Bioreactores Micro
Bioreactores Micro
Bioreactores Micro
Es el componente principal de un
bioproceso.
La eficiencia de un reactor (aparte de las consideraciones bioquímicas) esta
determinada por las limitaciones de:
transferencia de calor
transferencia oxígeno
cantidad de movimiento.
Transferencia de masa e intercambio de gases
Describe la solubilidad del O2en un líquido en relación a la presión parcial del O2 en el gas en contacto
con la fase líquida
Insuflando aire se logra una concentración de 8mg O2/L en agua, con oxígeno puro 43 mg O2/L
ElO2 tiene baja solubilidad en agua (7 mg/l, a 35°C) y los microorganismos solo utilizan O2 disuelto.
Se debe transferir O2 desde la fase gaseosa (burbuja de aire) a la fase líquida permanentemente.
Difusión dentro de la burbuja hacia la interfase gas-líquido -Difusión a través de la película líquida en torno al
flóculo celular
Difusión a través de la interfase gas-líquido
-Entrada al flóculo celular
Difusión a través de la película líquida en torno a la burbuja -Difusión a través del flóculo celular
Movimiento por difusión en el seno del líquido -Difusión a través de la membrana celular
-Reacción de oxidación
Macroscópicamente, la transferencia de O2 puede explicarse por la ecuación:
Kla: es el coeficiente volumétrico de transferencia de O2, que incluye el valor del área superficial
de las burbujas. [h-1]
KLa (C*-C)
Agitación:
aumenta el área de intercambio por unidad de volumen, por efecto de la ruptura de las burbujas.
Disminuye el espesor de las películas (L) por lo que aumenta el KL (coeficiente volumétrico de transferencia
de O2 ).
Tensioactivos: afectan el área de trasferencia y el KLa: burbujas mas pequeñas aumento del área y del Kla, el
aumento de la resistencia de la película disminuye KL
Oxidación de sulfito.
Gassing out estatico
Gassing out dinamico
Métodos para la determinación del Kla (coeficiente
volumétrico de transferencia de O2)
Método directo:
Método dinámico:
El método dinámico puede aplicarse para condiciones donde no hay reacción (qo es
cero). Esto es interesante cuando se estudia la influencia de parámetros operativos, Ej:
velocidad de agitación y velocidad de flujo de gas, sobre el coeficiente volumétrico
de transferencia de masa en un medio modelo.
Midela velocidad de conversión de una solución 0,5M de sulfito de sodio a sulfato en presencia de cobre
como catalizador
Para solucionar eso se desarrolló un método alternativo en el cual, en lugar de trabajar con la solución concentrada de
Na2SO3 en el reactor y con una concentración de O2 cercana a 0, se agrega una solución de Na2SO3 a un caudal tal que
toda la sal se consume al momento de ingresar al reactor.
Como la velocidad de ingreso de sulfito es menor que la velocidad de trasferencia de O2, la concentración de O2
disuelto es distinta de 0.
La velocidad de la reacción puede representarse según la ecuación:
La fuerza por unidad de área aplicada en forma paralela a la superficie de cada partícula
biológica (cizallamiento), puede definirse como esfuerzo de corte, o “shear stress” (τ).
Este τ es proporcional a la diferencia de las velocidades (dv) entre las líneas de flujo del
medio de cultivo superior e inferior, dividido por una distancia muy pequeña entre estas líneas
de flujo (dy).
donde, dv/dy está definida como la velocidad o gradiente de deformación (γ) y puede
entenderse como los cambios de velocidades que generarían una deformación a una
partícula cualquiera.
Esta ecuación se cumple solo si la viscosidad es constante, no importando la velocidad de
deformación a la que es sometido el fluido, y esto se cumple en fluidos newtonianos.
Un cultivo celular puede presentar dos tipos de daño:
a) un daño letal que provoca la muerte por necrosis (lisis celular) o apoptosis (proceso de muerte
programada) en las células.
b) daños sub letales que se manifiestan en alteraciones metabólicas en los cultivos.
