Esterilización Biorreactores

PROCESO
DE
ESTERILIZACION
TERMINOLOGÌA:
SEPSIS:
Infección o contaminación de un tejido vivo.
ASEPSIA:
Protección contra la infección. Permite mantener estériles instrumentos y
otros materiales que han de estar en contacto con heridas, medios, etc.
Cirugía aséptica: usa instrumentos estériles, suturas, ropa, guantes,
ANTISEPSIA:
Destrucción de gérmenes para evitar la infección.
Inhibiendo el crecimiento y la reproducción de los microorganismos.
ANTISÉPTICO :
Sustancia germicida para la desinfección de los tejidos vivos, piel y
mucosas.
DESINFECTANTE: Agente que elimina la carga microbiana total en
superficies inanimadas.
DESINFECCIÓN:
Destrucción de microorganismos patógenos, pero no de esporas y
gérmenes resistentes.
ESTERILIZACIÓN :
Muerte total de microorganismos, tanto patógenos como no patógenos,
incluye esporas. La esterilización es absoluta:
ESTÉRIL
Libre de microorganismos, incapaz de
producir cualquier forma de vida.
GERMICIDA: Agente que mata gérmenes

BACTERICIDA: Destruye a las bacterias.
ESPORICIDA: Destruye a las esporas.
FUNGICIDA: Destruye a los hongos.
VIRICIDA:
BACTERIOSTÁTICO:
Agente que inhibe el crecimiento bacteriano
sin llegar a destruirlo.
FUMIGACIÓN:
Reduce número de microorganismos, insectos, descontamina superficies,.
Utiliza: sales de amonio, fenoles o hipocloritos.
Clases de M’os por temperatura de crecimiento
• Psicrófilos: 5 – 20ºC
• Mesófilos: 20 – 45ºC
• Psicrótrofos: 5 – 45ºC
• Termófilos: > 45°- 95°C
• Hipertermófilos: > 95°C
• Temp. Bajas: Bacteriostáticas
• Temp. Altas: Bactericidas
ESTERILIZACION
Eliminación de toda forma de vida,
incluye esporas.
Es absoluta:
Se realiza generalmente por:
Medios físicos:
- Calor: Húmedo y seco
- Filtración,
Productos químicos:
Excluye cualquier técnica que
resulte solamente en daño parcial a
los microorganismos o atenuación
de alguna actividad.
MÉTODOS DE
ESTERILIZACIÓN:
FÍSICOS:
- Calor húmedo:
- Calor seco:
- Radiaciones:
QUÍMICOS:
- Óxido de etileno:
- Glutaraldehido:
- Otros gases:
CALOR HÚMEDO:
EBULLICIÓN SIMPLE:
Acción: Desnaturaliza y coagula proteínas.
Formas:
- Puede usar autoclave con espita abierta
- Deposito pequeño: ebullición por 5 ó 10 minutos
¿Qué se puede esterilizar?

Material de vidrio, jeringas, agujas, ,
- Aplicación:
Cuando contaminación no es grande
- Desventajas:
No garantiza destrucción total de esporas
AUTOCLAVAJE:
Fundamento: Vapor de agua hirviente en
recipiente cerrado. Aumentan Temp. y Presión.
EFECTO: Coagula y desnaturaliza proteínas.
• TIEMPO: 15 a 20 min, 121°C, 12 Lib. P.

5 a 10 min, 135°C, 15 Lib. P
• MATERIAL A AUTOCLAVAR:
- Material desechable
- Cubierta protectora: mantiene interior estéril
- Material textil (gasas, vendas, etc.)
- Instrumental: jeringas de vidrio, agujas.)
- Líquidos y sustancias hidrosolubles
- Ropa de uso hospitalario contaminada
- Medios de cultivo para M’os
- Soluciones de sales, etc.
TIEMPO DE ESTERILIZACIÓN: Comienza cuando se alcanza
la temperatura óptima en el interior de autoclave.
AUTOCLAVES ELECTRICOS:
Acero inoxidable, automatizadas y programadas.
TINDALIZACIÓN: Propuesto por Tyndall
Tratamiento: 100ºC por 30’, repetir 3 veces, intercalar incubación.
Uso: Esteriliza azúcares que caramelizan a más de 100ºC.
Se lleva a cabo en el autoclave sin presión. La espita se mantiene abierta,
por lo que no se genera presión en el interior, y por eso sólo se consiguen
100º.
PASTEURIZACION
Tto. térmico, elimina M'os patógenos: leche, jugos y derivados
No es esterilización, garantiza destrucción de M'os patógenos, pero no de
M'os banales; pueden estar presentes en alimentos pasteurizados.
Métodos de pasteurización:
P. LENTA: 62.8 °C durante 30 minutos
P. RAPIDA: 71.7 °C durante 15 segundos
M’os patógenos resistentes al calor: M. tuberculosis y Coxiella burnetti.
Leche pasteurizada: contiene microorganismos no patógenos.
Debe ser mantenida en refrigeración (4ºC) para
retrasar crecimiento de M'os banales.
ULTRA HIGH TEMPERATURE (UHT)

