DIPLOMADO: EL LABORATORIO CLINICO EN

MICROBIOLOGIA

MODULO III

INFECCIONES DEL TORRENTE

SANGUÍNEO Y CATÉTERES

Lic. TM JUAN C. RIVEROS QUINTANA

 Paciente que se presenta en Urgencias con
signos clínicos de una infección en potencia:

¿Cuál es la etiología de la infección?

¿Es esta infección de origen viral o
bacteriano?
¿Es necesaria una antibioticoterapia?
¿Existen signos severos y riesgo para
un cuadro de sepsis ?
¿La antibioticoterapia es eficiente?
 infecciones del torrente sanguíneo

Las infecciones del torrente sanguíneo

son enfermedades graves caracterizadas
por una alta morbilidad y mortalidad.
los hemocultivos son utilizados para
aislar los microorganismos circulantes
y ha sido el estándar en el diagnóstico
que permite la elección del tratamiento.
Diagnostico Microbiológico

Dada la estricta necesidad de brindarle al médico

información rápida y comprensible para establecer un
tratamiento inicial adecuado y precoz

¿Cómo optimizar el
diagnóstico microbiológico?
Tratamiento antibiótico apropiado

 Existe una relación entre tratamiento antibiótico

inapropiado y riesgo de muerte.
 La mortalidad también se relaciona con la demora en
instaurar el mismo desde que se produjo el shock
septico.
 Iniciar la terapia correcta dentro de la 1ra. hora del
episodio séptico se relaciona con 80% de
sobrevida.
 Dentro de las 6 primeras horas, por cada hora
adicional de demora sobrevida cae un
promedio de 7,6%.
Optimizar
 5-6 hs. deeldemora
diagnósticosobrevida
microbiológico
= 42% !!!
 9-12 hs. de demora sobrevida = 25%
 Bacteremia

• La bacteriemia se define como presencia de

bacterias en sangre demostrada por un hemocultivo
positivo. El término fungemia hace referencia a la
presencia de hongos en sangre.
• Se produce cuando los microorganismos invaden el
torrente sanguíneo y se multiplican a un ritmo que
supera la capacidad del sistema reticuloendotelial
para eliminarlos.

La etiología va a estar condicionada por el origen de la infección

(comunitaria, nosocomial o asociada a cuidados sanitarios) y los factores
predisponentes del huésped.
 Bacteremia
Esta invasión puede ser:
– Foco infeccioso extravascular:
• Capilares sanguíneos
• Vasos linfáticos
– Foco infeccioso intravascular:
• Endocarditis
• Infección de catéteres intravenosos o arteriales
• Falla en las defensas del huésped a localizar la
infección.
• Falla del tratamiento medico en remover, drenar o
esterilizar el foco.
• La incidencia de la bacteriemia depende del tipo de
población estudiada (5-30 casos por 1000
pacientes hospitalizados)
Foco infeccioso
extravascular
Foco infeccioso
intravascular
 Bacteremia
En función del patrón clínico
Bacteremia transitoria -Manipulación de mucosas y tejidos infectados.
-Maniobras odontológicas.
-Algunas meningitis , Neumonías, Pielonefritis.

Bacteremia intermitente -En pacientes con fiebre de origen

desconocidos asociados a:
-Abscesos no drenados (Pélvico,
Abdominal ,Prostático, Hepático.)

Bacteremia continua --Asociados a focos Endovasculares.

- Característica de endocarditis infecciosas.
- Catéter intravascular infectado.
- Fiebre tifoidea, Brucelosis.
Se consideran bacteriemias de brecha aquellas que se
producen a pesar de que el paciente esté recibiendo
un tratamiento antibiótico adecuado tras hemocultivos
de control previos negativos.
 ¿Cuando y donde puede ocurrir la
bacteremía?
La bacteria y hongos entran a sangre de
sitios diversos:

Sitios intravascular (19%)

Tracto genito- urinario (17%)
Tracto respiratorio (12%)
Intestino y peritoneo (5%)
Piel (5%)
Tracto biliar (4%)
Abscesos intra-abdominal (3%)
Otro conocido (8%)
y sitios desconocidos (27 %)
Cumitech 1C Blood Cultures IV 2005 ASM Press American Society for Microbiology
 SÍNDROMES CLÍNICOS
COLONIZACIÓN: Crecimiento de bacterias sin respuesta inflamatoria
acompañada y que sucede en tejidos o cavidades que habitualmente no
son estériles.
INFECCIÓN: Fenómeno caracterizado por la respuesta inflamatoria debida a la
presencia de microorganismos o por la invasión de tejidos normalmente
estériles.
BACTERIEMIA: Presencia de bacterias viables en sangre, a la práctica
equivalente a un hemocultivo positivo. Un solo hemocultivo positivo es
suficiente excepto por microorganismos habitualmente contaminantes
(SPCN)
SÍNDROME RESPUESTA INFLAMATORIA SISTÈMICA (SIRS):respuesta
clínica generalizada a una amplia gama de agresiones (infección,
traumatismo, inflamación...) Se define en base a parámetros clínicos (FR,
FC,Tª) y analíticos (leucos)
SEPSIS: SIRS por infección
SHOCK: Hipotensión debida a sepsis, aunque hay una correcta expansión del
volumen intravascular, con alteración de la perfusión de algún órgano.
 Definiciones y criterios de sepsis, modificados de la
conferencia de consenso de 1991

