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Dióxido de cloro (CLO 2) como

agente antimicrobiano não tóxico
para vírus, bactérias e leveduras
(Cândida Albicans)
Robert O Young

Universal Medical Imaging Group, EUA

Correspondência: Robert O Young, pH Miracle Inc., 16390 Dia del Sol, Valley
Center, Califórnia, 92082, EUA, Tel 760 751 8321

Recebido: 26 de dezembro de 2016 | Publicado: 8 de outubro de 2016

Citação: Young RO (2016) Dióxido de cloro (CLO 2 ) como agente antimicrobiano

não tóxico para vírus, bactérias e leveduras (Candida Albicans). Int J Vaccines Vaccin
2 (6): 00052. DOI: 10.15406 / ijvv.2016.02.00052

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Resumo
O uso de uma família de agentes
químicos, liberando espécies ativas de
oxigênio, eficazes contra
microorganismos infecciosos e vírus, é
descrito com ênfase no Dióxido de
Cloro (CLO 2), um dos óxidos de
cloro. Também são discutidos o
ozônio, o hipoclorito, o periodato e os
mecanismos de ação conhecidos pelos
quais certos glóbulos brancos ligam e
 2

erradicam microrganismos
infecciosos e bactérias primitivas,
também conhecidas como vírus.
É apresentada uma explicação dos
mecanismos bioquímicos do ácido de
CLO 2 como um agente antimicrobiano.
É dada atenção especial a Cândida
albicans, citomegalovírus, vírus da
poliomielite, Herpes I e II, HTLV-III e
Pseudomonas que respondem à
aplicação clínica da CLO2. Está
implícito que esses mecanismos
bioquímicos são tão fundamentais que
o desenvolvimento de cepas
resistentes de bactérias e / ou
leveduras não ocorreria com outros
agentes anti-infecciosos. São
discutidas listas limitadas de
anormalidades na saúde que
respondem à CLO2.
Palavras-chave:
Dióxido de cloro; Ozônio; Clorito; Clorato; Cloreto;
 3

Introdução
CLO 2 é um composto inorgânico
composto de oxigênio; cloreto;
potássio e ouro. Os compostos de
oxigênio e cloreto são formados a
partir de dois elementos
eletronegativos. Essa propriedade
química da CLO 2 possibilita a
liberação de oxigênio nascente após a
decomposição durante sua ação como
um agente antimicrobiano. Certos
aspectos do sistema imunológico
celular (especificamente glóbulos
brancos) utilizam outros mecanismos
na geração de derivados de oxigênio
altamente reativos (radicais livres)
com o objetivo de combater a invasão
de organismos estranhos. Sem esses
mecanismos de proteção fornecidos
pelo sistema imunológico envolvendo
derivados de oxigênio; a capacidade
 4

de combater a infecção é bastante

prejudicada.
O sistema imunológico de muitas
pessoas; particularmente os idosos; é
deficiente na capacidade de fornecer
esses derivados de oxigênio altamente
reativos (radicais livres) que são tão
necessários para atacar a grande
variedade de vírus; e os invasores
bacterianos tornam-se alvos fáceis
para as muitas doenças que produzem
com os sintomas que as acompanham
e às vezes bizarros.
O uso de CLO 2 auxilia os mecanismos
naturais de proteção do corpo na
neutralização desses agentes
infecciosos que; se não for
adequadamente neutralizado;
certamente levará a doenças. A seguir,
serão descritos os mecanismos
bioquímicos pelos quais a CLO 2 auxilia
o sistema imunológico na destruição
 5

de organismos patogênicos,
disponibilizando uma forma ativa de
oxigênio [1].
Aplicações clínicas de agentes
antimicrobianos
Propriedades físicas e estrutura
química
CLO2 na forma pura (anidra) é um
líquido a 0° C. Tendo uma cor
vermelha profunda. Quando
misturado com água e em alta diluição,
é incolor [2].
Os modelos atômicos de Bohr indicam
uma ligação "covalente em
coordenada" entre os elementos do
CLO2. Esse tipo de ligação representa o
compartilhamento de um par de
elétrons entre dois átomos, como na
ligação "covalente"; mas nessa ligação
ambos os elétrons são contribuídos
 6

por um dos átomos (cloro) e nenhum

pelo outro. Na ligação covalente, um
elétron é contribuído por cada um dos
átomos que formam a ligação (Figura
1).

Figura 1: mostra o compartilhamento

de elétrons formando uma ligação
covalente.
Quando a CLO2 reage como um agente
antimicrobiano, o átomo de oxigênio
primeiro se liga a um único átomo (o
que está sendo oxidado) e depois é
dissociado do cloro. Um elétron é
 7

então liberado para o cloro formando

o íon cloreto. Quando se percebe que
existem 5,3 g. de íon cloreto por litro
de plasma humano, torna-se óbvio que
a pequena quantidade de cloreto
gerado pelo uso de CLO 2 é desprezível.
Definição química de CLO 2
CLO 2 é um sal de sódio inorgânico
(sem carbono), contendo apenas
elementos eletronegativos ligados por
eletrostática; ligações covalentes e
covalentes coordenadas (Figura 2). A
estrutura química do CLO 2 é
dependente do pH; isso é; a
estabilidade ou instabilidade desta
substância é determinada em grande
medida pela concentração de íons
hidrogênio (H + ou prótons) no meio
circundante.
 8

Figura 2: A estrutura atômica do CLO2.

Sob condições ácidas; o clorito de

sódio torna-se instável e decompõe-se
em uma variedade de produtos,
incluindo, entre outros, íons
cloreto; íons hiperclorosos e oxigênio
nascente (atômico). É por esse motivo
que o CLO 2 quando engarrafado e
armazenado por longos períodos de
tempo; é armazenado em buffer. Sob
condições ácidas; A CLO 2 resulta em
uma molécula neutra que consiste em
três átomos eletronegativos mantidos
juntos por ligações covalentes e
covalentes coordenadas.
 9

Deste cluster; um único átomo de

oxigênio nascente altamente reativo é
liberado nos microrganismos
alvo. Como você verá abaixo; oxigênio
nascente é o agente ativo da CLO 2 e; a
menos que seja liberado; o
antiviral; atividade antibacteriana e
antifúngica não ocorrerá.
Inativação de vírus
Um vírus normalmente consiste em
uma camada externa ou revestimento
de proteína que encapsula um ácido
nucleico que pode ser DNA ou RNA
(por exemplo, retrovírus). A espinha
dorsal esquelética de ácidos nucleicos
inclui derivados de ácido fosfórico
(H 3 PO 4 ; um ácido muito forte), no
qual dois dos três grupos hidroxila
originais (-OH) são substituídos;
deixando apenas um grupo hidroxila
ativo por fosfato.
 10

Segmento de cadeia de DNA

estendida mostrando ligação
alternada de desoxirribose-fosfato
Alguns vírus podem ter glicoproteínas
incorporadas ao revestimento de
proteínas; isso é; proteínas às quais
foram adicionados polissacarídeos
(cadeias de açúcar). Os
polissacarídeos ligados podem se ligar
a locais específicos no revestimento
protéico; efetivamente convertendo
uma superfície de proteína em uma
superfície de policarbonato [3]. Essa
nova superfície possui especificidade
para certos polissacarídeos
encontrados nas superfícies de tipos
específicos de células; transmitindo
assim especificidade à ligação do vírus,
bem como um grau de proteção
imunológica.
Uma vez vinculado ao tipo de célula
apropriado; o componente de ácido
 11

nucleico do vírus é injetado na célula e

de várias maneiras; assume o processo
de síntese de proteínas da
célula. Certos segmentos do ácido
nucleico viral consistem em genes
responsáveis pela replicação do
revestimento. O componente de ácido
nucleico se replica por um processo
conhecido como "emparelhamento de
bases"; em que cada base da fita
original atrai e liga a base
correspondente; formar um par (AT e
CG; descrito mais detalhadamente
abaixo) através da ligação de
hidrogênio. O resultado é a replicação
do vírus completo até que a célula
exploda; liberando muitas partículas
virais adicionais no meio circundante.
Na presença destes ácidos nucleicos
ácidos; o CLO 2 molécula torna-se
instável e libera oxigênio nascente no
meio.
 12

