NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230
2003-12-19

MICROBIOLOGA DE ALIMENTOS Y ALIMENTO PARA ANIMALES. MTODO HORIZONTAL DE TCNICAS DE MUESTREO DE SUPERFICIES USANDO CAJAS DE CONTACTO Y MTODO DE ESCOBILLN

E:

MICROBIOLOGY OF FOOD AND ANIMAL FEEDING STUFFS. HORIZONTAL METHODS FOR SAMPLING TECHNIQUES FROM SURFACES USING CONTACT PLATES AND SWAB METHODS.

CORRESPONDENCIA:

esta norma es una adopcin idntica (IDT) por traduccin de la ISO ISO/DIS18593:2002. Microbiology of Food And Animal Feeding Stufss. Horizontal Method For Sampling Techniques From Surfaces Using Contact Plates And Swab Methods. microbiologa de alimentos; anlisis microbiolgico; superficies.

DESCRIPTORES:

I.C.S.: 07.100.30
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. Tel. 6078888 Fax 2221435

Prohibida su reproduccin

Editada 2004-01-30

PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 5230 fue ratificada por el Consejo Directivo del 2003-12-19. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en el Comit Tcnico 25 Microbiologa. ALPINA ASINAL AVESCO BIOCONTROL BIOQUILAB LTDA. BIOTRENDS LABORATORIOS CARULLA VIVERO- S.A. CONGELAGRO CONSULTOR INDEPENDIENTE EMPRESA DE ACUEDUCTO Y ALCANTARILLADO DE BOGOT -E.S.PENZIPAN DE COLOMBIA LTDA. FBRICA DE ESPECIAS Y CONDIMENTOS EL REY FRIGORFICO GUADALUPE FRIGORFICO SUIZO S.A. FRIGORFICOS COLOMBIANOS S.A. GASEOSAS COLOMBIANAS S.A. INGENIO PICHICHI INSTITUTO NACIONAL DE SALUD IVONNE BERNIER LABORATORIO. NULAB LTDA. PURIFICACIN Y ANLISIS SECRETARA DE SALUD DE BOGOT TRES M COLOMBIA S.A. UNIVERSIDAD DE LOS ANDES LEMA ALPINA S.A. ASINAL LTDA. ASOCIACIN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGA AVESCO BAVARIA S.A. BIOCONTROL BIOQUILAB LTDA. CENICAA COMPAA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A. COOPERATIVA DE GANADEROS DE CARTAGENA LTDA. CREPES & WAFLES GASEOSAS COLOMBIANAS S.A. INGENIO PROVIDENCIA S.A. INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO INSTITUTO NACIONAL DE SALUD IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA. LABORATORIO BIOCONTROL LESNIAK E.U. LEVAPAN S.A. MERCADEO DE ALIMENTOS DE COLOMBIA S.A. NULAB LTDA. PURIFICACIN Y ANLISIS DE FLUIDOS LTDA.

QUIOS LTDA. TRES M. COLOMBIA S.A. UNIVERSIDAD JAVERIANA

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las siguientes empresas: ACEITES Y GRASAS VEGETALES S.A. ALGARRA AQUALAB ASOCIACIN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGA BAVARIA S.A. BIANLISIS BIOMERIUX. BIOQUILAB LTDA. CASA LUKER CENICAA CERVECERA LEONA COMPAA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A. CONSULTORAS MICROBIOLGICAS COOPERATIVA DE GANADEROS DE CARTAGENA LTDA. CREPES Y WAFLES GASEOSAS COLOMBIANAS S.A. ICONTEC BARRANQUILLA ICONTEC MEDELLN ICONTEC CALI ICONTEC CERTIFICACIN PRODUCTO BLANCA USECHE CONSULTOR INDEPENDIENTE INGENIO PICHICHI S.A. INGENIO RIOPAILA INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO ICA INVIMA INSTITUTO NACIONAL DE VIGILANCIA MDICA LABORATORIO MICROBIOLGICO SIS LARKIN LTDA. LEONA S.A. LESNIAK E.U LEVAPN S.A. LLOREDA GRASAS S.A. MERCADEO DE ALIMENTOS DE COLOMBIA S.A. MINISTERIO DE PROTECCIN SOCIAL NESTL DE COLOMBIA S.A. PASSIFLORA COLOMBIANA S.A. PRODUCTORA DE CONCENTRADOS Y JUGOS DE FRUTA QUALA S.A. QUIOS LTDA. REPRESENTACIONES BIOTECNOLGICAS LTDA. RICA RONDO, INDUSTRIA NACIONAL DE ALIMENTOS S.A. TECNIMICRO LABORATORIO DE ANLISIS UNIDAD ADMINISTRATIVA DE SALUD PBLICA UNIVERSIDAD CATLICA INGECAL UNIVERSIDAD JAVERIANA VIKINGOS