• Tabla I. Definiciones y criterios de sepsis, modificados de la

conferencia de consenso de 1991 (American College of Chest
Sepsis Cuando sospecharla

Physicians and the Society of Critical Care Medicine )

Síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SRIS,
SIRS): presencia de dos o mas de las siguientes
condiciones:
Temperatura: >38°C ó < 36°C (hipotermia :neonatos, ancianos).
Frecuencia cardiaca: >90 latidos/min
Frecuencia respiratoria: >20 respiraciones/min,
ó PaCO2 <32 mm Hg
Cuenta de leucocitos: >12,000 células/mm3,
<4,000 células/mm3,
ó >10% de formas inmaduras
La comprobación de bacteriemia en un paciente con SIRS sella el diagnóstico de sepsis.
El termino “septicemia” fue desaconsejado en la conferencia de consenso de 1991
 Sesíón Formación Continuada del Servicio de Cirugía General. CHGUV.
Valencia, 23 Mayo 2007

OTROS

TRAUMA
BACTERIEMIA

FUNGEMIA

INFECCION
SEPSIS SIRS
PARASITEMIA

QUEMADURA
VIRUS

OTROS
PANCREATITIS
 Conferencia Internacional de Definición
de Sepsis - 2001

Se aborda la redefinición de SIRS y sepsis,

con la recomendación de estratificar a los
pacientes no sólo en función de la clínica,
sino también atendiendo a marcadores
bioquímicos como PCR, IL-6 y PCT,
independientemente de los resultados de
estudios microbiológicos.
Síndromes sépticos (estadios de la sepsis): 1991

• Sepsis: SRIS debido a infección documentada,

clínica y/o microbiologicamente.
• Sepsis grave: Sepsis que se acompaña de
disfunción de órganos, hipotensión o hipoperfusión.
• Sepsis grave de alto riesgo: Sepsis grave que tiene
un riesgo de mortalidad hospitalaria muy elevado,
del 30% o mayor.
• Shock septico: Cuadro de sepsis que cursa con
alteraciones circulatorias, celulares y del
metabolismo lo suficientemente profundas como
para aumentar sustancialmente la mortalidad.
Definiciones del Tercer Consenso Internacional sobre
Sepsis y Shock Séptico (2016)

• la sepsis se define como una disfunción

orgánica que amenaza la vida de un paciente
causada por una respuesta no regulada del
individuo frente a la infección.
• Shock septico Pacientes con sepsis y
necesidad sostenida de vasopresores para
mantener PA> 65 mmHg y con niveles de
Lactato > 2 mmMol/L (>18 mg/dL) (Un valor
superior es predictor de gravedad, mala evolución y mortalidad )
Mortalidad del 40 % o mas.
Definiciones del Tercer Consenso Internacional sobre
Sepsis y Shock Séptico (2016)

• Un aumento en la puntuación de Sequential (Sepsis-

related) Organ Failure Assessment (SOFA) de 2 o más
constituye disfunción orgánica.
• Esta escala tiene en cuenta la alteración del nivel de
conciencia, la presencia de una presión arterial sistólica
≤100 mmHg y/ o la presencia de una frecuencia
respiratoria ≥22 rpm (respiraciones por minuto).
• Recomiendan que los criterios SOFA reemplacen los
criterios síndrome de respuesta inflamatoria sistémica
recomendados previamente.
 FRACASO ORGÁNICO

DISFUNCIÓN ORGÁNICA
BIOMARCADORES DE SEPSIS
 MARCADORES BIOLÓGICOS DE SEPSIS

Un marcador de sepsis o de infección debería cumplir los

siguientes requisitos :
• Alta sensibilidad que asegure que todos los pacientes
con infección tengan un resultado positivo, y elevada
especificidad que evite que los pacientes sin infección
sean diagnosticados como positivos.
• Precoz en el tiempo para tener un diagnóstico en las
primeras horas de desarrollo de la infección.
• Permitir diferenciar entre infección viral o bacteriana.
• Permite detectar la presencia de un cuadro infeccioso,
diferenciando el proceso de un SRIS de otra etiología .
• Reflejar los resultados del tratamiento con
antimicrobianos para el seguimiento del paciente.
 Procalcitonina (PCT)

