génie génétique cours

LE GÉNIE GÉNÉTIQUE
Définition du génie génétique

Le génie génétique est un ensemble de techniques qui permettent d'identifier, d'isoler, de transférer, de modifier
de manière contrôlée le matériel génétique
Principes du génie génétique

l'universalité du code génétique qui est le même de la bactérie à l'être humain, de sorte que chaque
organisme vivant a la potentialité de lire, comprendre et réaliser l'information génétique d'un autre
organisme vivant
le clonage d'un gène, c'est-à-dire le fait de l'isoler et de le multiplier
Ce que le génie génétique peut faire

- détecter et isoler des gènes dans le patrimoine génétique
- faire passer un gène d'un organisme à un autre
- reproduire en éprouvette certains segments du matériel génétique
- modifier des gènes ciblés
Principe du génie génétique: Le transfert naturel des gènes de l’A.t à une plante
Historiquement: En 1907, E. Smith et C. Townsend ont isoler une bactérie sous forme de bâtonnet qui se développe
dans le sol. L’introduction de cette bactérie dans une fissure au niveau d’une plante saine, induit la galle du collet.
Principe du génie génétique: Le transfert naturel des gènes de l’At à une plante
Le plasmide est responsable de l’apparition de la tumeur

Le plasmide Ti est un petit plasmide de 215 milliers de paires de bases. Le schéma ci-contre récapitule
les régions responsables de ses différentes propriétés. La région Vir contient des gènes dont
l'expression est stimulée en présence de
certains composés végétaux.
Ces gènes de virulence produisent des
protéines responsables du transfert de
l'ADN-T à l'intérieur des tissus végétaux.
La région de l'ADN-T contient des gènes de

production d'opines ainsi que la production
d'auxines et de cytokinines par la cellule
hôte.
Les cellules hôtes se multiplient et produisent

des opines, sources de nutriments pour les
agrobactéries.
Le plasmide contient d'ailleurs des gènes

impliqués dans le catabolisme des opines.
L'origine de réplication assure la
multiplication du plasmide au sein de la
bactérie.
Un végétal blessé émet des composés
phénoliques bactériostatiques qui attirent
Agrobacterium vers le site de la blessure
et permet l’adhésion de la bactérie aux
cellules végétales.
Agrobacterium met alors en place un

système de transfert d’un fragment de son
ADN vers la cellule blessée dit ADN-T
porté par le plasmide Ti qui s’intègre au
génome nucléaire de la cellule végétale.
Les gènes portés par l’ADN-T s’expriment

dans le végétal et conduisent à la
synthèse :
de deux phytohormones* : l’auxine, hormone de croissance et une cytokine, dont la surproduction entraîne une multiplication
anarchique des cellules végétales ; de composés absents habituellement de la cellule végétale, des opines. Les opines
peuvent induire le transfert du plasmide Ti d’une agrobactérie vers une autre par conjugaison génétique. Ce sont donc des
médiateurs chimiques clefs de l’interaction Agrobacterium-plante, dont la présence dans la tumeur favorise la croissance des
pathogènes et concoure à leur dissémination.
Principe du génie génétique: Les techniques utilisées en génie génétique
Le génie génétique (ou ingénierie génétique) est un ensemble de techniques ayant pour objet une modification
artificielle du génome des êtres vivants. Le génie génétique est un champ très actif de la recherche car les applications
possibles sont multiples, notamment en santé humaine et en agriculture biotechnologique.
Isolement du gène d’intérêt- étape I

Technique utilisant les enzymes de restriction : (nucléases)
Une enzyme de restriction est capable de couper l’ADN en fragment au niveau d'une séquence de nucléotides
caractéristique (de quatre à une dizaine de paires de bases) appelée site de restriction. Chaque enzyme de restriction
reconnaît ainsi un site de restriction spécifique.
Ces enzymes sont naturellement présentes chez un grand nombre d'espèces de bactéries (elles sont un moyen de se défendre
contre les infections par des virus en découpant en petit morceaux l'ADN de ces derniers).
Les enzymes de
restrictions sont
donc des ciseaux
moléculaires, elles
peuvent couper en
faisant des
extrémités franches
ou des extrémités
cohésives.
Technique utilisant la transcriptase inverse
Après l’extraction de l’ARN,

la synthèse d’un brin
d’ADN à partir d’une
matrice d’ARN est réalisée
par une transcriptase
inverse (polymérase
extraite de rétrovirus).
On obtient un hybride
ARN/ADN, et on se
débarrasse de l'ARN puis
on resynthèse une ADNc à
l'aide d'ADN polymérase et
de nucléotides.
Transfert du gène d’intérêt dans un vecteur – Etape 2
Introduction du gène dans un vecteur :

Après l’extraction de l’ADN source:
- Extraction d’un plasmide bactérien.
- ouverture par une enzyme de restriction(on
utilise le même enzyme de fragmentation
d’ADN)
- Mélange de la ligation des bouts d’ADN et du
plasmide.
- Transformation d’une bactérie à l’aide de
plasmides recombinés.
Transfert du gène d’intérêt dans une cellule Hôte– Etape 3
La cellule hôte peut être soit une bactérie (Escherichia coli) ou une levure et qui a une grande
capacité de multiplication
Sélection et criblage:
sélection des bactéries génétiquement modifiés
avec l’ajout d’un antibiotique
clonage.– Etape 4
Stimuler la division chez ces bactéries transgéniques pour les cloner et par conséquent cloner le transgène (le gène
d’intérêt)
expression du gène dans les bactéries transformées et extraction de la protéine
synthétisée.– Etape 5
Les bactéries transformées sont placées dans des fermenteurs ou règnent des conditions optimales pour leur
multiplication. Ceci favorise l’expression du gène greffe. Le vecteur recombiné permet à la cellule hôte d’exprimer le
gène et aussi de transmettre cette propriété à sa nombreuse descendance. Pour récolter les molécules protéiques
fabriquées, on soumet les bactéries cultivées à un choc osmotique ou bien à une lyse mécanique.
En résumé
Des applications – dans le domaine médical (Exemple de l’insuline)
Produire, en quantité industrielle par des microorganismes génétiquement modifiés, une substance à intérêt
médical comme l’insuline, l’hormone de croissance et certains vaccins.
Des applications – Exemple dans le milieu agricole.
les étapes de la transgénèse pour la production du maïs résistant à un insecte, la pyrale qui provoque de gros dégâts
dans les tiges de maïs réduisant ainsi la production. Le génome d’une bactérie du sol (Bacillus thuringiensis) contient
le gène responsable de la fabrication de la protéine toxique pour les larves de pyrale du maïs.

génie génétique cours

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

génie génétique cours

Transféré par

Informations du document

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

génie génétique cours

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

LE GÉNIE GÉNÉTIQUE

Définition du génie génétique

Principes du génie génétique

le clonage d'un gène, c'est-à-dire le fait de l'isoler et de le multiplier

Ce que le génie génétique peut faire

Le plasmide est responsable de l’apparition de la tumeur

La région de l'ADN-T contient des gènes de

Les cellules hôtes se multiplient et produisent

Le plasmide contient d'ailleurs des gènes

Agrobacterium met alors en place un

Les gènes portés par l’ADN-T s’expriment

Isolement du gène d’intérêt- étape I

Après l’extraction de l’ARN,

Introduction du gène dans un vecteur :

Vous aimerez peut-être aussi