METODOLOGIA PARA

AMOSTRAGEM DE
AEDES AEGYPTI POR MEIO
DE ARMADILHAS DE POSTURA
(OVITRAMPAS)
Índice

Introdução .................................................................................... 3

Qual é a metodologia do projeto? .............................................. 4

Como as armadilhas serão distribuídas pelos municípios? ..... 4

Como montar a armadilha? ........................................................ 5

Como deve ocorrer a atuação em campo? ................................. 6

Como preparar o material para envio por correio? .................. 8

Como os dados são consolidados e divulgados? ..................... 9

Contato ......................................................................................... 9
1 - Introdução
Nós temos acompanhado - e alguns vivenciado - o grande problema de saúde pública
causado pelos vírus dengue, Zika e chikungunya. Enquanto não tivermos uma vacina eficiente
contra estes arbovírus, a principal forma de combate é controlar o vetor das três doenças: o
mosquito Aedes aegypti.

A mais importante medida de controle do mosquito é eliminar os criadouros, os locais que o

Aedes busca para por os seus ovos. Como uma medida complementar de controle, em casos
de epidemia, recomenda-se o uso de um larvicida (atualmente utiliza-se o pyriproxyfen) ou de
um adulticida (atualmente utiliza-se o malathion). Esses produtos devem ser utilizados com
critério, porque o uso contínuo pode selecionar populações de mosquitos resistentes, ou seja,
que não morrem com o inseticida.

A resistência do mosquito Aedes aegypti a inseticidas é o foco da pesquisa

Um dos objetivos das nossas pesquisas na Fundação Oswaldo Cruz, no Rio de Janeiro, é estudar
a resistência a inseticidas das populações de mosquito em cada região do Brasil, com o intuito
de desenvolver estratégias de uso eficientes e seguras. O Ministério da Saúde já realiza, por
exemplo, a rotação de inseticidas. Isto significa usar por até 5 anos um produto e trocar por
outro (de preferência de classe e mecanismo de ação diferente do que estava sendo usado)
que também sirva para combater aquela população de mosquito. Por isso, o monitoramento da
resistência a um determinado inseticida é tão importante.

Para estudar a resistência, é preciso coletar ovos de Aedes aegypti de diversos municípios em
cada região brasileira. Por isso, contamos com a participação dos estados e, principalmente, dos
municípios, que são os responsáveis diretos pela coleta dos ovos.

Esta apostila tem o objetivo de apresentar o projeto e explicar a metodologia de coleta dos ovos de
mosquitos, que serão enviados para a análise em laboratório. Este produto acompanha um vídeo
em que todos os procedimentos são apresentados de forma detalhada.

Sem a contribuição de vocês, essa pesquisa não seria possível.

Muito obrigado!

José Bento Pereira Lima,

pesquisador do Instituto Oswaldo Cruz (IOC/Fiocruz) e coordenador do projeto

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2 - Qual é a metodologia
do projeto?
Como nosso objetivo é entender a resistência dos mosquitos aos inseticidas por todo o país,
nós contamos com a ajuda de profissionais da estatística para selecionar os municípios que
poderiam representar cada região do Brasil. Foram escolhidos 143 municípios. O principal critério
foi a localização geográfica, para fazer a cobertura do território brasileiro. Por isso, nem sempre o
município escolhido é o mais importante epidemiologicamente naquela região.

Nesta primeira etapa, será realizada a coleta de ovos de mosquitos Aedes em cada um destes
municípios. Estes ovos serão utilizados para realizar os ensaios de avaliação de resistência
em laboratório.

3 - Como as armadilhas serão

distribuídas pelos municípios?
As armadilhas usadas na nossa pesquisa são as ovitrampas, que foram desenvolvidas
especialmente para coletar os ovos do mosquito.

O número de armadilhas instaladas em cada município varia de acordo com o número de

imóveis que ele possui:

Número de imóveis Número de ovitrampas

no município a serem instaladas
Até 50.000 100
De 50.000 a 200.000 150
De 200.000 a 500.000 200
Mais de 500.000 300

Para fazer a distribuição das armadilhas pelos municípios, deve-se dividir o número de quarteirões
do município pelo número de ovitrampas a serem instaladas.

Exemplo: município com 40.000 imóveis e 2.000 quarteirões. Pelo número de imóveis,
sabemos que devem ser instaladas 100 ovitrampas (ver tabela). Dividindo o total de quarteirões
(2.000) pelo número de ovitrampas (100), o resultado é 20. Assim, devemos instalar uma
armadilha a cada 20 quarteirões.

