Papers by Pierre D Desvignes
Blood, 2000
Congenital homozygous dysfibrinogenemia was diagnosed in a man with a history of 2 thrombotic str... more Congenital homozygous dysfibrinogenemia was diagnosed in a man with a history of 2 thrombotic strokes before age 30. His hemostatic profile was characterized by a dramatically prolonged plasma thrombin clotting time, and no clotting was observed with reptilase. Complete clotting of the abnormal fibrinogen occurred after a prolonged incubation of plasma with thrombin. The release of fibrinopeptides A and B by thrombin and of fibrinopeptide A by reptilase were both normal. Thrombin-induced fibrin polymerization was impaired, and no polymerization occurred with reptilase. The polymerization defect was characterized by a defective site “a,” resulting in an absence of interaction between sites A and a, indicated by the lack of fragment D1 (or fibrinogen) binding to normal fibrin monomers depleted in fibrinopeptide A only (Des-AA fm). By SDS-PAGE, the defect was detected on the γ-chain and in its fragment D1. The molecular defect determined by analysis of genomic DNA showed a single base ...
Background. Direct indicator of abnormalities of the complement system, the determination of tota... more Background. Direct indicator of abnormalities of the complement system, the determination of total complement activity in the serum is providing important informations in the diagnosis of many diseases (1). An automated homogeneous liposome immunoassay method (LIA) has been developed for its measurement (2). Then, we adapted these reagents on Synchron ® Systems LX-DxC (Beckman Coulter) (3).
Clinica Chimica Acta, 1981
We have studied the Thorp method for precipitation of fibrinogen from diluted plasma, using a spe... more We have studied the Thorp method for precipitation of fibrinogen from diluted plasma, using a specific buffer (pH 6.3) at 56 degrees C, and the preferred anticoagulant (EDTA). Nephelometric or turbidimetric measurements of the precipitate were compared with the results obtained by radial immunodiffusion, or by thrombin clotting, of fibrinogen. In the absence of prior proteolysis (as indicated by the presence of fibrinogen and fibrin degradation products), correlations between the methods were excellent (r > 0.99). We conclude that the method of heat precipitation, which is simple to operate and inexpensive, gives results equally as good as the more difficult and time-consuming techniques.
Jounées de Biologie Médicale de Marseille, 2006
METHODE DE DOSAGE SANGUIN DE LA PROTEINE C-REACTIVE SUR MICRO-PRELEVEMENT CAPILLAIRE (QUIKREAD :... more METHODE DE DOSAGE SANGUIN DE LA PROTEINE C-REACTIVE SUR MICRO-PRELEVEMENT CAPILLAIRE (QUIKREAD : FUMOUZE DIAGNOSTICS) : DELOCALISATION DANS UN SERVICE DE PEDIATRIE-NEONATALOGIE
P desvignes 1, A boutib 1, B faverge 2
Introduction. Le diagnostic étiologique d’une fièvre sans foyer reste problématique chez les nouveau-nés et les nourrissons, population à haut risque d’infections bactériennes sévères souvent asymptomatiques au début, avec un risque important d’erreurs d’orientation (hospitalisation ou retour à domicile après admission au service des urgences, séjour en maternité ou transfert en néonatalogie après la naissance…) comme dans les décisions thérapeutiques (prescription ou non d’antibiotiques …). Les scores cliniques habituellement utilisés sont peu performants, surtout dans le premier mois de vie et les examens biologiques sont très difficiles à obtenir, surtout compte tenu du faible calibre de leur réseau veineux.
Or, à a phase aiguë de la réponse inflammatoire, il ya une augmentation rapide de la concentration sanguine en protéine C-réactive (CRP), dont l’amplitude est beaucoup plus importante dans les infections bactériennes(régulièrement plus de 10 à 100 fois les valeurs habituelles) que dans les infections virales, même s’il existe une zone de chevauchement des valeurs dans ces deux types d’infections. Ainsi, bien que peu spécifique, le dosage de la CRP sanguine reste le marqueur biologique le plus utilisé pour l’identification des enfants à risque d’infections bactériennes.