Se ha observado que, como respuesta al estrés hidrodinámico, al interior de la célula se establece una
respuesta asociada a los mecanismos de defensa ya conocidos hacia el estrés oxidativo.
Los parámetros usados como medida del daño celular dependen de cada cultivo. Así, las variables más
usadas involucran velocidades de crecimiento, producción y de consumo de nutrientes y rendimientos
celulares y de productos.
2.3.- Generación de calor por crecimiento microbiano
40–50% de la energía suministrada por las fuentes de C se convierten en ATP, el resto se libera
como calor.
El calor liberado se puede calcular a partir de las entalpías de combustión del sustrato y de la
biomasa formada:
Para verificar que la esterilización ha sido efectiva, deberán controlarse parámetros físicos como: la
temperatura y el tiempo, y factores biológicos, como el factor D y F.
Para conseguir una esterilización completa, es conveniente que el sistema permita esterilizaciones
independientes de los distintos elementos del sistema:
Recipiente
Cierre mecánico del agitador
Filtros de venteo
a.- Esterilización.
Las condiciones ambientales del biorreactor tales como flujo de gases (por
ejemplo, oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono, etc.), temperatura, pH, oxígeno
disuelto y velocidad de agitación, deben ser cuidadosamente monitoreadas y
controladas.
Turbidostato.
La concentración de células en
el reactor se mantiene constante.
La alimentación se regula
mediante el monitoreo de la
densidad óptica del cultivo.
Se alimenta medio fresco
cuando la turbidez supera un
límite prefijado.
El volumen se mantiene
constante retirando una cantidad
de fluido equivalente a la que se
agrega.
Quimiostato:
el crecimiento de
biomasa se
controla por un
nutriente
esencial y el resto
se agrega en
exceso.
•El sistema controla el pH del medio de cultivo; que varia por los productos de desecho
y el metabolismo propio del cultivo celular o microorganismos.
•Un sistema de control de acidez consta de:
•El sistema controla el pH del medio de cultivo; que varia Un sistema de control de acidez
por los productos de desecho y el metabolismo propio consta de:
del cultivo celular o microorganismos.
•Un sistema de control de acidez consta de: Sistema de medición:
Sistema de control
Subsistemas mecánicos
dispensadores.
Q = UA ΔT
Q es la cantidad de flujo de calor,
ΔT la diferencia de temperatura a través de la pared,
A el área de la pared, y
U es el coeficiente de transferencia.
Instrumentación:
Un sistema de control de Temperatura: sistema que ordena y regula la acción del motor que controla las
válvulas que regulan el flujo de líquido frío o caliente.
Válvula Solenoide: mecanismo que regula el flujo de líquido por la tubería o línea de paso.
Para lograr la agitación deseada se calcula la potencia del motor, para ello se determina el
número de Reynolds (NRe), el número de potencia para los impulsores (Np) y la potencia del
motor en Hp.
El número de Reynolds se calcula con la ecuación:
NP= Nº Potencia
N P C ( N Re ) X ( N Fr )Y
NFr= Nº de Froude
La variación de Np con el Res , se observa en la figura siguiente.
El flujo en un reactor tanque agitado es completamente turbulento, para un Res > 104.
En un reactor con bafles, sólo las fuerzas inerciales son importantes para un flujo turbulento, Np tiene
un valor constante de Res.
En régimen de flujo laminar, Res < 10, las fuerzas viscosas dominan y la disipación de la potencia
dependerá del Res.
Filtros de las Líneas de Aire
Difusor de Aire:
Biorreactores especiales:
de estado sólido y foto-biorreactores
Por su forma y tipo de agitación
Ejemplo:
en fermentaciones continuas alimentadas con altas concentraciones de sustrato (entre 134 y 295
Kg/m3) se presentan grandes variaciones en las concentraciones de biomasa y producto debido
a un comportamiento oscilatorio. Cuando este fenómeno se controla, la productividad promedio
del proceso alcanza los 15.6 Kg/m3 h. Sin embargo, cuando el fenómeno no se regula, la
productividad del proceso cae a 4.6 Kg/m3 h .
