DETERMINACION DEL SISTEMA

ABO
 REPRESENTACION ESQUEMATICA DE LA
SINTESIS BIOQUIMICA DE LOS ANTIGENOS ABH
 LA DETERMINACIÓN DEL SISTEMA ABO
COMPRENDE DOS PARTES:
1. Prueba celular para determinar el antígeno de
grupo sanguíneo
2. Prueba sérica o inversa para determinación de
los anticuerpos
Las dos pruebas se realizan simultáneamente
y se complementan.
En aquellos casos en que hay discrepancias
entre ambas pruebas, la investigación
adicional revelará una condición que puede ser
de importancia clínica o solo interesante
desde el punto de vista serológico.
 INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS EN ABO
P. celular P. sérica Interpretación
G.R. desconocidos Suero desconocido Grupo sanguíneo
Suero conocido Hematíes
Anti-A Anti-B Anti-A,B A1 B

-----------------------------------------------------------------------------
- - - + + O
+ - + - + A
- + + + - B
+ + + - - AB
- - + - + subgrupo A
- - + + + subgrupo A +
 INTERPRETACION DE LA
DETERMINACION DEL FACTOR Rh
DISCREPANCIAS ENTRE LA PRUEBA CELULAR
Y LA PRUEBA SERICA
Las discrepancias son el resultado de:
1. ERRORES TECNICOS
* Material sucio
* Contaminación bacteriana de las muestras o de
los reactivos
* Proporción incorrecta entre suero y células
* Exceso o falta de centrifugación
* Uso incorrecto de la temperatura de incubación
* Pérdida de la actividad de los reactivos
* Presencia de hemólisis, la cual no se identificó
* Incorrecta identificación de las muestras
 2. PROBLEMAS INHERENTES A LAS
CELULAS
a. Pseudoaglutinación
b. Autoaglutinación
c. Poliaglutinación
d. Sub-grupos débiles de A
e. Antígeno B adquirido
f. Reacción de campo mixto
 PSEUDOAGLUTINACION
No es verdadera aglutinación, las células se agrupan formando pilas
de moneda ( rouleaux ).
Se observa: cuando los G.R. están suspendidos en su propio suero,
hay exceso de proteínas o proteínas anormales, gelatina de Wharton o
presencia de macromoléculas.
AUTOAGLUTINACION
G.R. fuertemente sensibilizados por anticuerpos y puede aglutinarse
espontáneamente con los sueros hemoclasificadores ABO. Se observa
en A.H.R.N., transfusión con sangre incompatible,enfermedades
hemolíticas inmunes.
Si esto sucede es posible remover una cantidad del anticuerpo unido
mediante elusión suave que no modifique los antígenos, después de
los cual se puede hacer una tipificación efectiva para el ABO
 POLIAGLUTINACION
Los G.R. de un individuo son aglutinados por todos o casi todos los
sueros humanos. El fenómeno es debido a que bajo ciertas circunstancias
son expuestos o descubiertos antígenos que forman parte de la estructura
de la membrana eritrocítica y que normalmente están ocultos pero para
los cuales existen anticuerpos en casi todas las personas.
La poliaglutinación no tiene relación directa con el sistema ABO.
Las células poliaglutinables pueden ser clasificadas en:
* Por activación T: todas los G.R. tienen el receptor T latente que se
pone de manifiesto por infecciones bacterianas tanto in vitro como in
vivo. Es un fenómeno transitorio.
* Por activación Tn: también se debe a la activación de un receptor
latente pero por mecanismo no conocido que ocurre solo in vivo y no es
transitorio. Las personas presentan pancitopenia.
* El Ag. Cad ( Super Sid ) es de baja
incidencia y es el único poliaglutinable hereditario; la mayoría adultos
contienen el anti-Cad. La reacción de aglutinación es la típica de campo
 ANTIGENOS DEBILES O SUPRIMIDOS
Puede aparecer en subtipos débiles de A o B en caso de leucemia o
enfermedades malignas que debilitan la reactividad de los antígenos.
La discrepancia se presenta porque en los G.R. no se observa la
aglutinación con los reactivos correspondiente, pero en el suero están
presentes el anti-A o anti-B.
ANTIGENO B ADQUIRIDO
Se debe considerar este antígeno cuando en la prueba celular los
G.R. se comportan como AB y en la prueba sérica se demuestra el
anticuerpo anti-B. Solamente los G.R. del grupo A adquieren la
espeficidad anti-B.
* Para identificarlo se recomienda observar el grado de
aglutinación con el anti-A y el anti-B.
* Determinar en la saliva la presencia de la sustancia A y
B * Revisar la H.C.:buscar asociación con enf.
Malignas: colon, recto, próstata, cuello uterino; infecciones con E.
 AGLUTINACION DE CAMPO MIXTO
Dos poblaciones de células rojas distintas y separables están
presentes en la muestra de sangre. Se reconoce porque en la
tipificación, la reacción de aglutinación muestra células
aglutinadas en medio de un mar de células no aglutinadas.
Este fenómeno se observa:
a. Pacientes del grupo A o B que reciben transfusión de sangre O
b. Hemorragia materno fetal
c. Transfusión intrauterina
d. Quimeras
e. En la reacción débil adquirida del antígeno A como se observa en
las leucemias.
Las dos poblaciones de células se pueden separar por técnicas de
aglutinación o hemólisis
 3. PROBLEMAS INHERENTES AL SUERO
a) Presencia de anticuerpos irregulares fríos que reacciona con otros
Ags. presentes en los G.R. A y B usados en la prueba inversa. Vg.
Auto anti-I, anti- A1, anti-H.
* Auto anti- I, es el de mayor frecuencia. Este anticuerpo aglutina
a todas las células adultas, incluyendo las propias y las usadas en el
grupo inverso. Las células del cordón, regularmente no contienen el
antígeno I, no son aglutinadas por la prueba inversa y permite
aclarar las discrepancia.
* Anti A-1 presente en los individuos A2 y A2B, aglutinan a las
células A1 . *
anti-H en personas A1 y A1B. Generalmente causan pocos
problemas.
b) Disproteinemias que causan el fenómeno del roleaux
c) Ausencia de anti-A y anti-B
TIPIFICACION DE LOS ANTIGENOS Rh
 INDICACIONES TIPIFICACION DEL
Rh
La rutina del Banco de Sangre solo incluye la
determinación del antígeno D y la demostración
de la actividad Du.
Los demás antígenos se tipifican en situaciones
especiales, como:
* Investigación de paternidad
*En personas con anticuerpos anti-Rh
*En la sangre a transfundir a receptores con
anticuerpos anti-Rh
*En pacientes que reciben transfusiones
periódicas
 REACTIVOS COMERCIALES UTILIZADOS EN
LA TIPIFIACION DEL Rh
1. SUERO ANTI-D DE ALTA PROTEÍNA
Estos reactivos dan resultados rápidos y reprodu –
cibles, sin embargo pueden haber falsos positivos
cuando los G.R. están sensibilizados con
anticuerpos ( autosensibilización ).
Para detectar estos falsos positivos se debe usar un
reactivo control.
Factores que conducen a los falsos positivos:
*Dependientes del reactivo
*Dependientes del suero del paciente
 DETERMINACION DEL ANTIGENO D
CON SUERO DE ALTA PROTEINA
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Tubo anti-D Tubo control Rh Interpretación
-------------------------------------------------------------------------
+ - Rh positivo
+ débil - Posible Du
- - Rh negativo o posible Du
+ + Autoaglutinación
( investigar dicha situación )
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 PRUEBA PARA DETERMINAR DU
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Tubo con anti-Rh Tubo control Rh Interpretación

