UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDELLAH

FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES

DEPARTEMENT DE BIOLOGIE

Projet de Fin d’Etudes

Licence Sciences & Techniques

Sciences Biologiques Appliquées et Santé
(LST - SBAS)

Interférences de l’hémolyse, ictère, lipémie et biotine

sur le dosage des paramètres de routine dans un
laboratoire de biologie clinique

Présenté par : Aarab Bouchra

Encadré par : Pr Bencheikh Rachid

Dr Kettani Tayeb

Soutenu le : 06 /07/2021

Devant le jury composé de :

 Pr Bencheikh Rachid
 Dr Kettani Tayeb
 Pr Guissi Sanae

Stage effectué à : Laboratoire d’analyses médicales Saada

Année universitaire 2020-2021
0
Remerciements :

Je tiens à remercier vivement le Docteur Kettani Tayeb d’avoir accepté de m’accueillir

au sein de son laboratoire d’analyses médicales ‘’Saada’’, de m’avoir fait confiance pour
ce sujet afin de m’initier à la recherche scientifique et de m’avoir consacré beaucoup de
temps pour les corrections.

Je voudrais remercier le Professeur Bencheikh Rachid pour tous les conseils avisés qu’il
m’a conférés, et pour ses efforts de prés et de loin, pour les moyens et l’assistance
nécessaire à la réalisation de mon travail.

Je voudrais également remercier Pr Guissi Sanae pour l’honneur qu’elle m’a fait en
acceptant d’examiner mon sujet comme membre de jury, et pour ses remarques utiles.

Mes remerciements s’adressent également à toute l’équipe du laboratoire ‘’Sarioui Aicha,

Abbassi Souhayla et El Khachani Ibtissam’’ pour leurs disponibilité, leur patience et
leur persévérance ainsi que pour leurs précieux conseils.

Que tous ceux qui m’ont aidé, de prés et de loin à mener à bout ce travail, trouvent ici
l’expression de ma reconnaissance extrême et ma profonde gratitude.

1
Sommaire :

Présentation de laboratoire d’analyses médicales ‘’Saada’’................................................. 6

Chapitre I : Recherche bibliographique

I. Introduction............................................................................................................... 7
II. Hémolyse
1. Echantillon hémolysé.....................................................................................8
2. Surcharge en hémoglobine des échantillons plasmatiques............................9
3. Signification d’interférence de l’hémolyse................................................. 10
4. Détermination du seuil hémolytique........................................................... 10
III. Ictère
1. Echantillon ictérique.....................................................................................11
2. Surcharge en bilirubine des échantillons plasmatiques................................11
3. Signification d’interférence de l’ictère.........................................................12
4. Détermination du seuil ictérique..................................................................12
IV. Lipémie
1. Echantillon lipémique...................................................................................13
2. Surcharge en intralipide des échantillons plasmatiques...............................13
3. Signification d’interférence de la lipémie....................................................14
4. Détermination de seuil lipémique.................................................................14
5. Exemple........................................................................................................15
V. Interférences
1. Les paramètres biologiques sensiblement influencés par l’hémolyse..........16
2. Les paramètres biologiques sensiblement influencés par l’ictère...............16
3. Les paramètres biologiques influencés par la lipémie..................................16
VI. La biotine
1. Définition......................................................................................................17
a) Structure moléculaire.......................................................................17
b) Formule brute...................................................................................17
c) Température de fusion......................................................................17
2. Les médicaments qui contiennent de la biotine............................................18
3. Les doses de biotine qui peuvent être ingérées............................................18
4. Effets indésirables........................................................................................18

2
 5. Les valeurs physiologiques normales de la biotine......................................18
6. La pharmacocinétique de la biotine..............................................................18
7. Interférence dans les immunodosages..........................................................19
8. Interférence de biotine sur le dosage de TSH...............................................20
9. Exemples......................................................................................................21

Chapitre II : Matériels et méthodes

1. Population étudiée........................................................................................24
2. Tubes utilisés................................................................................................24
3. Etapes de travail...........................................................................................24
a) Centrifugation...................................................................................24
b) Mesure de la valeur d’aspect............................................................24
4. Explication....................................................................................................26
5. Exemple pour hémolyse...............................................................................26
6. Exemple pour ictère......................................................................................27
7. Exemple pour lipémie..................................................................................27

