Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 105

Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111

ISSN: 1410-8917
/=/jurnal Kimia
[ Y- Sains &
Aplikasi
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi
Journal of Scientific and Applied Chemistry
e-ISSN: 2597"9914
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa

Potensi Senyawa Antibakteri dari Ekstrak Akar Manis ( Glycyrrhiza

glabra L) terhadap Bacillus cereus
Sogandi3*, Wan Syurya Tri Darma3, Raudatul Jannah3
a Fakultas Farmasi, Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta, Jalan Sunter Permai, Sunter, Jakarta Utara 14356, Indonesia

* Corresponding author: [email protected]

https://doi.0rg/10.1 A7io/jksa.?.?,./i..105 -111

Article Info Abstract

Article history: Title: Potential of Antibacterial Compounds from Sweet Root Extract (Glycyrrhiza
glabra L) on Bacillus cereus
Received: 18 February 2019
Revised: 7 May 2019 The high number of poisoning food and diarrheal diseases caused by Bacillus cereus
Accepted: 13 May 2019 bacteria has been treated with chemical drugs and traditionally herbal plants. One of
Online: 31 July 2019 the commonly used herbal plants is sweet root (Glycyrrhiza glabra L.). This study aims
Keywords: to extract and fractionate sweet root plants, determine the antibacterial activity and
Antibacterial; Bacillus identify the types of bioactive compounds as antibacterial compounds. The extraction
cereus; bioactive; process uses a maceration technique and fractionation using buthanol, ethyl acetate,
Glycyrrhiza glabra L; sweet and hexan solvents. Antibacterial activity was carry out by the diffusion method and
root identification of bioactive compounds by GCMS analysis. This study showed that
greatest antibacterial activity was found in ethyl acetate fraction with a strong
category and MIC value of 12,5%. This study for the first time also revealed that the
types of bioactive compounds from sweet root plants (Glycyrrhiza glabra L.) as
antibacterial compounds are n-Hexadecanoic as a fatty acid group and 4H-Pyran 4-
one 2.3 dihydro-3, 5-dihydroxy-6 methyl from the flavonoid group.

Abstrak

Kata Kunci: Tingginya angka keracunan makanan dan penyakit diare yang disebabkan oleh bakteri
Akar manis; Antibakteri; Bacillus cereus selama ini ditangani dengan obat kimia dan secara tradisional
Bacillus cereus; Bioaktif; menggunakan tanaman herbal. Salah satu tanaman herbal yang biasa digunakan
Glycyrrhiza glabra L. adalah tanaman akar manis (Glycyrrhiza glabra L.). Penelitian ini bertujuan untuk
mengekstraksi dan melakukan fraksinasi tanaman akar manis, mengetahui aktivitas
antibakteri ekstrak akar manis, serta mengidentifikasi jenis senyawa bioaktif yang
diduga berperan sebagai senyawa antibakteri. Proses ekstraksi menggunakan teknik
maserasi kemudian difraksinasi bertingkat menggunakan pelarut butanol, etil asetat,
dan heksan. Aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi agar dan identifikasi
senyawa bioaktif dilakukan dengan analisis GCMS. Hasil penelitian menunjukkan
aktivitas antibakteri terbesar terdapat pada fraksi etil asetat dengan kategori yang
kuat dan memiliki nilai KHM 12,5%. Penelitian ini juga untuk pertama kalinya
mengungkapkan jenis senyawa bioaktif dari tanaman akar manis (Glycyrrhiza glabra
L.) yang berperan sebagai senyawa antibakteri adalah adalah n -Hexadecanoic acid yang
merupakan golongan asam lemak dan 4H-Pyran 4- one 2,3 dihydro-3,5-dihydroxy-6
methyl dari golongan flavonoid.
 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 106

