Un antibitico es una sustancia qumica producida por un ser vivo o derivado sinttico, que mata o impide el crecimiento de ciertas

clases de microorganismos sensibles, generalmente bacterias. Los antibiticos se utilizan en medicina humana, animal y horticultura para tratar infecciones provocadas por grmenes. . Los antibiticos generalmente ayudan a las defensas de un individuo hasta que las respuestas locales sean suficientes para controlar la infeccin. Las penicilinas son antibiticos del grupo de los -lactmicos con excelentes propiedades bactericidas, los cuales tienen un alto margen de seguridad, porque actan en estructuras de las bacterias que no estn presentes en la clula humana. Son usados profundamente en medicina, especialmente en el tratamiento de infecciones estafiloccicas como ntrax, heridas y quemaduras infectadas; en el tratamiento de infecciones neumoccicas como neumona, pleuritis y endocarditis; en enfermedades estreptoccicas como infeccin puerperal, peritonitis; y en infecciones gonoccicas como la gonorrea y la sfilis. La penicilina fue descubierta por el bacterilogo Alexander Fleming, en el St. Marys Hospital de Londres, el cual dio cuenta de su hallazgo en un a comunicacin publicada en 1929 en el British Journal of Experimental Pathology. Sin embargo, no se consider seriamente hasta 1940, cuando en la universidad de Oxford el profesor Howard Florey y el bioqumico Ernst Chain consiguieron producir y presentar la penicilina en una forma utilizable Durante la segunda guerra mundial la demanda de agentes quimioteraputicos para tratar las infecciones de las heridas, condujo al desarrollo de un proceso de produccin de penicilina y al inicio de una era de investigacin sobre los antibiticos. Los primeros procesos para la produccin de penicilinas, implicaban el crecimiento de Penicillium notatum sobre la superficie de un medio lquido.El periodo de incubacin era usualmente de 6-12 das. La mejora del cultivo inicial se produjo en 1943 con el descubrimiento de una nueva especie, P. chrysogenum, la cual permiti incrementar los rendimientos del producto y trabajar en cultivo sumergido empleando lactosa como fuente de carbono y energa, y agua de macerado de maz como fuente de nitrgeno.

De acuerdo al mtodo de produccin, en la Figura 1 se muestran los tres tipos de penicilinas que se pueden obtener: Las naturales (Aquellas generadas sin intervencin biotecnolgica), las biosintticas (Producidas mediante adicin de determinados compuestos en el medio de cultivo del biorreactor), y las semisintticas (Obtenidas mediante pretratamiento enzimtico o qumico aplicado a un tipo de penicilina). En el cuadro se muestra la clasificacin de las penicilinas dentro de las familias mencionadas anteriormente, destacando que la clasificacin de las penicilinas biosintticas no es mostrada debido a que son las mismas que se obtienen naturalmente pero haciendo uso de la biotecnologa. A nivel industrial la Penicilina G junto con la penicilina V, son las ms producidas debido a la gran demanda que tienen en el mercado farmacutico. Estas penicilinas se obtienen usando procesos sumergidos en fermentadores. La fermentacin de penicilina es un proceso aerbico, en donde las cantidades de oxgeno necesarias varan, pues estas dependen de la cepa, del biorreactor y del tipo de impulsor. El inculo se inicia utilizando esporas liofilizadas y despus de varias etapas de crecimiento est preparado el cultivo de produccin. En la fermentacin tpica de penicilina existe una fase de crecimiento de aproximadamente 40 horas con un tiempo de duplicacin de 6 horas, durante la cual se forma la mayor parte de la biomasa celular. Seguida a esta fase de crecimiento, el cultivo llega a la fase real de produccin de penicilina y finalmente cuando la fermentacin termina, es llevado al proceso de separacin. . Debido al aporte de distintos componentes al medio, la fase de produccin puede extenderse hasta 120-160 horas.

