MICROBIOLOGIA

1º BIMESTRE
AULA 1 20/02/2020
MORFOLOGIA E ESTRUTURA DA CÉLULA BACTERIANA
* CÉLULAS PROCARIÓTICAS X CÉLULAS EUCARIÓTICAS

CÉL. PROCARIÓTICA
CÉL. EUCARIÓTICA
TAMANHO
0,5 A 2,0nm
Acima de 20nm
PAREDE CELULAR
Polissacarídeo e aminoácidos
Fungos: quitina
Vegetais: celulose
MEMBRANA CELULAR
Em esteróis
Com esteróis
DNA
Em contato com o citoplasma (nucleoide)
Isolado por membrana (carioteca)
ESTRUTURAS/ ORGANELAS
Ribossomos
Retículo endoplasmático, complexo golgiense, mitocôndrias, cloroplastos
ENZIMAS RESPIRATÓRIAS
Membrana celular
Mitocôndria
DIVISÃO CELULAR
Divisão binária
Mitose/ meiose
A Célula procariótica precisa da membrana para respirar, devido à ausência de
mitocôndrias. O tempo de divisão das bactérias depende da espécie, mas ela divide-
se quando está “morrendo”, isso faz com que seu processo infeccioso seja muito
rápido, pela velocidade com que se prolifera.
* FORMAS
Ver a imagem de origem
As bactérias podem apresentar-se na forma de coco (esférica), bacilo (bastão,
bastonete, com dois lados paralelos, podendo apresentar extremidades retas,
arredondadas ou afiladas), espiral (espirilo com várias curvaturas e menos
mobilidade, espiroqueta com várias curvaturas e mais mobilidade ou vibrião que
possui apenas uma curvatura).
*Algumas bactérias possuem forma de cocobacilo, são bacilos extremamente curtos,
geralmente encontradas em áreas de infecção hospitalar.
*Pleomorfismo: é uma característica genética presente em algumas bactérias que
possuem mais de um gene, podendo expressar um em um momento e outro dependendo do
ambiente em que ela se encontra, mudando sua forma.
* ARRANJOS OU AGRUPAMENTOS
*As bactérias em forma de bacilos sempre dividem-se no plano vertical, já na forma
de cocos dividem-se em qualquer plano e as espiraladas não formam arranjos, sempre
aparecem isoladamente.
E os agrupamentos são determinados pelo plano de divisão.
1. Bacilos: diplobacilo (2 bacilos), estreptobacilos (cadeia de bacilos).
2. Cocos: diplococos (2 cocos), estreptococos (em cadeias), estafilococos (em
cachos), tétradas (formando quadrado, um plano só), sarcinas (em cubos, mais de um
plano).
AULA 2 27/02/2020
* VISUALIZAÇÃO
Bactérias são transparentes então para determinar forma e agrupamento utilizamos
corantes tóxicos (são absorvidos pela membrana bacteriana, alcançam o citosol, se
espalham e colorem o interior da bactéria).
1. Colorações simples: azul de metileno, lugol, safranina, eosina, etc. Não
associamos corantes para cada estrutura diferente.
2. Colorações diferenciais: servem para evidenciar alguma diferença em determinada
lamina, corando apenas um tipo de microrganismo, possibilitando a observação da
forma, do arranjo e do tipo de bactéria. Coloração de Gram (Gram positivos e Gram
negativos) e Ziehl Neelsen (micobactérias).
3. Colorações especiais: para esporos (Wirtz Conklin), para espiroquetídeos
(Fontana Tribondeau), para cápsula (Nanquim).
ESTRUTURAS BACTERIANAS
Parede celular
Cápsula
Flagelos
Pili ou fímbrias
Nucleoide
Plasmídeos
Ribossomos (polirribossomos)
Grânulos
Vacúolos gasosos
* MEMBRANA CELULAR OU PLASMÁTICA
1. Composição: lipídeo (bicamada) e proteína (intercalada), num modelo mosaico
fluido.
2. Funções:
- Transporte de solutos;
- Fosforilação oxidativa (formação de ATP);
- Biossíntese (responsáveis pela síntese de componentes da célula);
- Duplicação de DNA;
- Secreção de proteínas.
3. Mesossomos
*Todas devem ter.
* PAREDE CELULAR
Localiza-se acima da membrana, pode ou não existir. Sintetizada pela própria
bactéria.
