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UNIVERSIDAD NACIONAL “PEDRO RUÍZ GALLO”

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA

BACTERIAS
Mycobacterium-
Fusobacterium
Integrantes:
Niquen Coloma Jenrry
Docente:
Dra. Montenegro Esquivel Zully
Curso: Microbiología veterinaria
OBJETIVOS
Conoce y describe las características de patogenicidad
e inmunogenicidad, vías de transmisión, diagnóstico
microbiológico:

● Mycobacterium
● Fusobacterium
Mycobacterium
Morfología y tinción

● Bacilos rectos o ligeramente curvos.


● No esporulan, no capsulan.
● Poseen una pared celular con múltiples capas
de lípidos complejos y residuos de ácido
micólico lo cual no permite que se tiñan con
facilidad, pero al teñirse resisten la
decoloración con alcohol ácido de ahí su
denominación de bacilos alcohol ácido
resistentes (BAAR) o bacilos acidorresistentes
● Son bacilos de 02-0.5um de ancho por 1-4um de longitud.
● En cultivas viejos y en frotis de ganglios linfáticos caseosos se aprecian ramificados en
esputo o tejidos.
● Se tiñen irregularmente y toman apariencia de rosario debido a su contenido en
polifosfatos y vacuolas.
● Aerobios estrictos, requieren medios de cultivo con pH óptimo de 7.
● Las cepas virulentas de M. tuberculosis, observadas a partir de cultivos tienen una
disposición como cordón serpenteante constituido por bacilos en disposición paralelas.
● Agrupa a especies patógenas y saprofíticas; las primeras afectan a diferentes especies,
generalmente, con preferencia de hospedador, ocasionando una enfermedad crónica
debilitante, la tuberculosis.
● Las micobacterias conservan viabilidad en cadáveres putrefactos y suelos húmedos por 1
a 4 años.
● Mycobacterium bovis resiste 1 año en heces, sangre y orina.
● Entre 12- 14°C en oscuridad y en suelo, de 4 a 7 años.
● Muere por la radiación solar en forma directa.
M.BOVIS

● Es menos aerotolerante que M. tuberculosis


pero más patógeno para animales de
experimentación.
● Crece lentamente, requiere, de medios sin
glicerol.
● Sus colonias son diminutas, transparentes,
lisas y piramidales, se adhieren a la
superficie del medio pero se emulsionan con
facilidad.
● En medios líquidos crece semejante
Mycobacterium tuberculosis.
M. AVIUM

● Son bacilos cortos con gránulos


bipolares.
● Formas ramificadas.
● Crece mejor a 44°C forma colonias
lisas, húmedas crises - blanquecinas
que se emulsionan con facilidad.
● En medios líquidos forman una
película suave y viscosa.
Mecanismos de infección

TUBERCULOSIS
● La tuberculosis bovina es una enfermedad crónica que en ocasiones afecta a otras especies
de mamíferos.
● Es una zoonosis importante que afecta a los humanos, ingresa por medio de la inhalación de
aerosoles. ingestión de leche no pasteurizada, carne mal cocidas, a través de heridas en la
piel, por medio de inseminaciones y en el laboratorio por contacto con los tejidos
contaminados.
● Los bovinos se contagian por consumir pastos y agua contaminada con secreciones, monta
directa, por amamantamiento de vacas infectadas.
Hospedero
definitivo
● Después de la inhalación de los bacilos tuberculosos virulentos, llegan a los espacios
alveolares donde son fagocitados por macrófagos alveolares en cuyo interior el bacilo se
multiplica lentamente, su supervivencia se garantiza por acción del factor cordón y de los
sulfátidos. Los bacilos drenan por vía linfática afectando ganglios linfáticos
traqueobronquiales, y el foco primario constituyen el "Complejo Primario".

● En los porcinos, las lesiones primarias se encuentran en el aparato intestinal y los ganglios
mesentéricos o en la orofaringe y los ganglios linfáticos submaxilares.