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales. DIRECCIN DE NORMALIZACIN

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

MICROBIOLOGA DE ALIMENTOS Y ALIMENTO PARA ANIMALES. MTODO HORIZONTAL DE TCNICAS DE MUESTREO DE SUPERFICIES USANDO CAJAS DE CONTACTO Y METODO DE ESCOBILLN

0.

INTRODUCCIN

Esta norma especifica un mtodo horizontal para la determinacin del nmero de microorganismos viables en las superficies de utensilios, superficies de trabajo y otros equipos en contacto con alimentos para conocer el nivel de contaminacin durante la produccin o la efectividad de los protocolos de limpieza y desinfeccin. Este mtodo horizontal describe ambos, el mtodo de contacto de superficies usando contacto con caja o el mtodo de lminas de inmersin o de escobilln hmedo o seco o enjuague. El mtodo de contacto de cajas es solo aplicable a superficies planas, mientras que el mtodo de escobilln (hmedo y seco) puede ser usado para cualquier tipo de superficies. Para una muestra de superficies extensas (> 100 cm2 paos o esponjas) pueden ser utilizadas paos o esponjas. Los mtodos alternativos prescritos en este estndar son mtodos tiles para la estimacin de la carga microbiana de las superficies. Los resultados son muchas veces presentados como puntajes de calificacin de higiene, basados en el nmero de UFC (Unidad Formadora de Colonias) x cm2 presentado en un test de superficies. 1. OBJETO

Esta norma especfica un mtodo horizontal para la enumeracin de microorganismos viables en superficies con contacto de placas, lminas de inmersin y escobillones (trapo o esponja). 2. REFERENCIAS NORMATIVAS

Los siguientes documentos referenciados son indispensables para la aplicacin de esta norma. Para referencias fechadas, se aplica nicamente la edicin citada. Para referencias no fechadas, se aplica l ltima edicin del documento referenciado (incluida cualquier correccin) . NTC 4092; Microbiologa de Alimentos y de Alimentos para Animales. Reglas Generales para el Anlisis Microbiolgico. (ISO 7218:1996), ISO 4832:1991, Microbiology. General Guidance for the Enumeration of Coliforms. Colony Count Technique. 1

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

ISO 4833:1991, Microbiology. General Guidance for the Enumeration of Micro-Organisms. Colony Count Technique at 30 C ISO 6887-1:1999, Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. Preparation of Test Samples, Initial Suspension and Decimal Dilutions for Microbiological Examination. ISO 6888-1:1999, Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. Horizontal Method for the Enumeration of Coagulase-Positive Staphylococci (Sr species). Part 1: Technique Using BairdParker Agar Medium ISO 6888-2:1999, Microbiology of Food And Animal Feeding Stuffs. Horizontal Method for the Enumeration of Coagulase-Positive Staphylococci (Staphylococcus Aureus and other Species). Part 2: Technique Using Rabbit Plasma Fibrinogen Agar Medium ISO 7402, Microbiology. General Guidance for the Enumeration of Enterobacteriaceae without Resuscitation. MPN Technique and Colony-Count Technique. ISO 7218:1996, Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. General Rules for Microbiological Examinations ISO 7954:1987, Microbiology. General Guidance for Enumeration of Yeasts and Moulds. Colony Count Technique at 25 C 3. TRMINOS Y DEFINICIONES