• La Procalcitonina (PCT) precursor de la calcitonina, proteína

sintetizada en la glándula tiroides y células neuroendocrinas del
pulmón.
• VN : (<0,05 ng/ml). Se cree que en procesos bacterianos inhiben
el paso final de PCT a calcitonina, hecho que origina que
aumenten sus valores específicamente en relación directa a la
carga bacteriana.
• La PCT aumenta su concentración en la sangre a las 2-6 h tras el
estímulo bacteriano y los valores máximos se alcanzan en 12-36 h
(vida media 20-36 h).
• valores de sensibilidad variables, entre el 75 y el 98%.
• Es conocido que los valores de este marcador son superiores en
infecciones causadas por bacilos gramnegativos.
 Proteína C reactiva (PCR),

• La proteína C reactiva (PCR), es una proteína de fase

aguda liberada por lo hepatocitos en respuesta a
cualquier tipo de proceso infeccioso (bacteriano o vírico) o
inflamatorio, lo que limita su capacidad diagnóstica y
pronóstica.
• Es mejor utilizarlo con otros conjuntamente con otros
biomarcadores.
• Comienza a elevarse en sangre a las 12 horas, por lo que
es menos útil en el diagnóstico inicial del cuadro agudo .
 La interleucina 6 (IL-6)

• La interleucina 6 (IL-6) y IL-8, citoquinas mayor

sensibilidad y especificidad para distinguir sepsis de un
SRIS no infeccioso.
• Se ha demostrado el valor diagnóstico y pronóstico de
ambas interleucinas en pacientes neutropénicos.
Según algunos autores la IL-6 tendría mayor valor
diagnóstico de sepsis en población adulta que la IL-8,
pero menor que la PCT.
 En colaboracion con los macrofagos
implicados en la respuesta Inmune Celular

IL-2
Ag Th1 TNF
Linfocito
IFN-
IL-12
CD4 + Monocitos
Macrofagos

CPA Th0 Th0

LTh2 mastocitos
Basofilos

IL-4
IL-4
IL-5
Th2 IL-6
En colaboracion con los macrofagos IL-10
implicados n la respuesta Inmune Humoral
IL-13
En la inmunidad innata estimula la síntesis de proteínas de fase aguda por los hepatocitos
y por lo tanto contribuye a los efectos sistémicos de la inflamación (la llamada “respuesta
de fase aguda”).
En la inmunidad adaptativa estimula el crecimiento de los linfocitos que se han
diferenciado a células productoras de anticuerpos.
Procalcitonina
PCT es actualmente el mejor marcador
de infección sistémica bacteriana
 Epidemiología de la Sepsis

• Continúa siendo causa importante de morbilidad y

mortalidad.
• Se producen aproximadamente 250,000 casos de
sepsis en EE.UU. cada año.
• Incidencia en aumento por: mayor población
añosa, mayor población con inmunocompromiso,
incremento de intervenciones invasivas, aumento
de organismos resistentes.
The Epidemiology of Sepsis in the United States from 1979 through 2000N Engl J Med
2003;348:1546-54.
¿ Que es un Hemocultivo ?
¿ Que es un Hemocultivo ?

El hemocultivo es una técnica

microbiológica cuya finalidad es la
detección de microorganismos en el
torrente sanguineo.

Se define como un volumen de

sangre obtenido en condiciones
asépticas (preferiblemente por
punción venosa) que se inocula a
una o más botellas (generalmente
que contiene medio de cultivo en
caldo).
 Los Los
principales usos
tres principales
del
usosHemocultivo
del hemocultivo

1. Confirmar la etiología
infecciosa.
2. Identificar el agente
etiológico.
3. Orientar la terapia antibiótica
• La ventaja del Hemocultivo puede estar limitada por
distintos factores que determinan resultados falsos
positivos, falsos negativos.
– Induce a errores diagnósticos.
– Puede provocar tratamientos inadecuados.
– Favorece el uso irracional de ATB’s.

• Las cultivos contaminados han sido reconocidos

como un asunto problemático por décadas y siguen
una fuente de frustración igualmente para el clínico
y el personal de laboratorio.
 Limitaciones del Hemocultivo

No existe un Gold standard

para documentar bacteremias.
Ninguno de los sistemas de
hemocultivo recupera el 100%
de los agentes potenciales de
bacteremias.
 Impacto de Hemocultivos

Aproximadamente 40 – 50% de los

episodios de sepsis cursan
hemocultivos negativos.
• Antibióticos previos.
• Volumen/numero insuficiente de
sangre/muestras cultivadas .
• Gérmenes fastidiosos o de
crecimiento lento.
• Gérmenes no viables pero
cuadro clínico desencadenado por
componentes de pared.
Indicaciones de Hemocultivo
 Indicaciones de Hemocultivo

A que patologías no les puede faltar Hemocultivos :

Sepsis
Meningitis
Endocarditis
Píelonefritis
Infección intraabdominal
Fiebre de origen desconocido
Infecciones graves de la piel
Neumonía
Osteomielitis
Artritis
Infecciones relacionados al cateter.
Sindrome febril en pacientes inmunocomprometidos.
Buen juicio clínico
Rendimiento de los Hemocultivos
 Hemocultivos. Factores que afectan
el rendimiento