Seccin de transformacin: Se pueden utilizar cepas fngicas o cepas bacterianas. Se escogi la cepa fngica Penicillium chrysogenum y se trabajar en medio power, ya que esta cepa permite incrementar los rendimientos de producto y trabajar en cultivo sumergido. Sustrato:

La fuente de carbono utilizada para que las cepas fngicas produzcan Penicilina es la glucosa, aunque en algunas ocasiones se ha acompaado con Lactosa.

Microorganismo:

El microorganismo utilizado sern las cepas de Penicillium chrysogenum, las cuales se sembrarn en placas de medio Power y se incubarn a 28 C durante 4-5 das para lograr una completa esporulacin. Los cultivos en medio lquido se realizarn en matraces erlenmeyer lisos de 250 ml y 500 ml con un volumen de medio de 50 ml y 100 ml respectivamente. Las condiciones de cultivo, tanto para el inculo como para la fermentacin, sern de 25 C y 250 rpm en agitadores orbitales. Condiciones del medio:

Las cepas fngicas se conservarn aprovechando la capacidad de estos organismos de formar estructuras asexuales de reproduccin y resistencia (conidios). Temperatura: la temperatura indican que el valor ptimo para crecimiento es de aproximadamente 30 C, en tanto que el ptimo de produccin oscila entre 20 y 25 C. Para un proceso "batch" la temperatura puede variar entre 23 y 28 C, en tanto que para el "batch" alimentado esa variacin est entre 25 y 27 C. -pH: El pH ptimo debe ser mantenido alrededor de 6.5, lo cual permite adems minimizar la hidrlisis de penicilina a cido penicilico. Se debe tener en cuenta que el pH puede no ser constante debido a que el valor ptimo para crecimiento puede ser diferente del de formacin de producto.

Regulacin mediada por el oxgeno: Para la produccin de penicilina, conseguir una buena aireacin del micelio con oxgeno es una de las condiciones imprescindibles. La aireacin presenta un problema especial en esta fermentacin, debido a que al incrementarse la biomasa, y por consiguiente la demanda de 02, aumenta tambin la viscosidad del medio, lo cual crea una resistencia importante para la transferencia de oxgeno. Por lo tanto puede ocurrir que por encima de un cierto valor de X el suministro de oxgeno pueda ser insuficiente para mantener un qp mximo por un determinado tiempo. Para superar estos problemas se puede incrementar la potencia de agitacin, el caudal de aire, la presin dentro del reactor, cambiar las condiciones de cultivo o incluso trabajar con cepas modificadas que no aumenten la viscosidad. - Inhibicin: (Regulacin mediada por la fuente de fsforo).El efecto represor de la glucosa sobre la biosntesis de penicilina depende de la concentracin del fosfato inorgnico en el medio de fermentacin. En el medio complejo de fermentacin con la fuente de fsforo limitada, el efecto represor es del 13 % cuando la fuente