3.1 cajas de contacto cajas plsticas servidas con un volumen de agar controlado especialmente elaborados para muestras de superficies, las cajas varan en dimetro acorde al producto. 3.2 lminas de inmersin lminas sintticas, uno o ambos lados (7 cm2 x 10 cm2 ) cubiertas con una capa de un medio de crecimiento slido. Varios medios de crecimiento estn disponibles acorde al microorganismo buscado. 3.3 escobilln barra delgada (estril) con algodn o material sinttico (alginato), escobilln contenido en un tubo o envuelto. 3.4 tela o pao hmedo, es de material estril entretejido, libre se sustancias antimicrobianas, empacado individualmente en bolsas plsticas estriles, usado para toma de muestras de superficies largas (> 100 cm2). 3.5 esponja hmeda, cuadro estril de esponja plana, libre de sustancias antimicrobianas, tambin empacado individualmente en bolsa plstica estril, usado para toma de muestras de superficies largas (> 100 cm2). 2

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

4.1 Para obtener un estimativo de contaminacin microbiana de una superficie usando cajas de contacto o mtodo de escobilln se requiere seguir los siguientes pasos: 4.2 Una caja de contacto (o lmina de inmersin) con el medio agar apropiado, es presionado contra la superficie a analizar. Despus de la incubacin una estimacin de contaminacin de la superficie puede ser obtenida por el conteo del nmero de colonias desarrolladas. Debido a que estos mtodos no son cuantitativamente dignos de confianza o de resultados reproducibles, podran solo ser usados en un anlisis de tendencia. 4.3 Usando el mtodo del escobilln para examinar un rea especfica marcada de superficie (por ejemplo usando una plantilla) y despus de frotar para tomar la muestra. Las barras de los escobillones se rompen dentro de un tubo o botella que contiene un fluido en dilucin estril o lquido neutralizante y luego se mezcla manualmente. Si la superficie es enjuagada con un pao o esponja estril, el dispositivo de muestreo es almacenado en un lquido de volumen de dilucin conocida, (100 ml x 100 cm2). En el laboratorio, se utiliza la suspensin inicial y si es necesario, diluciones decimales (1ml, 5 ml y 10 ml de diluyente), para determinar el nmero de microorganismos, usando los procedimientos descritos en los mtodos para la enumeracin de (grupos) microorganismos a ser investigados. 4.4 El tiempo y temperatura de incubacin depende del tipo de microorganismo a ser detectado. 4.5 Para medios selectivos, se pueden realizar las pruebas de confirmacin apropiadas. El nmero de Unidades Formadoras de Colonia (UFC) de un microorganismo especfico por cm2 o por objeto, es calculado del nmero de colonias (confirmadas).
NOTA Estos mtodos no son cuantitativamente confiables o reproducibles y sus resultados solo pueden ser usados en n anlisis de tendencias.

4.6 Luego de tomar la muestra de la superficie, puede hacerse la limpieza y desinfeccin para prevenir el aumento de la contaminacin cmo resultado del procedimiento de muestreo. 5. 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 MEDIOS DE CULTIVO Y LQUIDOS DE DILUCIN Agar Plate Count, ISO 4833 y si es requerido. Agar Rojo Violeta Bilis Dextrosa, ISO 7402 y si es requerido. Agar Rojo Bilis Violeta, ISO 4832 y si es requerido. Agar Oxitetraciclina Huevo Glucosa (OGY), ISO 7954 y si es requerido. Agar Baird Parker, ISO 6888-1 y 6888-2.

O cualquier otro medio de cultivo conocido para enumeracin o enriquecimiento de (grupos) microorganismos. 5.6 5.7 Lquidos de dilucin, vase la norma ISO 6887-1 Lquidos neutralizantes, vase el numeral 7. 3

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

Para los requerimientos generales. Vase la norma ISO 7218.

Aparatos disponibles son una alternativa aceptable a cristalera reutilizable si este tiene especificaciones similares. Los aparatos usuales del laboratorio de microbiologa y, en particular, los siguientes: 6.2 Aparatos para esterilizacin en seco (horno) o esterilizacin hmeda (autoclave)

Vase la norma ISO 7218. 6.3 Incubadoras, capaces de operar en la temperatura de incubacin para los (grupos de) microorganismos a ser investigados (25 C 1 C, 30 C 1 C, 37 C 1C). 6.4 Baos de agua, o aparatos similares, una capacidad de operar entre 44 C a 47 C y otro capaz de hervir agua. 6.5 Ph -metro, capaz de ser ledo a la unidad cerca de 0,01 pH a 25 C 1 C, posibilitando la medicin a ser hecha, la cual es precisa a 0,1 unidad pH. 6.6 Stomacher o Pulsifier, usando bolsas plsticas estriles para preparar las suspensiones iniciales por movimiento peristltico ( Stomacher) o vibracin (Pulsifier). 6.7 Mezclador vortex, para mezclar lquidos en tubos de cultivo.