● En aves, las lesiones primarias se localizan en el aparato intestinal y ganglios linfáticos


mesentéricos.
● El complejo primario en los animales no cicatriza sino que progresa en forma
lenta o rápida.

● Desde su localización en los ápices pulmonares, los microorganismos continúan


multiplicándose y la aparición de hipersensibilidad a la tuberculina provoca la
formación de pseudotumores o granulomas los que son agregados organizados
de macrófagos agrandados rodeados de fibroblastos, macrófagos y linfocitos,
que pueden convertirse en tumores o tubérculos.

● Conforme a los granulomas aumentan de tamaño sus porciones centrales sufren


necrosis y se reducen a masas caseosas con tendencia a la mineralización.
Cuando los bacilos escapan de los focos primarios se desplazan por la corriente
sanguínea y linfática y se alojan en otros órganos y tejidos (ubre, útero, riñones,
meninges, ganglios) para establecer otros tubérculos.
Determinantes de patogenicidad
● Factor Cordón: provoca granulomas pulmonares del tipo de cuerpo extraño.
● In vivo: Inhibe la fusión fagosoma lisosoma en los macrófagos, estimula la
formación de granulomas, ataca la membrana mitocondrial causando lesión
funcional de la respiración.
● In vitro: Es responsable del agregado de bacterias en forma de cordones en los
medios de cultivo y se observa en tinciones
● Cera D: Interfiere con la acción bactericida de anticuerpos y complemento.
● Sulfátidos: Son lípidos que contienen azufre en asociación con el factor Cordón
potencian sinérgicamente su toxicidad.
INFECCIONES CLÍNICAS

Tuberculosis forma nódulos o gránulos que se


calcifican, caseifican y dan reacción alérgica.
Los signos generales incluyen debilidad, anorexia,
disnea, emaciación y fiebre baja fluctuante. El signo
principal es pérdida de peso a pesar de una buena
nutrición y cuidado. Afecta a todas las
especies de vertebrados.
1. Tipo Humano
2. Tipo bovino: Patógeno en animales de sangre
caliente.
3. Tipo aviar: Patógeno en aves, puercos, bovinos,
ovinos, perros, gatos, animales de sangre fría.
INMUNOLOGÍA
● En el huésped naturalmente afectado
se producen simultáneamente dos
respuestas Inmunológicas.
● Inmunidad antituberculosa a
hipersensibilidad a la tuberculina.
● La inmunidad antituberculosa es una
inmunidad mediada por células y
provocada por bacterias intracelulares
DIAGNÓSTICO
Hombre:
Muestras: Esputo, LCR, orina, tejidos (tomados
con aguja o por cirugía), lavado gástrico.

Animales:
Muestras: Órganos, pus, ganglios
linfáticos (postmortem).
Examen Directo:
a) Técnica de Ziehl Neelsen: Baciloscopía (esputo): La positividad depende
que la muestra tenga de 5,000 a 10,000 bacilos/mL de esputo.
En órganos la sola presencia da positividad a la prueba.

b) Microscopía de fluorescencia: Técnica de T. Truant con auramina y Rodamina. Se


observan bacilos fluorescentes de color amarillo y brillantes en fondo oscuro.
Cultivo:
Las muestras contaminadas deben ser sometidas a digestión y descontaminación empleando
N acetilcisteína, NaOH o fosfato trisódico cloruro de benzalconio, posteriormente se siembran
en medios apropiados y con atmósferas de 5-10% de CO2 para los cultivos primarios; la
incubación debe ser por 3 a 6 semanas.
De observarse B.A.A.R. (Bacilos Ácidos Alcohol Resistentes) atípicos, se enviará el cultivo
para su tipificación a un laboratorio referencial.