Ácidos nucleicos; RNA e DNA; tem

muitas características em comum; de
fato; eles são quase quimicamente
idênticos. Cada um consiste em uma
cadeia de açúcar alternado (uma
modificação da ribose; desoxirribose)
e grupos fosfato; conhecido como
"esqueleto de açúcar fosfato". Anexado
a um carbono específico de cada grupo
desoxirribose está um composto de
anel orgânico conhecido como
"base". Completamente; existem
apenas quatro tipos de bases
encontradas no DNA; nomeadamente;
guanina (G); citosina (C); adenina (A)
e timina (T). É a sequência dessas
quatro unidades ao longo da cadeia
que faz com que um segmento do DNA
seja diferente do outro. O RNA difere
quimicamente do DNA, pois a base
timina é substituída pela base uracil
(U); representando uma diferença
 13

bioquímica muito sutil. Há também

uma diferença sutil no desoxirribose
de açúcar.
A liberação de oxigênio nascente do
dióxido de cloro CLO2 em um
ambiente ácido
A base guanina; encontrado em RNA e
DNA; é muito sensível à oxidação;
formando 8-oxoguanina como
produto de oxidação [4]. A liberação
de CLO 2 resulta na oxidação do
resíduo de guanina com a formação de
8-oxoguanina; impedindo assim a
replicação do ácido nucleico viral por
emparelhamento de bases. Embora a
replicação do revestimento protéico
possa continuar; a formação de um
vírus funcional completo foi
bloqueada pela oxidação da CLO2.
 14

Bactérias aeróbias e anaeróbias

Quando a vida começou na terra, mas
antes da presença de oxigênio na
atmosfera da terra; as bactérias
consistiam no que hoje é conhecido
como anaeróbio. Essas bactérias
sobrevivem apenas na ausência de
oxigênio e incluem muitos organismos
patogênicos. Com o aparecimento de
algas; dióxido de carbono; presente
em grande proporção na atmosfera
primordial; foi convertido por algas
em carboidratos; gerando oxigênio
como subproduto. No início; o
oxigênio reagiu com sais de ferro nos
oceanos primitivos para gerar
extensos depósitos de óxido de ferro
(minério de ferro). Quando o ferro
solúvel nos oceanos se esgotou; a
concentração de oxigênio na
atmosfera começou a aumentar.
Atualmente; o oxigênio compreende
 15

aproximadamente 20% da atmosfera

da Terra, enquanto os níveis de
dióxido de carbono caíram para cerca
de 2%.
Algumas bactérias foram capazes de
sobreviver ao aumento dos níveis de
oxigênio na atmosfera por qualquer
um dos três caminhos. A presença de
oxigênio na atmosfera resultante de
algas e outras plantas que contêm o
pigmento verde clorofila; permitiu o
desenvolvimento de uma ampla gama
de formas de vida, tanto no oceano
como em terras conhecidas hoje como
animais. Algumas bactérias
anaeróbicas passaram a residir em
ambientes livres de oxigênio nos
corpos dos animais; notavelmente; os
intestinos. Outros anaeróbios
resolveram o problema da toxicidade
do oxigênio, desenvolvendo formas
metabólicas para lidar com sua
 16

presença universal. Estes incluem o

desenvolvimento da enzima
superóxido dismutase (SOD); qual em
sua forma mais primitiva; ferro
contido [5]. Refinamentos posteriores
incluíram a incorporação de manganês
(nas mitocôndrias) e finalmente; uma
combinação de cobre e zinco.
Acredita-se amplamente que ainda
existe outra solução para a toxicidade
do oxigênio no desenvolvimento de
organismos que têm a capacidade de
utilizar o oxigênio em seu
metabolismo. Esses organismos são
hoje conhecidos como aeróbios ou
bactérias aeróbicas. Uma forma desses
organismos pode ter sido o precursor
de um organismo de inclusão
encontrado em muitas células animais
e humanas conhecidas como
mitocôndrias; tendo seu próprio DNA
circular.
 17

É sabido que as culturas de muitas

bactérias se tornam ácidas;
tipicamente gerando lático; ácidos
acéticos e outros ácidos carboxílicos
simples (orgânicos). O meio ácido que
envolve muitas bactérias desencadeia
a decomposição da CLO 2 e a
subsequente liberação de oxigênio
nascente. O oxigênio nascente é um
agente oxidante particularmente
potente para organismos anaeróbicos,
porque é essencialmente um radical
livre que não o procura; mas dois
elétrons. Organismos anaeróbicos não
desenvolveram defesas adequadas
contra o ataque de oxigênio; oxigênio
particularmente incipiente; e
rapidamente sucumbir à sua ação letal.
Um possível mecanismo para a
liberação de oxigênio nascente do íon
clorito (CLO 2-) em um ambiente ácido
envolve a associação ou ligação de H +
 18

(próton; normalmente ligado ao

oxigênio da água como H3O +) a
qualquer um dos três pares de
elétrons não utilizados na camada
externa de cloro. Essa associação é
equivalente à formação da ligação
covalente hidrogênio-cloro (H- Cl). Por
causa da deficiência de elétron único
do átomo de cloro; somente uma
ligação covalente é permitida por
vez. Como a ligação H- Cl é mais forte
(a ligação H- O da água é quase a
ligação mais forte conhecida) do que a
ligação covalente O-Cl existente; a
ligação O-Cl é interrompida pela
ejeção de oxigênio nascente. Isso leva
à dissociação do próton ácido do cloro
e à formação do íon hipocloroso (ClO-)
e hipoclorito de sódio (NaOCl) e à
liberação de oxigênio nascente do
dióxido de cloro em um ambiente
ácido.
 19

A decomposição do clorito de sódio

em oxigênio nascente e hipoclorito
de sódio em ambiente ácido
Na + + CLO 2 - H + -------> Na + +
CLO 2 -------> Na + + ClO- + [O]
Oxigênio Nascido Íon Sódio +
Dióxido de Cloro + Sódio
Hipocloroso de Sódio + Hipoclorito
de Sódio Iônico - ----------> Oxigênio
Nascente

(Figura 3) A fórmula para a

decomposição do clorito de sódio em
oxigênio nascente e hipoclorito de
sódio em ambiente ácido]. Durante a
Primeira Guerra Mundial; essa
instabilidade do íon clorito foi
explorada por Alexis Carrel (1873-
1944; Prêmio Nobel 1912); mais
conhecido por sua cultura prolongada
de células cardíacas de frango na
Universidade Rockefeller; Nova
 20

York. Carrel administrou com sucesso

uma solução bruta por via tópica para
vítimas de guerra com fragmentos de
casca incorporados [6]. Os organismos
anaeróbicos responsáveis pela
gangrena gasosa nessas feridas foram
rapidamente extintos; salvando
muitos soldados que de outra forma
teriam perecido [7].