6.8 Pipetas graduadas, con amplia capacidad de abertura y una capacidad nominal de 1 ml, graduadas en divisiones de 0,1 ml, o pipetas automticas de 100 l o 1 000 l. 6.9 Contenedores, como botellas, tubos, frascos, disponible para esterilizacin y almacenamiento de medios de cultivo. 6.10 6.11 6.12 6.13 Cajas de Petri, elaboradas en plstico de 90 mm a 100 mm. Lminas de inmersin, cubiertas con medio ya descrito (vanse los numerales 5.1 a 5.5). Cajas de contacto, de plstico y con medio ya descrito (vanse los numerales 5.1 a 5.5). Escobillones, paos o esponjas, individualmente envueltas y estriles.

6.14 Plantilla, con material resistente a corrosin (por ejemplo un marco en acero inoxidable de 20 cm2 a 100 cm2), las cuales son fciles de limpiar y pueden esterilizarse. 6.15 Nevera o caja con aislamiento, capaz de mantener las muestras entre 1 C y 4 C durante el transporte al laboratorio. 7. 7.1 MUESTREO GENERAL

Es importante que le laboratorio reciba una muestra representativa de la superficie a analizar y que esta muestra no haya sido cambiada por residuos de desinfectantes o durante el transporte o almacenamiento. 4

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

Los desinfectantes son generalmente formulados para una desinfeccin en un tiempo de contacto de 5 min a 15 min, esperar 15 min antes de investigar la superficie con escobilln o cajas de contacto, para avaluar el desempeo del programa de limpieza y desinfeccin (o de otro modo, acorde a las especificaciones del desinfectante). En todos los casos donde se esperan residuos de desinfectantes, pueden aadirse neutralizantes apropiados al lquido de dilucin y al medio usado en las cajas de contacto, para prevenir cualquier efecto inhibitorio del desinfectante en el crecimiento del microorganismo. Un neutralizante apropiado para toda situacin puede no ser descrito. Generalmente, el Tween 80 (30 g/l) y la Lecitina (3 g/l) son usados para neutralizar residuos de desinfectantes absorbidos (componentes de amonio cuaternario, anfotericidas). El tiosulfato de sodio (5 g/l) es un buen neutralizante de productos con base halgena. En el caso del perxido usado en desinfectantes, la catalasa o peroxidasa pueden ser usados como neutralizantes. Una unidad de estas enzimas cataliza la descomposicin de 1 mol de perxido de hidrogeno por un minuto a 25 C y a un pH de 7. La frmula para neutralizantes universal es:
Tween 80 (Polisorbato 80) Lecitina Tiosulfato de sodio L-histidina Saponina 30 g/l 3 g/l 5 g/l 1 g/l 30 g/l

Preparar en lquido de dilucin (peptona 1g/l, NaCl 8,5 g/l), distribuir en tubos o botellas y esterilizar 15 min a 121 C. 7.2 MTODO DE CAJA DE CONTACTO

Despus de remover de los contenedores de transporte, presionar la superficie del agar de la caja de contacto o de la lmina firmemente y sin cualquier movimiento lateral contra la superficie analizada. La literatura dice que resultados ptimos de las cajas de contacto son obtenidos con un tiempo de contacto de 10 s y una presin de 500 g. (para cajas RODAC de un dimetro de 55 mm tienen un aplicador comercialmente disponible). Cerrar la caja de contacto o lminas inmediatamente despus de la inoculacin y poner en el contenedor de transporte. 7.3 MTODO DE ESCOBILLN

Remover un escobilln de la envoltura y humedecer la punta por inmersin en el tubo que contiene el lquido de dilucin. Presionar la punta del escobilln contra la pared del tubo para remover el exceso de agua. Ubicar la punta del escobilln en la superficie para ser investigada y una lnea del rea estimada de 20 cm2 a 100 cm2, mientras que se rota el escobilln entre el pulgar y el dedo ndice en dos direcciones en sentido derecho uno al otro. Poner el escobilln en el tubo con el lquido de dilucin y romper o cortar el lmite indicado del palo aspticamente. En caso de paos o esponjas, abrir el paquete plstico que contiene la esponja o pao. Remover el pao o esponja con pinzas estriles o guantes estriles y enjuagar como se describi antes. Devolver al paquete plstico y cerrar de manera que quede sin agujeros. 5