Se lleva la leche a 149 ºC durante 2 segundos.
Se puede conservar a Tº ambiente durante mucho tiempo.
CALOR SECO:
• HORNOS:
Mecanismo antiguo de esterilización.
Tiempo: 160°C/ 2 hrs.
140°C/ 5 hrs.
• ACCION:
Desnaturaliza proteínas (irreversible)
Fusión y desorganización de membrana.
• MECHEROS: Llama directa
ASEPSIA:
HORNOS ESTERILIZADORES
RADIACIONES IONIZANTES :
RADIOESTERILIZACIÓN: Esterilización en frío.
RADIACIONES GAMMA:
Altamente letal para cualquier microorganismo .
Efecto: Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los
AN., dañan proteínas, etc.
USO: Industrial:
• MAT. A ESTERILIZAR:
Material que no resiste
vapor caliente.
- Plásticos.
- Suturas
- Antibióticos
- Hojas de metal.
- Algunos alimentos
- Aceites y grasas.
No uso: Medios de cultivo, sol. proteicas (altera componentes)
RADIACIONES NO IONIZANTES:
Rad. Electromagnéticas, rad. Solar.

- RAD. INFRARROJA: Baja activ. antimicrobiana
- RAD. ULTRAVIOLETA: 260 nm

Afecta DNA (Bases pirimídicas), forma dímeros
de pirimidina, pérdida de la viabilidad celular.
Esteriliza aire y superficie de objetos, mata M’os.
• APLICACIÓN:
- Esterilización de laboratorios, quirófanos y depósitos.
- La sobreexposición genera quemaduras.
• USO:
- Restringido a períodos cortos de eliminación bacteriana
RADIACIÓN ULTRAVIOLETA
FILTROESTERILIZACION:
EQUIPO: Embudo contenedor, membrana filtrante de
celulosa, recipiente estéril.
Tamaño de poros: 0.4 micras
Membrana retiene partículas y bacterias
No retienen virus ni micoplasmas.
USOS:
Aceites, soluciones termolábiles, soluciones
oftálmicas, solución intravenosas, drogas
diagnósticas, medios para cultivo celular, soluciones
de antibióticos y vitaminas.
Elimina riesgos de contaminación cruzada.
CONTROL DE ESTERILIZACIÓN
GARANTÍA DE ESTERILIDAD:
- Prueba: No existencia de M’os vivos.
- En medios de cultivo: No Crecimiento
INDICADORES QUÍMICOS :
• TUBO DE BROWNE: Se coloca en autoclave.
Cambia de color: Rojo  amarillo Verde
Depende de eficiencia de esterilización .
INDICADORES BIOLOGICOS:
• UTILIZA ESPORAS:
- Bacillus subtilis:
Control de esterilidad en seco y con óxido de etileno.
- B. stearothermophilus: Control de esterilización por vapor.
• CINTAS CONTROL ESTERILIZACION

- Cambio: Incoloro a negro, cuando alcanza Temp. de esterilización
- Sello en objeto a autoclavar: Aparece color en correcto autoclabaje.
ESTERILIZACIÓN POR
AGENTES QUIMICOS:
Microbicidas:
- Fungicidas, bactericidas, viricida.
ÓXIDO DE ETILENO:
Agente alquilante  Esterilización gaseosa
ACCION: de 3 a 8 Hrs.
Marcha automática y dispositivos de seguridad.
• MATERIALES A ESTERILIZAR:
Termosensible y descartable:
- Máscaras de anestesia
- Guantes
- Catéteres
- Sondas
- Jeringas.
DESVENTAJAS:
- Altamente tóxico
- Inflamable
- Produce quemaduras.
GLUTARALDEHÍDO (CIDEX):
Pentanodial, glutaral,
Lìquido oleaginoso, generalmente incoloro o amarillo claro
Al 2% destruye todo tipo de vida microbiana.
Bactericida, fungicida y viricida, destruye a VIH.
Tiempo:
10 hrs. Inmersión: esporicida.
20 minutos: Actúa como antiséptico.
Enjuagar instrumental antes de usar:

Ligeramente tóxico para la piel
USO: Instrumental quirúrgico.