Buen juicio clínico

Toma de muestra antes de

iniciar ATB
Dependientes del médico
Volumen y número de
hemocultivos

Correcta antisepsia de la piel

 Hemocultivos. Factores que afectan
el rendimiento

TIEMPO DE INCUBACION

UTILIZACION DE FRASCO
ANAEROBIO

DEPENDIENTES DEL
MICROBIOLOGO COMBINACION DE
SISTEMAS DE HEMOCULT

SUBCULTIVOS INICIALES
Y TERMINALES
Cuando tomar los Hemocultivos
Momento de la obtención de la muestra

41 Num. Bacterias 800

Temperatura (relativo)
40.5
700

40
600
39.5

500
39

38.5 400

38
300
37.5
200
37
100
36.5

36 0

Tiempo
 Momento de la obtención de la
muestra

Tiempo
• Tan pronto como sea posible después del inicio de los síntomas clínicos
sospecha de infección.
• Se ha documentado que el mejor momento para obtener la muestra de
sangre es entre 2 horas a 30 minutos antes del pico febril .
• ANTES de la administración de antibióticos
• Pacientes bajo tratamiento ATB Valle INTERDOSIS
• Recoger el cultivo de sangre basada en la condición clínica del paciente y
de la necesidad inmediata de terapia antimicrobiana.
• Tiempo entre cultivos de sangre en un período 24hr no es crítico.
Cuando tomar los Hemocultivos
Momento de obtención de la muestra
 Sitio de Toma de Hemocultivos

No hay diferencias en el rendimiento del

cultivo de sangre obtenida de venas en
comparación a las muestras arteriales.
No se debe sacar sangre atreves del catéter
excepto que quiera documentarse una
infección relacionada a catéter o bien si el
paciente no tiene accesos en vasos sanguíneos.
Toma de muestra
 Toma de muestra (1)

Palpación vena escogida

Limpieza de la zona con
alcohol isopropilico 70º
durante 30 segundos y luego
usar:
• Clorhexidina 2 % (en vehículo
alcohólico)
• Alcohol iodado 1 – 2 % (30
segundos)
• Solución acuosa de yodo (1,5 a
2 minutos)
 Toma de muestra (1)

• Desinfección del tapón

del frasco de hemocultivo
• La limpieza se debe realizar con
alcohol isopropilico 70 %, NO con
productos iodados, esos corroen
la goma y aumentan la
posibilidad de contaminación.
 Toma de muestra (2)

Dejar secar el compuesto

iodado para que ejerza la
acción oxidante.
Evitar tocar con los dedos el
lugar de la venopunción
No hablar ni toser en el
momento de realizar la
extracción.
En los enfermos alergicos a los
compuestos iodados realizar
dos limpiezas con alcohol
Isopropilico.
 Respecto a la utilización de antiséptico para la desinfección de la piel, el 94,7% utiliza un
único antiséptico (Alcohol 45%, Povidona Yodada 26,8%, Clorhexidina 23%); el 3,3%
emplea primero alcohol y luego Povidona yodada y el 0,5% usa primero tintura yodada y
posteriormente alcohol. Gráfico 1.

SANCHEZ BERMEJO, R. et al. Hemocultivos: ¿Qué te han contado y qué

haces?. Enferm. glob. 2012, vol.11, n.26, pp. 146-163
La clorhexidina alcohólica necesita 15-30 segundos para secar;
la tintura de yodo 30 segundos y la povidona yodada, 2 min

7.5%

clorhexidina al 2%

(p<0.0001)

2.1%

MADEO M, BARLOW G. Reducción de las tasas de contaminación de hemocultivos mediante el uso

de un aplicador de solución de clorhexidina al 2% en unidades de admisión de pacientes agudos. J
Hosp Infect 2008;69:307-9
 Toma de muestra (3)

Colocar la aguja sobre

la vena con el bisel
hacia arriba e
introduzca la aguja en
el centro de la vena sin
titubeos de 1-1,5 cm,
aproximadamente.
 Toma de muestra (4)

Usar cultivos aeróbicos y

anaeróbicos.
La sangre se vierte en el
frasco evitando producir
hemólisis; el tapón de
caucho debe desinfectarse
previamente con yodo al 1-
2%, si se trata de frascos
convencionales. La muestra
se envía inmediatamente al
laboratorio de microbiología,
debidamente identificada.
Inoculación de la sangre en los medios de cultivo

La tasa de contaminación cuando la aguja se cambio antes de la inoculación fue 2.0 %, comparada con
3.7 % cuando la aguja no se cambio.
 El flebotomista extrae sangre
del paciente con el uso de
torniquete y agujas.
 Funciones:
 Comprobar que los equipos
utilizados para la recolección
de la sangre están
debidamente desinfectados
 Etiquetado correcto y preciso
de muestras de sangre
 Almacenamiento eficaz y
manejo apropiado de la sangre
recolectada
 Preparación de equipos
necesarios, tales como agujas,
torniquete, gasas, algodón y
alcohol
 Verificación de la identidad del
paciente o el donante de
sangre
Volumen de sangre
 Volumen de sangre (1)