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4 - Como montar a armadilha?
O kit de instalação da armadilha contém:
- 1 vaso plástico de cor preta, com aproximadamente 800mL;
- 1 paleta de compensado de madeira (tipo Eucatex) de 3cm x 12cm;
- 1 clipe de metal;
- levedo de cerveja.

Montagem da ovitrampa:

As paletas exigem uma preparação que deve começar

2 dias antes da montagem da armadilha no campo. É
preciso deixar as paletas de molho na água comum, de
1 torneira, para retirar os resíduos e restos de serragem.
Depois de 24 horas de molho, deve-se deixar as paletas
secarem completamente. O ideal é colocá-las em uma
bacia, sobre um papel toalha, por cerca de 24 horas.

As ovitrampas devem ser adequadamente identificadas

com uma etiqueta, para evitar que a armadilha seja
utilizada para outra finalidade. Cada ovitrampa deve
conter um número exclusivo, que estará anotado na
etiqueta, onde deve constar ainda o logo do município e
uma frase orientando os moradores a não mexerem na
2 armadilha (exemplo: Por favor, não mexa!).
A paleta também deve ser identificada. É preciso colocar
uma tira de fita crepe na extremidade da paleta e ali
anotar o código do município (é o código fornecido pelo
IBGE), a data de instalação e o número da ovitrampa
correspondente. É muito importante que a paleta receba
o mesmo número da ovitrampa em que foi colocada.

Para a montagem da ovitrampa, a paleta deve ser fixada

na borda do vaso com o clipe de metal. Um dos lados da
3 paleta é mais áspero que o outro, para facilitar a fixação
dos ovos no momento da postura. Por isso, essa parte
áspera precisa ficar exposta, voltada para dentro do vaso.

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 Para atrair as fêmeas dos mosquitos para a armadilha,
é preciso colocar no fundo uma solução de levedo de
cerveja em concentração de 0,04%.

Como preparar a solução:

- colocar 6 g de levedo de cerveja em um tubo Falcon
4 com capacidade para 50 ml;
- colocar água da torneira no tubo até que a solução
atinja a marca de 50ml, misturando com o auxílio de
uma pipeta ou um palito de madeira, evitando agitar para
não formar espuma;
- manter a solução em frasco fechado durante o
transporte até o local de instalação da armadilha.

O local de instalação deve ser escolhido de acordo com

os seguintes critérios:
- no peridomicílio; ou seja, no entorno das casas;
5 - preferencialmente em uma altura de até 80 cm (caso
não seja possível, o máximo aceitável deve ser de 120cm);
- ao abrigo da chuva e da luz do sol;
- fora do alcance de crianças e animais domésticos;
- a armadilha não deve ser movimentada até o dia da coleta.

Depois de escolher o local para instalação, é preciso colocar

1ml da solução de levedo de cerveja em cada armadilha e
acrescentar 300ml de água da torneira. O vaso tem furos
6 na altura dos 300 ml, para evitar que uma quantidade
maior de água se acumule. Caso não tenha um copo com
graduação, o agente pode utilizar 6 medidas do copinho
de café, que possui aproximadamente 50 ml.

5 - Como deve ocorrer a

atuação em campo?
No momento de instalar a armadilha, o agente de saúde deve se apresentar ao
morador, explicar o procedimento e pedir o consentimento para a instalação. Caso
o morador aceite, é importante anotar todas as informações necessárias na ficha
que vai acompanhar cada agente durante todo o período de coleta. Cada armadilha
instalada em determinado endereço tem um número fixo, que será utilizado para

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todas as paletas que forem colocadas nela. O agente deve preencher a ficha
corretamente e com atenção, atualizando as informações a cada coleta realizada.
O morador deve preencher e assinar o termo de consentimento autorizando a
instalação da armadilha. Esse documento deve ser guardado pelo agente junto
às fichas.

O agente deve escolher o local da instalação com a ajuda do morador, explicando

que a armadilha deve ficar protegida do sol, da chuva e de crianças e animais.
Ao fim da visita, o agente deve informar ao morador a data da próxima visita
para coleta de ovos e reinstalação ou recolhimento da armadilha.

