones donde se utili-
zan estas preparaciones se busca establecer
modos de control para disminuir los riesgos
del consumo, al mismo tiempo que explicitar
cientficamente sus acciones teraputicas. En
algunas regiones (Asia) existe una gran difi-
cultad para evitar la incorporacin de hier-
bas potencialmente txicas o metales pesa-
dos, ya que no son considerados dainas en
el sitio de origen (Shaw et al., 1997). En
Europa, Alemania es lder en el proceso de
regulacin racional de las plantas medicina-
les (Benzi y Ceci, 1997) y Estados Unidos
clasific a varias plantas medicinales bajo el
rtulo de suplementos dietarios (Murphy,
1999), quedando de este modo fuera de la
evaluacin de la FDA (Food and Drug
Administration).
Las plantas contienen elementos activos
que las protegen de los insectos, mohos y
otros parsitos, as como de los rayos ultra-
violeta del sol. Muchos de estos componen-
tes ya sea de forma individual o en diferen-
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tes combinaciones poseen efectos estimu-
lantes, calmantes o teraputicos en el hom-
bre (Wills et al., 2000).
Estos principios son vitaminas, minera-
les, carbohidratos, microelementos y agen-
tes curativos especficos, que ayudan al cuer-
po en su lucha contra la infeccin. Las hier-
bas se usan mucho para aliviar la enferme-
dad e impedir que sta vuelva. Desintoxican
el organismo y apoyan al sistema inmuno-
lgico, ayudndole a mantener el equilibrio
(Font y Quer, 1983).
Entre los principios vegetales ms usados
en teraputica podemos citar: Las hormo-
nas esteroides (progestgenos, corticosteroi-
des, estrgenos y agentes anablicos); atro-
pina y efedrina y sus derivados semisintti-
cos; morfina y derivados hipnoanalgsicos;
podofilotoxina y su derivado etopxido;
vincristina, vinblastina y taxol (anticancer-
genos); derivados flavonoides del Ginkgo
biloba (activador cerebral); Ginseng.
3. GENTICA TOXICOLGICA
Generalmente, la actividad farmacolgica de
las hierbas medicinales se asocia a la toxici-
dad de las mismas y el efecto txico induci-
do depende de la dosis consumida. Por esto
resulta importante estudiar las plantas txi-
cas como fuente de productos activos.
Una de las formas de evaluacin de toxi-
cidad est dada por su efecto sobre el patri-
monio gentico, nivel de anlisis propio de
la gentica toxicolgica, disciplina cuyos
objetivos principales son, entre otros:
Implementar ensayos y mtodos para la
evaluacin del riesgo producido por agen-
tes que se encuentran en el medio ambiente
y cuya presencia puede alterar la integri-
dad del patrimonio gentico.
Elucidar la relacin entre genotoxicidad e
iniciacin de un proceso neoplsico.
Para ello debe valerse de los denomina-
dos marcadores biolgicos o biomarcadores
que indican: exposicin a sustancias txicas
(en los planos molecular o celular), efectos
adversos en la salud o susceptibilidad a dis-
tintos agentes. Estos biomarcadores repre-
sentan cambios en el organismo, o en la c-
lula, que pueden ser cuantificados en dife-
rentes sistemas biolgicos (NRC, 1987;
NCR, 1991; Wogan, 1992). Se considera
que un marcador de efecto biolgico repre-
senta un evento que puede correlacionarse
con el dao a la salud y tiene posibilidad
predictiva (NCR, 1991).
Los compuestos qumicos pueden interac-
tuar directa o indirectamente con el ADN,
produciendo cambios que afectan el funcio-
namiento celular y que a largo plazo causan
trastornos en la salud, particularmente trans-
formaciones malignas. De ah la importan-
cia de detectar en sus etapas iniciales la ac-
cin sobre el material gentico mediante
biomarcadores de efecto. Con este fin se uti-
lizan determinaciones tales como las Abe-
rraciones Cromosmicas (AC) (Preston et
al., 1981; Au et al., 1998), el Intercambio
de Cromtides Hermanas (ICH) (Taylor,
1958; Wolf et al., 1974; Bender et al., 1974;
Painter, 1980; Shafer, 1982), Microncleos
(Au et al, 1998), Mutaciones Gnicas a nivel
del locus HPRT (Au et al., 1998; Albertini et
al., 1998), sntesis de ADN no programada y
electroforesis de una sola clula (ensayo del
cometa) (Ashby, 1988; Carrano y Natarajan,
1988; Wogan, 1992), entre otros.
