Faculté de

Pharmacie d’Alger
Laboratoire
d’Immunologie

LYMPHOCYTES T
Plan

I. Introduction
II. Ontogénèse
III. Phénotype
 IV. Activation V.
Fonctions VI.
Explorations

I. Introduction

Système immunitaire:
⇒ Ensemble d’organes, cellules, tissus et molécules qui interagissent
ensemble. ⇒ Fonctions: Protéger l’organisme contre les agressions extérieures
et intérieures.
 I. Introduction

Système immunitaire:
⇒ Immunité innée
⇒ Immunité adaptative
 • Complément : VA / VL
• Cellules cytotoxiques :
I. Introduction NK
Immunité innée:
• Barrières cutano-muqueuses
• Cellules phagocytaires : PNN, Ma
 Reflète l’action des :
•LT: Réponse immunitaire cellulaire •LB:
Immunité adaptative : Réponse immunitaire humorale

I. Introduction
🡺Sont impliqués dans l’immunité à médiation cellulaire
🡺Transmissibles par les cellules lymphoïdes et non le sérum
🡺Comprenant l’immunité cellulaire vis-à-vis : ▪Agents
bactériens
▪Agents viraux
▪Rejet de greffe (immunité d’allo greffe)
▪Rejet des tumeurs (immunité anti tumorale)
▪Réactions d’ hypersensibilité retardée

II. Ontogenèse
 Rappel sur le Thymus
II. Ontogenèse
⇒ Organe lympho-épithélial, bilobé
⇒ Situé dans la partie supérieure du
médiastin antérieur au dessus du cœur
et des gros vaisseaux

⇒Constitué de deux
lobes
⇒Chacun d’eux est
divisé en lobules par
des travées de tissu
conjonctif appelées
trabécules. Un compartiment externe dense => cortex ;
⇒Chaque lobule est
organisé en deux
compartiments:
Un compartiment interne plus clair =>
médullaire.
Rappel sur le Thymus
 contient LT immatures
(90 - 95 %)
logés dans une trame de
cellules épithéliales
spécialisées appelées
cellules nourricières, ou «
nurse cells », qui ont une
forme étoilée avec de
longues extensions
membranaires.

La médullaire
contient des thymocytes
plus matures (5 - 10 %)
sont en contact avec des
cellules épithéliales
regroupées en structures
arrondies appelées
corpuscules de Hassal,
des cellules dendritiques
et des macrophages.

Le cortex
 II. Ontogenèse
Deux étapes:

Maturatio
n
Sélection
Maturation des LT
Les précurseurs des LT pénètrent dans le thymus au niveau de la jonction
cortico-médullaire, migrent à travers le cortex vers la zone sous-capsulaire :
commencent à proliférer et à se différencier.

Au cours de la maturation : LT migrent du cortex 🡺 médullaire passent par

différents stades de différenciation.

Maturation des LT
 Cellule pro-T
Thymocyte double-négatif CD4- et CD8-
Thymocyte double-positif CD4+ et CD8+
Thymocyte simple positif CD4+ ou CD8+
Lymphocyte T mature.

Apparition/Disparition des marqueurs de surface

Réarrangement des gènes et expression du TCR

Sélection des LT
⇒ Contrairement aux lymphocytes B qui reconnaissent
l’antigène natif, les lymphocytes T ne reconnaissent que des
peptides issus du processing de l’antigène et présentés par
une molécule de CMH sur une cellule présentatrice
d’antigène.

⇒ Cette capacité de reconnaissance est acquise au cours de

la maturation intra-thymique où les thymocytes subissent une
double sélection :

Sélection Positive

Sélection Négative

Sélection Positive
⇒S’effectue dans la région corticale.
⇒ Implique l’interaction des thymocytes immatures double-positifs (CD4+, CD8+) et
les cellules épithéliales corticales.
⇒ Permet la survie des thymocytes exprimant des TCR capables de se lier aux
molécules du CMH du soi.
⇒Il en résulte une restriction au CMH : les LT sélectionnées ne sont capables de
reconnaitre les peptides antigéniques que dans le contexte des molécules du CMH.
 Sélection Négative
🡺Permet l’élimination par apoptose des thymocytes portant des TCR de haute affinité pour les
peptides du « soi »: la capacité de distinguer le soi du non soi (auto-tolérance). 🡺S’effectue au niveau
de la médullaire.
🡺Implique l’interaction des thymocytes double-positifs (CD4+, CD8+), des cellules dendritiques et des
macrophages qui portent les molécules de classe I et II du CMH.
 Au terme de la
sélection thymique, seuls 5% environ, des thymocytes seront exportés vers la périphérie.