1. Funções:
- Manutenção da forma;
- Integridade celular (pressão osmótica);
- Rigidez e proteção.
*É permeável, a menos que a molécula seja MUITO grande.
2. Componente principal: peptideoglicano (polímero)
Ácido N-Acetilglicosamina (NAG)
Ácido N-Acetilmurâmico (NAM)
Cadeia Lateral Tetrapeptídica (CLT): formada por 4 cadeias de aminoácidos
*Ligação cruzada entre as CLTs. Essa ligação é fornecida pela ponte de pentaglicina
(5 glicinas), alguns antibióticos atuam inibindo essas CLTs, isso faz com que a
parede celular fique defeituosa e a célula estoure.
AULA 2 03/03/2020
* Bactérias Gram-positivas: apresentam peptideoglicano (camada clara), proteínas e
ácidos teicóicos (polímeros), é formado por carboidrato, fosfato e álcool (ribitol
ou glicerol), que podem estar na superfície, imersos na parede ou atravessando,
dependendo da sua função.
*Mais de 90% é de peptideoglicano, sendo uma camada bem espessa.
Propriedade dos ácidos teicóicos: regulam entrada e saída de íons, regulam
atividade das autolisinas (enzimas que quebram o peptideoglicano, sendo usada na
divisão celular), receptor para bacteriófagos, sítio de ligação com o epitélio do
hospedeiro e antígenos de superfície (fazem a identificação de microrganismos).
* Bactérias Gram-negativas: apresentam peptideoglicano (até 5%, menor proporção
quando comparada à gram-positiva), membrana externa (parte voltada para o meio
extracelular) e espaço periplasmático (envolve o peptideoglicano, estende-se até a
membrana externa).
A membrana externa é composta por: lipopolissacarídeos (LPS), sendo eles complexo
(lipídeo A*), região core ou central (polissacarídeo), antígeno O (polissacarídeo
variável), bicamada fosfolipidica e proteínas (OMPs: parede celular).
*Endotoxina: faz parte da bactéria.
Função das proteínas de membrana externa: porinas (poros para passagem de
moléculas), transporte de solutos (ligam-se a moléculas e transportam pela
membrana), receptor de fímbrias e bacteriófagos, lipoproteínas (ligação entre
membrana externa e o peptideooglicano).
*Importância da membrana externa: forte carga positiva da membrana externa:
- Escape do sistema imune (fugir da fagocitose, porque as células fagocíticas
também apresentam carga + na sua superfície, por isso repelem-se);
- Dificulta entrada de alguns antibióticos e detergentes.
Gram-negativo: LPS é a camada mais externa → antígeno O (polissacarídeo voltado
para a superfície) → carga + (na química).
O espaço periplasmátco contém enzimas hidrolíticas (lipases, proteases...) servem
pra que as moléculas sejam quebradas e possam ser absorvidas, enzimas capazes de
inativar drogas (as enzimas quebram os antibióticos fazendo com que ele perca o
efeito, sendo resistentes) e proteínas transportadoras de solutos (chaperoninas,
fazem a proteção de uma molécula desde o momento em que entram até a membrana,
porque a bactéria precisa dela sem ser degradada).
* COLORAÇÃO DE GRAM
(Diferenciação de gram + e gram -, para saber como tratar a bactéria)
* Reagentes:
Cristal violeta: corante principal. Gram+ é roxa e gram- não se cora.
Lugol: fixador do corante principal (mordente).
Álcool ou álcool-cetona: diferenciador. Consegue retirar o corante na gram-, pela
baixa quantidade de peptideoglicano e alta quantidade de lipídeo.
Fucsina ou safranina: corante de fundo.
DIFERENCIAÇÃO
Gram +: absorvem o corante cristal violeta e o lugol (complexo corante). O
peptideoglicano sofre desidratação com o álcool+cetona dificultando a saída do
complexo corante.
Gram -: absorvem o cristal violeta e o lugol. A menor quantidade de peptideoglicano
e maior quantidade e lipídeos da parede celular permite a perda do complexo
corante.
AULA 3 05/03/2020
* BACTÉRIAS DIFERENTES
* Micobactérias:
Peptideoglicano e grande conteúdo de lipídeos (ácidos micólicos).
* Arqueobactérias:
Peptideoglicano diferente:
Ácido N-acetilglicosamina
Proteínas
* Micoplasma:
Sem parede celular
Membrana plasmática contém esteróis.