1. Pendahuluan tanaman akar manis telah banyak dilakukan, namun

penelitian tentang identifikasi jenis senyawa aktif dari
Makanan merupakan kebutuhan dasar bagi
hasil fraksinasi ekstrak akar manis (Glycyrrhiza glabra L.)
kehidupan manusia. Kasus keracunan makanan dan
sebagai penghambat pertumbuhan bakteri Basillus cereus
penyakit infeksi disebabkan makanan cenderung
belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk
meningkat. Hasil laporan WHO pada tahun 2004 diare
mengekstraksi dan melakukan fraksinasi ekstrak
telah menyerang 4 miliar penduduk di dunia dan
tanaman Akar manis, mengetahui aktivitas antibakteri
membunuh sekitar 2,2 juta jiwa, angka tersebut
terhadap pertumbuhan Basillus cereus, dan
meningkat hingga mencapai 61% di tahun 2009. Hasil
mengidentifikasi jenis senyawa bioaktifnya sebagai
laporan BPOM mengenai kejadian luar biasa (KLB)
antibakteri.
keracunan pangan di Indonesia tahun 2007 sampai
dengan 2011 menemukan bakteri Bacillus cereus
menempati urutan kedua setelah Stapylococus aureus
2. Metode Penelitian
sebagai bakteri patogen penyebab kejadian luar biasa 2.1. Ekstraksi Sampel
(KLB) di Indonesia [1]. Simplisia akar manis diperoleh dari BALITRO dan
Keracunan makanan merupakan penyakit yang determinasi dilakukan di LIPI. Simplisia kering disortir
disebabkan oleh mengkonsumsi makanan yang dan dipilih sampel akar manis yang bebas dari jamur
terkontaminasi oleh bakteri. Sekitar 80% penyakit yang maupun karakteristik yang kurang baik kemudian
tertular melalui makanan disebabkan oleh bakteri simplisia dicuci bersih. Simplisia yang telah bersih
pathogen [2]. Beberapa jenis bakteri yang sering dikeringkan dan dirajang membentuk potongan kecil,
menimbulkan penyakit antara lain: Staphylococcus aureus, kemudian dihaluskan membentuk serbuk [9]. Simplisia
Bacillus cereus, Clostridum perferingens, Escherichia coli, akar manis yang telah berbentuk serbuk sebanyak 2 kg
Vibrio cholera, Shigella sp, Salmonella sp, Clostridium dimaserasi menggunakan pelarut etanol dengan
difficile, Compylobacter jejuni, Yersinia entrolitica, Klebsiella perbandingan 1:5, simplisia dikocok setiap 2 jam dan
pnemontae, dan Vibrio haemolyticus [3]. Salah satu akibat dibiarkan selama 24 jam. Filtrat dan ampas kemudian
dari keracunan makanan yaitu diare. Diare merupakan dipisahkan dan dievaporator. Hasil pemisahan dengan
suatu gejala klinis dari gangguan pencernaan (usus) yang pelarut dilanjutkan dengan pemekatan dan penguapan di
ditandai dengan bertambahnya frekuensi defekasi lebih waterbath hingga ekstrak yang diperoleh menjadi lebih
dari biasanya yang berulang-ulang yang disertai adanya kental [10].
perubahan bentuk dan konsistensi feses menjadi lembek 2.2. Fraksinasi Ekstrak
atau cair [3].
Ekstrak akar manis difraksinasi secara berturut-
Basillus cereus (B. cereus) merupakan bakteri gram turut menggunakan pelarut air, n-hexan, etil asetat dan
positif , berbentuk basil atau kotak berantai panjang yang n-butanol. Diawali dengan fraksi hexan : air dimasukkan
dapat dijumpai dalam makanan seperti daging, saus, dan kedalam corong pisah hingga diperoleh fraksi hexan dan
beberapa makanan lain. B cereus adalah organisme yang fraksi air. Fraksi hexan dipisahkan, kemudian fraksi air
dapat hidup di tanah yang umumnya mencemari difraksinasi kembali menggunakan etil asetat sehingga
makanan terutama beras. Saat beras dalam jumLah besar diperoleh fraksi etil asetat dan fraksi air, fraksi etil asetat
dimasak dan dibiarkan dingin perlahan, spora dari B. dipisahkan dan fraksi air difraksinasi kembali
cereus berkecambah, dan sel vegetatif menghasilkan menggunakan butanol, diperoleh fraksi butanol dan
racun selama pertumbuhan sporulasi [4]. fraksi air. Masing-masing hasil fraksi dilakukan proses
Penggunaan obat tradisional bahan alam dalam pemekatan dengan menggunakan water bath kemudian
bentuk ekstrak menjadi alternatif pilihan masyarakat semua fraksi dibuat dalam konsentrasi 1 g/mL untuk uji
selain dari pengobatan menggunakan bahan kimia. aktivitas antibakteri [11].
Penyakit yang disebabkan oleh bakteri dapat 2.3. Uji Bebas Etanol
disembuhkan dengan menggunakan tanaman yang
Identifikasi dilakukan dengan cara ekstrak
memiliki khasiat antibakteri seperti akar manis
dilarutkan dengan H2S04 dalam tabung reaksi, kemudian
(Glycyrrhiza glabra L.). Akar manis (Glycyrrhiza glabra L)
ditambahkan asam asetat dan ditutup dengan kapas,
mengandung flavonoid liquirtin, asam glisirinat,
dipanaskan sampai mendidih selanjutnya diidentifikasi
isoliquirtin, asparagin 2%, gula 15%, amilum, protein,
bau ester pada kapas, jika ekstrak tidak mengandung
dan glisiramarin [5]. Selain sebagai antibiotik dan
etanol maka tidak tercium bau ester [12].
antibakteri dari akar manis juga memiliki potensi sebagai
pengawet makanan, sehingga keracunan makanan bisa 2.4. Skrining Metabolit Sekunder
dicegah.
2.4.1. Identifikasi flavonoid
Tanaman akar manis (Glycyrrhiza glabra L.) telah Sebanyak 1 mL sampel ditambahkan lempeng
diketahui memiliki banyak khasiat, diantaranya memiliki magnesium dan 1 mL larutan HCL pekat, 5 mL larutan
aktivitas antidepresan [6], antikanker [7], dan amil alkohol, dikocok dengan kuat, dan dibiarkan hingga