Chapitre III : Résultats et discussion

Résultats et discussion.........................................................................................28

Conclusion............................................................................................................................29

Références............................................................................................................................30

3
Liste d’abréviation :

AC anti-VHc: Hépatite C

ACE: Antigène carcino-embryonnaire

AFP: Alpha-foetoprotéine

Antigène HBs : marqueur diagnostique de l'infection par le virus de l'hépatite B

Beta HCG: Hormone chrionique gonadodtrope

CA 125 : Carbohydrate antigène 125

CA 15-3 : Marqueur du cancer tumoral

CA 19-9 : Marqueur du cancer tumoral

CMV IgG: Cytomégalovirus immunoglobuline G

CMV IgM: Cytomégalovirus immunoglobuline M

HIV : Virus immunodéficience humain

NT-pro-BNP : marqueur d’insuffisance cardiaque

PSA : Antigène prostatique spécifique

PTH: Parathormone

T3L : Triiodothyronine libre

T4L : Thyroxine libre

TSH : hormone thyréostimuline

Vit B12: Vitamine B12

Vit D total: Vitamine D total

4
Introduction générale

La chimie clinique est une science quantitative qui s’intéresse à la mesure de quantités de
substances importantes d’un point de vue biologique dans les liquides organiques. Les
méthodes permettant de mesurer ces substances sont conçues avec soin en vue de fournir
des évaluations exactes de leur concentration. Les résultats des dosages sont comparés à
des intervalles de référence afin d’obtenir une signification diagnostique et clinique de ces
valeurs. Lorsque la valeur obtenue pour un test se situe en dehors de l’intervalle de
référence attendu, le résultat inhabituel sert de signal, révélant l’existence d’un problème.

Lors de ce travail l’objectif est d’étudier quatre facteurs interférents les plus courants dans
un échantillon de sérum ou de plasma à savoir : l’hémolyse, l’ictère, la lipémie et la
biotine.

Nous procéderons en exposant les principaux mécanismes d’interférences, en détaillant

les matériaux et la méthode utilisés, en identifiant et en quantifiant les interférences dues à
ces substances visibles (pour l’hémolyse, l’ictère, et la lipémie) et invisibles ( pour la
biotine) puis en discutant de la conduite à tenir lors la détection d’un échantillon
présentant une de ces caractéristiques.

5
Présentation de laboratoire Saada

Le laboratoire Saada d’analyses médicales est mis en service depuis le mois Aout 2010
par son dirigeant Docteur Kettani Tayeb qui a un :

 Diplôme de Pharmacien de la Faculté de Médecine et de Pharmacie de l’université

de Bruxelles(U.L.B)
 Diplôme des études spécialisées en Analyses Biologiques et Cliniques (Bruxelles
U.L.B)
 Ancien membre du Corps Scientifique (Enseignant et Chercheur) à la faculté de
Médecine et de Pharmacie Bruxelles(U.L.B)
 Diplôme universitaire en Procréation Médicale Assistée (Montpellier, UM1)
 Diplôme universitaire en Management de la qualité pour les professionnels et
acteurs de la santé (Université de Bordeaux)

Ce laboratoire est situé au quartier Zaza, avenue Saint Louis, rue Sindiane, N°82,
Saada, Fès. Il réalise les analyses de biologie médicale suivantes :

 Hématologie
 Biochimie
 Bactériologie
 Biologie de la reproduction
 Parasitologie
 Mycologie
 Toxicologie
 Auto-immunité (IFI)
 Test d’allergie

Ce laboratoire est composé :

 du rez-de-chaussée qui englobe la salle d’accueil des patients et deux salles de

prélèvement du sang
 d’un premier étage qui renferme le bureau du médecin, une salle d’Hémato-Chimie,
et une salle de Bactériologie
 d’un deuxième étage qui contient une laverie, un vestiaire, et des toilettes

6
Chapitre I : Recherche bibliographique

I. Introduction :

La biologie médicale désigne une spécialité qui a recourt à des techniques de

laboratoire (analyse, microscopie, immunologie, bactériologie, virologie, sérologie,
hématologie ....) pour contribuer notamment à l’évolution de l’état de de santé, au
diagnostic de pathologies, et au suivi des traitements...