ESTRUTURAS EXTERNAS À PAREDE CELULAR (acima)
Cápsula (polímero secretado) ou camada mucosa
Flagelo
Fímbrias ou pili
* CÁPSULA OU CAMADA MUCOSA
A bactéria produz subunidades glicosídicas (polímero mucoide, espesso) que se
deposita acima da parede celular.
1. Funções:
- Resistência à dessecação: fazendo retenção de água ela mantem a bactéria viva em
ambientes secos;
- Aumento da capacidade invasiva de bactérias patogênicas: está relacionada com o
sistema imunológico, devida à composição da cápsula, pelos polissacarídeos terem
cargas positivas e repelirem os fagócitos (promove escape da fagocitose);
- Aderência: por ser um polímero mucoide (altamente hidratado que fica grudento)
tem facilidade em grudar ao hospedeiro (lembrar do sagu alimento);
- Formação de biofilme: biofilme é uma película formada por organismos vivos (o
lodo formado no casco do navio, microrganismos marinhos associam-se formando esta
película, caso não seja retirado a tendência é que aquilo se calcifique pelo
depósito de sais). Bactéria planctônica adere numa superfície, devido à cápsula, e
vai proliferando-se, este biofilme sofre maturação com o envelhecimento desta
célula, as do meio estão se proliferando ativamente. Eliminar um biofilme maduro é
muito difícil.
* FLAGELO
É um filamento de origem proteica que se sobrepõe na superfície bacteriana, podem
apresentar mais de um, em contato com o meio externo. Mais encontrado em bactérias
gram – e raras em gram +.
1. Função: motilidade da bactéria em direção a algo.
2. Estrutura: corpo basal, formado por vários anéis, que se insere na estrutura da
bactéria (ancora-o), um gancho (responsável pela impulsão da bactéria devido à
amplitude) e um longo filamento (formado de várias flagelinas).
3. Localização e número:
- Bactérias polares: flagelo surge de extremidades (ou de uma ou das duas)
A - Monotríquia: 1 único flagelo
B - Lofotríquia: vários flagelos partindo de um único ponto
C - Anfitríquia: flagelos em lados opostos. Independente de serem em lados
ospostos, o movimento flagela é ordenado e direcionado, sendo o movimento desses
flagelos, um em sentido horário e o outro em sentido anti-horário.
D - Peritríquia: vários flagelos ao redor da bactéria

4. Taxia: é o movimento direcionado por transdutores (semelhantes aos nossos

receptores) e que induzem o deslocamento no sentido do estímulo.
5. Espiroquetos: apresentam endoflagelos, funciona diferente por conta da forma que
elas apresentam, o flagelo acompanha a curvatura do corpo da bactéria. Ao bater o
corpo gira, como se fosse um saca rolhas.
* FÍMBRIAS OU PILI
Filamento proteico, apêndice. Diferente do flagelo estes sempre vão estar em grande
quantidade e mais curtas.
1. Tipos:
- Pili de conjugação (pili F ou sexual): transferência de material genético,
formando uma ponte.
- Pili de ligação: fixação a receptores.
*Também são sítios receptores de bacteriófagos.
COMPONENTES CITOPLASMÁTICOS
* NUCLEOIDE OU REGIÃO NUCLEAR
Região que compreende o material genético (DNA cromossomal), RNA e proteínas, com
ausência de membrana nuclear, o DNA é uma molécula única, em dupla hélice e
circular (começa e termina no mesmo ponto).
Genes housekeeping são genes altamente conservados, que mantém a sobrevivência da
bactéria, sendo uma única cópia de cada gene.
AULA 4 12/03/2020
* PLASMÍDEO
DNA extracromossomal que codifica características vantajosas.
Alguns tipos:
- Plasmídeo sexual ou plasmídeo F: usado para transferência de material genético,
apenas se a bactéria tiver capacidade de formar o pili F (ponte que sustenta essa
transferência). Material extracromossomal que possui o gene para a formação do
pili;
- Plasmídeo de resistência a antibióticos;
- Plasmídeo de virulência (bactérias patogênicas): capacidade de agredir (gravidade
da doença).
* RIBOSSOMOS
Subunidades 50S e 30S, relacionadas à sedimentação de cada subunidade
Ribossomos 70S: polirribossomos ao longo do citoplasma, tendem a se aproximar da
membrana.
Realiza a síntese proteica.
Essenciais para TODAS as bactérias.