Un resultado negativo es casi siempre interpretado

sin tener en cuenta el volumen de sangre.
El volumen de sangre obtenido para el hemocultivo
es la variable más importante.
En Adultos el número de MO presentes en sangre es
pequeño, típicamente menos de 10 UFC/ml y a
menudo menos de 1 UFC/ml.
En infantes y de niños pequeños , típicamente es
mayor de 100 a 1.000 UFC/ml, el aumento del
volumen de sangre , aumenta la recuperación
microbiana.
El volumen de sangre que se obtiene es la
variable que más afecta a la sensibilidad del
hemocultivo

Update on Detection of Bacteremia and Fungemia LARRY G. REIMER,1,2,3* MICHAEL L. WILSON,4,5 AND MELVIN P.
WEINSTEIN6,7,8CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, July 1997, p. 444–465
 Volumen de sangre (2)

En un estudio, el recuento bacteriano promedio de

niños con bacteremia por Haemophilus influenzae
era de 6000 unidades formadoras de colonias
(CFUs) por ml de sangre y niños con Streptococcus
pneumoniae era de 50 CFUs por ml de sangre.
En ese estudio, sin embargo, una importante
proporción (23%) de las cultivos tenían recuentos de
colonias de entre 0 y 4 UFC por ml, lo que sugiere
que el nivel de bacteriemia en bebés y niños
pequeños a veces puede ser baja y por lo tanto más
difícil de detectar en los hemocultivos con pequeño
volumen de sangre.
How Reliable Is a Negative Blood Culture Result? Volume of Blood Submitted for Culture in
Routine Practice in a Children’s Hospital Thomas G. Connell, MRCPIa PEDIATRICS Volume
119, Number 5, May 2007
Cumitech 1C Blood
Cultures IV 2005 ASM
Press American Society for
Microbiology

Copyright 2007 ASM Press

American Society for Microbiology

© Instituto Nacional de
Salud, 2005

Copyright ©2007 Clinical

and Laboratory Standards
Institute.
 Volumen de sangre(3)

La proporción entre el volumen de sangre obtenida y el

volumen de caldo de cultivo debe estar en una relación de 1:5
– 1:10.
El volumen de sangre dependerá de la edad del paciente; por
cada venopunción se recomienda:
Adultos: 10 – 30 mL En pacientes pediátricos ningún volumen
Niños: 1 – 5 mL de sangre es demasiado pequeño para
Lactantes: 1 – 2 mL cultivo cuando se sospecha de sepsis
Neonatos: 0,5 – 1 mL
Para los adultos, cada mililitro adicional de sangre cultivado
aumenta la recuperación microbiana hasta el 3%.

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS BACTERIOLÓGICOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

Serie de Normas Técnicas N° 28 Elaborado por Rosa Sacsaquispe Contreras y Gladis Ventura
Egúsquiza. — Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2001
 Volumen de sangre(4)
VOLUMEN DE HEMOCULTIVOS EN ADULTOS
 Volumen de sangre(5)
VOLUMEN DE HEMOCULTIVOS EN ADULTOS
 Volumen de sangre(6)
VOLUMEN DE HEMOCULTIVOS EN ADULTOS
Volumen de sangre(7)
VOLUMEN DE HEMOCULTIVOS EN
PEDIATRICOS
RAZONES DEL BAJO VOLUMEN DE SANGRE
HEMOCULTIVADO EN NEONATOS :

• Dificultad en la toma de muestra.

• Preocupación acerca de la volemia en estos
pacientes.
• Evitar transfusiones después de repetidas
punciones por diversos motivos.
• Empezar antibiótico sin retraso.
Volumen de sangre(8)
VOLUMEN DE HEMOCULTIVOS EN
PEDIATRICOS
VENTAJAS DE VOLUMEN DE SANGRE
CORRECTO EN NEONATOS
> 1 ml y > de 1 hemocultivo

• Incremento en la detección de
bacteriemia.
• Mejor discriminación de contaminantes
• Discontinuar terapia innecesaria.
• Optimización de la terapia antibiótica.
• Reducción de costos y de presión de
selección de cepas resistentes.
El peso basado para el volumen de colección

La carga bacteriana en sepsis es variable en diversas

categorías de edad .
la bacteriemia de bajo nivel es muy común en la población
pediátrica y que el volumen de sangre para cultivo debe ser
siempre proporcional al peso (al volumen de sangre total) y
a la edad .
Se recomienda cultivar un volumen de sangre
aproximadamente del 4-4.5% del volumen total de sangre
del paciente, volúmenes inferiores determinan en
bacteriemias de bajo nivel resultados falsos negativos o un
mayor tiempo para la detección de un resultado positivo.

