SEMINARIO: HEMOCULTIVO (BACTEREMIA Y SEPSIS)

Bacteriemia: presencia de bacterias en sangre, cuando éstas invaden y se multiplican en el

torrente sanguíneo.
Fungemia: presencia de hongos (levaduras u hongos filamentosos) en sangre, cuando estos
invaden y se multiplican en el torrente sanguíneo.

BACTERIEMIA Y FUNGEMIA
▫ Son complicaciones graves de las infecciones bacterianas y fúngicas, respectivamente.
▫ Se producen cuando los microorganismos invaden el torrente sanguíneo y se multiplican a
una velocidad superior a la capacidad del sistema reticuloendotelial para eliminarlos. Esta
invasión puede tener un origen extravascular (accediendo a través de capilares sanguíneos o
vasos linfáticos) o endovascular (endocarditis, catéteres intravenosos o arteriales).

▫ Clasificación:
● Momento de aparición: nosocomial, comunitaria o asociada a cuidados sanitarios
● Origen: primaria o secundaria a otro foco infeccioso (documentado mcrobiológicamente)
● Patrón clínico: transitoria, intermitente y persistente.

Sepsis y shock séptico

• La sepsis se define como una disfunción orgánica y potencialmente mortal causada por una
respuesta no regulada del individuo frente a la infección (sospechada o documentada
microbiológicamente).
• Se denomina shock séptico al cuadro de sepsis que cursa con alteraciones circulatorias,
celulares y metabólicas lo suficientemente graves como para aumentar sustancialmente la
mortalidad (cifras superiores al 40%).

SEPSIS
INFORME O.M.S, SEPTIEMBRE 2020:
Afecta a unos 49 millones de personas al año en todo el mundo.
Causa 11 millones de muertes al año.
Casi la mitad de los 49 millones de casos de septicemia anuales ocurren en niños, con el
resultado de 2,9 millones de muertes, que podrían evitarse en su mayoría mediante un
diagnóstico temprano y una atención clínica adecuada. Esta muertes son a menudo
consecuencia de enfermedades diarreicas o infecciones de las vías respiratorias bajas

La OMS exhorta a la comunidad mundial a:

Elaborar medios de diagnóstico rápidos, asequibles y adecuados, especialmente para la
atención primaria y secundaria, con el fin de mejorar la identificación, vigilancia, prevención y
tratamiento de la septicemia.
-Sepsis severa: 2% de los pacientes. Tasas de mortalidad entre el 30-50% (Bouza et al. BMC
Infectious Diseases).

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 INVASIÓN ESCASA. INVASIÓN MASIVA

IMPORTANCIA DIAGNÓSTICA
• El diagnóstico precoz de la bacteriemia y el informe precoz del perfil de sensibilidad
antibiótica constituye una de las prioridades del Servicio de Microbiología ya que se asocia a
una elevada mortalidad que puede oscilar entre el 10-30%.
• La gravedad de este tipo de infecciones requiere la administración precoz de antibioterapia
empírica que puede ser inadecuada hasta en un 25-30% de los casos.
• Código sepsis: Programa de actuación con estrategias coordinadas, eficientes y eficaces que
permitan la detección y el tratamiento precoz de los pacientes con sepsis y shock séptico.

HEMOCULTIVO
El hemocultivo es la técnica utilizada para investigar la presencia o ausencia de
microorganismos en la sangre.

INDICACIONES
• Cualquier paciente con fiebre 38ºC o con temperatura inferior a 36ºC.
• Leucocitosis, leucopenia y trombopenia no relacionadas con procesos hematológicos.
• Signos de infección focal o sepsis, aun en ausencia de fiebre
• Sospecha de endocarditis
• Sospecha de meningitis, osteomielitis, pielonefritis, infección intraabdominal, artritis,
infecciones graves de piel y tejidos blandos, neumonía y fiebre de origen desconocido.
• Sospecha de bacteriemia asociada a catéter.
• En neonatos ante la mínima sospecha de infección.