Figura 3: Uma micrografia eletrônica

mostrando o vírus da pólio intacto
antes da exposição ao ozônio (O 3 ).
 21

Ausência de ativação da CLO 2

Há apenas um pequeno número de
substâncias biológicas básicas
encontradas nos organismos vivos.
Estes incluem proteínas; lipídios;
carboidratos e ácidos nucléicos. A
capacidade dos ácidos nucléicos (na
forma de vírus) de ativar o dióxido de
cloro e o oxigênio nascente já foi
discutida anteriormente. Lipídios e
carboidratos são substâncias neutras;
carregando nem uma carga elétrica
nem grupos ácidos. A possibilidade de
proteínas ativando CLO 2 é discutida
abaixo.
Muitas proteínas; particularmente
aqueles que são solúveis e
encontrados livres no sangue e nos
tecidos circundantes médios; conter
em suas superfícies grupos
orgânicos; de natureza ácida e básica
(alcalina). Na maioria das proteínas
 22

solúveis (globulares), predomina um

ou outro desses dois tipos de
grupos. As proteínas nas quais os
grupos ácidos superam os grupos
básicos são proteínas ácidas e aquelas
nas quais os grupos básicos
predominam são conhecidas como
proteínas básicas.
Uma técnica foi desenvolvida para
determinar; para uma dada proteína;
em que categoria pode estar. As
proteínas ácidas ou básicas migram
sob a influência de um campo elétrico
aplicado. Esta técnica de laboratório;
conhecido como eletroforese; foi
usado para determinar a acidez ou
basicidade das proteínas. À medida
que o pH do meio circundante no qual
uma proteína foi solubilizada é
alterado; a proteína migrará em uma
direção ou outra. Quando um pH é
encontrado, isso resulta em nenhuma
 23

migração; Diz-se que a proteína está

no seu ponto isoelétrico. O valor de pH
no qual isso ocorre para uma dada
proteína é conhecido como o ponto
isoelétrico dessa proteína. Os pontos
isoelétricos da maioria das proteínas
não estão longe de 7 ou de
neutralidade. Tais proteínas não são
capazes de ativar a CLO2
decompor; parcialmente responsável
por baixa toxicidade.
CLO2 como agente antifúngico
Os fungos são considerados plantas
sem clorofila e carecem da capacidade
de gerar carboidratos da luz solar e do
dióxido de carbono. Eles
provavelmente foram derivados em
uma atmosfera livre de oxigênio, mas
alguns desenvolveram a capacidade de
tolerar baixos níveis de oxigênio. A
maioria dos fungos prefere um
ambiente pobre em oxigênio e vive
 24

melhor sob essas condições. Eles

obtêm suas necessidades de energia a
partir da decomposição (através da
atividade enzimática) da matéria
orgânica existente e; nesta Luz; pode
ser considerado parasitário.
Por causa de sua baixa tolerância ao
oxigênio nascente e ao meio ácido em
que eles prosperam (pela liberação de
ácidos orgânicos); os fungos na forma
micelial são sensíveis à ação destrutiva
da CLO2. Um exemplo de um fungo
patogênico humano é Cândida
albicans; dedos e unhas dos pés
invasores. Um segundo exemplo é o
fungo responsável pelo "pé de
atleta"; prosperar entre os dedos em
um ambiente úmido, enquanto outro
exemplo é “micose”; propagando-se
nas células mortas encontradas na
pele (além de gerar muitas
 25

micotoxinas que afetam a

homeostase).
De todas as considerações acima; é
evidente que a CLO 2 é essencialmente
ativada apenas por vírus; bactérias e
fungos ácidos. Outros agentes
oxidantes citotóxicos usados
clinicamente O CL02 não é o único
agente antimicrobiano em uso
clínico. Outro agente que também
fornece oxigênio ativo é o peróxido de
hidrogênio; que tem sido utilizado no
tratamento da artrite; câncer e outras
doenças metabólicas. O peróxido de
hidrogênio está disponível
comercialmente em baixas
concentrações para o tratamento de
infecções microbianas tópicas.
Verificou-se ser mais eficaz como
esporicida do que como bactericida; o
peróxido de hidrogênio é
bacteriostático em concentrações
 26

maiores que 0,15 milimolar [8]. Ácido

peracético; CHC (0) OOH; é
simplesmente ácido acético; CHC (0)
OH; com um átomo de oxigênio
adicional inserido entre o carbono e o
grupo OH. Essa ligação é
instável; decomposição em ácido
acético e um átomo de oxigênio está
sendo disponibilizado como
bactericida; fungicida ou virucida. O
ácido peracético exibe atividade
rápida contra esporos e leveduras [8].
Um agente antimicrobiano com
semelhança química com a CLO 2 é o
hipoclorito de sódio (NaOCI), no qual
apenas um átomo de oxigênio é ligado
ao halogênio em vez de dois. Soluções
contendo 125 ppm foram eficazes em
30 minutos na descontaminação de
objetos contaminados em massa por
bactérias e fungos gram-positivos e
gram-negativos. A água potável
 27

altamente contaminada por uma

suspensão polimicrobiana tornou-se
estéril em 30 minutos por uma solução
contendo 10 ppm de hipoclorito de
sódio [9].
Ainda outro agente oxidante com
aplicação aumentada é o ozônio. O
ozônio é um gás instável e não está
disponível comercialmente, mas deve
ser gerado conforme necessário. Foi
demonstrado que o ozônio inibe
seletivamente o crescimento de
células cancerígenas humanas
[10]. Sob condições especificadas, o
crescimento de células cancerígenas
foi inibido em mais de 90%, enquanto
as células controle foram inibidas em
menos de 50% [11].
Estes resultados indicam que células
cancerígenas; por causa de seu
metabolismo de oxigênio alterado; são
menos capazes de lidar com o estresse
 28

oxidativo apresentado pelo ozônio do

que as células normais. Também se
demonstrou que o ozônio inativa o
vírus da poliomielite, com um efeito
perceptível após apenas 0,5 segundos
de contato e é muito forte após 2,5
segundos. Esses resultados são
paralelos aos causados pela CLO 2 em
relação ao vírus da poliomielite (veja
abaixo, atividade antiviral da CLO2). O
ozônio está sendo usado na Europa e
nos EUA para tratar várias doenças,
incluindo uma condição cancerosa;
distúrbios da coagulação sanguínea e
doenças hepáticas; entre outros [12-
14] (Figura 4).
 29

Figura 4: mostra uma micrografia de

contraste de fase do vírus da
poliomielite após exposição ao ozônio
(O3) [11].
Citotoxicidade da CLO 2
Prova de que CLO 2 é citotóxico para
bactérias; o fungo e o vírus são
mostrados clinicamente por dados que
indicam sua eficácia como
desinfetante (fora do corpo).
Verificou-se que a CLO 2 inativa o
organismo que causa a doença do
legionário (Legionella pneumophila)
[15]. O composto quimicamente
relacionado por iodato de sódio
(NaIO4) inibiu a virulência; diminuiu a
respiração e aumentou a sensibilidade
à fagocitose do patógeno comum
Listeria monocytogenes [16].
Uma solução germicida foi
desenvolvida contendo CLO 2 em um
 30

ácido PH (ácido lático). A solução deu

a morte completa de Staphylococcus
aureus; Esporos de Pseudomonas e
Candida albicans em 10 minutos. Se
usado em um dispositivo de limpeza
por ultrassom, a morte completa
ocorreu em menos de cinco minutos
[17]. O vírus bacteriano £ 2 foi
rapidamente inativado com CLO2 a pH
5,9, apenas o GMP (guanosina
monofosfato) reagiu enquanto os
aminoácidos cistina; triptofano e
tirosina reagiram rapidamente [18].
A CLO 2 aplicada ao vírus da
poliomielite separou o RNA do
revestimento protéico (capsídeo). A
CLO 2 reagiu com a proteína do
capsídeo e impediu a adsorção;
penetração e não revestimento normal
do vírus. Ele também reagiu com o
RNA viral e prejudicou a capacidade do
 31

ácido nucleico de atuar como um

modelo para replicação [19].
Destino da CLO 2 após ingestão
A meia-vida para a eliminação de
CLO 2 de animais experimentais
(ratos) foi de 43,9 horas. Quando ratos
que ingeriram 100 mg de CLO 2 por
litro durante 15 dias receberam 3 ml
de 300 mg / litro por via oral, a meia-
vida foi de 31 horas.
A distribuição de CL O2 nos tecidos
após a administração do material
marcado com CL O2 é a seguinte
Plasma; 2,74;
Rim; 2,45;
Pulmão; 2,25;
Estômago; 2,15;
Fígado; 1,16;
Baço; 0,76;
Timo; 0,68
 32

[20]. Os metabólitos do CLO2 são clorito

(CLO2); clorato (CIO3); cloreto (CL) e
oxigênio (O2) [21,22] (Figura 5).