*Não é o mesmo de eucariotos, possui RNAr específico de bactérias, isso é bom por
causa do uso de antibióticos, que destroem os ribossomos de bactérias e não de
procariotos.
* GRÂNULOS
São polímeros condensados.
Função de armazenamento e quando precisa das substâncias degrada para que possa ser
utilizado.
- Glicogênio, amido
- Ácido beta hidroxibutírico (PHB): forma de armazenamento de lipídeos
- Polifosfato
* VACÚOLOS GASOSOS
Estruturas que retém gases mantendo a bactéria no meio de uma coluna de água, sendo
mais comum em bactérias aquáticas.
ESPORULAÇÃO OU ESPOROGÊNESE
Origem do esporo ou também chamado de endoesporo, sendo a forma mais resistente da
bactéria no ambiente, que armazena o potencial da bactéria voltado a se proliferar,
contendo DNA, RNA, ribossomos e enzimas. No entanto esse endoesporo não se
alimenta, não gasta ATP e não consome água, de forma latente (com o metabolismo
estacionado).
Metabolismo (funcionando, com ação de enzimas) basal, que praticamente chega a
zero, com pouca água, não há gasto de energia (ATP);
Composição exclusiva: ácido dipicolínico e cálcio, responsável pela resistência do
esporo;
Resistência ao calor e produtos químicos, por conta de sua estrutura rígida;
Gêneros principais que oferecem risco à nossa saúde: Bacillus e Clostridium.
NUTRIÇÃO E METABOLISMO MICROBIANO
* NUTRIÇÃO BACTERIANA
Nutrientes: são substâncias necessárias em quantidades diferentes para as
atividades metabólicas bacterianas, para gerar energia (ATP) ou para síntese de
seus próprios componentes.
Bactéria não faz ingestão, ela faz absorção por meio das proteínas da membrana
plasmática, nutrientes solubilizados em água que passam para o meio intracelular.
Para a bactéria que está no nosso corpo a fonte de nutrientes é o sangue.
* Fases metabólicas:
- Reação anabólica: de moléculas simples para moléculas complexas, por consumo de
ATP.
- Reação catabólica: quebra de moléculas complexas para moléculas simples,
produzindo ATP.
* Nutrientes essenciais:
- Macronutrientes: carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, enxofre, potássio,
magnésio, cálcio, sódio e ferro.
- Micronutrientes: cobre, cobalto, zinco, molibdênio, cromo, manganês, níquel, etc.
* Fontes de carbono
De acordo com as fontes de carbono as bactérias se classificam em:
- Autotróficas: CO2 ou HCO3-
- Heterotróficas: açúcares, ácidos graxos, aminoácidos, etc.
* Fontes de nitrogênio
Bactérias classificam-se em 3 categorias:
- Retiram nitrogênio da atmosfera (fixadoras em nitrogênio): utilizadas para
enriquecimento do solo;
- Utilizam compostos inorgânicos (amônia e nitrato): contaminam alimentos, mas que
muitas vezes não causam danos no nosso corpo;
- Utilizam compostos orgânicos (proteínas e aminoácidos): são encontradas em
abundância no nosso organismo, obtendo facilmente os nutrientes nele.
* Necessidade de oxigênio
O oxigênio é essencial? Não
Classificação quanto ao uso de oxigênio:
- Aeróbias: bactéria que utiliza oxigênio em concentrações atmosféricas, crescem na
primeira camada do meio de cultura (tubo);
- Anaeróbias: crescem no fundo do tubo pela ausência de oxigênio, sendo ele tóxico
para elas podendo destruir elementos das células. Bactérias presente na microbiota
do dente, mais profundamente na raiz. Geralmente demoram para ser percebidas e
consequentemente são difíceis de controlar;
- Facultativas: pode ou não usar o oxigênio, independe, mas na maioria das vezes
preferem utilizar o oxigênio pelo fato dele liberar maiores quantidades de ATP, o
que favorece seu crescimento;
- Microaerófilas: crescem na presença de pouco oxigênio, não suportam a
concentração atmosférica, sendo tóxica para ela. No nosso organismos procuram
lugares com menores concentrações de O2;
- Aerotolerantes: resistem ao oxigênio, ela não o usa, mas ele não é tóxico para
ela, conseguindo sobreviver em ambientes com concentrações atmosféricas.
*Aeróbias e facultativas são mais comuns nas infecções.
