Lutilisation Dun Microscope

Boîte à outils
Comment utiliser un microscope ?

Un microscope sert à grossir les objets qu’on ne L’oculaire est une lentille à
peut pas voir à l’œil nu, par exemple, des cellules. travers laquelle l’œil observe
l’échantillon sur la lame. En
On l’utilise lorsque la loupe ou le binoculaire ne général, l’oculaire grossit un objet
permettent pas une observation satisfaisante. de 10 fois (10X).
Le corps est composé de
l’oculaire et des objectifs.
La tourelle porte-objectifs, qui a
Les parties du microscope et leurs la forme d’un disque, porte les
fonctions objectifs. Une rotation permet de
Pour utiliser un microscope, il est important de changer d’objectif.
Les objectifs sont des lentilles qui
pouvoir identifier chacune de ses parties et de grossissent l’échantillon observé.
savoir à quoi elles servent. L’illustration suivante En général, un microscope est
indique le nom de chaque partie d’un microscope. muni de trois objectifs qui
La fonction de chacune de ces parties est grossissent 4 fois (4X), 10 fois
présentée dans l’encadré ci-contre. (10X) et 40 fois (40X).
La platine est un plateau mobile
sur lequel on dépose la lame de
verre. L’ouverture au centre de la
platine permet à la lumière de
traverser la lame
Les valets maintiennent la lame
en place sur la platine.
Le condenseur concentre la
lumière de la source lumineuse
vers l’échantillon déposé sur la
lame. Il comprend le diaphragme,
qui permet de modifier la quantité
de lumière nécessaire à
l’observation.
La source lumineuse émet la
lumière qui traverse l’échantillon et
permet de l’observer.
Le pointeur est une flèche qui se
trouve dans l’oculaire. Elle indique
à un deuxième observateur un
point précis dans le champ de
vision.
La potence, qui relie le pied au
corps, sert à transporter le
microscope.
La vis macrométrique sert à faire
une première mise au point plus
ou moins précise de l’image.
La vis micrométrique permet de
faire une seconde mise au point
plus précise de l’image.
Le pied qui supporte le
microscope est posé sur la table.
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Le transport
Il faut toujours transporter un microscope de façon sécuritaire.
(Tenir fermement la potence avec une main en soutenant le pied
avec l’autre main.)
La mise au point
Il est important de faire la mise au point du microscope avant de l’utiliser.
1. Abaisser complètement la platine à l’aide de la vis macrométrique.
2. À l’aide de la tourelle porte-objectifs, mettre en place le plus petit objectif (4X).
3. Vérifier la propreté des lentilles en regardant dans l’oculaire. S’il y a lieu, nettoyer
les lentilles et la source lumineuse avec du papier à lentilles.
4. Placer la lame sur la platine entre les valets. Toujours manipuler la lame par les
bords pour qu’elle reste propre.
5. En regardant dans l’oculaire, monter la platine jusqu’à ce que l’image soit la plus
nette possible. Il se peut qu’elle reste légèrement brouillée. Attention ! Il faut le faire
lentement. Il ne doit pas y avoir de contact entre l’objectif et la lame.
6. Centrer l’objet observé à l’aide des vis d’ajustement pour les valets.
7. À partir de cette étape, ne plus toucher à la vis macrométrique.
8. Tourner la vis micrométrique pour obtenir une image plus nette. Vérifier l’ouverture
du diaphragme et l’ajuster la luminosité, s’il y a lieu.
9. Pour augmenter le grossissement, tourner la tourelle porte-objectifs pour utiliser
l’objectif suivant (10X). Faire ensuite la mise au point à l’aide de la vis
micrométrique seulement.
10. Répéter l’étape précédente avec le dernier objectif (40X) si l’on veut obtenir un
grossissement supérieur.
Le rangement
Une fois l’observation terminée, il faut ranger le microscope en suivant les étapes ci-
dessous.
1. Replacer l’objectif au grossissement le plus faible (4X).
2. Abaisser complètement la platine à l’aide de la vis macrométrique.
3. Retirer la lame.
4. Débrancher l’appareil en tirant sur la fiche, et non sur le fil.
5. Nettoyer le matériel (lentilles, objectifs, lame, etc.) et ranger le microscope.
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Détermination de la taille approximative du spécimen

