Módulo 8 Control de Calidad en Inmunohematología

CONTROL DE CALIDAD
EN
INMUNOHEMATOLOGÍA
M G . J O S É A N TO N I O PA R E D E S A R R A S C U E
P R O F E S O R P R I N C I PA L – FA C U LTA D D E M E D I C I N A – U . N . M . S . M .
T E C N Ó L O G O M É D I C O – S E RV I C I O D E M E D I C I N A T R A N S F U S I O N A L - H N E R M
Control de Calidad en Inmunohematología
PROPÓSITO:
◦Dar seguridad y proveer una calidad
buena y uniforme minimizando los errores
Clasificación de los errores
1. Errores de organización o SISTÉMICOS:
◦ debido a una incorrecta identificación de las muestras, o
◦ error en la transcripción o
◦ en llenado de resultados
2. Errores técnicos o individuales:
◦ debido a los equipos (no calibrados sin mantenimiento preventivo, esperar
a que se malogren para recién intervenir
◦ reactivos no controlados y seguidos en su performance
◦ técnicas o procedimientos no estandarizadas
Control de Calidad en Inmunohematología
Control de calidad interno
Control de calidad externo
Control de calidad interno
1. Control de calidad de equipos
2. Control de calidad de reactivos
3. Control de calidad de técnicas
Control de calidad interno EQUIPOS
Centrifugas
Lavadores celulares automáticos
Incubadoras
Refrigeradoras
Congeladoras
Control de Calidad de
Centrifugas de
Serología
Control de calidad de centrífugas de -
Serología
MUESTRAS:
◦ Suspensión de Glóbulos rojos grupo O Rh positivo al 5%
◦ Suspensión de Glóbulos rojos grupo O Rh negativo al 5%
◦ Frasco de Anti D comercial
Serología
PROCEDIMIENTO
Preparar dos series de tubos de vidrio 12 x 75, de 5 tubos cada una, la primera
rotularla como POSITIVO, la segunda como NEGATIVO.
Agregar una gota de las células a su serie respectiva.
Agregar una gota del Anti D a cada serie, justo inmediatamente antes de
centrifugar.
Se centrifugan los tubos por parejas, (positivo y negativo)
El primer par comenzando por 10 Segundos, se lee, se anota y se descarta.
A continuación se hace lo mismo con cada par aumentando en 5 segundos.
Serología
POSITIVO NEGATIVO
Muestra 1 (GR O Rh positivo al 5%) 1 gota
Muestra 1 (GR O Rh negativo al 5%) 1 gota
Centrifugar por parejas a 3,500 r.p.m. comenzando por 10
segundos
Anotar resultados según tabla adjunta
Repetir los pasos anteriores, ir incrementando 5 segundos por
cada vez, usando un juego nuevo de tubos, recién dispensados
Se evalúa por cada tiempo
Delimitación del botón
Facilidad de desprendimiento
Grado de aglutinación resultante
Sobrenadante libre de hematíes
Criterios de control 10” 15” 20” 30” 45”
+ - + - + - + - + -
Liquido sobrenadante claro
Botón celular claramente definido
Células fácilmente resuspendidas
Reacciones negativas bien definidas
Grado de aglutinación para positivos
Interpretación
El tiempo óptimo de centrifugación es el tiempo más corto necesario
para cumplir estos criterios:
La aglutinación en los tubos positivos es tan fuerte como se
determina al preparar los reactivos.
No hay aglutinación ni ambigüedad en los tubos negativos.
El botón celular está claramente delineado y la película está bien
definida, no es vellosa.
Interpretación
El líquido sobrenadante es claro.
El botón celular se vuelve a suspender fácilmente.
De acuerdo con los resultados obtenidos se escoge el
tiempo mínimo en el cual el tubo POSITIVO resulte un botón
bien delimitado, fácil de desprender, con una aglutinación
clara (1+) y el sobrenadante libre de hematíes; y el
NEGATIVO presente un botón nítido, que se disgregue
fácilmente.
1.2 control de calidad
interno: REACTIVOS
Control de Calidad en
Inmunohematologia
1.2 Control Interno: REACTIVOS
Debe detectar la desviación de los requerimientos
mínimos de calidad establecidos (especificaciones).
Control de calidad de
antisueros
Al controlar un antisuero debe estudiarse
Especificidad
Potencia
Avidez
Titulo
Especificidad
A A A B B B D D D
Suero Anti A
Suero Anti B
Suero Anti D
GR A1 Rh Negativo al 5%
GR B Rh Negativo al 5%
GR O Rh POSITIVO al 5%
Centrifugar a 3 500 r.p.m. durante el tiempo que haya sido determinado en el control
de centrífuga
LECTURA
RESULTADO
AVIDEZ
En una lámina de vidrio desengrasada colocar 1 gota del reactivo a probar.
Colocar 1 gota de hematíes específicos al reactivo (al 40%) a una distancia de un centímetro de
la gota de antisuero.
Con una baqueta mezclar haciendo un circulo que no sea mayor a 2 cm. de diámetro
(Temperatura ambiente).
En el preciso instante en que se pone en contacto los hematíes y el antisuero disparar el
cronómetro.
Realizar movimientos de vaivén hasta que comiencen a formarse aglutinados de 1 mm2 , parar
el cronómetro.
Anotar el tiempo transcurrido en segundos.
Repetir la prueba con la misma muestra, la diferencia no deberá ser mayor de 3 segundos, en
caso contrario deberá repetirse hasta asegurar los resultados.
TITULACIÓN
DILUCIÓN 1 2 4 8 16 32 64 128 256 512
ANTISUERO 500 500
Ul Ul
SSF 500 500 500 500 500 500 500 500 500
Ul Ul Ul Ul Ul Ul Ul Ul Ul
Mezclar con una punta “nueva” y
trasvasar con esta al siguiente tubo sin
tocar las paredes de este
Trasvasar a nuevo juego de tubos, con
punta “nueva” cada vez
GR respectivos al 5%
Mezclar por agitación
Centrifugar a 3 500 r.p.m. durante el tiempo que haya sido determinado en el control de centrífuga
REULTADO
PUNTAJE - SCORE
Equivalencia
Aglutinación Puntaje
(cruces)
4+ 12
3+ 10
2+ 8
1+ 5
+/- 2
0 0
Ficha de control de
antisueros
Ficha de control de antisueros
I Aspecto General:
1. Examen macroscópico:
transparente ( ) ligeramente turbio ( ) turbio ( )
2. Tipo:
Humano ( ) Monoclonal ( ) Otros ( )
3. Marca:
4. Volumen:
5. Lote No.
6. Fecha de expiración:
7. Casa Comercial:
Ficha de control de antisueros
II Características Específicas:
1. Especificidad:
Células A1 Células A2 Células A1B Células A2B Células B Células O
Reacción
2. Potencia
 Avidez segundos
 Titulo dils
 Score puntos
3. Control microbiológico
 Se aíslan gérmenes SI ( ) NO ( )
 Germen(es) aislados:………………………………………………………………………
Potencia y Avidez requerida para
antisueros ABO
Título (potencia) Avidez (Seg)
Antisuero Células
en estudio usadas policlonal monoclonal policlonal monoclonal
A1 128 dils 256 dils 10 – 12 3–4

