REACTIFS BIOLABO

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Factor X Plasma Déficient
FABRICANT : Plasma immuno-déplété pour le dosage du Facteur X
BIOLABO SAS, dans le plasma humain citraté
Les Hautes Rives
02160, Maizy, France REF 13310 R1 6 x 1 mL

SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES

Tel : (33) 03 23 25 15 50
Fax : (33) 03 23 256 256
| IVD USAGE IN VITRO

INTERET CLINIQUE (1) (2) (7) (8) PREPARATION DES REACTIFS

Le Réactif Factor X-Plasma Déficient est utilisé pour la détermination • Ouvrir un flacon avec précaution, ajouter exactement 1 mL d’eau
de l’activité du Facteur X (F.X) dans le plasma humain par toute déminéralisée.
méthode de mesure du temps de coagulation sur coagulomètre ou • Refermer le bouchon et laisser reposer 10 à 20 minutes à
automate d’hémostase. température ambiante (20-25°C).
Le facteur X est activé en F.Xa par : • Avant l’emploi, homogénéiser le lyophilisat en remuant doucement
- le complexe facteur IXa-Ca++-Phospholipides-facteur VIIIa pour éviter la formation de mousse.
- Le complexe facteur tissulaire-F.VIIa
ATTENTION : NE PAS AGITER. PROTEGER DE LA LUMIERE
Le F.Xa forme avec le facteur Va, les phospholipides et le Ca++ un
complexe (la Prothombinase) qui transforme la prothrombine en
thrombine. PRECAUTIONS
Le F.Xa peut activer le Facteur VII en F.VIIa. Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
Le Facteur Xa est inhibé par l’antithrombine III associée ou non à usage in vitro.
l’héparine. Lorsque le F.Xa est fixé sur une surface phospholipidique, • Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
cette inhibition est fortement diminuée. • Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
On note un déficit en facteur X dans les cas suivants : • Ne pas pipeter avec la bouche.
- Déficit congénital en facteur X • En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
- Déficit associé à ceux des facteurs II, VII, IX l’eau et consulter un médecin.
• Carence d’apport ou d’absorption en vitamine K (maladie • La fiche de données de sécurité est disponible sur simple demande.
hémorragique du nouveau né, ictère par rétention, traitement par • Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
les antibiotiques) • Chaque plasma provenant d’un donneur humain et utilisé pour la
• Traitement médicamenteux antivitamine K préparation de ce contrôle a été analysé et a donné des résultats
- Déficit associé à ceux des facteurs II, V, VII négatifs pour l’antigène Hbs et les anticorps de l’hépatite C et du
• Insuffisances hépatiques dues aux cirrhoses, hépatites VIH-1, VIH-2. Cependant, aucun test ne peut garantir de façon
• Fibrinolyse absolue l’absence de tout agent infectieux
• Coagulation intravasculaire disséminée (CIVD) Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine
- Déficit acquis lors d’amylose biologique comme potentiellement infectieux. Respecter la législation
en vigueur.
Coagulation et atteinte hépatique :
En présence de vitamine K, le foie synthétise les facteurs II, VII, IX et STABILITE ET CONSERVATION
X. Toute atteinte hépatique peut donc se traduire par une diminution
du taux des facteurs plasmatiques se traduisant par des troubles Lyophilisats, avant ouverture : stable jusqu'à la date de péremption
hémorragiques. indiquée sur l’étiquette, s’il est utilisé et conservé comme indiqué dans
Evolution du taux des facteurs II, V, VII et X au cours d’hépatites : la notice.
Après reconstitution : stable 8 heures à température ambiante.
Diagnostic Pronostic
Hépatites Ne pas utiliser le plasma reconstitué après la date de péremption
Facteurs VII et X Facteur II Facteur V indiquée sur l’étiquette du coffret.
Bénignes N N N N
< 50% PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (3)
Plasma (citraté).
Prolongées N N
Mélanger le sang fraichement prélevé (9 volumes) avec une solution
tamponnée de citrate trisodique 3.2% (1 volume).
Graves N
Centrifuger 10 min à 3000 g et prélever le surnageant.
Jour 1 Jour 10 Jour 1 Jour 10 Jour 1 Jour 10
Conservation en tube plastique : 4h à 20-25°C, 6h à 2-8°C
N= Normal Ne pas conserver le plasma à 2-8°C en cas de dosage simultané du
facteur VII car le facteur VII est susceptible de s’activer à cette
PRINCIPE température (système des kallicréines).
Le principe de la méthode, consiste à déterminer, en présence de
thromboplastine tissulaire et de calcium, le temps de coagulation d’un INTERFERENCES (4)
système où tous les facteurs sont présents en excès (apportés par le Les inhibiteurs de la thrombine (ex : hirudine, argatroban…), présents
Factor X-Plasma Déficient) à l’exception du Facteur X amené par le dans le plasma des patients à tester peuvent conduire à une sous-
plasmas de patient à tester. Ce dosage peut être réalisé à l’aide des estimation du taux de facteur II dans ce plasma.
réactifs BIOLABO suivants : Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
dosage.
REF 13702, 13704, 13712 :
BIO-TP LI (Low ISI) Taux de Prothrombine (TP) REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
REF 13885, 13880 et 13881 : BIO-TP Taux de Prothrombine (TP) 1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
2. Réactif indiqué au § PRINCIPE
REACTIFS 3. REF 13883 : Tampon Owren Koller pour l’établissement de la droite
de Thivolle (résultats en %)
Flacon R1 Facteur X Plasma Déficient 4. REF 13970 : BIO-CAL Plasma de référence
5. REF 13971 et REF 13972 : COATROL 1 et COATROL 2
Plasma humain lyophilisé citraté dépourvu de Facteur X par 6. Papier millimétré
immuno-adsorption spécifique.