Figura 5: É uma micrografia

eletrônica de varredura de Candida
albicans mostrando as cicatrizes dos
brotos.
Toxicidade de CLO 2
Foi demonstrado por estudos de
toxicidade no homem que a ingestão
diária de 500 ml de CLO 2 com uma
concentração de 5 ppm é tolerada com
segurança [23]. Em outros estudos
 33

com ratos, o LD do NaCLO 2 foi

estabelecido em 140mg / kg [2]. Em
estudos onde CLO2; Na CLO2 ou CIO3 foi
incluído na água potável por vários
meses, onde nenhum aumento
significativo nas concentrações de
metemoglobina resultou em doses tão
altas quanto 1000 mg / litro (1000
ppm) no rato; rato ou galinha [20].
CL02 na cicatrização de feridas
Foi demonstrado clinicamente que a
CLO 2 é altamente eficaz na aceleração
da cicatrização de feridas com
aplicações específicas para
queimaduras. A princípio, pode não
haver explicação aparente para esse
relacionamento, mas uma análise
bioquímica cuidadosa revelou um
mecanismo de ação relacionando a
CLO 2 à cicatrização de feridas. Os
ácidos nucléicos (RNA e DNA) são
formados por apenas quatro unidades
 34

básicas ligadas em uma cadeia. Uma

das unidades básicas é designada;
monofosfato de guanosina; ou GMP. Se
o grupo fosfato for aproximado de um
dos grupos hidroxila do componente
açucarado ribose; a água é eliminada e
o produto é conhecido como GMP
cíclico (cGMP).
Foi demonstrado que o cGMP estimula
a divisão celular e é ativado durante o
processo de regeneração. Sabe-se
também que a enzima que sintetiza
cGMP; guanilato ciclase; é estimulado
por um dos derivados de oxigênio
altamente reativos; radical
hidroxila; simbolizado por OH-. Um
agente oxidante quimicamente
semelhante ao CLO 2 é o ácido
periódico; HIO4; em que quatro
átomos de oxigênio estão ligados a um
único átomo de halogênio; iodo. No
CLO2; dois átomos de oxigênio estão
 35

ligados ao cloro halogênio. Foi

determinado que o radical hidroxil
está presente em soluções de ácido
periódico [24] e; por
inferência; também pode estar
presente em soluções de CLO 2 . A
presença de radicais hidroxila na
CLO 2ativa a enzima guanilato ciclase;
qual; por sua vez; sintetiza cGMP
levando à proliferação celular e
cicatrização de feridas [1].
O significado de cândida albicans na
terapia com CLO2
Cândida albicans é um residente
normal do sistema digestivo humano;
e trato vaginal e; ao contrário de
muitas outras leveduras; é encontrado
em duas formas (dimórficas). O
fermento de padeiro ou de cervejeiro é
um exemplo familiar de fermento que
ocorre em apenas uma forma; o de
células únicas em forma de ovóide que
 36

se reproduzem pelo processo de

"brotamento". Um mais velho; as
células grandes se contraem perto de
uma extremidade e, eventualmente, se
fecham formando uma célula filha que
se liberta e continua o ciclo
reprodutivo.
Diz-se que Cândida albicans é
"dimórfica" porque a célula unicóide
ovóide pode; sob certas condições;
continue alongando-se em um cilindro
quase perfeito (micélio);
ocasionalmente estabelecendo uma
parede ou divisória que separa células
individuais. Esse processo também é
acompanhado pela ramificação na
qual um novo tubo pode começar a
crescer lateralmente a partir de um
ponto específico. Ao alterar as
condições da cultura, a forma de
Cândida albicans pode ser alterada de
uma forma para outra e vice-
 37

versa. Esse fenômeno é conhecido

como pleomorfismo (Figura 6).

Figura 6: Cândida albicans em forma

de Y ou redonda pode se transformar
biologicamente em Cândida albicans
em forma de M ou micelial.
Acredita-se que apenas a forma
micelial é patogênica no homem; quem
será discutido em mais detalhes
abaixo. A incidência de candidose
superficial e invasiva aumentou
acentuadamente nas últimas décadas;
provavelmente resultante do uso
generalizado de tratamento
imunossupressor; antibióticos; etc. O
organismo pode razoavelmente ser
 38

descrito como o patógeno fúngico mais

comum e mais grave do homem [25].
Cândida albicans tem uma distribuição
mundial e é comumente encontrada
em indivíduos normais. A incidência
deste fungo em vários grupos
submetidos a tratamento médico é
geralmente mais alta. Atualmente,
a vaginite por Cândida é a segunda
forma mais comum de infecção vaginal
nos Estados Unidos. Das mulheres que
desenvolvem candidose vaginal; uma
proporção significativa sofre
recorrências frequentes ou apresenta
sintomas intratáveis crônicos. Cândida
albicans pode infectar praticamente
todos os tecidos do corpo humano.
Claramente, há um requisito para
medicamentos antifúngicos novos e
mais eficazes [26].
Para Cândida albicans colonizar e
infectar superfícies mucosas com
 39

sucesso, ela deve aderir às superfícies

epiteliais. Nos animais livres de
germes, a mucosa é colonizada em
números mais altos do que nos
animais controle (normal). Esses
resultados sugerem que a flora
bacteriana indígena suprime a
colonização por Cândida albicans.
Este; por sua vez; implica que pelo
menos um fator que contribui para a
infecção por Cândida albicans pode ser
o equilíbrio entre os vários
componentes da flora intestinal [26].
Lise de cândida por CLO2
A lise de Cândida (e outras leveduras
infecciosas) pela CLO 2 pode ser
explicada por um mecanismo simples
relacionado à capacidade oxidante
dessa substância. Segue uma descrição
e justificativa para o mecanismo
relacionado à quitina; um dos
constituintes da parede celular
 40

fúngica. A quitina é uma substância

polimérica (formada pela ligação de
uma subunidade básica) que forma a
maior parte das partes duras dos
insetos (concha; pernas; cabeça;
etc.). É uma substância insolúvel em
água formada pela ligação entre o
derivado da glicose; N-
acetilglucosamina (NAG) (contém
nitrogênio, enquanto a glicose não). A
quitina é sintetizada bioquimicamente
pela enzima quitina sintetase; e
fornece rigidez à parede celular dos
fungos [27].
As células de levedura se reproduzem
assexuadamente brotando na qual
uma célula filha é formada por uma
constrição próxima a uma
extremidade de uma célula madura. A
construção continua até as paredes
quase se encontrarem seguidas por
um espessamento da parede neste
 41