antioksidan [8]. Penelitian mengenai ekstrak dari
 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 107
memisah. Jika warna merah naik ke atas menunjukkan pada panjang gelombang 620 nm dengan menggunakan
mengandung flavonoid [13]. aquadest sebagai blanko. Nilai absorban larutan Me
Farland 0,5 di kisaran 0,08 sampai dengan 0,13. Larutan
2.4.2.Idendfikasi alkaloid baku Me Farland 0,5 ini ekuivalen dengan suspensi sel
Sebanyak 1 mL sampel ditambahkan dengan 5 mL bakteri dengan konsentrasi 1,5x10s CFU/mL [15].
asam klorida 10%, lalu ditambahkan ammonium
hidroksida dan klorofom, kemudian dikocok. Lapisan 2.7. Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
kloroform yang berada dibagian bawah diambil lalu KHM ditentukan sebagai konsentrasi terendah yang
diuapkan hingga kering. Residu ditambahkan 2 mL HC1 dapat menghambat pertumbuhan bakteri dari fraksi
2%, kemudian ditambahkan dengan pereaksi Mayer dan butanol, etil asetat, heksan, dan fraksi air akar manis.
Bouchardad. Penambahan pereaksi Mayer akan Konsentrasi sampel yang digunakan adalah 50%, 25%,
memberikan endapan warna putih dan penambahan 12,5%, 6,25%, dan 3,125%. Pengujian KHM dilakukan
pereaksi Bouchardad akan memberikan endapan dalam tabung reaksi berisi 5 mL media NB. Tabung reaksi
berwarna coklat yang menunjukkan mengandung kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
alkaloid [13]. Tabung reaksi hasil perlakuan dibandingkan dengan
tabung reaksi kontrol yang hanya berisi media NB,
2.4.3. Identifikasi saponin konsentrasi sampel dalam tabung reaksi yang kejernihan
Larutan sisa hasil percobaan identifikasi senyawa warnanya paling mendekati dengan tabung reaksi kontrol
golongan flavonoid, dikocok secara vertikal selama 10 ditetapkan sebagai nilai KHM [16].
detik, kemudian dibiarkan selama 10 menit. Apabila
2.8. Aktivitas Antibakteri
terbentuk busa dan tidak hilang, maka menunjukkan
adanya senyawa golongan saponin [13]. Kertas cakram uji yang telah steril dicelupkan ke
dalam fraksi akar manis dengan konsentrasi 1 g/mL.
2.4.4.Idendfikasi tannin dan fenolik Aquadest sebagai kontrol negatif dan antibiotik
Sampel ditambahkan dengan 3 tetes larutan FeCl3 tetrasiklin 30 meg sebagai kontrol positif dibiarkan
lalu diamati perubahan warna. Jika terbentuk warna biru selama 30 menit. Bakteri Bacillus cereus yang sudah
kehijauan maka positif tannin. Jika terjadi warna hijau, diremajakan sehari sebelumnya diambil 3 mL dan
ungu atau biru sampai hitam menunjukkan adanya diencerkan dengan 5 mL larutan NaCl 0,9%. Suspensi
fenolik [13]. diambil 3 mL dan dicampurkan dengan media NA
sebanyak 17 mL dan dituangkan ke cawan petri,
2.4.5.Identifikasi triterpenoid
didiamkan selama 15 menit, kemudian masing-masing
Sebanyak 2 mL sampel diuapkan sampai kering. kertas cakram ditempelkan pada permukaan media NA,
Residu yang diperoleh dilarutkan dalam 0,5 mL klorofom cawan petri diinkubasi pada suhu 37°C untuk selanjutnya
lalu ditambahkan dengan 0,5 mL asam asetat. dilihat dan diukur zona hambat yang terbentuk selama 24
Selanjutnya, campuran ini ditetesi dengan 2 mL asam jam pengamatan [14].
sulfat pekat melalui dinding tabung. Terbentuknya cincin
warna kecoklatan atau violet menunjukkan adanya 2.9. Analisis GCMS
triterpenoid [13]. Senyawa bioaktif dari fraksi akar manis yang
memiliki aktivitas antibakteri tertinggi dianalisis
2.5. Pembuatan Media
menggunakan GCMS (Agilent Technologies 7890) untuk
Media Nutrient broth (NB) dibuat dengan menimbang mengidentifikasi jenis metabolit sekunder yang diduga
4,16 g NB (Himedia) bubuk kemudian dilarutkan dalam bertanggung jawab dalam menghambat pertumbuhan
aquadest 320 mL dan disterilkan dengan autoklaf pada bakteri Bacillus cereus. Jenis kolomyang digunakan adalah
suhu i2i°C selama 15 menit, media didinginkan hingga HP Ultra 2. Capilarry Coloumn (30 m x 0.20 mm LD, 0.11 pm
suhu 45°C, kemudian dituang pada tabung reaksi steril
film thickness). Dengan temperatur kolom 250°C, gas
masing-masing 5 mL. Media Nutrient agar (NA) dibuat pembawa yang digunakan adalah helium dengan laju alir
dengan menimbang 3,93 g NA bubuk (Himedia),
30 cm/detik, rasio 1/30, temperatur sumber ion 230°C,
dilarutkan dengan aquadest 140 mL dan disterilkan dan suhu ion permukaan adalah 280 °C.
dengan autoklaf pada suhu i2i°C selama 15 menit, media
didinginkan hingga suhu 6o°C, kemudian dituangkan ke
3. Hasil dan Pembahasan
dalam cawan petri steril masing-masing 20 mL dan
dibiarkan mengeras pada suhu ruang [14]. Penelitian ini diawali dengan melakukan
determinasi sampel yang digunakan di LIPI Bogor untuk
2.6. Pembuatan Standar Me. Farland memastikan spesies sampel yang akan digunakan adalah
Larutan standard Me Farland yang digunakan adalah benar dari tanaman akar manis. Berdasarkan hasil
standard 0.5 yang dibuat dengan mencampurkan larutan determinasi diketahui bahwa tanaman yang menjadi
Bad, 1% dengan H2S04 1%. Sebanyak 0,05 mL larutan sampel dalam penelitian ini adalah Glycyrrhiza glara L
Bad, 1% dicampurkan dengan 9,95 mL larutan H2S04 1% yang termasuk dalam suku Leguminose.
dan dikocok sampai homogen. Kekeruhan larutan diukur
 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 108