Méthode. Distribué en France par les laboratoires Fumouze, le système QuikReadÒ CRP (Orion Diagnostica) utilise une méthode immuno turbidimétrique (micro particules recouvertes de fragments F(ab)2 anti-CRP humaine). Rapide (résultats en moins de 3 minutes), donc utilisable en urgence, et ne nécessitant que 20 µL de sang total, elle est adaptée aux micro-prélèvements capillaires plus faciles à réaliser et beaucoup moins traumatisants
Il est constitué d’un photomètre manuel peu encombrant, simple et robuste, sans réglage et entièrement auto-contrôlé, d’un distributeur de tampon hémolysant, et d’un kit de réactifs prêts à l'emploi (stables à température ambiante), tous les consommables étant à usage unique. Un contrôle liquide, titré pour cette méthode, est disponible et l’ensemble des manipulations à effectuer est entièrement géré par le système. A chaque étape, Il suffit de suivre les indications qui s'affichent clairement sur l'écran de l’instrument, et les résultats peuvent être imprimés ou envoyés sur PC pour une complète traçabilité. La mesure des densités optiques est réalisée pendant toute la durée des opérations, ce qui permet de contrôler l’ensemble de la procédure, et donc de détecter la plupart des erreurs de manipulation.
Résultats. Cette méthode s’est révélée suffisamment sensible (inférieure à 10mg/L), précise (répétabilité et reproductibilité avec des CV respectifs à 9.4% et 10.1%, pour des concentrations en CRP proches de 10 mg/l) et exacte (comparaison avec la méthode turbidimétrique SynchronÒ LX 20, Beckman-Coulter : droite de régression selon Passing Bablock y = 1,03 x +1,48 avec r = 0,99) et sans effet crochet pour des concentrations proches de 1000 mg/L. Très peu sensible aux "interférences visibles" (hémolyse, bilirubines, lipides), aux hypercellularités et aux facteurs rhumatoïdes, elle est bien adaptée aux échantillons de sang total et, malgré l'impossibilité d’un contrôle visuel du plasma, aux nouveau-nés grands fournisseurs de sangs riches en éléments nucléés et en "interférences visibles". L'hématocrite ne pouvant pas être mesuré, une correction est appliquée correspondant à un hématocrite à 0,40, à mi-chemin entre les hématocrites souvent supérieurs à 0,50 des nouveau-nés et ceux souvent bas (aux alentours de 0.30) des nourrissons et prématurés ; l’influence de ce facteur reste par ailleurs très faible par rapport à l'amplitude des variations de la CRP sanguine dans les infections bactériennes.
Discussion. Appliqué en routine depuis un an, ce protocole de dosage capillaire de la CRP avec le système QuikReadÒ a concerné 267 enfants toutes activités confondues. Pour 154 d’entre eux, ne présentant pas de complications cliniques, la concentration sanguine de CRP était restée indétectable, ce qui a permis dans la plupart de ces cas, en fonction des circonstances (signes cliniques, environnement familial, …) d’éviter les examens complémentaires, la mise en place ou la poursuite d'une thérapeutique et/ou une hospitalisation. La sélection de ces enfants à risque d’infection bactérienne sévère ainsi que leur confort sont améliorés, tout en évitant des bilans traumatisant. Le surcoût de ce véritable dosage quantitatif de la CRP sur sang total, par rapport à celui du dosage plasmatique fait au laboratoire auquel il peut totalement se substituer dans cette application, reste à l’évidence extrêmement modéré compte tenu des économies réalisées dans la prise en charge de ces petits patients.
Conclusions. Très facile à utiliser, avec des réactifs prêts à l'emploi et stables à température ambiante, un appareillage peu encombrant, simple et robuste, des manipulations réduites, faciles (pas de pipetage) et entièrement monitorées et contrôlées par la machine, le système QuikReadÒ ne demande pas de compétence spécifique et la formation des utilisateurs est très simple et très rapide. Il paraît donc être particulièrement bien adapté à la délocalisation.