Elle demande la maitrise des techniques pour une interprétation biologique juste et
précise, pour cela , il faut éviter toute source d’erreur qui peut entrainer un résultat erroné
conduisant à de mauvaises interprétations, un mauvais diagnostic, et éviter aussi la
répétition des analyses prises en charge par le patient (surcoût)

Il existe trois phases pour la réalisation d’une analyse quelconque. D’abord, la phase
pré-analytique qui couvre toutes les étapes qui précèdent l’analyse et qui peuvent
influencer les résultats. Il s’agit en particulier des prélèvements, de la conservation et du
transport des échantillons. Ensuite, la phase analytique qui correspond au processus
technique permettant l’obtention d’un résultat d’analyse biologique. Et enfin, la phase
post analytique qui couvre toutes les étapes qui suivent l’analyse, jusqu’à la transmission
des résultats au prescripteur .Il s’agit en particulier de l’enregistrement des résultats, de la
validation technique et biologique, avec, si besoin adjonction de commentaires sur la
qualité de l’échantillon, de la transmission des résultats, ainsi que le stockage des
échantillons analysées. [1]

Actuellement la part prépondérante des erreurs concerne la phase pré-analytique.

On peut distinguer parmi les erreurs, celles que l’on peut corriger :

 L’identification des échantillons (absente, incomplète, ou erronée)

 Remplissage incorrect des tubes
 Tubes mal positionnés
 Délai entre prélèvement et réception au laboratoire trop important

Les erreurs que l’on ne peut pas corriger sont : l’hémolyse, l’ictère, et la lipémie

7
 II. Hémolyse :

L’hémolyse est la destruction des globules rouges (érythrocytes) présents dans le sang, elle
peut interférer avec les dosages réalisés en laboratoire .Ces interférences sont dues à la
libération dans le sérum ou le plasma de constituants présents dans les globules rouges
(hémoglobine, bilirubine, les enzymes érythrocytaires....) [2]

1. Echantillon hémolysé

Il s’agit d’un échantillon dont le sérum ou le plasma est coloré en rouge orangé plus ou
moins fortement selon le degré de l’hémolyse. [2]

Figure 1 : Echantillon hémolysé

Suite aux interférences franches rencontrées dans ce cas d’hémolyse, le fabricant

Roche a réalisé des tests de surcharge avec des concentrations croissantes d’hémoglobine
afin de déterminer à partir de quelle concentration, les résultats étaient faussés, et il a
constaté que le résultat avec surcharge était sujet à interférence lorsqu’il était modifié de
10% par rapport au résultat initial sans surcharge.

8
 2. Surcharge en hémoglobine des échantillons plasmatiques :

La méthode de surcharge en hémoglobine consiste à réaliser à partir de l’hémolysat

décongelé une gamme de concentration en hémoglobine variant de 0 à 2000 µmol/l soit de
0 à 32,2 g/l. Chaque point de cette gamme de concentration en hémoglobine est additionné
à des plasmas de concentration variable pour chacun des paramètres étudiés. [3]

La corrélation entre l’indice d’hémolyse et la concentration en hémoglobine exprimée en

µmol/l fournit une droite de pente (a=0,8952) et d’ordonnée à l’origine (b=21,06) avec un
coefficient de corrélation (r=0,999). [3]

Figure 2 : Corrélation entre la concentration en hémoglobine et l’indice d’hémolyse

9
 3. Quand juger que la différence entre ajout/pas d’ajout d’hémoglobine est
significative ?

La différence entre ajout est pas d’ajout est considérée non significative lorsqu’aucune
modification du résultat n’a été observée, alors qu’elle est significative dès que les
résultats étaient faussés par la plus faible concentration en hémoglobine ajoutée. [3]

4. Détermination du seuil hémolytique

La limite de 10% de variation a été choisie pour définir une influence de l’hémolyse sur
la mesure. [3]

10
III. Ictère :

Cette situation est due à une augmentation anormale de la bilirubine, composé ayant
une coloration brunâtre. (La bilirubine est le produit de dégradation normal de
l’hémoglobine contenue dans les globules rouges) [2]