3.1. Ekstraksi dan Fraksinasi Sampel metabolit sekunder sampel akar manis dari berbagai
Ekstrak etanol dibuat dengan metode maserasi fraksi dapat dilihat pada tabel 2.
menggunakan pelarut etanol 96% dengan direndam Tabel 2. Kandungan metabolit sekunder akar manis
selama 1x24 jam. Metode maserasi dipilih karena mudah
Metabolit Fraksi
dilakukan dan tidak memerlukan pemanasan dalam
sekunder Butanol Etil asetat Heksan Air
prosesnya, sehingga senyawa yang akan ditarik tidak
mudah terdegradasi. Rendemen ekstrak yang didapat Alkaloid
135,3 g dari simplisia seberat 2 kg. Untuk mengetahui Saponin
jumLah senyawa yang hilang setelah pemanasan Tanin
dilakukan pengujian susut pengeringan yang didapatkan Fenol
sebesar 8,96%, hal ini sudah sesuai dengan standar susut Flavonoid
pengeringan yaitu harus kurang dari 10%. Pengujian Triterpenoid
kadar air untuk mengetahui kandungan air dalam ekstrak Steroid
setelah proses pengentalan diketahui sebesar 5,26%,
Glikosida
angka ini memenuhi persyaratan kadar air ekstrak suatu
Keterangan: (+) memberikan reaksi positif, (-)
sampel, yaitu kurang dari 10% [1, 17].
memberikan reaksi negatif
Fraksinasi menggunakan pelarut organik yang
3.3. Penentuan Nilai KHM
memiliki kepolaran yang berbeda, yaitu air, butanol, etil
asetat dan heksan. Prinsip fraksinasi cair-cair adalah Pengujian konsentrasi hambat minimum dari
pemisahan senyawa berdasarkan tingkat kepolarannya sampel akar manis hasil fraksinasi menggunakan pelarut
dengan prinsip “Like dissolve like", artinya pelarut akan butanol, etil asetat, heksan dan air dilakukan pada
melarutkan senyawa yang tingkat kepolarannya sama konsentrasi 3,125; 6,25; 12,5; 25; dan 50% (Tabel 3)
dengan pelarut tersebut. Pelarut butanol dan air memiliki terlihat fraksi butanol dan etil asetat memiliki nilai KHM
sifat pelarut yang polar sehingga senyawa yang bersifat yang paling rendah, yaitu pada konsentrasi sampel 12,5%
polar akan tertarik pada pelarut butanol dan air. Fraksi sudah dapat menghambat pertumbuhan bakteri Bacillus
heksan untuk menarik senyawa yang bersifat non-polar, cereus. Pelarut heksan memiliki nilai KHM sebesar 25%
dan pelarut etil asetat akan menarik senyawa yang dan fraksi air 50%. Hasil penelitian ini berbeda dengan
bersifat semi polar [18]. Berdasarkan hasil fraksinasi yang dilakukan oleh Gupta et al., (2013) yaitu ekstrak baru
(Tabel 1) diketahui rendemen tertinggi terdapat pada mulai menunjukan sensitivitasnya ketika konsentrasi
pelarut polar yaitu fraksi air sebanyak 41,4% dan fraksi sampel 50% [19]. Perbedaan nilai KHM ini kemungkinan
butanol 33,1%, diikuti dengan pelarut semipolar pada disebabkan oleh kandungan senyawa antibakteri yang
fraksi etil asetat 29,0% dan fraksi nonpolar heksan berbeda disetiap pelarut [20] dan juga dipengaruhi
16,5%. Hal ini menunjukkan ekstrak etanol akar manis tempat tumbuh tanaman serta jenis pelarut yang
lebih banyak mengandung senyawa polar. digunakan saat proses ekstraksi [21].