Son utilisation directement dans les services cliniques, en restant bien sûr sous le contrôle (possible en temps réel et à distance) du laboratoire, permet une prise de décision immédiate et sûre, sachant bien entendu que de faibles concentrations sanguines en CRP ne dispensent pas, en fonction de la clinique et surtout si les signes ont débuté depuis moins de 12 heures, d'une réévaluation à 24 heures, pour tenir compte de la cinétique plus ou moins retardée de l'augmentation de la CRP dans le sang.
1-Laboratoire d'Hématologie-Biochimie (Centre Hospitalier Général de Martigues)
2-Service de Pédiatrie-Néonatalogie (Centre Hospitalier Général de Martigues)
Spectra Biologie, 2003
Les tubes sous vide en matiere plastique destines au prelevements sanguins apportent une nette am... more Les tubes sous vide en matiere plastique destines au prelevements sanguins apportent une nette amelioration de la securite des personnels et des patients grâce a leur grande resistance mecanique, bien meilleure que celle des tubes en verre. Mais pour leur utilisation en routine, l'evaluation de leurs performances s'impose, particulierement pour les tubes destines aux analyses d'hemostase, pour lesquelles on connait l'influence considerable qu'ils exercent sur les resultats. Le College d'Hematologie des Hopitaux a donc decide de realiser une etude multicentrique dans le but de comparer les tubes d'hemostase sous vide en matiere plastique a double paroi Vacuette® (citrate et CTAD) de la societe Greiner Bio-one aux tubes Vacutainer® correspondants, ces tubes sous vide en verre a paroi siliconee de la societe Becton Dickinson etant tres largement utilises dans les laboratoires d'hemostase. Seuls les examens d'hemostase courants ont ete concernes par cette etude: TP(avec calcul de l'INR chez les patients sous traitement par les AVK), dosage du fibrinogene, et TCA particulierement interessant chez les patients traites par une heparine( HNF ou HBP). Les conditions operatoires etaient celles utilisees habituellement par les sites evaluateurs. Les resultats ont montre une bonne correlation dans tous les cas. Connaissant la fragilite du melange CTAD, cette etude a ete completee par la comparaison de tubes Vacuette® CTAD recemment fabriques, avec des tubes Vacuette® CTAD proches de leur date de peremption pour le dosage de l'activite anti Xa, ce qui a permis de montrer la persistance des bonnes performances de ces tubes pendant toute la duree de leur validite.
Annales de biologie clinique, 1987
Activation of plasminogen by tissue-type plasminogen activator (tpA) is potentiated by fibrin. We... more Activation of plasminogen by tissue-type plasminogen activator (tpA) is potentiated by fibrin. We have demonstrated the role of fibrin polymerization in the potentiating effect of tpA-induced fibrinolysis. Therefore a pathogenic mechanism of thrombotic disorder may be related to an abnormal fibrin polymerization: the abnormal clot being less accessible to fibrinolysis than normal one. This defective lysis may be due to a defective enhancement by the abnormal fibrin of plasminogen activation by tpA, as demonstrated for fibrinogen Dusard, a congenital dysfibrinogenemia associated with a very severe thrombotic disorder. In some other cases, a decrease in the availability of the plasmin cleavage sites in fibrin clot may be involved. On the contrary, some antithrombotic drugs such as pentosane polysulfate in modifying clot structure allow a better degradation of fibrin clot by fibrinolytic enzymes. It is speculated that this enhanced fibrinolysis could explain, almost in part, the antith...
Blood
Congenital homozygous dysfibrinogenemia was diagnosed in a man with a history of 2 thrombotic str... more Congenital homozygous dysfibrinogenemia was diagnosed in a man with a history of 2 thrombotic strokes before age 30. His hemostatic profile was characterized by a dramatically prolonged plasma thrombin clotting time, and no clotting was observed with reptilase. Complete clotting of the abnormal fibrinogen occurred after a prolonged incubation of plasma with thrombin. The release of fibrinopeptides A and B by thrombin and of fibrinopeptide A by reptilase were both normal. Thrombin-induced fibrin polymerization was impaired, and no polymerization occurred with reptilase. The polymerization defect was characterized by a defective site "a," resulting in an absence of interaction between sites A and a, indicated by the lack of fragment D(1) (or fibrinogen) binding to normal fibrin monomers depleted in fibrinopeptide A only (Des-AA fm). By SDS-PAGE, the defect was detected on the gamma-chain and in its fragment D(1). The molecular defect determined by analysis of genomic DNA sho...