momento. O espaço restante é

preenchido com um plug de quitina
(ki-tin). Quando a célula filha se
liberta, o que de outra forma seria um
buraco aberto na célula, torna-se uma
cicatriz de quitina que obstrui o
buraco e evita a ruptura celular por
lise [28], veja a Figura 3.
Assim; qualquer agente que iniba a
síntese de quitina deve; à luz dessas
considerações; agir como um agente
lítico para leveduras.
Em um esforço para responder à
pergunta sobre se o sistema
imunológico celular (glóbulos
brancos) tem uma ação antifúngica
contra Coccidioides immitis; os
leucócitos polimorfonucleares (células
PMN) foram incubados com o fungo
em condições de cultura. Os resultados
do contato de PMNs com o fungo
 42

indicaram que a incorporação de NAG

na quitina foi inibida de 54 a 85% [28].
Os PMNs de pacientes com doença
granulomatosa crônica (CGD) são
aparentemente equivalentes em todos
os aspectos às células semelhantes de
indivíduos normais, mas carecem da
capacidade de gerar espécies ativas de
oxigênio (membros da família de
espécies tóxicas de oxigênio reativo ou
ROTS) usadas por essas células para
combater infecções (incluindo
superóxido; peróxido de hidrogênio;
radical hidroxila e oxigênio
singlete). Uma medida da produção de
espécies reativas de oxigênio tóxico ou
ROTS por essas células é a
quimioluminescência (geração
química de luz) resultante da presença
de partículas estranhas. Os testes
feitos com PMNs isolados de pacientes
com CGD são notavelmente baixos em
 43

resposta quimioluminescente à
estimulação.
Quando PMN de um paciente com CGD
foram incubados com Coccidioides; a
incorporação de NAG na quitina foi
inibida de apenas 0 a 22 por cento sob
várias condições, em comparação com
54 a 85 por cento com PMNs normais
[28]. Esses resultados indicam que os
agentes responsáveis pela inibição
foram as espécies tóxicas de oxigênio
altamente reativas (ROTS)
mencionadas acima. Espécies
oxidativas semelhantes surgem da
decomposição de certos agentes
oxidantes (incluindo CLO2) quando em
contato com as substâncias alvo
(proteínas bacterianas; olissacarídeos;
vírus; etc.). Foi demonstrado que o
ácido periódico (HIO4); uma
substância na qual quatro átomos de
oxigênio estão ligados ao iodo
 44

(correspondendo ao cloro na CLO2); é

capaz de formar uma família
ROTS; radical hidroxila [24].
Outro derivado de oxigênio
reativo; superóxido; pode resultar da
quebra da CLO 2 (durante uma reação
oxidativa) na qual os dois átomos de
oxigênio liberados adquirem um
elétron. Sabe-se que é produzido por
Candida albicans como subproduto
metabólico [29]. Portanto; três
membros da família ROTS de
derivados de oxigênio;
nomeadamente; radical hidroxila;
superóxido e oxigênio singlete; são
produzidos por ambos os PMNs
durante a explosão oxidativa (resposta
a partículas estranhas) e pela
CLO 2 durante um processo oxidativo.
Essas considerações indicam que
as células CLO2 e PMN são capazes de
inibir a biossíntese de quitina em
 45

Candida, resultando em lise a partir da

ausência do tampão de quitina na
cicatriz do broto.
Atividade antiviral de CLO 2
Vírus; em geral; consiste em duas
partes; um núcleo interno de ácido
nucleico que consiste em qualquer
um; DNA ou RNA; e um revestimento
protéico externo. O revestimento
protéico serve não apenas para
proteger o ácido nucleico vital, mas
também é fundamental para fornecer
especificidade na ligação à superfície
de determinadas células (o vírus da
poliomielite se liga às células
nervosas; o vírus da influenza se liga à
mucosa nasal; etc.). Também foi
demonstrado que sem certos
polissacarídeos específicos ligados ao
revestimento proteico
(glicoproteínas); a ligação à superfície
celular não ocorrerá [30].
 46

Este aspecto será discutido em mais

detalhes abaixo em relação à ação
da CLO 2 em vírus.
Algum vírus; incluindo o vírus da AIDS
HTLV-I3I; herpes e citomegalovírus;
são cercados por uma membrana
lipídica de duas camadas, que é um
fragmento da membrana plasmática
da célula na qual o vírus se replicou. À
medida que o vírus se rompe e mata a
célula, ele leva um fragmento da
membrana plasmática dessa célula e
fica encapsulado. Essa membrana é
crítica para a infectividade e, sem ela, o
vírus não pode inserir o tipo de célula
apropriado para replicação. Os
agentes antivirais que danificam ou
deterioram a membrana lipídica
bicamada encapsulante também
inibem ou impedem a infectividade.
Voltaremos a esse aspecto da
 47

atividade antiviral da CLO 2 em uma

seção subsequente.
Atividade bioquímica de CL02
A ação da CLO 2 como agente citotóxico
pode incluir até quatro mecanismos
bioquímicos separados descritos
abaixo.
Oxidação de proteínas
Como acima mencionado; o
revestimento protéico é altamente
significativo em infectividade viral e
fornece especificidade para a ligação
ao tipo celular adequado. Dois
aminoácidos que sofreriam oxidação e
modificação em grau suficientemente
significativo para permitir a inibição
da ligação do vírus à célula são aqueles
que contêm enxofre; nomeadamente;
metionina e cisteína.
 48

O resíduo de metionina; -CH ^ CH ^

CRj; contém a ligação tioéter do CSC
sujeita a oxidação em um ou dois
estágios. No primeiro estágio, a ligação
de um átomo de oxigênio resulta na
formação do sulfóxido -
CH2CH3SCO2CH; tendo a capacidade
de ligar várias moléculas de água
(hidrofílica). O composto parental;
metionina; é hidrofóbico (em relação
ao resíduo). Um estágio subsequente
de oxidação leva à formação da
sulfona; -CH 2 CH 2 S (O2) CH; que é
ainda mais hidrohilílico que o
sulfóxido. Tanto o sulfóxido de
metionina quanto a sulfona são
modificações bem conhecidas desse
aminoácido [29].
A modificação da capacidade de
ligação à água de um constituinte da
proteína (metionina) é altamente
significativa em relação à atividade
 49

antiviral da CLO2. Nas micrografias

eletrônicas de transmissão de vírus
que foram expostas à ação da CLO2,
parece que a camada externa inchou
muito como uma esponja. A
penetração aumentada da água no
revestimento de proteína viral
permite que o CLO 2 adicional (solúvel
em água) penetre em camadas ainda
mais profundas do revestimento;
iniciando assim um ciclo vicioso
(Figura 3).
Oxidação de ácido nucleico (RNA)
Como acima mencionado; A CLO 2 é
capaz de gerar uma variedade de
derivados de oxigênio extremamente
reativos quando atua como um agente
oxidante. Outro exemplo de um agente
oxidante que libera oxigênio atômico
ou nascente é o ozônio; O 3 esta
molécula é constituída por uma cadeia
de três átomos de oxigénio mantidas
 50

juntas por ligações covalentes. A

liberação de um átomo de oxigênio
resulta em estável; oxigênio
molecular; 0. A atividade oxidante da
CLO2 é semelhante ao do ozônio;
liberando formas altamente ativas de
oxigênio. Pesquisas muito detalhadas
foram descritas relacionadas à
oxidação do vírus da poliomielite pelo
ozônio. A exposição da cadeia de RNA
do vírus ao ozônio resultou em
fragmentação em várias cadeias
curtas. O efeito do ozônio no ácido
nucleico foi medido
espectrofotometricamente, indicando
que a inativação estava completa após
apenas sessenta segundos [30].
O ácido nucleico que compreende o
RNA ou DNA dos vírus consiste em
uma cadeia de quatro blocos de
construção dispostos em alguma
sequência específica. É a sequência
 51

