engenharia_genetica

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critérios Fosfatase Remover fosfato da 5'

origem de replicação, gene de resistência,


promotor, sitio multiplo de clonagem
Ligase Liga os fragmentos de DNA
1. escolha do vetro
Polimerase Replicação do DNA pela fita molde

2. isolamento e digestão do DNA Usando Quinase Transferência fosfato do ATP para 5'
Mecanismo passos Exonuclease
clonagem genica 3. ligação dos fragmentos com o vetor Enzimas modificadores de DNA Nuclease Removem nucleotideos das extremidades

apenas
4. transformação bacteriana Degradam ligações dentro da cadeia Sítios palindrômicos
Endonuclease
5. seleção dos clones recombinantes Mais específico
Tratamento com
A própria célula do paciente Modificada geneticamente

Domínios do receptor
Terapia celular Car T cell SCFV, Hinge, Transmembrana e Intracelular
engenharia genetica são podem
Célula tronco Pluripotentes induzidas Ir para qualquer linhagem
Bioprinting
cel somática + cMyc +Sox2 + Oct4 + Kif4
Impressão Fatores de transcrição
de órgão
são
Pequenas culturas de tecidos
Organóides
tridimensionais

são usam
Talen Ativadores de transcrição FOK 1 + linker + 2× TAL
Utilizações
Usar Corte em sendo
Editores de genoma Crisper crRNA + tracrRNA + nuclease Cas9 Pam= N*GG Possível alterar a sequência específica

Uso de
ZFN Dedos de zinco + linker + nucleares FOK 1

Separação das proteínas formadas

GST + proteína de interesse +IPTG no líquido


Purificar
Usar Para
Expressão de proteínas recombinantes Cromatografia Eluir proteína de interesse

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