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Papers by Pierre D Desvignes
P desvignes 1, A boutib 1, B faverge 2
Introduction. Le diagnostic étiologique d’une fièvre sans foyer reste problématique chez les nouveau-nés et les nourrissons, population à haut risque d’infections bactériennes sévères souvent asymptomatiques au début, avec un risque important d’erreurs d’orientation (hospitalisation ou retour à domicile après admission au service des urgences, séjour en maternité ou transfert en néonatalogie après la naissance…) comme dans les décisions thérapeutiques (prescription ou non d’antibiotiques …). Les scores cliniques habituellement utilisés sont peu performants, surtout dans le premier mois de vie et les examens biologiques sont très difficiles à obtenir, surtout compte tenu du faible calibre de leur réseau veineux.
Or, à a phase aiguë de la réponse inflammatoire, il ya une augmentation rapide de la concentration sanguine en protéine C-réactive (CRP), dont l’amplitude est beaucoup plus importante dans les infections bactériennes(régulièrement plus de 10 à 100 fois les valeurs habituelles) que dans les infections virales, même s’il existe une zone de chevauchement des valeurs dans ces deux types d’infections. Ainsi, bien que peu spécifique, le dosage de la CRP sanguine reste le marqueur biologique le plus utilisé pour l’identification des enfants à risque d’infections bactériennes.
Méthode. Distribué en France par les laboratoires Fumouze, le système QuikReadÒ CRP (Orion Diagnostica) utilise une méthode immuno turbidimétrique (micro particules recouvertes de fragments F(ab)2 anti-CRP humaine). Rapide (résultats en moins de 3 minutes), donc utilisable en urgence, et ne nécessitant que 20 µL de sang total, elle est adaptée aux micro-prélèvements capillaires plus faciles à réaliser et beaucoup moins traumatisants
Il est constitué d’un photomètre manuel peu encombrant, simple et robuste, sans réglage et entièrement auto-contrôlé, d’un distributeur de tampon hémolysant, et d’un kit de réactifs prêts à l'emploi (stables à température ambiante), tous les consommables étant à usage unique. Un contrôle liquide, titré pour cette méthode, est disponible et l’ensemble des manipulations à effectuer est entièrement géré par le système. A chaque étape, Il suffit de suivre les indications qui s'affichent clairement sur l'écran de l’instrument, et les résultats peuvent être imprimés ou envoyés sur PC pour une complète traçabilité. La mesure des densités optiques est réalisée pendant toute la durée des opérations, ce qui permet de contrôler l’ensemble de la procédure, et donc de détecter la plupart des erreurs de manipulation.
Résultats. Cette méthode s’est révélée suffisamment sensible (inférieure à 10mg/L), précise (répétabilité et reproductibilité avec des CV respectifs à 9.4% et 10.1%, pour des concentrations en CRP proches de 10 mg/l) et exacte (comparaison avec la méthode turbidimétrique SynchronÒ LX 20, Beckman-Coulter : droite de régression selon Passing Bablock y = 1,03 x +1,48 avec r = 0,99) et sans effet crochet pour des concentrations proches de 1000 mg/L. Très peu sensible aux "interférences visibles" (hémolyse, bilirubines, lipides), aux hypercellularités et aux facteurs rhumatoïdes, elle est bien adaptée aux échantillons de sang total et, malgré l'impossibilité d’un contrôle visuel du plasma, aux nouveau-nés grands fournisseurs de sangs riches en éléments nucléés et en "interférences visibles". L'hématocrite ne pouvant pas être mesuré, une correction est appliquée correspondant à un hématocrite à 0,40, à mi-chemin entre les hématocrites souvent supérieurs à 0,50 des nouveau-nés et ceux souvent bas (aux alentours de 0.30) des nourrissons et prématurés ; l’influence de ce facteur reste par ailleurs très faible par rapport à l'amplitude des variations de la CRP sanguine dans les infections bactériennes.