DESDE EL LABORATORIO A LA CLÍNICA El hemocultivo pediátrico: indicaciones y

técnica M. de Cueto y A. Pascual -An Pediatr Contin. 2007;5(5):279-82
 El peso basado para el volumen de colección
El volumen recomendado debe obtenerse en base al peso
del paciente y a la pérdida de volemia que ello representa
Cumitech 1C Blood Cultures IV 2005 ASM Press American Society for Microbiology
Número de hemocultivos
 Número de hemocultivos (1)

Se recomienda:
• Obtener los 2-3 set de hemocultivos al mismo
tiempo, de diferentes sitios de punción.
• Obtener 2-3 set hemocultivos en 24 horas
separados por 30 a 90 minutos, no sólo
aumenta la probabilidad de recuperar las
bacterias a partir de la sangre, sino que
también puede ser una guía para diferenciar
una bacteremia verdadera de una
contaminación.
 Definiciones importantes

CLSI, M47-A, 2007

Cultivo microbiológico de la sangre

Set de obtenido por una punción, independiente
Hemocultivo del número de botellas en el cual la
muestra haya sido distribuida.

Serie de Un grupo de hemocultivos

relacionados temporalmente con un
Hemocultivos episodio sospechoso de bacteriemia o
fungemia
 Definiciones importantes

Brazo derecho Brazo izquierdo

de 1 único de 1 único
sitio de punción sitio de punción

“1” hemocultivo “1” hemocultivo

= =
2 botellas 3 botellas
= =
1 SET de hemocultivos 1 SET de hemocultivos

2 sets = SERIE de hemocultivos

Número de hemocultivos (2)
Número de hemocultivos (3)
 Número de hemocultivos (4)

10 ml x botella
1 set = 20 ml
Por que tomar más de un hemocultivo

Ayuda a diferenciar
Obtener el volumen bacteriemia de
correcto de sangre contaminación al aislar
microorganismos de piel

Documenta Mejora la detección

bacteriemia continua de bacteriemias
y persistente intermitentes
Por que tomar mas de un hemocultivo
Transporte
Transporte

Dentro de las 2 horas

En los casos en que la introducción de
un hemocultivo en un sistema
automático se demore más de 2h,
sobre todo si ha estado incubado a 35-
37ºC, debe realizarse un subcultivo
ciego .
Nunca refrigerar .
Proteger del calor y la luz del sol
Recepción y registro de los hemocultivos
Empaque seguro :
Evitar que se rompa.
Evitar que se derrame.
Evitar exposición a agentes
Infecciosos.
Criterios de rechazo.
Problemas de identificación serios.
Frascos dañados o contaminados.
En el caso de graves deficiencias en el
envío de la muestra se contacta con el
servicio que la remite para
solucionarlas y después se procesa.
Atmosfera tipo de frascos
 Atmosfera , tipo de frascos

• Incidencia de bacteriemia por anaerobios estrictos

ha disminuido en los últimos años.
• En ciertos casos puede deducirse en base a la
infección (foco intra-abdominal, ginecológicos y
necrotizantes de piel y partes blandas).
• El uso de frascos anaerobios mejora la detección de
bacterias anaerobias facultativas como Abiotrophia,
S. aureus, enterobacterias, estreptococos y C.
glabrata
• La deteccion de levaduras distintas de y H,.
Capsulatum, C. neoformans y P. aeruginosa es
pobre en frascos anaeróbicos
Atmosfera , tipo de frascos
 Frascos con resina

• Se usan para disminuir la acción de los antibióticos

• Mejoran la detección de estafilococos y levaduras
• El verdadero efecto de las resinas o del carbón es
discutible y posiblemente la mayor recuperación se
deba a una lisis mecánica de los leucocitos y a la
liberación de microorganismos intracelulares
• Hay algunos trabajos que demuestran el
incremento en la detección de contaminantes .
Tiempo de incubación
 Tiempo de incubación

Cultivar por cinco días es suficientes para

recuperar casi todos los microorganismos
significativos (el 99%). Mas de 5 dias no
mejora la recuperación de bacteremias.
La mayoría de los organismos fastidiosos se
pueden también recuperar en 5 días, por
ejemplo los organismos de HACEK
(Haemophilus aphrophilus , Actinobacillus
actinomycetemcomitans , Cardiobacterium
Hominis , Eikenella corrodens , y Kingella
kingae), brucella spp.
Advanced Techniques in Diagnostic Microbiology- Yi-Wei Tang
Charles W. Stratton-2006 Springer USA.
 Tiempo de incubación

El periodo de cultivo para brucella spp. había

sido polémicos hasta el estudio por Bannatyne
et el al. (1997) que demostró que 90 de 97 tales
pacientes bacterémicos llegaron a ser cultivos
positivos en un plazo de 5 días. Tiempo de
observacion hasta 21 dias.

