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    Diapos Salmonella Solo Laboratorio

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    Este documento proporciona información general sobre las enterobacterias, un grupo de bacterias gramnegativas que incluye géneros como Escherichia, Salmonella y Shigella. Luego, se enfoca específicamente en Salmonella, describiendo sus características, los métodos para su aislamiento e identificación a través de pruebas bioquímicas como TSI, citrato, indol y pruebas adicionales.

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    Diapos Salmonella Solo Laboratorio

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    Este documento proporciona información general sobre las enterobacterias, un grupo de bacterias gramnegativas que incluye géneros como Escherichia, Salmonella y Shigella. Luego, se enfoca específicamente en Salmonella, describiendo sus características, los métodos para su aislamiento e identificación a través de pruebas bioquímicas como TSI, citrato, indol y pruebas adicionales.

    Descripción original:

    salmonella

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    Este documento proporciona información general sobre las enterobacterias, un grupo de bacterias gramnegativas que incluye géneros como Escherichia, Salmonella y Shigella. Luego, se enfoca específicamente en Salmonella, describiendo sus características, los métodos para su aislamiento e identificación a través de pruebas bioquímicas como TSI, citrato, indol y pruebas adicionales.

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    JUAN CARLOS RUMBO USTARIZ

    YARCELIS TORREZ MACHUCA

    FICHA:851830
    ENTEROBACTERIAS

    GENERALIDADES

     Bacilos y cocobacilos gramnegativos.


     Son aerobios o anaerobios facultativos.
     No formadores de esporas.
     Fermentadores de glucosa.
     Oxidasas negativas.
     Reducen nitratos a nitritos.
     La mayoría son móviles.
     Producen catalasa.
    INCLUYE GENEROS COMO:

    Escherichia sp Enterobacter sp Proteus sp

    Shigella sp Serratia sp Morganella sp

    Salmonella sp Citrobacte sp Providencia sp

    Klebsiella sp Edwarsiella sp Yersinia sp


     PRUEBA IMVIC
    Las pruebas son : Indol, Rojo de metilo, Voges-Proskauer y
    Citrato. El resultado de este test se expresa mediante
    símbolos de positivo o negativo (+ o -) según el resultado de
    cada prueba.
    SALMONELLA
     Se incluye en la familia Enterobacteriaceae
     Bacilos cortos ( 1-2 µm ).
     Gram negativos.
     Anaerobios facultativos.
     Fermentadores de la glucosa con producción de acido y gas
    (características general de Enterobacterias).
     Incapaz de hidrolizar la lactosa y sacarosa .
     Catalasa positivo.
     Oxidasas negativo.
     La mayoría son móviles: provistos de flagelos peritricos
     No formadoras de esporas.
    DETERMINACION DE SALMONELLA
    EL AISLAMIENTO DE SALMONELLA INCLUYE
    CUATRO ETAPAS FUNDAMENTALES:

    1. Enriquecimiento no selectivo.

    2. Enriquecimiento selectivo.

    3. Siembra en placa en agar selectivo y


    diferencial.

    4. Identificación.
    ENRIQUECIMIENTO NO SELECTIVO

    1. Pesar en la bolsa para stomacher previamente


    tarada 25 gr representativo de la muestra total.

    2. Añadir 225 ml de agua peptonada tamponada(medio


    de enriquecimiento no selectivo).

    3. Colocar a bolsa de stomacher y hacer funcionar el


    aparato por 2 minutos, el tiempo máximo de
    homogenización dependerá del tipo de alimento. No
    debe sobrepasar los 3 minutos.

    4. Incubar a 35- 37 °C por 18 a 24 horas


    ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO

    1. Transferir 1 ml de cultivo del enriquecimiento no


    selectivo en 10 ml de caldo selenito cisteína.