Discussion. Appliqué en routine depuis un an, ce protocole de dosage capillaire de la CRP avec le système QuikReadÒ a concerné 267 enfants toutes activités confondues. Pour 154 d’entre eux, ne présentant pas de complications cliniques, la concentration sanguine de CRP était restée indétectable, ce qui a permis dans la plupart de ces cas, en fonction des circonstances (signes cliniques, environnement familial, …) d’éviter les examens complémentaires, la mise en place ou la poursuite d'une thérapeutique et/ou une hospitalisation. La sélection de ces enfants à risque d’infection bactérienne sévère ainsi que leur confort sont améliorés, tout en évitant des bilans traumatisant. Le surcoût de ce véritable dosage quantitatif de la CRP sur sang total, par rapport à celui du dosage plasmatique fait au laboratoire auquel il peut totalement se substituer dans cette application, reste à l’évidence extrêmement modéré compte tenu des économies réalisées dans la prise en charge de ces petits patients.
Conclusions. Très facile à utiliser, avec des réactifs prêts à l'emploi et stables à température ambiante, un appareillage peu encombrant, simple et robuste, des manipulations réduites, faciles (pas de pipetage) et entièrement monitorées et contrôlées par la machine, le système QuikReadÒ ne demande pas de compétence spécifique et la formation des utilisateurs est très simple et très rapide. Il paraît donc être particulièrement bien adapté à la délocalisation.
Son utilisation directement dans les services cliniques, en restant bien sûr sous le contrôle (possible en temps réel et à distance) du laboratoire, permet une prise de décision immédiate et sûre, sachant bien entendu que de faibles concentrations sanguines en CRP ne dispensent pas, en fonction de la clinique et surtout si les signes ont débuté depuis moins de 12 heures, d'une réévaluation à 24 heures, pour tenir compte de la cinétique plus ou moins retardée de l'augmentation de la CRP dans le sang.
1-Laboratoire d'Hématologie-Biochimie (Centre Hospitalier Général de Martigues)
2-Service de Pédiatrie-Néonatalogie (Centre Hospitalier Général de Martigues)
P desvignes 1, A boutib 1, B faverge 2
Introduction. Le diagnostic étiologique d’une fièvre sans foyer reste problématique chez les nouveau-nés et les nourrissons, population à haut risque d’infections bactériennes sévères souvent asymptomatiques au début, avec un risque important d’erreurs d’orientation (hospitalisation ou retour à domicile après admission au service des urgences, séjour en maternité ou transfert en néonatalogie après la naissance…) comme dans les décisions thérapeutiques (prescription ou non d’antibiotiques …). Les scores cliniques habituellement utilisés sont peu performants, surtout dans le premier mois de vie et les examens biologiques sont très difficiles à obtenir, surtout compte tenu du faible calibre de leur réseau veineux.
Or, à a phase aiguë de la réponse inflammatoire, il ya une augmentation rapide de la concentration sanguine en protéine C-réactive (CRP), dont l’amplitude est beaucoup plus importante dans les infections bactériennes(régulièrement plus de 10 à 100 fois les valeurs habituelles) que dans les infections virales, même s’il existe une zone de chevauchement des valeurs dans ces deux types d’infections. Ainsi, bien que peu spécifique, le dosage de la CRP sanguine reste le marqueur biologique le plus utilisé pour l’identification des enfants à risque d’infections bactériennes.