Advanced Techniques in Diagnostic Microbiology- Yi-Wei Tang

Charles W. Stratton-2006 Springer USA.
Tiempo de incubación
Hemocultivo manuales
 Hemocultivos : Sistemas manuales

Simples de usar.
Solo necesitan incubadora y en algunos casos
agitador.
Métodos muy económicos.
Ideales para laboratorios que realizan pocos
cultivos.
Ingredientes de los medios.
Control de calidad de los medios.
 Hemocultivos : Sistemas manuales

Hospital San Bartolome

Composicion:
Caldo tripticasa soya (TSB)
Extracto de levadura 0.5%
Polianetol sulfonato de sodio
(SPS) 0.03%
Sacarosa 10%
Sulfato de magnesio 0.25%
Gelatina 1.2%
 CONVENCIONAL
MEDIO DE HEMOCULTIVO

MEDIO
• Tripticase soy broth
• soybean-casein digest (SCD) broth.
• Brain heart infusion (BHI) .
• Columbia broth base.

Estudios comparativos han demostrado que no existe un medio de cultivo

que pueda considerarse superior a todos los demás.
 CONVENCIONAL
MEDIO DE HEMOCULTIVO

Anticoagulantes:
• Polianetol sulfonato de sodio (SPS) al 0.025 a
0.050% . El SPS inhibe la lisozyma, inactiva
aminoglucosidos y polymyxin B, inhiben la
fagocitosis y el complemento.
• El SPS inhibe el crecimiento de Neisseria
meningitidis de N. gonorrhoeae. Gardnerella
Vaginalis , Streptobacillus moniliformis ,
Peptostreptococcus anaerobius , Francisella
tularensis , Moraxella catarrhalis .
• Es posible neutralizar el efecto inhibidor del SPS
agregando gelatina (1.2%) a los medios de
cultivo.
Diagnostic microbiology –Connie R. Mahon and George Manuselis- 1995 USA
 CONVENCIONAL
MEDIO DE HEMOCULTIVO

Anticoagulantes:
• La heparina puede ejercer actividad
antimicrobiana.
• Citrato de sodio de 0.5%- al 1% puede inhibir
CGP.
• El amilosulfato de sodio (SAS) inhibe K.
pneumoniae.
• EDTA inhibidor de ciertos microorganismos.

Diagnostic microbiology –Connie R. Mahon and George Manuselis- 1995 USA

 CONVENCIONAL

MEDIO DE HEMOCULTIVO

Sacarosa (10-30%).
• Estabilizador osmotico, recuperación en
bacteremias por BGN en pacientes sometidos a
terapia antimicrobiana, casos en la que se
prevee un numero reducido de bacterias 10
UFC/ml o menos.
• La sacarosa ejerce un efecto protector sobre
MO que han sufrido daño de sus paredes
celulares (previniendo los cambios de presión
osmótica).
 Medio Bifásico Ruiz Castañeda

Características
Caldo Tripticasa soya
Agar tripticasa soya en plano
inclinado
Anticoagulante: SPS
Ventajas
Menor invasión a los frascos
Elimina el subcultivo manual
Reduce el riesgo de
contaminación del personal y del
cultivo .
Ideal para aislamiento de Brucella
Hemocultivos : Sistemas manuales

Hospital San Bartolome

PROCEDIMIENTO EN CASO DE HEMOCULTIVOS POSITIVOS Incubación 35 °C Observacion de crecimientos en los medios

Subcultivo con jeringa Placas a utilizar Incubación 35 °C

Identificación de colonias

Identificación y Antibiograma
Hemocultivo Automatizados
Hemocultivo Automatizado - Ventajas
 Hemocultivos : Sistemas comerciales

Monitorización continua :
Ventajas :
• DETECCION PRECOZ
• DISMINUYE EL TRABAJO DEL LABORATORIO
• NO SON NECESARIOS SUBCULTIVOS INICIALES NI
TERMINALES
• PERMITEN INOCULOS DE 10 ml DE SANGRE
• NO TIENEN DESHECHOS RADIOACTIVOS
• MICOBACTERIAS
• DETECTOR,INCUBADOR Y AGITADOR JUNTOS
• SISTEMAS INFORMATIZADOS
• DIAGNOSTICO DE BACTERIEMIA RELACIONADA A
CATETER DE LARGA PERMANENCIA
• CONTROL DE CALIDAD POR FABRICANTE.
 Hemocultivos Automatizados

Monitorización continua :
Difieren en :
• EL MÉTODO DE DETECCIÓN DE CO2.
• EN LA CAPACIDAD DE LOS FRASCOS.
• EN EL TIPO DE MEDIO DE CULTIVO UTILIZADO.
• EN EN LA FRECUENCIA DE LECTURA.
• RESINAS O CARBÓN ACTIVADO: REMOVEDORES DE
ANTIBIÓTICO.
• DETECCIÓN POR PRESIÓN, COLOMETRIA O FLUORIMÉTRIA
• EN EN LA CAPACIDAD MÁXIMA DE LOS INCUBADORES
Desventajas :
• COSTO (P/LABORATORIOS PEQUEÑOS)
• TAMAÑO
Hemocultivos : Sistemas comerciales
Hemocultivos : Sistemas comerciales
BacT/ALERT
Combination Unit
(120 cells)

BacT/ALERT 3D - (240 cells)