Puntos clave en el rendimiento microbiológico de los hemocultivos

• El volumen : 8-10 ml por frasco (adulto) y 1-4 ml en el frasco pediátrico.
• La extracción de la sangre antes de iniciar el tratamiento antimicrobiano.
• Evitar contaminaciones (Desinfectar el sitio de venopunción, utilizar guantes, mascarilla, no
tocar con la mano el lugar de la venopunción, no extraer los hemocultivos a través de catéter)
• Enviar los frascos rápidamente al laboratorio

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• Realizar 2 extracciones en adultos de puntos diferentes (cada una con un frasco aerobio y un
frasco anaerobio).
• En niños una extracción de un solo frasco pediátrico (aerobio).

RECOGIDA DE MUESTRA (OBTENCIÓN DE LA SANGRE) Momento y lugar de la extracción

● 2 hemocultivos (2 extracciones)
●4 frascos en total
● 2 lugares de venopunción diferentes
● En niños un solo frasco aerobio

HEMOCULTIVO Momento de la extracción:

Antes del tratamiento antibiótico
Coincidiendo/cerca del pico febril
Con TTº antibiótico: justo antes de la siguiente dosis (valle)
Sospecha endocarditis: cualquier momento (bacteriemia continua)

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DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO: HEMOCULTIVO-> crecimiento del microorganismo causal
Método de referencia por excelencia
Cultivo de sangre para aislar el agente responsable
Positivos: <40% (sepsis) hasta 70% (shock séptico)
-Medio rico en nutrientes
-Frasco Aerobio, anaerobio, Vial pediátrico, hongos
-Incubación: 5 días

ETIOLOGÍA
Cualquier microorganismo puede estar implicado en la producción de bacteriemia: desde los
patógenos comunes hasta los microorganismos oportunistas, generalmente saprófitos.

PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA EN MICROBIOLOGÍA

• INTRODUCCIÓN INMEDIATA EN EL INCUBADOR: incubación durante 5 días

INCUBADOR DE FRASCOS DE HEMOCULTIVOS

Es un sistema automatizado que permite incubar, agitar y controlar continuamente el
crecimiento de microorganismos aerobios, facultativos y anaerobios.
Se trata de un sistema basado en tecnología colorimétrica ya que detecta el crecimiento
bacteriano porque éste ocasiona un aumento en la producción de CO2 en el medio y por tanto
una modificación del pH que se traduce en un cambio de color en el sensor de la base de la
frasco.

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HEMOCULTIVO POSITIVO
Aquel en el que existe crecimiento de un microorganismo habitualmente patógeno y/o de un
organismo que ha crecido también en el hemocultivo acompañante, compatible con la clínica
del paciente.
MICROORGANISMOS PATÓGENOS
-Streptococcus grupo A
- Streptococcus pneumoniae
- Haemophilus influenzae
- Enterobacterias
- Bacteroides
- Pseudomonas aeruginosa
- Candida

HEMOCULTIVO NEGATIVO
Aquel en el que no existe crecimiento en al menos los primeros 5 días de su incubación.
En el caso de sospecha de fungemia, se prolonga la incubación hasta 15 días.
En sospecha de endocarditis infecciosa o de microorganismos de crecimiento lento, por
ejemplo Brucella, se prolonga la incubación, hasta 30 días.

HEMOCULTIVO CONTAMINADO
Aquel en el que crecen organismos no significativos, que no justifican la clínica del paciente.

MICROORGANISMOS NO SIGNIFICATIVOS
-Staphylococcus coagulasa negativos
- Bacillus spp
- Corynebacterium spp
- Micrococcus spp
- Cutibacterium spp
- Clostridium perfringens
- Lactobacillus spp
- Streptococcus del grupo viridans

HEMOCULTIVO CONTAMINADO ¿Cómo se contamina un hemocultivo?

La contaminación es frecuente durante el proceso de extracción (3-30%).
Las bacterias causantes de la contaminación proceden de la flora de la piel del paciente, las
manos del personal o fomites contaminados.
>90%: Defecto en la desinfección de la piel antes de la extracción de la muestra de sangre

¿Qué supone la contaminación de un hemocultivo?