1. Echantillon ictérique :

Il s’agit d’un échantillon dont le plasma ou le sérum a perdu sa couleur normale jaune
paille, en virant vers le jaune foncé, brun ou verdâtre. [2]

Figure 3 : Echantillon ictérique

2. Surcharge en bilirubine des échantillons plasmatiques

La méthode de surcharge en bilirubine consiste à réaliser à partir d’une solution de

ditaurate de bilirubine une gamme de concentration de 50 à 1600 µmol/l. Chaque
concentration de cette gamme est ajoutée à des plasmas de concentration variable pour
chacun des paramètres étudiés. [3]

11
 La corrélation entre l’indice d’ictère et la concentration en ditaurate de bilirubine
exprimée en µmol/l fournit une droite de pente (a=0,989) et d’ordonnée à l’origine
(b=37,58) avec pour coefficient de corrélation (r=0,996) [3]

Figure 4 : Corrélation entre la concentration de ditaurate de bilirubine et l’indice

d’ictère

3. Quand juger que la différence entre ajout/pas d’ajout est significative ?

La différence entre ajout est pas d’ajout est considérée non significative lorsqu’aucune
modification du résultat n’a été observée, alors qu’elle est significative dès que les
résultats étaient faussés par la plus faible concentration en bilirubine ajoutée. [3]

4. Détermination du seuil ictérique

Critére d’acceptabilité : 10% de la valeur initiale [4]

12
IV. Lipémie

La lipémie est provoquée le plus souvent par une augmentation de la concentration des
triglycérides qui peut être en rapport avec l’alimentation, une anomalie du métabolisme
lipidique ou bien une perfusion des lipides. [2]

1. Echantillon lipémique

Il s’agit d’un échantillon dont le sérum ou le plasma a un aspect trouble, translucide ou

laiteux dû à l’augmentation des lipides [2]

Figure 5 : Echantillon lipémique

2. Surcharge en intralipide des échantillons plasmatiques

La méthode de surcharge en intralipide consiste à réaliser à partir d’une solution

d’intralipide 20% une gamme de concentration variant de 0 à 2500 mg/dl. L’indice de
lipémie est déterminé sur des échantillons de la gamme d’intralipide Chaque concentration
de cette gamme est ajoutée à des plasmas de concentration variable pour chacun des
paramètres étudiés. [3]

13
 La corrélation entre l’indice de lipémie et la concentration en intralipid exprimée en
mg/dl fournit une droite de pente (a=0,996) et d’ordonnée à l’origine (b= -41) avec un
coefficient de corrélation (r=0,998) [3]

FIGURE 6 : Corrélation entre la concentration en intralipide et l’indice de lipémie

3. Quand juger que la différence entre ajout/pas d’ajout est significative ?

La différence entre ajout est pas d’ajout est considérée non significative lorsqu’aucune
modification du résultat n’a été observée, alors qu’elle est significative dès que les
résultats étaient faussés par la plus faible concentration en intralipid ajoutée. [3]

4. Détermination du seuil lipémique

Critére d’acceptabilité : 10% de la valeur initiale [4]

14
Exemple :

Glycémie

D’après le pharmacien Ali Damien (2014-2015) [3]

 Quand agit l’hémolyse sur le dosage de glycémie ?

Aucune interférence n’est observée jusqu’un indice H de 1000 mg/dl

 Quand agit l’ictère sur le dosage de glycémie ?

Aucune interférence n’est observée jusqu’un indice I de 60 mg/dl

 Quand agit la lipémie sur le dosage de glycémie ?

Aucune interférence n’est observée jusqu’un indice L de 1000 mg/dl [3]

D’après le fabricant Roche (2017) [4]

 Quand agit l’hémolyse sur le dosage de glycémie ?

Aucune interférence n’est observée jusqu’un indice H de 1200 mg/dl

 Quand agit l’ictère sur le dosage de glycémie?

Aucune interférence n’est observée jusqu’un indice I de 60 mg/dl

 Quand agit la lipémie sur le dosage de glycémie ?