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

Otra alternativa es abrir el paquete que contiene la esponja o pao; apretar la esponja o pao a travs de la bolsa sobre la mano. Use la esponja para recoger la muestra y transferir al pao o esponja en una bolsa plstica estril, cerrar la bolsa de manera que no queden agujeros. Frotis con siembra directa: Utilizar aplicadores o hisopos de algodn estriles para realizar el frotis o toma de muestra en la superficie. [2] Una vez tomada la muestra, sembrar con el hisopo o aplicador en la superficie del agar, segn el tipo de microorganismo o analito objetivo de la bsqueda. Para el transporte de los aplicadores es importante tener en cuenta el numeral 8. 8. TRANSPORTE

La siembra de las muestras obtenidas por el mtodo de escobilln debe realizarse preferiblemente dentro de las 4 h siguientes a la toma de muestra. Se debe igualmente transportar en una caja o nevera de icopor a una temperatura entre 1 C a 4 C. Examinar en el laboratorio tan pronto como sea posible y no despus de 24 h. El transporte de cajas de contacto y/o lminas preferiblemente con 4 h en una va donde no ocurra contaminacin. 9. 9.1 PROCEDIMIENTO MTODO DE CAJA DE CONTACTO

Incubar las placas o lminas de acuerdo al tipo de microorganismo a ser detectado. 9.2 MTODO DE ESCOBILLN (INCLUYENDO ESPONJA O PAO)

Mezclar el contenido del tubo que tiene los escobillones en el mezclador vortex por 30 s, ajustando la velocidad para que la pared del tubo quede humedecida arriba a una altura de 2 cm a 3 cm debajo de la tapa. Esto representa la suspensin inicial. Aadir a la bolsa plstica que contienen los paos o esponjas, una cantidad de lquido de dilucin o lquido neutralizante, dependiendo del tamao del rea a investigar (100 ml x 100 cm2). Despus de esto, tratar al contenido de la bolsa en un Stomacher por 1 min o pulsifier por 30 s, esto representa la suspensin inicial. Si se presume de nmeros elevados de microorganismos , preparar otras diluciones decimales en diluyente agua peptonada para obtener un nmero de colonias contables. De acuerdo a la enumeracin de mtodos utilizados (vanse las normas ISO apropiadas), inocular por duplicado en las cajas con medio la dilucin inicial, usando un 1 ml de inoculo para servir las cajas y 0,1 ml de inoculo para tcnicas de difusin. Tratar cualquiera de las otras diluciones de la misma manera; Invertir las cajas e incubarlas a una temperatura y tiempo adecuado para cada medio. 6

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

Otro mtodo utilizado puede ser el mtodo de Goteo (DIN 10113-2). Comenzando con la dilucin ms alta, usar pipetas estriles para transferir alicuotas de 0,05 ml de la suspensin inicial (escobillones, esponjas o paos) y de las otras diluciones a sectores apropiados del medio de cultivo marcado en el centro de la placa de agar ( por duplicado, usando las mismas diluciones pero en diferente placa de agar) cada pre-secado de la placa de agar puede ser usado por goteo de no ms de 6 diluciones diferentes. Cuando el goteo es aplicado, es conveniente tocar la punta de la pipeta en la superficie del agar en orden de transferencia de una cantidad completa de la dilucin al medio de cultivo. Guardar las placas de agar horizontalmente (tapa arriba) bajo una superficie hmeda. Si el mtodo de escobilln es usado para demostrar la presencia de microorganismos especficos (Lysteria monocytogenes o Salmonella spp), el rea investigada podra ser preferiblemente de no menos de 1 000 cm2. Transferir el escobilln, pao o esponja a un medio de enriquecimiento y mezclar bien. 9.3 SELECCIN Y CONTEO DE COLONIAS

