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    Instructivode Uso VIPEHEC2008

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    VIP para EHEC®

    AOAC® Método Oficial 996.09 9


    Prueba de un sólo paso para la detección de E. coli enterohemorrágico
    (EHEC) en alimentos e ingredientes..

    En México: http://www.serco.com.mx [email protected] 01-800-00-SERCO(73726)

    DescripciÓn general (c) No mezcle caldos de pruebas inactivados (de la Sección B).
    VIP ® para EHEC es un análisis visual de un sólo paso que permite Transfiera 0.1 mL de caldo de prueba de la Sección A(b)
    detectar infecciones por E.coli enterohemorrágico (EHEC). para enriquecimiento de entre 18 -28 h o de la
    Cada prueba VIP es independiente y puede ser realizada de Sección B para enriquecimiento de 8 h, al pocillo donde
    forma individual o en grupos. Queda asegurado un alto nivel se agrega la muestra. Transfiera al dispositivo sólo el liquido,
    de sensibilidad y especificidad para E. coli O157:H7 por medio no las partículas del alimento.
    de un sistema reactivo patentado, el cual forma un complejo de
    antígenos-anticuerpos-cromogénico si EHEC se encuentra (d) Incube a temperatura ambiente por:
    presente. • 15-20 min usando enriquiecimiento de 8 houras
    Modo de empleo • 10 min usando el enriquicimento de 18-28 h

    A. Enriquecimiento y preparación de la porción de D. Lectura y interpretación de resultados


    la prueba
    (a) 8 horas de enriquecimiento—Únicamente: NOTA: Leer el dispositivo despues del tiempo de incubaction esecificada.
    Pesar asépticamente 25 g de la muestra y ponerla en de la incubación. Después de este tiempo pueden aparecer
    225 mL de caldo BioControl mEHEC™ precalentado (42ºC) ligeras lineas al no desarrollarse un color especifico y
    (véase el Anexo en la parte de atrás de la página). deberán ignorarse.
    Homogenice (stomacher) la muestra durante 2 min. Incube
    durante 8 h a 42ºC. Prosiga con la seccion B. Inactivatión (a) Examine la unidad VIP y observe si existen lineas de
    del caldo de prueba. detección tanto en la ventana de la muestra como en la
    ventana de verificación. Las líneas deben ser oscuras al
    (b) De 18 a 28 horas de enriquecimiento-Todas los alimentos contrastar con el fondo blanco y deben extenderse a lo
    (incluyendo carne cruda y concinada): largo de la ventana. La intensidad de las líneas de la ventana
    Pesar asépticamente 25 g de la muestra y ponerla en 225 mL de verificación y de la muestra puede variar. La ausencia
    de caldo soya typticasa modificado con novobiocina de la linea de control indica que el resultado de la prueba
    (mTSB + n) (véase el Anexo en la parte de atrás de la no es válido. Póngase en contacto con el Servicio Técnico
    página). Si se analizan tamaños más grandes de la muestra, de BioControl llamando al teléfono 1-800-245-0113.
    aumente propocionalmente el volumen de mTSB+n para
    mantenar una proporción de dilución de 1:9. Mezcle bien (b) La prueba será considerada positiva cuando se aprecien
    el contenido. Incube durante la noche (18-28 h) entre las líneas en la ventana de la muestra y en la ventana de
    35-37ºC. Prosiga con la sección C para analisis del caldo verificación.
    de prueba. (c) La prueba será considerada negativa cuando se aprecie una
    NOTA: Para muestras viscosas (por ej. queso en polvo), agrgue línea en la ventana de verificación y no se vea ninguna
    > 2.25 mL de Triton X-100 hecho al vapor por cada 225 mL línea en la ventana de la muestra. Si no aprecia ninguna línea
    de mTSB + n en el momento en que se añada la muestra y antes en la ventana de verificación, la prueba no será valida.
    de la incubación. (d) Se deberán realizar controles tanto negativos como
    Para todos los enriquecimientos: Una vez finalizada la positivos para que analista se familiarice con la interpretación
    incubación, mantenga refrigerados los caldos enriquecidos de los resultados.
    originales a una temperatura de 2-8ºC. Podrán ser útiles
    para la confirmación de presuntas muestras positivas (véase (e) Antes de desechar las unidades de VIP se deben introducir
    la Sección E). en autoclave a 121°C durante 15 min.

    B. Inactivación del caldo de prueba


    Sólo es aplicable para enriquecimientos de 8 h. — Mezcle
    cuidadosamente la muestra enriquecida y deje que
    reposen las partículas de alimentos. Transfiera 4.0 mL de
    caldo enriquecido a un tubo de ensaye. Inactive el caldo
    de prueba durante 10 min. a 100ºC. Enfríe los caldos de
    prueba inactivados a temperatura ambiente antes de Línea de detección
    realizar las pruebas en la unidad VIP. Los caldos de prueba Línea de control
    Indica pruebas presuntivas
    inactivados pueden permanecer almacenados durante positivas
    Verificacion de la
    un máximo de cuatro días a una temperatura de entre prueba
    2-8ºC.
    C. Análisis del caldo de prueba Se agregó la muestra
    (a) Abra el paquete sellado que contiene las unidades VIP en el pocillo
    y retire el número de pruebas necesarias. Se requiere un
    dispositivo por cada muestra. Las unidades VIP no
    pueden ser reutilizadas. Vuelva a sellar las unidades VIP que
    no hayan sido utilizadas en el paquete, asegúrese de que
    contengan descante. Guarde a temperatura ambiente Ventana de prueba para la Ventana que indica el
    en un lugar fresco y oscuro. muestra buen funcionamiento de
    (esta línea solamente la prueba
    (b) Los caldos enriquecidos deberán equilirarse a una
    temperatura de entre 25-37ºC antes de realizarse aparece an caso de que
    la prueba. haya muestra positiva