Aucune interférence n’est observée jusqu’un indice L de 1900 mg/dl [4]

15
 V. Interférences : [4]

1. Pour l’hémolyse :

Les paramètres sensibles sont : Aspartate-amino-transférase, cholestérol total, créatine

kinase, créatinine, lactate déshydrogénase, magnésium, phosphore, protéines totales,
triglycérides, sodium, potassium, chlore, bilirubine totale, bilirubine directe, acide urique.
alanine-amino-transférase, gamma glutamyl-transférase, lipase, phosphatase alcaline,
troponine T hypersensible,

2. Pour l’ictère :

Les paramètres sensibles sont : Créatinine, cholestérol total, HDL cholestérol,

phosphatase alcaline, protéines totales, triglycérides.

3. Pour la lipémie :

Les paramètres sensibles sont : Alanine-amino-transférase, albumine, aspartate-amino-

transférase, magnésium.

16
VI. La biotine :

1. Définition :

La biotine ou la vitamine B8, également appelée vitamine H, est une molécule

hydrosoluble qui joue un rôle essentiel dans la production d’énergie à partir des nutriments,
ainsi que dans la synthèse d’acides gras et des acides aminés .Elle est à la fois apportée par
l’alimentation(Les pois, les haricots, le foie, le soja, la levure de bière...) et fabriquée par la
flore intestinale. Elle contribue au maintien des cheveux, de la peau, et de muqueuses
normales.

a) Structure moléculaire : [5]

b) Formule brute de la biotine : [5]

C10H16N2O3S

c) Température de fusion de la biotine : [5]

231-233 °C

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 2. Les médicaments qui contiennent de la biotine :

ALVITYL, AZINC COMPLEXE, BEROCCA, BEROCCA S/S, BIOTINE BAYER,

BIOTINE ROCHE, CERENDAY, CERNEVIT, QIZENDAY, SOLUVIT, SUPRADYNE,
SURVITINE …

3. Les doses de biotines qui peuvent être ingérées: [4]

Les apports nutritionnels conseilles sont de 50µg par jour (0,05 mg) et une
alimentation équilibrée couvre normalement les besoins.

Lorsqu’elle est utilisée pour soigner des problèmes de peau ou d’ongles, la biotine est
habituellement prescrite à la dose de 15mg par jour (3 comprimés par jour pendant 6
semaines).

4. Effets indésirables

Des manifestations d’hypersensibilité d’allure allergique, principalement cutanées

(urticaire, angioedéme, prurit ...)

5. Les valeurs physiologiques normales de biotine : [4]

La biotine est dosée par l’analyse d’un prélèvement sanguin ponctionné par une simple
prise de sang. Si les valeurs de référence peuvent varier en fonction de la méthode de
dosage, elles sont généralement comprises entre 0,5 et 3,3 nmol/l

6. La pharmacocinétique de la biotine : [4]

La demi-vie de la biotine varie de 8 à 19 heures.

Puisque la biotine est toujours absorbée par voie orale (Per Os), alors la quantité de
médicament qui atteint la circulation générale est en fonction :

 de la quantité absorbée par l’épithélium digestif

18
  processus d’élimination pré-systémique

7. Interférences dans les immunodosages : [6]

Certaines techniques d’immunodosages utilisent le complexe streptavidine-anticorps

biotinylés. Ces dosages sont soumis à interférences en particulier avec la prise de biotine.

La biotine est utilisée dans le traitement de certaines métaboliques génétiques,

troubles du métabolisme énergétique mitochondrial, et plus récemment à fortes doses dans
la sclérose en plaque. Elle est disponible sans ordonnance comme complément alimentaire,
parfois à doses élevées.

Des concentrations supra-physiologiques sériques en biotine peuvent induire des

interférences dans les dosages biologiques.

‘’Il est de ce fait impératif d’informer le laboratoire de la prise éventuelle de

biotine lors de la prescription d’analyses biologiques afin d’évaluer les analyses
pouvant interférer avec le traitement ‘’

Tableau 1 : Les paramètres influencés par la biotine et les conséquences

d’interférences [6]

19
 8. Interférence de biotine sur le dosage de TSH :

Principe de dosage de TSH :

Méthode ‘’Sandwich’’ [4]