En estudios de genotoxicidad las tcni-
cas de eleccin deben ser capaces de detec-
tar tanto el dao como la reparacin conse-
cuente al material gentico en clulas indi-
viduales. Uno de los ensayos que cumple con
esta premisa es la electroforesis de una sola
clula o ensayo del cometa.
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3.1. Electroforesis de clulas individuales
Uno de los ensayos tiles para la deteccin
de dao de simple y de doble cadena al ADN
es la electroforesis de una sola clula (ensayo
del cometa), que evala los niveles de dao
y reparacin al ADN en poblaciones celula-
res, sin la necesidad de trabajar con clulas
en proliferacin. Es un sistema potencial-
mente sensible para evidenciar la induccin
de dao gentico. Una gran ventaja de este
mtodo es la posibilidad de obtener infor-
macin del dao inducido a clulas indivi-
duales. La mayora de los mtodos usados
comnmente para detectar el dao al mate-
rial gentico son capaces de dar una respuesta
promedio. Mientras que, en poblaciones
celulares heterogneas, los valores promedios
no son de utilidad para describir el efecto de
una substancia determinada. Esto es espe-
cialmente cierto en casos donde se encuen-
tra diferente susceptibilidad en la respuesta
a una droga (Angelis et al., 1999).
El fundamento de la tcnica consiste en
lisar las clulas de inters, embebidas en un
gel de agarosa sobre un portaobjetos, por
medio de detergentes y altas concentracio-
nes de sal. Posteriormente, el ADN liberado
ser sometido a la accin de un campo elc-
trico a pH neutro (stling y Johanson, 1984).
En las clulas en las que exista incremento
del dao al ADN se formarn pequeos frag-
mentos, los que, al someterse a una corrien-
te elctrica, tendrn la propiedad de pene-
trar en la malla de agarosa migrando, de esta
manera, hacia el nodo.
La capacidad del ADN de migrar hacia
el nodo depender del tamao de los frag-
mentos generados por la lesin. Por medio
de la coloracin con bromuro de etidio (co-
lorante con afinidad por el ADN), darn la
imagen de pequeos cometas. El largo del
cometa se incrementa con el dao inducido
a la doble hlice del ADN.
El ensayo de electroforesis de una sola
clula en condiciones alcalinas es una herra-
mienta muy promisoria en el estudio de dao
inducido al ADN por agentes qumicos en
clulas de mamferos (Singh et al., 1988;
Singh et al., 1989; Tice et al., 2000; Fairbairn
et al., 1993). Se asume que la electroforesis
en condiciones alcalinas detecta tanto rotu-
ras de cadena doble y simple, aunque la na-
turaleza y el mecanismo del ensayo no se
encuentra totalmente clarificado (Collins,
1992). Diversos grupos de investigacin han
evaluado el ensayo de electroforesis de una
sola clula, en muestras de linfocitos de po-
blaciones expuestas, utilizndolo como m-
todo de screening. Los estudios revelaron
una considerable variacin intra-individual.
Esto se debe a la extremada sensibilidad de
los linfocitos y sugiere una dificultad en la
utilizacin de ADN proveniente de los mis-
mos para la realizacin de biomonitoreos de
poblaciones expuestas (Ross et al., 1995).
El inters en el ensayo del cometa se ha
incrementado notablemente en los ltimos
aos, debido a que ha demostrado ser un
mtodo extremadamente sensible en la de-
teccin del dao al ADN a nivel celular. Este
ensayo est siendo considerado por la litera-
tura como un mtodo rpido, para predecir
el dao genotxico de un agente en diseos
experimentales, tanto in vivo como in vitro
(Fairbairn, 1995; Monteith y Vanstone, 1995).
