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    Proprietes Des Proteines

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    Le document décrit les différents facteurs influençant la solubilité des protéines comme le pH, la force ionique, la température, les solvants organiques, les détergents et les agents chimiques. Il explique également le caractère amphotère des protéines et comment estimer leur point isoélectrique.

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    PROPRIETES DES PROTEINES

    SOLUBILITE
    INFLUENCE DU PH

    La solubilit dune protine est minimum pour une valeur de


    pH gale son phi, car ce pH la protine se comporte
    comme une molcule neutre et ses possibilits dinteraction
    avec leau par le biais de liaisons hydrognes sont donc
    minimum.

    SOLUBILITE
    INFLUENCE DE LA FORCE
    IONIQUE

    Les sels interviennent la fois par leur charges et leur


    concentrations.

    U=

    c.z

    *C: concentration de chaque ion.


    *Z: valence de chaque ion.
    Les protines sont solubles faible force ionique, alors
    qu force ionique leve(concentration en sels
    augmente) les protines prcipitent : cest leffet de
    relargage: utilis dans les techniques de prcipitation
    par les sels: sulfate dammonium.

    EXPLOITATION DU PHNOMNE DE
    RELARGAGE PAR LES SELS
    Plus une molcule est polaire, plus la force ionique devra
    tre importante pour observer le phnomne de relargage
    par les sels.
    Pour une force ionique donne, certaines protines
    pourront tre encore solubles alors que dautres auront
    dj t prcipites.
    Ce principe est couramment utilis lors des premires
    tapes de purification dune protine pour sparer
    rapidement et moindre cot les protines des autres
    composants prsents dans le milieu.
    Il est galement envisageable dexploiter le phnomne
    de relargage par les sels afin de sparer des protines.

    SOLUBILITE
    INFLUENCE DE LA
    TEMPERATURE

    Llvation thermique est un facteur de dnaturation des


    protines et par consquent de leur prcipitation.
    En dessous de 40, la T favorise la solubilit de certaines
    protines.
    La dnaturation dune protine correspond la destruction
    des liaisons qui maintiennent en place les niveaux de
    structure quaternaires (sil y a lieu), tertiaires et secondaires.
    La protine se prsente sous une configuration
    dsordonne, seule la structure primaire nest pas
    perturbe. En consquence, la protine nest plus sous sa
    forme native et a donc perdu son activit biologique.
    Suivant les facteurs de dnaturation, le processus peut tre
    rversible ou irrversible.

    SOLUBILITE
    INFLUENCE DES SOLVANTS
    ORGANIQUES

    Les protines sont insolubles.

    Augmentent les forces dattraction et facilitent ainsi


    lagrgation des protines entre elles.

    SOLUBILITE
    INFLUENCE DES DETERGENTS

    Pntrent dans le cur des protines et perturbe les


    interactions hydrophobes.
    le dsoxycholate de sodium qui facilite le passage en
    solution de certaines protines enzymatiques.

    SOLUBILITE
    INFLUENCE DES AGENTS
    CHIMIQUES

    Ure et Guanidine:

    Facilitent la pntration de leau dans les protines, ce


    qui perturbe les interactions hydrophobes et les liaisons
    hydrognes.
    Mercaptothanol entrane la rupture des ponts
    disulfures.
    Lacide trichloractique 5% provoque la prcipitation
    des protines.

    CARACTERE AMPHOTERE

    Les protines possdent au moins deux fonctions


    caractre acido-basique (extrmits N et C terminales), elles
    ont donc un caractre amphotre.
    La charge globale dune protine sera fonction du bilan des
    charges prsentes sur chaque site acido-basique.
    Cette charge globale pourra tre positive, nulle ou ngative.
    La protine pourra, en fonction du pH du milieu dans lequel
    elle se trouve, se comporter comme un cation, comme une
    molcule neutre ou comme un anion.
    Le pH ou 100 % de la protine est sous forme globalement
    neutre (forme zwitterion) correspond au pHi de la protine.
    Lorsque le pH est infrieur au pHi, la forme majoritaire de la
    protine est la forme cation.
    Lorsque le pH est suprieur au pHi de la protine la forme
    majoritaire de la protine est la forme anion.

    ESTIMATION DU PHI DUNE PROTINE

    Le pHi dune protine dpend du pKa de chaque fonction


    acido-basique.
    Sachant que le pHi correspond au pH o la protine est
    entirement sous la forme zwitterion, on peut facilement
    estimer sa valeur par une quation du type:
    pHi = 1/2 (pKa1 +pKa2) avec pKa1 et pKa2 correspondant
    aux pKa des couples acidobasiques impliqus dans la
    formation de la forme zwitterion.

    Le bilan des charges montre que la forme zwitterion


    (charge globale de la protine gale 0) est
    majoritaire entre pH 3,86 et pH 9,69.
    On aura une valeur proche de 100 % de forme
    zwitterion entre ces deux pH.
    On peut donc estimer le pHi de cette protine :
    pHi 1/2 (3,86 + 9,69) 6,775

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