Resultados:
Inoculación:
Los animales susceptibles y las vías de inoculación
Otras pruebas:
Radiografías, cultivo de sangre, ELISA.
DIAGNÓSTICO DE CAMPO
1. Tuberculina Vieja: Es un extracto antigénicamente crudo preparado a partir de. caldos de
cultivo de 6 semanas de antigüedad sometidas a ebullición, filtrados y concentrados a vapor
hasta quedar en la décima parte de lo procesado. El componente activo de éste preparado
es una proteína termoestable que contiene fracciones antigénicas de los bacilos como
peptiglucolipidos, oligopolisacaridos y glucolípidos fenólicos. Este producto fue usado
inicialmente para el diagnóstico de TBC.

2. Derivado Proteico Purificado (DPP): Es una tuberculina vieja parcialmente purificada por
fraccionamiento con sulfato de amonio; es el reactivo usado para las pruebas cutáneas con
tuberculina.
Intradermoreacción en bovinos:

1. Prueba de la tuberculina cervical simple: se inocula en el tercio medio del cuello. Esta
zona se debe depilar con maquina o tijera a 5cm de diámetro aproximadamente. Se
inyectan 0.1mL de tuberculina PPD bovina. La lectura se hace a las 72 horas (más o
menos 6 horas).
● Positivo: 3 mm o mayor
● Negativo: menos de 3 mm.

2. Prueba de la tuberculina ano caudal: Se realiza en el pliegue ano – caudal interno a


unos 6cm de la base de la cola y en el centro del pliegue (Fig 79). Esta zona es menos
sensible a la tuberculina que la piel del cuello. Se inyectan 0.1 mL de DPP bovina.
● Positivo: 5mm o mayor / sospechoso: 3 mm.
● Negativo: menos de 3 mm.

Hay que tener en cuenta que todo animal sospechoso en un establecimiento donde se hayan
detectado animales reaccionantes positivos en pruebas anteriores o en las que se están
realizando se le debe considerar positivo.
3. Prueba tuberculínica comparativa: La prueba intradérmica comparativa se utiliza
para la realización de un diagnóstico diferencial entre animales infectados por
Mycobacterium bovis y aquellos sensibilizados a la tuberculosis por exposición a otras
micobacterias.
La prueba consiste en la inyección de tuberculina bovina y tuberculina aviar en diferentes
puntos del cuello y en la subsiguiente evaluación de la respuesta transcurridos 3 días. La
dosis de tuberculina no debe ser inferior a 2000 UI de tuberculina bovina ni a 200UI de
tuberculina aviar. La distancia entre ambas inyecciones debe ser aproximadamente
12-15cm.
● Positivo: 4 mm mayor que la tuberculina aviar.
● Dudoso: Entre 1 y 4 mm mayor que la tuberculina aviar
● Negativo: Cuando no hay reacción o cuando la reacción es igual o menor que la
tuberculina aviar.
1. Reacción intradérmica en aves: se aplica en la barbilla; en cerdos en el pliegue de la
oreja; en caprinos y ovinos en el pliegue de la cola.

2. Prueba de la reacción térmica breve: Se inyecta DPP en dosis de 4 mL por vía


subcutánea en el cuello de bovinos cuya temperatura rectal no pase de 39°C en el
momento de la inyección y 2 horas después. Se realiza la lectura si se eleva la
temperatura por encima de 40°C a las 4-8 horas post inyección, se clasifica al animal
como reactor positivo; la temperatura más elevada suele observarse entre las 6 y 8 horas
post inoculación.

3. Reacción oftálmica o de Calmette: Se coloca una gota de tuberculina en la conjuntiva; el


animal responde con congestión difusa y edema en 2 horas y la reacción desaparece en
24-36 horas. Se usa en primates.
Fusobacterium
Fusobacterium necrophorum