Durée totale du cycle analytique : 18 minutes

 1 ère incubation : 50 µl d’échantillon sont mis en présence d’un anticorps

monoclonal anti-TSH biotinylé et d’un anticorps monoclonal anti-TSH
ruthénylé. Il se forme un sandwich.
 2 éme incubation : les microparticules tapissées de streptavidine sont ajoutées dans
la cuvette réactionnelle. Le complexe immun est fixé à la phase solide par une
liaison streptavidine-biotine.
 Le mélange réactionnel est aspiré dans la cellule de mesure où les microparticules
sont maintenues au niveau de la surface de l’électrode par un aimant. L’élimination
de la fraction libre est effectuée par le passage de ProCell ou ProCell M. Une
différence de potentiel appliquée à l’électrode déclenche la production de
luminescence qui est mesurée par un photomultiplicateur.
 Les résultats sont obtenus à l’aide d’une courbe de calibration. Celle-ci est générée
spécifiquement par l’analyseur utilisé pour une calibration en 2 points et une courbe
de référence mémorisée dans l’étiquette code-barres ou le e-code-barres du réactif.
[4]

Figure 4 : Principe du dosage de TSH

20
Lors d’une interférence due à la biotine :

La biotine exogène prenant alors la place des anticorps biotinylés du dosage sur la
streptavidine des microparticules, ce qui provoque une baisse de signal. Cette diminution
de signal est alors faussement interprétée comme une diminution de la concentration de
l’analyte. [7]

9. Exemples :

Exemple 1 :

Observation

Une patiente âgée de 70 ans, atteinte d’une sclérose en plaque, était adressée en
consultation pour une hyperthyroïdie. Elle présentait une TSH diminuée et des hormones
thyroïdiennes périphériques (T3-T4) très élevées, alors que l’examen clinique ne trouvait
aucun signe d’hyperthyroïdie (asthénie, amaigrissement, sueurs, palpitations, irritabilité,
troubles du sommeil)

Discussion

La patiente était hospitalisée suite à un bref épisode de trouble de conscience

spontanément résolutif. Le bilan étiologique était négatif. Un premier bilan thyroïdien était
réalisé 17 jours avant la consultation, à son entrée en hospitalisation. Il trouvait une TSH
abaissée à 0,012 mUI/l (N= 0,36 – 3,74), une T3 et une T4 très élevées, respectivement
supérieures à 46 pmol/l (N=3,3 – 6,1) et à 103 pmol/l (N= 9,8 – 18,8). Le dosage n’avait
pas été précédé par la réalisation d’injection de produit de contraste iodé.

Le bilan était contrôlé 6 jours plus tard. La TSH était normalisée à 1,91 mUI/l, tout comme
la T3 à 6 pmol/l et la T4 à 13 pmol/l. Les anticorps anti-récepteurs de la TSH et les
anticorps anti-thyroglobuline étaient négatifs. L’ordonnance habituelle de la patiente
n’avait pas été modifiée ni pendant, ni après l’hospitalisation.

21
Un nouveau contrôle était réalisé 3 jours plus tard alors que la patiente était sortie
d’hospitalisation depuis 2 jours. Il trouvait une TSH diminuée à 0,022 mUI/l, une T3
augmentée à 10,35 pmol/l et une T4 augmentée à 76,4 ng/l (N= 11,93 – 21,81). Il
s’agissait du dernier bilan réalisé avant la consultation d’endocrinologie et il était à
nouveau évocateur d’une hyperthyroïdie.

L’antécédent de sclérose en plaque amenait à rechercher une prise biotine, que la patiente
confirmait prendre depuis environ 6 mois, bien que n’apparaissant pas sur son ordonnance
habituelle. Elle avait pris de la biotine jusqu’au jour de sa première hospitalisation, mais
n’avait pas pu la prendre pendant son séjour hospitalier. Elle l’avait prise à nouveau dès sa
sortie de l’hospitalisation. Le premier bilan thyroïdien avait donc été réalisé sous biotine, le
deuxième après 6 jours d’arrêt, et le troisième 2 jours après la reprise du traitement par
biotine.

La patiente est demandée d’arrêter de prendre la biotine avant un nouveau contrôle du

bilan thyroïdien 7 jours plus tard. Ce dernier était normal avec une TSH à 1,57 mUI/l, une
T3 à 3,67pmol/l et une T4 augmentée à 13,09 pmol/l. Les bilans thyroïdiens étaient donc
normaux lors des 2 périodes d’interruption de la biotine. [8]

Exemple 2 :

Une patiente de 77 ans s’est vue découvrir une hyperthyroïdie majeure avec positivité
des anticorps anti-récepteur de la TSH évoquant une maladie de Basedow.