Error en el diagnóstico
Aumento de la estancia del paciente en el hospital.
Tratamiento innecesario.
Aumento de la resistencia a antibióticos
Pruebas complementarias adicionales
AUMENTO DEL COSTE PARA LA ASISTENCIA SANITARIA >4000 Euros/episodio

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EPIDEMIOLOGÍA
La bacteriemia puede afectar a individuos de cualquier edad y sexo,
- Ligero predominio en los varones
- Distribución bimodal de la edad, con una mayor incidencia en el período neonatal y en la
edad avanzada.
-El tracto urinario y las vías respiratorias bajas se consideran las puertas de entrada más
comunes.
- La utilización de catéteres y de técnicas diagnósticas y terapéuticas agresivas supone un
riesgo importante de bacteriemia, cada vez más frecuente.

Bacteriemia relacionada con catéteres (BRC)

La bacteriemia, es consecuencia de la colonización del catéter.
En el caso de los catéteres endovenosos centrales de larga duración (Tunelizados, PICCs,
Reservorios), la infección del catéter y la posible necesidad de tener que retirarlo, supone un
serio problema para el tto. del paciente.

BRC
Está documentado que el 75% de los episodios de infección del catéter, fueron errores en
algún momento (inserción, manipulación…)
Clorhexidina al 2% en base alcohólica es el antiséptico más eficaz, por encima de la povidona
en base alcohólica.
Higiene de manos+clorhexidina alcohólica+no acceso femoral+retirada del catéter cuando
no se use, hay evidencia de que son sinérgicas para minimizar las infecciones de los CVC.
La inserción de estos catéteres debe hacerse con medidas de asepsia quirúrgica.

Diagnóstico de BRC.
Hemocultivo obtenido por el catéter y por una vena periférica. El HC del catéter debe
positivizar por lo menos 2 h antes que el de la vena periférica. Esto sirve para bacterias no para
Cándidas.
Cultivo de la piel de alrededor de la inserción del catéter y de las conexiones. 15 UFC/ml,
tiene un alto valor predictivo negativo.

MICROBIOLOGÍA DE LA ORINA. INFECCIONES URINARIAS

INFECCIÓN DEL TRACTO URINARIO (ITU) O INFECCIÓN URINARIA (IU)
Es la presencia de microorganismos en el tracto urinario (TU), que es normalmente estéril por
encima del esfínter uretral.
IU bajas: síndrome uretral, uretritis, cistitis y prostatitis.
IU altas: pielonefritis y absceso renal.
NO COMPLICADA: cistitis en la mujer adulta no embarazada.
COMPLICADA: embarazo,niños,varon, pacientes con anomalías anatómicas o funcionales,
instrumentación vías urinarias y las pielonefritis.

EPIDEMIOLOGÍA: Segunda causa de infección tanto en la comunidad como en el hospital.

BACTERIURIA
La presencia de bacterias en la orina.
Se considera que la bacteriuria es significativa (criterio de ITU) cuando existen ≥105 UFC/ml
del mismo uropatógeno en un urocultivo de micción media.
Una cifra menor por lo general significa una muestra contaminada.
Sin embargo, en el caso de piuria y disuria,103-104 puede ser significativo de infección.

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ETIOLOGÍA
Microorganismos que provienen del colon y por lo tanto la microbiota fecal del paciente
condiciona en gran medida la etiología de la IU.
En el 95% causadas por un único microorganismo (ppal. E.coli).
<5% son mixtas y suelen existir alteraciones urológicas, mayor probabilidad de recurrencias y
gérmenes más resistentes.
Generalmente ambulatoria (E.coli).
Nosocomial (K.pneumoniae, P.aeruginosa, Enterococcus spp., Corynebacterium urealyticum).

ETIOLOGÍA
Es importante discriminar entre especies con capacidad uropatógena
Enterobacteriaceae, P. aeruginosa, otros bacilos G-, Enterococcus spp., estreptococos
β- Hemolíticos, levaduras, S. aureus, S. saprophyticus, A. urinae, etc.
de aquellas especies que generalmente representan microbiota urogenital o cutánea
Lactobacillus spp, difteroides distintos de C. urealyticum, Streptococcus del grupo viridans y
Bacillus spp. que no se considerarán valorables.

PATOGENIA
En condiciones normales la orina y las vías urinarias son estériles y sólo la uretra distal
está colonizada por flora cutánea y genital.

