MAKALAH IMUNOSEROLOGI

MACAM-MACAM REAKSI IMUNOSEROLOGI

(PRESIPITASI,FLOKULASI)

Disusun Oleh:

 Ade Murtika Suryani 1613453009

 Minda Afrina Nadea Rani 1613453018
 Tiara 1613453021

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN TANJUNG KARANG
PRODI D III ANALIS KESEHATAN
TA.2017/2018
 KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa karena atas rahmat-
Nyalah kami dapat menyelesaikan makalah ini dengan baik. Dan tidak lupa juga kami
mengucapkan terimakasih banyak kepada Ibu dosen dan teman-teman sekelas yang
turut mendukung kami dalam terselesaikannya makalah ini dengan baik. Makalah ini
dibuat sebagai salah satu nilai tugas dari mata kuliah Imunoserologi.
Selanjutnya demi kesempurnaan dari makalah ini kami mengharapkan saran serta
kritik yang membangun dari Ibu dosen serta teman-teman sekalian. Terimakasih

Bandar Lampung, 19 Maret 2018

DAFTAR ISI
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Dalam lingkungan sekitar kita terdapat banyak substansi bermolekul kecil yang bisa masuk
kedalam tubuh. Substansi kecil tersebut bisa menjadi antigen bila dia melekat pada protein
tubuh kita yang dikenal dengan istilah hapten. Substansi-substansi tersebut lolos dari barier
respon non spesifik (eksternal maupun internal), kemudian substansi tersebut masuk dan
berikatan dengan sel limfosit B yang akan mensintesis pembentukan antibodi.
Sebelum pertemuan pertamanya dengan sebuah antigen, sel-sel B menghasilkan molekul
immunoglobin IgM dan IgD yang tergabung pada membran plasma untuk berfungsi sebagai
reseptor antigen. Sebuah antigen merangsang sel untuk membuat dan menyisipkan dalam
membrannya molekul immunoglobulin yang memiliki daerah pengenalan spesifik untuk
antigen itu. Setelah itu, limfosit harus membentuk immunoglobulin untuk antigen yang sama.
Pemaparan kedua kali terhadap antigen yang sama memicu respon imun sekunder yang
segera terjadi dan meningkatkan titer antibodi yang beredar sebanyak 10 sampai 100 kali
kadar sebelumnya. Sifat molekul antigen yang memungkinkannya bereaksi dengan antibodi
disebut antigenisitas.kesanggupan molekul antigen untuk menginduksi respon imun disebut
imunogenitas.

1.2 Rumusan Masalah

1. Apa itu presipitasi dan flokulasi?
2. Bagaimana terjadinya reaksi presitipasi dan reaksi flokulasi?
3. Bagaimana cara uji presipitasi dan cara uji flokulasi?

1.3 Tujuan
1. Untuk mengetahui apa itu reaksi presipitasi dan reaksi flokulasi
2. Untuk mengetahui bagaimana terjadinya reaksi presipitasi dan reaksi flokulasi
3. Untuk mengetahui bagaimana cara uji presipitasi dan cara uji flokulasi
 BAB II
PEMBAHASAN

2.1 Presitipasi

Presipitasi adalah hasil kombinasi antara antigen terlarut dengan antibodi terlarut
menghasilkan suatu komplek yang terlihat. Proses presipitasi pertama kali ditemukan oleh
Kraus tahun 1897 saat kultur bakteri enterik membentuk presipitat bila dicampur dengan
antibodi spesifik.
Presipitation adalah salah satu metode sederhana yang mendeteksi reaksi antigen-antibodi.
kebanyakan antigen multivalent sehingga mampu membentuk satu aggregat dengan adanya
antibodi yang seuai. Jika antigen terlarut bergabung dengan antibodinya dalam lingkungan
yang mengandung elektrolit ( NaCl ) pada suhu dan pH yang cocok, maka gabungan antigen
antibodi ini menjadi presipitat yang tidak dapat larut.

2.2 Tujuan uji presipitasi

Penggunaan reaksi presipitasi yaitu:
1. Menentukan jenis kuman
2. Identifikasi unsur antigenik pada kuman di dalam jaringan binatang yang terinfeksi
3. Pembakuan toksin dan antitoksin
4. Mencari antibodi di dalam serum
5. Uji serologis medikolegal untuk mendeteksi darah, serum dll.