A2 64 dils 128 dils 15 – 20 5–6
Anti A A 1B 6ª dils 128 dils 20 – 30 5–6
A 2B 64 dils 64 dils 20 - 30 5-6
A1 128 dils 256 dils 10 – 12 3–4

Anti AB A2 64 dils 128 dils 15 – 20 5–6
B 128 dils 256 dils 10 - 12 3–4
Anti B B, A1B 128 dils 256 dils 10 - 12 3-4
Potencia y avidez requerida para sueros
anti D
Tipo de Reactivo (GR R1r) TITULO Avidez
CIS 37oC Segundos
IgM (monoclonal) 64 dils 128 – 256 dils 5 – 10
IgM + IgG (monoclonal blend) 32 – 64 dils 128 dils 10 – 20
IgG monoclonal 128 – 256 dils 15 – 20
IgG policlonal 32 dils 60
Control de calidad de GR
Parametros a Requerimientos de Frecuencia de Control ejecutado
revisar calidad control por
APARIENCIA No hemolisis ni Dario Grupos de
turbidez en el laboratorio
sobrenadante por
inspección visual
REACTIVIDAD Y Reacciones claras Cada lote en el 1er Grupos de
ESPECIFICIDAD con antisueros y ultimo día de la laboratorio
selectivos contra Ag vida útil especifica
de GR específicos de almacenamiento
Control de calidad de Antisuero ABO
Control de calidad de antisuero Rh
Control de calidad de antiglobulina
humana
Control de Calidad de Albúmina Sérica
Bovina
Control de Calidad de Solución Salina
Control de Calidad de LISS
1.3 CONTROL
INTERNO: TÉCNICAS
Proveída la calidad del equipo y de los reactivos, los
falsos resultados serán por la técnica misma, por lo
inadecuado del método o -más frecuente-por
“errores operacionales” como consecuencia de una
técnica inapropiada o interpretación incorrecta.
Necesariamente para cumplir este criterio se deberán
ESTANDARIZAR y protocolizar cada uno de los procesos.
Se deberá obtener el compromiso y fidelización de cada uno
de los integrantes del equipo
Se deberá realizar controles ciegos inopinados para verificar
la proficiencia.
[email protected]
Preguntas control
Para registrar la asitencia se deberán responder 2 preguntas control
1.- ¡que se debe informar en el control de calida de antisueros?

2. ¿cada cuanto tiempo se debe hacer el control de calidad de las centrìfugas de serología?
una opcional o comodin
3.- como establecemos el tiempo optimo de centrifugación para inmunohematologia
El correo al que deben responder es:
[email protected]

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Células A1 Células A2 Células A1B Células A2B Células B Células O

A1 128 dils 256 dils 10 – 12 3–4

A1 128 dils 256 dils 10 – 12 3–4

1.- ¡que se debe informar en el control de calida de antisueros?

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