Tabel 1. Hasil fraksinasi sampel akar manis Tabel 3. Penetuan KHM sampel akar manis

Fraksi Berat (g) Rendemen (%) Konsentrasi Fraksi

sampel (%) Butanol Etil asetat Heksan Air
Fraksi butanol 40 33,i
3,125
Fraksi eti asetat 35 29,0
6,25
Fraksi heksan 20 16,5
12,5
Fraksi air 50 41,4
25
3.2. Kandungan Metabolit Sekunder 50
Hasil organoleptik menunjukkan bahwa sifat dari Keterangan: (+) terdapat pertumbuhan bakteri (-) tidak
ekstrak etanol akar manis memiliki bentuk ekstrak terdapat pertumbuhan bakteri
kental, warna coklat kehitaman, aroma seperti cengkeh, 3.4. Penentuan Aktivitas Antibakteri
rasanya manis dan lengket. Hasil skrining pada fraksi
Hasil pengujian aktivitas antibakteri dari ekstrak
akar manis memberikan hasil positif dengan hasil yang
butanol, etil asetat, heksan dan fraksi air dengan
berbeda pada setiap fraksi yaitu fraksi butanol
konsentrasi 1 g/mL diketahui bahwa fraksi etil asetat
mengandung, flavonoid, tannin, alkaloid, glikosida, dan
adalah fraksi yang memiliki aktivitas penghambatan
triterpenoid. Fraksi etil asetat mengandung alkaloid,
paling besar terhadap pertumbuhan bakteri Bacillus cereus
flavonoid, saponin, tanin, glikosida, triterpenoid, dan
yang ditunjukkan dengan terbentuknya zona bening
fenol. Fraksi heksan mengandung alkaloid, glikosida,
berdiameter ±17,11 mm.
triterpenoid, dan fenol. Fraksi air mengandung alkaloid,
flavonoid, saponin, tannin, glkosida, asam lemak
triterpenoid, dan fenol. Hasil identifikasi kandungan
 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 109
Tabel 4. Aktivitas antibakteri sampel Akar Manis Tabel 5. Hasil GCMS fraksi etil asetat akar manis

Sampel Diameter zona hambat (mm) RT Nama Senyawa Kandungan (%)