La patiente était asymptomatique et devant cette discordance clinico-biologique, une

interférence de dosage par la biotine a été évoquée. Après une suspension du traitement de
72 h, le bilan thyroïdien s’est normalisé avec des anticorps négatifs. [9]

Exemple 3 :

Une patiente âgée de 48 ans, traitée par biotine à haute dose, présente une thyroïdite
multinodulaire à l’échographie, tout en étant asymptomatique avec un examen clinique
normal. A la biologie ; TSH à 0,005 mU/l, T4 à 59,9 ng/l, anticorps anti-TPO positifs à

22
>600 UI/L (seuil>34) et anti-TG à 591 UI/L (seuil>115). La biologie faite 5 jours après
l’arrêt de la biotine montre une normalisation (TSH à 0,58 mU/L, T4L à 9,5 ng/l) [10]

Exemple 4 :

Une patiente de 42 ans, présente une biologie avec TSH à 0,008 mU/l , T4L à 41 ng/l et
anti-TPO positifs à 364 UI/L avec des signes cliniques étonnamment modérés de
thyrotoxicose (perte de 2 Kg, irritabilité, thermophobie, absence de tachycardie). Le doute
sur une interaction avec la biotine à haute dose ainsi que son inefficacité sur la sclérose en
plaque conduisent à son arrêt. Deux semaines plus tard, la biologie est normale (TSH à
1,82mU/l, T4L à 9,6 ng/l), avec négativité des anti-TPO. [10]

23
Chapitre II : Matériels et méthodes

1. Population étudiée

Cette étude est réalisée sur des patients qui se rendent au laboratoire pour effectuer des
examens biologiques et en particulier chimiques et sérologiques, et qui ont un aspect du
sérum hémolysé, ictérique ou lipémique.

2. Tubes utilisés

Les dosages chimiques et sérologiques s’effectuent sur un spécimen de sang prélevé dans
des tubes à bouchon vert (pour les tests de chimie) et des tubes à bouchon jaune (pour les
tests de sérologie)

 Le tube à bouchon vert contient un anti coagulant : l’héparine de lithium

 Le tube à bouchon jaune ne contient aucun anti coagulant mais il est caractérisé par
la présence d’un gel séparateur entre les cellules sanguines et le plasma

3. Etapes de travail
a) Centrifugation

Les prélèvements sont mis dans la centrifuge afin de séparer les cellules sanguines du
plasma, l’aspect du sérum est généralement remarquable à l’œil nu par la couleur différente
de la normale.

Pour les tubes verts : 1000 tours par minute pendant 2 minutes

Pour les tubes jaunes : 4000 tours par minutes pendant 10 minutes

b) Mesure de la valeur d’aspect

La mesure de la valeur d’aspect du sérum est effectuée par des appareils automatiques
spécialisés :

Cobas e 411 pour les dosages de sérologie

24
C’est un analyseur automatisé qui repose sur la technologie brevetée de
l’électrochimiluminescence (ECL) pour réaliser des analyses de test immunologiques. Il a
été développé pour des dosages in vitro quantitatifs et qualitatifs pour une large gamme
d’applications (notamment les marqueurs de l’anémie et les marqueurs osseux, cardiaques
et tumoraux, les soins intensifs, la fertilité/les hormones, les soins de grossesse et les
maladies infectieuses)

Figure 5 : Cobas e 411 pour les dosages de sérologie

C’est un analyseur sélectif patient par patient, a accès aléatoire et continu. Intégration de 4
principes de mesure (absorbance, turbidimétrie, polarisation de fluorescence, dépistage de
drogues urinaires), avec une capacité de 36 paramètres en ligne.

25
Figure 6 : Intégra 400 pour le dosage de chimie

4. Explication :

On compare la valeur trouvée pour chaque aspect avec les valeurs du tableau suivant afin
de savoir s’il y a présence d’hémolyse, d’ictère ou bien de lipémie, et son échelle.

