Petunjuk penulisan

PET U N J U K T EK N I S ANALISIS KIMIA TANAH, TANAMAN, AIR, DAN PUPUK Balai Penelitian Tanah Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Departemen Pertanian 2005 Petunjuk Teknis ANALISIS KIMIA TANAH, TANAMAN, AIR, DAN PUPUK PENA NG G UNG JA W A B Dr. Fa hm ud d in Ag us PENYUSUN Sula e m a n Sup a rto Evia ti PENYUNTING B.H. Pra se tyo (Ke tua ) Djo ko Sa nto so (Ang g o ta ) La d iya ni Re tno Wid o w a ti (Ang g o ta ) PENYUNTING PELA KSA NA Sri Erita Ap rilla ni Fa rid a Ma na lu TA TA LETA K Did i Sup a rd i FO TO SA M PUL Nura ini DITERBITKA N O LEH : BA LA I PENELITIA N TA NA H Ba d a n Pe ne litia n d a n Pe ng e m b a ng a n Pe rta nia n De p a rte m e n Pe rta nia n Jl. Ir. H. Jua nd a 98 Bo g o r 16123 Te lp . (0251) 336757, Fa x (0251) 321608 e -m a il: so il-RI@ ind o .ne t.id Wib site :http :/ / b a litta na h.litb a ng .d e p ta n.g o .id ISBN KATA PENGANTAR Prosedur analisis yang diberikan dalam petunjuk teknis ini adalah prosedur rutin untuk analisis tanah, tanaman, air dan pupuk yang dilakukan di laboratorium kimia Balai Penelitian Tanah. Disebut rutin karena jenis-jenis penetapan ini biasa diminta oleh para pengguna jasa baik praktisi maupun peneliti pertanian. Laboratorium kimia tanah merupakan bagian dari laboratorium tanah, Balai Penelitian Tanah selain laboratorium biologi, laboratorium penelitian, laboratorium fisika, dan laboratorium mineral. Laboratorium tanah telah terakreditasi oleh Komite Akreditasi Nasional, Badan Standardisasi Nasional sebagai laboratorium penguji mulai tahun 2004 di bawah No. LP-192-IDN. Analisis tanah memberikan data sifat fisika dan kimia serta status unsur hara di dalam tanah. Selain untuk uji tanah, analisis tanah juga diperlukan untuk klasifikasi tanah dan evaluasi lahan. Uji tanah digunakan dalam penelitian kesuburan agar dapat memberikan rekomendasi pemupukan untuk perbaikan kesuburan tanah dan peningkatan hasil pertanian. Analisis jaringan tanaman diperlukan untuk penelitian respon pemupukan, diagnosis penyakit yang disebabkan kekahatan atau keracunan unsur, dan rekomendasi pemupukan. Hasil analisis air dapat digunakan untuk penilaian kualitas air irigasi, tingkat erosi dan kuantitas pasokan atau intensitas pencucian hara dari suatu lahan. Analisis pupuk digunakan untuk uji mutu pupuk yang diperlukan dalam penelitian pertanian maupun perdagangan. Terbitnya buku ini diharapkan dapat membantu laboratorium-laboratorium tanah, peneliti, mahasiswa dan pihak-pihak lain yang berkepentingan di dalam memenuhi kebutuhan metode analisis yang handal dalam melaksanakan tugasnya, sehingga dapat menghasilkan data hasil analisis yang benar. Bogor, Oktober 2005 Balai Penelitian Tanah Kepala, Dr. Fahmuddin Agus NIP.080.079.624 i DAFTAR ISI KATA PENGANTAR ....................................................................................................... i DAFTAR ISI ................................................................................................................... ii DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................................... iv PENDAHULUAN……………………………………………………………………… v I. Analisis Tanah 1. Persiapan contoh di laboratorium ........................................................................ 1 2. Penetapan kadar air kering mutlak ....................................................................... 1 3. Penetapan daya hantar listrik ............................................................................... 2 4. Penetapan pH tanah .............................................................................................. 3 5. Penetapan kebutuhan kapur ................................................................................. 4 6. Penetapan kemasaman dapat ditukar ................................................................... 5 7. Penetapan tekstur ................................................................................................. 7 7.1 Penetapan tekstur cara pipet ........................................................................... 7 7.2 Penetapan tekstur cara hidrometer ................................................................. 9 8. Penetapan P dan K ekstrak HCl 25% ................................................................. 11 9. Penetapan P tersedia metode Olsen ................................................................... 13 10. Penetapan P tersedia metode Bray ..................................................................... 14 11. Penetapan erapan P ............................................................................................. 15 12. Penetapan retensi P ............................................................................................ 18 13. Penetapan susunan kation, kapasitas tukar kation dan kejenuhan basa ............. 19 14. Penetapan ketersediaan Fe, Mn, Cu dan Zn ekstrak DTPA ............................... 24 15. Penetapan C-organik ........................................................................................... 25 16. Penetapan N total ................................................................................................ 27 17. Penetapan unsur hara makro dan mikro ekstrak Morgan Wolf ......................... 30 18. Penetapan total unsur hara makro dan mikro...................................................... 35 19. Penetapan total unsur hara logam berat .............................................................. 40 II. Analisis Jaringan Tanaman 1. Persiapan contoh ................................................................................................ 43 2. Penetapan kadar air ............................................................................................ 43 3. Penetapan total N cara pengabuan basah dengan H2SO4 dan Selen ................... 44 4. Penetapan total unsur hara makro, mikro cara pengabuan basah dengan HNO3 dan HClO4 .......................................................................................................... 47 5. Penetapan total unsur hara makro, mikro cara pengabuan basah dengan H2SO4 dan H2O2 ............................................................................................................ 52 6. Penetapan total unsur hara logam berat cara pengabuan basah dengan HNO3 dan HClO4 .......................................................................................................... 56 III. Analisis Air Irigasi 1. Persiapan contoh ................................................................................................ 59 2. Penetapan kadar lumpur...................................................................................... 59 3. Penetapan daya hantar listrik ............................................................................. 60 4. Penetapan pH ..................................................................................................... 60 ii 5. Penetapan K, Na, Ca, dan Mg ............................................................................ 61 6. Penetapan Fe, Mn, Al, Cu dan Zn ...................................................................... 63 7. Penetapan ammonium......................................................................................... 64 8. Penetapan fosfat ................................................................................................. 66 9. Penetapan karbonat dan bikarbonat .................................................................... 67 10. Penetapan klorida ............................................................................................... 68 11. Penetapan sulfat ................................................................................................. 69 12. Penetapan nitrat .................................................................................................. 70 13. Penetapan boron ................................................................................................. 71 IV. Analisis pupuk A. Analisis Pupuk anorganik 1. Persiapan contoh ................................................................................................ 74 2. Penetapan kadar air 2.1 Karl Fischer.................................................................................................. 74 2.2 kering 1050C ................................................................................................ 75 3. Penetapan nitrogen 3.1 Penetapan N-urea (N-organik) ...................................................................... 76 3.2 Penetapan N-NH4 dan N-NO3 ...................................................................... 77 3.3 Penetapan N - urea ....................................................................................... 79 4. Penetapan Biuret ................................................................................................ 81 5. Penetapan P dan K total ..................................................................................... 82 6. Penetapan P dan K larut asam sitrat 2% ............................................................ 85 7. Penetapan P dan K larut dalam air ...................................................................... 87 8. Penetapan total Fe, Al, Ca dan Mg .................................................................... 89 9. Penetapan besar butiran/ kehalusan ................................................................... 91 10. Penetapan asam bebas ........................................................................................ 91 11. Penetapan belerang ............................................................................................ 92 12. Penetapan silikat ................................................................................................ 94 13. Penetapan setara CaCO3 .................................................................................... 95 14. Penetapan kadar klorida ..................................................................................... 96 B. Analisis pupuk organik 1. Persiapan contoh dan kadar bahan ikutan ........................................................... 97 2. Penetapan air ...................................................................................................... 98 3. Penetapan pH ..................................................................................................... 99 4. Penetapan kadar abu ........................................................................................ 100 5. Penetapan N total ............................................................................................. 100 6. Penetapan C organik ........................................................................................ 102 7. Penetapan total P, K, Na, Ca, Mg, S, Fe, Al, Mn, Cu, Zn, B ........................... 103 8. Penetapan total unsur logam berat ................................................................... 106 9. Penetapan total logam berat Hg dan As ........................................................... 108 10. Penetapan KTK ................................................................................................ 110 DAFTAR BACAAN .................................................................................................... 112 iii DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Kondisi alat untuk pengukuran unsur-unsur ............................................ 114 Lampiran 2. Pedoman penyajian laporan hasil analisis ............................................... 115 Lampiran 3. Kriteria sifat kimia tanah .......................................................................... 117 Lampiran 4. Segitiga tekstur ........................................................................................ 118 Lampiran 5. Definisi dan syarat-syarat mutu beberapa pupuk yang penting .............. 119 iv PENDAHULUAN Latar belakang Seiring dengan kemajuan sistem pertanian di negara kita, maka berkembang pula laboratorium-laboratorium tanah di daerah-daerah sebagai pendukungnya. Pengoperasian laboratorium-laboratorium ini memerlukan prosedur analisis yang handal. Balai Penelitian Tanah (Balittanah) ketika bernama Lembaga Penelitian Tanah (LPT) telah menerbitkan buku-buku prosedur analisis, yaitu Penuntun Analisa Tanah (Sudjadi et al., 1971), Metoda Analisa Air Irigasi (Sudjadi dan Widjik, 1972) dan Penuntun Analisa Tanaman (Lembaga Penelitian Tanah, 1978). Prosedur-prosedur analisis dalam bukubuku ini digunakan di Laboratorium Kimia yang pada waktu itu bernama laboratorium kesuburan tanah, LPT. Prosedur-prosedur ini berkembang terus sesuai dengan tuntutan peralatan dan metode yang baru yang lebih baik, serta disesuaikan dengan kebutuhan pengguna jasa. Pada saat ini hampir seluruh peralatan yang digunakan telah diganti dengan peralatan yang lebih canggih. Tulisan ini merupakan petunjuk teknis (juknis) untuk melaksanakan analisis tanah, tanaman, air dan pupuk yang digunakan di laboratorium kimia, Balittanah, pada saat ini. Pada umumnya metode-metode analisis di dalam buku ini telah digunakan dalam pelatihan-pelatihan dan magang analisis personil laboratorium dari instansi pemerintah pusat maupun daerah, perguruan tinggi, perusahaan swasta, dan praktek lapang pelajar dan mahasiswa, serta kegiatan uji silang hasil analisis antar laboratorium tanah secara nasional. Dengan demikian prosedur-prosedur yang disajikan sebenarnya telah digunakan oleh hampir semua laboratorium tanah di Indonesia. Berbeda dengan prosedur analisis yang sudah diterbitkan terdahulu, ini merangkum prosedur analisis rutin untuk tanah, tanaman dan air irigasi ditambah dengan prosedur analisis pupuk dalam satu buku. Pengambilan contoh tidak dimasukkan dalam buku ini. Prosedur analisis tanah dalam juknis ini memberikan metode analisis yang biasa digunakan sekarang. Analisis liat total ditiadakan karena sudah sangat jarang diminta. Beberapa jenis analisis baru ditambahkan, yaitu penetapan retensi P, erapan P, analisis total untuk pengukuran unsur hara makro dan mikro, serta logam berat. Penetapan tekstur tiga fraksi cara Pipet ditambah dengan cara hidrometer sebagai alternatif. Penetapan tekstur cara hidrometer merupakan cara yang sederhana dengan alat sederhana, sehingga dapat dilakukan di laboratorium dengan fasilitas terbatas. Prosedur analisis tanaman dalam juknis mengambil metode-metode yang berdasarkan pengalaman lebih baik. Campuran HClO4 dengan HNO3 digunakan untuk penetapan unsur hara makro dan mikro secara total. Khusus untuk penetapan nitrogen digunakan metode destruksi H2SO4 dengan campuran selen sebagai katalisator. Semua unsur logam dalam ekstrak yang dihasilkan diukur dengan alat spektrofotometer serapan atom (SSA) dan fotometer nyala. Dalam buku terbitan terdahulu disajikan juga cara alternatif pengukuran unsur logam secara kolorimetri. Seperti pengukuran unsur logam dalam analisis tanaman, juknis ini hanya memberikan cara SSA dan fotometer nyala, buku terbitan yang lalu memberikan metode kolometri sebagai alternatif. Hal-hal lain pada umumnya masih serupa. Analisis pupuk disesuaikan dengan prosedur dalam SNI (standar nasional indonesia) bagi pupuk yang sudah memiliki SNI. Sisanya mengacu ke pustaka-pustaka yang tersedia. 1 Pengawasan mutu a. b. c. d. e. f. Sumber kesalahan analisis yang mungkin terjadi di laboratorium antara lain: Bahan kimia yang tidak murni atau telah mengalami kontaminasi Pelaksana analisis yang kurang teliti mengikuti cara kerja analisis Kerusakan alat pengukuran Kontaminasi dari peralatan gelas yang kurang bersih Prosedur analisis yang tidak valid Kesalahan perhitungan Kesalahan karena bahan kimia yang tidak murni dapat dihindarkan dengan mengoreksi hasil penetapan contoh dengan hasil penetapan blanko. Penetapan blanko yaitu penetapan tanpa contoh dengan penggunaan jenis dan jumlah bahan kimia serta pengerjaan yang sama dengan penetapan contoh. Hasil pengukuran blanko menunjukkan mutu bahan kimia yang digunakan. Blanko harus selalu disertakan pada setiap kali melakukan analisis. Mutu air demineralisasi yang digunakan harus dipantau minimal sekali setiap minggu. Air demineralisasi yang dapat digunakan memiliki nilai daya hantar listrik < 5 µS cm-1. Kesalahan dari pelaksana analisis dapat ditunjukkan dari penetapan duplo. Penetapan duplo ialah penetapan dua ulangan untuk satu contoh. Hasil yang diperoleh dari kedua ulangan tersebut memperlihatkan ketelitian pelaksana analisis. Makin kecil perbedaan kedua ulangan tersebut makin baik cara kerja analis tersebut. Dengan cara ini kesalahan dari pelaksana analisis dapat terdeteksi dan ketelitian kerjanya dapat ditingkatkan di masa yang akan datang. Dalam satu seri pengerjaan analisis, beberapa contoh harus ada duplonya. Kesalahan dari kerusakan alat pengukuran dapat dilihat dari hasil penetapan contoh standar (contoh referensi). Penetapan contoh standar adalah penetapan yang dilakukan terhadap contoh yang telah diketahui komposisinya. Contoh standar ini dapat disediakan sendiri (internal standard). Standar tanah disediakan dengan mengambil beberapa contoh dari jenis tanah berbeda dengan nilai parameter dari rendah sampai tinggi. Standar tanaman juga dapat disiapkan dari beberapa jenis tanaman, demikian pula standar pupuk. Contoh-contoh standar tanah, tanaman dan pupuk disimpan dalam botol plastik bertutup yang kedap udara dan disimpan di ruangan kering dan dingin (ruang ber-AC). Standar air agak jarang dilakukan mengingat sifatnya yang tidak stabil. Standar air dapat disediakan dengan melakukan pengawetan, misalnya pengasaman hingga pH <2 dan disimpan dalam refrigerator. Namun demikian tetap perlu diperhatikan, bahwa kestabilan setiap unsur dalam contoh air berbeda. Nitrat dan amonium hanya tahan disimpan 2 hari hingga 1 minggu, karbonat hingga 2 minggu, fosfat hingga 1 bulan, logam-logam secara umum tahan disimpan hingga 6 bulan (Clesceri et al., 1998). Masing-masing contoh standar disediakan dengan jumlah cukup banyak agar dapat digunakan beberapa tahun. Contoh-contoh standar dianalisis beberapa kali sampai mendapatkan hasil rata-rata. Contoh standar selalu disertakan dalam setiap kali analisis bersama-sama contoh. Kumpulan nilai contoh standar dapat digunakan untuk menghitung simpangan baku relatif setiap parameter analisis. Jika terjadi penyimpangan hasil dari contoh standar terhadap rata-ratanya (misalnya > atau < dua kali simpangan baku) ketika diikutsertakan pada penetapan contoh maka alat pengukuran perlu dicurigai. Kontaminasi dari peralatan gelas karena cara pencuciannya yang kurang bersih menimbulkan kesalahan acak yang sulit diketahui. Karenanya perlu 2 diperhatikan agar alat gelas benar-benar bersih. Peralatan gelas dibersihkan dengan membilasnya menggunakan air keran terlebih dahulu segera setelah selesai dipakai dan kemudian merendamnya dalam larutan deterjen bebas fosfor 2% atau larutan HCl 6% beberapa jam hingga maksimum 24 jam. Selanjutnya, alat gelas dicuci dengan air keran hingga sisa larutan perendam benar-benar hilang dan kemudian dibilas tiga kali menggunakan air bebas ion. Peralatan disimpan pada tempat yang bersih dengan posisi sedemikian rupa sehingga memungkin sisa air bilasan terdrainase. Selanjutnya dapat dikeringkan dalam oven pada suhu 105 oC. Oven juga harus bersih dari sisa-sisa bahan kimia atau kotaminan lainnya. Prosedur analisis yang digunakan dipilih yang valid. Validasi prosedur dapat dilakukan dengan mengevaluasi linieritas deret standar, limit deteksi, keterulangan (repeatibility) dan perolehan kembali (recovery). Semuanya dilakukan minimal dengan tujuh ulangan. Metode yang baik memiliki linieritas deret standar dengan nilai koefisien determinasi (R2) minimal 0,99. Limit deteksi dihitung sebagai nilai rata-rata konsentrasi analit yang sesuai dengan blanko contoh ditambah tiga kali simpangan baku. Keterulangan dinyatakan dalam simbangan baku relatif (%). Nilai ini bertambah besar dengan menurunnya konsentrasi analit. Metode yang baik memiliki keterulangan dengan nilai simpangan baku seperti dapat dilihat pada Tabel 1 (Wood et al., 1998). Uji perolehan kembali dilakukan melalui analisis contoh dengan spiking (penambahan contoh dengan analit yang diketahui jumlahnya). Analit yang ditambahkan biasanya sekitar 50 hingga 100 % dari kadar analit dalam contoh. Nilai perolehan kembali (%) dapat dihitung dari {(konsentrasi contoh spike - contoh asal)/ konsentrasi spike} x 100 %. Metode yang baik memberikan nilai perolehan kembali sekitar 90-110 % hingga 95-105 %. Tabel 1. Rekomendasi simpangan baku relatif dari keterulangan yang dapat diterima pada konsentrasi analit yang berbeda. Konsentrasi analit 100 g kg-1 10 g kg-1 1 g kg-1 100 mg kg-1 10 mg kg-1 1 µg kg-1 100 µg kg-1 10 µg kg-1 1 µg kg-1 0,1 µg kg-1 Simpangan baku relatif %* 2 3 4 5 7 11 15 21 30 43 * (Simpangan baku/rata-rata) x 100 % Kesalahan perhitungan berakibat fatal. Kesalahan ini meliputi kesalahan faktor-faktor pengali/pembagi seperti faktor pengenceran, penimbangan, dan konversi bentuk unsur/senyawa, misalnya konversi PO43- ke P2O5. Unit ukuran yang digunakan dalam penyajian juga sering menimbulkan kesalahan. Oleh karena itu dalam menghitung hasil analisis perlu diperhatikan satuan yang akan digunakan dan penguasaan metode analisis itu sendiri. Metode titrasi akan memerlukan cara 3 perhitungan yang berbeda dengan metode spektrofotometri. Hasil analisis tanah, tanaman dan pupuk disajikan atas dasar contoh kering 105 oC, sedangkan contoh yang dianalisis adalah contoh kering udara. Oleh karena itu perhitungan hasil analisis perlu dikalikan faktor koreksi kadar air, yaitu bobot contoh kering udara dibagi bobot contoh kering 105 oC (kecuali pH, ukuran partikel dan kadar air biasa disajikan terhadap contoh asal). Namun demikian atas permintaan pelanggan hasil analisis dapat disajikan berdasarkan contoh asal atau berdasarkan contoh kering 105oC. Akhirnya untuk menjaga agar mutu data yang dihasilkan laboratorium selalu baik dan setiap kesalahan dapat segera terdeteksi, selain cara-cara tersebut di atas laboratorium perlu membandingkan data yang dihasilkannya dengan data laboratorium lain. Laboratorium kimia Balittanah menjadi anggota dari program uji silang Wageningen, Belanda (WEPAL = Wageningen evaluating programmes for analytical laboratories) untuk tanah (ISE = international soil-analytical exchange programme) dan jaringan tanaman (IPE= international plant-analytical exchange programme). Selain itu Balittanah juga mengkoordinasikan program uji silang analisis tanah dan tanaman secara nasional yang pada saat ini beranggotakan 53 laboratorium tanah yang tersebar di seluruh Indonesia. DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximination of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Lembaga Penelitian Tanah. 1978. Penuntun Analisa Tanaman. Publikasi L.P.T. No. 9/71. Sudjadi, M., I.M. Widjik S., dan M. Soleh. 1971. Penuntun Analisa Tanah. Publikasi No.10/71, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. Sudjadi, M. dan I.M Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. Wood, R., A. Nilson, and H. Wallin. 1998. Quality in the food analysis laboratory. The royal society of chemistry. Thomas Graham House, Science Park, Cambridge, UK. 4 ANALISIS TANAH Persiapan contoh di laboratorium Pencatatan contoh Contoh dari lapangan yang disertai dengan surat permintaan analisis yang berisi daftar contoh dan jenis analisis yang diperlukan, diterima oleh administrasi laboratorium. Dalam buku administrasi dicatat nomor permintaan analisis, jumlah dan nomor contoh. Untuk setiap contoh dibuat nomor laboratorium yang ditulis pula pada label karton. Administrasi laboratorium juga membuat laporan hasil analisis yang telah selesai dikerjakan. Surat permintaan dan daftar hasil analisis didokumentasikan. Pengeringan a. Contoh disebarkan di atas tampah yang dialasi kertas sampul. Label karton yang berisi nomor laboratorium contoh diselipkan di bawah kertas. b. Akar-akar atau sisa tanaman segar, kerikil, dan kotoran lain dibuang. c. Bongkahan besar dikecilkan dengan tangan. d. Simpan pada rak di ruangan khusus bebas kontaminan yang terlindung dari sinar matahari atau dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 40 oC. Penumbukan/pengayakan Siapkan contoh-contoh tanah dengan ukuran partikel < 2 mm dan < 0,5 mm sebagai berikut: a. Contoh ditumbuk pada lumpang porselen atau mesin giling dan diayak dengan ayakan dengan ukuran lubang 2 mm. b. Simpan dalam botol yang sudah diberi nomor contoh. c. Contoh < 0,5 mm diambil dari contoh <2 mm, digerus atau digiling dan diayak dengan ayakan 0,5 mm. Lumpang, ayakan dan alat-alat lainnya harus bersih sebelum dipakai untuk contoh berikutnya. Penyimpanan Simpan contoh yang akan dianalisis di ruang contoh yang dekat dengan ruang timbang. Setelah selesai dianalisis disimpan dalam gudang penyimpanan contoh untuk jangka waktu tertentu agar memudahkan bila diperlukan pengulangan analisis. Penetapan kadar air kering mutlak Dasar penetapan Contoh tanah dipanaskan pada suhu 105oC selama 3 jam untuk menghilangkan air. Kadar air dari contoh diketahui dari perbedaan bobot contoh sebelum dan setelah dikeringkan. Faktor koreksi kelembapan dihitung dari kadar air contoh. 5 Peralatan ♦ Pinggan aluminium ♦ Penjepit tahan karat ♦ Oven ♦ Eksikator ♦ Neraca analitik ketelitian 3 desimal Cara kerja Timbang 5,000 g contoh tanah kering udara dalam pinggan aluminium yang telah diketahui bobotnya. Keringkan dalam oven pada suhu 105 oC selama 3 jam. Angkat pinggan dengan penjepit dan masukkan ke dalam eksikator. Setelah contoh dingin kemudian timbang. Bobot yang hilang adalah bobot air. Perhitungan Kadar Air (%) = (kehilangan bobot / bobot contoh) x 100 Faktor koreksi kadar air (fk) = 100 / (100 – kadar air) DAFTAR ACUAN Sudjadi, M., I.M. Widjik S. dan M. Soleh. 1971. Penuntun Analisa Tanah. Publikasi No.10/71, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan daya hantar listrik Dasar penetapan Nilai daya hantar listrik (DHL) mencerminkan kadar garam yang terlarut dS/M. Peningkatan konsentrasi garam yang terlarut akan menaikkan nilai DHL larutan yang diukur oleh alat menggunakan elektrode platina. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Botol kocok 100 ml ♦ Dispenser 50 ml/gelas ukur ♦ Mesin pengocok ♦ Labu semprot 500 ml ♦ Konduktometer dengan sel platina Pereaksi ♦ Air bebas ion yang bebas CO2 Air bebas ion dididihkan dan dinginkan sebelum digunakan untuk membuat semua pereaksi penetapan DHL. ♦ Larutan baku NaCl 0,010 M atau KCl 0,010 M. Larutan ini memiliki daya hantar listrik sebesar 1.413 µS cm-1. Timbang 0,5844 g NaCl p.a. yang telah dikeringkan pada 105 oC selama 2 jam atau 0,7455 g KCl p.a. yang telah dikeringkan pada 110 oC selama 2 jam. Masukan ke dalam labu ukur 1 l, larutkan dengan air bebas ion hingga 1 l. 6 Cara kerja Timbang 10,00 g contoh tanah ke dalam botol kocok, tambahkan 50 ml air bebas ion. Kocok dengan mesin pengocok selama 30 menit. Ukur DHL suspensi tanah dengan konduktometer yang telah dikalibrasi menggunakan larutan baku NaCl dan baca setelah angka mantap. Setiap akan melakukan kalibrasi dan mengukur contoh elektrode dicuci dan dikeringkan dengan tisu. Nilai DHL dilaporkan dalam satuan dS m-1 menggunakan 3 desimal. Catatan: • Prosedur di atas menggunakan rasio 1:5 • Rasio dapat berubah sesuai jenis contoh dan permintaan • 1 dS m-1 = 1 mS cm-1 = 1mmhos cm-1 = 1000 µS cm-1 = 1000 µmhos cm-1 DAFTAR ACUAN Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan pH tanah Dasar penetapan Nilai pH menunjukkan konsentrasi ion H+ dalam larutan tanah, yang dinyatakan sebagai –log[H+]. Peningkatan konsentrasi H+ menaikkan potensial larutan yang diukur oleh alat dan dikonversi dalam skala pH. Elektrode gelas merupakan elektrode selektif khusus H+, hingga memungkinkan untuk hanya mengukur potensial yang disebabkan kenaikan konsentrasi H+. Potensial yang timbul diukur berdasarkan potensial elektrode pembanding (kalomel atau AgCl). Biasanya digunakan satu elektrode yang sudah terdiri atas elektrode pembanding dan elektrode gelas (elektrode kombinasi). Konsentrasi H+ yang diekstrak dengan air menyatakan kemasaman aktif (aktual) sedangkan pengekstrak KCl 1 N menyatakan kemasaman cadangan (potensial). Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Botol kocok 100 ml -1 ♦ Dispenser 50 ml gelas ukur ♦ Mesin pengocok ♦ Labu semprot 500 ml ♦ pH meter Pereaksi ♦ Air bebas ion ♦ Larutan buffer pH 7,0 dan pH 4,0 ♦ KCl 1 M Larutkan 74,5 g KCl p.a. dengan air bebas ion hingga 1 l. 7 Cara kerja Timbang 10,00 g contoh tanah sebanyak dua kali, masing-masing dimasukkan ke dalam botol kocok, ditambah 50 ml air bebas ion ke botol yang satu (pH H2O) dan 50 ml KCl 1 M ke dalam botol lainnya (pH KCl). Kocok dengan mesin pengocok selama 30 menit. Suspensi tanah diukur dengan pH meter yang telah dikalibrasi menggunakan larutan buffer pH 7,0 dan pH 4,0. Laporkan nilai pH dalam 1 desimal. Catatan: • Prosedur di atas menggunakan rasio 1:5 • Rasio dapat berubah sesuai jenis contoh dan permintaan DAFTAR ACUAN Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan kebutuhan kapur Dasar penetapan Jumlah kapur yang diperlukan untuk meningkatkan pH suatu tanah masam ke pH yang diinginkan ditetapkan berdasarkan kurva hubungan penambahan larutan basa dengan pH tanah yang dicapai. Jumlah basa yang digunakan setara dengan kebutuhan kapur yang nilainya dikonversi ke dalam satuan bobot CaCO3 ha-1. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Botol kocok 100 ml ♦ Pipet ukur 25 ml ♦ pH meter dan elektrode gelas kombinasi ♦ Buret 10 ml ♦ Neraca analitik Pereaksi ♦ NaOH 1 N Buat dari larutan NaOH standar Titrisol ♦ NaOH 0,02 N Pipet 20 ml larutan NaOH 1 N ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 1 l. Titar larutan ini ditetapkan dengan HCl 0,02 N setiap kali dipakai. ♦ NaOH 0,05 N Pipet 25 ml larutan NaOH 1 N ke dalam labu ukur 500 ml. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 500 ml. Titar larutan ini ditetapkan dengan HCl 0,02 N setiap kali dipakai. ♦ HCl 1 N Buat dari larutan HCl standar Titrisol ♦ HCl 0,02 N 8 ♦ Pipet 2 ml larutan HCl 1 N ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Larutan sangga pH 7,0 dan pH 4,0 Cara kerja Timbang 10,000 g tanah untuk setiap tingkat penambahan basa dan masingmasing dimasukkan ke dalam botol kocok 100 ml. Tambahkan dengan pipet larutan NaOH 0,02 N masing-masing sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml dan air bebas ion sehingga jumlah setiap larutan menjadi 25 ml (air ditambahkan terlebih dahulu sebelum larutan NaOH 0,02N). Penambahan NaOH ini menghasilkan deret penambahan basa 0; 0,02; 0,04; 0,08; 0,12; 0,16 dan 0,20 m.e. Kocok campuran selama 1 jam dan ukur pH suspensi dengan alat pH meter yang telah dikalibrasi menggunakan larutan sangga pH 7,0 dan 4,0. Catatan: Tambah jumlah larutan NaOH 0,02 N atau gunakan NaOH 0,05 N bila volume larutan melebihi 25 ml. Perhitungan Buat kurva hubungan m.e. NaOH yang diperlukan dengan pH tanah yang dihasilkan atau gunakan persamaan regresi. Dapatkan m.e. NaOH yang menghasilkan pH yang dikehendaki dan hitung kebutuhan kapurnya sebagai berikut: Kebutuhan kapur (kw CaCO3 ha-1) = (m.e. NaOH x 50) x 10-8 x (1,5 x 108) x fk = m.e. NaOH x 75 x fk Keterangan: 50 = bst CaCO3 10-8 = konversi mg ke kuintal CaCO3 1,5 x 108 = konversi g contoh ke ha Faktor koreksi kadar air (fk) = 100 / (100 – % kadar Air) Catatan: Kedalaman lapisan olah 15 cm dan BD (bulk density) tanah dianggap 1. DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methods for soil testing (revised edition). University of Georgia. Athens, Georgia. Jones Jr., J.B. 1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Page, A.L., R.H. Miller and D.R. Keeney (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. Penetapan kemasaman dapat ditukar Dasar penetapan Kemasaman dapat ditukar terdiri atas Al3+ dan H+ pada koloid tanah. 