Kontrol negatif 6,00 ± 0,00 36,012 n-Hexadecanoic acid 14,14
Kontrol positif 21,00 ± 0,00 4H-Pyran 4-one, 2,3
14,595 dihydro-3,5-dihydroxy- 13,18
Fraksi butanol 15.00 ± 0.10
6 methyl
Fraksi etil asetat 17,11 ± 0.21
37,108 Oleic acid 11,60
Fraksi heksan 6,85 ± 0.18 Hexadeca-2,6,10,14-
Fraksi air 6,53 ± 0.20 37,756 tetraen-i-ol, 3,7,11,16- 10,86
tetramethyl (E,E,E)
Berdasarkan hasil uji aktivitas antibakteri sampel
3,459 Etil etanoat 8,81
akar manis dari berbagai fraksi pelarut ini dapat dilihat
bahwa kontrol positif yang digunakan dapat 43,6n Stigmasta-3,5-dien 7,17
menghambat pertumbuhan bakteri Bacillus cereus Senyawa n-hexadecanoic acid dan oleic acid
sedangkan pada kontrol negatif terdapat pertumbuhan merupakan turunan lemak [24] dan n- Hexadecanoic acid
bakteri. Berdasarkan hasil uji aktivitas antibakteri pada adalah asam lemak jenuh yang memiliki formula CI6H3202
fraksi akar manis didapatkan hasil masing-masing fraksi [25]. Menurut Lopez-Malo dkk. [26], konsentrasi dari
memiliki luas zona hambat yang berbeda-beda. Ukuran asam lemak dengan rantai yang panjang dapat
zona hambat dapat menunjukan sifat sensitifitas suatu menghambat mikroorganisme khususnya bakteri gram
zat terhadap bakteri, berdasarkan klasifikasi aktivitas positif, kapang dan juga khamir. Hal ini didukung dengan
antibakteri menurut Davis dan Stout [22] fraksi air dan penelitian Darmadji dan Izumimoto [27] yang
heksan tergolong dalam kategori sedang, fraksi etil asetat mengatakan bahwa mekanisme kerja n- hexadecanoic acid
dan butanol kuat dan kontrol positif yang menggunakan dalam menghambat pertumbuhan bakteri dengan
antibiotik tetrasiklin tergolong sangat kuat dengan zona menyerap nutrisi yang ada pada bakteri, menghambat
hambat lebih dari 20 mm [22]. Penelitian ini sejalan masuknya air dan menghalangi kerja enzim pada
dengan hasil penelitian Rodino dkk. [23] yang beberapa bakteri. Senyawa n- hexadecanoic acid juga
mengungkapkan bahwa ekstrak etanol dari tanaman akar dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan seperti yang
manis dapat menghambat pertumbuhan bakteri Bacillus dilaporkan oleh Bodoprost dan Rosemeyer [28]. Melaui
cereus dengan aktivitas zona hambat 15 mm. Fraksi etil penelitian ini untuk pertama kalinya juga senyawa 4H-
asetat memiliki zona hambat terbesar dibandingkan Pyran 4-one, 2,3 dihydro-3,S-dihydroxy-6 methyl
dengan fraksi yang lainnya, sehingga fraksi etil asetat dilaporkan teridentifikasi dalam tanaman akar manis.
akar manis dilanjutkan ketahap identifikasi senyawa
4H-Pyran 4-one, 2,3 dihydro-3,5-dihydroxy-6 methyl
bioktif menggunakan instrumen GCMS. termasuk dalam golongan flavonoid dan diketahui
3.5. Identifikasi Senyawa Bioaktif memiliki aktivitas sebagai antimikrobial dan
antiinflamasi[29].
Hasil identifikasi senyawa metabolit sekunder dari
fraksi etil asetat akar manis dengan GCMS menunjukkan Kandungan senyawa Oleic acid dengan kandungan
golongan utamanya adalah senyawa asam lemak dengan 11,60% yang memiliki formula CI8H34C>2 ini juga sudah
kandungan terbanyak adalah senyawa n-Hexadecanoic pernah dilaporkan sebelumnya memiliki aktivitas
acid dengan luas puncak 14,14%. Hasil GCMS ditunjukkan sebagai antibakteri [30]. Senyawa Stigmastan~3,5~dien
pada Gambar 1 dan tabel 5. telah dilaporkan terdapat pada tanaman Calamintha
nepeta (L.) Savi subsp. Glandulosa dan memiliki aktivitas
sebagai antioksidan [31]. Senyawa Hexadeca-2,6,10,14-
tetraen-i-ol, 3,7,11,16-tetramethyl (E,E,E) dalam fraksi etil
asetat tanaman akar manis ini juga pernah dilaporkan

J
terdapat pada tanaman Eugenia bracteata dengan
memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Bacillus
Subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli,
Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis and
Micrococcus luteus, Salmonella typhimurium, Klebsiella
pneumoniae, Enterobacter cloacae dan Proteus vulgaris [32].
Gambar 1. Spektogram hasil GCMS fraksi etil asetat Akar
manis 4. Kesimpulan
Penelitian ini telah mengungkapkan bahwa ekstrak
tanaman akar manis (Glycyrrhiza glabra L.) memiliki
aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan Bacillus
cereus dengan aktivitas tertinggi terdapat pada fraksi etil
asetat yang tergolong dalam kategori penghambatan
 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 110