● Es un anaerobio, no
esporulado causante de
infecciones primarias como
los abscesos hepáticos e
infecciones mixtas como la
necrobacilosis.
● Se localiza principalmente en
piel y mucosas.
MORFOLOGÍA Y TINCIÓN
● Bacilos pleomórficos de hasta 100um de ancho
con extremos redondeados, pueden verse
formas cortas, largas o filamentosas con
tumefacciones bulbosas y cuerpos redondos.
● Presenta gránulos metacromáticos o cuerpos
moniliformes observados con las tinciones de
Giemsa o azul de metileno.
● No esporula.
● Inmóvil.
● Gramnegativo.
CARACTERÍSTICAS CULTIRALES
● Es anaerobio obligado, crece entre 30°C - 40°
C y en medios con pH 6,0 – 8,4. Requiere de
medios enriquecidos con extracto de
levadura, sangre, suero o líquido ascítico,
vitamina. K, hemina y un hidrato de carbono.
Puede emplearse medio base como agar
Brucella, infusión cerebro corazón y medios
de cultivo como caldo carne y tioglicolato.
● Sus colonias son pequeñas, grises, opacas y
circulares.
● Son α o β hemolíticas o no producen
hemólisis.
● En medios líquidos forma turbidez uniforme y
sedimento ligero, fino, blanco sucio.
MECANISMO DE INFECCIÓN-DETERMINANTES
DE PATOGENICIDAD
Comensal del aparato digestivo y las mucosas; las infecciones pueden ser endógenas o exógenas al entrar en el
organismo a través de heridas de piel y mucosas. Es invasor y destructor, acciones que son facilitadas por una
lipasa, una exotoxina leucocida y una necrotoxina. También produce colagenasa, neuraminidasa, heparinasa y
proteasa.

Las infecciones frecuentemente son mixtas, así en los abscesos hepáticos en vacas comúnmente está
relacionado con Corynebacterium pyogenes; así mismo se considera invasor secundario común en casos de
estomatitis necrótica, faringitis y enteritis.

Existen otras interacciones sinérgicas para el desarrollo de infecciones, así por ej. Arcanobacterium pyogenes
produce un factor termolábil que estimula la replicación de Fusobacterium necrophorum, mientras que F.
necrophorum sintetiza una leucotoxina que se correlaciona con la virulencia de la cepa F. necrophorum facilita la
invasión tisular por bacteroides (Dichelobacter nodosus) y este elabora un factor de crecimiento que es
aprovechado por F. necrophorum. Esta última asociación ocurre en el pedero.
INFECCIONES CLÍNICAS
En diferentes especies Necrosis o Necrobacilosis
● Equinos: Dermatitis gangrenosa, necrosis de porciones distales de
las extremidades o Pododerrnatitis necrótica crónica.
● Bovinos: Abscesos hepáticos, ulceración de la panta, necrosis
postpuerperal de la vagina y útero, lesiones en el intestino, mama,
pezones, pulmones, articulaciones y pezuñas.
● Terneros: Difteria del ternero (estomatitis necrótica).
● Ovinos: Podredumbre de las pezuñas (pedero), úlceras en labios,
hepatitis y vulvitis necrótica, necrosis de orejas.
● Porcinos: Cojera, Rinitis necrótica, Estomatitis ulcerosa, Enteritis
necrótica.
● Caprinos: Estomatitis ulcerativa.
● Aves: Agente secundario de la difteria.
● Conejos: Úlceras necróticas en labios, boca, piel y tejido
subcutáneo.
ASPECTOS INMUNITARIOS
● Muchos animales adultos poseen normalmente anticuerpos contra F. necrophorum.
● La respuesta inmune es innata y es la fagocitosis.
DIAGNÓSTICO
1. Muestra: Epitelio del borde de las úlceras. Pus de los abscesos. Las
muestras deben ser cultivadas inmediatamente y deben tomarse
precauciones para evitar su exposición al oxígeno. Las muestras
obtenidas con jeringas se mantendrán ahí hasta su procesamiento.
2. Examen directo: Tinción de Giemsa o Gram. Se observan bacilos en
forma de mazo gramnegativo.
3. Cultivo: En agar sangre sus colonias son pequeñas, opacas y
circulares no hemolíticas.
4. Inoculación: Subcutánea en conejos y ratones, en una semana se
producen abscesos en el sitio de inoculación y en el hígado.

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