3+ Al dan H+ ini dapat ditukar oleh K+ dari pengekstrak KCl 1 M. Al3+ dan H+ dalam larutan dapat dititar dengan larutan NaOH baku menghasilkan endapan Al(OH)3 dan air. Untuk penetapan Al-dd, Al(OH)3 direaksikan dengan NaF yang menghasilkan OH- yang dapat dititar dengan larutan HCl baku. 9 Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Buret 10 ml ♦ Mesin kocok ♦ Botol kocok 100 ml ♦ Erlenmeyer 50 ml ♦ Sentrifuse atau kertas saring ♦ Dispenser 50 ml ♦ Pipet 10 ml Pereaksi ♦ KCl 1M Timbang 74,6 g KCl, dilarutkan dengan air bebas ion dalam labu ukur 1 liter, kemudian diimpitkan. ♦ Penunjuk phenolphtalin (pp) 0,1% Larutkan 100 mg phenolphtalin dalam 100 ml etanol 96%. ♦ NaF 4% Larutkan 40 g NaF dengan air bebas ion dalam labu ukur 1 l, kemudian diimpitkan. ♦ Larutan baku NaOH 0,020N Pipet 20 ml NaOH 1N (Titrisol), diencerkan dan diimpitkan dengan air bebas ion dalam labu ukur 1 l. ♦ Larutan baku HCl 0,020 N Pipet 20 ml HCl 1N (Titrisol), diencerkan dan diimpitkan dengan air bebas ion dalam labu ukur 1 l. Cara kerja Timbang 5,00 g tanah <2 mm ke dalam botol kocok 100 ml, ditambah 50 ml KCl 1N. Campuran dikocok dengan mesin kocok selama 30 menit kemudian disaring atau disentrifuse. Ekstrak jernih dipipet 10 ml ke dalam erlenmeyer, dibubuhi penunjuk PP kemudian dititar dengan NaOH baku sampai warna merah jambu (T1). Tambahkan sedikit larutan penitar HCl agar warna merah jambu tepat hilang. Tambah 2 ml NaF 4% (warna ekstrak akan merah kembali). Kemudian dititar dengan HCl baku sampai warna merah tepat hilang. Kerjakan analisis blanko. Perhitungan Kemasaman dapat ditukar (dd) Al-dd dan H-dd (m.e 100 g-1) = (T1 - Tb1) x N NaOH x 50/10 x 100/5 x fk (T1 - Tb1) x N NaOH x 100 x fk Al-dd Al-dd (m.e 100 g-1) = (T2 - Tb2) x N HCl x 50/10 x 100/5 x fk (T2 - Tb2) x N HCl x 100 x fk H-dd H-dd ( m.e. 100 g-1) = kemasaman-dd – Al-dd 10 Keterangan: Tb 1 = blanko pada T1 = blanko pada T2 Tb 2 N HCl = normalitas HCl N NaOH = normalitas NaOH 50/10 = konversi dari 10 ml ke 50 ml ekstrak 100/5 = konversi dari 5 g ke 100 g contoh Faktor koreksi kadar air (fk) = 100 / (100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Sudjadi, M., I.M. Widjik S. dan M. Soleh. 1971. Penuntun Analisa Tanah. Publikasi No.10/71, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan tekstur Penetapan tekstur cara Pipet Dasar penetapan Bahan organik dioksidasi dengan H2O2 dan garam garam yang mudah larut dihilangkan dari tanah dengan HCl sambil dipanaskan. Bahan yang tersisa adalah mineral yang terdiri atas pasir, debu dan liat. Pasir dapat dipisahkan dengan cara pengayakan basah, sedangkan debu dan liat dipisahkan dengan cara pengendapan yang didasarkan pada hukum Stoke. Peralatan ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Pereaksi ♦ ♦ ♦ Piala gelas 800 ml Penyaring Berkefeld Ayakan 50 mikron Gelas ukur 500 ml Pipet 20 ml Pinggan aluminium Dispenser 50 ml Gelas ukur 200 ml Stop watch Oven berkipas Pemanas listrik Neraca analitik ketelitian 4 desimal H2O2 30% H2O2 10% H2O2 30% diencerkan tiga kali dengan air bebas ion. HCl 2N 11 ♦ Encerkan 170 ml HCl 37% teknis dengan air bebas ion dan diimpitkan hingga 1 l. Larutan Na4P2O7 4% Larutkan 40 g Na4P2O7.10 H2O dengan air bebas ion dan diimpitkan hingga 1 l. Cara kerja Timbang 10,00 g contoh tanah <2 mm, masukan ke dalam piala gelas 800 ml, ditambah 50 ml H2O2 10% kemudian dibiarkan semalam. Keesokan harinya ditambah 25 ml H2O2 30% dipanaskan sampai tidak berbusa, selanjutnya ditambahkan 180 ml air bebas ion dan 20 ml HCl 2N. Didihkan diatas pemanas listrik selama lebih kurang 10 menit. Angkat dan setelah agak dingin diencerkan dengan air bebas ion menjadi 700 ml. Dicuci dengan air bebas ion menggunakan penyaring Berkefield atau dienap-tuangkan sampai bebas asam, kemudian ditambah 10 ml larutan peptisator Na4P2O7 4%. Pemisahan pasir Suspensi tanah yang telah diberi peptisator diayak dengan ayakan 50 mikron sambil dicuci dengan air bebas ion. Filtrat ditampung dalam silinder 500 ml untuk pemisahan debu dan liat. Butiran yang tertahan ayakan dipindahkan ke dalam pinggan aluminium yang telah diketahui bobotnya dengan air bebas ion menggunakan botol semprot. Keringkan (hingga bebas air) dalam oven pada suhu 105oC, didinginkan dalam eksikator dan ditimbang (berat pasir = A g). Pemisahan debu dan liat Filtrat dalam silinder diencerkan menjadi 500 ml, diaduk selama 1 menit dan segera dipipet sebanyak 20 ml ke dalam pinggan aluminium. Filtrat dikeringkan pada suhu 105oC (biasanya 1 malam), didinginkan dalam eksikator dan ditimbang (berat debu + liat + peptisator = B g). Untuk pemisahan liat diaduk lagi selama 1 menit lalu dibiarkan selama 3 jam 30 menit pada suhu kamar. Suspensi liat dipipet sebanyak 20 ml pada kedalaman 5,2 cm dari permukaan cairan dan dimasukkan ke dalam pinggan aluminium. Suspensi liat dikeringkan dalam oven pada suhu 105oC, didinginkan dalam eksikator dan ditimbang (berat liat + peptisator = C g). Catatan: Bobot peptisator pada pemipetan 20 ml berdasarkan penghitungan adalah 0,0095 g. Bobot ini dapat pula ditentukan dengan menggunakan blanko. 25 adalah faktor yang dikonversikan dalam 500 ml dari pemipetan 20 ml. Perhitungan fraksi pasir = A g fraksi debu = 25 (B - C) g fraksi liat = 25 (C - 0,0095) g Jumlah fraksi = A + 25 (B - 0,0095) g Pasir (%) = A / {A + 25 (B - 0,0095)} x 100 Debu (%) = {25(B - C)} / {A + 25 (B - 0,0095)} x 100 Liat (%) = {25 (C - 0,0095)} / {A + 25 (B - 0,0095)} x 100 12 Keterangan A B C 100 = berat pasir = berat debu + liat + peptisator = berat liat + peptisator = konversi ke % DAFTAR ACUAN Sudjadi, M., I.M. Widjik S. dan M. Soleh. 1971. Penuntun Analisa Tanah. Publikasi No.10/71, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. Penetapan tekstur cara Hidrometer Dasar penetapan Penetapan tekstur cara hidrometer berdasarkan pengukuran berat jenis (BJ) suspensi tanah. Kadar butiran tanah dapat diketahui dari selisih BJ suspensi dengan BJ cairan media. Hidrometer yang digunakan dibuat khusus untuk pengukuran BJ suspensi tanah. Hidrometer tipe 152 H memiliki pembagian skala yang dibuat langsung dalam satuan kadar partikel g l-1. Peralatan ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Neraca analitik Mesin pengaduk khusus dengan piala logam Silinder sedimentasi atau gelas ukur 500 ml. Pengaduk khusus untuk suspensi Alat hidrometer tanah tipe 152 H Timer atau stopwatch. Pereaksi Larutan pendispersi natrium pirofosfat 4% • Larutkan 40,00 g Na4P2O7.10 H2O dengan air bebas ion dan diimpitkan hingga 1 l. Cara kerja Dalam piala gelas 100 ml ditimbang 25,00 g contoh tanah halus < 2 mm ditambahkan 10 ml larutan pendispersi natrium pirofosfat. Dipindahkan ke dalam piala logam dan diencerkan dengan air bebas ion sampai isi 200 ml. Diaduk dengan mesin pengaduk kecepatan tinggi selama 5 menit. Setelah itu semuanya dipindahkan ke dalam gelas ukur 500 ml (lakukan pembilasan), diencerkan dengan air bebas ion sampai isi 500 ml, diaduk dengan pengaduk khusus dan dibiarkan semalam. Dengan cara yang sama, tetapi tanpa contoh, dibuat penetapan blanko. Catatan: Bila mesin pengaduk tidak tersedia, timbang contoh ke dalam botol kocok, tambahkan larutan pendispersi dan kocok dengan mesin kocok selama 1 malam. Pindahkan seluruh suspensi ke dalam gelas ukur 500 ml dan cara kerja selanjutnya sama. Pengukuran fraksi campuran debu+liat Keesokan harinya setiap suspensi tanah dalam gelas ukur diaduk selama 30 detik dengan pengaduk. Setelah itu stopwatch disiapkan untuk pengukuran fraksi campuran debu dan liat. Suspensi dikocok homogen dengan pengaduk (cukup 20 detik) setelah itu hidrometer tanah segera dimasukkan ke dalam suspensi dengan 13 perlahan dan hati-hati. Tepat 40 detik setelah pengocokan, angka skala hidrometer yang berimpit dengan permukaan suspensi dicatat (Pembacaan 1). Angka tersebut menunjukkan jumlah g fraksi campuran debu+liat per liter suspensi. Larutan blanko juga diukur untuk koreksi suhu fraksi debu+liat. Pengukuran fraksi liat Suspensi tersebut dibiarkan selama 2 jam agar diperoleh suspensi liat dan segera diukur dengan alat hidrometer. Angka skala hidrometer yang berimpit dengan permukaan suspensi dicatat (Pembacaan 2). Angka tersebut adalah jumlah g fraksi liat dalam 1 l suspensi. Larutan blanko juga diukur untuk koreksi suhu fraksi liat. Perhitungan Selain koreksi kadar air, bahan organik dalam contoh perlu dikoreksi supaya fraksi pasir yang dihitung lebih mendekati kebenaran. Dari hasil pengukuran pada Pembacaan 1 diperoleh fraksi campuran debu - liat = A g/l dan blanko = a g/l, sedangkan pada Pembacaan 2 diperoleh fraksi liat = B g/l dan blankonya = b g/l. Diketahui bahwa persen bahan organik = C (% C-organik x 1,724) dan faktor koreksi kelembapan (faktor koreksi kadar air) = fk. Dalam 25 g tanah kering udara terdapat : Tanah kering 105oC = 25 (fk g)-1 Bahan organik = 25C 100 g-1 Pasir + Debu + Liat = (25 fk-1) – (25C 100) g-1 Liat = {(B - b)/2} g Debu = {(A - a)/2 - (B - b)/2} g Pasir = (25 Fk-1) – (25C 100-1) - (A - a) g Dengan demikian: Pasir (%)=[{(25 fk-1) - (25C 100-1) - (A - a)/2 g}/{(25 fk-1)-(25C 100-1) g}] x 100 Debu (%) = [{(A - a)/2 - (B -b)2 g} / {(25/Fk) – (25C/100) g}] x 100 Liat (%) = [ (B - b) g / {(25 Fk-1) – (25C 100-1) g}] x 100 Keterangan: A = fraksi campuran debu – liat (g l-1) a = blanko pada Pembacaan 1 B = fraksi liat (g l-1) b = blanko pada Pembacaan 2 C = persen bahan organik (% C-organik x 1,724) fk = faktor koreksi kadar air = 100 / (100 – % kadar air) 2 = konversi kadar suspensi dari g l-1 ke g 500 ml-1 100 = konversi ke % 14 DAFTAR ACUAN Bouyoucos, C.J. 1962. Hydrometer method improved for making particle size analysis of soils. Agronomy Journal 54 : 464 - 465. Penetapan P dan K ekstrak HCl 25% Dasar penetapan Fosfor dalam bentuk cadangan ditetapkan dengan menggunakan pengekstrak HCl 25%. Pengekstrak ini akan melarutkan bentuk-bentuk senyawa fosfat dan kalium mendekati kadar P dan K-total. Ion fosfat dalam ekstrak akan bereaksi dengan ammonium molibdat dalam suasana asam membentuk asam fosfomolibdat. Selanjutnya akan bereaksi dengan asam askorbat menghasilkan larutan biru molibdat. Intensitas warna larutan dapat diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm, sedangkan kalium diukur dengan flamefotometer. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Botol kocok ♦ Mesin kocok bolak-balik ♦ Alat sentrifus ♦ Tabung reaksi ♦ Dispenser 10 ml ♦ Pipet volume 0,5 ml ♦ Pipet volume 2 ml ♦ Pipet ukur 10 ml ♦ Spektrofotometer UV-VIS ♦ Flamefotometer Pereaksi ♦ HCl 25 % Encerkan 675,68 ml HCl pekat (37%) dengan air bebas ion menjadi 1 l. ♦ Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dengan 100 ml air bebas ion dalam labu ukur 1 l. Tambahkan 0,277 g K (SbO)C4H4O6 0,5 H2O dan secara perlahan 140 ml H2SO4 pekat. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. ♦ Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat, pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. ♦ Standar induk 1.000 ppm PO4 (Titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk PO4 Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1 l. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. ♦ Standar induk 200 ppm PO4 Pipet 50 ml standar induk PO4 1.000 ppm titrisol ke dalam labu 250 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. 15 ♦ Standar induk 1.000 ppm K (Titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk K Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1000 ml. Impitkan dengan air bebas bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. ♦ Standar 200 ppm K Pipet 50 ml dari standar induk 1000 ppm K ke dalam labu ukur 250 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. ♦ Deret standar PO4 (0; 4; 8; 16; 24; 32 dan 40 ppm) Pipet berturut turut 0; 2; 4; 8; 12; 16 dan 20 ml standar 200 ppm PO4 ke dalam labu ukur 100 ml. Masing-masing ditambah 5 ml HCl 25% dan air bebas ion hingga tanda garis lalu kocok. ♦ Deret standar K (0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ppm) Pipet berturut turut 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 200 ppm K ke dalam labu ukur 100 ml. Masing-masing ditambah 5 ml HCl 25% dan air bebas ion hingga tanda garis lalu kocok. Cara kerja Timbang 2,000 g contoh tanah ukuran <2 mm, dimasukkan ke dalam botol kocok dan ditambahkan 10 ml HCl 25% lalu kocok dengan mesin kocok selama 5 jam. Masukan ke dalam tabung reaksi dibiarkan semalam atau disentrifuse. Pipet 0,5 ml ekstrak jernih contoh ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 9,5 ml air bebas ion (pengenceran 20x) dan dikocok. Pipet 2 ml ekstrak contoh encer dan deret standar masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 10 ml larutan pereaksi pewarna P dan dikocok. Dibiarkan selama 30 menit, lalu ukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Untuk kalium, ekstrak contoh encer dan deret standar K diukur langsung dengan alat flamefotometer. Perhitungan Kadar P potensial mg P2O5 (100 g)-1 = ppm kurva x (ml ekstrak/1.000 ml) x (100 g/g contoh) x fp x (142/90) x fk = ppm kurva x 10/1.000 x 100/2 x 20 x 142/90 x fk = ppm kurva x 10 x 142/190 x fk Kadar K potensial mg K2O (100g)-1 = ppm kurva x 10 x 94/78 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran (20) 142/190 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P2O5 94/78 = faktor konversi bentuk K menjadi K2O DAFTAR ACUAN Sudjadi, M., I.M. Widjik S. dan M. Soleh. 1971. Penuntun Analisa Tanah. Publikasi No.10/71, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. 16 Penetapan P-tersedia metode Olsen Dasar penetapan Fosfat dalam suasana netral/alkalin, dalam tanah akan terikat sebagai Ca, Mg-PO4. Pengekstrak NaHCO3 akan mengendapkan Ca, Mg-CO3 sehingga PO43dibebaskan ke dalam larutan. Pengekstrak ini juga dapat digunakan untuk tanah masam. Fosfat pada tanah masam terikat sebagai Fe, Al-fosfat. Penambahan pengekstrak NaHCO3 pH 8,5 menyebabkan terbentuknya Fe, Al-hidroksida, sehingga fosfat dibebaskan. Pengekstrak ini biasanya digunakan untuk tanah ber-pH >5,5. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Botol kocok 50 ml ♦ Kertas saring W 91 ♦ Tabung reaksi ♦ Pipet 2 ml ♦ Dispenser 20 ml ♦ Dispenser 10 ml ♦ Mesin pengocok ♦ Spektrofotometer UV-VIS Pereaksi ♦ Pengekstrak NaHCO3 0,5 M, pH 8,5 Larutkan 42,0 g NaHCO3 dengan air bebas ion menjadi 1 l, pH larutan ditetapkan menjadi 8,5 dengan penambahan NaOH. ♦ Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dengan 100 ml air bebas ion dalam labu ukur 1 l. Tambahkan 0,277 g K (SbO)C4H4O6 0,5 H2O dan secara perlahan 140 ml H2SO4 pekat. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. ♦ Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat. Tambahkan 25 ml H2SO4 4N, kemudian dijadikan 1 l dengan air bebas ion. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. ♦ Standar induk 1.000 ppm PO4 (Titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk PO4 Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1 liter. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. ♦ Standar induk 100 ppm PO4 Pipet 10 ml larutan standar induk 1.000 ppm PO4 ke dalam labu 100 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. ♦ Deret standar PO4 (0-20 ppm) Pipet berturut-turut 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ml larutan standar 100 ppm PO4 ke dalam labu ukur 100 ml, diencerkan dengan pengekstrak Olsen hingga 100 ml. Cara kerja Timbang 1,000 g contoh tanah <2 mm, dimasukkan ke dalam botol kocok, ditambah 20 ml pengekstrak Olsen, kemudian dikocok selama 30 menit. Saring dan 17 bila larutan keruh dikembalikan lagi ke atas saringan semula. Ekstrak dipipet 2 ml ke dalam tabung reaksi dan selanjutnya bersama deret standar ditambahkan 10 ml pereaksi pewarna fosfat, kocok hingga homogen dan biarkan 30 menit. Absorbansi larutan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Perhitungan Kadar P2O5 tersedia (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak/1.000 ml x 1.000 g/g contoh x fp x 142/90 x fk = ppm kurva x 20/1.000 x 1.000/1 x 142/90 x fk = ppm kurva x 20 x 142/90 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) 142/190 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P2O5 fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Olsen, S.R., C.V.Cole, F.S. Watanabe, and L.A. Dean. 1954. Estimation of available P in soils by extraction with sodium bicarbonate. USDA cir.No 939. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Watanabe, F.S. and R. Olsen. 1965. Test of an ascorbic acid methods for determination of phosphorus in water and NaHCO3 extracts from soil. Soil Sci.Am.Proc.29 : 677 - 678. Penetapan P tersedia metode Bray Dasar penetapan Fosfat dalam suasana asam akan diikat sebagai senyawa Fe, Al-fosfat yang sukar larut. NH4F yang terkandung dalam pengekstrak Bray akan membentuk senyawa rangkai dengan Fe & Al dan membebaskan ion PO43-. Pengekstrak ini biasanya digunakan pada tanah dengan pH <5,5. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Dispenser 25 ml ♦ Dispenser 10 ml ♦ Tabung reaksi ♦ Pipet 2 ml ♦ Kertas saring ♦ Botol kocok 50 ml ♦ Mesin pengocok ♦ Spektrofotometer 18 Pereaksi ♦ HCl 5 N Sebanyak 416 ml HCl p.a. pekat (37 %) dimasukkan dalam labu ukur 1.000 ml yang telah berisi sekitar 400 ml air bebas ion, kocok dan biarkan menjadi dingin. Tambahkan lagi air bebas ion hingga 1.000 ml. ♦ Pengekstrak Bray dan Kurts I (larutan 0,025 N HCl + NH4F 0,03 N) Timbang 1,11 g hablur NH4F, dilarutkan dengan lebih kurang 600 ml air bebas ion, ditambahkan 5 ml HCl 5 N, kemudian diencerkan sampai 1 l. ♦ Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dengan 100 ml air bebas ion dalam labu ukur 1 liter. Tambahkan 0,277 g K (SbO)C4H4O6 0,5 H2O dan secara perlahan 140 ml H2SO4 pekat. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. ♦ Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat, kemudian dijadikan 1 liter dengan air bebas ion. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. ♦ Standar induk 1.000 ppm PO4 (Titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk PO4 Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1 l. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. ♦ Standar induk 100 ppm PO4 Pipet 10 ml larutan standar induk 1.000 ppm PO4 ke dalam labu 100 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. ♦ Deret standar PO4 (0-20 ppm) Pipet berturut-turut 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ml larutan standar 100 ppm PO4 ke dalam labu ukur 100 ml, diencerkan dengan pengekstrak Olsen hingga 100 ml. Cara kerja Timbang 2,500 g contoh tanah <2 mm, ditambah pengekstrak Bray dan Kurt I sebanyak 25 ml, kemudian dikocok selama 5 menit. Saring dan bila larutan keruh dikembalikan ke atas saringan semula (proses penyaringan maksimum 5 menit). Dipipet 2 ml ekstrak jernih ke dalam tabung reaksi. Contoh dan deret standar masing-masing ditambah pereaksi pewarna fosfat sebanyak 10 ml, dikocok dan dibiarkan 30 menit. Diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Perhitungan Kadar P2O5 tersedia (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak/1.000 ml x 1.000g/g contoh x fp x 142/190 x fk = ppm kurva x 25/1.000 x 1.000/2,5 x fp x 142/190 x fk = ppm kurva x 10 x fp x 142/190 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) 142/190 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P2O5 fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 19 DAFTAR ACUAN Bray, R.H. and L.T. Kurtz. 1945. Determination of total organik and available forms of phosphorus in soils. Soil Sci. 59: 39 - 45. Burt, R. (Ed.). 2004. Soil Survey Laboratory Methods Manual, Soil Survey Investigations Report No.42, Vers.4,0. Natural Resources Conservation Service, United States Department of Agriculture. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan erapan P Dasar penetapan Pengekstrak CaCl2 0,01 M dapat menghasilkan ekstrak yang jernih dan dianggap sesuai dengan kekuatan ion larutan di dalam tanah dari daerah temperate. Oleh karena reaksi keseimbangan antara P dalam larutan dengan komponenkomponen tanah berjalan lambat, maka diperlukan waktu untuk mencapai kesetimbangan minimum 6 hari. Berdasarkan kurva hubungan P dalam larutan dengan P dierap, maka jumlah pupuk P yang diperlukan untuk mencapai batas kritis konsentrasi P terlarut dapat ditentukan. Sifat-sifat erapan P tanah seperti kapasitas erap dan daya erap P dapat pula ditentukan berdasarkan data ini dengan menggunakan model erapan P. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Alat sentrifusi ♦ Tabung sentrifusi 50 ml ♦ Pipet isi dan pipet ukur ♦ Mesin kocok ♦ Tabung reaksi ♦ Spektrofotometer UV-VIS Pereaksi ♦ Larutan CaCl2 0,1 M Larutkan 14,700 g CaCl2.2H2O dengan air bebas ion hingga 1l. ♦ Larutan CaCl2 0,01 M Larutan CaCl2 0,1 M diencerkan 10 x dengan air bebas ion. ♦ Larutan 500 ppm P Larutkan 2,1954 KH2PO4 p.a. (yang telah dikeringkan pada 130 oC selama 2 jam) dengan air bebas ion di dalam labu ukur 1.000 ml, tambahkan beberapa tetes kloroform, kemudian diimpitkan sampai tanda garis. ♦ Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dengan 100 ml air bebas ion dalam labu ukur 1 l. Tambahkan 0,277 g K (SbO)C4H4O6 0,5 H2O dan secara perlahan 140 ml H2SO4 pekat. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. 20 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat, kemudian dijadikan 1 l dengan air bebas ion. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. Larutan deret kepekatan P (0-50 ppm) Pipet 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar pokok 500 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Masing-masing ditambahkan 10 ml larutan CaCl2 0,1 M dan kemudian diimpitkan dengan air bebas ion. Larutan-larutan ini mempunyai kepekatan 0; 5; 10; 20; 30; 40 dan 50 ppm P (µg P/ml). Deret kepekatan P dapat diubah sesuai keperluan (jenis tanah) dengan menambah atau mengurangi volume pemipetan standar pokok P. Standar P 50 ppm Pipet 10 ml standar pokok 500 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 10 ml larutan CaCl2 0,1 M dan kemudian diimpitkan dengan air bebas ion. Standar P 1 ppm Pipet 2 ml standar 50 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan larutan CaCl2 0,01 M hingga tepat 100 ml. Deret standar P ( 0-1 ppm) Pipet berturut turut 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 1 ppm P ke dalam tabung reaksi. Tambahkan larutan CaCl2 0,01 M sehingga volume masing-masing menjadi 10 ml. Bila menggunakan standar PO43-, deret standar dibuat dengan kepekatan 0 – 4 ppm. Cara kerja Timbang 2,000 g tanah untuk setiap tingkat kepekatan P dan masing-masing dimasukkan ke dalam tabung sentrifusi. Masing-masing ditambah 20 ml larutan deret kepekatan P. Inkubasi selama 6 hari sambil dikocok 2x30 menit hari-1 (pagi dan siang). Setelah selesai inkubasi, campuran disentrifus untuk mendapatkan cairan jernih. Pipet 10 ml ekstrak jernih contoh dan deret standar P (0-1 ppm) ke dalam tabung kimia, ditambah 2 ml pereaksi pewarna P pekat, kocok dan biarkan selama 30 menit. Ukur absorbansi larutan dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Perhitungan ♦ ♦ P dalam larutan tanah (µg P ml-1) = ppm kurva P dierap = (P ditambahkan – P larutan tanah) x 10 x fk -1 (µg P g tanah ) (µg P ml-1) (µg P ml-1) ♦ Buat kurva hubungan P dalam larutan (sumbu x) dengan P dierap (sumbu y) untuk setiap tingkat penambahan P pada kertas grafik semilog. Kebutuhan pupuk P untuk mencapai kadar P tertentu dalam larutan (misalnya 0,02 ppm P) dicari dari kurva. ♦ Penggunaan model erapan P (misalnya Langmuir) untuk hubungan P terlarut dan P dierap tanah dapat menjelaskan sifat-sifat erapan P tanah. 21 Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) 95/31 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P (bila digunakan) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Fox, R.L., and Kamprath E.J. 1970. Phosphate Sorption Isotherms for Evaluating the Phosphate Requirement of Soils. Soil Sci. Soc. Am. Pro. 34: 902-907 Penetapan retensi P Dasar penetapan Daya retensi tanah terhadap fosfat ditetapkan dengan cara Blackmore (1981). Contoh tanah ditambahkan larutan fosfat 1000 ppm hingga tercapai kesetimbangan antara fosfat yang dierap dengan fosfat dalam larutan. Kadar fosfat dalam larutan diukur untuk menghitung persen fosfat yang ditahan oleh tanah. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Mesin kocok bolak balik 180 goyangan menit-1 ♦ Alat sentrifusi dengan tabung sentrifuge 50 ml ♦ Alat dispenser/diluter ♦ Tabung reaksi ♦ Alat spektrofotometer Pereaksi ♦ Larutan pengekstrak 1000 ppm P. Dalam labu ukur 1 l dilarutkan 4,40 g KH2PO4 dan 16,4 g natrium asetat anhidrous dengan 500 ml air bebas ion. Ditambah 11,5 ml asam asetat glasial dan diencerkan dengan air bebas ion sampai tanda 1 l. ♦ Larutan asam vanadat Larutkan 0,5 g amonium vanadat (NH4VO3) dalam 500 ml air bebas ion mendidih, dinginkan dan tambahkan perlahan 70 ml HNO3 pekat. Encerkan larutan hingga 1 l dengan air bebas ion. ♦ Larutan amonium molibdat Larutkan 10 g amonium molibdat {(NH4)6Mo7O24.4H2O} dalam 500 ml air bebas ion hangat. Setelah dingin encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. ♦ Larutan campuran asam vanadomolibdat Campurkan 1 bagian larutan asam vanadat dengan 1 bagian larutan amonium molibdat. ♦ Larutan standar 0 Larutkan 16,4 g natrium asetat anhidrous dan 11,5 ml asam asetat glasial dalam labu 500 ml dengan air bebas ion hingga 1 l. ♦ Deret standar retensi - P Ke dalam tabung reaksi masing-masing dipipet: 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml larutan pengekstrak 1.000 ppm P. Semuanya diencerkan dengan standar nol 22 menjadi 10 ml. Deret ini mempunyai kepekatan : 0; 100; 200; 400; 600; 800 dan 1.000 ppm P atau: 100; 90; 80; 60; 40; 20 dan 0% retensi P. Cara kerja Timbang contoh halus < 2 mm, sebanyak 2,000 g ke dalam tabung sentrifusi, ditambah 10 ml larutan retensi 1.000 ppm P dengan pipet. Dikocok selama satu malam (16 jam) dengan mesin pengocok. Sentrifusi pada 2.000 rpm selama 10 menit untuk mendapat ekstrak jernih. Dipipet 0,5 ml ekstrak jernih contoh dan deret standar kedalam tabung kimia dan ditambah 9,5 ml pereaksi asam vanadomolibdat. Kocok dan dibiarkan 30 menit. Ukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 466 nm. Perhitungan Retensi P (%) = {1000 – (ppm kurva x fp x fk) / 1.000} x 100 Keterangan: ppm kurva = kadar P dalam contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 1000 = kadar P dalam pengekstrak (mg/l) 100 = konversi ke persen DAFTAR ACUAN Blackmore, L.C., P.L. Searle and B.K. Daly. 1981. Methods for chemicals analysis of soils. N.Z. Soil Bureau Sci.Rep.10A. Soil Bureau, Lower Hutt. New Zealand. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan susunan kation, kapasitas tukar kation (KTK) dan kejenuhan basa (KB) Dasar penetapan Koloid tanah (mineral liat dan humus) bermuatan negatif, sehingga dapat menyerap kation-kation. Kation-kation dapat ditukar (dd) (Ca2+, Mg2+, K+ dan Na+) dalam kompleks jerapan tanah ditukar dengan kation NH4+ dari pengekstrak dan dapat diukur. Untuk penetapan KTK tanah, kelebihan kation penukar dicuci dengan etanol 96%. NH4+ yang terjerap diganti dengan kation Na+ dari larutan NaCl, sehingga dapat diukur sebagai KTK. Kation-kation dapat ditukar (Ca2+, Mg2+, K+ dan Na+) ditetapkan dengan Flamefotometer dan AAS. NH4+ (KTK) ditetapkan secara kolorimetri dengan metode Biru Indofenol. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Tabung perkolasi ♦ Labu ukur 50 ml 23 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Labu ukur 100 ml Labu semprot Spektrofotometer Flamefotometer Atomic absorption spectrophotometer (AAS) Pereaksi Perkolasi ♦ Amonium asetat 1 M, pH 7,0 Timbang 77,08 g serbuk NH4-Asetat p.a. ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air bebas ion hingga serbuk melarut dan tepatkan 1 l. Atau dapat pula dibuat dengan cara berikut: Campurkan 60 ml asam asetat glasial dengan 75 ml ammonia pekat (25%) dan diencerkan dengan air bebas ion hingga sekitar 900 ml. pH campuran diatur menjadi 7,00 dengan penambahan amonia atau asam asetat, kemudian diimpitkan tepat 1 l. ♦ Etanol 96 % ♦ HCl 4 N Sebanyak 33,3 ml HCl p.a. 37 % dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi sekitar 50 ml air bebas ion, kocok dan biarkan dingin. Tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml. ♦ NaCl 10% Timbang 100 g NaCl, kemudian dilarutkan dengan air bebas ion. Tambahkan 4 ml HCl 4 N dan diimpitkan tepat 1 l. ♦ Pasir kuarsa bersih ♦ Filter pulp Kation-kation dapat ditukar ♦ Amonium asetat 4 M, pH 7,0 Buat dengan cara yang sama seperti amonium asetat 1 M, namun menggunakan 4 x 77,08 g NH4-Asetat p.a. ♦ Standar pokok 1.000 ppm K ♦ Standar pokok 1.000 ppm Na ♦ Standar pokok 1.000 ppm Ca ♦ Standar pokok 1.000 ppm Mg ♦ Standar campur 200 ppm K, 100 ppm Na, 50 ppm Mg, 250 ppm Ca. Pipet masing-masing : 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm K 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Na 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mg 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm Ca Campurkan dalam labu ukur 100 ml, ditambah 25 ml NH4-asetat 4 N, pH 7,0, kemudian diimpitkan. ♦ Deret standar campur K (0-250 ppm), Na (0-100 ppm), Ca (0-250 ppm) dan Mg (0-50 ppm) Pipet standar campuran sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan larutan NH4Ac 1 M, pH 7. ♦ Larutan La 2,5 % 24 ♦ Timbang 66,8376 gram LaCl3.7H2O, dilarutkan dengan air bebas ion ditambahkan 10 ml HCl 25% kemudian diimpitkan tepat 1 l. Larutan La 0,125 % Larutan La 2,5 % diencerkan 20 x dengan air bebas ion. KTK cara destilasi ♦ Asam borat 1% Larutkan 10 g H3BO3 dengan 1 l air bebas ion. ♦ Natrium Hidroksida 40 % Larutkan 400 g NaOH dalam piala gelas dengan air bebas ion 600 ml, setelah dingin diencerkan menjadi 1 l. ♦ Batu didih Buat dari batu apung yang dihaluskan. ♦ Penunjuk Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 200 ml etanol 96 %. ♦ Larutan baku asam sulfat 1N (Titrisol) ♦ H2SO4 4 N Masukkan 111 ml H2SO4 p.a. pekat (95-97 %) sedikit demi sedikit melalui dinding labu labu ukur 1.000 ml yang telah berisi sekitar 700 ml air bebas ion, kocok dan biarkan menjadi dingin. Tambahkan lagi air bebas ion hingga 1.000 ml, kocok. ♦ Larutan baku asam sulfat 0,050 N Pipet 50 ml larutan baku H2SO4 1 N Titrisol ke dalam labu ukur 1 l. Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Atau: Pipet 12,5 ml asam sulfat 4 N ke dalam labu ukur 1 l. Encerkan sampai 1 l dengan air bebas ion, kocok. Kenormalannya ditetapkan dengan bahan baku boraks. KTK cara kolorimetri ♦ Larutan Fenol Timbang 80 g serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan dengan sekitar 500 ml air bebas ion secara perlahan sambil diaduk. Setelah dingin ditambahkan 125 g serbuk Fenol, kemudian diencerkan dengan air bebas ion dan diimpitkan sampai garis 1 l. ♦ Larutan sangga Tartrat Timbang 80 g serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan dengan sekitar 500 ml air bebas ion. Setelah dingin tambahkan 50 g K, Na-tartrat dan aduk hingga larut. Diimpitkan dengan air bebas ion sampai tepat 1 l. ♦ Natrium hipoklorit (NaOCl) 5 % ♦ Standar pokok 2500 m.e. NH4+ l-1 Timbang 16,500 g serbuk (NH4)2SO4 p.a. ke dalam labu ukur 100 ml. Larutkan dengan air bebas ion dan impitkan hingga tepat 100 ml. ♦ Standar NH4+ 0 dan 25 me l-1 Pipet standar 2500 m.e. NH4+ l-1 sebanyak 1 ml, dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 10 ml etanol 96 % dan diimpitkan dengan larutan NaCl 10 %. Dengan cara yang sama, tapi tanpa pemipetan larutan standar dibuat standar 0. 