dos quatro nucleotídeos (designados

pelas letras A; C; G e U para RNA) que
faz com que uma cadeia se diferencie
da outra, resultando na síntese de
proteínas específicas para cada
uma. Quando uma mistura dos quatro
nucleotídeos é exposta ao ozônio,
verifica-se que apenas a unidade
designou; G (guanina); é degradado no
estágio inicial. Na exposição do RNA de
transferência (tRNA) ao ozônio;
guanina novamente foi o primeiro
nucleotídeo a ser degradado. A
exposição do vírus do mosaico do
tabaco (TMV) ao ozônio causou uma
rápida perda de infectividade em 30
minutos, mostrando uma degradação
preferencial da guanina [2].
Oxidação de lipídios
Alguns vírus estão rodeados por uma
membrana lipídica de duas camadas,
como descrito acima. Qualquer
 52

substância que atue para romper essa

membrana é um agente antiviral para
esse vírus, uma vez que a membrana é
essencial para a infectividade. A
CLO 2 pode agir para romper essa
membrana peroxidando os ácidos
graxos insaturados encontrados na
membrana lipídica da bicamada. O
posicionamento específico dessas
insaturas ao longo da cadeia de ácidos
graxos está relacionado à integridade
e fluidez da membrana. A peroxidação
de insaturações resulta no
desenvolvimento de grupos hidrofíli
cos (busca de água) na parte central
da cadeia de ácidos graxos, o que causa
distorção na membrana lipídica
bicamada. Esta atividade do CLO 2 não
foi demonstrado bioquimicamente,
mas é muito aparente nas micrografias
eletrônicas (transmissão) da ruptura
 53

da membrana viral mostrada na

Figura 10.
Oxidação de polissacarídeos
Existem nas superfícies dos
vírus; cadeias de açúcares e bactérias
(incluindo C. albicans) de açúcares
(polissacarídeos); alguns ligados à
proteína como glicoproteína. Um
exemplo de tal polissacarídeo é o
manano composto principalmente de
açúcar manose e encontrado na
superfície de muitas leveduras. A
degradação de açúcares e
polissacarídeos foi realizada
principalmente com ácido periódico e
seus sais com a estrutura HIO4 . A parte
oxidante desta substância é o íon IO 4 -
(periodato); em que quatro átomos de
oxigênio estão ligados a um único
átomo de iodo (halogênio). Um agente
oxidante semelhante é o produto CLO 2
da pH Miracle, chamado Ativator, que
 54

possui o CLO 2 estruturado ou em sua

forma parcialmente reduzida; CLO.
Quando um agente oxidante dessa
natureza é aplicado ao grupo aldeído
livre de um "açúcar redutor" (aquele
no qual o anel foi aberto com a
formação de um aldeído), uma extensa
degradação é iniciada, como
exemplificado pelas equações [31]
(Figura 7)

Figura 7: Micrografia eletrônica de

parede celular de levedura.
 55

Ilustração HC-OH
Os produtos formados são substâncias
de baixo peso molecular, incluindo
formaldeído; ácido fórmico; dióxido de
carbono; etc. As superfícies de muitos
organismos e vírus carregam
polissacarídeos altamente
significativos em relação à
infecciosidade. São esses
polissacarídeos que mostram
especificidade para a superfície das
células alvo que permitem que o
organismo se ligue a essas células em
particular e invada (infectividade)
[31]. Um dos mecanismos de ação da
CLO 2 contra organismos patogênicos
(incluindo Candida) é, sem dúvida, a
oxidação e degradação de açúcares
com uma perda concomitante de
infecciosidade e integridade para
esses organismos.
 56

Significado da parede celular de

cândida albicans
Os principais polissacarídeos da
parede celular da maioria das
leveduras são mananos (formados
principalmente por açúcar; manose) e
glucanos (formados principalmente
por açúcar; glicose) cujas estruturas
básicas foram determinadas. Nos
modelos de parede celular de
leveduras recentemente propostos;
um componente manana-proteína é
encontrado na região externa,
enquanto o glucano é encontrado
principalmente na região interna. A
quitina (um polímero do derivado da
glicose; N-acetilglucosamina) foi
detectada não apenas na cicatriz do
broto, mas também na rede glucana da
parede celular [32].
Tratamento das células (forma de
levedura) de C. albicans com
 57

helicase; uma preparação enzimática a

partir do intestino de caracol; libera
principalmente manose da superfície
durante os primeiros 20 minutos. Os
furos são formados na parede celular,
o que permite maior penetração na
camada interna de glucana durante os
próximos 40 minutos (Figura 5 e
8). Usando manchas seletivas para
microscopia eletrônica, até oito
camadas discretas foram
demonstradas na parede celular de C.
Albicans. A camada mais externa; 1;
consiste principalmente de 1; 6-
manano. A segunda camada é
composta por 1; 2-manano, enquanto
a terceira camada é 1; 6-glucana. A
quarta camada é amplamente 1; 3-
glucana com a quinta camada;
quitina. As camadas mais internas; 6, 7
e 8; são compostos em grande parte de
quitina-proteína.
 58

Figura 8: Mostra a parede celular após

digestão pela preparação da enzima
helicase.
Cândida albicans é conhecida como
uma levedura "dimórfica"; implicando
que ele possa exibir uma das duas
formas. Uma forma; a levedura ou a
forma Y (Figura 9A); é caracterizado
por indivíduo; células em forma de
ovóide com aparência semelhante à
levedura de padeiro A segunda forma
é o micélio (Figura 9B e C); filamentoso
da forma M; caracterizado por longo;
 59

fios tubulares separados em intervalos

irregulares por uma parede (septo). A
forma Y se reproduz brotando na qual
uma célula mais velha se contrai em
um ponto próximo a uma extremidade
e continua a se estreitar até que uma
nova célula filha seja retirada. A forma
M continua alongada no topo;
estabelecendo um septo à medida que
progride. Esta forma também se
ramifica em intervalos irregulares com
a formação de um novo micélio [34]
(Figura 9 e 10).
 60

Figura 9: Micrografia eletrônica de

morfologia de Cândida albicans.
 61

Figura 10: Micrografia eletrônica de

uma forma micelial de Cândida
albicans.
Um grande esforço foi feito pelos
pesquisadores para determinar quais
fatores ou conjunto ou condições de
cultura são responsáveis pela
conversão de Y para M em C. albicans e
vice-versa. Ainda não foi definido um
único fator causal, embora haja
evidências de que os fatores são
 62

complexos. Muita atenção tem sido

dada a esse assunto, porque há um
grande corpo de literatura que
reivindica uma relação entre o micélio
(forma M) e a infecciosidade. [25-36]
Esse fungo geralmente é encontrado
na forma Y em indivíduos saudáveis
normais [36] A associação da forma M
com a patogenicidade é baseada na
premissa de que as hifas (filamentos)
penetram nos tecidos mais
rapidamente do que as células de
levedura e são mais difíceis de
fagocitar [35].
A Figura 10 ilustra diferenças na
morfologia no desenvolvimento dos
esporos a duas temperaturas
diferentes; 20 ° e 37 ° C. No cultivo de
C. albicans em um meio quimicamente
definido, verificou-se que a biotina é
essencial para apoiar o crescimento
máximo de várias cepas desse fungo
 63