de carbono (glucosa) es aadida en el tiempo de inoculacin, mientras que se incrementa hasta un 59 % cuando el medio es suplementado a la vez con glucosa y con fosfato inorgnico a una concentracin de 100 mM. La adicin de fosfato inorgnico a una concentracin de 100mM no tiene efecto sobre la produccin de penicilina en medios con la concentracin de glucosa limitada o con lactosa como fuente de carbono. Todo esto indica la necesidad de un adecuado manejo del proceso y del diseo del reactor, as como sistemas de control rigurosos para la obtencin de un buen producto. Seccin de separacin: Actualmente la extraccin con solventes es la base para la separacin y purificacin de la penicilina. El primer paso consiste en separar el micelio del medio de cultivo empleando un filtro rotatorio a vaco tipo cilndrico. El filtrado rico en penicilina es luego enfriado en un intercambiador de calor a 0 - 4 C con el objeto de disminuir la degradacin enzimtica y qumica durante las etapas de extraccin posteriores. Las penicilinas G es un cidos fuerte (pKa entre 2.5 - 3.1). La extraccin se puede realizar en operaciones continuas, a contracorriente en extractores centrfugos en etapas mltiples, a temperaturas de 0 - 3 C. Otra posibilidad es el empleo de mezcladores estticos o decantadores, los cuales tienen en menor costo de inversin. Se debe tener en cuenta que la penicilina G se degradan en medio cido con una cintica de primer orden a una velocidad proporcional a la temperatura y recproca con respecto al pH. Esto hace que la vida media en condiciones de eficiente extraccin en medio cido sea muy reducida. La extraccin de penicilina se puede realizar en una o ms etapas sucesivas, con una acidificacin del caldo filtrado con H2SO4 o H3 O4 al 10% P/V y con el agregado de un agente surfactante (0,003 - 0,1% P/P, en el solvente), realizndose la extraccin y concentracin en extractores centrfugos. Dependiendo de las especificaciones de uso final, el solvente conteniendo penicilina se puede tratar con carbn para separar pigmentos y otras impurezas. Esta etapa actualmente no se realiza debido a las bajas impurezas de los caldos y a los altos rendimientos obtenidos.

La cristalizacin se puede realizar desde la fase acuosa si se desea, siendo los valores crticos las concentraciones de sodio o potasio, la temperatura, la concentracin de penicilina y el pH. En caso de hacerse la cristalizacin a partir de un solvente se requiere tambin un exceso de Na+ o K+ , siendo los cristales recuperados en un filtro rotatorio a vaco. Estos cristales son lavados y presecados con un solvente voltil que tambin separa impurezas coloreadas. El secado definitivo se puede realizar con aire caliente, vaco o calor radiante. Aproximadamente el 65% de la fuente de carbono metabolizada se utiliza para el mantenimiento energtico, el 25% para el crecimiento y slo el 10% para la produccin de penicilina. Grado de pureza: La produccin de penicilina es un proceso relativamente ineficiente ya que slo un 20 % de la fuente de carbono consumida durante la fermentacin termina incorporndose a la molcula de penicilina, aunque los anlisis de flujos metablicos en las cepas de alta produccin estiman un rendimiento terico de la conversin hasta valores del 50 % . La mejora en la produccin y en el porcentaje de rendimiento de las cepas que actualmente se emplean se ha conseguido, en mayor medida, mediante la utilizacin de tcnicas clsicas de mutacin y seleccin. La introduccin de la tecnologa del ADN recombinante ha llevado a la clonacin y caracterizacin de los genes estructurales de la ruta biosinttica de penicilina y hace posible la investigacin sobre su regulacin a nivel molecular. Debido a que la expresin de los genes de biosntesis de penicilina est sujeta a sofisticados controles, bien sea por factores nutricionales y/o factores reguladores, los conocimientos sobre los circuitos reguladores y la sobreexpresin de los posibles genes reguladores pueden llevar a incrementos importantes sobre la produccin y el rendimiento en la biosntesis de la penicilina.

Demanda Existen dos formas de uso de estos medicamentos: Parenteral que consiste en una inyeccin que puede ser intramuscular o endovenosa y enteral, que es tomado como tableta o suspensin. El uso de las mismas, vara dependiendo ms de la necesidad del paciente que del tipo de infeccin que presente. En Colombia, la venta de estos medicamentos se hace nicamente bajo prescripcin mdica, sin importar cul sea su presentacin. Debido a los recursos limitados, es difcil poner en prctica un eficiente sistema de vigilancia continua de la susceptibilidad a penicilina y la prevalencia de los serotipo. La resistencia a la penicilina est aumentando en Amrica Latina. La comparacin de los datos obtenidos en los aos 1994 y1998 mostr una distribucin estadsticamente significativa de neumococos altamente resistentes en cinco pases. Esta informacin debe proporcionar datos fiables para la formulacin de una vacuna adecuada para su uso en Amrica Latina con el fin de crear una tasa de cepas resistentes de alto nivel para combatir enfermedades