PATOGENIA. PUERTA DE ENTRADA:

Ascendente (colonización genital y perineal)
Hematógena (en el curso de una bacteriemia pueden aparecer abscesos renales o
pielonefritis aguda)

PATOGENIA
En circunstancias normales, estas bacterias son eliminadas por el flujo y las propiedades
antibacterianas de la orina
Si dichas bacterias no pueden ser eliminadas se inicia:
- una colonización (adhesión del microorganismo al uroepitelio, su multiplicación y su
eliminación por la orina) o
- una infección (implica lesión del epitelio vesical)

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CUADROS CLÍNICOS
BACTERIURIA ASINTOMÁTICA
DISURIA ESTÉRIL
CISTITIS
PIELONEFRITIS AGUDA
PROSTATITIS

DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. El diagnóstico microbiológico de la ITU se sustenta en 3

pilares:
1)Los síntomas clínicos
2)El urocultivo
3)El examen microscópico de la orina

Sistemático y sedimento: leucocituria, nitritos, hematuria, bacteriuria.

Tiras reactivas:
- piuria (estudio de la esterasa leucocitaria, enzima de los PMN) y
- bacteriuria (estudio de los nitritos, producto de la reducción bacteriana de los nitratos).
- Sensibilidad 80-90%.

Urocultivo Diagnóstico de confirmación

Identificación y cuantificación del microorganismo infectante
Sensibilidad antibiótica.
El problema:
delimitar en la orina obtenida por micción media, si la presencia de bacterias es realmente de
origen vesical o superior o por contaminación de la orina a su paso por el meato urinario.

Criterios de Kass
Bacteriuria significativa (=Infección) >105 UFC/ml
Bacteriuria no significativa <105 UFC/ml
En urocultivos recogidos por punción suprapúbica o renal se valorará cualquier recuento.
Falsos negativos sobre todo en individuos sintomáticos, varones y con microorganismos
grampositivos.
Falsos positivos con recuentos de 105 UFC/ml de lactobacillus y estreptococos con estudio
vesical negativo lo que indicaba contaminación.
Así en pacientes sintomáticos se valoran recuentos de >104 UFC/ml.

DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
Gram de orina: 1 bacteria/campo se relaciona bien con > 105 UFC/ml.

La fiabilidad del resultado depende de:

las condiciones en las que se haya recogido (para evitar su contaminación por la flora
periuretral y vaginal).
Conservación (a 4-8ºC hasta su procesamiento para evitar la proliferación de
microorganismos)
Maximo 24 h.
Micción media.
Sonda permanente la recogida se efectúa con aguja y jeringa.
En recién nacidos, lactantes y niños incontinentes el diagnóstico se establece por punción
suprapúbica, - alternativamente sondaje uretral o la bolsa colectora adhesiva.
Tuberculosis se requieren 3 muestras de la primera orina matinal (tres días consecutivos).

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MICCIÓN ESPONTÁNEA
• PREPARACIÓN DEL PACIENTE
• Limpieza correcta: lavar genitales con jabón y secar con gasa estéril o toalla limpia.
• Mujer: separar los labios, Hombres retirar prepucio.
• RECOGIDA DE MUESTRA
• siempre antes de recibir ciclos de antibióticos
• Eliminación primeros ml (eliminar posibles contaminantes).
• Recoger micción media (dos dedos) y desechar el resto

DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. CULTIVO DE LA ORINA

Semicuantitativa (asas calibradas de 0,01 o 0,001 ml).
número de ufc/mL del microorganismo
colonias bien aisladas para su identificación y sensibilidad ATB.
Diferentes medios de cultivo. A.Cled, AS
35-37ºC atmósfera aeróbica (24-48 h).