* Classificação quanto à temperatura
- Psicrófilas: cresce em temperaturas baixas, de geladeira, freezer
*Psicrotolerantes: suportam baixas temperaturas, tem maior capacidade de adaptação
- Mesófilas (entre 25 e 40ºC): conseguem se adaptar ao nosso organismo, oferecendo
mais riscos para a gente, não morre, mas para de crescer, metabolismo cai a
praticamente zero
- Termófilas: cresce em temperaturas mais elevadas, acima dos 40ºC
* Hipertermófilas (acima 80ºC): adaptam-se a temperaturas vulcânicas
* Classificação quanto ao pH (fundamental para o metabolismo)
- Neutrófilas: pH em torno de 7,0 (bactérias patogênicas para o homem), sua
infecção ou não depende muito da via de entrada e como será esse contato;
- Acidófilas (acidogênicas, quando a própria bactéria produz o ácido, como é o caso
de lactobacilos): suporta um pH menor que 7,0, como é o caso da microbiota do
estômago;
- Alcalifílicas: preferem um pH mais elevado, dificilmente encontradas no nosso
organismo, mais comuns no ambiente externo.
AULA 5 17/03/2020
* MEIOS DE CULTURA
Classificação de acordo com a composição, estado físico e finalidade.
* Composição
- Quimicamente definidos ou sintéticos: sabemos exatamente a composição deste meio.
- Complexos: também chamado de rico ou enriquecido, disponibiliza nutrientes em
maiores quantidades, mas não conseguimos definir o quanto, funciona para
microrganismos exigentes. Ex.: usamos uma certa quantidade de ovos na composição.
* Quanto aos estados físicos os meios podem ser:
- Sólido: ágar-ágar, utilizado isolamento de colônias bacterianas (plaqueamento);
- Semi-sólido: ágar-ágar, utilizado para observação de motilidade;
- Líquido: caldo, utilizado para o enriquecimento bacteriano.
A consistência dos meios é dada pela concentração de “ágar-ágar” (tem origem de
algas) constituído de polissacarídeo complexo (gelose).
Sólido → colônias (UFC) → bacterianas
* Finalidade
- Enriquecimento: facilidade de crescimento;
- Seletivos: inibem o crescimento de determinados microrganismos;
- Diferenciais: permitem a identificação de características metabólicas dos
microrganismos;
- Contagem: meios sem inibidores ou estimuladores (determinação do número).
* METABOLISMO MICROBIANO
Representa o conjunto de reações químicas que ocorrem em uma célula bacteriana
quando em contato com o meio de cultura ou o ambiente onde esta se encontra.
* Reações endergônicas e exergônicas
Reações endergônicas: compostos com nível de energia mais baixo e ao reagirem entre
si armazenam uma maior quantidade de energia, absorvendo maior energia.
Reações exergônicas: usa um composto com nível de energia maior e o degrada,
produzindo, liberando energia.
* Armazenamento de energia
Bactérias obtém energia (ATP) a partir da molécula de glicose.
Processos para utilização da glicose:
Glicólise → piruvato
- Fermentação
- Respiração: maior produção de energia.
*Temos uma microbiota mais diversificada no nosso intestino, por causa da grande
disponibilidade de nutrientes e água.
* Enzima
É uma proteína que diminui a energia de ativação (energia necessária para levar as
moléculas a um estado reativo) e aumenta a velocidade da reação. Não é consumida,
mas sim reconstituída ao final da reação. Possui alto grau de especificidade (liga-
se à substratos específicos). Usada em processos vitais.
*São chamadas de catalisadores, fazendo com que as moléculas reajam mais facilmente
entre si, que também necessitam de condições apropriadas para desenvolverem suas
funções.
Toda reação química ocorre com um tipo de energia para ela ser processada, não é
espontâneo. A eat é um iniciador, o calor pode ser uma energia de ativação que
aumenta os processos metabólicos.
A bactéria para de crescer quando o alimento é colocado na geladeira por conta da
inativação enzimática por conta da desnaturação. Isso não é morte bacteriana,
porque morte ocorre quando essa desnaturação é irreversível.
Fatores que influenciam a atividade enzimática
- Temperatura: se aumentar pode desnaturar, caso diminua pode alterar a afinidade
com substrato;
- pH: grupamentos protonados podem alterar a interação entre as partes;
- Concentração do substrato
- Concentração da enzima
- Inibidores (competitivos e não competitivos): atrapalham o processamento do
substrato.