microscopique
Le plus simple dans ce cas est de déterminer la dimension du champ oculaire, c’est-à-
dire le diamètre du champ que l’on peut voir en regardant dans le microscope. L’intérêt
est ici qu’une fois cette dimension déterminée aux différents grossissements utilisés, on
peut la réemployer lors de toutes les utilisations ultérieures du microscope. Attention !
Cette dimension du champ oculaire doit être déterminée pour chaque microscope, en
particulier s’il s’agit de modèles différents !
Pour déterminer la dimension du champ oculaire, en l’absence
de micromètre oculaire, la solution la plus simple est de le faire à
faible grossissement. Pour cela, il suffit de placer sous le
microscope une règle transparente en plastique ou du papier
millimétré (avec un bon éclairage, on voit très bien « à travers »,
Vue d’une règle
et donc la graduation). transparente graduée
Cette méthode, si elle reste extrêmement simple, n’est malheureusement pas utilisable à
un grossissement même moyen et encore moins au fort grossissement. Pour connaître
la dimension du champ oculaire à ces grossissements on interpole donc à partir de la
dimension du champ à faible grossissement, en supposant une réelle de proportionnalité
entre ces valeurs. Notez que cette méthode n’est pas très rigoureuse. Toutefois, elle reste
suffisante à notre niveau.
Voici les étapes de calcul à effectuer afin de déterminer la taille réelle d’un
spécimen microscopique :
Étape 1 : Détermination du diamètre du champ oculaire à faible grossissement
Observer une référence
Vue d’un papier
de taille, c’est-à-dire, un millimétré au faible
morceau de papier grossissement.
millimétré à faible Chaque carré fait
1.0 millimètres de
grossissement (oculaire côté.
× 10, objectif × 4).
Ici, notre champ oculaire fait donc un diamètre de ≈5.0 mm. Il s’agit bien entendu d’une
mesure approximative.
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Étape 2 : Interpolation aux autres grossissements

Sur ce microscope, nous disposons de trois objectifs. Nous pouvons donc maintenant
proposer une valeur approchée du diamètre du champ à ces trois grossissements :
Diamètre de champs oculaire pour trois grossissements d’un microscope
Diamètre champ
Grossissement Grossissement Grossissement oculaire (Dchamp)
oculaire objectif total (Gtotal) 𝟓. 𝟎𝒎𝒎 𝒙 𝟒𝟎
𝑫𝒄𝒉𝒂𝒎𝒑 =
𝑮𝒕𝒐𝒕𝒂𝒍
Faible 10 × 4 = 5.0 mm tel que vue dans

10 x 4x
grossissement 40 fois l’oculaire du microscope
Moyen 10 × 10 = 5.0𝑚𝑚 𝑥 40 2.0 mm

10 x 10 x
grossissement 100 fois 100
Fort 10 × 40 = 5.0𝑚𝑚 𝑥 40 0.5 mm

10 x 40 x
grossissement 400 fois 400
Attention : Ces valeurs ne sont valables que sur notre seul microscope ! Elles doivent être
déterminées de manière indépendante pour chaque microscope.
Étape 3 : Détermination de la taille réelle du spécimen

La dimension de taille approximative du spécimen microscopique peut être calculée en
faisant un rapport entre la taille observée et de diamètre du champ oculaire.
• Diamètre du champ oculaire (Dchamp)
• Nombre estimé de spécimen consécutif 𝐷𝑐ℎ𝑎𝑚𝑝
nécessaire à la traversé du diamètre du 𝑇𝑟é𝑒𝑙 =
champ oculaire (Nbspé) 𝑁𝑏𝑠𝑝é
• Taille réelle du spécimen (Tréel)
Par exemple :
Dans l’image ci-contre, les deux cellules ont
été observées à un grossissement de 400x
avec le microscope utilisé à l’étape 1 & 2.
Quelle est leur taille réelle ?
𝐷𝑐ℎ𝑎𝑚𝑝
Dchamp=0.5mm 𝑇𝑟é𝑒𝑙 =
𝑁𝑏𝑠𝑝é
Nbspé=3
Tréel= ? Donc la taille réelle de ces cellules est de
0.5𝑚𝑚
𝑇𝑟é𝑒𝑙 = = 0.17𝑚𝑚 0.17mm.
3

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Détermination de la taille approximative du spécimen

Étape 2 : Interpolation aux autres grossissements

Faible 10 × 4 = 5.0 mm tel que vue dans

Moyen 10 × 10 = 5.0𝑚𝑚 𝑥 40 2.0 mm

Fort 10 × 40 = 5.0𝑚𝑚 𝑥 40 0.5 mm

Étape 3 : Détermination de la taille réelle du spécimen

• Taille réelle du spécimen (Tréel)

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