------------------------------------------------------------------------
- - Rh negativo
+ - Rh positivo
+ + Prueba inválida
( bloqueo in vivo por
anticuerpos )
Se debe proceder a la
Prue- ba Rh usando anti-D salino o
de molécula IgG modificada
 PRUEBA CON ANTI-D SALINO
Se usa para determinar el antígeno D cuando
la prueba con el reactivo anterior ha sido
inválida
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Tubo con anti-D Tubo control Interpretación
-------------------------------------------------------------
+ No requerido G.R. contienen el
antígeno D
- No requerido G.R. no contienen el
antígeno D
-------------------------------------------------------------
SUERO ANTI-D DE MOLECULA IgG MODIFICADA
Los anticuerpos IgG anti-D son convertidos en aglutininas
salinas mediante reducción química que desdoblan los enlaces
disulfídicos confiriendo una mayor flexibilidad a la molécula lo
que le permite que sus dos porciones Fab cubran una distancia
mayor que la IgG nativa. Este suero anti-D puede ser usado
con toda confianza en lugar del reactivo de alta proteína sin
que sea necesario montar pruebas de control.
Se usa también para la determinación de la prueba Du , aunque
no debe realizarse si el Coombs directo es positivo.

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Tubo con anti-Rh Tubo auto-control Interpretación
--------------------------------------------------------------------------
- - Rh negativo
+ - Rh positivo
+ + Prueba no válida