4. ETNOMEDICINA EN LA
REPBLICA ARGENTINA
En la Repblica Argentina existen ms de
2.000 especies vegetales autctonas que son
utilizadas regionalmente como medicinales
y que an no han sido estudiadas cientfica-
mente. Las dos formas principales de con-
sumo por la poblacin de las plantas medi-
cinales son: cocimiento e infusin. Ambas
consisten en extracciones acuosas de los prin-
cipios activos presentes en las plantas, radi-
cando la diferencia entre ambos que en el
caso del cocimiento se realiza una coccin,
101
mientras que en la infusin se adiciona agua
en ebullicin.
Entre las plantas medicinales argentinas
de reconocida actividad farmacolgica, po-
demos citar a las siguientes: Chenopodium
multifidumL.; ChenopodiumambrosioidesL.;
Lithraea molleoides; Stybnolobiumjaponicum;
Schkhuria pinnata; Prosopisalba; Solanum
sysimbriifolium.
Chenopodium ambrosioides L. var.
anthelminticumy el Chenopodiummultifidum
L. (Chenopodiaceae) son un claro ejemplo
de plantas medicinales utilizadas en la me-
dicina tradicional, no slo en nuestro pas
sino tambin en el resto de Latinoamrica.
El nombre vulgar de estas hierbas es Paico
(Argentina), Pazote, Apazote o Epazote
(Mxico) y Santa Mara (Brasil). Crecen en
forma salvaje desde Mxico, extendindose
por toda Amrica del Sur, hasta el sur de
nuestro pas.
En la literatura se encuentran referencias
a los usos farmacolgicos del Paico desde
1571, cuando Francisco Hernndez refiere
que el cocimiento de las races contienelas
disenteras, quita lasinflamacionesy arroja del
vientrelos animales nocivos (Hernndez,
1571). Recin en 1712 Esteyneffer seal la
utilidad del Apazote o Epazote (Paico)
en el tratamiento del resfro, dolor de cabe-
za y reumatismo. Cabe aclarar que en la ac-
tualidad se siguen fabricando supositorios
caseros, elaborados con jabn y hojas de
Paico, con la finalidad de favorecer la eva-
cuacin intestinal (Ysunza, 1976).
Los principales usos folclricos del Paico
son como nervativo, antirreumtico, anti-
helmntico, sedante y agente analgsico
(Okuyama et al., 1993). Tambin se han
descripto sus propiedades como agente fun-
gicida (Kishore et al., 1993), laxante, abor-
tivo y fundamentalmente como antihelmn-
tico (Auro de Ocampo y Jimnez, 1993;
Riley, 1993). Entre las propiedades farma-
colgicas de la planta entera se ha descripto
su utilidad para el tratamiento de parasitosis
en peces (Auro de Ocampo y Jimnez,
1993), as como el uso en el tratamiento de
leishmaniasis cutneas en la poblacin rural
de Brasil (Franca et al., 1996).
El Ch. ambrosioideses una hierba arom-
tica, anual o perenne, erguida o ascendente,
fuertemente olorosa, de 40 cm a 1 mt de
alto. El tallo puede ser simple o ramificado
con hojas pecioladas, oblongas y lanceoladas
de 3 a 10 cm. de largo por 1 a 5 cm de an-
cho. La inflorescencia es en forma de espi-
gas con numerosas flores, dispuestas en pa-
ncula piramidal, con o sin hojas interpues-
tas. Es oriunda de Amrica y ha sido utiliza-
da con fines mdicos y alimenticios por siglos
por las diferentes culturas precolombinas
(Viesca, 1984; Estrella, 1988; Girault, 1987).
Ya en 1654 Cobo describi su aplicacin en
el tratamiento de cualquier tipo de tumor,
aplicando las hojas en forma de emplasto.
Por otro lado, se ha descripto que el coci-
miento de Paico con mucha sal provocara
la desinflamacin de las piernas en procesos
gotosos (Girault, 1987).
El uso de Ch. ambrosioidesvar. anthel-
minticumes oficial en varios pases del mun-
do. En los Estados Unidos estuvo incluido
en la farmacopea hasta 1947 y en Francia
fue introducido en el Codex Medicamento-
rio en 1949 (Pousset, 1989). En la actuali-
dad se encuentra en las farmacopeas de nu-
merosos pases, verbigratia: Espaa, Mxico,
Portugal, Argentina, India, Italia y Turqua
(Martindale, 1982).