9.3.1 Mtodo de placa de contacto Contar el nmero de (especfico) colonias en las placas de contacto o lminas directamente despus del periodo de incubacin especificado y confirmar este, si es necesario, acorde a el microorganismo(s). 9.3.2 Mtodo de escobilln (esponja o pao) Contar las colonias de cada caja y confirmar si es necesario, acorde al microorganismo(s). 9.3.3 Mtodo de goteo en placa Contar el nmero de colonias (blanco) a las diluciones producidas de 5 colonias a 50 colonias. 9.3.4 En el caso de procedimientos de enriquecimiento, seguir las instrucciones despus de pre- enriquecimiento acorde al microorganismo(s). 10. 10.1 CLCULO Y EXPRESIN DE RESULTADOS MTODO DE CAJA DE CONTACTO

Dividir el nmero de (blanco) colonias por el rea de la superficie de la placa, Reportar el recuento como UFC x cm2 de superficie. 10.2 MTODO DE ESCOBILLN (ESPONJA O PAO)

10.2.1 Calcular el nmero de UFC x ml de suspensin inicial, como se describe en la norma ISO estndar. (Vase el numeral 5).

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

10.2.2 Calcular el nmero de UFC por cm2 de superficie investigada con la frmula:

N x F x D A

en donde N F A D es el nmero de UFC en 1 ml de lquido de dilucin (lquido de inactivacin) es la suma (ml) de lquido de dilucin (liquido de inactivacin) en el tubo o bolsa. es la superficie investigada (cm ) es el reciproco de la dilucin usada.
2

10.2.3 Para el mtodo de goteo, calcular el nmero de N de UFC/ml del lquido de suspensin usando la frmula.
N =

V (n1 + 0,1 x n2 )d

en donde

C
V
n1 n2

es la suma de colonias contadas en todas las gotas retenidas de dos diluciones sucesivas de 1 de la menor que contenga cinco colonias.

= = = =

volumen de inoculo aplicado en cada gota ( en este caso 50 l). nmero de gotas retenidas en la primera dilucin. nmero de gotas retenidas en la segunda dilucin. factor de dilucin correspondiente a la primera dilucin.

Para obtener el conteo/cm2 de superficie, usar la frmula:

N x F A

en donde F A es el volumen del lquido de dilucin ( o lquido neutralizante) en el tubo o bolsa. es el rea de muestreo / cm
2

10.2.4 Si el rea analizada no es definida, usar la frmula N x F x D para calcular el nmero de UFC / escobilln.

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

Cuando los mtodos semicuantitativos son usados, el resultado obtenido en UFC/cm2 de superficie puede ser llamado tambin nmero higinico. Estos pueden variar dependiendo de las superficies examinadas es recomendable que estos sean designados y agregados entre las partes interesadas. 10.2.5 En el caso de procedimientos de enriquecimiento, reportar el organismo blanco tanto detectado como no detectado en el rea muestreada. Expresin de resultados para el mtodo de Frotis con siembra directa Se reporta como ausencia / presencia del microorganismo patgeno objeto de la bsqueda por elemento evaluado (ejemplo cuchara, cuchillo, etc) o rea de la superficie evaluada. Cuando se presume de recuentos inferiores a 10 UFC para los casos de aislamiento de microorganismos mesfilos ,coliformes totales, mohos y levaduras, se debe reportar las unidades encontradas por elemento o rea de la superficie evaluada. Si el objeto de la bsqueda lo requiere posteriormente realizar la identificacin correspondiente.

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230
BIBLIOGRAFA

[1]

EN 1276, Chemical Desinfectans and Antiseptics. Quantitatice Suspensin Tests for the Evaluation of Bactericidal Activity of Chemical Desinfectants and Antiseptics Used in the Food, Industrial, Domestic and Institutional Areas. Test Methods and Requirements Phase 2, Step 1. Manual operativo de anlisis microbiolgicos para alimentos, Cortes Luna Gilma Janeth M.Sc. Laboratorio de Control de Calidad de Alimentos, edicin 91. Pg. 124 y 125.

[2]

10

NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5230

INTERNATIONA ORGANIZATION FOR STANDARIZATION. Microbiology of food and Animal Feeding Stuffs- Horizontal Method for Sampling Techniques From Surfaces Using Contact Plates And Swab Methods. Gneve: ISO, 2002 8 p, (ISO/DIS 18593).

11