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 25/03/2015

 CALIBRATION MODE OPERATOIRE

• REF 13970 : BIO-CAL Plasma de référence pour la calibration des Technique manuelle
tests de coagulation Préparer une gamme de dilution avec REF 13970 : BIO-CAL Plasma
de référence dans du tampon Owren Koller comme suit :
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur
et des conditions de conservation du réactif. Dilutions 1/d 1/10 1/20 1/40 1/80
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants : Plasma de référence (mL) 0,1 0,1 0,1 0,1
1. Changement du lot de réactif.
2. Après opérations de maintenance sur l’analyseur. Tampon Owren Koller (mL) 0,9 1,9 3,9 8,0
3. Les valeurs de contrôle obtenues sortent des limites de confiance,
même après utilisation d’un deuxième flacon de plasma de contrôle Préincuber la Thromboplastine au moins 15 minutes à 37°C.
fraîchement reconstitué. Homogénéiser le réactif avant pipetage.
Déterminer les temps de coagulation de chaque point de la gamme
CONTRÔLE DE QUALITE
comme suit :
• REF 13971: COATROL 1 Taux 1
Plasma de référence 1/10 à 1/80 0,1 mL
• REF 13972: COATROL 2 Taux 2
• Tout autre plasma de contrôle titré pour cette méthode. Plasma Déficient 0,1 mL
• Programme externe de contrôle de la qualité. Incuber 2 minutes à 37°C.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants : Thromboplastine (préincubée à 37°C): 0,2 mL
• Au moins un contrôle par série.
Déclencher le chronomètre simultanément.
• Au moins un contrôle par 24 heures.
• Changement de flacon de réactif. Agiter et rechercher le moment de la coagulation en remuant le tube
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur. de façon à l’amener presque à l’horizontale, sous un bon éclairage..
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de
Procéder de même pour les contrôles et plasmas à tester
confiance indiquées, appliquer les actions suivantes :
1. Répéter le test en utilisant le même contrôle. préalablement dilué au 1/10 dans le tampon Owren Koller :
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un plasma Contrôles ou plasmas de patients (dilué 1/10) 0,1 mL
de contrôle fraichement reconstitué et répéter le test. Plasma Déficient 0,1 mL
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
calibrant ou un calibrant fraichement reconstitué et répéter le test. Incuber 2 minutes à 37°C.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer à nouveau Thromboplastine (préincubée à 37°C): 0,2 mL
en utilisant un autre flacon de réactif et répéter le test.
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service Technique automatique