25 ♦ Deret standar 0 – 25 m.e. NH4+ l-1 Pipet ke dalam tabung reaksi masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 25 me NH4+. Tambahkan standar 0 hingga semuanya menjadi 10 ml. Cara kerja Timbang 2,500 g contoh tanah ukuran >2 mm, lalu dicampur dengan lebih kurang 5 g pasir kuarsa. Dimasukkan ke dalam tabung perkolasi yang telah dilapisi berturut-turut dengan filter flock dan pasir terlebih dahulu (filter pulp digunakan seperlunya untuk menutup lubang pada dasar tabung, sedangkan pasir kuarsa sekitar 2,5 g) dan lapisan atas ditutup dengan penambahan 2,5 g pasir. Ketebalan setiap lapisan pada sekeliling tabung diupayakan supaya sama. Siapkan pula blanko dengan pengerjaan seperti contoh tapi tanpa contoh tanah. Kemudian diperkolasi dengan amonium acetat pH 7,0 sebanyak 2 x 25 ml dengan selang waktu 30 menit. Filtrat ditampung dalam labu ukur 50 ml, diimpitkan dengan amonium acetat pH 7,0 untuk pengukuran kationdd: Ca, Mg, K dan Na (S). Tabung perkolasi yang masih berisi contoh diperkolasi dengan 100 ml etanol 96 % untuk menghilangkan kelebihan amonium dan perkolat ini dibuang. Sisa etanol dalam tabung perkolasi dibuang dengan pompa isap dari bawah tabung perkolasi atau pompa tekan dari atas tabung perkolasi. Selanjutnya diperkolasi dengan NaCl 10 % sebanyak 50 ml, filtrat ditampung dalam labu ukur 50 ml dan diimpitkan dengan larutan NaCl 10 %. Filtrat ini digunakan untuk pengukuran KTK dengan cara destilasi atau kolorimetri. Pengukuran kationdd (Ca, Mg, K, Na) Perkolat NH4-Ac (S) dan deret standar K, Na, Ca, Mg masing-masing dipipet 1 ml ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 9 ml larutan La 0,25 %. Diukur dengan AAS (untuk Ca dan Mg) dan flamefotometer (untuk pemeriksaan K dan Na) menggunakan deret standar sebagai pembanding. Pengukuran KTK Pengukuran KTK dapat dilakukan dengan cara destilasi langsung, destilasi perkolat NaCl dan kolorimetri perkolat NaCl. Destilasi langsung Pada cara destilasi langsung dikerjakan seperti penetapan N-Kjeldahl tanah, isi tabung perkolasi (setelah selesai tahap pencucian dengan etanol) dipindahkan secara kuantitatif ke dalam labu didih. Gunakan air bebas ion untuk membilas tabung perkolasi. Tambahkan sedikit serbuk batu didih dan aquades hingga setengah volume labu. Siapkan penampung untuk NH3 yang dibebaskan yaitu erlenmeyer yang berisi 10 ml asam borat 1 % yang ditambah 3 tetes indikator Conway (berwarna merah) dan dihubungkan dengan alat destilasi. Dengan gelas ukur, tambahkan NaOH 40% sebanyak 10 ml ke dalam labu didih yang berisi contoh dan secepatnya ditutup. Destilasi hingga volume penampung mencapai 50– 75 ml (berwarna hijau). Destilat dititrasi dengan H2SO4 0,050 N hingga warna merah muda. Catat volume titar contoh (Vc) dan blanko (Vb). Destilasi perkolat Cara destilasi perkolat dilakukan dengan memipet 10 ml perkolat NaCl ke dalam labu didih (tambahkan 1 ml parafin cair untuk menghilangkan buih). Selanjutnya dikerjakan dengan cara yang sama seperti destilasi langsung. 26 Kolorimetri Pengukuran NH4+ (KTK) dapat pula ditetapkan dengan metode Biru Indofenol. Pipet masing-masing 0,5 ml perkolat NaCl dan deret standar NH4+ (0; 2,5; 5; 10; 15; 20 dan 25 me l-1) ke dalam tabung reaksi. Ke dalam setiap tabung tambahkan 9,5 ml air bebas ion (pengenceran 20x). Pipet ke dalam tabung reaksi lain masing-masing 2 ml ekstrak encer dan deret standar. Tambahkan berturutturut larutan sangga Tartrat dan Na-fenat masing-masing sebanyak 4 ml, kocok dan biarkan 10 menit. Tambahkan 4 ml NaOCl 5 %, kocok dan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 636 nm setelah 10 menit sejak pemberian pereaksi ini. Catatan: Warna biru indofenol yang terbentuk kurang stabil. Upayakan agar diperoleh waktu yang sama antara pemberian pereaksi dan pengukuran untuk setiap deret standar dan contoh. Perhitungan Kationdd (cmol (+) kg-1) (S) = (ppm kurva/bst kation) x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1.000 g g contoh-1 x 0,1 x fp x fk = (ppm kurva/bst kation) x 50 ml 1.000 ml-1 x 1.000 g 2,5 g-1 x 0,1 x fp x fk = (ppm kurva/bst kation) x 2 x fp1 x fk Kapasitas tukar kation (T) Cara destilasi langsung: KTK (cmol (+) kg-1) = (Vc - Vb) x N H2SO4 x 0,1 x 1.000 g/2,5 g x fk = (Vc - Vb) x N H2SO4 x 40 x fk Cara destilasi perkolat: KTK (cmol (+) kg-1) = (Vc - Vb) x N H2SO4 x 0,1 x 1.000 g/2,5g x 50 ml/10 ml x fk = (Vc - Vb) x N H2SO4 x 200 x fk Cara kolorimetri: KTK (cmol (+) kg-1) = me kurva x 50 ml 1.000 ml-1 x 1.000 g 2,5 g-1 x 0,1 x fp2 x fk = me kurva x 2 x fp2 x fk Kejenuhan basa = jumlah kationdd (S)/KTK (T) x 100 % Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 0,1 = faktor konversi dari mmol ke cmol bst kation = bobot setara: Ca : 20, Mg: 12,15, K: 39, Na: 23 fp1 = faktor pengenceran (10) fp2 = faktor pengenceran (20) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) S = jumlah basa-basa tukar (cmol(+) kg-1) T = kapasitas tukar kation (cmol(+) kg-1) 27 DAFTAR ACUAN Burt, R. (Ed.). 2004. Soi Survey Laboratory Methods Manual, Soil Survey Investigations Report No.42, Vers.4,0. Natural Resources Conservation Service, United States Department of Agriculture. Hajek, B.F., F. Adams, and J.T. Cope. 1972. Rapid determination of exchangeable bases, acidity and cation exchange capacity. Soil Sci. Soc. Am. Proc. 36: 436 - 438. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan ketersediaan Fe, Mn, Cu, dan Zn ekstrak DTPA Dasar penetapan Pengekstrak DTPA (dietilene triamine penta acetic acid) dapat melarutkan ion-ion logam dalam bentuk senyawa khelat. Pada pH 7,3 larutan DTPA memiliki daya khelat paling kuat untuk mengekstrak besi dan logam-logam lainnya. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Botol kocok plastik 100 ml ♦ Mesin kocok ♦ Kertas saring / sentrifusi ♦ Tabung reaksi ♦ AAS Pereaksi ♦ Larutan pengekstrak DTPA pH 7,3 Timbang 1,96 g DTPA dan 14,92 g TEA (tri etanol amin), masukan ke dalam labu ukur 1.000 ml dan larutkan dengan air suling sampai ± 900 ml. Ditambahkan 1,47 g CaCl2.2H2O dan dikocok, lalu pH diatur sampai pH 7,3 dengan HCl 6 N, selanjutnya diimpitkan dengan air bebas ion menjadi 1.000 ml (kepekatan akhir ; 0,005 M DTPA, 0,1 M TEA dan 0,1 M CaCl2). ♦ Larutan pengekstrak DTPA pekat empat kali Cara pembuatan seperti pengekstrak DTPA dengan konsentrasi bahan empat kali. ♦ Standar campur pekat Fe (100 ppm), Mn (100 ppm), Cu (50 ppm) dan Zn (25 ppm). Dipipet masing-masing : 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Fe 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mn 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Cu 2,5 ml standar pokok 1.000 ppm Zn Campurkan dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 25 ml pengekstrak DTPA pekat empat kali dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. ♦ Standar campur encer Fe (10 ppm), Mn (10 ppm), Cu (5 ppm) dan Zn (2,5 ppm) Pipet 10 ml larutan standar campur pekat ke dalam labu ukur 100 ml. Encerkan dengan pengekstrak DTPA hingga tepat 100 ml. 28 ♦ Deret standar campuran: Fe : 0 ; 1 ; 2 ; 4 ; 6 ; 6 ; 8 ; dan 10 ppm Mn : 0 ; 1 ; 2 ; 4 ; 6 ; 6 ; 8 ; dan 10 ppm Cu : 0 ; 0,5 ; 1 ; 2 ; 3 ; 4 ; dan 5 ppm Zn : 0 ; 0,25 ; 0,5 ; 1,0 ; 1,5 ; 2,0 ; dan 2,5 ppm Pipet standar campur encer sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml dan masingmasing dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan pengekstrak DTPA hingga volume setiap tabung menjadi 10 ml. Cara kerja Timbang 10,00 g contoh tanah halus <2 mm. Tambah 20 ml larutan pengekstrak DTPA, dikocok dengan mesin kocok selama 2 jam. Suspensi disaring atau disentrifusi untuk mendapatkan ekstrak yang jernih. Ukur masing-masing unsur dengan alat AAS. Perhitungan Kadar unsur-unsur (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1.000 g g contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 20 1.000-1 x 1.000 10-1 x fp x fk = ppm kurva 2 x fp x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methods for soil testing (revised edition). University of Georgia. Athens, Georgia. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Penetapan C-organik Dasar penetapan Karbon sebagai senyawa organik akan mereduksi Cr6+ yang berwarna jingga menjadi Cr3+ yang berwarna hijau dalam suasana asam. Intensitas warna hijau yang terbentuk setara dengan kadar karbon dan dapat diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 561 nm. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Spektrofotometer 29 ♦ Labu ukur 100 ml ♦ Dispenser 10 ml ♦ Pipet volume 5 ml Pereaksi ♦ Asam sulfat pekat ♦ Kalium dikromat 1 N Larutkan 98,1 g kalium dikromat dengan 600 ml air bebas ion dalam piala gelas, tambahkan 100 ml asam sulfat pekat, panaskan hingga larut sempurna, setelah dingin diencerkan dalam labu ukur 1 l dengan air bebas ion sampai tanda garis. ♦ Larutan standar 5.000 ppm C Larutkan 12,510 g glukosa p.a. dengan air suling di dalam labu ukur 1 l dan diimpitkan. Cara kerja Timbang 0,500 g contoh tanah ukuran <0,5 mm, dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 5 ml K2Cr2O7 1 N, lalu dikocok. Tambahkan 7,5 ml H2SO4 pekat, dikocok lalu diamkan selama 30 menit. Diencerkan dengan air bebas ion, biarkan dingin dan diimpitkan. Keesokan harinya diukur absorbansi larutan jernih dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 561 nm. Sebagai pembanding dibuat standar 0 dan 250 ppm, dengan memipet 0 dan 5 ml larutan standar 5.000 ppm ke dalam labu ukur 100 ml dengan perlakuan yang sama dengan pengerjaan contoh. Catatan: Bila pembacaan contoh melebihi standar tertinggi, ulangi penetapan dengan menimbang contoh lebih sedikit. Ubah faktor dalam perhitungan sesuai berat contoh yang ditimbang. Perhitungan Kadar C-organik (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = ppm kurva x 100 1.000-1 x 100 500-1 x fk = ppm kurva x 10 500-1 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 100 = konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Black, C.A. 1965. Methods of Soil Analysis, Part 2, Agronomy 9. American Society of Agronomy, Madison,Wis. Graham, E.R. 1948. Determination of soil organik mater by means of a photoelectric colorimeter. Soil Sci. 65: 181 - 183. Page, A.L. , Miller R.H.and Keeney D.R. (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. 30 Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan N-total Dasar penetapan Senyawa nitrogen organik dioksidasi dalam lingkungan asam sulfat pekat dengan katalis campuran selen membentuk (NH4)2SO4. Kadar amonium dalam ekstrak dapat ditetapkan dengan cara destilasi atau spektrofotometri. Pada cara destilasi, ekstrak dibasakan dengan penambahan larutan NaOH. Selanjutnya, NH3 yang dibebaskan diikat oleh asam borat dan dititar dengan larutan baku H2SO4 menggunakan penunjuk Conway. Cara spektrofotometri menggunakan metode pembangkit warna indofenol biru. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Tabung digestion & blok digestion ♦ Labu didih 250 ml ♦ Erlenmeyer 100 ml bertera ♦ Buret 10 ml ♦ Pengaduk magnetik ♦ Dispenser ♦ Tabung reaksi ♦ Pengocok tabung ♦ Alat destilasi atau Spektrofotometer Pereaksi Destruksi ♦ Asam sulfat pekat (95-97 %) ♦ Campuran selen p.a. (tersedia di pasaran) atau Buat dengan mencampurkan 1,55 g CuSO4 anhidrat, 96,9 g Na2SO4 anhidrat dan 1,55 g selen kemudian dihaluskan. Destilasi ♦ Asam borat 1% Larutkan 10 g H3BO3 dengan 1 l air bebas ion. ♦ Natrium Hidroksida 40 % Larutkan 400 g NaOH dalam piala gelas dengan air bebas ion 600 ml, setelah dingin diencerkan menjadi 1 l. ♦ Batu didih Buat dari batu apung yang dihaluskan. ♦ Penunjuk Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 200 ml etanol 96 %. ♦ Larutan baku asam sulfat 1N (Titrisol) 31 ♦ H2SO4 4 N Masukan 111 ml H2SO4 p.a. pekat (95-97 %) sedikit demi sedikit melalui dinding labu labu ukur 1000 ml yang telah berisi sekitar 700 ml air bebas ion, kocok dan biarkan menjadi dingin. Tambahkan lagi air bebas ion hingga 1000 ml, kocok. ♦ Larutan baku asam sulfat 0,050 N Pipet 50 ml larutan baku H2SO4 1 N Titrisol ke dalam labu ukur 1 liter. Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Atau: Pipet 12,5 ml asam sulfat 4 N ke dalam labu ukur 1 l. Diencerkan sampai 1 l dengan air bebas ion, kocok. Kenormalannya ditetapkan dengan bahan baku boraks. Spektrofotometri ♦ Standar 0 Encerkan ekstrak blanko dengan air bebas ion menjadi 50 ml. Jumlah blanko yang dikerjakan disesuaikan dengan volume standar 0 yang diperlukan. ♦ Standar pokok 1000 ppm N Timbang 4,7143 serbuk (NH4)2SO4 p.a. (yang telah dikeringkan pada 100 oC selama 4 jam) ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 1 l dan kocok hingga larutan homogen. ♦ Standar 20 ppm N Buat dengan memipet 2 ml standar pokok 1.000 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan standar 0 hingga tepat 100 ml. ♦ Deret standar 0-20 ppm N Pipet 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar N 20 ppm masing-masing ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 hingga semuanya menjadi 10 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan 0; 2; 4; 8; 12; 16 dan 20 ppm N. Lakukan pengocokan pada setiap pencampuran. ♦ Larutan Na-fenat Timbang 100 gram serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 125 g serbuk fenol dan aduk hingga larut. Diencerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. ♦ Larutan sangga Tartrat Timbang 50 gram serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 50 g serbuk K, Na-tartrat dan aduk hingga larut. Encerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. ♦ Natrium hipoklorit (NaOCl) 5% Cara kerja Destruksi contoh Timbang 0,500 g contoh tanah ukuran <0,5 mm, masukan ke dalam tabung digest. Tambahkan 1 g campuran selen dan 3 ml asam sulfat pekat, didestruksi hingga suhu 350 oC (3-4 jam). Destruksi selesai bila keluar uap putih dan didapat ekstrak jernih (sekitar 4 jam). Tabung diangkat, didinginkan dan kemudian ekstrak diencerkan dengan air bebas ion hingga tepat 50 ml. Kocok sampai homogen, biarkan semalam agar partikel mengendap. Ekstrak digunakan untuk pengukuran N dengan cara destilasi atau cara kolorimetri. 32 Pengukuran N Pengukuran N dengan cara destilasi Pindahkan secara kualitatif seluruh ekstrak contoh ke dalam labu didih (gunakan air bebas ion dan labu semprot). Tambahkan sedikit serbuk batu didih dan aquades hingga setengah volume labu. Disiapkan penampung untuk NH3 yang dibebaskan yaitu erlenmeyer yang berisi 10 ml asam borat 1% yang ditambah 3 tetes indikator Conway (berwarna merah) dan dihubungkan dengan alat destilasi. Dengan gelas ukur, tambahkan NaOH 40% sebanyak 10 ml ke dalam labu didih yang berisi contoh dan secepatnya ditutup. Didestilasi hingga volume penampung mencapai 50–75 ml (berwarna hijau). Destilat dititrasi dengan H2SO4 0,050 N hingga warna merah muda. Catat volume titar contoh (Vc) dan blanko (Vb). Pengukuran N dengan spektrofotometer Pipet ke dalam tabung reaksi masing-masing 2 ml ekstrak dan deret standar. Tambahkan berturut-turut larutan Sangga Tartrat dan Na-fenat masing-masing sebanyak 4 ml, kocok dan biarkan 10 menit. Tambahkan 4 ml NaOCl 5 %, kocok dan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 636 nm setelah 10 menit sejak pemberian pereaksi ini. Catatan: Warna biru indofenol yang terbentuk kurang stabil. Upayakan agar diperoleh waktu yang sama antara pemberian pereaksi dan pengukuran untuk setiap deret standar dan contoh. Perhitungan Cara destilasi: Kadar nitrogen (%) = (Vc - Vb) x N x bst N x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 100 500-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 2,8 x fk Keterangan : Vc, b = ml titar contoh dan blanko N = normalitas larutan baku H2SO4 14 = bobot setara nitrogen 100 = konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) Cara Spektrofotometri: Kadar nitrogen (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1000 ml-1 x 100/mg contoh x fp x fk = ppm kurva x 50 1.000-1 x 100 500-1 x fp x fk = ppm kurva x 0,01 x fp x fk Keterangan: ppm kurva 100 fp fk = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. = konversi ke % = faktor pengenceran (bila ada) = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 33 DAFTAR ACUAN Black, C.A. 1965. Methods of Soil Analysis, Part 2, Agronomy 9. American Society of Agronomy, Madison,Wis. Burt, R. (Ed.). 2004. Soi Survey Laboratory Methods Manual, Soil Survey Investigations Report No.42, Vers.4,0. Natural Resources Conservation Service, United States Department of Agriculture. Lisle, L., J. Gaudron and R. Lefroy. 1990. Laboratory Techniques for Plant and Soil Analysis. UNE-ACIAR- Crawford Fund. Department of Agronomy and Soil Science, University of New England, Armidale, Australia.and Australian Centre for International Agricultural Research. Page, A.L. , Miller R.H.and Keeney D.R. (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. Penetapan unsur hara makro dan mikro ekstrak Morgan Wolf Dasar penetapan Pengekstrak Morgan (Natrium asetat, pH 4,8) digunakan untuk menentukan ketersediaan unsur hara dalam tanah. pH 4,8 dimaksudkan untuk mendekati pH tanah yang berada sekitar perakaran tanaman. Kation-kation dan anion-anion dapat larut dengan baik dalam pengekstrak ini. Penambahan DTPA ke dalam pengekstrak Morgan meningkatkan kemampuan mengekstrak logam-logam. Pengekstrak Morgan Wolf ini digunakan untuk menetapkan ketersediaan unsur-unsur makro NH4+, NO3-, P, K, Ca, Mg, SO42-serta unsur-unsur mikro Fe, Mn, Cu, Zn, dan B dari tanah. Pengekstrak ini cocok untuk tanah ber-pH masam sampai hampir netral. Peralatan ♦ Neraca analitik ♦ Tabung reaksi ♦ Dispenser 25 ml ♦ Kertas saring ♦ Botol kocok plastik 100 ml ♦ Pipet volume 1, 2 dan 5 ml ♦ Pipet ukur 10 ml ♦ Mesin kocok bolak balik 180 goyangan menit-1 ♦ Flamefotometer ♦ AAS ♦ Spektrofotometer Pereaksi ♦ Pengekstrak Morgan-Wolf Timbang 100 g Na-asetat (NaC2H3O2.3H2O) dalam labu ukur 1000 ml ditambah 30 ml asam asetat glasial dan 0,05 g DTPA. Diencerkan dengan air bebas ion sampai 950 ml. Atur pH sampai 4,8 dengan penambahan asam asetat. Setelah pH nya tercapai impitkan sampai tanda garis 1000 ml dan dikocok. ♦ Karbon aktif 34 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Pengekstrak Morgan-Wolf pekat empat kali Cara kerja seperti pembuatan pengekstrak Morgan-Wolf dengan menggunakan bahan empat kali, kecuali pengenceran tetap hingga 1 l. Standar pokok 1.000 ppm N-NH4+ Timbang 4,7143 serbuk (NH4)2SO4 p.a. (kering 105 oC) ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 1 l dan kocok hingga larutan homogen. Standar 20 ppm N-NH4 dibuat dengan memipet 2 ml standar pokok 1.000 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan pengekstrak MorganWolf hingga tepat 100 ml. Deret standar 0-20 ppm N-NH4+ Pipet 0, 1, 2, 4, 6, 8 dan 10 ml standar 20 ppm N-NH4+ masing-masing ke dalam tabung reaksi. Tambahkan pengekstrak Morgan-Wolf hingga semuanya menjadi 10 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan 0, 2, 4, 8, 12, 16, dan 20 ppm N. Lakukan pengocokan pada setiap pencampuran. Larutan Na-fenat Timbang 100 g serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 125 g serbuk fenol dan aduk hingga larut. Encerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. Larutan sangga Tartrat Timbang 50 g serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 50 g serbuk K,Na-tartrat dan aduk hingga larut. Encerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. Natrium hipoklorit (NaOCl) 5 % Standar pokok 1.000 ppm N-NO3Larutkan 7,218 g serbuk KNO3 p.a. (kering 105 oC) dengan air bebas ion di dalam labu ukur hingga 1 l. Standar pokok 1.000 ppm S-SO42Timbang 5,4459 g K2SO4 p.a. (kering 105 oC) ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dan impitkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Standar campur 50 ppm S-SO42- dan 10 ppm N-NO3Pipet 5 ml standar pokok 1.000 ppm S-SO42- dan 1 ml standar pokok 1.000 ppm N-NO3- ke dalam labu ukur 100 ml. Encerkan dengan pengekstrak Morgan-Wolf hingga 100 ml. Deret standar campur SO42-(0-50 ppm S) dan N03- (0-10 ppm N) Pipet standar campur 50 ppm S-SO42- dan 10 ppm N-NO3- sebanyak 0, 1, 2, 4, 6, 8 dan 10 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan pengekstrak Morgan-Wolf. Larutan brucine 2 % Larutkan 2 g brucine dengan pengekstak Morgan-Wolf hingga 100 ml. H2SO4 pekat (95-97 %) p.a. Larutan BaCl2-Tween Timbang 3 g serbuk BaCl2 p.a. ke dalam botol kocok 250 ml, ditambahkan 4 ml Tween 80 dan botol digoyangkan agar campuran merata. Campuran dibiarkan semalam, selanjutnya ditambah 100 ml air bebas ion dan dikocok selama 2 jam hingga serbuk BaCl2 terlarut sempurna. Larutan dibiarkan semalam sebelum digunakan. 35 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Larutan asam campur Ke dalam labu ukur 1 l yang berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, tambahkan secara perlahan berturut-turut 50 ml CH3COOH glasial (100 %) p.a., 20 ml HCl pekat (37 %) p.a. dan 20 ml H3PO4 pekat (70 %) p.a., kemudian diimpitkan dengan air bebas ion menjadi 1 l. Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dalam 100 ml air. Tambahkan 140 ml H2SO4 pekat dan 0,227 g K (SbO)C4H4O6.0,5 H2O. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. Pereaksi pewarna P pekat Timbang 0,53 g asam ascorbat ke dalam labu ukur 100 ml, ditambah 50 ml pereaksi P pekat dan diencerkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. Standar pokok P 500 ppm Larutkan 2,1954 g KH2PO4 p.a. (kering 40oC) dengan air bebas ion dalam labu ukur 1000 ml, ditambah beberapa tetes kloroform, kemudian diimpitkan sampai tanda garis. Dapat pula digunakan standar pokok PO43- dari Titrisol. Standar P 50 ppm Pipet 10 ml standar pokok 500 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 25 ml pengekstrak Morgan-Wolf pekat empat kali dan kemudian diimpitkan dengan air bebas ion. Standar P 1 ppm Pipet 2 ml standar 50 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan pengekstrak Morgan-Wolf hingga tepat 100 ml. Deret standar P ( 0-1 ppm) Pipet berturut turut 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 1 ppm P ke dalam tabung reaksi. Tambahkan pengekstrak Morgan-Wolf sehingga volume masingmasing menjadi 10 ml. Bila menggunakan standar PO43-, deret standar dibuat dengan kepekatan 0 – 4 ppm. Standar campur 250 ppm K, 50 ppm Mg, 250 ppm Ca. Pipet masing-masing: 25,0 ml standar pokok 1000 ppm K 25,0 ml standar pokok 1000 ppm Ca 5,0 ml standar pokok 1000 ppm Mg Campurkan dalam labu ukur 100 ml, ditambahkan 25 ml pengekstrak MorganWolf pekat empat kali, kemudian diimpitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campur K (0-250 ppm), Ca (0-250 ppm) dan Mg (0-50 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml, masing-masing dimasukkan kedalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan larutan Morgan-Wolf. Larutan La 0,25 % Timbang 66,8376 gram LaCl3.7H2O, dilarutkan dengan air bebas ion ditambahkan 10 ml HCl 25% kemudian diimpitkan tepat 1 l. Standar pokok Fe, Al, Mn, Cu dan Zn masing-masing 1000 ppm Gunakan larutan standar Titrisol. Deret standar Al (50 ppm) Pipet 10 ml standar pokok Al 1000 ppm ke dalam labu ukur 200 ml. Tambahkan 25 ml pengekstrak Morgan-Wolf pekat empat kali dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 200 ml. 36 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Deret standar Al (0-50 ppm) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 50 ppm Al ke dalam tabung reaksi. Tambahkan pengekstrak Morgan-Wolf hingga 10 ml. Standar campur Fe (100 ppm), Mn (100 ppm), Cu (50 ppm), dan Zn (25 ppm) Pipet masing-masing: 10,0 ml standar pokok 1000 ppm Fe 10,0 ml standar pokok 1000 ppm Mn 5,0 ml standar pokok 1000 ppm Cu 2,5 ml standar pokok 1000 ppm Zn Campurkan dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 25 ml pengekstrak MorganWolf pekat empat kali dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campur Fe (0-100 ppm), Mn (0-100 ppm), Cu (0-50 ppm) dan Zn (0-25 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml dan masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan pengekstrak Morgan-Wolf hingga volume setiap tabung menjadi 10 ml. Larutan standar 2 ppm B Pipet 2 ml larutan standar 100 ppm B ke dalam labu ukur 100 ml. Diencerkan dengan pengekstrak Morgan-Wolf hingga 100 ml. Deret standar 0-2 ppm B Pipet berturut turut 0; 1; 2; 3 dan 4 ml standar 2 ppm B ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 4 ml. Deret standar ini mengandung: 0; 0,5; 1,0; 1,5 dan 2,0 ppm B Larutan sangga Larutkan 100 g NH4-Asetat, 10 g EDTA-4Na dan nitrilotriaceticacid (NTA) dengan 160 ml air bebas ion di dalam botol plastik. Tambahkan perlahan 50 ml asam asetat glasial dan diaduk hingga homogen. Azomethine-H Larutkan 0,25 g azomethine-H dan 1 g asam askorbat dengan sekitar 25 ml air bebas ion di dalam erlenmeyer plastik 50 ml. Erlenmeyer direndam dalam air panas hingga larutan menjadi jernih. Simpan pereaksi ini dalam botol plastik berwarna gelap. Cara kerja Timbang 20,00 g contoh tanah halus <2 mm dalam botol kocok 100 ml, tambahkan 1 ml karbon aktif dan 40 ml pengekstrak Morgan Wolf. Kocok selama 5 menit dengan mesin pengocok pada minimum 180 goyangan menit-1. Saring dengan kertas saring Whatman No.1 untuk mendapatkan ekstrak yang jernih. Pengukuran NH4+ Pipet ke dalam tabung reaksi masing-masing 2 ml ekstrak contoh dan deret standar. Tambahkan berturut-turut larutan sangga Tartrat dan Na-fenat masingmasing sebanyak 4 ml, kocok dan biarkan 10 menit. Tambahkan 4 ml NaOCl 5 %, kocok dan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 636 nm setelah 10 menit sejak pemberian pereaksi ini. Catatan: warna biru indofenol yang terbentuk kurang stabil. Upayakan agar diperoleh waktu yang sama antara pemberian pereaksi dan pengukuran untuk setiap deret standar dan contoh. 37 Pengukuran NO3Pipet masing-masing 5 ml ekstrak contoh dan deret standar ke dalam tabung reaksi. Ditambahkan berturut-turut 0,5 ml larutan brucine dan 5 ml H2SO4 pekat p.a. sambil dikocok. Kocok dengan pengocok tabung sampai homogen dan biarkan 30 menit. Setelah 30 menit larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm. Pengukuran P Dipipet masing-masing 5 ml ekstrak contoh dan deret standar P ke dalam tabung kimia. Ditambahkan 1 ml pereaksi pewarna P. Kocok dengan pengocok tabung sampai homogen dan biarkan 30 menit. P dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Pengukuran K, Ca dan Mg Dipipet 1 ml ekstrak dan deret standar masing-masing ke dalam tabung kimia dan ditambahkan 9 ml larutan La 0,25 %. Kocok menggunakan pengocok tabung sampai homogen. Ca & Mg diukur dengan AAS dan K diukur dengan alat Flamephotometer dengan deret standar sebagai pembanding. Pengukuran S Dipipet masing-masing 2 ml ekstrak dan deret standar S ke dalam tabung kimia. Ditambahkan masing-masing 7 ml asam campur dan 2,5 ml larutan BaCl2tween kemudian kocok dengan pengocok tabung sampai homogen. Biarkan 5 menit dan kemudian diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm. Pengukuran Fe, Al, Mn, Cu, dan Zn Dipipet masing-masing 1 ml ekstrak contoh dan deret standar campuran Fe, Al, Mn, Cu dan Zn ke dalam tabung kimia. Tambahkan 9 ml air bebas ion dan kocok (pengenceran 10x). Fe, Al, Mn, Cu dan Zn diukur langsung dari ekstrak contoh menggunakan AAS dengan deret standar masing-masing sebagai pembanding. Al menggunakan nyala campuran gas N2O-asetilen, sedangkan yang lainnya menggunakan nyala campuran udara-asetilen. Pengukuran boron Dipipet masing-masing 4 ml ekstrak contoh dan deret standar boron ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 1 ml larutan sangga dan kocok. Kemudian tambahkan 1 ml Azomethine-H, kocok dan biarkan 1 jam. Boron dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 430 nm. Perhitungan Kadar unsur makro dan mikro (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1000 g g contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 40/1.000 x 1.000/20 x fp x fk = ppm kurva x 2 x fp x fk 38 Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Hesse, P.R. 1971. A Textbook of Soil Chemical Analysis. Chemical Publishing Co.,Inc. New York. Jones Jr., J.B. and B. Wolf 1984. Soil Testing. Soil testing procedures using modified (Wolf) Morgan extracting reagent. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Penetapan total unsur hara makro dan mikro Dasar Penetapan Unsur makro dan mikro total dalam tanah dapat diekstrak dengan cara pengabuan basah menggunakan campuran asam pekat HNO3 dan HClO4. Kadar makro dan mikro dalam ekstrak diukur menggunakan AAS, flamefotometer dan spektrofotometer. Peralatan ♦ Neraca analitik 3 desimal ♦ Tabung digestion & blok digestion ♦ Pengocok tabung ♦ Dispenser. ♦ Tabung reaksi ♦ Spektrophotometer UV-VIS ♦ AAS ♦ Flamephotometer ♦ Spektrofotometer 18.3 Pereaksi ♦ HNO3 pekat (65 %) p.a. ♦ HClO4 pekat (60 %) p.a. ♦ Standar 0 (larutan HClO4 0,6 %) Dipipet 1 ml HClO4 pekat (60 %) ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, goyangkan dan tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml (pengenceran 100 x). ♦ Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dalam 100 ml air. Tambahkan 140 ml H2SO4 pekat dan 0,227 g K (SbO)C4H4O6.0,5 H2O. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. ♦ Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat, kemudian dijadikan 1 l dengan air murni. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. 39 ♦ Standar pokok 500 ppm P Larutkan 2,1954 g KH2PO4 p.a. (yang telah dikeringkan pada 130 oC selama 2 jam) dengan air bebas ion dalam labu ukur 1000 ml, ditambah beberapa tetes kloroform, kemudian diimpitkan sampai tanda garis. Dapat pula digunakan standar pokok PO43- dari Titrisol. ♦ Standar 50 ppm P Dipipet 10 ml standar pokok 500 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 1 ml HClO4 pekat dan kemudian diimpitkan dengan air bebas ion. ♦ Deret standar P ( 0-50 ppm) Pipet berturut turut 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar 50 ppm P kedalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 10 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 5; 10; 20; 30; 40; dan 50 ppm P. Bila menggunakan standar PO43-, deret standar dibuat dengan kepekatan 0 – 200 ppm. Deret standar ini akan memiliki kepekatan: 0; 20; 40; 80; 120; 160; dan 200 ppm PO43♦ Standar pokok 1000 ppm S Ditimbang 5,4459 g K2SO4 p.a. (yang telah dikeringkan pada 105 oC selama 4 jam) ke dalam labu ukur 1 liter. Larutkan dan impitkan dengan air bebas ion hingga 1 l. ♦ Standar 50 ppm S Dipipet 5 ml standar S 1000 ppm ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan berturut-turut air bebas ion hingga setengahnya dan secara perlahan 1 ml HClO4 pekat. Tambahkan lagi air bebas ion hingga tanda tera 100 ml dan kocok hingga homogen. ♦ Deret standar S (0-50 ppm) Dipipet standar S 50 ppm sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml, masing-masing masukan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan larutan HClO4 0,6 %. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 5; 10; 20; 30; 40; 50 ppm S ♦ Larutan BaCl2-Tween Ditimbang 3 g serbuk BaCl2 p.a. ke dalam botol kocok 250 ml, tambahkan 4 ml Tween 80 dan botol digoyangkan agar campuran merata. Campuran dibiarkan semalam, selanjutnya ditambah 100 ml air bebas ion dan dikocok selama 2 jam hingga serbuk BaCl2 terlarut sempurna. Biarkan semalam sebelum digunakan. ♦ Larutan asam campur Ke dalam labu ukur 1 l yang berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, tambahkan secara perlahan berturut-turut 50 ml CH3COOH glasial (100 %) p.a., 20 ml HCl pekat (37 %) p.a. dan 20 ml H3PO4 pekat (70 %) p.a., kemudian diimpitkan dengan air bebas ion menjadi 1 l. ♦ Standar campur 250 ppm K, 100 ppm Na, 50 ppm Mg, 250 ppm Ca. Pipet masing-masing: 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm K 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Na 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm Ca 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mg Campurkan dalam labu ukur 100 ml, tambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat, kemudian diimpitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. ♦ Deret standar campur K (0-250 ppm), Na (0-100 ppm), Ca (0-250 ppm) dan Mg (0-50 ppm) 40 Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan larutan HClO4 0,6 %. Deret standar campuran akan memiliki kepekatan: S0 0 0 0 0 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ S2 50 20 50 10 S3 100 40 100 20 S4 150 60 150 30 S5 200 80 200 40 S6 250 100 250 50 ppm K ppm Na ppm Ca ppm Mg Larutan La 2,5 % Timbang 66,8376 g LaCl3.7H2O, larutkan dengan air bebas ion ditambahkan 10 ml HCl 25% kemudian diimpitkan tepat 1 l. Larutan La 0,25 % Larutan La 2,5 % diencerkan 10 x dengan air bebas ion. Standar pokok Fe, Al, Mn, Cu dan Zn masing-masing 1.000 ppm Gunakan larutan standar Titrisol. Deret standar Al (0-100 ppm) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10,0 ml standar pokok 1000 ppm Al ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 10; 20; 40; 60; 80; dan 100 ppm Al. Standar campur Fe (100 ppm), Mn (100 ppm), Cu (50 ppm) dan Zn (25 ppm) Pipet masing-masing: 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Fe 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mn 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Cu 2,5 ml standar pokok 1.000 ppm Zn Campurkan dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga tepat. Standar campur Fe (10 ppm), Mn (10 ppm), Cu (5 ppm) dan Zn (2,5 ppm) Pipet 10 ml standar campur Fe (100 ppm), Mn (100 ppm), Cu (50 ppm) dan Zn (25 ppm) ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campur Fe (0-10 ppm), Mn (0-10 ppm), Cu (0-5 ppm), dan Zn (02,5 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml dan masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan larutan standar 0 hingga volume setiap tabung menjadi 10 ml, kocok. Deret standar campuran akan memiliki kepekatan: S0 0 0 0 0 ♦ S1 25 10 25 5 S1 1 1 0,5 0,25 S2 2 2 1,0 0,5 S3 4 4 2,0 1,0 S4 6 6 3,0 1,5 S5 8 8 4,0 2,0 S6 10 10 5,0 2,5 ppm Fe ppm Mn ppm Cu ppm Zn Larutan standar 100 ppm B Timbang 0,2857 serbuk H3BO3 p.a. ke dalam labu ukur 500 ml dan dilarutkan dengan air bebas ion hingga tepat 500 ml. 41 ♦ ♦ ♦ ♦ Larutan standar 2 ppm B Pipet 2 ml larutan standar 100 ppm B ke dalam labu ukur 100 ml. Encerkan dengan larutan standar 0 hingga 100 ml. Deret standar 0-2 ppm B Pipet berturut turut 0; 1; 2; 3; dan 4 ml standar 2 ppm B ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 4 ml. Deret standar ini mengandung: 0; 0,5; 1,0; 1,5; dan 2,0 ppm B Larutan sangga Larutkan 100 g NH4-Asetat, 10 g EDTA-4Na dan nitrilotriaceticacid (NTA) dengan 160 ml air bebas ion di dalam botol plastik. Tambahkan perlahan 50 ml asam asetat glasial dan diaduk hingga homogen. Azomethine-H Larutkan 0,25 g azomethine-H dan 1 g asam askorbat dengan sekitar 25 ml air bebas ion di dalam erlenmeyer plastik 50 ml. Erlenmeyer direndam dalam air panas hingga larutan menjadi jernih. Simpan pereaksi ini dalam botol plastik berwarna gelap. Cara kerja Timbang 0,500 g contoh tanah <0,5 mm ke dalam tabung digestion. Tambahkan 5 ml HNO3 p.a. dan 0,5 ml HClO4 p.a. dan biarkan satu malam. Besoknya dipanaskan dalam digestion blok dengan suhu 100 oC selama satu jam , kemudian suhu ditingkatkan menjadi 150 oC. Setelah uap kuning habis suhu digestion blok ditingkatkan menjadi 200 oC. Destruksi selesai setelah keluar asap putih dan sisa ekstrak kurang lebih 0,5 ml. Tabung diangkat dan dibiarkan dingin. Ekstrak diencerkan dengan air bebas ion hingga volume tepat 50 ml dan kocok dengan pengocok tabung hingga homogen. Ekstrak ini dapat digunakan untuk pengukuran unsur-unsur makro: P, K, Ca, Mg, Na, S dan unsur-unsur mikro: Fe, Al, Mn, Cu, Zn dan B. Pengukuran P Pipet masing-masing 1 ml ekstrak contoh dan deret standar P ke dalam tabung kimia. Tambahkan 9 ml air bebas ion dan kocok (pengenceran 10x). Pipet masing-masing 2 ml ekstrak encer contoh dan deret standar ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 10 ml pereaksi pewarna P. Kocok dengan pengocok tabung sampai homogen dan biarkan 30 menit. P dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Pengukuran K, Ca, Mg, dan Na Pipet 1 ml ekstrak dan deret standar masing-masing ke dalam tabung kimia dan ditambahkan 9 ml larutan La 0,25 %. Kocok dengan menggunakan pengocok tabung sampai homogen. Ca dan Mg diukur dengan AAS sedangkan K dan Na diukur dengan alat flamephotometer dengan deret standar sebagai pembanding. Pengukuran S Pipet masing-masing 1 ml ekstrak dan deret standar S ke dalam tabung kimia. Ditambahkan masing-masing 7 ml asam campur dan 2,5 ml larutan BaCl2tween kemudian kocok dengan pengocok tabung sampai homogen. Biarkan 30 menit dan kemudian diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm. 42 Pengukuran Fe, Al, Mn, Cu, dan Zn Fe, Al, Mn, Cu dan Zn diukur langsung dari ekstrak contoh menggunakan AAS dengan deret standar masing-masing sebagai pembanding. Al menggunakan nyala campuran gas N2O-asetilen, sedangkan yang lainnya menggunakan nyala campuran udara-asetilen. Pengukuran boron Pipet masing-masing 4 ml ekstrak contoh dan deret standar boron ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 1 ml larutan sangga dan kocok. Kemudian tambahkan 1 ml Azomethine-H, kocok dan biarkan 1 jam. Boron dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 430 nm. Perhitungan Kadar P, K, Ca, Mg, dan Na (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 100/500 x 10 x fk = ppm kurva x 0,1 x fk Kadar S (%) = ppm kurva x 50/1.000 x 100/500 x fk = ppm kurva x 0,01 x fk Kadar Fe, Al, Mn, Cu, Zn, dan B ( ppm ) = ppm kurva x ml ekstrak 1000 ml-1 x 1.000 g g contoh-1 x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 1.000/0,5 x fk = ppm kurva x 100 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 100 = konversi ke % (pada satuan %) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran DAFTAR ACUAN Burt, R. (Ed.). 2004. Soil Survey Laboratory Methods Manual, Soil Survey Investigations Report No.42, Vers.4,0. Natural Resources Conservation Service, United States Department of Agriculture. Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Horwitz, William. (ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Jones Jr., J.B.1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. 43 Penetapan total unsur hara logam berat Dasar penetapan Unsur logam berat total dalam tanah dapat diekstrak dengan cara pengabuan basah menggunakan asam campur pekat HNO3 dan HClO4. Kadar logam berat dalam ekstrak diukur menggunakan AAS. Peralatan • • • • • • • Neraca analitik 3 desimal Tabung digestion & blok digestion Pengocok tabung Dispenser Tabung reaksi Tabung sentrifusi AAS Pereaksi ♦ HNO3 pekat (65 %) p.a. ♦ HClO4 pekat (60 %) p.a. ♦ Standar 0 (larutan HClO4 10 %) Pipet 10 ml HClO4 pekat (60 %) ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, goyangkan dan tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml . ♦ Standar pokok 1.000 ppm Pb (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Cd (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Co (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Cr (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Ni (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Mo (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Ag (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm As (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Se (titrisol) ♦ Standar pokok 1.000 ppm Sn (titrisol) (Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk logam berat titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1000 ml. Impitkan dengan bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok). ♦ Standar campuran: ( 20 ppm Pb, 2 ppm Cd, 5 ppm Co, 10 ppm Ni, 20 ppm Cr) Pipet 20 ml standar pokok Pb , 2 ml standar pokok Cd, 5 ml standar pokok Co, 20 ml standar pokok Cr dan 10 ml standar pokok Ni ke dalam labu ukur 1000 ml, kemudian encerkan dengan larutan standar 0 hingga 1.000 ml, kocok. ♦ Deret standar campuran: Pipet masing–masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml larutan standar campuran kedalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml larutan standar 0, lalu dikocok. ♦ Standar campuran: (30 ppm Mo, 20 ppm As, 10 ppm Se) Pipet 30 ml standar pokok Mo, 20 ml standar pokok As dan 10 ml standar pokok Ni ke dalam labu ukur 1000 ml, kemudian diencerkan dengan larutan standar 0 hingga 1.000 ml, lalu dikocok. 44 ♦ Standar 5 ppm Ag: Pipet 2,5 ml standar pokok Ag ke dalam labu ukur 500 ml, kemudian diencerkan dengan air bebas ion hingga 500 ml. ♦ Deret standar Ag: Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar 5 ppm Ag ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml standard 0, lalu dikocok ♦ Standar 50 ppm Sn Pipet 25 ml standar pokok Sn ke dalam labu ukur 500 ml, kemudian diencerkan dengan air bebas ion menjadi 500 ml. ♦ Deret Standar Sn: Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 50 ppm Sn ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml standar 0, lalu dikocok Cara kerja Timbang 1,000 g contoh ke dalam tabung digest, ditambahkan 1 ml asam perklorat p.a dan 5 ml asam nitrat p.a, didiamkan satu malam. Esoknya dipanaskan pada suhu 100 oC selama 1 jam 30 menit, suhu ditingkatkan menjadi 130 oC selama 1 jam, suhu ditingkatkan menjadi 150 oC selama 2 jam 30 menit (sampai uap kuning habis, bila masih ada uap kuning waktu pemanasan ditambah lagi), setelah uap kuning habis suhu ditingkatkan menjadi 170 oC selama 1 jam kemudian suhu ditingkatkan menjadi 200 oC selama 1 jam (terbentuk uap putih). Destruksi selesai dengan terbentuknya endapan putih atau sisa larutan jernih sekitar 1 ml. Ekstrak didinginkan kemudian diencerkan dengan air bebas ion menjadi 10 ml, lalu dikocok. Pengukuran Ekstrak jernih diukur dengan alat AAS menggunakan deret standar masingmasing logam berat sebagai pembanding. Perhitungan Kadar logam berat (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1000 g g contoh-1 x fk = ppm kurva x 10/1.000 x 1.000/1 x fk = ppm kurva x 10 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. Fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Burt, R. (Ed.). 2004. Soil Survey Laboratory Methods Manual, Soil Survey Investigations Report No.42, Vers.4,0. Natural Resources Conservation Service, United States Department of Agriculture. Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Horwitz, William. (ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. 45 Jones Jr., J.B.1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. 46 ANALISIS JARINGAN TANAMAN Persiapan contoh Contoh yang berasal dari lapangan sebelum dianalisis terlebih dahulu dicuci dengan air bebas ion untuk menghilangkan debu-debu dan kotoran lainnya yang dapat memberikan kesalahan pada hasil analisis. Contoh tanaman tersebut secepatnya dikeringkan dalam oven berkipas, bila perlu sebelumnya dipotong-potong agar pengeringan lebih cepat dan oven diset pada suhu 70 oC. Contoh yang telah kering kemudian digiling dengan grinder mesin yang menggunakan filter dengan kehalusan 0,5 mm. Contoh yang telah digiling dimasukkan ke dalam botol plastik ditutup rapat-rapat agar tidak terkontaminasi dan diberi nomor urut sesuai dengan nomor percobaan atau perlakuan. Contoh-contoh tersebut siap untuk analisis kimia. Penetapan kadar air Dasar penetapan Contoh tanaman dipanaskan pada suhu 105oC untuk menghilangkan air selama 4 jam. Kadar air dari contoh diketahui dari perbedaan bobot contoh sebelum dan setelah dikeringkan. Faktor koreksi kelembapan dihitung dari kadar air contoh. Peralatan ♦ Botol timbang ♦ Neraca analitik ♦ Oven ♦ Eksikator Cara kerja Timbang 1,000 g contoh tanaman dengan kehalusan <0,5 mm ke dalam botol timbang yang telah diketahui bobot kosongnya. Masukan ke dalam oven yang diset 105 oC selama 4 jam. Angkat, dinginkan dalam eksikator dan ditimbang kembali. Perhitungan Kadar air (%) = kehilangan bobot/bobot contoh asal x 100 Faktor koreksi (fk) = 100/(100 - % kadar air) DAFTAR ACUAN Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. 47 Penetapan N-total cara pengabuan basah dengan H2SO4 Dasar penetapan Senyawa nitrogen organik dioksidasi dalam lingkungan asam sulfat pekat dengan katalis campuran selen membentuk (NH4)2SO4. Kadar amonium dalam ekstrak dapat ditetapkan dengan cara destilasi atau spektrofotometri. Pada cara destilasi, ekstrak dibasakan dengan penambahan larutan NaOH. Selanjutnya, NH3 yang dibebaskan diikat oleh asam borat dan dititar dengan larutan baku H2SO4 menggunakan penunjuk Conway. Cara spektrofotometri menggunakan metode pembangkit warna indofenol biru. Peralatan ♦ Neraca analitik 3 desimal ♦ Tabung digestion & blok digestion ♦ Pengocok tabung ♦ Alat destilasi atau spektrofotometer ♦ Labu didih 250 ml ♦ Erlenmeyer 100 ml ♦ Tabung reaksi Pereaksi Destruksi ♦ H2SO4 pekat (95-97 %) p.a. ♦ Campuran selen p.a. (tersedia di pasaran) atau Buat dengan mencampurkan 1,55 g CuSO4 anhidrat, 96,9 g Na2SO4 anhidrat dan 1,55 g selen kemudian dihaluskan. Destilasi ♦ Natrium Hidroksida 40 % Larutkan 400 g NaOH dalam piala gelas dengan air bebas ion 600 ml, setelah dingin diencerkan menjadi 1 l. ♦ Asam borat 1% Larutkan 10 g H3BO3 dengan 1 l air bebas ion. ♦ Penunjuk Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 200 ml etanol 96 %. ♦ Larutan baku asam sulfat 1N (titrisol) ♦ H2SO4 4 N Masukan 111 ml H2SO4 p.a. pekat (95-97 %) sedikit demi sedikit melalui dinding labu labu ukur 1000 ml yang telah berisi sekitar 700 ml air bebas ion, kocok dan biarkan menjadi dingin. Tambahkan lagi air bebas ion hingga 1000 ml, kocok. ♦ Larutan baku asam sulfat 0,050 N Pipet 50 ml larutan baku H2SO4 1 N Titrisol ke dalam labu ukur 1 liter. Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Atau: Pipet 12,5 ml asam sulfat 4 N ke dalam labu ukur 1 l. Encerkan sampai 1 l dengan air bebas ion, kocok. Kenormalannya ditetapkan dengan bahan baku boraks. 48 ♦ Penunjuk Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 200 ml etanol 96 %. ♦ Asam borat 1% Larutkan 10 g H3BO3 dengan 1 l air bebas ion. ♦ Batu didih Buat dari batu apung yang dihaluskan. Spektrofotometri ♦ Standar 0 Encerkan ekstrak blanko dengan air bebas ion menjadi 50 ml. Jumlah blanko yang dikerjakan disesuaikan dengan volume standar 0 yang diperlukan. ♦ Standar pokok 1.000 ppm N Timbang 4,7143 serbuk (NH4)2SO4 p.a. ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 1 l dan kocok hingga larutan homogen. ♦ Standar 20 ppm N Buat dengan memipet 2 ml standar pokok 1000 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan standar 0 hingga tepat 100 ml. ♦ Deret standar 0-20 ppm N Pipet 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar N 20 ppm masing-masing ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 hingga semuanya menjadi 10 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ppm N. Lakukan pengocokan pada setiap pencampuran. ♦ Larutan Na-fenat Timbang 100 gram serbuk NaOH p.a. dan dilarutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 125 gram serbuk fenol dan aduk hingga larut. Diencerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. ♦ Larutan sangga Tartrat Timbang 50 gram serbuk NaOH p.a. dan larutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 50 g serbuk K, Na-tartrat dan aduk hingga larut. Encerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. ♦ Natrium hipoklorit (NaOCl) 5 % Cara kerja Destruksi contoh Timbang 0,250 g contoh tanaman <0,5 mm ke dalam tabung digestion. Tambahkan 1 g campuran selen dan 2,5 ml H2SO4 p.a. Campuran diratakan dan biarkan satu malam supaya diperarang. Siapkan pula blanko dengan memasukkan hanya 1 g campuran selen dan 2,5 ml H2SO4 p.a. ke dalam tabung digestion. Esoknya dipanaskan dalam blok digestion hingga suhu 350 oC. Destruksi selesai bila keluar uap putih dan didapat ekstrak jernih (sekitar 4 jam). Tabung diangkat, didinginkan dan kemudian ekstrak diencerkan dengan air bebas ion hingga tepat 50 ml. Kocok sampai homogen, biarkan semalam agar partikel mengendap. Ekstrak jernih digunakan untuk pengukuran N dengan cara destilasi atau cara kolorimetri. 49 Pengukuran N Pengukuran N dengan cara destilasi Pipet 10 ml ekstrak contoh ke dalam labu didih. Tambahkan sedikit serbuk batu didih dan aquades hingga setengan volume labu. Siapkan penampung NH3 yang dibebaskan yaitu erlenmeyer yang berisi 10 ml asam borat 1 % ditambah 2 tetes indikator Conway (berwarna merah) dan dihubungkan dengan alat destilasi. Dengan gelas ukur, tambahkan NaOH 40% sebanyak 10 ml ke dalam labu didih yang berisi contoh dan secepatnya ditutup. Destilasi hingga volume penampung mencapai 50–75 ml (berwarna hijau). Destilat dititrasi dengan H2SO4 0,050 N hingga warna merah muda. Catat volume titar contoh (Vc) dan blanko (Vb). Cara ini seperti penetapan N-Kjeldahl contoh tanah dan dapat dijadikan metode acuan. Pengukuran N dengan spektrofotometer Pipet 1 ml ekstrak contoh ke dalam tabung reaksi, tambahkan 9 ml air bebas ion dan kocok dengan pengocok tabung. Pipet ke dalam tabung reaksi masingmasing 2 ml ekstrak encer dan deret standar. Tambahkan berturut-turut larutan sangga Tartrat dan Na-fenat masing-masing sebanyak 4 ml, kocok dan biarkan 10 menit. Tambahkan 4 ml NaOCl 5 %, kocok dan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 636 nm setelah 10 menit sejak pemberian pereaksi ini. Catatan: warna biru indofenol yang terbentuk kurang stabil. Upayakan agar diperoleh waktu yang sama antara pemberian pereaksi dan pengukuran untuk setiap deret standar dan contoh. Perhitungan Cara destilasi: Kadar N (%) = (Vc - Vb) x N x bst N x 50 ml 10 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 50/10 x 100/250 x fk = (Vc - Vb) x N x 28 x fk Keterangan: Vc, b = ml titar contoh dan blanko N = normalitas larutan baku H2SO4 14 = bobot setara Nitrogen 100 = konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) Cara spektrofotometri: Kadar N (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 50/1000 x 100/250 x 10 x fk = ppm kurva x 0,2 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 100 = konversi ke % fp = faktor pengenceran (10) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 50 DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Horwitz, William. (ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Jones Jr., J.B.1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Lembaga Penelitian Tanah. 1978. Penuntun Analisa Tanaman. Publikasi L.P.T. No. 9/71. Lisle, L., J. Gaudron and R. Lefroy. 1990. Laboratory Techniques for Plant and Soil Analysis. UNE-ACIAR- Crawford Fund. Department of Agronomy and Soil Science, University of New England, Armidale, Australia.and Australian Centre for International Agricultural Research. Penetapan unsur hara makro dan mikro cara pengabuan basah dengan HNO3 dan HClO4 Dasar penetapan Unsur hara makro dan mikro total dalam tanah dapat diekstrak dengan cara pengabuan basah menggunakan campuran asam pekat HNO3 dan HClO4. Kadar unsur makro dan mikro dalam ekstrak diukur menggunakan spektrofotometer serapan atom (SSA), fotometer nyala dan spektrofotometer. Peralatan ♦ Neraca analitik 3 desimal ♦ Tabung digestion & blok digestion ♦ Pengocok tabung ♦ Dispenser. ♦ Tabung reaksi ♦ Spektrophotometer UV-VIS ♦ SSA ♦ Fotometer nyala Pereaksi ♦ HNO3 pekat (65 %) p.a. ♦ HClO4 pekat (60 %) p.a. ♦ Standar 0 (larutan HClO4 0,6 %) Pipet 1 ml HClO4 pekat (60 %) ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, goyangkan dan tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml (pengenceran 100 x). ♦ Pereaksi P pekat Larutkan 12 gram (NH4)6 Mo7O24.4H2O dalam 100 ml air. Tambahkan 140 ml H2SO4 pekat dan 0,227 g K (SbO)C4H4O6.0,5 H2O. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. ♦ Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat, kemudian dijadikan 1 l dengan air murni. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. 51 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Standar induk PO4 1.000 ppm (titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk PO4 Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1 l. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. Standar induk PO4 200 ppm Pipet 50 ml standar induk PO4 1000 ppm titrisol ke dalam labu 250 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. Standar PO4 20 ppm Pipet 10 ml standar PO4 200 ppm ke dalam labu 100 ml, impitkan dengan standar 0. Deret standar PO4 ( 0-20 ppm) Pipet berturut turut 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 20 ppm PO4 ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 10 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ppm P Standar pokok S 1.000 ppm Timbang 5,4459 g K2SO4 p.a. (kering 105 oC) ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dan impitkan dengan air bebas ion hingga 1 liter. Standar S 50 ppm Pipet 5 ml standar S 1.000 ppm ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan berturut-turut air bebas ion hingga setengahnya dan secara perlahan 1 ml HClO4 pekat. Tambahkan lagi air bebas ion hingga tanda tera 100 ml dan kocok hingga homogen. Deret standar S (0-50 ppm) Pipet standar S 50 ppm sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan larutan HClO4 0,6 %. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 5; 10; 20; 30; 40; 50 ppm S Larutan BaCl2-Tween Timbang 3 g serbuk BaCl2 p.a. ke dalam botol kocok 250 ml, tambahkan 4 ml Tween 80 dan botol digoyangkan agar campuran merata. Campuran dibiarkan semalam, selanjutnya ditambah 100 ml air bebas ion dan dikocok selama 2 jam hingga serbuk BaCl2 terlarut sempurna. Biarkan semalam sebelum digunakan. Larutan asam campur Ke dalam labu ukur 1 l yang berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, tambahkan secara perlahan berturut-turut 50 ml CH3COOH glasial (100 %) p.a., 20 ml HCl pekat (37 %) p.a. dan 20 ml H3PO4 pekat (70 %) p.a., kemudian diimpitkan dengan air bebas ion menjadi 1 l. Standar campur 250 ppm K, 100 ppm Na, 50 ppm Mg, 250 ppm Ca. Pipet masing-masing: 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm K 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Na 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm Ca 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mg Campurkan dalam labu ukur 100 ml, ditambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat, kemudian diimpitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campur K (0-250 ppm), Na (0-100 ppm), Ca (0-250 ppm), dan Mg (0-50 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 10 ml dengan larutan HClO4 0,6 %. 52 Deret standar campuran akan memiliki kepekatan: S0 0 0 0 0 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ S1 25 10 25 5 S2 50 20 50 10 S3 100 40 100 20 S4 150 60 150 30 S5 200 80 200 40 S6 250 ppm K 100 ppm Na 250 ppm Ca 50 ppm Mg Larutan La 2,5 % Timbang 66,8376 g LaCl3.7H2O, dilarutkan dengan air bebas ion ditambahkan 10 ml HCl 25% kemudian diimpitkan tepat 1 l. Larutan La 0,25 % Larutan La 2,5 % diencerkan 10 x dengan air bebas ion. Standar pokok Fe, Al, Mn, Cu, dan Zn masing-masing 1.000 ppm Gunakan larutan standar titrisol. Deret standar Al (0-50 ppm) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10,0 ml standar pokok Al 1.000 ppm ke dalam labu ukur 200 ml. Tambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 5; 10; 20; 30; 40 dan 50 ppm Al Standar campur Fe (100 ppm), Mn (100 ppm), Cu (50 ppm) dan Zn (25 ppm) Pipet masing-masing: 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Fe 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mn 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Cu 2,5 ml standar pokok 1.000 ppm Zn Campurkan dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campur Fe (0-100 ppm), Mn (0-100 ppm), Cu (0-50 ppm), dan Zn (0-25 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml dan masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan larutan standar 0 hingga volume setiap tabung menjadi 10 ml. Standar campur Fe (10 ppm), Mn (10 ppm), Cu (5 ppm), dan Zn (2,5 ppm) Pipet 10 ml standar campur Fe (100 ppm), Mn (100 ppm), Cu (50 ppm), dan Zn (25 ppm) ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan perlahan 1 ml HClO4 pekat dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campur Fe (0-10 ppm), Mn (0-10 ppm), Cu (0-5 ppm), dan Zn (02,5 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml dan masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan larutan standar 0 hingga volume setiap tabung menjadi 10 ml, kocok. Deret standar campuran akan memiliki kepekatan: S0 0 0 0 0 S1 1 1 0,5 0,25 S2 2 2 1,0 0,5 S3 4 4 2,0 1,0 S4 6 6 3,0 1,5 S5 8 8 4,0 2,0 S6 10 10 5,0 2,5 ppm Fe ppm Mn ppm Cu ppm Zn 53 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Larutan standar 100 ppm B Timbang 0,2857g serbuk H3BO3 p.a. ke dalam labu ukur 500 ml dan dilarutkan dengan air bebas ion hingga tepat 500 ml. Larutan standar 2 ppm B Pipet 2 ml larutan standar 100 ppm B ke dalam labu ukur 100 ml. Diencerkan dengan larutan standar 0 hingga 100 ml. Deret standar 0-2 ppm B Pipet berturut turut 0; 1; 2; 3 dan 4 ml standar 2 ppm B ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 4 ml. Deret standar ini mengandung: 0; 0,5; 1,0; 1,5; dan 2,0 ppm B Larutan sangga Larutkan 100 g NH4-Asetat, 10 g EDTA-4Na dan nitrilotriaceticacid (NTA) dengan 160 ml air bebas ion di dalam botol plastik. Ditambahkan perlahan 50 ml asam asetat glasial dan diaduk hingga homogen. Azomethine-H Larutkan 0,25 g azomethine-H dan 1 g asam askorbat dengan sekitar 25 ml air bebas ion di dalam erlenmeyer plastik 50 ml. Erlenmeyer direndam dalam air panas hingga larutan menjadi jernih. Simpan pereaksi ini dalam botol plastik berwarna gelap. Cara kerja Timbang 0,500 g contoh tanaman <0,5 mm ke dalam tabung digestion. Ditambahkan 5 ml HNO3 p.a. dan 0,5 ml HCLO4 p.a. dan biarkan satu malam. Besoknya dipanaskan dalam digestions blok dengan suhu 100 oC selama satu jam, kemudian suhu ditingkatkan menjadi 150 oC. Setelah uap kuning habis suhu digestion blok ditingkatkan menjadi 200 oC. Destruksi selesai setelah keluar asap putih dan sisa ekstrak kurang lebih 0,5 ml. Tabung diangkat dan dibiarkan dingin. Ekstrak diencerkan dengan air bebas ion hingga volume tepat 50 ml dan kocok dengan pengocok tabung hingga homogen. Ekstrak ini dapat digunakan untuk pengukuran unsur-unsur makro: P, K, Ca, Mg, Na, S, dan unsur-unsur mikro: Fe, Al, Mn, Cu, Zn, dan B. Pengukuran P Pipet masing-masing 1 ml ekstrak contoh ke dalam tabung kimia. Tambahkan 9 ml air bebas ion dan kocok (pengenceran 10x). Dipipet masingmasing 2 ml ekstrak encer contoh dan deret standar P (0-20 ppm PO4) ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 10 ml pereaksi pewarna P. Kocok dengan pengocok tabung sampai homogen dan biarkan 30 menit. P dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Pengukuran K, Ca, Mg dan Na Pipet 1 ml ekstrak dan deret standar masing-masing ke dalam tabung kimia dan ditambahkan 9 ml larutan La 0,25 %. Kocok dengan menggunakan pengocok tabung sampai homogen. Ca dan Mg diukur dengan SSA sedangkan K dan Na diukur dengan alat fotometer nyala dengan deret standar sebagai pembanding. Pengukuran S Pipet masing-masing 1 ml ekstrak dan deret standar S ke dalam tabung kimia. Ditambahkan masing-masing 7 ml asam campur dan 2,5 ml larutan BaCl254 tween kemudian kocok dengan pengocok tabung sampai homogen. Biarkan 30 menit dan kemudian diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm. Pengukuran Fe, Al, Mn, Cu dan Zn Fe, Al, Mn, Cu, dan Zn diukur langsung dari ekstrak contoh menggunakan SSA. dengan deret standar masing-masing sebagai pembanding. Al menggunakan nyala campuran gas N2O-asetilen, sedangkan yang lainnya menggunakan nyala campuran udara-asetilen. Pengukuran boron Pipet masing-masing 4 ml ekstrak contoh dan deret standar boron ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 1 ml larutan sangga dan kocok. Kemudian tambahkan 1 ml Azomethine-H, kocok dan biarkan 1 jam. Boron dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 430 nm. Perhitungan Kadar P (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x B.A. P /B.M. PO4 x fp x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 100/500 x 31/95 x 10 x fk = ppm kurva x 0,1 x 31/95 x fk Kadar K, Ca, Mg dan Na (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 100/500 x 10 x fk = ppm kurva x 0,1 x fk Kadar S (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = ppm kurva x 50/1000 x 100/500 x fk = ppm kurva x 0,01 x fk Kadar Fe, Al, Mn, Cu, Zn, dan B ( ppm ) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1000 g g contoh-1 x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 1.000/0,5 x fk = ppm kurva x 100 x fk Keterangan: ppm kurva 100 1000 fp fk = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. = faktor konversi ke % = faktor konversi ke ppm (mg/kg) = faktor pengenceran (10) = faktor koreksi kadar air = 100/(100 - % kadar air) 55 DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Jones Jr., J.B.1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Lembaga Penelitian Tanah. 1978. Penuntun Analisa Tanaman. Publikasi L.P.T. No. 9/71. Lisle, L., J. Gaudron and R. Lefroy. 1990. Laboratory Techniques for Plant and Soil Analysis. UNE-ACIAR- Crawford Fund. Department of Agronomy and Soil Science, University of New England, Armidale, Australia.and Australian Centre for International Agricultural Research. Walsh, L.M. and J.D. Beaton. 1973. Soil Testing and Plant Analysis edition. Soil Sci.Soc.Am., Madison,Wisconsin. Penetapan unsur hara makro cara pengabuan basah dengan H2SO4 dan H2O2 Dasar penetapan Unsur hara makro dan mikro total dalam tanah dapat diekstrak dengan cara pengabuan basah menggunakan H2SO4 pekat dan H2O2. Kadar makro dan mikro dalam ekstrak diukur menggunakan SSA, fotometer nyala dan spektrofotometer. Peralatan ♦ Neraca analitik 3 desimal ♦ Tabung digestion & blok digestion ♦ Pengocok tabung ♦ Dispenser. ♦ Alat destilasi ♦ Labu didih 250 ml ♦ Erlenmeyer 100 ml bertera ♦ Tabung reaksi ♦ Spektrofotometer UV-VIS ♦ SSA ♦ Photometer nyala Pereaksi ♦ H2SO4 pekat (95-97 %) p.a. ♦ H2O2 pekat (30 %) p.a. ♦ Larutan NaOH 40 % ♦ Larutan baku H2SO4 0,050 N ♦ Penunjuk Conway ♦ Asam borat 1 % ♦ Batu didih 56 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Standar 0 Encerkan ekstrak blanko dengan air bebas ion menjadi 50 ml. Jumlah blanko yang dikerjakan disesuaikan dengan volume standar 0 yang diperlukan. Standar pokok 1000 ppm N Timbang 4,7143 serbuk (NH4)2SO4 p.a. ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 1 l dan kocok hingga larutan homogen. Standar 20 ppm N dibuat dengan memipet 2 ml standar pokok 1.000 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan standar 0 hingga tepat 100 ml. Deret standar 0-20 ppm N Dipipet 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar N 20 ppm masing-masing ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 hingga semuanya menjadi 10 ml. Deret standar ini memiliki kepekatan 0; 2; 4; 8; 12; 16 dan 20 ppm N. Lakukan pengocokan pada setiap pencampuran. Larutan Na-fenat Timbang 100 g serbuk NaOH p.a. dan larutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 125 g serbuk fenol dan aduk hingga larut lalu diencerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. Larutan sangga tartrat Timbang 50 g serbuk NaOH p.a. dan larutkan secara perlahan sambil diaduk dengan sekitar 500 ml air bebas ion di dalam labu ukur 1 l. Setelah dingin tambahkan 50 g serbuk K, Na-tartrat dan aduk hingga larut. Encerkan dengan air bebas ion sampai 1 l. Natrium hipoklorit (NaOCl) 5 % Pereaksi P pekat Larutkan 12 g (NH4)6 Mo7O24.4H2O dalam 100 ml air. Tambahkan 140 ml H2SO4 pekat dan 0,227 g K (SbO)C4H4O6.0,5 H2O. Jadikan 1 l dengan air bebas ion. Pereaksi pewarna P Campurkan 1,06 g asam askorbat dan 100 ml pereaksi P pekat, kemudian dijadikan 1 l dengan air murni. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. Standar induk PO4 1000 ppm (titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk PO4 titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1 l. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. Standar induk PO4 200 ppm Pipet 50 ml standar induk PO4 1.000 ppm titrisol ke dalam labu 250 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis lalu kocok. Standar PO4 20 ppm Pipet 10 ml standar PO4 200 ppm ke dalam labu 100 ml, impitkan dengan standar 0. Deret standar PO4 ( 0-20 ppm) Pipet berturut turut 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 20 ppm PO4 ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 10 ml. Standar campur 250 ppm K, 100 ppm Na, 50 ppm Mg, 250 ppm Ca. Pipet masing-masing: 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm K 10,0 ml standar pokok 1.000 ppm Na 25,0 ml standar pokok 1.000 ppm Ca 57 5,0 ml standar pokok 1.000 ppm Mg Campurkan dalam labu ukur 100 ml, tambahkan perlahan ekstrak 2 buah blanko. Bilas tabung dengan air bebas ion dan masukan air bilasan ke dalam labu. Tambahkan air bebas ion hingga tepat 100 ml. ♦ Deret standar campur K (0-250 ppm), Ca (0-250 ppm), Mg (0-50 ppm), dan Na (0-100 ppm) Pipet standar campur sebanyak 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml, masing-masing masukan ke dalam tabung reaksi dan jadikan 10 ml dengan larutan standar 0. ♦ Larutan La 2,5 % Timbang 66,8376 g LaCl3.7H2O, dilarutkan dengan air bebas ion ditambahkan 10 ml HCl 25% kemudian diimpitkan tepat 1 l. ♦ Larutan La 0,25 % Larutan La 2,5 % diencerkan 10 x dengan air bebas ion. Cara kerja Timbang 0,250 g contoh tanaman <0,5 mm ke dalam tabung digestion. Tambahkan 2,5 ml H2SO4 p.a., biarkan satu malam supaya diperarang. Esoknya dipanaskan dalam blok digestion selama satu jam pada suhu 100 oC. Angkat dan biarkan mendingin, tambahkan 2 ml H2O2 p.a., panaskan kembali dan suhu ditingkatkan menjadi 200 oC, panaskan selama 1 jam. Angkat, biarkan agak dingin dan tambahkan kembali H2O2 sebanyak 2 ml kemudian panaskan kembali hingga suhu 350 oC. Pengerjaan ini diulang sampai keluar uap putih dan didapat sekitar 1 ml ekstrak jernih. Suhu tidak melebihi 350 oC. Kerjakan blanko. Tabung diangkat, dinginkan dan kemudian ekstrak diencerkan dengan air bebas ion hingga tepat 50 ml. Kocok sampai homogen dengan pengocok tabung, biarkan semalam supaya mengendap. Ekstrak jernih dapat digunakan untuk pengukuran N-Kjeldahl, P, K, Ca, Mg dan Na. Pengukuran N dengan cara destilasi Pipet 10 ml ekstrak contoh ke dalam labu didih. Tambahkan sedikit serbuk batu didih dan air bebas ion hingga setengah volume labu. Siapkan penampung NH3 yang dibebaskan yaitu erlenmeyer yang berisi 10 ml asam borat 1 % yang ditambah dua tetes indikator Conway dan dihubungkan dengan alat destilasi. Dengan gelas ukur, tambahkan NaOH 40% sebanyak 10 ml ke dalam labu didih yang berisi contoh dan secepatnya ditutup. Destilasi hingga volume penampung mencapai 50– 75 ml. Destilat dititrasi dengan asam standar (H2SO4 0,050 N). Catat volume titrasi (ml) untuk contoh (Vc) dan blanko (Vb). Cara ini seperti penetapan N-Kjeldahl contoh tanah dan dapat dijadikan metode acuan. Pengukuran N dengan spektrofotometer Pipet 1 ml ekstrak contoh ke dalam tabung reaksi, tambahkan 9 ml air bebas ion dan kocok dengan pengocok tabung. Pipet ke dalam tabung reaksi masingmasing 2 ml ekstrak encer dan deret standar. Tambahkan berturut-turut larutan sangga tartrat dan Na-fenat masing-masing sebanyak 4 ml, kocok dan biarkan 10 menit. Tambahkan 4 ml NaOCl 5 %, kocok dan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 636 nm setelah 10 menit sejak pemberian pereaksi ini. Catatan: warna biru indofenol yang terbentuk kurang stabil. Upayakan agar diperoleh waktu yang sama antara pemberian pereaksi dan pengukuran untuk setiap deret standar dan contoh. 58 Pengukuran P Pipet masing-masing 1 ml ekstrak contoh dan deret standar PO4 ke dalam tabung kimia. Tambahkan 9 ml air bebas ion dan kocok (pengenceran 10x). Pipet masing-masing 2 ml ekstrak encer contoh dan deret standar ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 10 ml pereaksi pewarna P. Kocok dengan pengocok tabung sampai homogen dan biarkan 30 menit. P dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Pengukuran K, Ca, Mg, dan Na Pipet 1 ml ekstrak dan deret standar masing-masing ke dalam tabung kimia dan tambahkan 9 ml larutan La 0,25 %. Kocok dengan menggunakan pengocok tabung sampai homogen. Ca dan Mg diukur dengan SSA sedangkan K dan Na diukur dengan alat fotometer nyala dengan deret standar sebagai pembanding. Perhitungan N cara destilasi: Kadar N (%) = (Vc - Vb) x N x bst N x 50 ml 10 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 50/10 x 100/250 x fk = (Vc - Vb) x N x 28 x fk Keterangan : Vc, b = ml titar contoh dan blanko N = normalitas larutan baku H2SO4 14 = bobot setara Nitrogen 100 = konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) N cara spektrofotometri: Kadar N (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 100/250 x 10 x fk = ppm kurva x 0,2 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 100 = konversi ke % fp = faktor pengenceran (10) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) Kadar P (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x B.A. P /B.M. PO4 x fp x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 100/250 x 31/95 x 10 x fk = ppm kurva x 0,2 x 31/95 x fk Kadar K, Ca, Mg, dan Na (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk = ppm kurva x 50/1.000 x 100/250 x 10 x fk = ppm kurva x 0,2 x fk 59 Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 100 = faktor konversi ke % 1.000 = faktor konversi ke ppm (mg kg-1) fp = faktor pengenceran (10) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 - % kadar air) DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Jones Jr., J.B.1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Lembaga Penelitian Tanah. 1978. Penuntun Analisa Tanaman. Publikasi L.P.T. No. 9/71. Lisle, L., J. Gaudron, and R. Lefroy. 1990. Laboratory Techniques for Plant and Soil Analysis. UNE-ACIAR- Crawford Fund. Department of Agronomy and Soil Science, University of New England, Armidale, Australia.and Australian Centre for International Agricultural Research. Walsh, L.M. and J.D. Beaton. 1973. Soil Testing and Plant Analysis edition. Soil Sci.Soc.Am., Madison,Wisconsin. Penetapan total unsur hara logam berat cara pengabuan basah dengan HNO3 dan HClO4 Dasar penetapan Unsur logam berat total dalam tanaman dapat diekstrak dengan cara pengabuan basah menggunakan campuran asam pekat HNO3 dan HClO4. Kadar logam berat dalam ekstrak diukur menggunakan SSA. Peralatan • Neraca analitik 3 desimal • Tabung digestion & blok digestion • Pengocok tabung • Dispenser • Tabung reaksi • Tabung sentrifusi • SSA Pereaksi ♦ HNO3 pekat (65%) p.a. ♦ HClO4 pekat (60%) p.a. ♦ Standar 0 (larutan HClO4 10%) 60 ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ ♦ Pipet 10 ml HClO4 pekat (60%) ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, goyangkan dan tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml . Standar pokok 1.000 ppm Pb (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Cd (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Co (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Cr (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Ni (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Mo (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Ag (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm As (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Se (titrisol) Standar pokok 1.000 ppm Sn (titrisol) (Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk logam berat Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1.000 ml. Impitkan dengan bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok). Standar campuran: (20 ppm Pb, 2 ppm Cd, 5 ppm Co, 10 ppm Ni, 20 ppm Cr) Pipet 20 ml standar pokok Pb , 2 ml standard pokok Cd, 5 ml standar pokok Co, 20 ml standar pokok Cr dan 10 ml standar pokok Ni kedalam labu ukur 1000 ml, kemudian diencerkan dengan larutan standar 0 hingga 1.000 ml, kocok. Deret standar campuran: Pipet masing–masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml larutan standar campuran ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml larutan standar 0, lalu dikocok. Standar campuran: (30 ppm Mo, 20 ppm As, 10 ppm Se ) Pipet 30 ml standar pokok Mo, 20 ml standar pokok As dan 10 ml standar pokok Ni ke dalam labu ukur 1000 ml, kemudian diencerkan dengan larutan standar 0 hingga 1000 ml, lalu dikocok. Standar 5 ppm Ag: Pipet 2,5 ml standar pokok Ag kedalam labu ukur 500 ml, kemudian diencerkan dengan air bebas ion hingga 500 ml. Deret standar Ag: Pipet masing–masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar 5 ppm Ag ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml standard 0, lalu dikocok. Standar 50 ppm Sn Pipet 25 ml standar pokok Sn ke dalam labu ukur 500 ml, kemudian diencerkan dengan air bebas ion menjadi 500 ml. Deret standar Sn: Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar 50 ppm Sn ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10, 9, 8, 6, 4, 2; dan 0 ml standar 0, lalu dikocok Cara Kerja Timbang 1,000 g contoh ke dalam tabung digest, ditambahkan 1 ml asam perklorat dan 5 ml asam nitrat, didiamkan satu malam. Esoknya dipanaskan pada suhu 100 oC selama 1 jam 30 menit, suhu ditingkatkan menjadi 130 oC selama 1 jam, suhu 61 ditingkatkan menjadi 150 oC selama 2 jam 30 menit (sampai uap kuning habis, bila masih ada uap kuning waktu pemanasan ditambah lagi), setelah uap kuning habis suhu ditingkatkan menjadi 170 oC selama 1 jam kemudian suhu ditingkatkan lagi menjadi 200 o C selama 1 jam hingga terbentuk uap putih. Destruksi selesai dengan terbentuknya endapan putih atau sisa larutan jernih sekitar 1 ml. Ekstrak didinginkan kemudian diencerkan dengan air bebas ion menjadi 10 ml, lalu dikocok. Pengukuran Ekstrak jernih diukur dengan alat SSA menggunakan deret standar masingmasing logam berat sebagai pembanding. Perhitungan Kadar logam berat (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1000 g g contoh-1 x fk = ppm kurva x 10/1.000 x 1.000/1 x fk = ppm kurva x 10 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 1000 = faktor konversi ke ppm (mg/kg) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Jones Jr., J.B.1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Lembaga Penelitian Tanah. 1978. Penuntun Analisa Tanaman. Publikasi L.P.T. No. 9/71. Lisle, L., J. Gaudron, and R. Lefroy. 1990. Laboratory Techniques for Plant and Soil Analysis. UNE-ACIAR- Crawford Fund. Department of Agronomy and Soil Science, University of New England, Armidale, Australia.and Australian Centre for International Agricultural Research. Walsh, L.M. and J.D. Beaton. 1973. Soil Testing and Plant Analysis edition. Soil Sci.Soc.Am., Madison,Wisconsin. 62 ANALISIS AIR IRIGASI Persiapan contoh Contoh yang berasal dari lapangan sebelum dianalisis terlebih dahulu diperiksa label dan nomor contoh dan segera dianalisis. Penetapan kadar lumpur Dasar penetapan Lumpur disaring dengan kertas saring dan ditimbang bobotnya setelah dikeringkan. Jumlah lumpur dihitung berdasarkan bobot lumpur dalam satuan volume air (g l-1). Peralatan • Pinggan aluminium • Kertas saring berlipat • Corong berdiameter 15 cm • Erlenmeyer 1 l • Pengering listrik 105 0C Pereaksi • Air bebas ion Cara kerja Kertas saring berlipat disimpan di atas pinggan aluminium kering yang telah diketahui bobotnya dan dipanaskan dalam oven pada suhu 105 oC selama 0,5 - 1 jam. Selanjutnya, masukan pinggan yang berisi kertas saring ke dalam eksikator dan setelah dingin ditimbang (A mg). Ke dalam erlenmeyer berskala disaring 100 hingga 500 ml contoh air (tergantung volume contoh dan kadar lumpurnya) dengan kertas saring kering yang telah diketahui bobotnya. Saringan dalam erlenmeyer dapat digunakan untuk penetapan kation, anion dan unsur-unsur lain. Lumpur dalam kertas saring dimasukkan kembali ke dalam pinggan aluminium dan dikeringkan pada suhu 1050 C selama 1 - 3 jam, didinginkan dalam eksikator dan ditimbang (B mg). Perhitungan Kadar Lumpur (mg/l) = (B – A) x 1000 ml/ml contoh yang disaring Keterangan: A = berat kertas saring kosong (mgram) B = berat kertas saring + lumpur kering 1.000 = faktor dari ml ke liter 63 DAFTAR ACUAN Menon, R. G. 1973. Soil and Water Analysis, A laboratory manual for the analysis of soil and water. FAO/UNDP Project. Sudjadi, M. dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor. Penetapan daya hantar listrik Dasar penetapan Daya hantar listrik dalam air dapat diukur langsung dengan alat konduktometer. Peralatan • Konduktometer dengan sel platina • Piala gelas 100 ml • Thermometer Pereaksi • Larutan baku NaCl 692 ppm yang memiliki daya hantar listrik sebesar 1.413 µS/cm. Cara kerja Alat konduktometer dinyalakan. Elektrode dicuci (disemprot) dengan air bebas ion lalu dikeringkan dengan tisu. Alat dikalibrasi dengan memasukkan elektrode ke dalam larutan baku NaCl. Tepatkan pembacaan alat menjadi 1.413 µS/cm. Setelah kalibrasi selesai elektroda dicuci lalu dikeringkan. Masukan elektrode ke dalam contoh yang akan diukur (kira-kira 50 ml) dan baca setelah angka mantap. Setiap akan mengukur contoh elektrode dicuci dan dikeringkan dengan tisu. Setelah selesai elektroda dicuci dengan air bebas ion dan dilap sampai kering. Alat dimatikan. DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan pH Dasar penetapan Nilai pH air dapat diukur langsung dengan pH meter menggunakan elektrode gelas kombinasi. Peralatan pH-meter dengan elektrode gelas kombinasi Pereaksi Larutan sangga pH 7,00 dan pH 4,01 64 Cara kerja Tombol suhu pada alat pengukur pH disesuaikan dengan suhu larutan yang diperiksa. pH-meter dikalibrasi dengan larutan penyangga pH 7,00 dan pH 4,01. Bilas elektrode dengan air bebas ion dan keringkan dengan tisu sebelum pengukuran setiap contoh/larutan sangga. Elektrode dimasukkan ke dalam contoh (kira-kira 25 ml) baca setelah mantap. Bilas elektrode dengan air bebas ion dan keringkan dengan tisu sebelum pengukuran setiap contoh/larutan sangga. Larutan bekas penetapan pH dapat digunakan untuk penetapan HCO3 dan CO3. DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Menon, R. G, 1973. Soil and Water Analysis, A laboratory manual for the analysis of soil and water. FAO/UNDP Project. M. Sudjadi dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan K, Na, Ca, dan Mg Dasar penetapan Unsur hara Ca dan Mg dalam air dapat diukur dengan SSA sedangkan unsur K dan Na diukur dengan fotometer nyala. Peralatan • • • • • • • • • Fotometer nyala SSA Pengocok tabung Labu ukur 1 l Labu ukur 100 ml Tabung kimia Pipet ukur 10 ml Pipet isi 5, 10, 20 dan 25 ml Dispenser 1 ml Pereaksi • Standar pokok 1.000 ppm K, 1.000 ppm Na, 1.000 ppm Ca, dan 1.000 ppm Mg Pindahkan secara kuantitatif masing-masing larutan standar induk K, Na, Ca, dan Mg titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1.000 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. 65 • • • Standar campuran 200 ppm K, 100 ppm Na, 250 ppm Ca, dan 50 ppm Mg (standar campuran 1). Pipet 20 ml standar pokok 1.000 ppm K, 10 ml standar pokok 1.000 ppm Na, 25 ml standar pokok 1.000 ppm Ca dan 5 ml standar pokok 1.000 ppm Mg ke dalam labu ukur 100 ml dan diimpitkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. Standar campuran 20 ppm K, 10 ppm Na, 25 ppm Ca, dan 5 ppm Mg (standar campuran 2). Pipet 10 ml larutan standar campuran 1 ke dalam labu ukur 100 ml dan diimpitkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. Deret standar campuran 0-20 ppm K, 0-10 ppm Na, 0-25 ppm Ca, dan 0-5 ppm Mg. Pipet larutan standar campuran 2 masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml ke dalam tabung kimia, tambahkan air bebas ion hingga setiap tabung berisi 10 ml larutan dan dikocok. Deret standar campuran akan mengandung: S0 0 0 0 0 S1 2 1 2,5 0,5 S2 4 2 5 1,0 S3 8 4 10 2,0 S4 12 6 15 3,0 S5 16 8 20 4,0 S6 20 10 25 5,0 ppm K ppm Na ppm Ca ppm Mg • Larutan 25.000 ppm La Timbang 29,32 g La2O3, ditambah 100 ml HCl 25% dilarutkan dengan air bebas ion, kemudian diimpitkan tepat 1 l dan dikocok atau 67,0 gram LaCl3.7H2O ditambah 15 ml HCl 25% dilarutkan dalam satu liter air bebas ion. Cara kerja Pipet 10 ml contoh air ke dalam tabung kimia. Tambahkan 1 ml larutan 25000 ppm La ke dalam setiap tabung contoh dan deret standar campuran dan dikocok. Ukur K dan Na dalam contoh dengan flamephotometer, serta Ca dan Mg dengan SSA, menggunakan deret standar sebagai pembanding. Perhitungan Kadar kation (m.e. l-1) = ppm kurva/bst kation x fp Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (kalau ada) bst kation = bobot setara kation (K = 39, Na = 23, Ca = 40/2, Mg = 24.3/2) DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Menon, R. G, 1973. Soil and Water Analysis, A laboratory manual for the analysis of soil and water. FAO/UNDP Project. 66 Sudjadi, M, dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan Fe, Mn, Al, Cu, dan Zn Dasar penetapan Unsur hara Fe, Mn, Al, Cu dan Zn dalam air dapat diukur langsung dengan SSA Peralatan • Spektrometer serapan atom (SSA) • Pengocok tabung • Labu ukur 1 l • Labu ukur 100 ml • Tabung kimia • Pipet ukur 10 ml • Pipet isi 5 dan 10 ml Pereaksi • Standar pokok 1.000 ppm Fe, 1.000 ppm Mn, 1.000 ppm Al, 1.000 ppm Cu, dan 1.000 ppm Zn. Pindahkan secara kuantitatif masing-masing larutan standar induk Fe, Mn, Cu dan Zn titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1.000 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. • Standar campuran 100 ppm Fe, 100 ppm Mn, 50 ppm Cu dan 25 ppm Zn (standar campuran 1). Pipet 10 ml standar pokok 1.000 ppm Fe, 5 ml standar pokok 1.000 ppm Mn dan 2,5 ml standar pokok 1.000 ppm Zn ke dalam labu ukur 100 ml dan diimpitkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. • Standar campuran 10 ppm Fe, 10 ppm Mn, 5 ppm Cu, 2,5 ppm Zn dan 50 ppm Al (standar campuran 2). Pipet 10 ml larutan standar campuran 1 dan 5 ml larutan standar pokok 1.000 ppm Al ke dalam labu ukur 100 ml dan diimpitkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. • Deret standar campuran 0-10 ppm Fe, 0-5 ppm Mn, 0-5 ppm Cu, 0-2,5 ppm Zn, dan 0-50 ppm Al. Pipet larutan standar campuran 2 masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml ke dalam tabung kimia, tambahkan air bebas ion hingga setiap tabung berisi 10 ml larutan dan dikocok. Deret standar campuran akan memiliki kepekatan: S0 0 0 0 0 0 S1 1 1 0,5 0,25 5 S2 2 2 1,0 0,5 10 S3 4 4 2,0 1,0 20 S4 6 6 3,0 1,5 30 S5 8 8 4,0 2,0 40 S6 10 10 5,0 2,5 50 ppm Fe ppm Mn ppm Cu ppm Zn ppm Al 67 Cara kerja Tuangkan sekitar 10 ml contoh jernih ke dalam tabung kimia. Ukur Fe, Al, Mn, Cu dan Zn dengan SSA dengan menggunakan deret standar masing-masing sebagai pembanding. Perhitungan Kadar kation (me l-1) = ppm kurva/bst kation x fp Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (kalau ada) bst = bobot setara (Fe= 55,85/3; Mn= 54,9/2; Cu= 63,55; Zn= 65.38; Al= 26,98/3) DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan amonium Dasar penetapan Amonium dalam air dapat diukur langsung secara kolorimetri dengan metode biru indofenol. Peralatan • Spetrofotometer visibel • Pipet ukur 10 ml • Pipet isi 10 dan 25 ml • Tabung kimia Pereaksi • Larutan sangga sitrat Timbang 32 g serbuk NaOH p.a. ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dengan sekitar 500 ml air bebas ion. Setelah dingin tambahkan 40 g tri-natrium sitrat dan 0,3 g Na-nitroprusida aduk hingga larut, tambahkan 2 ml larutan Brij-35 30% dan air bebas ion hingga 1 l. • Larutan fenolat pekat Timbang 56,3 g serbuk NaOH p.a. dan larutkan dengan sekitar 500 ml air bebas ion secara perlahan sambil diaduk. Setelah dingin tambahkan 137 g serbuk fenol, kemudian encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l, kocok. Simpan dalam botol berwarna gelap dan encerkan setelah disimpan minimal 2 hari. 68 • • • • • • • Larutan fenolat encer Tambahkan 250 ml larutan fenolat pekat ke dalam 250 ml air bebas ion. Simpan dalam botol berwarna gelap, aduk dan siap digunakan. Natrium hipoklorit (NaOCl) 5 % Encerkan dua kali larutan natrium hipoklorit 10 % Larutan standar induk 1000 ppm N Timbang 4,7193 g (NH4)2SO4 (yang telah dikeringkan pada 100 oC selama 4 jam) ke dalam labu ukur 1 l, larutkan dengan air bebas ion sampai tanda garis, kocok. Standar 250 ppm N Pipet 25 ml larutan standar induk 1.000 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml, lalu tambahkan air bebas ion hingga 100 ml dan kocok. Standar 25 ppm N Pipet 10 ml larutan standar 250 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml, lalu tambahkan air bebas ion hingga 100 ml dan kocok. Standar 2,5 ppm N Pipet 10 ml larutan standar 25 ppm N ke dalam labu ukur 100 ml, lalu tambahkan air bebas ion hingga 100 ml dan kocok. Deret standar N (0-2,5 ppm N) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standar 2,5 ppm N ke dalam tabung reaksi. Tambahkan air bebas ion ke dalam setiap tabung hingga volume 10 ml, lalu kocok. Deret standar ini memiliki kepekatan 0; 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ppm N. Cara kerja Pipet ke dalam tabung reaksi masing-masing 2 ml contoh air dan deret standar. Tambahkan berturut-turut larutan sangga Sitrat dan Na-fenat masing-masing sebanyak 4 ml, kocok dan biarkan 10 menit. Tambahkan 4 ml NaOCl 5%, kocok dan diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 636 nm setelah 30 menit sejak pemberian pereaksi ini. Perhitungan Kadar NH4 (m.e. l-1) = ppm kurva/bst N x fp = ppm kurva/14 x fp Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada). Daftar Acuan Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. 69 Penetapan fosfat Dasar Penetapan Fosfat dalam air dapat diukur langsung secara kolorimetri dengan pewarnaan biru molibden pada panjang gelombang 693nm. Peralatan • Spektrofotometer • Pipet automatik 0,5 ml • Pipet ukur 5 ml • Pipet isi 5 ml • Tabung kimia Pereaksi • Pereaksi P pekat Larutkan 12,00 gram amonium molibdat, (NH4)6 Mo7O24.4H2O dalam 100 ml air. Tambahkan 140 ml H2SO4 pekat dan 0,2770 g kalium antimonil tartrat, K (SbO)C4H4O6.0,5 H2O. Tambahkan air bebas ion hingga 1 l, kocok. • Pereaksi pewarna P pekat Campurkan 0,530 g asam askorbat dan 50 ml pereaksi P pekat, kocok. Pereaksi P ini harus selalu dibuat baru. • Standar pokok 1000 ppm PO4 3- (titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk PO4 titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1.000 ml. Impitkan dengan air bebas P/bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. • Standar 50 ppm PO4 3Pipet 5 ml standar pokok 1.000 ppm PO4 ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga tanda garis, kocok. • Standar 2,5 ppm PO4 Pipet 5 ml standar 50 ppm PO4 ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga tanda garis, kocok. • Deret standar PO4 ( 0-2,5 ppm) Pipet berturut turut 0; 0,5; 1; 2; 3; 4 dan 5 ml standar 2,5 ppm PO4 ke dalam tabung reaksi. Tambahkan air bebas ion sehingga volume masing-masing menjadi 5 ml, kocok. Kepekatan deret standar yang dihasilkan adalah: 0; 0,25; 0,50; 1,00; 1,50; 2,00; dan 2,50 ppm PO4. Cara kerja Pipet 5,0 ml contoh ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 0,5 ml pereaksi P pekat ke dalam contoh dan deret standar, kocok dan biarkan selama minimal 15 menit. Ukur PO4 dalam larutan dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 693 nm. Mula-mula ukur deret standar kemudian contoh. Perhitungan Kadar fosfat (m.e. l-1) = ppm kurva/bst kation x fp 70 Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran bst PO4 = 95/3 DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Sudjadi, M. dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor. Penetapan karbonat dan bikarbonat Dasar penetapan Karbonat dan bikarbonat dalam air dapat diukur langsung dengan cara titrasi menggunakan asam hingga pH tertentu. Peralatan • Piala gelas 100 ml • pH meter • Pengaduk magnit • Buret otomatis Pereaksi • Standar asam khlorida 1,000 N Pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk HCl Titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1000 ml. Impitkan dengan air bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. • Asam klorida 0,020 N Pipet 20 ml HCl 1,000 N ke dalam labu ukur 1.000 ml. Encerkan dengan air bebas ion dan impitkan sampai tanda garis, kocok hingga homogen. Cara kerja Pipet 25,0 ml contoh air ke dalam piala gelas. Masukkan elektrode pH-meter yang telah dikalibrasi dengan larutan penyangga pH 7,00 dan pH 4,01 hingga terendam larutan contoh. Dititar dengan HCl 0,020 N perlahan-lahan sambil diaduk dengan pengaduk magnit (hati-hati agar jangan menyentuh ujung elektrode). Perhatikan pembacaan pH-meter untuk menentukan titik akhir penitaran. Penitaran dilakukan sampai tepat pH 8,4 ml titran dicatat (a ml). Kemudian penitaran dilanjutkan sampai tepat pH 4,4 penggunaan seluruh titran dicatat (b ml). 71 Perhitungan CO3 (m.e/l) = 1.000 ml ml contoh-1 x 2a x N HCl. = 1.000/25 x 2a x N HCl. = 40 x 2a x N HCl. HCO3 (m.e./l) = 1.000/25 x (b-2a) x N HCl . = 40 x (b-2a) x N HCl. Keterangan: 1.000 = faktor dari ml ke l a = ml titran hingga pH 8,4 b = ml titran hingga pH 4,4 N HCl = normalitas HCl (0,020 N) DAFTAR ACUAN Sudjadi, M. dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan Klorida Dasar penetapan Klorida dalam air dapat ditetapkan langsung dengan cara argentometri. Peralatan • Buret dengan ketelitian 0,001 ml • Erlenmeyer 100 ml • Pipet 10 ml Pereaksi • AgNO3 0,100 N Gunakan standar induk AgNO3 titrisol. Atau timbang 16,98 g AgNO3 p.a. larutkan dengan air bebas ion dalam labu ukur 1 l. • AgNO3 0,010 N Pipet 10 ml AgNO3 0,100 N dilarutkan dengan air bebas ion dalam labu ukur 100 ml • Indikator kalium kromat 5% Timbang 5 g kalium kromat ke dalam labu ukur 100 ml + 2 ml AgNO3 0,100N larutkan dengan air bebas ion sampai tanda garis, kocok lalu diamkan semalam. Saring simpan di wadah berwarna gelap. Cara Kerja Pipet 10,0 ml contoh dan tambahkan larutan penunjuk kalium kromat 5% sebanyak lebih kurang empat tetes, kemudian titar dengan AgNO3 0,010 N sampai warna larutan berubah merah. Catat volume (ml) larutan penitar yang diperlukan. Kerjakan blanko dengan memipet 10 ml air bebas ion. 72 Perhitungan Kadar khlorida dalam air (m.e l-1) = (ml contoh – ml blk) x N x 1.000 ml ml contoh-1 = (ml contoh – ml blk) x N x 1.000/10 = (ml contoh – ml blk) x N x 100 Keterangan: ml = volume titran (ml) yang diperlukan untuk penitaran 1000 = faktor dari ml ke liter 10 = volume contoh N = normalitas AgNO3 (0,010 N) DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Menon, R. G, 1973. Soil and Water Analysis, A laboratory manual for the analysis of soil and water. FAO/UNDP Project. Penetapan sulfat Dasar penetapan Sulfat dalam air dapat diukur langsung secara turbidimetri. Peralatan • Spektrofotometer • Tabung kimia • Pipet otomatis 1 ml • Pipet isi 5 ml • Pipet ukur 5 ml Pereaksi • Standar pokok S 1.000 ppm Gunakan standar S titrisol atau timbang 5,4349 g K2SO4 p.a. (telah dikeringkan 105 oC selama 4 jam) ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dan impitkan dengan H2O hingga 1 l. • Standar S 50 ppm Pipet 5 ml standar S 1000 ppm ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga tanda tera 100 ml dan kocok hingga homogen. • Deret standar S (0-50 ppm) Pipet standar S 50 ppm sebanyak 0, 0,5, 1, 2, 3, 4 dan 5 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 5 ml dengan air bebas ion. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 5; 10; 20; 30; 40; dan 50 ppm S. • Larutan BaCl2-Tween Timbang 3,00 gram serbuk BaCl2 p.a. ke dalam botol kocok 250 ml, tambahkan 4 ml Tween 80 dan botol digoyangkan agar campuran merata. Campuran dibiarkan semalam, selanjutnya ditambah 100 ml air bebas ion dan dikocok selama 2 jam hingga serbuk BaCl2 terlarut sempurna. Larutan dibiarkan semalam sebelum digunakan. 73 • Larutan asam campur Ke dalam labu ukur 1 l yang berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, tambahkan secara perlahan berturut-turut 250 ml CH3COOH glasial (100 %) p.a., 100 ml HCl pekat (37 %) p.a. dan 100 ml H3PO4 pekat (70 %) p.a., kemudian diimpitkan dengan air bebas ion menjadi 1 l. Cara kerja Pipet 5,0 ml masing-masing contoh air dan deret standar ke dalam tabung kimia. Tambahkan 1 ml pereaksi asam campur dan kocok. Tambah 1 ml larutan BaCl2Tween, kocok dan biarkan 15 menit. Contoh diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm menggunakan deret standar sebagai pembanding. Setiap larutan dalam tabung diaduk perlahan sebelum diukur. Perhitungan Kadar sulfat (m.e. l-1) = ppm kurva/bst x fp Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (kalau ada) bst S = bobot setara S (32/2) DAFTAR ACUAN Menon, R. G. 1973. Soil and Water Analysis, A laboratory manual for the analysis of soil and water. FAO/UNDP Project. Sudjadi, M. dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan nitrat Dasar penetapan Nitrat dalam air dapat diukur langsung dengan cara spektrofotometeri. Peralatan • Spektrofotometer • Tabung kimia • Pipet isi 5 ml dan 10 ml • Pipet ukur 5 ml Pereaksi • Larutan sangga NH4OAc 1 M, pH 4,8 Timbang 77,00 gram serbuk NH4-asetat p.a. ke dalam labu ukur 1 l. Tambahkan air hingga sekitar 900 ml, tambahkan asam asetat glasial p.a. dan kocok hingga pH 4,8. Impitkan dengan air bebas ion. 74 • Larutan brusin 2 % Timbang 2,000 g brucin ke dalam labu ukur 100 ml dan tambahkan larutan sangga NH4-asetat 1 M pH 4,8 hingga tanda tera, kocok. • Asam sulfat pekat p.a. • Standar Pokok 1.000 ppm N-NO3 Larutkan 7,218 g serbuk KNO3 p.a (kering 105oC) ke dalam labu 1 l. Larutkan dengan air bebas ion sampai tanda tera. • Standar 100 ppm N-NO3 Pipet 10 ml larutan standar 1.000 ppm N-NO3 ke dalam labu ukur 100 ml dan encerkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. • Standar 5 ppm N-NO3 Pipet 5 ml larutan standar 100 ppm N-NO3 ke dalam labu ukur 100 ml dan encerkan dengan air bebas ion sampai tanda garis. • Deret standar 0-5 ppm N-NO3 Pipet standar 5 ppm N-NO3 sebanyak 0; 0,5; 1; 2; 3; 4; dan 5 ml, masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dijadikan 5 ml dengan air bebas ion. Deret standar ini memiliki kepekatan: 0; 0,5; 1; 2; 3; 4; dan 5 ppm N. Cara kerja Pipet 5,0 ml contoh air ke dalam tabung kimia. Ke dalam larutan deret standar dan contoh, sambil dikocok tambahkan 0,5 ml larutan brusin 2 % dan 5 ml larutan H2SO4 pekat, biarkan selama 1 jam (sampai dingin) kemudian ukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm. Perhitungan Kadar NO3 (m.e. l-1) = ppm kurva/bst x fp Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (kalau ada) bst = bobot setara N (14) DAFTAR ACUAN Sudjadi, M. dan I.M. Widjik. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Penetapan boron Dasar penetapan Boron dalam air dapat diukur langsung dengan cara spektrofotometri menggunakan pereaksi azomethine. 75 Peralatan • Spektrofotometer • Tabung kimia • Pipet isi 2 ml dan 10 ml • Pipet ukur 5 ml • Pipet otomatis 1 ml Pereaksi • Larutan standar 100 ppm B Timbang 0,2859 g serbuk H3BO3 kering ke dalam labu ukur 500 ml dan larutkan dengan air bebas ion hingga tepat 500 ml. • Larutan standar 2 ppm B Pipet 2 ml larutan standar 100 ppm B ke dalam labu ukur 100 ml. Encerkan dengan larutan standar 0 hingga 100 ml. • Deret standar B Pipet berturut turut 0; 1; 2; 3 dan 4 ml standar 2 ppm B ke dalam tabung reaksi. Tambahkan standar 0 sehingga volume masing-masing menjadi 4 ml. • Larutan sangga Larutkan 100,00 g NH4-Asetat, 10,00 g EDTA-4Na (titriplex II) dan 4,00 g nitrilotriaceticacid (titriplex I) dengan 160 ml air bebas ion di dalam botol plastik. Tambahkan perlahan 50 ml asam asetat glasial dan diaduk hingga homogen. • Azomethine-H Larutkan 0,230 g azomethine-H dan 0,500 g asam askorbat dengan sekitar 25 ml air bebas ion di dalam erlenmeyer plastik 50 ml. Erlenmeyer direndam dalam air panas hingga larutan menjadi jernih. Simpan pereaksi ini dalam botol plastik berwarna gelap. Cara kerja Pipet masing-masing 4 ml ekstrak contoh dan deret standar boron ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 1 ml larutan sangga dan kocok. Kemudian tambahkan 1 ml Azomethine-H, kocok dan biarkan 1 jam. Boron dalam larutan diukur dengan alat spektrofotometer pada panjang gelombang 430 nm dengan deret standar B sebagai pembanding. Perhitungan Kadar B (mg l-1) = ppm kurva x fp Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fp = faktor pengenceran (kalau ada) 76 DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. 