Ambientes bien ventilados
ANTISEPTICOS Y DESINFECTANTE S:
- ALCOHOLES:
Etanol 70%: Bactericida 1 a 2 min.
No destruye esporas.
Poco activo en presencia de materia orgánica.
Uso limitado en piel.
Alcohol isopropílico, bencílico.
- PERÓXIDO DE HIDRÓGENO:
Libera O2 al contacto.
No penetra a tejidos. Aseo bucal, lavar heridas
- ISODINE:
Presentación: Solución y espuma.
Lavado de manos, Enguantado, campo quirúrgico .
- FENOL:
Alquilfenoles, halogenofenoles
OXIDANTES:
CLORO:
Desinfectante desde antigüedad:
Uso: Tto. de aguas de abastecimiento humano, piscinas.
Reacciona con agua  ácido hipocloroso: (HOCl)
HIPOCLORlTOS:
- Hipoclorito cálcico: Ca(OCl)2 (polvo blanqueador)
Preparación: Gas cloro + cal muerta + Agua  Suspensión acuosa.
- Hipoclorito sódico:
Estabilidad de solución de hipoclorito: Temp, concentración y pH.
- CLOROFENOLES: Desinfección de objetos inanimados.
- CLORHEXIDINA: En jabón: lavado quirúrgico (zona a operar)
- HEXACLOROFENO: Incorporado al jabón. Guantes estériles.
- YODÓFOROS:
METALES PESADOS Y SUS SALES
Todas las sales en solución son en cierto grado germicidas,

dependiendo de su concentración.
Las sales de metales pesados son más toxicas que las de los
demás metales.
Sales usadas como desinfectantes:
Sol. de Hg, Cu y Ag a altas concentraciones son coagulantes
proteicos,
A concentraciones mas bajas son similares a los
desinfectantes químicos.
Efecto: se unen a los SH- de las enzimas celulares.
MECANISMO DE ACCIÓN ANTIMICROBIANA
A. Desnaturalización de proteínas:
Enzimas (proteínas) existen en estado coloidal, si son
enérgicamente alteradas por un agente antimicrobiano se
coagulan y no son funcionales.
- Ácidos y bases fuertes:
- Ácidos orgánicos: Ac. Benzoico,
B. Destrucción de membrana y pared celular:

Sustancias que alteran propiedades físico-químicas de m.c.
impiden el funcionamiento normal, matando o inhibiendo la
célula. Ej. - Lisozima: Destruye la PC,
- Penicilina: Impiden síntesis de PC. lisis celular.
- Detergentes:
- Compuestos fenólicos:
- Alcoholes: Etanol y alcohol isopropílico.
C. Modifican grupos funcionales:
- Metales pesados:
- Agentes oxidantes: Cloro, peróxido de hidrógeno
- Colorantes:
- Agente alquilante: Formaldehido, Glutaraldehido, óxido de
etileno
D. Antagonismo químico:
Agente químico interfiere en la reacción normal entre una
enzima específica y su sustrato.
Al unirse con la parte activa de la Enzima impide la unión de
ésta con el Sustrato. ej.
-PABA con Sulfas

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GERMICIDA: Agente que mata gérmenes

¿Qué se puede esterilizar?

EFECTO: Coagula y desnaturaliza proteínas.

• TIEMPO: 15 a 20 min, 121°C, 12 Lib. P.

ULTRA HIGH TEMPERATURE (UHT)

Rad. Electromagnéticas, rad. Solar.

- RAD. ULTRAVIOLETA: 260 nm

Esteriliza aire y superficie de objetos, mata M’os.

• CINTAS CONTROL ESTERILIZACION

Marcha automática y dispositivos de seguridad.

Enjuagar instrumental antes de usar:

USO: Instrumental quirúrgico.

Todas las sales en solución son en cierto grado germicidas,

B. Destrucción de membrana y pared celular:

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