kuat. Hasil analisis GCMS mengungkapkan bahwa [12] Himanshu Aggarwal, Jayashri Ghosh, Alka Rao,
kandungan terbesar tanaman akar manis dalam fraksi etil Vinod Chhokar, Evaluation of Root and Leaf Extracts
asetat adalah senyawa n-Hexadecanoic acid dan 4H-Pyran of Glycrriza Glabra for Antimicrobial Activity, Journal
A~one, 2,3 dihydro-3,5-dihydroxy-6 methyl yang of Medical and Bioengineering, 4, 1, (2015) 81-85
http: //doi.org/io.i272Q/jomb./L.i.81-8ÿ
merupakan golongan flavonoid.
[13] Norman R. Farnsworth, Biological and
Daftar Pustaka Phytochemical Screening of Plants, Journal of
Pharmaceutical Sciences, 55, 3, (1966) 225-276
[1] Badan Pengawas Obat dan Makanan, Kriteria dan tata https://d0i.0rg/10.1002/jps.2600550302
laksana pendaftaran obat tradisional, obat herbal
[14] Sogandi, Apon Zaenal Mustopa, I Made Artika, Bugi
terstandar dan fitofarmaka, in: B.P.O.d. Makanan
(Ed.) HK.00.05.41.13, Jakarta, 2005. Ratno Budiarto, Inhibitory Activity of Lactobacillus
plantarum U10 Isolated from Tempoyak (Fermented
[2] Siti Zulaekah, Pendidikan Gizi Dengan Media Booklet Durian) Made in Indonesia against Salmonella typhi,
Terhadap Pengetahuan Gizi, KEMAS: Jurnal Kesehatan Microbiology Indonesia, 9, 2, (2015) 73-81
Masyarakat, 7, 2, (2012) 127-133 http://doi.0rg/10.5454/mi.9.2.4
http: //doi.org/io.ili2QZ./kemas.v7i2. 2808
[15] Sogandi, Frensiska Anggelia, Lilih Riniwasih K, Uji
[3] Harold Richardson, Fiona Smaill, Medical Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 96% Daun
microbiology, BMJ, 317, 7165, (1998) 1060 Rambai (Sonneratia caseolaris, (L.) Engl) terhadap
https://doi.0rg/10.1i86/bmj.8i 7.716 5.1060 Pertumbuhan Bakteri Escherichia col, Indonesia
Natural Research Pharmaceutical Journal, 2, 1, (2017)
[4] Rullah Hermanda, Wahyu Widayat, Laode Rijai,
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Akar
73-80
Tumbuhan Merung (Coptosapelta tomentosa) [16] Risa Nursanty, Aktivitas antibakteri ekstrak metanol
terhadap Bakteri Escherichia Coli dan Staphylococcus tanaman Lawsonia inermis L. dan Capsicum
aureus, in: Mulawarman Pharmaceuticals frutescens L. terhadap bakteri Staphylococcus aureus
Conferences, 2016, pp. 322-329. ATCC 29213, Bioleuser, 1, 3, (2017) 98-103
[5] Sulistiorini Indriaty, Lela Sulastri, Uji Aktivitas [17] Rita Dwi Ratnani, Indah Hartati, Yance Anas, Devi
Ekstrak Air Akar Manis (Glycyrrhiza glabra L.) Sebagai Endah P., Dita Desti D. Khilyati, Standardisasi
Penyubur Rambut Pada Kelinci Jantan, Medical Sains; Spesifik dan Non Spesifik Ekstraksi Hidrotropi
Jurnal Ilmiah Kefarmasian, 1, 1, (2016) Andrographolid dari Sambiloto (Andrographis
http://dx.doi.org/io.i28ZL/ms.viii.ii paniculata), Seminar Nasional Peluang Herbal Sebagai
[6] Dinesh Dhingra, Amandeep Sharma, Alternatif Medicine Tahun 2015, Semarang, (2015)
Antidepressant- like activity of Glycyrrhiza glabra L. in [18] Irvina Nurrachmi, Bintal Amin, Dessy Yoswaty,
mouse models of immobility tests, Prog Analisis Senyawa Bioaktif Ekstrak Heksan, Etil Asetat
Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry, 30, 3, (2006) dan Metanol Rumput Laut (Eucheuma cottonii ) dari
449-454 Pantai Pulau Jaga, Karimun Provinsi Kepulauan Riau,
https://d0i.0rg/10.1016/j.pnpbp.2005.11.019 Asian Journal of Environment, History and Heritage, 2,
1, (2018) 105-112
[7] Giulia Pastorino, Laura Cornara, Sonia Soares,
Francisca Rodrigues, M. Beatriz P.P. Oliveira, [19] Divya Gupta, Mukesh Kumar, Evaluation of in vitro
Liquorice (Glycyrrhiza glabra): A phytochemical and antimicrobial potential and GC-MS analysis of
pharmacological review, Phytotherapy Research, 32, Camellia sinensis and Terminalia arjuna,
12, (2018) 2323-2339 Biotechnology Reports, 13, (2017) 19-25
https://d0i.0rg/10.1002/ptr.6178 https://d0i.0rg/10.1016/j.btre.2016.11.002
[ 8] Faruk Karahan, Cumhur Avsar, Ibrahim Ilker Ozyigit, [20]Gebremedhin Romha, Birhanu Admasu, Tsegaye
Ismet Berber, Antimicrobial and antioxidant Hiwot Gebrekidan, Hailelule Aleme, Gebreyohans
activities of medicinal plant Glycyrrhiza glabra var. Gebru, Antibacterial Activities of Five Medicinal
glandulifera from different habitats, Biotechnology & Plants in Ethiopia against Some Human and Animal
Biotechnological Equipment, 30, 4, (2016) 797-804 Pathogens, Evidence-Based Complementary and
https://d0i.0rg/10.1080/13102818.2016.1179590 Alternative Medicine, 2018, (2018) 10
https://d0i.0rg/10.1155/2018/2950758
[9] Departemen Kesehatan RI, Parameter standar umum
ekstrak tumbuhan obat, Direktorat Jenderal [21] Imad Hadi Hameed, Hussein J. Hussein, Muhanned
Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, 2000. Abdulhasan Kareem, Nidaa Shihab Hamad,
Identification of five newly described bioactive
[io]Anjar Purba Asmara, Uji Fitokimia Senyawa chemical compounds in methanolic extract of
Metabolit Sekunder Dalam Ekstrak Metanol Bunga
Mentha viridis by using gas chromatography - mass
Turi Merah (Sesbania grandifloraL. Pers), Al-Kimia, 5,
spectrometry (GC-MS), Journal of Pharmacognosy and
1,(2017)48-59
Phytotherapy, 7, 7, (2015) 107-125
https://doi.org/10.24252/al-kimia.v5i1.2856
https://d0i.0rg/10.5897/JPP2015.0349
[11] Moch. Chasani, Ruli Budi Fitriaji, Purwati, Fraksinasi
[22]W. W. Davis, T. R. Stout, Disc plate method of
Ekstrak Metanol Kulit Batang Ketapang (Terminalia
microbiological antibiotic assay. II. Novel Procedure
catappa Linn.) dan Uji Toksisitasnya dengan Metode Offering Improved Accuracy, Appl Microbiol, 22, 4,
BSLT (Brine Shrimp Lethality Test), Molekul, 8, 1, (1971) 666-670
(2013) 89-100
 Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (4) (2019): 105-111 ill