77 ANALISIS PUPUK ANALISIS PUPUK ANORGANIK Persiapan contoh Persiapan contoh merupakan tahap penyediaan contoh siap timbang untuk dianalisis. Tahap pertama contoh pupuk dicatat kode atau nomor pengirim , asal contoh dan diberi nomor laboratorium. Contoh diambil kurang lebih 10 g (representatif) untuk dihaluskan hingga lolos 80 mesh dengan grinder atau lumpang porselin. Contoh ini yang akan digunakan untuk analisis kadar unsur-unsur yang terdapat dalam pupuk. Contoh disimpan dalam kantong plastik, diberi nomor laboratorium dan ditutup hingga kedap udara. Penetapan kadar air Metode Karl Fischer Untuk penetapan pupuk urea dan pupuk NPK. Dasar penetapan Bila air bereaksi dengan larutan pereaksi Karl Fischer, yaitu campuran dari iod, belerang dioksida, piridin dan metanol, maka bila elektrode platina dari alat aquatitrator terpolarisasi sedikit saja akan mendepolarisasi elektrode. Hal ini menyebabkan sejumlah besar arus akan mengalir ke mikrometer dan menunjukan titik akhir titrasi. Peralatan • Aquatitrator atau aquameter • Botol timbang • Neraca analitik Pereaksi • Larutan Karl Fischer, larutan tunggal yang stabil dengan titar 5 mg H2O ml-1 • Metanol, dengan kadar air maks 0,1 % • Air bebas ion Cara kerja Masukkan sejumlah metanol ke dalam botol reaksi aquatitrator hingga elektrode platina terendam. Titrasi dengan larutan Karl Fischer sampai titik akhir tercapai dan diperoleh metanol bebas air. Timbang dengan teliti 2,000 – 3,000 g contoh urea dan masukan ke dalam botol reaksi aquatitrator dan aduk hingga semua contoh terlarut. Titrasi dengan larutan Karl Fischer hingga titik akhir tercapai dan catat volume larutan Karl Fischer yang dipakai untuk titrasi Perhitungan Kadar air dalam contoh dapat dihitung dengan rumus berikut : Kadar air = {(V x N)/(W x 1.000)} x 100 78 Keterangan: W = berat contoh dalam gram N = titar pereaksi Karl Fischer V = ml pereaksi Karl Fischer yang dipakai DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-2801-1998 SNI 02-2803-2000 Metode pengeringan pada 105 0C Untuk penetapan pupuk (NH4)2 SO4, pupuk NPK, fosfat alam, SP-36, DAP, MAP, dolomit/kaptan, kiserit, KCl, TSP+Zn dan UAP. Dasar penetapan Kadar air ditentukan dengan cara penguapan pada suhu 105 oC. Berat yang hilang merupakan jumlah air yang dikandung contoh pupuk. Peralatan • Botol timbang dari gelas, bertutup • Oven pengering dengan suhu otomatis • Desikator • Neraca analitik 4 desimal Cara kerja Timbang dengan teliti 5,0000 g contoh pupuk ke dalam botol timbang kosong yang telah diketahui beratnya. Panaskan dalam oven pengering pada suhu 105 0C selama 3 jam, dinginkan dalam desikator dan timbang. Ulangi pemanasan dan penimbangan sampai berat tetap. Berat yang hilang adalah berat air. 2.2.1 Perhitungan Kadar air (% ) = (W – W1) x 100/W Dimana: W = bobot contoh asal dalam g W1 = bobot contoh setelah dikeringkan dalam g 100 = faktor konversi ke % fka (faktor koreksi kadar air) = 100/(100 - % kadar air) (dihitung dari kadar air contoh pupuk halus dan digunakan sebagai faktor koreksi dalam perhitungan hasil analisis). DAFTAR ACUAN Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-0086-2005 79 Penetapan nitrogen Kadar nitrogen dari pupuk NPK dibedakan menjadi tiga bentuk senyawa N yaitu: NUrea (N-organik), N-NH4 dan N-NO3. Jumlah tiga bentuk senyawa ini merupakan Ntotal. Penetapan N-urea (N-organik) dan N-NH4 Dasar penetapan Nitrogen dalam contoh dihidrolisis dengan asam sulfat dan NH3 yang terbentuk didestilasi dengan penambahan alkali (suasana basa). Destilat ditampung dalam asam borat yang telah dibubuhi indikator Conway, kemudian dititrasi dengan larutan baku asam sulfat (0,050 N). Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu ukur /labu Kjeldahl 100 ml • Erlenmeyer 100 ml • Alat destilasi • Labu didih 250 ml • Buret digital 3 desimal/titrator • Hot plate (pemanas 0 – 350 0C)/Kjeldahltherm • Dispenser skala 0 – 10 ml Pereaksi • H2SO4 pekat (95-97%, BJ. 1,84) • Asam borat 1 % Timbang 1,00 g asam borat larutkan 100 ml H2O. • Asam sulfat 0,050 N (titrisol) Pipet 50 ml larutan baku H2SO4 1 N titrisol ke dalam labu ukur 1 l. Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. • NaOH 40 % Larutkan 400,0 g NaOH dalam piala gelas dengan air bebas ion 600 ml, setelah dingin diencerkan menjadi 1 l. • Indikator Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 100 ml etanol 96 %. • Batu didih Buat dari batu apung yang dihaluskan. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh yang telah dihaluskan ke dalam labu Kjeldahl atau labu ukur 100 ml. Tambahkan 2,5 ml H2SO4 pekat ke dalam labu dan sertakan blanko. Didihkan selama 1 jam di atas pemanas (hot plate). Setelah dingin encerkan dengan air bebas ion hingga tanda tera 100 ml, kocok hingga homogen. Pipet 10 ml ekstrak ke dalam labu didih yang telah diberi sedikit serbuk batu didih dan tambahkan 100 ml air bebas ion. Siapkan penampung destilat, yaitu 10 ml larutan asam borat 1% dalam erlenmeyer yang dibubuhi tiga tetes indikator Conway (larutan berwarna merah). Destilasikan dengan menambahkan 10 ml NaOH 40 %. Destilasi diakhiri apabila destilat 80 dalam penampung sudah mencapai volume 50-75 ml (larutan berwarna hijau). Destilat dititrasi dengan H2SO4 0,050 N hingga warna merah muda. Catat volume titar contoh (Vc) dan blanko (Vb). Perhitungan Kadar N-urea (N-organik) + N-NH4 (%) = (Vc - Vb) x N x bst N x 100 ml 10 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 100/10 x 100/500 x fk = (Vc - Vb) x N x 28 x fk Keterangan: Vc, b = ml titar contoh dan blanko N = normalitas larutan baku H2SO4 (0,050) 14 = bobot setara nitrogen 100 = konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Page, A.L., Miller R.H., and Keeney D.R. (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2 - Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. SNI 02-2811-2005. Penetapan N-NH4 dan N-NO3 Prinsip N dalam bentuk NH4 dan NO3 dilarutkan dalam air, didestilasi dengan penambahan alkali. NH3 yang keluar ditampung dengan asam borat dan destilat dititrasi dengan larutan asam baku H2SO4 0,050 N. Sisa penetapan N-NH4 yang masih mengandung NO3 direduksi dengan logam Devarda menjadi NH4. Destilasi dilakukan kembali seperti pada penetapan N-NH4. Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu takar 100 ml • Mesin kocok dengan kecepatan 250 goyangan menit-1 • Alat destilasi • Labu didih 250 ml • Buret digital atau buret mikro (3 desimal) • Pipet volume 10 ml • Erlenmeyer 100 ml Pereaksi • H2SO4 pekat (95-97 %, BJ. 1,84) • Larutan asam borat 1% Timbang 1 g asam borat larutkan 100 ml H2O. • Larutan NaOH 40 % Larutkan 400 g NaOH dalam piala gelas dengan air bebas ion 600 ml, setelah dingin diencerkan menjadi 1 l. 81 • • • • Larutan H2SO4 0,050 N (titrisol) Pipet 50 ml larutan baku H2SO4 1 N titrisol ke dalam labu ukur 1 liter. Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Indikator Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 100 ml etanol 96 %. Logam devarda (devarda alloy) Batu didih Buat dari batu apung yang dihaluskan. Cara kerja Timbang teliti 0,5000 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu takar 100 ml. Tambah 50 ml air bebas ion, tutup rapat kemudian kocok dengan mesin kocok selama 30 menit dengan kecepatan 200 goyangan menit-1. Tambahkan air bebas ion sampai tanda tera 100 ml dan kocok bolak-balik dengan tangan sampai homogen. Pipet 10 ml ekstrak ke dalam labu didih, tambahkan sedikit serbuk batu didih dan 100 ml air bebas ion. Siapkan penampung destilat, yaitu 10 ml asam borat 1% yang telah diberi tiga tetes indikator Conway dalam erlenmeyer (larutan berwarna merah). Destilasikan ekstrak dengan menambahkan 10 ml NaOH 40% ke dalam labu didih. Destilasi selesai apabila destilat pada penampung sudah mencapai volume 50-75 ml (larutan berwarna hijau). Destilat dititrasi dengan larutan asam baku H2SO4 0,050 N sampai titik akhir titrasi (Vc) (perubahan warna dari hijau menjadi merah jambu muda). Kerjakan penetapan blanko (Vb). Ekstrak bekas penetapan N-NH4 dalam labu didih ditambah 50 ml air bebas ion dan dibiarkan dingin (jika perlu direndam dalam air). Siapkan penampung destilat yang lain. Destilasikan dengan menambahkan 2 g devarda alloy, akan terjadi pendidihan dengan sendirinya (timbul buih-buih). Pemanas destilator dihidupkan bila buih-buih dalam labu didih sudah habis dan pemanasan dilakukan secara bertahap, hal ini untuk menghindari pembuihan kembali yang dapat masuk ke dalam penampung destilat.. Destilasi diakhiri bila volume destilat dalam penampung sudah mencapai 50-75 ml. Destilat dititrasi dengan asam standar H2SO4 0,050 N seperti penetapan N-NH4 . Perhitungan Kadar N-NH4 (%) Kadar N-NO3 (%) Keterangan : Vc, b N 14 100 fk = (Vc - Vb) x N x bst N x 100 ml 10 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 100/10 x 100/500 x fk = (Vc - Vb) x N x 28 x fk = (Vc - Vb) x N x bst N x 100 ml 10 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 100/10 x 100/500 x fk = (Vc - Vb) x N x 28 x fk = ml titar contoh dan blanko = normalitas larutan baku H2SO4 (0,050) = bobot setara nitrogen = konversi ke % = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 82 DAFTAR ACUAN Page, A.L., R.H. Miller, and D.R. Keeney (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2- Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. SNI 02-2811-2005. Kadar nitrogen dalam urea Prinsip Nitrogen dalam urea dihidrolisis dengan asam sulfat. NH4 yang terbentuk didestilasi dengan penambahan alkali (suasana basa). Destilat ditampung dalam asam borat yang telah dibubuhi indikator Conway, kemudian dititrasi dengan larutan baku asam sulfat. Peralatan • Labu ukur 100 ml • Erlenmeyer 100 ml • Alat destilasi • Buret digital 3 desimal • Hot plate (pemanas 0 – 3500C) • Neraca analitik 4 desimal • Dispenser 0 – 10 ml Pereaksi • H2SO4 pekat (95-97%, BJ. 1,84) • Campuran selen/katalis • Larutan asam borat 1% Timbang 1 g asam borat larutkan 100 ml H2O. • Larutan NaOH 40 % Larutkan 400 g NaOH dalam piala gelas dengan air bebas ion 600 ml, setelah dingin diencerkan menjadi 1 l. • Larutan H2SO4 0,050 N (titrisol) Pipet 50 ml larutan baku H2SO4 1 N titrisol ke dalam labu ukur 1 l. Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. • Indikator Conway Larutkan 0,100 g merah metil (metil red) dan 0,150 g hijau bromkresol (bromcresol green) dengan 100 ml etanol 96 %. • Batu didih Buat dari batu apung yang dihaluskan. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh urea ke dalam labu ukur. Dengan dispenser tambahkan 2,5 ml H2SO4 pekat ditambahkan campuran selen/katalis, kerjakan penetapan blanko. Didihkan campuran selama 1 jam di atas pemanas (hot plate). Setelah dingin encerkan dengan air bebas ion hingga tanda tera, kocok hingga homogen. Pipet 10 ml ekstrak ke dalam labu didih yang telah diberi sedikit serbuk batu didih dan tambahkan 100 ml air bebas ion. Siapkan penampung destilat dalam erlenmeyer yang terdiri atas 10 ml larutan asam borat 1 % yang telah dibubuhi tiga tetes indikator Conway. 83 Destilasikan dengan menambahkan 10 ml NaOH 40 %. Destilasi diakhiri apabila volume destilat dalam penampung sudah mencapai 50-75 ml. Destilat dititrasi dengan larutan asam baku, yaitu H2SO4 0,050 N hingga titik akhir (Vc) (perubahan warna dari hijau menjadi merah jambu muda). Penetapan blanko dikerjakan (Vb). Perhitungan Kadar N (%) = (Vc - Vb) x N x bst N x 100 ml 10 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fk = (Vc - Vb) x N x 14 x 100/10 x 100/500 x fk = (Vc - Vb) x N x 28 x fk Keterangan: Vc, b = ml titar contoh dan blanko N = normalitas larutan baku H2SO4 (0,050) 14 = bobot setara nitrogen 100 = konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Page, A.L., R.H. Miller, and D.R. Keeney (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2- Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. SNI 02-2801-1998. Penetapan biuret Dasar penetapan Biuret dengan garam kompleks tembaga alkali membentuk kompleks yang berwarna lembayung. Absorbansi larutan ini ditetapkan 530 – 540 nm, dengan larutan blanko sebagai acuan. Kadar biuret diperoleh dengan memakai kurva deret standar biuret yang disiapkan dengan cara yang sama. Peralatan • Spektrofotometer • Labu ukur 100 ml • Neraca analitik 4 desimal • Dispenser 10 ml Pereaksi • Air bebas ion yang bebas CO2 Air bebas ion dididihkan dan dinginkan sebelum digunakan untuk membuat semua pereaksi penetapan biuret. • Larutan tembaga (II) sulfat Timbang 6 g CuSO4.5H2O ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dengan air bebas ion hingga 1 l. • K, Na-tartrat (KNaC4H4O6.4H2O) Timbang 20 g kalium natrium tartrat dan 32 g KOH, masukan ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Simpan selama minimal 2 hari sebelum digunakan. 84 • • • Larutan biuret murni Timbang 5 g biuret standar, masukan kedalam gelas piala 100 ml, tambahkan 15 ml larutan amoniak 10% dan diaduk selama 15 menit. Saring larutan dengan menggunakan corong Gooch G3, cuci alat penyaring masing-masing dua kali dengan 5 ml air dan tiga kali dengan 10 ml aseton. Keringkan biuret selama 3 jam pada suhu 1050C. Simpan biuret standar dalam botol berwarna coklat dan ditutup rapat. Larutan standar biuret (0,8 mg ml-1) Timbang 0,8 g biuret ke dalam labu ukur 1 liter (sebelum ditimbang dikeringkan lebih dahulu pada suhu 1050C selama 3 jam). Encerkan dengan air bebas ion hingga 1 l. Deret standar biuret (0-800 ppm) Pipet masing-masing ke dalam labu ukur 50 ml: 0,5 ; 10; 15; 20; 25 ml larutan baku biuret 800 ppm. Tambahkan masing masing 10 ml larutan natrium kalium tartrat dan 10 ml tembaga sulfat encerkan hingga tanda garis dan diamkan 30 menit. Ukur absorbansi pada panjang gelombang 530-550 nm. Cara kerja Timbang teliti 10,0000 g urea ke dalam labu ukur 200 ml, larutkan dengan air bebas ion hingga tanda garis. Pipet 20 ml larutan contoh ke dalam labu ukur 50 ml + 10 ml larutan K, Na-tartrat + 10 ml larutan tembaga (II) sulfat, encerkan hingga tanda garis (B). Pipet 20 ml larutan contoh ke dalam labu ukur 50 ml + 10 ml larutan K, Na-tartrat, encerkan hingga tanda garis (C). Pipet 20 ml larutan contoh kedalam labu ukur 50 ml + 10 ml larutan tembaga (II) sulfat, encerkan hingga tanda garis (D). Pipet 10 ml larutan K,Na-tartrat ke dalam labu ukur 50 ml, encerkan hingga tanda garis (F). Diamkan masing-masing selama 30 menit lalu ukur absorbansinya dengan spektrometer pada panjang gelombang 530 – 540 nm. Pengukuran larutan blanko dilakukan untuk standar 0. Pengukuran pada rentang panjang gelombang 530-550 nm. Atur fotometer pada absorbansi 0 dengan larutan F kemudian tetapkan absorbansi dari larutan D (=ED). Atur fotometer pada absorbansi 0 dengan larutan C dan tetapkan absorbansi dari larutan B (=EB) Perhitungan Kadar biuret dapat dilihat pada kurva standar sesuai dengan absorbansi yang didapat dari larutan contoh. Kadar biuret dapat dihitung dengan rumus berikut: Kadar Biuret (%) = (a x fp)/(W x 10) Keterangan: W = berat contoh dalam gram a = berat biuret yang sesuai dengan selisih absorbansi larutan B dan D (EB – ED), dinyatakan dalam milligram fp = faktor pengenceran 85 Apabila menggunakan faktor kalibrasi pereaksi dapat digunakan rumus: Kadar Biuret (%) = {(EB – ED) fk x fp} / W x 10 Keterangan: EB = absorbansi larutan contoh B ED = absorbansi larutan D fk = faktor kalibrasi pereaksi (mg) fp = faktor pengenceran W = berat contoh (mg) DAFTAR ACUAN SNI 02-2801-1998. Penetapan P2O5 dan K2O total Dasar penetapan Fosfat diukur secara spektrometri dari senyawa kompleks (berwarna kuning) yang terbentuk hasil reaksi dari orthofosfat dengan amonium molibdat dan vanadat, sementara kalium diukur secara flamephotometri dari intensitas sinar emisi. Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu ukur 100 ml • Pemanas listrik/hot plate • Dispenser skala 10 ml/pipet ukur volume 10 ml • Dilutor (pengencer skala 0 – 10 ml)/pipet volume 1 ml • Pipet ukur 10 ml • Tabung reaksi 20 ml • Pengocok tabung (vortex mixer) • Spektrophotometer visible • Flamephotometer Pereaksi • Air bebas ion yang bebas CO2 Air bebas ion dididihkan dan dinginkan sebelum digunakan untuk membuat pereaksi dalam penetapan ini. • HCl p.a. pekat (37%, Bj. 1,19) • HCl 25 % Encerkan 675,7 ml HCl p.a. pekat (37%) dengan air bebas ion menjadi 1 l. • HNO3 pa. 67% • Standar 0 Pipet 50 ml HCl 25% ke dalam labu ukur 500 ml yang berisi kira-kira 200 ml air bebas ion. Kocok campuran dan impitkan dengan air bebas ion. • Pereaksi I (amonium molibdat 1%) Timbang 10 g NH4 Mo7 O24 . 4H2O dalam 1.000 ml air bebas ion. 86 • • • • • • • • Pereaksi II (amonium vanadat 0,5%) Timbang 0,5 g NH4VO3 + 70 ml HNO3 p.a. dalam 1.000 ml air bebas ion yang telah dididihkan dahulu. Pereaksi campuran (satu bagian Pereaksi I + satu bagian pereaksi II) Gunakan dalam keadaan segar, tidak dapat dipakai lebih dari 1 malam. Standar induk 2000 ppm P dalam H2O Timbang 8.7742 g KH2PO4 (yang telah dikeringkan pada 130 oC selama 2 jam), masukan ke dalam labu ukur 1 l, impitkan hingga tanda garis dengan air bebas ion. Standar 500 ppm P Pipet 25 ml larutan standar induk 2.000 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 10 ml HCl 25 % dan air bebas ion hingga 100 ml. Deret standar P (0-500 ppm P) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 500 ppm P. Tambahkan standar 0 hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 50; 100; 200; 300; 400 dan 500 ppm P. Standar induk 1000 ppm K (titrisol) Standar 200 ppm K Pipet 20 ml dari standar induk 1000 ppm K ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 1ml HCl 25 % dan air bebas ion sampai dengan 100 ml, lalu kocok. Deret standar K (0-20 ppm K) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 200 ppm K. Tambahkan standar 0 yang telah diencerkan 10 x hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ppm K. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu takar volume 100 ml. Tambahkan 10 ml HCl 25 % dengan dispenser atau pipet volume 10 ml. Panaskan pada hot plate sampai larut sempurna, mendidih selama 15 menit. Encerkan dengan air bebas ion dan setelah dingin volume ditepatkan sampai tanda tera 100 ml, tutup kemudian kocok bolak balik dengan tangan sampai homogen. Biarkan semalam atau jika perlu disaring untuk mendapatkan ekstrak jernih dengan cepat. Pengukuran P Pipet 1 ml ekstrak jernih atau filtrat dan deret standar P masing-masing ke dalam tabung kimia. Tambahkan masing-masing 9 ml pereaksi campuran, kocok hingga homogen dengan vortex. Diukur dengan spektrophotometer pada panjang gelombang 466 nm dengan deret standar P sebagai pembanding. Pengukuran K Pipet 1 ml ekstrak jernih atau filtrat di atas ke dalam tabung reaksi dan tambahkan 9 ml air bebas ion, kocok dengan vortex hingga homogen (pengenceran 10 x). Kalium diukur dengan fotometer nyala dari ekstrak yang telah diencerkan dengan deret standar K sebagai pembanding. Perhitungan Kadar P2O5-total (%) = ppm kurva x (ml ekstrak 1.000 ml-1) x (100 mg contoh-1) x fp x (142/90) x fk = ppm kurva x 100/1.000 x 100/250 x 142/90 x fk = ppm kurva x 0,04 x 142/190 x fk 87 Kadar K2O-total (%) = ppm kurva x 0,4 x 94/78 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran (10 untuk K, 1 untuk P) 142/190 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P2O5 94/78 = faktor konversi bentuk K menjadi K2O DAFTAR ACUAN Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-3776-2005. Kadar P2O5 dan K2O larut dalam asam sitrat 2% Dasar penetapan Fosfat terlarut asam sitrat 2% diukur secara spektrometri dari senyawa kompleks (warna kuning) yang terbentuk dari hasil reaksi orthofosfat dengan amonium molibdat dan vanadat, sedangkan kalium terlarut asam sitrat 2% diukur langsung secara flamephotometri. Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu takar volume 100 ml • Mesin kocok dengan kecepatan 250 goyangan menit-1 • Dispenser 10 ml pipet-1 ukur volume 10 ml • Dilutor/pipet volume 1 ml • Pipet ukur 10 ml • Tabung reaksi volume 20 ml • Pengocok tabung (vortex mixer) • Spektrophotometer visible • Flamephotometer Pereaksi • Larutan asam sitrat 2 % Timbang 10 g asam sitrat p.a. larutkan dalam 500 ml H2O • Air bebas ion yang bebas CO2 Air bebas ion dididihkan dan dinginkan sebelum digunakan untuk membuat pereaksi dalam penetapan ini. • HNO3 pa. 67% • Standar 0 Pipet 50 ml asam sitrat 2 % ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga 100 ml, kocok. 88 • • • • • • • • • Pereaksi I (amonium molibdat 1%) Timbang 10 g NH4 Mo7 O24 . 4H2O dalam 1.000 ml air bebas ion. Pereaksi II (amonium vanadat 0,5%) Timbang 0,5 g NH4VO3 + 70 ml HNO3 p.a. dalam 1.000 ml air bebas ion yang telah dididihkan dahulu. Pereaksi campuran (satu bagian Pereaksi I + satu bagian pereaksi II) Gunakan dalam keadaan segar, tidak dapat dipakai lebih dari 1 malam. Standar induk 2000 ppm P dalam H2O Timbang 8.7742 g KH2PO4 (yang telah dikeringkan pada 130 oC selama 2 jam), masukan ke dalam labu ukur 1 l, impitkan hingga tanda garis dengan air bebas ion. Standar 500 ppm P Pipet 25 ml larutan standar induk 2000 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 50 ml asam sitrat 2 % dan air bebas ion hingga 100 ml. Deret standar P (0-500 ppm P) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 500 ppm P. Tambahkan standar 0 hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 50; 100; 200; 300; 400; dan 500 ppm P. Standar induk 1000 ppm K (titrisol) Standar 200 ppm K Pipet 20 ml dari standar induk 1.000 ppm K kedalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 5 ml asam sitrat 2 % dan air bebas ion sampai dengan 100 ml, lalu kocok. Deret standar K (0-20 ppm K) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 200 ppm K. Tambahkan standar 0 yang telah diencerkan 10 x hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ppm K. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu takar volume 100 ml. Tambahkan 50 ml asam sitrat 2 % dengan dispenser atau pipet volume 50 ml. Tutup dan kocok dengan mesin kocok kecepatan 200 goyangan menit-1. Tambahkan air bebas ion hingga tanda tera 100 ml. Kocok bolak-balik dengan tangan hingga homogen, saring dengan kertas saring agar didapat cairan jernih. Pengukuran P Pipet 1 ml filtrat dan deret standar P masing-masing ke dalam tabung kimia. Tambahkan masing-masing 9 ml pereaksi campuran, kocok hingga homogen dengan vortex. Diukur dengan spektrophotometer pada panjang gelombang 466 nm dengan deret standar P sebagai pembanding. Pengukuran K Pipet 1 ml filtrat di atas ke dalam tabung reaksi dan tambahkan 9 ml air bebas ion, kocok dengan vortex hingga homogen (pengenceran 10 x). Kalium diukur dengan fotometer nyala dari ekstrak yang telah diencerkan dengan deret standar K sebagai pembanding. 89 Perhitungan Kadar P2O5 asam sitrat 2 % (%) = ppm kurva x (ml ekstrak 1.000 ml-1) x (100 mg contoh-1) x fp x (142/90) x fk = ppm kurva x 100/1.000 x 100/250 x 142/90 x fk = ppm kurva x 0,04 x 142/190 x fk Kadar K2O asam sitrat 2 % (%) = ppm kurva x 0,4 x 94/78 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran (10 untuk K, 1 untuk P) 142/190 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P2O5 94/78 = faktor konversi bentuk K menjadi K2O DAFTAR ACUAN Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-3776-2005. SNI 02-3769-2005. Kadar P2O5 dan K2O larut dalam air Dasar penetapan Fosfat terlarut dalam air diukur secara spektrometri dari senyawa kompleks (warna kuning) yang terbentuk dari hasil reaksi orthofosfat dengan amonium molibdat dan vanadat, sedangkan kalium terlarut dalam air diukur langsung secara flamephotometri. Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu takar volume 100 ml • Mesin kocok dengan kecepatan 250 goyangan menit-1 • Dispenser 10 ml pipet-1 ukur volume 10 ml • Dilutor/pipet volume 1 ml • Pipet ukur 10 ml • Tabung reaksi volume 20 ml • Pengocok tabung (vortex mixer) • Spektrophotometer visible • Flamephotometer Pereaksi • Air bebas ion yang bebas CO2 Air bebas ion dididihkan dan dinginkan sebelum digunakan untuk membuat pereaksi dalam penetapan ini. 90 • • • • • • • • • • HNO3 pa. 67% Pereaksi I (amonium molibdat 1%) Timbang 10 g NH4 Mo7 O24 . 4H2O dalam 1.000 ml air bebas ion. Pereaksi II (amonium vanadat 0,5%) Timbang 0,5 g NH4VO3 + 70 ml HNO3 p.a. dalam 1.000 ml air bebas ion yang telah dididihkan dahulu. Pereaksi campuran (satu bagian Pereaksi I + satu bagian pereaksi II) Gunakan dalam keadaan segar, tidak dapat dipakai lebih dari 1 malam. Standar induk 2.000 ppm P dalam H2O Timbang 8.7742 g KH2PO4 (yang telah dikeringkan pada 130 oC selama 2 jam), masukkan ke dalam labu ukur 1 l, impitkan hingga tanda garis dengan air bebas ion. Standar 500 ppm P Pipet 25 ml larutan standar induk 2.000 ppm P ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga 100 ml, kocok. Deret standar P (0-500 ppm P) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 500 ppm P. Tambahkan air bebas ion hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 50; 100; 200; 300; 400; dan 500 ppm P. Standar induk 1.000 ppm K (titrisol) Standar 200 ppm K Pipet 20 ml dari standar induk 1000 ppm K ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion sampai dengan 100 ml, lalu kocok. Deret standar K (0-20 ppm K) Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 200 ppm K. Tambahkan air bebas ion hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 2; 4; 8; 12; 16 dan 20 ppm K. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu takar volume 100 ml. Tambahkan 50 ml air bebas ion dengan dispenser atau pipet volume 50 ml. Tutup dan kocok dengan mesin kocok kecepatan 200 goyangan menit-1. Tambahkan lagi air bebas ion hingga tanda tera 100 ml. Kocok bolak-balik dengan tangan hingga homogen, saring dengan kertas saring agar didapat cairan jernih. Pengukuran P Pipet 1 ml filtrat dan deret standar P masing-masing ke dalam tabung kimia. Tambahkan masing-masing 9 ml pereaksi campuran, kocok hingga homogen dengan vortex. Diukur dengan spektrophotometer pada panjang gelombang 466 nm dengan deret standar P sebagai pembanding. Pengukuran K Pipet 1 ml filtrat di atas ke dalam tabung reaksi dan tambahkan 9 ml air bebas ion, kocok dengan vortex hingga homogen (pengenceran 10 x). Kalium diukur dengan fotometer nyala dari ekstrak yang telah diencerkan dengan deret standar K sebagai pembanding. 91 Perhitungan Kadar P2O5 larut dalam air (%) = ppm kurva x (ml ekstrak 1.000 ml-1) x (100 mg contoh-1) x fp x (142/90) x fk = ppm kurva x 100/1.000 x 100/250 x 142/90 x fk = ppm kurva x 0,04 x 142/190 x fk Kadar K2O larut dalam air (%) = ppm kurva x 0,4 x 94/78 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran (10 untuk K, 1 untuk P) 142/190 = faktor konversi bentuk PO4 menjadi P2O5 94/78 = faktor konversi bentuk K menjadi K2O DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-3776-2005. SNI 02-3769-2005. SNI 02-0086-2005. Pengukuran Fe, Al, Ca, dan Mg-total Dasar penetapan Besi, aluminium, kalsium dan magnesium diukur dengan spektro serapan atom dari ekstrak jernih hasil destruksi basah dengan asam mineral. Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu takar volume 100 ml • Pemanas listrik/hot plate • Dispenser 10 ml/pipet ukur 10 ml • Dilutor/pipet volume 1 ml • AAS Pereaksi • HCl 25% (HCl pa. 37%, Bj. 1,19) • Standar 0 Pipet 50 ml HCl 25% ke dalam labu ukur 500 ml yang berisi kira-kira 200 ml air bebas ion. Kocok campuran dan impitkan dengan air bebas ion. • Standar induk Fe, Al, Ca dan Mg masing-masing 1.000 ppm Gunakan larutan standar titrisol. 92 • • • • • • Standar 100 ppm Fe Pipet 10 ml larutan standar induk Fe 1.000 ppm ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan air bebas ion hingga 100 ml. Standar campur Fe (10 ppm) dan Al (100 ppm) Pipet masing-masing: 10,0 ml standar 100 ppm Fe 10,0 ml standar induk 1.000 ppm Al Campurkan dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 10 ml HCl 25 % dan impitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campuran Fe dan Al dengan kepekatan: 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ppm Fe 0; 10; 20; 40; 60; 80; dan 100 ppm Al Pipet standar campur Fe (10 ppm) dan Al (100 ppm) sebanyak: 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml, tambahkan standar 0 hingga volume masing-masing menjadi 10 ml. Standar campur 250 ppm Ca, dan 50 ppm Mg. Pipet masing-masing: 25,0 ml standar pokok 1000 ppm Ca 5,0 ml standar pokok 1000 ppm Mg Campurkan dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 10 ml HCl 25 %, kemudian diimpitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. kemudian diimpitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Standar campuran 25 ppm Ca dan 5 ppm Mg. Pipet 10 ml standar campur 250 ppm Ca dan 50 ppm Mg ke dalam labu ukur 100 ml, kemudian diimpitkan dengan air bebas ion hingga tepat 100 ml. Deret standar campuran Ca dan Mg dengan kepekatan: 0; 2,5; 5; 10; 15; 20; dan 25 ppm Ca 0; 0,5; 1; 2; 3; 4; dan 5 ppm Mg Pipet standar campur Ca (25 ppm) dan Mg (5 ppm) sebanyak: 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml, tambahkan standar 0 yang sudah diencerkan 10 x hingga volume masing-masing menjadi 10 ml. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu takar volume 100 ml. Tambahkan 10 ml HCl 25 % dengan dispenser atau pipet volume 10 ml. Panaskan pada hot plate sampai larut sempurna, mendidih selama 15 menit. Encerkan dengan air bebas ion dan setelah dingin volume ditepatkan sampai tanda tera 100 ml, tutup kemudian kocok bolak balik dengan tangan sampai homogen. Biarkan semalam atau jika perlu disaring untuk mendapatkan ekstrak jernih dengan cepat. Pengukuran Fe dan Al Pipet 1 ml ekstrak total ke dalam tabung kimia. Tambahkan 9 ml air bebas ion (dilutor), kocok sampai homogen dengan vortex. Ukur dengan AAS menggunakan deret standar campuran Fe (0-10 ppm) dan Al (0-100 ppm) sebagai pembanding. Pengukuran Ca dan Mg Pipet 1 ml ekstrak total ke dalam tabung kimia, tambahkan 9 ml air bebas ion. Tambahkan 1 ml larutan LaCl3 25.000 ppm masing-masing ke dalam 10 ml ekstrak encer dan deret standar campuran Ca (0-25 ppm) dan Mg (0-5 ppm), kocok sampai homogen (vortex). Ukur dengan AAS. 93 Perhitungan Kadar Fe2O3, Al2O3, CaO dan MgO (%) = ppm kurva x (ml ekstrak 1.000 ml-1) x (100 mg contoh-1) x fp x (B/A) x fk = ppm kurva x 100/1.000 x 100/250 x fp x B/A x fk = ppm kurva x 0,04 x fp x B/A x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran (10 untuk Ca dan Mg, 1 untuk Fe dan Al) B = berat molekul senyawa oksida logam Fe2O3 = 160 Al2O3 = 102 CaO = 56 MgO = 40,3 A = berat atom logam dalam senyawa oksida Fe = 112 Al = 54 Ca = 40 Mg = 24,3 DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 13-4704-1995. SNI 19-7030-2004. Penetapan besar butir/kehalusan Dasar penetapan Besar butir/kehalusan ditetapkan dengan cara penimbangan contoh yang lolos ayak pada ukuran lubang tertentu. Peralatan • Neraca analitik • Ayakan Mesh No. 25. dan No. 80 Cara kerja Timbang teliti 25,000 g contoh asli. Masukan dalam ayakan tersusun (yang paling atas No.25 selanjutnya No.80). Diayak selama ½ jam. Timbang masing-masing contoh yang tidak lolos pada setiap ayakan tersebut. Perhitungan Lolos ayakan mesh No.25 = W – W1/W x 100 % Lolos ayakan mesh No. 80 = W – (W1 + W2) /W x 100 % Keterangan: W = berat contoh W1 = berat contoh yang tidak lolos No. 25 W2 = berat contoh yang tidak lolos No. 80 94 DAFTAR ACUAN SNI 02-3776-2005. SNI 02-2858-2005. Penetapan asam bebas Dasar penetapan Keasaman bebas dapat ditentukan dengan cara titrasi langsung dengan larutan NaOH 0,10 N dengan indikator campuran. Peralatan • Buret digital 3 desimal • Erlenmeyer 250 ml • Neraca analitik 4 desimal Pereaksi • Larutan NaOH 0,10 N yang telah distandardisasi • Indikator campuran yaitu: 50 ml larutan 0,2 % MM dalam etanol dengan 50 ml larutan 0,1 % biru metil dalam etanol. • Air netral Air bebas ion yang dinetralkan dengan larutan 0,10 N NaOH atau larutan 0,10 N H2SO4 dengan penunjuk campuran sampai warna abu-abu. Cara kerja Timbang teliti 10,000 g contoh pupuk ke dalam erlenmeyer kemudian larutkan dengan 100 ml air netral, bila perlu disaring. Dititar dengan larutan NaOH 0,10 N sampai timbul warna netral ( abu-abu) Perhitungan Kadar asam bebas dihitung sebagai H2SO4 (%) = 49 x V x N x 100 / W x fk* Keterangan: V = banyaknya NaOH 0,10 N dalam ml N = normalitas NaOH (0,10 ) W = berat contoh dalam mg fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) * Untuk pupuk fosfat, kadar asam bebas dihitung sebagai asam fosfat DAFTAR ACUAN SNI 02-2809-2005. SNI 02-0086-2005. 