No dia de recolher as paletas, é preciso tomar cuidado para que elas permaneçam
na posição vertical, com a parte identificada para cima. Isso garante que os ovos
permaneçam fora do contato com a água e cheguem intactos ao laboratório.
Para isso, pode-se levar um pote vazio e colocar todas as paletas recolhidas
lado a lado, prendendo com o clipe, ou preparar uma caixa de isopor com uma
espuma cortada no fundo, para fixar as paletas.
corretamente e com atenção, atualizando as informações a cada coleta realizada.

O agente deve escolher o local da instalação com a ajuda do morador, explicando

que a armadilha deve ficar protegida do sol, da chuva e de crianças e animais.
Ao fim da visita, o agente deve informar ao morador a data da próxima visita
para coleta de ovos e reinstalação ou recolhimento da armadilha.

No dia de recolher as paletas, é preciso tomar

cuidado para que elas permaneçam na posição
vertical, com a parte identificada para cima.
Isso garante que os ovos permaneçam fora
do contato com a água e cheguem intactos ao
laboratório. Para isso, pode-se levar um pote
vazio e colocar todas as paletas recolhidas lado
a lado, prendendo com o clipe, ou preparar uma
caixa de isopor com uma espuma cortada no
fundo, para fixar as paletas.

Ao retirar a paleta, deve-se descartar a água que restou na ovitrampa,

jogando-a na terra ou no chão de cimento, para evitar que algum ovo que possa
ter permanecido ali possa sobreviver. Antes de colocar uma nova paleta, é
aconselhável lavar a armadilha com uma esponja para remover os ovos. A água
desta lavagem também deve ser desprezada na terra para evitar a proliferação
destes mosquitos.

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6 - Como preparar o material
para envio por correio?

Chegando ao laboratório, é preciso colocar as

paletas recolhidas para secar durante 2 a 3
dias. Elas devem ficar dispostas em uma bacia,
sem sobreposição, com a parte que contém os
ovos voltada para cima. Durante este período,
é importante proteger os ovos do contato com
formigas. Para isso, uma boa estratégia é utilizar
água para impedir que as formigas cheguem até
as paletas; no entanto, é preciso tomar cuidado para proteger as paletas da água
também. Uma sugestão é preparar uma bacia cheia de água, que pode ser da
torneira, e colocar duas ovitrampas com a boca virada para baixo dentro dessa
bacia com água. em seguida, apoiar a bacia que contém as paletas sobre esse
suporte feito com as ovitrampas, como mostra a figura ao lado.

Após a secagem das paletas, é preciso fazer a
contagem dos ovos. Com o auxílio de uma lupa,
basta contar quantos ovos são visualizados
em cada paleta e anotar o dado na ficha,
na linha correspondente àquela armadilha.
Caso alguma paleta não contenha ovos, ela é
considerada negativa. Dependendo do estado
de conservação, a paleta negativa pode ser
reaproveitada ou descartada.

Para enviar as paletas ao laboratório pelo correio,
elas devem ser colocadas em uma caixa (de
madeira, papelão ou isopor), com os ovos voltados
para cima. É possível colocar uma camada de
paletas sobre a outra, mas para isso é necessário
colocar um suporte (por exemplo, varetas de
madeira) entre as camadas, para que as paletas
não se encostem. A última camada de paletas
deve ter os ovos voltados para baixo. Para evitar que as paletas se movimentem
na caixa, é recomendável preencher as laterais com papel toalha, jornal ou
papelão, bem como colocar sobre a última camada de paletas um pedaço de
isopor ou de papelão. Por cima de tudo, devem ser colocados as fichas usadas
no campo e os termos de consentimento assinados pelos moradores. Ao fim do
processo, a caixa deve ser lacrada e enviada ao laboratório.

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7 - Como os dados são
consolidados e divulgados?
Os ensaios serão realizados pelo Laboratório de Fisiologia e Controle de Artrópodes Vetores do
Instituto Oswaldo Cruz, no Rio de Janeiro. Os resultados serão enviados para a Coordenação Geral
do Programa Nacional de Controle da Malária e Doenças Transmitidas pelo Aedes - CGPNCMD,
que divulgará os resultados após compilação e análise dos dados.

Contato
Instituto Oswaldo Cruz, no Rio de Janeiro
[email protected]
(21) 2580-6598

Coordenação Geral do Programa Nacional de Controle da

Malária e Doenças Transmitidas pelo Aedes – CGPNCMD
[email protected]
[email protected]