Biorreactores heterogeneos:
Parámetros:
Parámetros:
La ventaja de los RCS es que pueden asimilar variaciones de cantidad y calidad del afluente con poca
probabilidad de fallar.
En el sistema de lodos activados convencional, un incremento en el caudal del afluente provoca un menor
tiempo de retención del líquido a tratar en el reactor con el consiguiente desmejoramiento de la reacción
y/o la clarificación.
Aplicación 2: Reactor de carga
secuencial: ICEAS
Fase de llenado.
Se añade el agua residual cruda, al reactor donde existe lodo activo del ciclo previo.
El período de llenado determina las características hidráulicas del biorreactor.
Si el tiempo es corto se consigue un factor de carga instantáneo alto y esto hace al proceso
equivalente a un sistema continuo con una configuración de tanques en serie, lo cual a su vez es
análogo a un flujo pistón. En tal caso la biomasa se expone inicialmente a altas concentraciones de
nutrientes, pero en el tiempo esta concentración va disminuyendo.
Si el tiempo de llenado es largo el factor de carga instantáneo es pequeño y el comportamiento del
sistema es similar a uno de flujo continuo completamente mezclado donde la biomasa es sometida a
concentraciones bajas y relativamente constantes de los nutrientes del agua residual.
La fase de reacción
Sigue secuencialmente a la fase de llenado y promueve el ataque de la biomasa a la carga orgánica
con su consiguiente degradación.
Durante esta etapa se pueden seguir varias estrategias: reacción con mezcla pero sin aireación
forzada, lo cual provoca una actividad aeróbica mínima y favorece las reacciones anóxicas y
posiblemente las anaeróbicas; reacción aireada con entrada de aire forzado favoreciendo así las
reacciones aeróbicas.
Los períodos de llenado y de reacción serán escogidos según los objetivos del tratamiento. Así, si ambos
períodos son aeróbicos ocurrirá oxidación de carbono y adicionalmente nitrificación por la extensión
de la aireación.
Si la aireación es eliminada manteniendo la mezcla permite la desnitrificación. Si sucede nitrificación
durante el período de reacción, al inicio del siguiente ciclo se planifica mezcla sin aireación.
La fase de sedimentación
Tiene como objetivo conseguir un sobrenadante clarificado como efluente del sistema.
Esta operación es llevada a cabo bajo condiciones completamente estáticas, de
quietud.
La fase de descarga,
Permite extraer el agua clarificada del reactor hasta un cierto nivel del mismo que variará
según sea el diseño escogido permitiendo que en el tanque quede biomasa
sedimentada que constituye los lodos activados; los lodos son retenidos para que estén
disponibles para tratar la siguiente carga que llegará al tanque. En aquellos casos donde
se requiera desnitrificar, el volumen de lodo retenido debe ser grande para proveer el
nitrato que posteriormente sufrirá la desnitrificación.
Formando parte de la operación debe considerarse la purga o descarga del exceso de
los lodos. Para efectos de controlar el Tiempo de Retención de Sólidos (TRS) debe
desecharse una cierta cantidad de lodos.
En el fermentador en forma de
torre los flóculos de levadura se
mantienen en suspención por el
movimiento ascendente del medio y
las partículas arrastradas son
devueltas por medio de un dispositivo
de sedimentación situado en la parte
superior de la torre.
TIPOS.
de bandejas,
de tambor rotatorio,
de cama empacada o columna de lecho fijo.
Consisten de un cilindro que gira lentamente volteando el medio
de cultivo, ayudado por pestañas adheridas a la pared.
ΣS + X → ΣP + nX