Ch. multifidumes una hierba aromtica,
perenne, pubescente con hojas alternas,
cortamente pecioladas, pinatisectas, las in-
feriores ms largas que las superiores, de 4
cm de largo y hasta 1,5 cm de ancho. Gene-
ralmente despus de fructificar, las ramas
continan creciendo y producen hojas es-
patuladas enteras. Las flores son muy peque-
as y se disponen en glomrulos ssiles, en
las axilas de las hojas. El fruto encerrado to-
talmente por el cliz es lenticular, blanco
amarillento, con pelos vesiculosos adpresos,
Riesgosy beneficiosen el consumo de plantasmedicinales/ M.A. CARBALLO ET AL.
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cilndricos amarillos y la semilla, vertical, es
de color castao brillante (Giusti, 1967;
Gupta, 1995). Crece fundamentalmente en
Amrica del Sur, y se ha descripto distribui-
da biogeogrficamente en Per, Chile y Bra-
sil a la Argentina, extendindose por toda la
zona templada al norte de la provincia de
Chubut, es una planta muy comn de en-
contrar en suelos modificados (Gupta, 1995).
Lithraea molleoides Vell. Engl.
(Anacardiaceae) (nombre vulgar: Molle de
beber) es un rbol polgamo de follaje per-
sistente y denso, con copa semiesfrica o
globosa, frondosa, cuya alzada oscila gene-
ralmente entre 5 y 8 m, excepcionalmente
12, de tronco entre 10 y 30 cm de dime-
tro, ramas delgadas, corteza persistente, ra-
mas nuevas algo pubescentes. Hojas com-
puestas y alternas, color verde amarillento.
Flores pequeas, blanquecinas agrupadas en
panoj as axi l ares de 4 a 7 cm de l argo
(Toursarkissian, 1980). El molle de beber es
una especie tpica del monte serrano. Abun-
da a orillas de bosques, as como en el monte
de las sierras, donde se distingue desde lejos
por el tono broncneo de su copa, y puede
ser considerado como figura importante de
la flora serrana de Crdoba.
Hieronymus, G. (1882) sostiene que las
hojas se usan como el t para el resfriado y
tambin se le atribuyen propiedades vene-
nosas. Los datos de la literatura establecen
que la planta contiene una resina aromti-
ca, un aceite esencial y un principio oleoso
con propiedades irritantes que aplicadas so-
bre la piel, determinan una erupcin ecze-
matosa acompaada a veces de fenmenos
febriles (Domnguez, 1928). Sola (1942)
refiere otro uso etnomdico de la planta re-
emplazando el azcar del mate por algunas
semillas de Molle, las cuales, segn dicen,
mejoran el gusto de la infusin. En medici-
na domstica se emplea el cocimiento de
cogollos para combatir las inflamaciones de
las vas respiratorias y digestivas, provinien-
do de tal uso el nombre comn de molle
de beber o molle de tomar. Se asegura
que el follaje de esta planta destila una fina
lluvia, la cual determina una erupcin que
los naturales serranos conocen por flecha-
duras.
El origen de Styphnolobium japonicum L
Schott (Fabaceae) es en China y Corea, la
planta posee un follaje caduco, tiene valor
ornamental y se la utiliza en el arbolado ur-
bano. El uso etnofarmacolgico de esta plan-
ta es como antimicrobiano de uso externo.
La Schkuhria pinnata (Lam.) O.K.
(Asteraceae); (Nombre vulgar: Canchalagua)
es una herbcea anual de hasta 75 cm de
altura. A nivel etnomdico se la utiliza en
trastornos digestivos. Esta especie crece en
sitios perturbados, como arvense y ruderal,
en lugares donde la vegetacin original ha
sido derribada.
4.1. Screening genotxico: Metodologa
Tal como fuera mencionado con anteriori-
dad, una de las metodologas de eleccin para
realizar un screening de genotoxicidad es el
ensayo de cometa (Singh et al., 1988). Esta
tcnica utiliza como soporte portaobjetos,
los cuales son cubiertos por una fina capa
de 100 ml de agarosa de punto de fusin
normal al 0,5% disuelta en buffer fosfato
libre de calcio y magnesio. Posteriormente
los preparados son cubiertos con cubreobje-
tos y llevados durante 10 minutos a 4C
hasta lograr la solidificacin de la agarosa.