technique BIOLABO ou le revendeur local. Les caractéristiques de sédimentation et la qualité optique de cette
thromboplastine permettent une détection optique ou mécanique de la
INTERVALLES DE REFERENCE (6) (7) formation du caillot. Se référer au manuel d’utilisation du
coagulomètre utilisé.
Plasma (chez l’adulte) Généralement > 70% Remarque :
Des procédures spécifiques sont disponibles pour les analyseurs
Chez le nouveau né, le taux plasmatique de facteur X est faible: 30 à automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
50% des valeurs trouvées chez l’adulte.
Il est recommandé à chaque laboratoire d’établir ses propres valeurs
normales. CALCUL
Le résultat est déterminé d’après la formule suivante :
PERFORMANCES
Tracer la courbe de calibration à l’aide des résultats obtenus avec la
Les études de performances ont été réalisées sur SOLEA 100: gamme de calibration.
Intra-série Inter-série
N = 20 Niveau 1 Niveau 2 N = 20 Niveau 1 Niveau 2 Concentration %= f (temps de coagulation).
Moyenne Moyenne
93 33 97 57 Lire les concentrations (%) des contrôles et essais en reportant les
% %
temps de coagulation sur le graphe.
S.D. %: 2.4 1.9 S.D. %: 5.7 3.5
C.V. % : 2.6 5.7 C.V. % : 5.8 6.1 REFERENCES
Critères < 4% < 6% Critères < 8% < 10% (1) FAVRE-GILLY J., BELLEVILLE J., CROIZAT P., REVOL L.: “Les étatas
hémorragiques acquis par trouble plasmatique de la coagulation” cah. Méd.
Lyonnais, 43, 28, 2611-2628, 1967
Limite de détection: (2) CAEN J., LARRIEU M-J., SAMAMA M.: “L”hémostase, methods
d’exploration et diagnostic pratique” Paris, L’Expension scientifique, 153, 347,
Avec une dilution du plasma à tester au 1/10, la limite de détection de 1975
(3) GJOANNES H., FAGERHOL M.K.: “Studies on coagulation and fibrinolysis
la méthode se situe à 5 % de Facteur X in pregnancy” Acta Obstet. Gynecol. Scand., 54, 363-367, 1975
(4) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
LIMITE DE LINEARITE p.3-254 à 3-257
(5) BEZEAUD A., GUILLIN M-C., OLMEDA F., QUINTANA M., GOMEZ N.:
La réaction est linéaire jusqu’à 110 % avec une dilution au 1/10 des “Prothrombin Madrid: a new family of abnormality of prothrombin” Thromb.
Res., 16, 47-58, 1979
plasmas à tester.
(6) ANDREW M., PAES B., MILNER R., JOHNSTON M., MITCHELL L.?
TOLLEFSEN D.M., POWERS P.: “Development of the human coagulation
system in the full-term infant” Blood, 70, 165-172, 1987
(7) SAMAMA M., CONARD J., HORELLOU M.H., LECOMPTE T.: “Physiologie
et exploration de l’hémostase”. PARIS: DOIN, 81-82, 112-118, 1990
(8) SAMPOL J., ARNOUX D., BOUTIERE B.:”Manuel d’Hémostase” Paris:
Editions scientifiques et médicales Elsevier,46-48, 364-366, 395-405, 1995

IVD REF LOT →

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