95 Penetapan belerang Dasar penetapan Belerang dalam bentuk sulfat diukur dengan spektrofotometer berdasarkan metode turbidimetri pada panjang gelombang 432 nm. Peralatan • Neraca analitik 4 desimal • Labu takar volume 100 ml • Dispenser 10 ml • Dilutor • Pipet 1 ml • Hot plate 0 – 350 0C • Spektrofotometer visible Pereaksi • HCl 4 N. HCl pekat 37 %, Bj 1,19 (12 N) diencerkan tiga kali • HCl 0,04 N Encerkan HCl 4 N sebanyak 10 x • Larutan BaCl2 –Tween-80, Timbang 3,00 g BaCl2.2H2O, tambahkan 4 ml Tween–80 dan dijadikan 100 ml dengan penambahan air bebas ion, kocok sampai homogen. Larutan ini dibiarkan satu malam sebelum dipakai. Pereaksi ini dapat digunakan tidak lebih dari satu minggu. • Asam campur Campurkan 125 ml asam asetat glasial p.a. ( 97-100%), 50 ml HCl p.a. pekat (37 %) dan 50 ml asam fosfat pa, semuanya dijadikan 2,5 l dengan air bebas ion. • Standar induk 1000 ppm S Timbang 5.4354 g K2SO4 ke dalam labu ukur 1 l. Larutkan dengan air bebas ion hingga 1 l. • Standar 100 ppm S Pipet 10 ml standar induk 1000 ppm S ke dalam labu ukur 100 ml. Impitkan hingga tanda tera dengan larutan air bebas ion. • Standar 50 ppm S dalam HCl 0,04 N Pipet 50 ml standar 100 ppm S ke dalam labu ukur 100 ml. Tambahkan 1 ml larutan HCl 4 N dan air bebas ion hingga tanda tera. • Deret standar 0-50 ppm S Pipet masing-masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; 10 ml standar 50 ppm S. Tambahkan HCl 0,04 N hingga masing-masing menjadi 10 ml, kocok. Deret standar ini mengandung 0; 5; 10; 20; 30; 40; dan 50 ppm S. Cara kerja Timbang teliti 0,2500 g contoh pupuk kedalam labu takar 100 ml, tambahkan 10 ml HCl 4 N dengan dispenser dan panaskan pada hot plate sampai larut sempurna. Dinginkan dan volume ditepatkan sampai tanda tera 100 ml dengan air bebas ion. Tutup dan kocok bolak-balik dengan tangan sampai homogen, saring. Pipet 1 ml ekstrak ke dalam tabung kimia dan tambahkan 9 ml air bebas ion (pengenceran 10 x), kocok sampai homogen. Pipet masing-masing 1 ml deret standar S dan ekstrak contoh yang telah 96 diencerkan 10 x ke dalam tabung kimia. Tambahkan 7 ml asam campur dan 1 ml BaCl2tween kemudian kocok sampai homogen. Diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm dengan deret standar S sebagai pembanding. Perhitungan Kadar S (%) = ppm kurva x (ml ekstrak 1.000 ml-1) x (100 mg contoh-1) x fp x fk = ppm kurva x 100/1.000 x 100/250 x 10 x fk = ppm kurva x 0,4 x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikoreksi blanko. 100 = faktor konversi ke % fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) fp = faktor pengenceran (10) DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-2809-2005. SNI 02-1760-2005. Penetapan silikat Dasar penetapan Bahan yang tak larut dalam HCl, dengan HF akan membentuk SiF4 yang mudah menguap. Peralatan • • • • • • Neraca analitik Gelas piala volume 150 ml Corong dari gelas Cawan platina/porselin Pemanas listrik/hot plate Tanur listrik/mufle furnace Pereaksi • Larutan HCl (1 : 1) Campurkan 1 bagian HCl pekat dengan satu bagian air bebas ion. • HF pekat • H2SO4 pekat Cara kerja Timbang teliti 1,0000 g contoh yang telah dihaluskan ke dalam piala gelas volume 150 ml. Tambahkan 25 ml HCl (1:1), didihkan sampai larut (15 menit). 97 Encerkan dengan air bebas ion dan saring dengan kertas saring tak berabu. Cuci endapan dengan air bebas ion panas sampai bebas klorida. Masukan endapan dan kertas saring tersebut ke dalam cawan platina yang telah diketahui beratnya, pijarkan dalam tanur pada 1.000 oC selama 15 menit. Dinginkan dalam desikator dan timbang (W1). Selanjutnya abu ditetesi beberapa tetes HF dan 1 tetes H2SO4 pekat. Panaskan di atas hot plate, pijarkan dalam tanur pada 1.000 oC selama 15 menit, dinginkan dalam desikator dan timbang sampai bobot tetap (W2). Perhitungan Kadar SiO2 = (W1-W2)/ W x 100 % Keterangan W1 = berat endapan setelah pemijaran pertama (g) W2 = berat endapan setelah pemijaran kedua (g) W = berat contoh (g) DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 02-2804-1992. SNI 13-4704-1995. Penetapan setara CaCO3 Dasar penetapan Setara CaCO3 ditetapkan secara titrasi asam-basa, contoh dilarutkan dalam larutan standar HCl berlebih dan kelebihan asam dititrasi dengan larutan standar basa. Peralatan • Neraca analitik • Labu takar volume 100 ml • Erlenmeyer volume 50 ml • Pipet volume 50 ml • Titrator/buret mikro 25 ml • Pemanas listrik/hot plate Pereaksi • Larutan HCl 0,50 N Buat dari titrisol HCl 2 N • Larutan NaOH 0,25 N Buat dari titrisol NaOH 2 N • Indikator PP Timbang 0,100 g PP dalam 100 ml ethanol 96 %. Cara kerja Timbang dengan teliti 0,5000 g contoh pupuk ke dalam labu takar volume 100 ml. Tambahkan 50 ml larutan HCl 0,50 N dengan pipet volume 50 ml. Untuk penetapan 98 blanko, pipet 50 ml larutan HCl 0,50 N ke dalam labu takar volume 50 ml yang lainnya. Panaskan pada pemanas listrik/hot plate, baik contoh maupun blanko (10 menit mendidih). Dinginkan, encerkan dengan air bebas ion hingga tanda tera 100 ml, kocok bolak-balik hingga homogen. Pipet 10 ml ekstrak contoh maupun blanko ke dalam masing-masing erlenmeyer volume 50 ml. Tambahkan masing-masing tiga tetes indikator PP dan akhirnya dititar dengan larutan NaOH 0,25 N (sampai berwarna merah jambu muda), dicatat masing-masing ml titran untuk contoh (Vc) dan blanko (Vb). Perhitungan N NaOH = 10 x 0,25/Vb Keterangan: 10 0,25 Vb N = volume larutan standar HCl yang dipipet (ml) = N dari HCl yang telah diencerkan 2 x = banyaknya titran NaOH dari blanko = normalitas NaOH yang dicari Setara CaCO3 (%) = ( Vb – Vc) x N NaOH x 50 x ml ekstrak ml ekstrak dipipet-1 x 100 mg contoh-1 x fk = ( Vb – Vc) x N NaOH x 50 x 100/10 x 100/500 x fk = ( Vb – Vc) x N NaOH x 100 x fk Keterangan: Vb Vc 50 100 fk = banyaknya titran untuk penitaran blanko (ml) = banyaknya titran untuk penitaran contoh (ml) = berat setara CaCO3 = faktor konversi ke % = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN SNI 13-4704-1995. Penetapan khlor Dasar penetapan Khlorida ditetapkan secara titrasi argentometri (Mohr), dari ekstrak air dengan indikator khromat. Ion perak dengan ion klorida memberikan endapan putih dan kelebihan perak dengan khromat membentuk endapan merah. Peralatan • • • • • • • Neraca analitik Labu takar volume 100 ml/botol kocok 100 ml Mesin kocok dengan kecepatan 250 goyangan menit-1 Corong penyaring dan kertas saring W-41 Pipet volume 10 ml Erlenmeyer 50 ml Titrator/buret 10 ml 99 Pereaksi • Larutan AgNO3 0,01 N Timbang 1,6985 g AgNO3 dalam labu ukur 1000 ml, impitkan hingga tanda garis dengan air bebas ion. • Larutan indikator K2CrO4 5 % Timbang 5,000 g K2CrO4 dalam labu ukur 100 ml, impitkan hingga tanda garis dengan air bebas ion. Cara kerja Timbang teliti 1,0000 g contoh ke dalam labu takar volume 100 ml, tambahkan 50 ml air bebas ion. Kocok dengan mesin kocok selama 30 menit dengan kecepatan 200 goyangan menit-1. Tepatkan volume hingga tanda tera 100 ml dengan air bebas ion, kocok bolak balik. Disaring dengan kertas saring agar mendapat ekstrak jernih. Pipet 10 ml ekstrak (filtrat) ke dalam erlenmeyer dan tambahkan 0,5 – 1 ml indikator K2CrO4 5 %. Titar dengan larutan AgNO3 0,01 N hingga titik akhir titrasi yang ditunjukkan dengan terbentuknya endapan merah bata dari perak kromat, catat volume titran yang diperlukan (Vc). Sebagai penetapan blanko dipipet 10 ml air bebas ion dan ditetapkan seperti contoh, catat volume titran yang diperlukan (Vb). Perhitungan Kadar Cl (%) = ( Vb – Vc) x N x 35,5 x ml ekstrak ml ekstrak dipipet-1 x 100 mg contoh-1 x fk = ( Vb – Vc) x N x 35,5 x 100/10 x 100/1.000 x fk = ( Vb – Vc) x N x 35,5 x fk Keterangan: Vb Vc N 35,5 100 fk = banyaknya titran untuk penitaran blanko (ml) = banyaknya titran untuk penitaran contoh (ml) = normalitas larutan AgNO3 = berat setara Cl = faktor konversi ke % = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN SNI 02-2810-2005. SNI 02-6681-2005. 100 ANALISIS PUPUK ORGANIK Persiapan contoh dan kadar bahan ikutan Dasar penetapan Contoh pupuk organik diaduk hingga homogen dan diayak dengan ayakan 2 mm. Bahan yang tidak lolos ayakan merupakan bahan ikutan (plastik, kaca, kerikil dan lainlain) dipisahkan dan ditimbang. Semua analisis menggunakan contoh pupuk yang lolos ayakan 2 mm (contoh halus) kecuali kadar air contoh asal dan kadar bahan ikutan. Peralatan • Neraca analitik • Gelas piala volume 500 ml • Botol plastik isi 250 ml bertutup Cara kerja Timbang teliti 100,00 g contoh pupuk asal ke dalam piala. Masukan contoh ke dalam ayakan, kemudian diayak. Bahan yang tidak lolos ayakan, merupakan bahan ikutan, dimasukkan ke dalam gelas piala lain yang telah diketahui bobotnya. Timbang piala yang berisi bahan ikutan. Siapkan botol plastik yang telah diberi kode pengirim dan nomor laboratorium yang sesuai dengan contoh asalnya. Masukan contoh pupuk halus ke dalam botol plastik ini dan tutup dengan rapat untuk analisis selanjutnya. Perhitungan Kadar bahan ikutan (%) = W1/ W x 100 % Keterangan: W = bobot contoh asal dalam g W1 = bobot bahan tidak lolos ayakan 2 mm dalam g Faktor koreksi bahan ikutan (fki) = (100 - % bahan ikutan)/100 DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004. Penetapan kadar air Dasar penetapan Air dalam contoh pupuk diuapkan dengan cara pengeringan oven pada suhu 105oC selama semalam (16 jam). Peralatan • Neraca analitik • Botol timbang 101 • • Oven listrik Desikator Cara kerja Timbang teliti masing-masing 10,000 g contoh pupuk asal dan 5,000 g pupuk halus (<2 mm) ke dalam cawan porselin bertutup yang sudah diketahui bobotnya. Masukan ke dalam oven dan dikeringkam selama semalam pada suhu 105 oC. Dinginkan dalam desikator dan timbang. Simpan contoh ini untuk penetapan kadar abu (penetapan bahan organik dengan cara pengabuan). Perhitungan Kadar air (% ) = (W – W1) x 100/W Dimana: W = bobot contoh asal dalam gram W1 = bobot contoh setelah dikeringkan dalam gram 100 = faktor konversi ke % fk (faktor koreksi kadar air) = 100/(100 - % kadar air) (dihitung dari kadar air contoh pupuk halus dan digunakan sebagai faktor koreksi dalam perhitungan hasil analisis selain kadar air dan bahan ikutan). DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004 Penetapan pH Dasar penetapan Nilai pH menunjukkan konsentrasi ion H+ dalam larutan, yang dinyatakan sebagai – log[H+]. Peningkatan konsentrasi H+ menaikkan potensial larutan yang diukur oleh alat dan dikonversi dalam skala pH. Elektrode gelas merupakan elektrode selektif khusus H+, hingga memungkinkan untuk hanya mengukur potensial yang disebabkan kenaikan konsentrasi H+. Potensial yang timbul diukur berdasarkan potensial elektrode pembanding (kalomel atau AgCl). Biasanya digunakan satu elektrode yang sudah terdiri atas elektrode pembanding dan elektrode gelas (elektroda kombinasi). Peralatan - Botol kocok 100 ml - Dispenser 50 ml gelas ukur-1 - Mesin kocok - Labu semprot 500 ml - pH meter Pereaksi - Larutan buffer pH 7,0 dan pH 4,0 102 Cara kerja Timbang 10,00 g contoh pupuk halus, masukan ke dalam botol kocok, ditambah 50 ml air bebas ion. Kocok dengan mesin kocok selama 30 menit. Suspensi tanah diukur dengan pH meter yang telah dikalibrasi menggunakan larutan buffer pH 7,0 dan pH 4,0. DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004. Penetapan kadar abu Dasar penetapan Kadar abu/sisa pijar ditetapkan dengan cara pengabuan pada suhu 550 – 600 oC, sehingga bahan oganik menjadi CO2 dan logam menjadi oksida logamnya. Bobot bahan yang hilang merupakan bahan organik yang dapat dikonversi menjadi kadar C-organik setelah dikalikan faktor 0,58. Peralatan • Cawan porselen • Eksikator • Neraca • Tanur/furnace Cara kerja • Contoh bekas penetapan kadar air atau timbang dengan teliti 5,0000 g contoh di dalam cawan porselen dimasukkan ke dalam tanur. • Mula-mula diabukan pada suhu 300 0C selama 1,5 jam dan selanjutnya pada suhu 550-600 oC selama 2,5 jam. Matikan tanur dan biarkan semalam. • Dinginkan contoh dalam desikator dan timbang. Perhitungan Kadar abu (%) = W2 / W x fk x fki x 100 Kadar bahan organik (%) = (W-W2) / W x fk x fki x 100 Kadar C-organik (%) = kadar bahan organik x 0,58 Keterangan: W2 = berat abu dalam g W = berat contoh dalam g fki = faktor koreksi bahan ikutan = (100 - % bahan ikutan)/100 fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 0,58 = faktor konversi bahan organik ke karbon 103 DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Kadar N total Dasar penetapan N-organik dan N-NH4 yang terdapat dalam contoh didestruksi dengan asam sulfat dan selenium mixture membentuk amonium sulfat, didestilasi dengan penambahan basa berlebih dan akhirnya destilat dititrasi. nitrogen dalam bentuk nitrat diekstraksi dengan air, direduksi dengan devarda alloy, didestilasi dan ahirnya dititrasi. Peralatan • • • • • • • Neraca analitik Digestion apparatus (pemanas listrik/ block digestor Kjeldahl therm) Unit destilator/labu Kjeldahl Titrator/buret Dispenser Erlenmeyer vol. 100 ml Dispenser Pereaksi • H2SO4 pa. 98% • Larutan baku H2SO4 0,05 N Pipet 25 ml standar titrisol H2SO4 1 N dalam labu ukur 500 ml, impitkan hingga tanda tera dengan air bebas ion. • Asam borat 1 % Timbang 10,00 g asam borat dalam 1000 ml air bebas ion • Indikator conway Timbang 0,15 g BCG + 0,1 g MM dalam 100 ml etanol 96%. • Selenium mixture • NaOH 40 % Timbang 40,00 g NaOH dalam labu ukur 100 ml, impitkan hingga tanda tera dengan air bebas ion. Cara kerja Penetapan N-organik dan N-NH4 Timbang teliti 0,2500g contoh yang telah dihaluskan ke dalam labu Kjeldahl/ tabung digestor. Tambahkan 0,25 – 0,50 g selenium mixture dan 3 ml H2SO4 pa, kocok hingga campuran merata dan biarkan 2 – 3 jam supaya diperarang. Didestruksi sampai sempurna dengan suhu bertahap dari 150 oC hingga akhirnya suhu maks 350 oC dan diperoleh cairan jernih (3 –3,5 jam). Setelah dingin diencerkan dengan sedikit akudes agar tidak mengkristal. Pindahkan larutan secara kuantitatif ke dalam labu didih destilator volume 250 ml, tambahkan air bebas ion hingga setengah volume labu didih dan sedikit batu didih. Siapkan penampung destilat yaitu 10 ml asam borat 1 % dalam erlenmeyer volume 100 ml yang dibubuhi 3 tetes indikator conway. 104 Destilasikan dengan menambahkan 20 ml NaOH 40 %. Destilasi selesai bila volume cairan dalam erlenmeyer sudah mencapai sekitar 75 ml. Destilat dititrasi dengan H2SO4 0,05 N, hingga titik akhir (warna larutan berubah dari hijau menjadi merah jambu muda) = A ml, penetapan blanko dikerjakan = A1 ml. Penetapan N- NH4 Timbang teliti 1,0000 g contoh halus ke dalam labu didih destilator, tambahkan sedikit batu didih, 0,5 ml parafin cair dan 100 ml air bebas ion. Blanko adalah 100 ml air bebas ion ditambah batu didih dan parafin cair. Siapkan penampung destilat yaitu 10 ml asam borat 1 % dalam erlenmeyer 100 ml yang dibubuhi tiga tetes indikator Conway. Destilasikan dengan menambahkan 10 ml NaOH 40 %. Destilasi selesai bila volume cairan dalam erlenmeyer sudah mencapai sekitar 75 ml. Destilat dititrasi dengan larutan baku H2SO4 0,05 N, hingga titik akhir (warna larutan berubah dari hijau menjadi merah jambu muda) = B ml, blanko = B1 ml. Penetapan N-NO3 Bekas penetapan di atas (N-NH4) dibiarkan dingin, lalu tambahkan air bebas ion (termasuk blanko) hingga volume semula. Siapkan penampung destilat yaitu 10 ml asam borat 1 % dalam erlenmeyer 100 ml yang dibubuhi tiga tetes indikator Conway. Destilasikan dengan menambahkan 2 g devarda alloy, destilasi dimulai tanpa pemanasan agar buih tidak meluap. Setelah buih hampir habis, pemanasan dimulai dari suhu rendah, setelah mendidih suhu dinaikkan menjadi normal. Destilasi selesai bila volume cairan dalam erlenmeyer sudah mencapai sekitar 75 ml. Destilat dititrasi dengan larutan baku H2SO4 0,05 N, hingga titik akhir (warna larutan berubah dari hijau menjadi merah jambu muda) = C ml, blanko = C1 ml. Perhitungan N-organik dan N-NH4 Kadar N (%) = (A ml – A1 ml) x 0,05 x 14 x 100 mg contoh-1 x fk N-NH4 Kadar N-NH4 (%) = (B ml – B1 ml) x 0,05 x 14 x 100 mg contoh-1 x fk N-NO3 Kadar N-NO3 (%) = (C ml – C1 ml) x 0,05 x 14 x 100 mg contoh-1 x fk Keterangan: A ml = ml titran untuk contoh (N-org + N-NH4) A1 ml = ml titran untuk blanko (N-org + N-NH4) B ml = ml titran untuk contoh (N-NH4) B1 ml = ml titran untuk blanko (N-NH4) C ml = ml titran untuk contoh ( N-NO3) C1ml = ml titran untuk blanko ( N-NO3) 14 = bobot setara N fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) Kadar N- organik (%) = (kadar N-organik dan N-NH4) – kadar N-NH4 Kadar N-total (%) = kadar N-organik + N-NH4 + N-NO3 105 Daftar acuan Page, A.L., R.H. Miller, and D.R. Keeney (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2- Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. SNI 19-7030-2004. Kadar C-organik (Walkley & Black) Dasar penetapan Karbon organik dalam contoh dioksidasi oleh dikromat dalam suasana asam. Krom III yang yang terbentuk setara dengan C-organik yang teroksidasi dan diukur secara spektrometri. Peralatan • Neraca analitik • Labu takar volume 100 ml • Dispenser skala 10 ml/pipet ukur 10 ml • Pipet volume 5 ml • Spektrofotometer visibel Pereaksi • H2SO4 pa. 98%, BJ 1,84 • K2Cr2O7 2 N Timbang 98,1 g K2Cr2O7 + 100 ml H2SO4 pa dalam 1.000 ml air bebas ion • Larutan standar 5.000 ppm C Timbang 12,5 g glukosa dalam 1.000 ml air bebas ion Cara kerja Timbang teliti 0,0500 – 0,1000 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu takar volume 100 ml. Tambahkan berturut-turut 5 ml larutan K2Cr2O7 2 N, kocok, dan 7 ml H2SO4 pa. 98%, kocok lagi, biarkan 30 menit jika perlu sekali-kali dikocok. Untuk standar yang mengandung 250 ppm C, pipet 5 ml larutan standar 5000 ppm C kedalam labu takar volume 100 ml, tambahkan 5 ml H2SO4 dan 7 ml larutan K2Cr2O7 2 N dengan pengerjaan seperti di atas. Kerjakan pula blanko yang digunakan sebagai standar 0 ppm C. Masing-masing diencerkan dengan air bebas ion dan setelah dingin volume ditepatkan hingga tanda tera 100 ml, kocok bolak-balik hingga homogen dan biarkan semalam. Esoknya diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 651 nm. Perhitungan Kadar C-organik ( % ) = ppm kurva x100/ mg contoh x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva regresi hubungan antar kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikurangi blanko. fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 106 Kadar bahan organik (%) = 100/58 x kadar C-org (%) 100 /58 adalah faktor Van Bemmelen DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004. Penetapan P, K, Na, Ca, Mg, S, Fe, Al, Mn, Cu, Zn, dan B-total Dasar penetapan Contoh dioksidasi basah dengan HNO3 dan HClO4. Ekstrak yang diperoleh digunakan untuk mengukur unsur P, S dan B secara spektrophotometri; K dan Na diukur dengan flamefotometer/spektrometer serapan atom; sedangkan Ca, Mg, Fe, Al, Mn, Cu, dan Zn diukur dengan spektrometer serapan atom. Peralatan • Neraca analitik • Labu Kjeldahl volume 50 ml • Tabung dan block digestor Kjeldahl therm • Labu takar volume 50 ml • Tabung kimia volume 20 ml • Vortex mixer • Dilutor skala 0 – 10 ml/pipet ukur volume 10 ml • Dispenser skala 0 – 10 ml/pipet volume 1 ml • Spektrophotometer visible • Spektrometer serapan atom • Flamefotometer Pereaksi • HNO3 pa 65 % • HClO4 pa. 70% • Larutan standar induk K, Na, Ca, Mg, Fe, Al, Mn, Cu, Zn masing-masing 1.000 ppm dalam air bebas ion. • Larutan standar induk 500 ppm PO4, 500 ppm S dan 100 ppm B dalam air bebas ion. • Larutan LaCl3 25.000 ppm ( 67 g LaCl3 + 15 ml HCl 25% dalam 1.000 ml air bebas ion. • Deret standar campuran I mengandung: K, Na, Ca, dan Mg dalam ekstrak yang sama dengan ekstrak contoh dengan kepekatan sebaai berikut: 0; 2; 4; 8; 12; 16; dan 20 ppm K 0; 0,5; 1; 2; 3; 4; dan 5 ppm Na 0; 2,5; 5; 10; 15; 20; dan 25 ppm Ca 0; 0,5; 1; 2; 3; 4; dan 5 ppm Mg • Deret standar campuran II mengandung: Fe, Mn, Al, Cu dan Zn dalam ekstrak yang sama dengan ekstrak contoh dengan kepekatan sebagai berikut: 107 • • • • 0; 1; 2; 4; 6; 8 ; dan 10 ppm Fe 0; 10; 20; 40; 60; 80; dan 100 ppm Al 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ppm Mn 0; 0,5; 1; 2; 3; 4; dan 5 ppm Cu 0; 0,25; 0,5; 1; 1,5; 2; dan 2,5 ppm Zn Deret standar campuran III mengandung: P, S dan B dalam ekstrak yang sama dengan ekstrak contoh dengan kepekatan sebagai berikut: 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ppm PO4 0; 5; 10; 20; 30; 40; dan 50 ppm S 0; 0,2; 0,4; 0,8; 1,2; 1,6; dan 2 ppm B Pereaksi pembangkit pewarna penetapan fosfat: Pereaksi pekat; 12 g amonium heptamolibdat + 0,275 g Kalium antimoniltartat + 140 ml H2SO4 dalam 1.000 ml air bebas ion. Pereaksi encer (dibuat ketika akan digunakan, tidak dapat disimpan); 0,53 g asam askorbat + 50 ml pereaksi pekat dijadikan 500 ml dengan air bebas ion. Pereaksi untuk pengukuran S Asam campur: 125 ml asam asetat glasial + 50 ml HCl + 50 ml asam fosfat dijadikan 500 ml (untuk pemakaian diencerkan lima kali dengan H2O). BaCl2-Tween: 3 g BaCl2 + 4 ml Tween –80 dijadikan 100 ml dengan air bebas ion. Pereaksi penetapan B Larutan buffer: 100 g NH4-asetat + 10 g titriplex II + 4 g titriplex I + 50 ml asam asetat glasial dijadikan 200 ml dengan air bebas ion. Azomethine-H: 0,53 g azomethine-H + 1 g asam askorbat dilarutkan dengan 50 ml dengan air bebas ion (bila perlu dipanaskan). Cara kerja Timbang teliti 0,5000 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu digestion /labu Kjeldahl. Tambahkan 5 ml HNO3 dan 0,5 ml HClO4, kocok-kocok dan biarkan semalam. Panaskan pada block digestor mulai dengan suhu 100 0C, setelah uap kuning habis suhu dinaikan hingga 200 0C. Destruksi diakhiri bila sudah keluar uap putih dan cairan dalam labu tersisa sekitar 0,5 ml. Dinginkan dan encerkan dengan H2O dan volume ditepatkan menjadi 50 ml, kocok hingga homogen, biarkan semalam atau disaring dengan kertas saring W-41 agar didapat ekstrak jernih (ekstrak A). Pengukuran K dan Na Pipet 1 ml ekstrak A ke dalam tabung kimia volume 20 ml, tambahkan 9 ml air bebas ion (dapat menggunakan dilutor), kocok dengan vortex mixer sampai homogen. Ekstrak ini adalah hasil pengenceran 10x (ekstrak B). Ukur K dan Na dalam ekstrak B menggunakan flamefotometer atau SSA dengan deret standar campuran I sebagai pembanding, dicatat emisi/absorbansi baik standar maupun contoh. Pengukuran P Pipet 1 ml ekstrak B ke dalam tabung kimia volume 20 ml (dipipet sebelum pengukuran K dan Na), begitupun masing-masing deret standar P (standar campuran III). Tambahkan masing-masing 9 ml pereaksi pembangkit warna ke dalam setiap contoh dan deret standar, kocok dengan vortex mixer sampai homogen. Biarkan 15 – 25 menit, lalu diukur dengan spektrophotometer pada panjang gelombang 693 nm dan dicatat nilai absorbansinya. 108 Pengukuran Ca dan Mg Pipet 1 ml ekstrak A ke dalam tabung kimia volume 20 ml, tambahkan 9 ml air bebas ion dan 1 ml larutan LaCl3 25.000 ppm. Pipet 10 ml masing-masing deret standar Ca dan Mg (standar campuran I) ke dalam tabung kimia, tambahkan masing-masing 1 ml larutan LaCl3 25.000 ppm. Kocok dengan vortex mixer sampai homogen. Diukur dengan AAS dan dicatat nilai absorbansinya. Pengukuran S Pipet masing-masing 1 ml ekstrak A dan deret standar S (standar campuran III) ke dalam tabung kimia. Tambahkan 7 ml asam campur dan 1 ml larutan BaCl2 Tween, kocok sampai homogen. Diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm, dicatat nilai absorbansinya. Pengukuran B Pipet masing-masing 4 ml ekstrak A dan deret standar boron ke dalam tabung kimia, tambahkan masing-masing 1 ml larutan buffer boron. Masing-masing ditambahkan 1 ml larutan Azomethine-H, kocok sampai homogen dan biarkan 1 jam. Diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 432 nm. Pengukuran unsur mikro (Fe, Al, Mn, Cu, dan Zn) Unsur mikro dari ekstrak A di atas diukur langsung dengan AAS, hasilnya dibandingkan dengan deret standar campuran II (biasanya Fe dalam ekstrak A perlu diencerkan sampai 10 x). Perhitungan Kadar K/Na (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk Kadar P (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x 31/95 x fk Kadar Ca/Mg (%) = ppm kurva x ml ekstrak 1000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk Kadar unsur mikro (Fe, Mn, Al, Cu dan Zn) (ppm)= ppm kurva x ml ekstrak 1000 ml-1 x 100 mg contoh-1 x fp x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva regresi hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikurangi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) 100 = faktor konversi ke % 31 = bobot atom P 95 = bobot molekul PO4 DAFTAR ACUAN Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004. 109 Penetapan total logam berat (Pb, Cd, Co, Cr, Ni, As, Sn, Ag, Se, Mo) Dasar penetapan Contoh dioksidasi basah dengan HNO3 dan HClO4. Ekstrak yang diperoleh digunakan untuk mengukur unsur logam berat dengan spektrometer serapan atom. Peralatan • Neraca analitik • Tabung kimia volume 20 ml • Vortex mixer • Dilutor skala 10 ml/pipet ukur volume 10 ml • Dispenser skala 10 ml/pipet volume 1 ml • Spektrometer serapan atom Pereaksi • HNO3 pekat (65 %) p.a. • HClO4 pekat (60 %) p.a. • Standard 0 (larutan HClO4 10 %) Pipet 10 ml HClO4 pekat (60 %) ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, goyangkan dan tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml. • Standar pokok 1.000 ppm Pb (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Cd (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Co (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Cr (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Ni (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Mo (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Ag (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm As (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Se (titrisol) • Standar pokok 1.000 ppm Sn (titrisol) (pindahkan secara kuantitatif larutan standar induk logam berat titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1000 ml. Impitkan dengan bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok). • Standar campuran: ( 20 ppm Pb, 2 ppm Cd, 5 ppm Co, 10 ppm Ni, 20 ppm Cr) Pipet 20 ml standar pokok Pb , 2 ml standar pokok Cd, 5 ml standar pokok Co, 20 ml standar pokok Cr dan 10 ml standar pokok Ni ke dalam labu ukur 1.000 ml, kemudian diencerkan dengan larutan standar 0 hingga 1.000 ml lalu dikocok. • Standar campuran: ( 30 ppm Mo, 20 ppm As, 10 ppm Se ) Pipet 30 ml standar pokok Mo, 20 ml standar pokok As dan 10 ml standar pokok Ni ke dalam labu ukur 1.000 ml, kemudian diencerkan dengan larutan standar 0 hingga 1000 ml lalu dikocok. • Deret standar campuran: Pipet masing–masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml larutan standar campuran ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml larutan standar 0, kocok. 110 • • • • Standar 5 ppm Ag: Pipet 2.5 ml standar pokok Ag ke dalam labu ukur 500 ml, kemudian diencerkan dengan air bebas ion hingga 500 ml. Deret standar Ag: Pipet masing–masing 0; 1; 2; 4; 6; 8; dan 10 ml standard 5 ppm Ag ke dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml standar 0, kocok Standar 50 ppm Sn Pipet 25 ml standar pokok Sn ke dalam labu ukur 500 ml, kemudian diencerkan dengan air bebas ion menjadi 500 ml. Deret standar Sn : Pipet masing–masing 0; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10 ml standar 50 ppm Sn kedalam tabung reaksi, kemudian tambahkan masing-masing 10; 9; 8; 6; 4; 2; dan 0 ml standar 0, kocok Cara kerja Timbang teliti 1,0000 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu digestion. Tambahkan 5 ml HNO3 dan 0,5 ml HClO4, kocok-kocok dan biarkan semalam. Panaskan pada block digestor mulai dengan suhu 100 0C, setelah uap kuning habis suhu dinaikkan hingga 200 0C. Destruksi diakhiri bila sudah keluar uap putih dan cairan dalam labu tersisa sekitar 0,5 ml. Dinginkan dan encerkan dengan H2O dan volume ditepatkan menjadi 50 ml, kocok hingga homogen, biarkan semalam atau disaring dengan kertas saring W-41 agar didapat ekstrak jernih (ekstrak A). Pengukuran unsur logam berat (Pb, Cd, Co, Cr, Ni, As, Sn, Ag, Se, Mo) Logam berat dari ekstrak A diatas diukur langsung dengan AAS dengan deret standar sebagai pembanding. Perhitungan Kadar unsur logam berat (ppm) = ppm kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1000 g g contoh-1 x fp x fk Keterangan: ppm kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva regresi hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikurangi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Horwitz, William (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004. 