    2. Incubar en baño de María a 43°C por 18- 24 horas.

    3. Transferir 1 ml de cultivo obtenido del


    enriquecimiento no selectivo en 10 ml de caldo
    tetrationato, adicionado de 0.2 ml de solución de yodo
    y 0.1 ml de solución acuosa de verde brillante al 0.1 %

    4. Incubar en baño de María a 43 °C por 18 a 24 horas.


    SIEMBRA EN PLACA CON MEDIOS SELECTIVOS Y
    DIFERENCIALES
     Se deben utilizar mínimo 2 medios de cultivos
    selectivos por cada caldo de enriquecimiento no
    selectivo y selectivo. para el aislamiento del
    microorganismo.
     El laboratorio puede utilizar el medio diferencial
    de su elección.
    Se recomienda:
     Agar MacCONKEY
     Agar XLD (Agar de xilosa, lisina, Desoxicolato)
     Agar bismuto sulfito
    MEDIOS DE CULTIVOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES
    AGAR MACCONKEY (MCK). Las sales biliares y el cristal
    violeta ejercen una inhibición significativa sobre las
    bacterias Gram +. La lactosa y el indicador rojo neutro
    permiten comprobar la degradación de ese disacárido.
    XLD AGAR (AGAR DE XILOSA, LISINA,
    DESOXICOLATO)
     Las colonias en el medio se observan pequeñas
    de color rojas con centro de color negros por
    la producción de H2S.

    Salmonella sp
    NO ESTERILIZAR
    AGAR BISMUTO SULFITO
    Es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de
    Salmonella typhi y otros bacilos entéricos.
    Colonias típicas
    Las colonias típicas de la Salmonella typhi son marrones
    o negras, algunas veces con brillo metálico alrededor de
    las colonias.

    Salmonella
    typhi
    AGAR SULFITO BISMUTO

    • No esterilizar
    • Disolver 47,5 gr en 1
    litro de agua
    destilada
    IDENTIFICACION DE SALMONELLA MEDIANTE PRUEBAS
    BIOQUIMICAS

    TSI : Por lo general salmonella sp, da como resultado de esta


    prueba una reacción alcalina/acido K/A, con producción de
    ácido sulfhídrico.
    Pico alcalino / fondo alcalino : no hay fermentación de
    azucares. Pseudomonas sp.
    Pico alcalino/fondo ácido : Glucosa fermentada, lactosa ni
    sacarosa fermentadas. Shigella sp.
    Pico alcalino/fondo negro : Glucosa fermentada, ni lactosa ni
    sacarosa fermentadas, producción de ácido sulfhídrico.
    Salmonella sp.
    Pico ácido/fondo ácido: Glucosa y lactosa y/o sacarosa
    fermentadas. Puede producirse H2S o no. Escherichia coli.
    UTILIZACIÓN DE
    CITRATO

     Salmonella sp, por


    lo general utiliza el
    citrato como fuente
    de carbono. Se
    produce la
    liberación de
    amoniaco en el
    medio .
    Positiva Negativa
    PRUEBA DE INDOL
     Esta prueba se desarrolla para determinar si la
    bacteria en estudio esta en capacidad de
    desdoblar el Indol de la molécula del triptófano.
     Salmonella sp, no tiene la capacidad de generar el
    Indol por lo cual no se presenta ninguna reacción
    en el medio.
    PRUEBA DE MOTILIDAD
     Sirve para determinar si un organismo es móvil o
    no. La movilidad de las bacterias es consecuencia
    de la presencia de flagelos que se encuentran
    principalmente entre los bacilos, aunque algunas
    formas de cocos son móviles.
     La mayoría de las salmonellas son móviles.
    HIDROLISIS DE UREA
    Se debe a la capacidad que tiene el microorganismo
    de desdobla e hidrolizar la urea las cuales producen la
    enzima ureasa.
    Esta prueba se considera vital en la diferenciación
    bioquímica entre salmonella sp y Proteus sp.
    ROJO DE METILO
    Permite determinar la formación de ácidos
    orgánicos que se producen durante la fermentación
    de un carbohidrato. Un color rojo significa
    positividad de la reacción). Indica que el
    microorganismo realiza la fermentación de la
    glucosa por la vía ácido-mixta.
    La reacción para salmonella sp es positivo.
    REVELAR EL VOGES PROSKAUER (VP)

     Un color rojo indica positividad de la reacción.


    Este ensayo pone en evidencia la capacidad del
    microorganismo de producir acetilmetilcarbinol
    (acetoína) a partir de la fermentación
    butilenglicólica de la glucosa.
     La reacción para salmonella sp es negativo.

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