Siembra, identificación y sensibilidad

HEMOCULTIVOS: cuando hay infección sistémica, fiebre, sospecha de neumonía (para aislar el
agente causal) es obligatorio en este caso. Es la muestra estrella en microbiología, respuesta
mas rápida y adecuada, nos diagnostica las sepsis y bacteremia. Se usa para investigar la
presencia/ ausencia de microorganismo en la sangre. Se hacen 2 extracciones de sangre en
lugares distinto del cuerpo (en los 2 brazos), se mete en un frasco aerobio y otro anaerobio (de
una extracción) y tiros 2 iguales anaerobio y aerobio (en total 4), en los niños solo saco 1
(menos sangre), y lo pongo en frasco aerobio (mas habitual). INDICACIONES:
- Fiebre >38ºc o <36ºC
- Leucocitosis, leucopenia
- Meningitis falta…
El volumen: 8-10 ml por frasco (adulto) y 1-4ml en frasco pediátrico (cuanto mas sangre mejor
xq va a haber mas bacterias). La extracción de la sangre antes de iniciar el tto antimicrobiano.
Evitar contaminaciones (Desinfectar el sitio de venopunción, usar guantes, mascarilla, no tocar
con la mano el lugar de punción, etc…). Evitar los frascos rápidamente al laboratorio.
Realizar 2 extracciones en adultos en partes diferentes (frascos aerobio y anaerobio).
Momento de la extracción:
-antes del tto antibiótico, coincidiendo/ cerca del pico febril,

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-con tto antibiótico: justo antes de la siguiente dosis (valle),
-sospecha endocarditis: cualquier momento (bacteremia continua),
-no hay q esperar a pico febril en este caso.

Los vasos de HEMOCULTIVO se meten en un incubador, lo aguanta (favorece crecimiento

bacteriano), incubaciones durante 5 días (si se sospecha de hongos se mantienen hasta 15
días). Cuando crecen generan CO2, esto cambia ph, color?
Contaminación HEMOCULTIVO supone un coste de 4000$7 episodio.

-Bacteremia: presencia de bacterias en sangre, cuando estas invaden y se multiplican en el

torrente sanguíneo.
Bacteremia relacionada con catéteres: 75% de los episodios de infecc del catéter, fueron
errores en algún momento (inserción, manipulación…). Clorhexidina al 2% en base alcohólica
Estel antiséptico mas eficaz, por encima de la povidona en base alcohólica.
-Fungemia: presencia de hongos (levaduras u hongos filamentosos) en sangre, cuando estos
invaden y se multiplican en el torrente sanguíneo.

Mas frecuente son las bacteremias, son complicaciones graves de las infecciones bacterianas y
fungicas. Clasificación:

Momento de aparición: nosocomial, comunitaria o asociada a cuidados sanitarios

Origen: 1ª /2ª a otro foco de infeccioso (documentado microbiologiamente)
Patrón clínico: transitoria, intermitente y persistente
Puede ser transitoria (ej: cepillado dientes), intermitente (en det momentos, desaparece y
vuelve a aparecer), persistente (endocarditis, en válvula q ya esta mal, ocurre en válvula
naturales y artificiales, van creando un biofilm pegado a la válvula donde se multiplican, y va
mandado continuamente bacterias a la sangre).

SEPSIS: disfunción orgánica y potencialmente mortal causada x una respuesta no regulada del
individuo vs a la infección (sospechada o documentada micro biológicamente). Es un cuadro
tiempo dependiente (cada hora q se retrasa la admin del antibiótico aumenta la mortalidad un
7%). Mata a muchas personas en los países desarrollados. Causa 11mill muertes/año y afecta a
49mill personas/años y la ½ son niños. Esto se puede evitar con dg precoz y atención clínica
adecuada. Esta muertes son a menudo consecuencia de enf diarreicas o infecciones de las vías
respiratorias bajas y tb infecc urinarias. Sepsis severa: 2% pacientes. Tasa mortalidad 30-50%.

SHOCK SÉPTICO: cuadro de sepsis q cursa alteraciones circulatorias, celulares y metabólicas lo

suficientemente graves como para aumentar sustancialmente la mortalidad (cifras sup al 40%)

La bacteremia suele ser un proceso autolimitado (invasión escasa) y la septicemia un cuadro

grave (invasión masiva).

Bacteriuria significativa >10 elevado a 5 UFC/ml (criterio de ITU) del mismo uropatogeno
Bacteriuria no significativa: <105 UFC/ml orina
Si hay mas de 3 bacterias en la orina se considera q esta contaminada.
Punción supracubica: directamente en la vejiga.

Gram de orina: 1 bact/campo se relaciona bien con >105 UFC/ml.

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