2.3 Faktor – faktor yang mempengaruhi reaksi presipitasi

 Sifat antigen (Ag)
 Elektrolit dan pH
 Waktu dan suhu
 Ratio antigen-antibody (Ag-Ab)

2.4 Reaksi presipitasi

Pada uji presipitin terjadi reaksi antara satu antigen yang dapat larut dengan antibodi
homolognya. Reaksi ini berlangsung dengan poembentukan presipitat (endapan) kasat mata
pada batas permukaan reaktan-reaktan bersangkutan.
Reaksi semacam itu biasanya dilakukan dengan menggunakan antibodi (antiserum) dengan
jumlah konstan dan antigenj dengan berbagai pengenceran. Dengan mengingat bahwa
konsentrasi antibodi itu konstan, maka dapat kita lihat bahwa hanya terbentuk sejumlah kecil
presipitat bila antibodinya berlebihan. Dengan ditambahnya konsentrasi antigen, maka
jumlah presipitat meningkat dan mencapai maksimum bila perbandingan antara antigen dan
antibodinya optimum. Sesudah zone ini, dengan bertambahnya konsentrasi antigen, maka
jumlah presipitat menurun lagi. Jadi ada tiga zone reaksi antigen-antibodi pada uji presipitin :
zone kelebihan antibodi, zone setara, dan zone kelebihan antigen.
Kompleks Ag – Ab. (Sheehan, 1990)
- Pembentukkan presipitat terjadi apabila konsentrasi Ag dan Ab seimbang (zona
ekivalen = ZE)
- Konsentrasi Ag berlebih → Komplek Ag-Ab yg terbentuk larut kembali
disebut postzone effect
- Konsentrasi Ab berlebih → Komplek Ag-Ab yg terbentuk tetap larut disebut prozone
effect
Pada zone kelebihan antibodi, semua antigen telah bereaksi dengan antibodi dan telah
diendapkan (tidak ada antigen bebas di dalam supernatan). Sebaliknya di dalam zone
kelebihan antigen, semua antibodi telah bereaksi dengan antigen (tidak ada antibodi di dalam
supernatan), tetapi kompleks yang terbentuk tetap dapat larut karena banyaknya kelebihan
antigen mengikat antibodi menjadi kompleks yang berukuran kecil yang tidak terikat saling
membentuk agregat besar yang kasat mata. Di dalam zone setara terjadi presipitasi antigen
dan antibodi secara maksimum (tidak terdapat antigen bebas maupun antibodi bebas di dalam
supernatan) karena keduanya terdapat dalam proporsi optimum sehingga dapat membentuk
kisi-kisi antigen dan antibodi yang menjadi kasat mata dan tidak dapat larut. Karena alasan
ini, maka uji presipitin akan paling bermanfaat bila memungkinkan reaktan berdifusi sampai
konsentrasi optimumnya tercapai.

2.5 Pemeriksaan/uji presipitasi

Beberapa macam pemeriksaan berdasarkan prinsip presipitasi adalah berikut:
1. Turbidimetri : Mengukur kepadatan atau kekeruhan satu larutan. Alat deteksi
ditempatkan langsung menghadap sinar langsung. Cahaya yang terkumpul setelah
melewati langsung melalui larutan.
 2. Nephelometri: mengukur cahaya yang dipendarkan pada sudat tertentu dari sinar saat
melewati suatu suspensi. Jumlah cahaya yang dipendarkan sesuai dengan indeks
konsentrasi larutan. Nephelometri memberikan hasil yang akurat dan presisi pada
kuantitatif pada protein serum dan karena dapat diautomatisasi maka biaya per tes
relatif lebih murah dibanding metode lain.
Teknik lain dari prosedur presipitasi berupa tekhnik imunodifusi pasib meliputi :
A. Uji Cincin
Uji cincin adalah uji presipitin yang paling sederhana. Kedalam sebuah tabung bermulut kecil
diletakkan larutan antigen diatas larutan serum yang mengandung antibodi. Kedua larutan
tersebut akan berdifusi sampai keduanya mencapai konsentrasi optimum untuk terjadinya
presipitasi, pada titik tersebut muncullah suatu zona rapat atau cincin endapan diantara kedua
larutan tersebut.
B. Metode Difusi Agar
Ketepatan yang lebih tinggi dan pemisahan komponen di dalam campuran antigen dan
antibodi dapat diperoleh dengan cara membiarkan reaktan-reaktan tersebut berdifusi
bersama-sama dalam di dalam suatu gel agar.