Rôle du thymus dans la réponse immunitaire

Le rôle du thymus mis en évidence par les expériences de
thymectomie (Miller 1960): ⇒ L’ablation du thymus
–thymectomie- dans les 24 heures qui suivent la naissance,
entraîne un déficit immunitaire majeur et durable:
▪ Diminution du nombre des LT circulants (sang)
 ▪ Dépeuplement des aires T dépendantes dans la rate et les ganglions
▪ Des anomalies de l’immunité cellulaire apparaissent: Rejet de greffe de peau, HSR,… ▪
Des anomalies de l’immunité humorale : production de certains anticorps (Ag
T-dépendants) ⇒ Si l’on procède à une greffe thymique , on restaure ce type de
réponse.

Rôle du thymus dans la réponse immunitaire En pathologie humaine:

⇒au cours du syndrome de Di George (aplasie ou hypoplasie thymique congénitale):
Absence de LT circulants et d’immunité à médiation cellulaire, avec comme
 conséquence, une augmentation de la fréquence des maladies infectieuses.
⇒Le traitement, par greffe de thymus, du nouveau né atteint de ce syndrome restaure
la compétence immunitaire.

um ▪Rapport N/C: ↑↑

III. Phénotype
▪Cellules arrondies: 8-12
Morphologie

▪Cytoplasme:

petit,

basophile,

quelques

granulations

Neutrophils
azurophies Eosinophil
 Lymphocyte

Basophiles
Monocyte

III. Phénotype
Morphologie
▪Cellules arrondies: 8-12
um ▪Rapport N/C: ↑↑

▪Cytoplasme: petit, basophile, quelques granulations azurophies

 III. Phénotype
Répartition tissulaire
 III. Phénotype

LT LB NK
 BCR

TLR4
IgM de surface
CD79a
NKG2D
CD21 CD79b

CD19
IgD de surface TLR1
KIR CXCR1
.

CD56 TLR2

CD40
CD16

CMHII

γc

B7-1 TLR1 TLR6 IL2Rβ

B7-2
CD94/
NKG2A
CXCR5
NOYA U

2
NK
CMH I
PSGL-1

III. Phénotype
Ligand spécifique LFA-3
Exprimé en grande
densité sur les GR
moutons

III. Phénotype
III. Phénotype
 Structure du TCR

▪ Marqueur des LT par

excellence.
▪Glycoproteine, composée
de deux chaines
polypeptidiques liées par un
pont disulfure.

▪Le TcR est associé de façon

non covalente à la molécule
CD3 → transduction du
signal.

III. Phénotype
Mode de
reconnaissance du TCR
Les LT αβ reconnaissent un peptide antigénique fixé dans une poche d’une molécule codée par le
complexe majeur d’histocompatibilité (CMH) → deux classes de molécules CMH.
Niche contenant
un peptide
 HLA classe I HLA classe II
Cellules dendritiques, Toutes les cellules nucléées de l’organisme →cellules cibles
Monocyte/macrophage et LB → CPA

Interactions moléculaires

stabilisant le complexe TcR-peptide-CMH

Origine du peptide présenté

• CMH I – CD8(CTL)

Ex: issue d’une bactérie extra-cellulaire

Endogène
Ex: issue de protéine virale

• CMH II – CD4 (Th) Exogène

III. Phénotype
Principales sous population des LT

III. Phénotype
 Principales sous population des LT

CD4 CD8
Chaine polypeptidique Hétérodimére αβ
Organisée en Organisée en
▪Domaine extra cellulaire : 4 ▪Domaine extra cellulaire : 1
domaines IgLike domaines IgLike
▪Domaine transmembranaire ▪Domaine transmembranaire
▪Domaine intra ▪Domaine intra cytoplasmique
cytoplasmique
Principales sous population des LT
LTCD4+: Cellules auxiliaires => une fonction régulatrice d’amplification des RI grâce à une
capacité de production de grande quantité de cytokines
LTCD8+: LT effecteurs cytotoxiques

III. Phénotype
Synapse immunologique
Organes lymphoïdes primaires =
 site de développement des
lymphocytes .

Organes lymphoïdes secondaires

= site de réponse aux Ag
étrangers .