Para su desarrollo se toman alcuotas de
clulas control y tratadas con la droga en
estudio y se suspenden en buffer fosfato y
agarosa de bajo punto de fusin al 0,5%.
Posteriormente, se remueve el cubreobjeto
y se coloca la suspensin celular sobre la pri-
mera capa de agarosa. Nuevamente se colo-
ca el cubreobjetos para lograr una disper-
sin homognea de la agarosa. Se incuba a
4C hasta solidificacin. A continuacin se
retira el cubreobjetos y se coloca una tercera
103
capa de una solucin de agarosa de bajo
punto de fusin al 0,5%. Se incuban las
laminillas hasta solidificacin a 4C duran-
te 10 minutos y posteriormente se retira el
cubreobjetos.
Una vez finalizada la preparacin de los
extendidos, se los somete a la accin de una
solucin de lisis en fro. Posteriormente, se
colocan los preparados en una cuba de
electroforesis horizontal, en la cual se incu-
ban con buffer de corrida para lograr el
desenrollamiento de la doble hebra de ADN.
La electroforesis se lleva a cabo a temperatu-
ra ambiente durante 20 minutos a 25 volts.
Luego, los preparados son lavados con bu-
ffer de neutralizacin, para eliminar los res-
tos de detergentes y lcalis que pudieran in-
terferir con la coloracin fluorescente. Pos-
teriormente, se colorean con bromuro de
etidio (todo el procedimiento descripto se
lleva a cabo bajo luz amarilla, para evitar el
dao adicional al ADN que se pueda gene-
rar durante el desarrollo de la metodologa).
El anlisis microscpico de los preparados
se realiza en un microscopio de epi-fluores-
cencia. El dao a la molcula de ADN se
cuantifica midiendo el largo de 100 come-
tas sucesivos (50 cometas/preparado /con-
centracin /preparacin /individuo, realizan-
do la cuantificacin por duplicado) por
medio de un ocular graduado.
Es de fundamental importancia la inclu-
sin de controles positivos y negativos. Se re-
comienda que el control positivo sea perxi-
do de hidrgeno 50mM. Dicha sustancia es
altamente oxidante e induce en el ADN ro-
turas de cadena simple y doble y sitios lcali
lbiles. El control negativo debe ser el dilu-
yente utilizado en la preparacin a evaluar.
Los resultados se deben analizar estable-
ciendo la categora de dao hallada en cada
individuo por cada concentracin ensaya-
da. Se establecen cuatro categoras de dao,
dependiendo del largo total del cometa: bajo
(<20 mm); medio (20-40 mm), alto (40-80
mm) y clulas totalmente daadas (>80mm).
Una vez establecido el porcentaje de clulas
en cada categora, se calcula el ndice de
Dao (N), por cada individuo, por cada
concentracin ensayada.
N= Ncl Cat I + 2xNcl Cat II +
3xNcel Cat III + 4xNcl Cat IV
Una vez calculado el ndice de dao (N),
se procede al anlisis exploratorio de los da-
tos mediante el test de Varianza (ANOVA)
de medidas repetidas (Anderson et al., 1994;
Graphpad instat) .
5. RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el presente trabajo se realiza un releva-
miento sobre las plantas medicinales men-
cionadas como hierbas de uso frecuente en
la Repblica Argentina mediante la deter-
minacin del ensayo del cometa en linfoci-
tos de sangre perifrica, expuestos in vitroa
diferentes concentraciones de los extractos
acuosos de los productos naturales de inte-
rs .
En los resultados obtenidos en el ensayo
del cometa se evidenci que cuatro de las
seis especies evaluadas indujeron un incre-
mento de roturas en la doble hlice del
ADN. Esto sugiere la presencia de sustan-
cias txicas en los extractos acuosos de esas
plantas medicinales (Ch. multifidum1 in-
fusi n y coci mi ento; L. molleoides; S.
sysimbriifolium, S. pinnata) (Figuras 1, 2).