[36]. Em culturas; suplementação com

1,0 milimicograma / ml de
biotina. Sabe-se que o nível de biotina
no sangue humano normal, bem como
vários tecidos, como fígado e cérebro,
estão na faixa de 0,2 a 1,0
milimicrograma / ml. Por esses
motivos, existe a possibilidade de que
essa vitamina tenha um papel muito
definido na determinação da extensão
e da fase do crescimento de Cândida
albicans in vivo [36].
Quando a composição de
polissacarídeos das paredes celulares
isoladas de culturas normais de
biotina e deficientes em biotina foi
analisada, verificou-se que o conteúdo
de manano (camada externa) de
culturas insuficientes em biotina era
20% menor que o das culturas ideais
de biotina enquanto o glucano (
camada interna) foi 50% ou mais
 64

maior em culturas deficientes em

biotina [36]. Também foi descoberto
que quase todas as espécies de
leveduras contêm manano, mas fungos
filamentosos não [36].
Nas culturas de levedura de padeiro e
C. Albicans, tem sido apontada a
associação de biotina e
lipídios; particularmente aqueles que
contêm ácido oleico; com os
complexos glucomanananproteínas da
parede celular e o envolvimento da
biotina na síntese de lipídios
associados à parede celular. É possível
que várias alterações dos lipídios da
parede celular, com base no
metabolismo prejudicado dos ácidos
graxos (catalisadas pela biotina),
levem à superprodução de glucano às
custas do manano [36] .
Foi demonstrado que a forma Y de
Cândida albicans é favorecida em
 65

relação à forma M por quantidades

normais de biotina e que a deficiência
de biotina leva ao aumento do
crescimento da forma M. Esta
observação é altamente significativa
em relação à associação da forma M
mencionada acima com infecciosidade
e patogenicidade. As implicações são
que o tratamento de infecções por
Cândida com CLO2 poderia ser
auxiliado pela suplementação
simultânea com biotina.
As células de levedura (forma Y) de C.
albicans produzem um calor estável;
substância de baixo peso molecular
que suprime a transição levedura para
micelial, com o efeito inibitório sendo
aumentado pelo cobalto [28]. A
germinação de Cândida albicans em
meio líquido foi inibida pelo butirato
de sódio [37].
 66

Essas descobertas combinadas de

pesquisa sugerem que aqueles que
possuem biotina adequada; cobalto e
butirato de sódio em sua dieta são
menos propensos a desenvolver os
sintomas de infecção por fungos como
a infecção por Cândida do que aqueles
que não possuem esses suplementos
alimentares.
Algumas formas de bactérias
aparecem como organismos
“pleomórficos” ou modificações da
estrutura normal com deficiência na
parede celular. Essas modificações
também são conhecidas como “formas
L” ou estados adormecidos em
homenagem ao Instituto Lister, onde
foram classificadas como bactérias.
A participação ativa das formas L na
infecção aguda e crônica está apenas
começando a receber reconhecimento.
Também se demonstrou que a Cândida
 67

possui uma forma L, tendo sido isolada

do sangue de pacientes tratados com
antibióticos, como a penicilina ou seus
derivados. O mecanismo de ação da
penicilina é interferir na formação de
uma parede celular normal.
Antibióticos desta natureza que
inibem a formação de uma parede
celular completa são ineficazes contra
as formas L porque sobrevivem na
ausência de uma parede celular
completa [38].
O mecanismo de ação de vários
agentes antifúngicos
Uma classe de medicamentos
comumente usados para tratar a
Cândida e outras infecções fúngicas
são os chamados "antibióticos de
polieno", incluindo a nistatina;
anfotericina B; filipin e outros. Esses
compostos são assim denominados
porque consistem em grandes anéis
 68

orgânicos nos quais metade da

molécula é composta por uma cadeia
de hidrocarboneto insaturado
(ligações duplas carbono-carbono
alternando com ligações simples) com
a outra metade carregando muitos
átomos de oxigênio; principalmente
como grupos hidroxi (-OH). Na
química orgânica, o termo "ene"
refere-se a uma ligação dupla carbono-
carbono ou "insaturação"; daí o nome
antibiótico polieno [39].
Pesquisas com esses antibióticos
mostraram que um dos primeiros
efeitos observáveis após a adição a
uma cultura de Cândida albicans é a
liberação de potássio intracelular (K
+). Assumiu-se que a cessação do
crescimento resulta da perda de
potássio e outros constituintes de
baixo peso molecular da célula e da
captação simultânea de prótons (H +)
 69

para equilibrar a célula eletricamente.

O suporte para essa hipótese vem da
constatação de que os efeitos
inibidores do crescimento dessas
substâncias são impedidos pela adição
de potássio ao meio de cultura.
Contudo; outros experimentos podem
indicar que existem outros
mecanismos operando além da perda
de potássio através dos poros na
parede celular [40]. A partir de uma
inspeção da estrutura molecular dos
antibióticos de polieno, parece que a
molécula; quando empilhado sobre
ele; forma o poro através do qual os
íons passam. Este; Contudo; foi
demonstrado através de um estudo de
modelos dessas substâncias; para não
ser o caso. Um modelo de anfotericina
B indica que cada metade do círculo é
uma haste rígida e que as duas
metades ficam paralelas uma à outra,
 70

sem espaço entre elas para a passagem

de um íon [41]. Esse paradoxo é
resolvido pela percepção de que o
poro ou canal de íons é formado a
partir de oito moléculas de
anfotericina B dispostas em um círculo
perpendicular à membrana; formando
canal octogonal. São necessários dois
poros para cobrir a membrana lipídica
da bicamada. O lado da molécula que
carrega os grupos hidroxi fica no
interior do poro; ligação da água e
formação de um canal hidrofílico
através do qual os íons e substâncias
solúveis em água de baixo peso
molecular podem passar. A parte
externa do poro consiste em
hidrocarbonetos insaturados
(polieno) ligados a esteróis
normalmente encontrados na parede
celular (por exemplo, ergosterol).
 71

Foi demonstrado que o complexo com

esteróis é um requisito necessário
para a atividade fungicida desses
compostos, resultando em uma
reorientação de esteróis nas
estruturas da membrana [42]. O que
foi dito em relação à anfotericina B
também se aplica à nistatina [43].
Esses aspectos da biologia molecular
estão de acordo com as micrografias
eletrônicas de varredura (MEV) feitas
de células em crescimento e não em
crescimento de C. albicans. A nistatina
influenciou a função da membrana
celular de forma a induzir distorções e
deformações na superfície celular
[44].
A via alternativa na respiração de
cândida albicans
A equação fundamental da respiração
de Cândida albicans é dada por:
 72

O2 + 4H + + 4e ----------------------------
--> 2H2O
Representando a redução do oxigênio
molecular na água, na qual H +
representa um íon hidrogênio
(próton) e e- representa um
elétron. Uma das enzimas ligadas à
membrana na cadeia respiratória é o
citocromo, que liga o oxigênio
molecular a um único átomo de ferro
mantido firmemente em um anel
orgânico.
É sabido que cianeto; ou mais
corretamente íon cianeto (CN); é
altamente tóxico para os organismos
que utilizam oxigênio. Isso ocorre em
parte porque o íon cianeto se liga mais
fortemente ao átomo de ferro no
citocromo do que o oxigênio,
deslocando-o e impedindo-o de se
ligar. Quando o oxigênio não pode se
 73

ligar ao ferro, o processo de respiração

normal é inoperante.
Cândida albicans; para um ótimo
crescimento; requer oxigênio e; na
completa ausência de oxigênio; o
crescimento quase cessa [25]. Este
fungo possui um sistema respiratório
do citocromo que seria esperado que
fosse inibido pelo íon cianeto. Na
presença de cianeto, a respiração não
é inibida, mas é realmente estimulada.
Essa aparente estimulação da
captação de oxigênio pelo cianeto
pode provavelmente ser explicada
com base no seu efeito inibitório na
atividade da catalase. Catalase; a
enzima que destrói o peróxido de
hidrogênio; está presente em C.
albicans24 e contém um anel contendo
ferro orgânico semelhante ao
citocromo e à hemoglobina. A
degradação do peróxido de hidrogênio
 74