111 Kadar Logam berat Hg dan As dengan SSA Sistem Hidrida Dasar penetapan Metode generasi uap meningkatkan kepekaan teknik spetrometer serapan atom untuk Hg dan logam-logam yang membentuk hidrida (As. Bi, Sb, Se, Sn, dan Te). Metode NaBH4 mereaksikan unsur analit dalam larutan asam dengan natrium borohidrida membentuk gas hidrida. Uap hidrida dibawa oleh aliran gas inert (nitrogen atau argon) ke dalam tabung kuarsa yang dipanaskan sehingga terjadi dekomposisi. Sinar dari lampu katode yang diabsorpsi oleh atom analit ditetapkan seperti cara SSA yang biasa. Untuk raksa (Hg), reaksinya dengan NaBH4 dalam suasana asam langsung membentuk uap atom Hg, sehingga tidak perlu nyala (teknik uap dingin). Peralatan • Neraca analitik • Vortex mixer • Spektrometer serapan atom • Generator hidrida • Tabung reaksi 20 ml • Erlenmeyer 100 ml • Pipet 1-10 ml Pereaksi • HNO3 pekat (65 %) p.a. • HClO4 pekat (60 %) p.a. • Air bebas ion dua kali demineralisasi atau destilasi • Larutan natrium borohidrida, NaBH4 Larutkan 3,00 g NaBH4 dan 3,00 g NaOH dengan dalam labu ukur 500 ml dengan air bebas ion, encerkan dan impitkan hingga tanda garis kemudian saring ke dalam botol pereaksi borohidrida. Larutan ini harus selalu segar. • Larutan KMnO4 5% Larutkan 50,00 g KMnO4 dalam labu ukur 1 l dengan air bebas ion, encerkan dan impitkan hingga tanda garis. • Larutan kalium persulfat 5% Larutkan 50,00 g K2S2O8 dalam labu ukur 1 l dengan air bebas ion, encerkan dan impitkan hingga tanda garis. • Larutan natrium klorida hidroksilamin sulfat Larutkan 120,00 g NaCl dan 120 g (NH2OH)2.H2SO4 dalam labu ukur 1 liter dengan air bebas ion, encerkan dan impitkan hingga tanda garis. • Larutan natrium iodida atau kalium iodida 10% Larutkan 50,00 g NaI (KI) dalam labu ukur 500 ml dengan air bebas ion, encerkan dan impitkan hingga tanda garis. Biarkan paling sedikit 1 jam sebelum digunakan. Larutan harus selalu baru. • Standar 0 (larutan HClO4 10 %) Dipipet 10 ml HClO4 pekat (60 %) ke dalam labu ukur 100 ml yang telah berisi air bebas ion kira-kira setengahnya, goyangkan dan tambahkan lagi air bebas ion hingga tepat 100 ml . • Standar pokok 1.000 ppm Hg (titrisol) 112 • • • • • Standar pokok 1.000 ppm As (titrisol) Pindahkan secara kuantitatif larutan standar logam berat titrisol di dalam ampul ke dalam labu ukur 1.000 ml. Impitkan dengan bebas ion sampai dengan tanda garis, kocok. Standar 1 ppm Hg: Pipet 1 ml standard pokok Hg ke dalam labu ukur 1.000 ml, kemudian diimpitkan dengan standar 0 hingga tanda garis. Deret standar Hg: 0; 10; 20; 30; 40; dan 50 ppb Pipet masing-masing 0; 1; 2; 3; 4; dan 5 ml standar 1 ppm Hg ke dalam labu ukur 100 ml, kemudian diimpitkan dengan standar 0 hingga tanda garis. Larutan standar harus selalu segar. Standar 1 ppm As: Pipet 1 ml standard pokok As ke dalam labu ukur 1.000 ml, kemudian diimpitkan dengan standar 0 hingga tanda garis. Deret Standar As: 0; 10; 20; 30; 40; dan 50 ppb Pipet masing-masing 0; 1; 2; 3; 4; dan 5 ml standar 1 ppm As ke dalam labu ukur 100 ml, kemudian diimpitkan dengan standar 0 hingga tanda garis. Larutan standar harus selalu baru. Cara kerja Timbang teliti 1,0000 g contoh pupuk yang telah dihaluskan ke dalam labu digestion. Tambahkan 5 ml HNO3 dan 0,5 ml HClO4, kocok-kocok dan biarkan semalam. Panaskan pada block digestor mulai dengan suhu 100 0C, setelah uap kuning habis suhu dinaikkan hingga 200 0C. Destruksi diahiri bila sudah keluar uap putih dan cairan dalam labu tersisa sekitar 0,5 ml. Dinginkan dan encerkan dengan H2O dan volume ditepatkan menjadi 50 ml, kocok hingga homogen, biarkan semalam atau disaring dengan kertas saring W-41 agar didapat ekstrak jernih. Pengukuran unsur logam berat Hg secara uap dingin Pipet masing-masing 10 ml deret standar Hg, contoh dan blanko ke dalam erlenmeyer 100 ml. Tambahkan 15 ml KMnO4 5%, biarkan paling sedikit 15 menit. Tambahkan 8 ml K2S2O8 5% dan panaskan selama 2 jam dalam penangas air pada suhu 95 oC. Dinginkan pada suhu ruang dan tambah 6 ml larutan NaCl-hidroksilamin sulfat untuk menghilangkan kelebihan KMnO4. Ukur larutan deret standar, ekstrak contoh dan blanko menggunakan SSA sistem hidrida teknik uap dingin. Pengukuran unsur logam berat As Pipet masing-masing 10 ml deret standar As, contoh dan blanko ke dalam erlenmeyer 100 ml. Tambahkan 5 ml NaI 10%, aduk dan biarkan paling sedikit 30 menit. Ukur larutan deret standar, ekstrak contoh dan blanko menggunakan SSA sistem hidrida. Perhitungan Kadar logam berat (ppb) = ppb kurva x ml ekstrak 1.000 ml-1 x 1000 g contoh-1 x fp x fk 113 Keterangan: ppb kurva = kadar contoh yang didapat dari kurva regresi hubungan antara kadar deret standar dengan pembacaannya setelah dikurangi blanko. fp = faktor pengenceran (bila ada) fk = faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Clesceri, L. S., A.E. Greenberg and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. SNI 19-7030-2004. Penetapan KTK Dasar penetapan Kapasitas tukar kation (KTK) pupuk organik dapat ditetapkan dengan cara perkolasi. Contoh dijenuhkan dengan larutan amonium asetat 1 M pH 7,0, kemudian amonium yang terjerap digantikan oleh natrium dari larutan NaCl 10 %. Kadar amonium dalam perkolat ditetapkan dengan cara destilasi. Peralatan • Neraca analitik • Tabung perkolasi • Labu takar volume 100 ml • Labu takar volume 50 ml • Pasir kuarsa • Filter pulp • Pipet volume 10 ml • Piala gelas volume 50 ml • Erlenmeyer volume 100 ml • Unit destilator Pereaksi • Larutan NH4-asetat pH 7 Timbang 78,10 g CH3COONH4 pa. dalam 1 l air bebas ion • Larutan NaCl 10 % Timbang 100 g NaCl pa. dalam 1 l air bebas ion • Etanol 96% • Larutan H2SO4 0,05 N • Larutan NaOH 40 % Timbang 400 g NaOH dalam 1 l air bebas ion • Indikator Conway Timbang 0,15 g BCG + 0,10 g MM dalam 100 ml etanol 96% 114 Cara kerja Timbang teliti 2,5000g contoh pupuk ke dalam piala gelas volume 50 ml. Tambahkan 5 – 7,5 g pasir kuarsa, aduk-aduk sampai homogen. Siapkan tabung perkolasi dengan menutup dasar tabung menggunakan filter pulp, kemudian masukan sekitar 5 g pasir kuarsa. Selanjutnya, berturut-turut masukan campuran contoh pupuk dengan pasir kuarsa dan sekitar 5 g pasir kuarsa ke dalam tabung perkolasi yang telah disiapkan. Ratakan ketebalan setiap material yang digunakan dalam tabung perkolasi. Perkolasi dengan 2 x 25 ml larutan amonium asetat pH 7 (perkolat dibuang). Contoh dan pasir dalam tabung perkolasi dicuci dengan 100 ml etanol. Diperkolasi kembali dengan 50 ml larutan NaCl 10%, dan perkolat ditampung dalam labu takar volume 50 ml untuk penetapan KTK. Pipet 20 ml perkolat ke dalam labu didih destilator tambahkan 80 ml air bebas ion, sedikit parafin cair dan batu didih. Siapkan penampung destilat yaitu 10 ml asam borat 1% dalam erlenmeyer yang dibubuhi tiga tetes indikator Conway. Destilasikan dengan menambahkan 10 ml larutan NaOH 40%. Destilasi diakhiri bila volume destilat sudah mencapai 75 ml. Destilat dititrasi dengan larutan standar H2SO4 0,05 N hingga warna larutan tepat berubah dari hijau ke merah jambu. Penetapan blanko dikerjakan. Perhitungan KTK (cmol+/kg) = (Vc - Vb) x N/10 x ml perkolat ml perkolat dipipet-1 x 1.000 g g contoh-1 x fp x fk = (Vc - Vb) x N/10 x 50 ml 20 ml-1 x 1.000 g g contoh-1 x fp x fk = (Vc - Vb) x N/10 x 50/20 x 1.000/2,5 x fp x fk = (Vc - Vb) x N x 100 x fp x fk Keterangan: Vc = Vb = N = 10 = fp = fk = ml titran untuk contoh ml titran untuk blanko normalitas H2SO4 konversi mmol ke cmol faktor pengenceran (bila ada) faktor koreksi kadar air = 100/(100 – % kadar air) DAFTAR ACUAN Page, A.L., R.H. Miller, and D.R. Keeney (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2- Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. SNI 13-3494-1994. 115 DAFTAR ACUAN Black, C.A. 1965. Methods of Soil Analysis, Part 2, Agronomy 9. American Society of Agronomy, Madison,Wis. Blackmore, L.C., P.L. Searle and B.K. Daly. 1981. Methods for chemicals analysis of soils. N.Z. Soil Bureau Sci.Rep.10A. Soil Bureau, Lower Hutt. New Zealand. Bouyoucos, C.J. 1962. Hydrometer method improved for making particle size analysis of soils. Agronomy Journal 54 : 464 - 465. Bray, R.H. and L.T. Kurtz. 1945. Determination of total organik and available forms of phosphorus in soils. Soil Sci. 59 : 39 - 45. Burt, R. (Ed.). 2004. Soi Survey Laboratory Methods Manual, Soil Survey Investigations Report No.42, Vers.4,0. Natural Resources Conservation Service, United States Department of Agriculture. Clesceri, L. S., A.E. Greenberg, and A. D. Eaton (Eds.). 1998. Standard Methods for The Eximanation of Water & Wastewater. 20 th edition, APHA AWWA WEF, Maryland, USA. Council on Soil Testing and Plant Analysis. 1980. Hand Book of reference methode for soil testing (revised edition). Graham, E.R. 1948. Determination of soil organik mater by means of a photoelectric colorimeter. Soil Sci. 65: 181 - 183. Hajek, B.F.,F. Adams, and J.T. Cope. 1972. Rapid determination of exchangeable bases, acidity and cation exchange capacity. Soil Sci. Soc. Am. Proc. 36 : 436 - 438. Hesse, P.R. 1971. A Textbook of Soil Chemical Analysis. Chemical Publishing Co.,Inc. New York. Horwitz, William. (Ed.). 2000. Official Methods of Analysis of AOAC International. 17 th edition, Volume I, Agricultural Chemicals, Contaminants, Drugs. AOAC International, Maryland USA. Jackson, M.L. 1958. Soil Chemical Analysis. Prentice-Hall, Inc., Englewood Cliffs,N.J. Jones Jr., J.B. 1984. Laboratory guide of exercises in conducting soil tests and plant analysis. Benton Laboratories, INC, Athens. Georgia. Lembaga Penelitian Tanah. 1978. Penuntun Analisa Tanaman. Publikasi L.P.T. No. 9/71. Lisle, L., J. Gaudron, and R. Lefroy. 1990. Laboratory Techniques for Plant and Soil Analysis. UNE-ACIAR- Crawford Fund. Department of Agronomy and Soil Science, University of New England, Armidale, Australia.and Australian Centre for International Agricultural Research. Menon, R. G. 1973. Soil and Water Analysis, A laboratory manual for the analysis of soil and water. FAO/UNDP Project. Olsen, S.R., C.V.Cole, F.S. Watanabe, and L.A. Dean. 1954. Estimation of available P in soils by extraction with sodium bicarbonate.USDA cir.No 939. 116 Page, A.L., R.H. Miller, and D.R. Keeney (Eds.). 1982. Methods of Soil Analysis, Part 2- Chemical and microbiological properties, 2nd Edition. American Society of Agronomy, Madison, Wisconsin. Rayment, G.E. and F.R. Higginson. 1992. Australian laboratory handbook of soil and water chemicals methods. Australian soil and land survey handbook. Inkata Press, Melbourne, Sydney. Sudjadi, M., I.M. Widjik S., dan M. Soleh. 1971. Penuntun Analisa Tanah. Publikasi No.10/71, Lembaga Penelitian Tanah, Bogor. Sudjadi M, dan I.M. Widjik S. 1972. Metoda Analisa Air Irigasi, Publikasi No. 8/72, Lembaga Penelitian Tanah Bogor van Reeuwijk, L.P. 1993. Procedures for Soil Analysis. 4th ed. Technical Paper, International Soil Reference and Information Centre. Wageningen, The Netherlands. Walsh, L.M. and J.D. Beaton. 1973. Soil Testing and Plant Analysis edition. Soil Sci.Soc.Am., Madison,Wisconsin. Watanabe, F.S. and R. Olsen. 1965. Test of an ascorbic acid methods for determination of phosphorus in water and NaHCO3 extracts from soil. Soil Sci.Am.Proc.29: 677 678. 117 Lampiran 1. Kondisi alat untuk pengukuran unsur-unsur Flammenfotometer Measurement K dan Na Flame type Atomizer Fuel flow Oxidant : Air+Elpiji, : Standar, : 200 mm, : 0,5 Kp/cm2 AAS Perkin Elmer Measurement Wavelength (nm) Flame type Fuel flow Oxidant Ca : 422,7 nm : Air+Acetylene : 10 : 30 Mg 285,2 nm Air+Acetylene 10 30 AAS Hitachi Measurement Wavelength (nm) Flame type Fuel flow Oxidant Fe : 248,3 nm : Air+Acetylene : 2,0 l min-1 : 160 kPa Al 309,3 nm N2O+Acetylene 6,0 l min-1 160 kPa Measurement Wavelength (nm) Flame type Fuel flow Oxidant Cu : 324,8 nm : Air+Acetylene : 2,2 l min-1 : 160 kPa Zn 213,9 nm Air+Acetylene 1,7 l min-1 160 kPa AAS Hitachi Z-5000 Measurement Wavelength (nm) Flame type Fuel flow Oxidant Pb : 283,3 nm : Air+Acetylene : 2,2 l min-1 : 160 kPa Cd 228,8 nm Air+Acetylene 2,0 l min-1 160 kPa Co 240,7 nm Air+Acetylene 2,2 l min-1 160 kPa Measurement Wavelength (nm) Flame type Fuel flow Oxidant Cr : 359,3 nm : Air+Acetylene : 2,4 l min-1 : 160 kPa Ni 232,0 nm Air+Acetylene 2,2 l min-1 160 kPa Mo 313,3 nm N2O+Acetylene 6,6 l min-1 160 kPa Measurement Wavelength (nm) Flame type Fuel flow Oxidant Ag : 328,1 nm : Air+Acetylene : 2,2 l min-1 : 160 kPa As 193,7 nm Air+H2(Acetylene) 5,0 l min-1 160 kPa Se 196,0 nm Air+H2(Acetylene) 5,0 l min-1 160 kPa Measurement Wavelength (nm) Fleme type Fuel flow Oxidant Sn : 224,6 nm : Air+H2 (Acetylene) : 5,0 l min-1 : 160 kPa Mn 279,6 nm Air+Acetylene 1,7 l min-1 160 kPa 118 Lampiran 2. Pedoman penyajian laporan hasil analisis No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 1. 2. 3. 4. 5. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Parameter Tanah Kadar air pH Daya hantar listrik Kebutuhan kapur Kemasaman dapat tukar Tekstur P2O5 (HCl 25%) K2O (HCl 25%) P2O5 (Olsen) P2O5 (Bray) Retensi P Basa-basa tukar (K, Na, Ca, Mg) Kapasitas tukar kation Kejenuhan basa DTPA (Fe, Mn, Cu, Zn) C-organik N-total Morgan wolf (makro+mikro) Total makro Total mikro Total logam berat Tanaman Kadar air Total N Total makro Total mikro Total logam berat Air Kadar lumpur Daya hantar listrik pH Unsur makro (K, Na, Ca, Mg) Unsur mikro (Fe, Mn, Cu, Zn) Amonium Fosfat Karbonat & bikarbonat Klorida Sulfat Nitrat Boron Pupuk anorganik Kadar air Nitrogen total N-NH4 N-NO3 N-organik P dan K-total P dan K larut asam nitrat P dan K larut air Total Fe, Al, Ca, Mg Besar butir Asam bebas Belerang Satuan Desimal % dS m-1 kw ha-1 cmol(+) kg-1 % mg 100g-1 mg 100g-1 ppm ppm % cmol(+) kg-1 cmol(+) kg-1 % ppm % % ppm % ppm ppm 2 1 3 2 2 0 0 0 0 1 1 2 2 0 1 2 2 1 2 0 2 % % % ppm ppm 2 2 2 0 2 mg l-1 dS m-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 m.e l-1 0 3 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 % % % % % % % % % ppm-1 % % % 2 2 2 2 2 2 2 2 2/0 2 2 2 119 No. 13. 14. 15. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. Parameter Silikat Setara CaCO3 Klorida Pupuk organik Kadar bahan ikutan Kadar air pH Abu N-total C-organik Total makro Total mikro Total logam berat Total Hg dan As KTK Satuan Desimal % % % 2 2 2 % % % % % % ppm ppm ppm m.e 100 g-1 2 2 1 2 2 2 2 1 1 1 2 120 Lampiran 3. Kriteria penilaian hasil analisis tanah Nilai Parameter tanah * Sangat rendah Rendah Sedang Tinggi Sangat tinggi <1 <0,1 <5 <15 <4 <5 <10 <5 1-2 0,1-0,2 5-10 15-20 5-7 5-10 10-20 5-16 2-3 0,21-0,5 11-15 21-40 8-10 11-15 21-40 17-24 3-5 0,51-0,75 16-25 41-60 11-15 16-20 41-60 25-40 >5 >0,75 >25 >60 >15 >20 >60 >40 <2 <0,3 <0,1 <0,1 <20 <5 <5 <1 <2 2-5 0,4-1 0,1-0,3 0,1-0,3 20-40 5-10 5-10 1-2 2-3 6-10 1,1-2,0 0,4-0,5 0,4-0,7 41-60 1-20 11-20 2-3 5-10 11-20 2,1-8,0 0,6-1,0 0,8-1,0 61-80 20-40 20-40 3-4 10-15 >20 >8 >1 >1 >80 >40 >40 >4 >15 C (%) N (%) C/N P2O5 HCl 25% (mg 100g-1) P2O5 Bray (ppm P) P2O5 Olsen (ppm P) K2O HCl 25% (mg 100g-1) KTK/CEC (me 100 g tanah-1) Susunan kation Ca (me 100 g tanah-1) Mg (me 100 g tanah-1) K (me 100 g tanah-1) Na (me 100 g tanah-1) Kejenuhan Basa (%) Kejenuhan Alumunium (%) Cadangan mineral (%) Salinitas/DHL (dS m-1) Persentase natrium dapat tukar/ESP (%) pH H2O Sangat masam Masam Agak masam Netral Agak alkalis Alkalis <4,5 4,5-5,5 5,5-6,5 6,6-7,5 7,6-8,5 >8,5 Unsur mikro DTPA* Zn (ppm) Fe (ppm) Mn (ppm) Cu (ppm) Unsur makro dan mikro morgan* Ca (ppm) Mg (ppm) K (ppm) Mn (ppm) Al (ppm Fe (ppm) P (ppm) NH4 (ppm) NO3 (ppm) SO4 (ppm) Cl (ppm) Defisiensi Marginal Cukup 0,5 2,5 1,0 0,2 0,5-1,0 2,5-4,5 - 1,0 4,5 1,0 0,2 Sangat rendah Rendah Nilai Sedang Tinggi Sangat tinggi 71 2 8 1 1 1 1 2 1 20 30 107 4 12 1 3 3 2 2 2 40 50 143 6 21 3 8 5 3 3 4 100 100 286 23 36 9 21 19 9 8 10 250 325 572 60 58 23 40 53 13 21 20 400 600 * Penilaian ini hanya didasarkan pada sifat umum secara empiris 121 Lampiran 4. Segitiga tekstur Gambarnya mana? 122 Lampiran 5. Definisi dan syarat-syarat mutu pupuk 1. Pupuk fosfat alam untuk pertanian Definisi Bahan baku galian yang sebagian besar mengandung mineral kalsium fosfat berasal dari batuan yang diproses menjadi bubuk (powder) yang dipergunakan secara langsung dalam pertanian dan dalam aplikasinya bisa dimodifikasi dalam bentuk bubuk, butiran, dan granular Syarat mutu Pupuk fosfat alam untuk pertanian SNI 02-3776-2005 No Uraian Persyaratan Satuan Mutu A 1 2. 3. Kadar unsur hara fosfor sebagai P20 5 - Total - Larut dalam asam sitrat 2% Kadar air Kehalusan - Kehalusan lolos 80 mesh Tyler - Kehalusan lolos 25 mesh Tyler Cemaran logam - Cadmium (Cd) - Timbal ( Pb) - Raksa (Hg) - Arsen (As) Mutu B Mutu C Mutu D % blb % blb min. 28 min. 7 min. 24 min. 6 min. 14 min. 3,5 min. 10 min. 2,5 % blb maks. 5 maks. 5 maks. 5 maks. 5 % blb min. 50 min. 50 min. 50 min. 50 % blb min. 80 min. 80 min. 80 min. 80 ppm ppm ppm ppm maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. maks. 100 500 10 100 100 500 10 100 100 500 10 100 100 500 10 100 Catatan: 1. Semua persyaratan kecuali kadar air dan kehalusan dihitung atas dasar bahan kering (adbk). 2. Dalam peredaran dapat diperjual belikan berbentuk granular. 2. Pupuk SP-36 Definisi Pupuk fosfat buatan berbentuk butiran (granular) yang dibuat dari batuan fosfat dengan campuran asam fosfat dengan asam sulfat yang komponen utamanya mengandung unsur hara fosfor berupa mono kalsium fosfat, Ca (H2P04 ) Syarat mutu pupuk SP-36 SNI 02-3769-2005 No. 1 2 Jenis uji Kadar unsur hara fosfor sebagai P205 P205 total P2O5 larut dalam asam sitrat 2 % P2O5, larut dalam air Kadar belerang (sebagai S) Satuan % % % % Persyaratan Minimal 36 Minimal 34 Minimal 30 Minimal 5 123 No. 3 4 Jenis uji Kadar asam bebas (sebagai H2P04) Kadar air Satuan % % Persyaratan Maksimal 6 Maksimal 5 Catatan: semua persyaratan kecuali kadar air dihitung atas dasar bahan kering(adbk). 3. Pupuk diamonium fosfat Definisi Pupuk majemuk buatan, berbentuk butiran, sebagai sumber hara nitrogen dan fosfat dengan rumus kimia (NH4)2 HPO4 Syarat mutu pupuk diamonium fosfat SNI 02-2858-2005 No. Jenis uji Satuan Persyaratan Minimal 18 Kadar nitrogen % Minimal 46 Kadar fosfor (dihitung sebagai P2O5) % Maksimal 2 % Kadar air Minimal 80 % Butiran lolos ayakan 5 US Mesh, tidak I lolos ayakan 10 US Mesh Cemaran logam 5 Maksimal 100 ppm - Kadmium (Cd) Maksimal 500 ppm - - Timbal (Pb) Maksimal 10 ppm - Raksa Hg Maksimal 100 ppm 6 Cemaran arsen (As) Catatan: semua persyaratan kecuali kadar air dan butiran dihitung atas dasar bahan kering (adbk) 1 2 3 4 4. Pupuk urea amonium fosfat Definisi Pupuk majemuk buatan berbentuk butiran sebagai sumber hara nitrogen dan fosfor Syarat mutu pupuk urea amonium fosfat SNI 02-2811-2005 No. Jenis uji Satuan Persyaratan Minimal 25 Kadar nitrogen % Minimal 66 Kadar fosfor (dihitung sebagai P2O5) % Maksimal 1 % Kadar air Minimal 90 % Butiran lolos ayakan 5 US Mesh, tidak I lolos ayakan 10 US Mesh Catatan: Semua persyaratan kecuali kadar air dan butiran dihitung atas dasar bahan kering (adbk). 1 2 3 4 124 5. Pupuk mono amonium fosfat Definisi Pupuk majemuk buatan berbentuk butiran, sebagai sumber hara nitrogen dan fosfor dengan rumus kimia (NH4HzPO4) Syarat mutu pupuk mono amonium fosfat SNI 02-2810-2005 No. Jenis uji Satuan Persyaratan 1 2 3 4 Kadar nitrogen % Minimal 11 Kadar fosfor (dihitung sebagai P2O5) % Minimal 48 Kadar air % Maksimal 1 Butiran lolos ayakan 5 US Mesh, % Minimal 80 tidak I lolos ayakan 10 US Mesh Catatan: semua persyaratan kecuali air dan butiran dihitung atas dasar bahan kering 6. Pupuk kalium sulfat Definisi Pupuk buatan berbentuk butiran atau serbuk dengan rumus kimia KzSO4, digunakan sebagai sumber hara kalium dan belerang yang juga disebut sebagai pupuk ZK (Zwavelzuur kalium) Syarat mutu pupuk kalium sulfat SNI 02-2809-2005 No. Jenis uji Satuan 1 2 3 4 5 Kalium sebagai kalium oksida (K20) Kadar belerang (S) Asam bebas sebagai H2SO4 Klorida (CI) Kadar air (Hz0) % % % % % Persyaratan Minimal 50 Minimal 17 Maksimal 2,5 Maksimal 2,5 Maksimal 1 7. Pupuk kalium klorida Definisi Pupuk tunggal yang mengandung unsur hara kalium, berbentuk serbuk, butiran atau gelintiran dengan rumus kimia KCI, yang juga disebut sebagai pupuk MOP (muriate of potash) Syarat mutu pupuk kalium klorida SNI 02-2805-2005 No. Jenis uji Satuan Persyaratan 1 Kalium sebagai kalium oksida K20 % Minimal 60 2 % Maksimal 1 Kadar air (Hz0) Catatan: persyaratan K20 dihitung atas dasar bahan kering (adbk) 125 8. Pupuk tripel super fosfat plus-Zn Definisi Pupuk buatan berbentuk butiran (granular) yang komponen utamanya mengandung unsur hara fosfor berupa mono kalsium fosfat dengan rumus kimia Ca(H2POa)2 dibuat dari batuan fosfat dan asam fosfat, ditambah unsur hara mikro seng Syarat mutu pupuk tripel super fosfat plus-Zn SNI 02-2800-2005 No. Jenis uji Satuan Persyaratan Kadar unsur hara fosfor sebagai Min. 45 - Total % - Larut dalam asam sitrat 2% Min. 43 % - Larut air Minimal 35 % Kadar asam bebas sebagai H3P04 Maksimal 5 % 2 Maksimal 5 % 3 Kadar air (Hz0) Minimal 0,2 % 4 Kadar seng sebagai Zn0 Catatan: semua persyaratan kecuali kadar air dihitung atas dasar bahan kering. 1 9. Pupuk amonium klorida Definisi Pupuk buatan berbentuk kristal dengan rumus kimia NH4CI, yang mengandung unsur hara nitrogen Syarat mutu pupuk amonium klorida SNI 02-2581-2005 No. Jenis uji Satuan Persyaratan Minimal 26 % Kadar nitrogen 1 Maksimal 1 % Kadar air 2 Maksimal 0,08 % Asam bebas (sebagai HCI) 3 Catatan: semua persyaratan kecuali kadar air, dihitung atas dasar bahan kering (adbk). 10. Pupuk amonium sulfat Definisi Pupuk buatan berbentuk kristal dengan rumus kimia (NH 4)2SO4 yang mengandung unsur hara nitrogen dan belerang, yang juga disebut sebagai pupuk ZA (Zwavelzuur ammoniak) Syarat mutu pupuk amonium sulfat SNI 02-1760-2005 No. 1 2 Jenis uji Kadar nitrogen Kadar belerang Satuan % % Persyaratan Minimal 20,8 Minimal 23,8 126 No. Jenis uji Satuan Persyaratan 3 Asam bebas (sebagai H2SO4) % Maksimal 0,1 4 Kadar air % Maksimal 1,0 Catatan: Semua persyaratan kecuali kadar air, dihitung atas dasar bahan kering. 11. Pupuk tripel super fosfat Definisi Pupuk buatan berbentuk butiran (granular) yang dibuat dari reaksi batuan fosfat dengan asam fosfat sehungga dihasilkan senyawa dengan komponen utama mono kalsium fosfat, Ca(H2PO4)2 Syarat mutu pupuk tripel super fosfat SNI 02-0086-2005 No. Jenis uji Kadar unsur hara fosfor sebagai - Total - Larut dalam asam sitrat 2% - Larut air Kadar asam bebas sebagai H3P04 2 3 Kadar air (Hz0) 4 Cemaran logam - Kadmium (Cd) - - Timbal (Pb) - Raksa Hg 5 Cemaran arsen (As) Catatan: Semua persyaratan kecuali kadar air (adbk). Satuan Persyaratan 1 % % % % % ppm ppm ppm ppm dihitung Minimal 45 Minimal 40 Minimal 36 Maksimal 6 Maksimal 5 Maksimal 100 Maksimal 500 Maksimal 10 Maksimal 100 atas dasar bahan kering 12. Pupuk anorganik hara makro campuran cair Definisi Pupuk yang mengandung unsur-unsur mikro seperti tembaga, kobal, seng, mangan, molibden dan boron sesuai fungsinya kandungan unsur ham primer seperti N, P, K tidak diutamakan, pupuk anorganik hara mikro campuran diproduksi dalam bentuk cair untuk menjamin homogenitasnya. Syarat mutu pupuk anorganik campuran SNI 02-6680-2002 No. Jenis uji Satuan Persyaratan 1 2 3 4 5 6 Tembaga (Cu) Kobal (Co) Mangan (Mn) Seng (Zn) Molibden (Mo) Boron ( B ) % % % % % % 0,10 - 0,13 0,010 - 0,012 0,90-1,10 0,16 - 0,20 0,07 - 0,09 0,04 - 0,06 127 No. 7 8 9 10 11 Jenis uji Biuret Merkuri (Hg) Arsen (As) Kadmium (Cd) Timbal (Pb) Satuan Persyaratan % ppm ppm ppm ppm Maksimal 1 Maksimal 0,2 Maksimal 5 Maksimal 1 Maksimal 5 13. Pupuk anorganik hara makro campuran Definisi Pupuk anorganik yang mengandung hara utama N, P, dan K yang dilengkapi unsur-unsur mikro seperti tembaga, kobal, seng, mangan, molibden, dan boron. Catatan: sesuai bahan baku yang digunakan pupuk anorganik hara makro campuran terdiri atas pupuk berbentuk padat dan cair. Syarat mutu pupuk anorganik hara makro campuran cair SNI 02-6681-2002 No. Jenis uji Jumlah kadar (Nitrogen total + P205 total+ K20) Nitrogen total P 2 0 5 total K20 Tembaga (Cu) Kobal (Co) Mangan (Mn) Seng (Zn) Molibden (Mo) Boron ( B ) Biuret Merkuri (Hg) Arsen (As) Kadmium (Cd) Timbal (Pb) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Satuan % % % % ppm ppm ppm ppm ppm ppm % ppm ppm ppm ppm Persyaratan Minimal 11 Minimal 2 Minimal 2 Minimal 2 2-3 0,25 - 0,35 18 – 22 3–5 1–2 18 – 22 Maksimal 1 Maksimal 0,2 Maksimal 5 Maksimal 1 Maksimal 5 Tabel 2. Persyaratan mutu pupuk anorganik hara makro campuran padatan No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Jenis uji Jumiah Kadar (Nitrogen total + P205 total+ Kz0) Nitrogen total P 2 0 5 total K20 Tembaga (Cu) Kobal (Co) Mangan (Mn) Seng (Zn) Molibden (Mo) Satuan Persyaratan % % % % ppm ppm ppm ppm ppm Minimum 30 Minimum 6 Minimum 6 Minimum 6 6-8 0,9 - 0,11 50 – 60 10 – 12 3–5 128 No. 10 11 12 13 14 15 Jenis uji Boron ( B ) Biuret Merkuri (Hg) Arsen (As) Kadmium (Cd) Timbal (Pb) Satuan Persyaratan ppm % ppm ppm ppm ppm 50 – 60 Maksimal 1 % Maksimal 0,2 Maksimal 5 Maksimal 1 Maksimal 5 14. Pupuk kalium nitrat Definisi Pupuk kalium nitrat adalah pupuk majemuk buatan berbentuk serbuk, butiran, serpihan dengan komponen utama KNO3 digunakan sebagai sumher hara nitrogen dan kalium. Syarat mutu pupuk kalium nitrat SNI 02-2808-1992 No. 1 2 3 4 Jenis uji Kadar nitrogen Kalium sebagai K2O Klorida sebagai Cl Kadar air Satuan Persyaratan % % % % Minimal 13,0 Minimal 44,0 Minimal 0,5 Maksimal 1,0 15. Pupuk kalsium nitrat Definisi Pupuk kalsium nitrat atau kalksalpeter/kapur sendawa adalah pupuk buatan yang mengandung unsur hara nitrogen dan kalsium berbentuk serpihan, butirari atau glintiran dengan rumus kimia Ca (N03)2.2H2O. Syarat mutu pupuk kalsium nitrat SNI 02-2806-1992 No. 1 2 3 4 Jenis uji Kadar nitrogen Kadar kalsium sebagai CaO Klorida sebagai Cl Kadar air Satuan Persyaratan % % % % Minimal 15 Minimal 26 Minimal 0,2 Maksimal 0,7 16. Pupuk urea tablet Definisi Pupuk urea tablet adalah pupuk buatan yang merupakan pupuk tunggal, mengandung unsur hara utama nitrogen, berbentuk tablet dengan rumus kimia CO (NH2)2. 129 Syarat mutu pupuk urea tablet SNI 02-4378-1996 No. 1 2 3 4 5 6 Jenis uji Kadar nitrogen Kadar air Kadar biuret Kekuatan penghancuran Ukuran - diameter - berat Toleransi pecah Satuan Persyaratan % % % kg Minimal 46 Maksimal 0,5 Maksimal 1 Minimal 2,4 mm g % 12,7 + 0,2 1 + 0,09 Maksimal 10 17. Pupuk urea Definisi Pupuk buatan yang merupakan pupuk tunggal, mengandung unsur hara utama nitrogen, berbentuk butiran ( p r i l n atau gelintiran (granulir) dengan rumus kimia CO(NH2)2 Syarat mutu pupuk urea S N I 0 2 - 2 8 0 1 - 1 9 9 8 No. Jenis uji Satuan 1 2 Bentuk butiran - Kadar nitrogen - Kadar air - Kadar biuret Bentuk gelintiran - Kadar nitrogen - Kadar air - Kadar biuret Persyaratan % % % Minimal 46 Maksimal 0,5 Maksimal 1 % % % Minimal 46 Maksimal 0,5 Maksimal 2 18. Pupuk-pupuk superfosfat tunggal dan rangkap Definisi Pupuk buatan berbentuk padat yang dibuat dengan bahan dasar bantuan fosfat alam sehingga dihasilkan senyawa CaH4(P04)z Syarat mutu pupuk superfosfat tunggal dan rangkap SNI 02-2857-1992 No. 1 2 3 Karakteristik Pz05 tersedia Asam bebas (dihitung sebagai H3P04) Air Superfosfat + tunggal Superfosfat + rangkap Minimal 18% Maksimal 4% 36% 4% Maksimal 4% 4% 130 19. Pupuk NPK padat Definisi Pupuk buatan berbentuk padat yang mengandung unsur hara nitrogen, fosfor dan kalium Syarat mutu pupuk NPK padat SNI 02-2803-2000 No. Jenis uji Satuan Nitrogen total Fosfor larut asam sitrat 2 % sebagai P205 Kalium sebagai Kz0 Jumlah kadar N, P205 dan K20 Kadar air 1 2 3 4 5 Persyaratan % % Minimal 6 Minimal 6 % % % Minimal 6 Minimal 30 Maksimal 2 20. Pupuk mono amonium fosfat (MAP) Definisi Pupuk mono ammonium fosfatkan (MAP) adalah pupuk majemuk buatan dengan rumus kimia NH4 H2 PO4, merupakan sumber hara nitrogen dan fosfat. Syarat mutu pupuk mono amonium fosfat SNI 02-2810-1992 /SII. 1685-85 No. Jenis uji Satuan Persyaratan Kadar air bebas Kadar nitrogen Kadar fosfat (P2O5) Besar butir Lolos ayakan mesh No. 6 tidak lolos ayakan mesh No. 16 1 2 3 4 % % % Maksimal 1,0 Minimal 11,0 Minimal 48,0 % Minimal 80% 21. Dolomit Definisi Pupuk dolomit adalah bahan mineral yang berasal dari alam yang mengandung unsur hara kalsium dan magnesium dengan rumus kimia Ca Mg (CO3)2. Mineral ini selain digunakan langsung untuk pengapuran juga digunakan untuk bahan pembuatan pupuk pabrik seperti PMLT (pupuk majemuk lengkap tablet) dan NPK +. Syarat mutu pupuk dolomit SNI 02 – 2804 – 1992 No. Jenis Uji Satuan 1 2 Kadar air Kadar Mg sbg MgO % % Persyaratan Maksimal 5 Minimal 18 131 No. 3 4 5 6 Jenis Uji Kadar Ca sbg CaO Kadar Al2O3 + Fe2O3 (R2O3) Kadar silikat sbg SiO2 Besar butir: Lolos ayakan mesh No. 40 Lolos ayakan mesh No. 60 Satuan Persyaratan % % % Minimal 30 Maksimal 3 Maksimal 3 % % 100 50 22. Kaptan/kapur pertanian Definisi Kapur pertanian merupakan mineral beasal dari alam yang merupakan sumber hara kalsium selain itu kaptan yang mempunyai reaksi fisiologis basa dapat menaikan pH tanah, kaptan yang umum banyak digunakan dalam pertanian adalah kalsit (CaCO3) Syarat mutu kapur pertanian SNI 13 – 4704 – 1995 No. Jenis uji Satuan 1 2 3 4 5 6 Penetapan ukuran butir Lolos melalui saringan 40 mesh Lolos melalui saringan 100 mesh Kadar air Kadar Ca dan Mg CaCO3 + MgCO3 CaO + MgO Kadar Fe2O3 dan Al2O3 (R2O3) Setara CaCO3 Kadar SiO2 Persyaratan % % % 100 50 Maksimal 5 % % % % % Minimal 85 Minimal 47 Maksimal 3 Minimal 8 0-3 23. Pupuk kiserit Definisi Pupuk kiserit merupakan meneral alam yang mengandung unsur hara magnesium dan sulfur, berbentuk padatan,warna putih keabu-abuan dengan rumus kimia MgSO4. H2O Syarat mutu kiserit. SNI. 02 – 2807 – 1992 No. Jenis uji Satuan Persyaratan Kadar air bebas Kadar magnesium sbg MgO Kadar sulfur sbg S % % % Maksimal 0,5 Minimal 25,5 Minimal 21,0 1 2 3 132 24. Urea ammonium fosfat (UAP) Definisi Urea amonium fosfat (UAP) adalah pupuk majemuk buatan dengan komponen utama urea amonium fosfat, berbentuk butiran/gelintiran, digunakan sebagai sumber hara nitrogen dan fosfat Syarat mutu pupuk urea amonium fosfat SNI 02 – 2811 – 1992 No. Jenis uji Satuan Persyaratan 1 2 3 4 Kadar air Kadar nitrogen Kadar fosfat sbg P2O5 Besar butir: Lolos ayakan Tyler 4 mesh Tidak lolos ayakan Tyler 16 mesh % % % Maksimal 1 Minimal 20 Minimal 20 % % 100 Minimal 90 25. Pupuk Guano Definisi Pupuk guano adalah pupuk yang berasal dari kotoran unggas ( kelelawar, walet, dan sebagainya), berbentuk serbuk kasar, butiran dengan atau tanpa penambahan unsur hara. Syarat mutu pupuk guano SNI 02 – 2871 – 1992 No. Jenis uji Satuan 1 2 3 4 5 6 Kadar air Total N Fosfat sebagai P2O5 Kalium sebagai K2O Khlorida sebagai Cl Berbau khas % % % % % Persyaratan Maksimal 10 Minimal 3,5 Minimal 10 Minimal Maksimal 0,5 133 26. Kompos dari sampah organik domestik Definisi Kompos dari sampah organik domestik merupakan bentuk akhir dari bahan-bahan organik sampah domestik setelah mengalami perubahan komposisi bahan organik sampah domestik akibat penguraian oleh mikroorganisme pada suhu tertentu menjadi senyawa organik yang lebih sederhana (dekomposisi). Syarat mutu kompos dari sampah organik domestik SNI 19-7030-2004 No. Jenis uji Satuan Persyaratan 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Kadar air Suhu Warna Bau Ukuran partikel Kemampuan ikat air pH Bahan asing Bahan organik Nitrogen Karbon C/N rasio Fosfor (P2O5) Kalium (K2O) Arsen Kadmium Kobal Kromium Tembaga Merkuri Nikel Timbal Selenium Seng Kalsium Magnesium Besi Aluminium Mangan Bakteri fecal coli Salmonella sp. % C 0 mm % % % % % % % mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 mg kg-1 % % % % % MPN g-1 MPN 4 g-1 50 Suhu air tanah Kehitaman Berbau tanah 0,55 – 25 58 6,80 – 7,49 1,5* 27– 58 0,40 9,80 – 32 0,10 10 – 20 0,20* 13* 3* 34* 210* 100* 0,8* 62* 150* 2* 500* 25,50* 0,60* 2,00* 2,20* 0,10* 1.000 3 * Nilainya lebih besar dari minimum atau lebih kecil dari maksimum. 134 Persyaratan teknis minimal pupuk an-organik padat dan cair SK Mentan No: 09/Kpts/TP.260/1/2003 Definisi Persyaratan teknis minimal pupuk an-organik adalah standar mutu pupuk yang ditetapkan oleh Menteri Pertanian terhadap pupuk yang belum ada SNI nya. Kandungan hara dalam pupuk an-organik terdiri atas unsur hara utama nitrogen, fosfat, kalium. Hara sekunder sulfur, kalsium, magnesium dan atau unsur hara mikro seperti tembaga, seng, mangan, molibden, boron, dan kobal. Persyaratan teknis minimal pupuk an-organik pupuk hara makro Pupuk hara makro padat Pupuk hara makro cair Jenis hara Tunggal Majemuk Tunggal Majemuk Nitrogen (total) Fosfor (P2O5) Kalium (K2O) Seng (Zn) Boron (B) Tembaga (Cu) Mangan (Mn) Molibden (Mo) Kobal (Co) Biuret Sesuai SNI Sesuai SNI Sesuai SNI - Total N, P2O5 dan K2O Minimal 30% Maksimal 0,50% Maksimal 0,25% Maksimal 0,50% Maksimal 0,50% Maksimal 0,001% Maksimal 0,002% Maksimal 1% Minimal 20% Minimal 8% Minimal 15% Maksimal 1% Total N, P2O5 dan K2O Minimal 10% Maksimal 0,25% Maksimal 0,125% Maksimal 0,25% Maksimal 0,25% Maksimal 0,001% Maksimal 0,0005% Maksimal 1% Persyaratan teknis minimal pupuk an-organik pupuk hara mikro Pupuk hara mikro padat Pupuk hara mikro cair Jenis hara Tunggal Majemuk Tunggal Majemuk Nitrogen (total) Fosfor (P2O5) Kalium (K2O) Maksimal 0,25% Maksimal 0,50% Sesuai SNI Seng (Zn) Maksimal 0,125% Maksimal 0,25% Sesuai SNI Boron (B) Maksimal 0,25% Maksimal 0,50% Sesuai SNI Tembaga (Cu) Maksimal 0,25% Maksimal 0,50% Sesuai SNI Mangan (Mn) Maksimal 0,001% Maksimal 0,001% Sesuai SNI Molibden (Mo) Maksimal 0,0005% Maksimal 0,002% Kobal (Co) Biuret Maksimal 100 ppm Maksimal 100 ppm Arsen (As) Maksimal 10 ppm Maksimal 10 ppm Merkuri (Hg) Maksimal 100 ppm Maksimal 100 ppm Kadmium (Cd) Maksimal 500 ppm Maksimal 500 ppm Timbal (Pb) Keterangan: • Jumlah unsur makro dan unsur mikro dalam pupuk majemuk masing-masing minimal dua unsur • Untuk pupuk fosfat alam yang dilarutkan dalam asam kuat (partially acidulated rock phosfat = PARP) kadar P2O5 larut asam sitrat harus > 10% • Unsur mikro dalam pupuk hara makro dianggap sebagai unsur ikutan • Untuk pupuk hara campuran, kadar unsur makro syarat mutunya mengikuti syarat mutu pupuk hara makro dan kadar unsur mikro mengikuti syarat mutu pupuk hara mikro 135 Konsep persyaratan teknis minimal pupuk organik dan pembenah tanah Persyaratan teknis minimal pupuk organik No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Parameter C-organik (%) C/N ratio Bahan ikutan (%) (kerikil, beling, plastik) Kadar air (%) Kadar logam berat As (ppm) Hg (ppm) Pb (ppm) Cd (ppm) pH Kadar total (N+P2O5+K2O) (%) Mikroba patogen (E. Coli, Salmonella) Kadar unsur mikro (ppm) (Zn, Cu, Mn, Co, Fe) Kandungan Padat Cair Minimal 15 12-25 <2 >6 - Minimal 20 Maksimal 35 - <10 <1 <50 <10 >4 - <8 Dicantumkan Dicantumkan <10 <1 <50 <10 >4 - <8 Dicantumkan Dicantumkan Dicantumkan Dicantumkan Persyaratan teknis minimal pembenah tanah No Parameter 1. Bahan aktif* (%) (sintetis) 2. 3. 4. KTK** pH Kadar air (%) Tanah) Bahan ikutan (%) Kadar logam berat (ppm) As Hg Pb Cd Mikroba patogen (cell ml-1) (E. coli, Salmonella) 5. 6. 7. Kandungan 0,02 – 5 (terhadap berat kering tanah >80 4-8 <35 <2 < 10 <1 < 50 < 10 Dicantumkan * Khusus untuk bahan yang direkayasa kimia ** KTK khusus zeolit >80 136