* Metode difusi tunggal

Dalam metode difusi tunggal yang dirancang Oudin, antigen ditaruh diatas gel agar yang
mengandung antiserum di dalam suatu tabung reaksi bermulut sempit. Setelah dibiarkan
selama beberapa jam atau beberapa hari, antigen itu merembes ke dalam gel membentuk pita-
pita endapan pada berbagai taraf, bergantung kepada jumlah dan macam antigen-antibodi
yang ada. Karena presipitasi terjadi ketika antigen menembus gel, maka cincin endapan mula-
mula muncul di dekat puncak gel dan nampaknya bergerak perlahan ke arah bawah.
Efek semacam ini mungkin sesungguhnya disebabkan karena adanya peningkatan jumlah
antigen yang menyebabkan endapan itu melarut (karena reaksi antigen-antibodi itu dapat
balik). Presipitasi terbentuk kembali pada posisi yang lebih kebawah dalam tabung tersebut,
yaitu pada tempat konsentrasi antigen yang optimum. Faktor-faktor yang menentukan taraf
untuk terjadinya reaksi ialah ukuran molekul dan konsentrasi nisbi reaktan.
* Metode difusi ganda.
Oakley dan Fulthorpe memodifikasi teknik Oudin dalam metode difusi tunggal dengan cara
menaruh antiserum di dalam agar di dasar tabung reaksi dan melapisinya dengan gel agar lalu
diatasnya ditaruh larutan antigen. Kedua reaktan itu berdifusi kearah masing-masing di dalam
agar dan presipitasi terjadi pada titik terdapatnya konsentrasi optimum. Ini adalah difusi
ganda satu dimensi.
Metode difusi ganda dua dimensi yang dirancang oleh Ouchterlony mempunyai keuntungan
dibandingkan dengan metode sebelumnya, bahwa berbagai antigen dan antiserum dapat
dibandingkan secara langsung. Dalam uji ini, reaktan merembes dari sumur-sumur yang
berisi antiserum dan antigen homolog dalam konsentrasi optimum. Bila pita endapan yang
dibentuk kedua antigen dan antibodi itu melebur pada titik pertemuannya, maka berarti kedua
antigen itu sama. Bila bersilangan, artinya kedua antigen itu berbeda.
C. Radioimunoasai
Radioimunoasai ialah suatu teknik mikro dengan kepekaan tinggi untuk meentukan jumlah
antigen yang amat sedikit. Teknik ini pada hakikatnya merupakan proses dua langkah.
Langkah yang pertama menyangkut kompetensi antara antigen uji (tidak berlabel atau tidak
radio aktif) dengan konsentrasi yang tidak diketahui (beragam) dan suatu antigen indikator
yang dikenal (berlabel atau radioaktif) dengan konsentrasi yang sudah diketahui (daoat
dihitung). Mereka berkompetensi untuk bereaksi dengan antibodi yang dikenal dan
jumlahnya terbatas, yang spesifik bagi antigen yang diberi label radio isotop. Ketiga reaktan
ini diinkubasikan selama beberapa jam sehingga dapat terjadi reaksi pengikatan antigen-
antibodi.
Langkah kedua menyangkut ditambahkannya kedalam sistem itu antiserum (anti-antibodi)
yang spesisifik dan erhadapnya mampu mengikat komponen antibodi dari kompleks
kekebalan yang tebentuk selama inkubasi pada langkah yang pertama. Ini mengakibakan
terjadinya presipitasi kompleks antigen-antibodi.Radioaktivitas endapan tersebut ditetapkan
di dalam detektor dan penghitung radioisotop.
Bila antigen uji pada langkah pertama telah bereaksi dengan antibodi, maka antigen indikator
radioaktif tidak dapat bereaksi dengan antibodi itu. Hitungan radioaktifnya akan redah karena
antigen indikator tidak terdapat dalam endapan. Namun demikian, bila antigen uji itu tidak
bereaksi dengan antibodi, maka antibodi itu tentunya bebas untuk mengikat antigen indikator
radioaktif.
Maka hitungan radioaktifnya akan tinggi karena antigen indikator terikat dalam endapan. Jadi
identitas dan konsentrasi antigen uji dapat ditentukan oleh radioaktivitas endapan.
Teknik radioimunoasai ini penting untuk menentukan adanya antigen hepatitis B, yang
mungkin ada di dalam serum donor darah yang tidak memperlihatkan gejala (donor yang
membawa virus (antigen) tanpa memperlihatkan gejala). Substansi-substansi lain yang dapat
diukur dengan radioimunoasai meliputi insulin, testosteron, estradiol, igE manusia, serta
bahan-bahan lain yang biasanya ada dalam jumlah amat kecil di dalam darah atau air seni
D. Immunoelektroforesis
Jika terdapat sejumlah Ag dalam larutan seperti serum, sulit memisahkan pita presipitasi yang
timbul pada setiap reaksi Ab-Ag, bila hanya menggunakan cara difusi di atas. Komponen
serum dipisahkan dengan elektroforesis dalam agar gel dan antiserum dibiarkan berdifusi
melalui komponen yang dihasilkan pada pita-pita yang terbentuk.
E. Elektroforesis "roket"
Merupakan metode kuantitatif, dilakukan elektroforesis antigen ke dalam gel yang telah
mengandung antibodi. Presipitasi yang terjadi berbentuk roket, panjang masing-masing roket
menunjukkan konsentrasi antigen.