Tissu non lymphoïde

IV. Activation
 LB mémoire
12

LT CD4+
CPA CMHII + Ag
spécifique LB spécifique
plasmocyte

hlaII
IL2, 4,5, 6
Ag
Prolifération Différentiation

Signaux
costimulateurs
-Par contact

3 Activation LT CD4+
spécifique au
- par les cytokines
IL2

IL2R
repos Induction de
hlaI spécifique LT CD8+ Cellule cible
LT CD4+ spécifique
l’IL2 et IL2R
au repos

IL2

Différenciationapoptose
LT CD8+
spécifique cytotoxique
Prolifération

IV. Activation
Signal 1: Reconnaissance
Signal 2: Co--stimulation
Signal 3: IL---IL2R
CD25
Chaine α du R-IL2

CTLA-4 (CD152)
Ligand du CD80/86

IV. Activation Profil

d’activation
 CD29
NOYA
U

CD40L (CD154)
Récepteur du CD40: Switch

Module le signal d’activation

CMH II CD45Ro
 V. Fonctions

LT CD4+ LT CD8+
auxiliaires cytotoxiques
▪Joue un rôle fondamental ▪Principaux effecteurs de la RI
dans l’initiation et le dvp des RI cellulaire
adaptatives. ▪2 catégories de lymphocytes
▪Fonction principale est la cytotoxiques:
production des cytokines ⇒ NK: I. innée
LT CD4+ ⇒ CTL: I. adaptative

LT CD8+

V. Fonctions
 LT CD4+ auxiliaires
Différentiation:
LTCD8+🡺CTL
Réponse immunitaire
cellulaire

Différentiation:
LB🡺Pc
Réponse immunitaire
humorale

Inflammation

Régulation de la RI
Différenciation des CD4 et contrôle de la réponse immune
 V. Fonctions LT CD4+
auxiliaires

Défenses de l’hôte
(Pathogènes intracellulaires) Autoimmunité

Défenses de l’hôte
(Parasites)
Allergie
Asthme

Défenses de l’hôte
(Pathogènes extracellulaires) Inflammation
Autoimmunité

Différenciation des CD4 et contrôle de la réponse immune

V. Fonctions
LT CD4+ auxiliaires
 V. Fonctions
LT CD8+ cytotoxiques
Impliqués dans l’immunité à médiation cellulaire :
▪Agents bactériens et viraux
▪Le rejet de greffe
▪Le rejet des tumeurs
▪Les réaction d’hypersensibilité retardée
Immunité cellulaire

Type cytotoxique Type HSR LT CD8+ LT CD4+

 Cellule infectée multiplication
par un virus intra-cellulaire

INFγ, TNFα
LT CD8+
cytotoxique

Macrophage infecté par un germe à

LT CD4+

Th1
HLAI
Activation Ma
cytotoxicité
 Production de dérivés
oxygénés /NO

Apoptose
Perforine
↑ ↑ de l’activité microbicide

granzyme

Immunité cellulaire

Type cytotoxique

Type HSR
▪ CTL 🡺 effecteurs ▪ Efficace contre les Ag
intracellulaires (les virus) ▪ LTh1 et macrophages 🡺 effecteurs ▪
▪ Les CTLs activés détruisent Efficace contre les Ag intracellulaires
directement la cellule cible qu’ils ont (bactéries intracellulaires exp : tuberculose,
reconnue en induisant la lyse cellulaire lépre, paludisme)
▪ les cytokines Th1 INFγ,TNFα amplifient
l’activité microbicide du macrophage

Fas/FasL

T
CD8+ T CD4+

Th1

Perforines INFγ,TN Fα
granzymes
 V. Exploration

Lymphocytes : 20-30% des leucocytes (FNS) => 1500-4000

c/ml 🡺Lymphopénie < 1500 c/ml

🡺Lymphocytose > 5000 c/ml

V. Exploration

Etude quantitative Etude qualitative

Numération cellulaire Tests fonctionnels
 V. Exploration

Etude quantitative
Technique de cytométrie en flux

Intérêt: Diagnostic des déficits

immunitaires qualitatifs ou
quantitatifs
Marqueur de surface spécifiques:
TCR, CD3, CD4 ou CD8
Principe: Etude des cellules isolées
entrainées par un fluide liquide
Permet d’isoler individuellement les
cellules, à grande vitesse et avec
précision
 V. Exploration Etude

qualitative Tests
fonctionnels
Activateur non lymphocytes
spécifique
Activation
(ex mitogène)
CD40L CD25

Marqueurs
d’activation
Antigène
spécifique
(ex tuberculine)

stimulus HLA-II CTLA-4

CMN ou
 Cytométrie en flux

Prolifération
Test de transformation
lymphoblastique

Cellules
allogéniques
Numération
IFNγ

Différentiation

Tests de cytotoxicité
(relargage du chrome) Dosage des cytokines
CTL LTh1
TEST DE CYTOTOXICITE
▪Permet d’évaluer la réponse cellulaire des LTCD8 en utilisant l’isotope
radioactif
▪ Cr51 : a le pouvoir de rentrer dans les cellules vivantes et d’être relargué
par les cellules lysées sous une forme trivalente, laquelle n’est pas ré
incorporable. ▪ La cytotoxicité est appréciée, par mesure de la radioactivité
dans un compteur à scintillation Béta.