[23] S Rodino, A. Butu, M. Butu, P.C. Cornea, Comparative

Studies on Antibacterial Activity of Licorice,
Elderberry and Dandelion, Digest Journal of
Nanomaterials and Biostructures, 10,3, (2015) 947-955
[24]K. Radha Krishnan, F. James, A. Mohan, Isolation and
characterization of n-hexadecanoic acid from
Canthium parviflorum leaves, Journal of Chemical and
Pharmaceutical Research, 8, 8, (2016) 614-617
[25]Zhong-hui Pu, Yu-qun Zhang, Zhong-qiong Yin, Jiao
Xu, Ren-yong Jia, Yang Lu, Fan Yang, Antibacterial
Activity of 9-Octadecanoic Acid-Hexadecanoic Acid-
Tetrahydrofuran-3,4-Diyl Ester from Neem Oil,
Agricultural Sciences in China, 9, 8, (2010) 1236-1240
https: //doi.org/io.ioi6/Si67i-2Q27(QQ~)6o2i2-i
[26]Aurelio Lopez-Malo, Stella Maris Alzamora, Enrique
Palou, Aspergillus flavus growth in the presence of
chemical preservatives and naturally occurring
antimicrobial compounds, Int J Food Microbiol, 99, 2,
(2005) 119-128
https://d0i.0rg/10.1016/j.ijf00dmicr0.2004.08.010
[27]Purnama Darmadji, Masatoshi Izumimoto, Effect of
chitosan in meat preservation, Meat Science, 38, 2,
(1994) 243-254
https://doi.org/io.ioi6/0309-i740(94)90H4-7
[28]Juliana Bodoprost, Helmut Rosemeyer, Analysis of
Phenacylester Derivatives of Fatty Acids from Human
Skin Surface Sebum by Reversed-Phase HPLC:
Chromatographic Mobility as a Function of Physico-
Chemical Properties, International Journal of
Molecular Sciences, 8, 11, (2007) 1111-1124
[29]Rengasamy Ragupathi Raja Kannan, Radjassegarin
Arumugam, Perumal Anantharaman, Chemical
composition and antibacterial activity of Indian
seagrasses against urinary tract pathogens, Food
Chemistry, 135, 4, (2012) 2470-2473
https://d0i.0rg/10.1016/j.f00dchem.2012.07.070
[30]P. Awa, S. Ibrahim, D. A. Ameh,GC/MS Analysis and
Antimicrobial Activity of Diethyl Ether Fraction of
Methanolic Extract from the stem bark of Annona
senegalensis Pers., International Journal of
Pharmaceutical Sciences and Research, 3, 11, (2012)
4213-4218
http://dx.d0i.0rg/10.13040/IJPSR.0975-
8232.3(11).4213-18
[31] Filomena Conforti, Mariangela Marrelli, Giancarlo
Statti, Federica Menichini, Dimitar Uzunov, Umberto
Solimene, Francesco Menichini, Comparative
chemical composition and antioxidant activity of
Calamintha nepeta (L.) Savi subsp. glandulosa (Req.)
Nyman and Calamintha grandiflora (L.) Moench
(Labiatae), Natural Product Research, 26, 1, (2012)
91-97
http://d0i.0rg/10.1080/14786419.2010.545356
[32]Kavitha Alii, Lakshmi Narasu Mangamoori,
Phytochemical compound identification and
evaluation of antimicrobial activity of Eugenia
Bracteata Roxb, International Journal of Biotechnology
and Biochemistry, 12, 1, (2016) 73-83