2.6 Flokulasi

Flokulasi adalah proses pengadukan lambat agar campuran koagulan dan air baku
yang telah merata membentuk gumpalan atau flok dan dapat mengendap dengan cepat.

2.7 Prinsip

Dengan pengadukan yang lambat maka flok-flok yang sudah terbentuk dalam proses
koagulasi diperbesar ukurannya, flok-flok akan ke dalam hubungan sehingga partikel-
partikel tersebut saling bertabrakan kemudian melekat dan berubah menjadi ukuran
yang siap turun mengendap dan endapan tersimpan di bak flokulasi.

2.8 Mekanisme Reaksi

Segera setelah terbentuk inti flok, inti flok bergabung menjadi flok berukuran lebih besar
yang memungkinkan partikel dapat mengendap.Penggabungan flok kecil menjadi
flok besar terjadi karena adanya tumbukan antar flok. Tumbukan ini terjadi
akibat adanya pengadukan lambat. Pada bak pengaduk cepat, dibubuhkan koagulan.
Pada bak pengaduk lambat, terjadi pembentukan flok yang berukuran besar hingga mudah
diendapkan pada bak sedimentasi. Koagulan yang banyak digunakan dalam pengolahan
air minum adalah aluminium sulfat atau garam-garam besi. Kadang-kadang
koagulan-pembantu, seperti polielektrolit dibutuhkan untuk memproduksi flok yang lebih
besar atau lebih cepat mengendap. Faktor utama yang mempengaruhi proses koagulasi-
flokulasi air adalah kekeruhan, padatan tersuspensi, temperatur, pH, komposisi dan
konsentrasi kation dan anion, durasi dan tingkat agitasi selama koagulasi dan flokulasi, dosis
koagulan, dan jika diperlukan, koagulan-pembantu.

Reaksi kimia untuk menghasilkan flok adalah:

- Al2(SO4)3.14H2O + 3Ca(HCO3)2  2Al(OH)3 + 3CaSO4 + 14H2O + 6CO2

Pada air yang mempunyai alkalinitas tidak cukup untuk bereaksi dengan alum, maka
perlu ditambahkan alkalinitas dengan menambah kalsium hidroksida.

- Al2(SO4)3.14H2O + 3Ca(OH)2 2Al(OH)3 + 3CaSO4 + 14H2O

Derajat pH yang optimum untuk alum berkisar 4,5 hingga 8, karena aluminium hidroksida
relatif tidak terlarut.
Ferro sulfat membutuhkan alkalinitas dalam bentuk ion hidroksida agar menghasilkan reaksi
yang cepat. Untuk itu, Ca(OH)2 ditambahkan untuk mendapatkan pH pada level di mana ion
besi diendapkan sebagai Fe(OH)3.
2.9 Tujuan

Tujuan utama flokulasi adalah membawa partikel ke dalam hubungan sehingga

partikel-partikel tersebut saling bertabrakan,kemudian melekat, dan tumbuh mejadi
ukuran yang siap turun mengendap.
Proses flokulasi dalam pengolahan air bertujuan untuk mempercepat proses
penggabungan flok-flok yang telah dibibitkan pada proses koagulasi. Partikel-partikel
yang telah distabilkan selanjutnya saling bertumbukan serta melakukan proses
tarik-menarik dan membentuk flok yang ukurannya makin lama makin besar serta mudah
mengendap.
2.10 Manfaat
Proses flokulasi bermanfaat untuk menurunkan tingkat kekeruhan untuk memperoleh air yang
bening, namun memiliki efek samping yaitu fraksi zat tersuspensi atau mikroorganisme
dalam air yang seringkali menyebabkan pencemaran dengan flokulasi zat suspensi
atau mikroorganisme tersebut bisa dihilangkan dari air.

2.11 Gangguan
- Waktu flokulasi
- Jumlah energi yang diberikan
- Jumlah koagulan
- Jenis dan jumlah koagulan/flokulan pembantu
- Cara pemakaian koagulan/flokulan pembantu
- Resirkulasi sebagian lumpur (jika memungkinkan)
- Penetapan pH pada proses koagulasi
 BAB III
PENUTUP

3.1 Kesimpulan
Presipitation adalah salah satu metode sederhana yang mendeteksi reaksi antigen-
antibodi. kebanyakan antigen multivalent sehingga mampu membentuk satu aggregat dengan
adanya antibodi yang seuai. Jika antigen terlarut bergabung dengan antibodinya dalam
lingkungan yang mengandung elektrolit ( NaCl ) pada suhu dan pH yang cocok, maka
gabungan antigen antibodi ini menjadi presipitat yang tidak dapat larut.