Tableau 2 : Tableau des indices de référence (Roche)

5. Exemple pour hémolyse :

Un prélèvement identifié par 21O357 a été reçu le 11/06/2021 pour faire un dosage de
potassium est LDH, alors que leur résultat d’aspect est la suivante :

 Hémolyse : 405
 Ictère :0

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  Lipémie : 17

Après comparaison avec les valeurs du tableau, on a trouvé que cet échantillon et
hématique avec échelle de 3+ parce que 200≤ 405 ≤500

6. Exemple pour ictère :

Un prélèvement d’un nouveau-né identifié par 21F404 a été reçu le 10/06/2021 pour faire
un dosage de GGT, alors que leur résultat d’aspect est la suivante :

 Hémolyse : -2
 Ictère : 15
 Lipémie : 25

Après comparaison avec les valeurs du tableau, on a trouvé que cet échantillon et ictérique
avec échelle de 3+ parce que 10≤ 15≤20

Alors on ne peut pas faire ce dosage, il est nécessaire de prendre un traitement pour baisser
la bilirubine chez ce nouveau-né

7. Exemple pour lipémie :

Un prélèvement identifié par 21E629 a été reçu le 10/06/2021 pour faire un dosage de
LDL, alors que leur résultat d’aspect est la suivante :

 Hémolyse : 23
 Ictère :1
 Lipémie : 55

Après comparaison avec les valeurs du tableau, on a trouvé que cet échantillon et
lipémique avec échelle de 1+ parce que 50≤ 55≤100

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Chapitre III : Résultats et discussion

Après la détection d’un échantillon hémolysé, lipémique ou ictérique pour lequel un

dosage est impacté vient la question du rendu du résultat. Deux stratégies existent :

 La première consiste à ne pas rendre le résultat, d’informer le patient et de

demander un nouvel échantillon.
 La deuxième solution, celle qui parait la plus adaptée et celle qui est choisi
d’employer au sein du laboratoire, est de rendre le résultat du dosage accompagné
d’un commentaire précisant le sens voire le niveau de l’interférence.

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Conclusion :

Cette étude confirme l’importance de maitriser la mesure d’interférence d’hémolyse,

d’ictère, de lipémie ou de biotine sur chaque échantillon et conduit à des
recommandations : le biologiste doit avoir une bonne connaissance de l’impact de
l’interférence sur les examens de biologie médicale qu’il effectue, et en cas d’un
échantillon détecté , il est conseillé d’accompagner le résultat d’un commentaire pertinent,
ce commentaire doit être gradué en fonction du degré d’interférence trouvée et de l’impact
clinique du résultat.

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Références :

[1] Buchman M, Esther F, Kessler D. ’’Erreurs pré-et post-analytiques identifiées par le

CQE’’.Avril 2016 : 1

[2] Olivier P-S, André D, Kessler D. ‘’ Echantillon hémolysé, lipémique, ictérique’’. Juin
2010 : 1-2

[3] Damien A, ‘’Interférences de l’hémolyse, de la lipémie, et de l’ictère sur le dosage des

principaux paramètres chimiques’’. Juin 2015 : 27-59

[4] Fiches techniques Roche Diagnostics

[5] Degraeve S, ‘’Evaluation de l’interférence de la biotine sur certains immunodosages’’.

Juillet 2019 : 1-2

[6] Morin Y, Barets M. ‘’ Biotine et interférences dans les immunodosages’’. Avril 2018 :
1-2

[7] Ranaivosoa MK, Ganel S, Arnaud A, Romain S, Parent X, Reix N. ‘’Insuffisance

rénale chronique et biotine: un duo propice aux bilans thyroïdiennes et parathyroïdiens
erronés, à propos de 2 cas’’2017 :4

[8] Benjamin B, Alexia R. ‘’La prise de biotine à fortes doses : une cause
d’hyperthyroïdie biologique factice ‘’2019 : 4-5

[9] Nguyen A, Fromont A, Duvillard L, Moreau T, Denimal D, Charpin E, Verges B.

‘’Attention aux interférences dans le dosage des hormones thyroïdiennes par les nouveaux
traitements par biotine utilisés dans la sclérose en plaque’’. 2016 :230

[10] Garon-Czmil J, Petitpain N, Swiegot D, Weryha G, Klein M, Gillet P. ’’De fausses

thyroïdites au cours de la SEP, cherchez la biotine’’2018 : 164

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