gera oxigênio necessário para o

crescimento ideal.
A incapacidade do cianeto em inibir a
respiração levou à proposta de uma
“via alternativa” em Cândida que não
envolva o citocromo. Estima-se que,
nas células em crescimento, a via
alternativa contribua com menos de
10% da respiração total [25]. Está
presente em todas as linhagens de C.
albicans testadas até o momento e é
encontrado nas formas levedura e
micelial. Evidências claras indicam
que a via alternativa está localizada
nas mitocôndrias. O mecanismo
bioquímico exato para esta via
respiratória é atualmente
desconhecido.
A presença de uma via respiratória
alternativa pode ser altamente
significativa em relação a um
mecanismo da atividade
 75

antifúngica da CLO2. O bloqueio da via

alternativa por um dos derivados de
oxigênio altamente reativos; por
exemplo; radical superóxido ou
hidroxilo; eliminaria a única maneira
restante pela qual o organismo
poderia sobreviver.
Metabolismo do enxofre em
cândida albicans
Dissulfetos orgânicos têm a ligação;
CSSC; e são formados a partir de dois
resíduos de cisteína de acordo com a
equação:
C-SH + HS-C + O ---------------------------
-> CSSC + I ^ O
Quando hidrogenado (reduzido); a
reação é reversível produzindo os
resíduos de cisteína originais como:
CSSC + 2H -----------------------------> C-
SH + HS- C Esta reação reversível
representa uma forma de reticulação
 76

entre os filamentos de proteínas que

são; de fato; simplesmente polímeros
de aminoácidos (ligados em
cadeias). O resultado da reticulação
em proteínas; dentro do mesmo fio ou
entre diferentes fios nas
proximidades; é a formação de uma
estrutura mais rígida, uma vez que o
movimento dos fios é inibido através
da reticulação.
Este princípio foi aplicado com
sucesso comercialmente no
tratamento “Ondas permanentes” para
cabelos em que as ligações dissulfeto
existentes são quebradas por uma
solução e reformadas por outra
solução. Enquanto a segunda solução é
reformar as ligações cruzadas; o
cabelo é colocado na posição desejada,
que fica fixa nessa posição quando a
solução é removida.
 77

Nas células normais de C. albicans, é

encontrada uma enzima; dissulfureto
de proteína redutase; que fornece
hidrogênio à ligação dissulfeto (forma
rígida), convertendo-a na forma
sulfidril (movimento livre). Em um
mutante de C. albicans (uma variação
anormal produzida pela radiação; etc.)
Essa enzima está ausente ou não
funciona e resulta em células que não
podem se dividir (sem divisão). Essas
observações indicam que o processo
de divisão celular está relacionado à
capacidade de quebrar as ligações
dissulfeto, convertendo a proteína
rígida em uma forma mais livre ou
flexível, podendo ser mais
desejável. Esses resultados implicam
que, se as ligações dissulfeto presentes
nas células em crescimento não
puderem ser rompidas com a
 78

formação de grupos sulfidril (-SH);

divisão celular pode não ocorrer.
Um agente que impede a formação dos
grupos sulfidril críticos para a divisão
celular é o CO2. Na equação mostrada
acima; é necessário um átomo de
oxigênio para cada dois grupos
sulfidril na remoção de hidrogênio e
na formação de água. Se esses grupos
contendo enxofre são mantidos
continuamente em um estado oxidado
(como CSSC); a divisão celular não
pode ocorrer e a replicação é
impedida. Esse pode ser um dos
mecanismos de ação da CLO 2, pelo
qual o crescimento de Cândida é
inibido [29-49].
Aplicação clínica da CLO 2
A pesquisa em andamento na
Innerlight Biological Research
Foundation investiga o uso clínico do
 79

CLO2 para as seguintes aplicações há

mais de vinte e cinco anos.
a. Herpes I e HI
b. AIDS (HTLV-m) [45]
c. Terçol (olho)
d. Feridas (herpes)
e. Telhas (herpes)
f. Verrugas
g. Citomegalovírus
h. Poliomielite
i. Gripe
j. Aftas
k. Infecção na orelha
l. Bronquite crônica Sinusite
m. Caspa
n. Psoríase
o. Inflamações de garganta
p. Pseudomonas Pneumonia
q. Doença peridontal
r. Infecções da bexiga
s. Micótico (Fúngico)
t. Cândida (sistêmica)
 80

u. Cândida (caracóis) [45]

v. Cândida (vaginite)
w. Cândida (oral; candidíase)
x. Cândida (gastrointestinal)
y. Esclerodermia da Micose
Esta pesquisa também inclui esporos
não específicos; bactérias e vírus.
Estudos de resultados clínicos da
CLO 2
Aplicações clínicas extensivas do
CLO 2 ao vírus Epstein-Barr (EBV)
[46]; citomegalovírus (CMV); vírus da
hepatite A; B; HIV (vírus da Aids) e
outros estão sendo usados
continuamente. O DNA do EBV dentro
do próprio vírus está em uma forma
linear. Algum tempo após a
infecção; os fins estão ligados entre si;
formando a forma circular
(epissoma). Uma vez que esta forma
de DNA esteja firmemente
 81

estabelecida; diz-se que a célula está

em um estado latente. O vírus
permanece nesse estado em
determinadas células B pelo resto da
vida do paciente. Cerca de 10% das
células B estão no estado de
proliferação ativa [47]. Um estudo
clínico de Epstein-Barr foi realizado no
American Biologics Medical Center
durante um período de quatro anos, de
1992 a 1996 [46].
Carga do caso: 1207 pacientes foram
tratados com o protocolo
Dioxychlor®. 784 pacientes eram do
sexo feminino - 65%. 423 pacientes
eram do sexo masculino - 35%. As
idades variaram de 16 a 52 anos.
Situação inicial: Os títulos séricos
elevados de IgG variaram de 400 a
5800. Tratamento intensivo por 14
dias. Suplementação Nutricional.
Clorito de sódio CLO2.
 82

Terapia (linha de base):

a. Clorito de sódio CLO 2 -
gotejamento intravenoso; 10 cc em
100 cc de solução salina;
estudos intravenosos diários nos
anos 90 no American Biologics
Medical Center estabeleceram que
10 ml de 25.000 ppm de clorito de
sódio CLO2 em 100 ml de solução
salina fisiológica administrada por
30 minutos é um nível de dosagem
seguro.
b. Clorito de sódio CLO 2 -
sublingual; 10 gotas debaixo da
língua; duas vezes por dia.
c. Extrato de timo (im) -
semanalmente.
d. Vitamina C - 15 g parenteral
(gotejamento).
Resultados (médias): Melhoria
clínica em tempo mínimo: 3 dias
melhora clínica significativa: 10 - 20
 83

dias Anticorpo (IgG); Redução de

90%; <35 dias [48].
Estudos de laboratório
microbiológico:
a. Em 1986; o Laboratório de
Microbiologia da Universidade de
Stanford realizou uma série de
testes mostrando a eficácia da
CLO 2 na neutralização de uma
variedade de vírus. A concentração
de CLO 2 utilizada foi de 0,75 ppm
em todos os estudos.
b. Os vírus incluíram Herpes
II; HTLV III e citomelagalovírus. O
estudo também incluiu a bactéria
Pseudomonas. As micrografias
eletrônicas mostram a erradicação
completa dos vírus e Pseudomonas
após o tratamento [49].
 84

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