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    API Exposã© (Récupération Automatique)

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    Benothmen Chaima
    Ce document décrit l'utilisation de galeries API pour identifier des bactéries comme Streptococcus et Staphylococcus. Après incubation, les résultats des tests sont lus et codés pour identifier la souche bactérienne en se référant au catalogue.

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    API exposé (Récupération automatique)

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    API Strep

     Identification des espèces du genre Streptococcus

    API Staph
     Identification des espèces du genre Staphylococcus

    API 20NE
     Identification des Non
    Enterobactéries
    (Pseudomonas par exemple)

    API 20E
     Identification des Enterobactéries
    Après incubation :

    - Pour la recherche de la TDA : introduire une goutte de chlorure de Fer III dans
    la cupule TDA.
    Attendre 2 à 3 minutes.

    - Pour la recherche de production d’indole : introduire une goutte de réactif de


    Kovacs dans la cupule IND.

    - Pour la voie fermentative du butane-diol introduire une goutte de réactif NaOH


    ou KOH puis une goutte de réactif Napht-1-ol dans la cupule VP. Attendre 10
    minutes.

    - Pour la recherche de la nitrate réductase : introduire une goutte d’acide


    sulfanilique puis une goutte de réactif Naphtyl-1-amine. Si c’est incolore,
    ajouter de la poudre de Zinc. Attendre 2 minutes.
    Résultats de la galerie:

    - + + + +

    5 2 1 5 7 7 3 5 5
    Résultats reportés sur la fiche d’identification

    Code n°: 5 215 773 (55)

    Se référer au catalogue pour identifier la souche à l’aide du code


    •Après addition des réactifs nécessaires à la révélation de différents tests, la galerie est
    lue conformément aux indications du fabricant et codée.

    •Pour cela, les tests sont groupés par trois successivement de gauche à droite, les
    derniers triplets pouvant inclure des caractères bactériens (comme la morphologie, le
    Gram, la mobilité, l'oxydase, etc.) qui ne sont pas étudiés dans la galerie mais qui sont
    indispensables à son interprétation.
    La galerie API 20 E comportant 20 tests, en additionnant à l’intérieur de chaque groupe les chiffres correspondant
    à des réactions positives, on obtient 7 chiffres ; la réaction de l’oxydase constitue le test numéro 21.

    Par ailleurs dans certains cas, le profil à 7 chiffres étant insuffisamment discriminatif, il faut réaliser les tests
    complémentaires ( 6 tests encadrés en rouge)

    -Réduction des nitrates en nitrites (NO2)


    -Réduction des nitrates en azotes (N2)
    -Mobilité (MOB)
    -Culture sur gélose de Mac Conkey (McC)
    -Oxydation du glucose (OF-O)
    -Fermentation du glucose (OF-F)

    Ces tests complémentaires sont mentionnés dans le catalogue analytique qui propose leur interprétation. Ils
    peuvent aussi être utilisés pour constituer un profil à 9 chiffres, identifiable avec un logiciel d’identification.

    La gélose MacConkey est un milieu d'isolement ordinaire, lactosé et sélectif des bacilles à
    Gram négatif non exigeants. Le désoxycholate de sodium et le cristal violet inhibe la
    croissance des bactéries à Gram positif.
    • Les sommes de chaque triplet lues de gauche à droite forment un code d'au moins
    7 chiffres qui correspond au profil biochimique du micro-organisme étudié.

    • La comparaison de ce code à ceux référencés dans la base de données de


    Biomérieux permet en général d'identifier ce micro-organisme.

    •Si le code numérique obtenu ne figure pas dans cette base de données, il peut
    s'agir
    d'un profil ou d'un micro-organisme non référencé, mais la cause la plus fréquente
    reste un problème technique (inoculum non respecté, paraffine oubliée, réactifs
    périmés, etc.).
    MERCI POUR VOTRE ATTENTION

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