Al analizar los resultados obtenidos en la
evaluacin de la infusin de Ch. multifidum,
se observ una gran heterogeneidad en la
respuesta, dependiendo de cada dador. Si
observamos la Figura 1b, vemos que existe
un efecto positivo, no llegando ste a ser es-
tadsticamente significativo. Estas variacio-
nes interindividuales, como ya fue mencio-
nado, estn influenciadas fundamentalmente
por dos mecanismos: la diferente suscepti-
bilidad individual y la extremada sensibili-
Riesgosy beneficiosen el consumo de plantasmedicinales/ M.A. CARBALLO ET AL.
104
Theoria, Vol. 14 (2): 2005
Figura 1. ndice de dao al ADN en tres dadores expuestos a ChenopodiummultifidumL., cuantificado
mediante el ensayo del cometa. a) Cocimiento; b) Infusin.
Figura 2. Electroforesis de una sola clula en linfocitos de sangre perifrica de tres dadores expuestos a
a) Lithraea molleoides; b) Schkuhria pinnata; c) Solanumsysimbriifolium.
b) a)
b) a)
c)
105
Figura 3. ndice de dao al ADN en tres dadores cuantificado mediante el ensayo del cometa. a)
Prosopisalba; b) Styphnolobiumjaponicum.
b) a)
dad de los linfocitos como sistema de ensayo
(Angelis et al., 1999; Tice y Strauss, 1995).
Otros ejemplos de heterogeneidad en la
respuesta se observaron en los resultados ob-
tenidos con P. alba y S. japonicum, donde se
evidencia que el individuo 1 es extremada-
mente sensible frente al agregado de un agen-
te externo (Figura 3).
La cuantificacin de las roturas de la ca-
dena ADN en algunas ocasiones es utilizada
como una medida de genotoxicidad, no slo
porque ellas per sepuedan causar la muerte
celular, sino por que probablemente este tipo
de lesiones sean los precursores de las abe-
rraciones cromosmicas (Natarajan et al.,
1980; Tice y Strauss, 1995).
De esta manera la electroforesis de una
sola clula resulta ser un buen candidato
como mtodo de screening para la deteccin
de dao a la molcula de ADN, sirviendo
como primera aproximacin, en forma r-
pida y sencilla del potencial genotxico de
una sustancia analizada que debe ser corro-
borada mediante su evaluacin con otros
biomarcadores de efecto genotxico.
Aunque las plantas medicinales tienen
propiedades teraputicas, algunas de ellas
pueden poseer compuestos con propiedades
no slo mutagnicas, sino tambin carcino-
gnicas. Ejemplos de stos son la quercetina
y la rutina o algunos constituyentes de espe-
cies exticas (Hocman, 1989).
Los ensayos de screening en mutagenici-
dad, en una primera instancia, son utiliza-
dos como ensayos cualitativos sobre poten-
ciales mutgenos. En una evaluacin muta-
gnica los resultados positivos pueden ser
utilizados de diferentes maneras. Entre ellas,
la de mayor aplicacin durante los ltimos
20 aos ha sido la de tomarlos como una evi-
dencia de peso para predecir carcinogenici-
dad de compuestos. Si bien la identificacin
de carcingenos es importante, la evaluacin
de mutagenicidad no es un simple compo-
nente de este proceso, sino que es de funda-
mental ayuda en el asesoramiento de riesgo/
beneficio frente a la exposicin de diversas
sustancias (Dearfield, 1995).
En el presente trabajo se observ una
heterogeneidad sustancial en la distribucin
Riesgosy beneficiosen el consumo de plantasmedicinales/ M.A. CARBALLO ET AL.
106
Theoria, Vol. 14 (2): 2005
de la migracin del ADN frente al agregado
de los extractos. Esto indica un nmero va-
riable de roturas de cadena simple y sitios
lcali-lbiles. Esta gran variacin intercelular
no podra haber sido detectada si el ensayo
slo identificara dao al material gentico
en poblaciones celulares (Singh et al., 1991).
Los resultados obtenidos en el presente
estudio sugieren que los extractos acuosos
evaluados no son inocentes frente a una eva-
luacin toxicogentica de screening. Por con-
siguiente, es necesario considerar el posible
potencial txico de estas plantas medicina-
les y establecer una metodologa para la pro-
teccin de la poblacin expuesta. Se necesi-
tan obtener respuestas en el mbito de la
salud pblica para regular el consumo masi-
vo e indiscriminado de las plantas medici-
nales.
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