    Pongase en contacto con el Servicio Technico de BioControl para recibir asistencia acerca del procedimiento del confirmacion de EHEC
    E. Confirmación
    Se deberan confirmar las presuntas pruebas positivas utilizando los metodos de cultivo descritos en la actual edicion del
    Manual Analitico Bacteriologico de la Administraction de Alimentos y Farmacos de los EE.UU.(Food and Drug Administration,
    FDA). Bacteriological Analytical Manual,AOAC INTERNATIONAL, Gaithersburg, MD 20877. Aislar de caldos enriquecidos
    previamente.
    F. Almacenamiento
    Guarde las unidades VIP no utilizades en el empaque orginal verificando que estén bien cerradas y que contienen
    el desecante. La línea indicadora de humedad del paquete desecante deberá se azul. Guarder a temperatura ambiente, entre
    15-25ºC (55-77ºF). No refrigerar.

    ANEXO- Preparación de los medios
    Caldo Soya con Tripticasa modificado (mTSB) BioControl (P/N 63000/ 63000-10K)
    Disuelva 33 g de medio en 1 L de agua desionizada. Administre en cantidades iguales de 225 mL en los recipientes adecuados. Esterilice por
    autoclave a 121˚C durante 15 min. Enfríe a temperatura ambiente. Agregue 1,0 mL de solución de novobiocina al 0,45% (véase a continuacion)
    en cada tubo mTSB de 225 mL justo antes de añadir la muestra.

    Preparación del Caldo Soya con Tripticasa modificado (mTSB)


    Mezclar:
    30.0 g de caldo soya de tripticasa (deshidrato))
    1,5 g de sales biliares núm.3,
    1,5 g fosfato dipotásico (K 2HPO4 anhidro)
    1,0 L agua desionizada
    Esterilice por autoclave a 121˚C durante 15 min y deje enfríar a temperatura ambiente. Agregue 1,0 mL de solución de novobiocina (véase a
    continuacion) por cada 225 mL del medio mTSB justo antes de añadir a la prueba.

    Solucion de novobiocina- 0,45%


    Disuelva 0,45 g de sal sódica de novobiocina en 100 mL de agua desionizada. Esterilice con filtro con un tamaño de poro de 0,45 µm o menor.
    La solución permanecerá estable un máximo de 60 días si se guarda en una botella oscura a una temperatura de entre 2-8˚C.
    Medio mEHEC™
    Precaliente 225 mL de agua desionizada estéril a 42˚C durante de noche. El día de su uso, transfiera asépticamente 7,1 g del medio BioContro
    mEHEC™ o un paquete del medio con unidades de dosis premedidas en el agua estéril precalentada. Mezcle cuidadosamente para disolver el polvo.
    Utilice el medio preparado en un tiempo máximo de 6 h. Alternativamiente, el medio de cultivo mEHEC puede ser preparado e autoclavado a
    121˚C por 15 min. En el caso de usar el medio autoclavado es necesario precalentar a 42˚C durante la noche antes del uso.

    INFORMACIÓN DEL PRODUCTO


    VIP para EHEC deberá utilizarse conforme se describe en este documento. Este producto no teine como finalidad el uso veterinario o humano.
    Las unidades VIP no pueden ser reutilizadas. Evitar el contracto con los ojos, la piel y la ropa. Evitar ingerir o tomar el producto. No utilice
    unidades VIP cuya fecha de caducidad haya vencido.

    GARANTÍA DEL PRODUCTO


    BioControl Systems, Inc. (BCS) garantiza que, hasta la fecha de caducidad indicada en el paquete, este producto estará libre de defectos materiales
    y de mano de obra siempre y cuando se almacene conforme a las condiciones del fabricante y se use debidamente. BCS acepta reponer durante el
    periodo de garantía aplicable todo producto defectuoso que le sea devuelto. La presente Garantía limitada no obliga a BCS a realizar reposiciones
    que pudieran resultar, parcial o totalmente, de la negligencia del Comprador o del uso indebido del producto o del uso del producto de un modo
    contrario al indicado. El comprador deberá notificar a BCS de todo aquel producto que considere defectuoso durante el periodo de garantía. A
    discreción de BCS, dicho producto deberá ser devuelto a BCS, con los costes de seguro y portes pagados. BCS repondrá todo producto que con-
    sidere defectuoso sin que el comprador incurra en costo alguno. En la eventualidad de que la evaluación de BCS no determine que el producto pre-
    senta alguno de los defectos que cubre la presente garantía, BCS deberá notificar consecuentemente al Comprador y eliminar/desechar el producto
    conforme a las Instrucciones del comprador.
    ©
    BioControl Systems, Inc. 2008 BioControl Systems, Inc., certifica que VIP para EHEC cumple todos los requisitos especifcados en AOAC ® Método Oficial
    996.09 Detección de infecciones por Eschericha coli enterohemorrágico O157:H7 en alimentos seleccionados, análisis immunoprecipitado visual. BioControl y
    VIP son marcas comerciales de BioControl Systems, Inc. Patente estadounidense núm. 5,658,747, Patente Europea núm. 0,759,172, Patente Canadiense núm.
    2,190,109, Patente Australiana núm. 680362, Patente Japonesa núm. 2894841, Patente México núm. 230973 Otras patentes estadounidenses e internacionales
    se encuentran pendientes. Impreso en EE.UU. Todos los derechos reservados.

    Contacto en México: http://www.serco.com.mx [email protected] 01-800-00-SERCO (73726)

    Núm. de catálogo 600020, 600050 55000.R014.072008

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