Méthode. Distribué en France par les laboratoires Fumouze, le système QuikReadÒ CRP (Orion Diagnostica) utilise une méthode immuno turbidimétrique (micro particules recouvertes de fragments F(ab)2 anti-CRP humaine). Rapide (résultats en moins de 3 minutes), donc utilisable en urgence, et ne nécessitant que 20 µL de sang total, elle est adaptée aux micro-prélèvements capillaires plus faciles à réaliser et beaucoup moins traumatisants
Il est constitué d’un photomètre manuel peu encombrant, simple et robuste, sans réglage et entièrement auto-contrôlé, d’un distributeur de tampon hémolysant, et d’un kit de réactifs prêts à l'emploi (stables à température ambiante), tous les consommables étant à usage unique. Un contrôle liquide, titré pour cette méthode, est disponible et l’ensemble des manipulations à effectuer est entièrement géré par le système. A chaque étape, Il suffit de suivre les indications qui s'affichent clairement sur l'écran de l’instrument, et les résultats peuvent être imprimés ou envoyés sur PC pour une complète traçabilité. La mesure des densités optiques est réalisée pendant toute la durée des opérations, ce qui permet de contrôler l’ensemble de la procédure, et donc de détecter la plupart des erreurs de manipulation.
Résultats. Cette méthode s’est révélée suffisamment sensible (inférieure à 10mg/L), précise (répétabilité et reproductibilité avec des CV respectifs à 9.4% et 10.1%, pour des concentrations en CRP proches de 10 mg/l) et exacte (comparaison avec la méthode turbidimétrique SynchronÒ LX 20, Beckman-Coulter : droite de régression selon Passing Bablock y = 1,03 x +1,48 avec r = 0,99) et sans effet crochet pour des concentrations proches de 1000 mg/L. Très peu sensible aux "interférences visibles" (hémolyse, bilirubines, lipides), aux hypercellularités et aux facteurs rhumatoïdes, elle est bien adaptée aux échantillons de sang total et, malgré l'impossibilité d’un contrôle visuel du plasma, aux nouveau-nés grands fournisseurs de sangs riches en éléments nucléés et en "interférences visibles". L'hématocrite ne pouvant pas être mesuré, une correction est appliquée correspondant à un hématocrite à 0,40, à mi-chemin entre les hématocrites souvent supérieurs à 0,50 des nouveau-nés et ceux souvent bas (aux alentours de 0.30) des nourrissons et prématurés ; l’influence de ce facteur reste par ailleurs très faible par rapport à l'amplitude des variations de la CRP sanguine dans les infections bactériennes.
Discussion. Appliqué en routine depuis un an, ce protocole de dosage capillaire de la CRP avec le système QuikReadÒ a concerné 267 enfants toutes activités confondues. Pour 154 d’entre eux, ne présentant pas de complications cliniques, la concentration sanguine de CRP était restée indétectable, ce qui a permis dans la plupart de ces cas, en fonction des circonstances (signes cliniques, environnement familial, …) d’éviter les examens complémentaires, la mise en place ou la poursuite d'une thérapeutique et/ou une hospitalisation. La sélection de ces enfants à risque d’infection bactérienne sévère ainsi que leur confort sont améliorés, tout en évitant des bilans traumatisant. Le surcoût de ce véritable dosage quantitatif de la CRP sur sang total, par rapport à celui du dosage plasmatique fait au laboratoire auquel il peut totalement se substituer dans cette application, reste à l’évidence extrêmement modéré compte tenu des économies réalisées dans la prise en charge de ces petits patients.
Conclusions. Très facile à utiliser, avec des réactifs prêts à l'emploi et stables à température ambiante, un appareillage peu encombrant, simple et robuste, des manipulations réduites, faciles (pas de pipetage) et entièrement monitorées et contrôlées par la machine, le système QuikReadÒ ne demande pas de compétence spécifique et la formation des utilisateurs est très simple et très rapide. Il paraît donc être particulièrement bien adapté à la délocalisation.
Son utilisation directement dans les services cliniques, en restant bien sûr sous le contrôle (possible en temps réel et à distance) du laboratoire, permet une prise de décision immédiate et sûre, sachant bien entendu que de faibles concentrations sanguines en CRP ne dispensent pas, en fonction de la clinique et surtout si les signes ont débuté depuis moins de 12 heures, d'une réévaluation à 24 heures, pour tenir compte de la cinétique plus ou moins retardée de l'augmentation de la CRP dans le sang.
1-Laboratoire d'Hématologie-Biochimie (Centre Hospitalier Général de Martigues)
2-Service de Pédiatrie-Néonatalogie (Centre Hospitalier Général de Martigues)