Outline
 BacT/ALERT Unsurpassed Recovery
Rare Organism Club

Actinobacillus actinomycetemcomitans Clostridum septicum Ochrobactrum anthropi

Actinomyces meyeri Coccidiodes immitis Paeciliomyces species
Actinomyces species Corynebacterium xerosis Pasteurella multocida
Actinomyces viscosus Cryptococcus laurentii Peptostreptococcus asaccharolyticus
Agrobacterium radiobacter Cryptococcus neoformans Peptostreptococcus micros
Arcanobacterium haemolyticus Desulfovibrio desulfuricans Prevotella buccae
Aspergillis fumigatus Dysgonic Fermenter 3 (DF-3) Prototheca wickerhamii
Aspergillus terreus Eikenella corrodens Pseudomonas gladioli
Bacteriodes oratus Erysipelothrix rhusiopathiae Pseudomonas mesophilica
Bacteroides caccae Flavimonas oryzihabitans Rhodococcus equi
Bacteroides thetaiotaomicron Flavobacterium meningosepticum Roseomonas gilardii
Bartonella (Rochalimaea) henselae Francisella tularensis Rothia dentocariosa
Bilophila wadsworthia Gardnerella vaginalis Salmonella poona
Blastomyces dermatitidis Gemella morbillorum Salmonella typhi
Borrelia species Gemella species Salmonella typhimurium
Brucella abortus Haemophilus aphrophilus Scedosporium prolificans
Brucella melitensis Haemophilus influenzae, group B Serratia marcescens
Brucella suis Helicobacter cinaedi Shewanella putrifaciens
Burkholderia pickettii Histoplasma capsulatum Stomatococcus mucilagenosus
Campylobacter coli Kingella kingae Streptobacillus moniliformis
Campylobacter fetus Kluyvera cryocrescens Streptococcus adjacens
Campylobacter jejuni Lactobacillus viridans Streptococcus agalactiae
Campylobacter lari Legionella species (additive required) Streptococcus bovis
Campylobacter upsaliensis Leishmania species Streptococcus defectivus
Candida glabrata Leptospira species Streptococcus mitis
Candida parapsilosis Leptotrichia buccalis Streptococcus pyogenes
Candida tropicalis Leuconostoc mesenteroides Torulopsis glabrata
Capnocytophaga canimorsus Listeria monocytogenes Vibrio cholerae
Capnocytophaga species Methylobacterium mesophilicum Vibrio vulnificus
Cardiobacterium hominis Moraxella catarrhalis Wangiella dermatiditis
CDC Group DF-2 Moraxella osloensis Wolinella species
CDC Pink coccoid Group (gnr) Mycobacterium chelonae Xanthomonas maltophilia
Chromobacterium violaceum Mycobacterium fortuitum Yersinia enterocolitica
Chryseomonas luteola Mycobacterium species Yersinia pestis
Clostridium bifermentans Mycoplasma pneumoniae Yersinia pseudotuberculosis
Clostridium ramosum Neisseria gonorrhoeae Yokenella reginsburgei
Clostridium symbiosum Neisseria meningitidis
Nocardia asteroides
Nocardia otitidiscaviarum Outline
Hemocultivos : Sistemas comerciales

BacT/Alert (Biomeriux).
 Primer sistema comercial no invasor de agitación y monitorización continua de cada
frasco.
 Detecta el CO2 producido por el crecimiento microbiano utilizando un sensor
colorimétrico interno pegado al fondo de los frascos.
 A medida que cambia el color del sensor, la cantidad de luz reflejada se incrementa y
es cuantificada como un aumento del voltaje.
 Las señales se analizan en un ordenador por medio de un algoritmo.
 La lectura se realiza cada 10 minutos.
 Los medios de cultivo se caracterizan por ser de plástico y estar hechos de
policarbonato, se caracterizan por ser irrompibles.
 Bact – Alert PF
Botella de Hemocultivo Pediátrico
Composición : 20 ml.
•Caldo Tripticasa soja o Caldo
Infusión cerebro-corazón (BHI)
•Polianetolsulfonato sódico SPS.
•Piridoxina
•Menadiona
•Hemina
•L-cisteína
•Sustratos de hidratos de carbono
y aminoácidos complejos en agua
purificada.
•Carbón activado como INHIBIDOR
de Antibioticos.
•Los frascos contienen una
atmósfera de CO2 en oxígeno y
nitrógeno al vacío.
Tiempo promedio de positivización de hemocultivos por el sistema Bact-Alert (Biomerieux, Francia)14,4
hs (rango: 2,1-60 hs).
Bact – Alert PF
Botella de Hemocultivo Pediátrico

Composición : 30 ml

≥ 1.6 gr perlas polimérica adsorbentes

Combinacion de peptonas /extractos
biologicos (≥1.85% p/v).
anticoagulante (0.083% p/v),
vitaminas y aminoacidos(≥0.00145%
p/v), fuentes de carbono (≥0. 45% p/v),
oligoelementos (≥0.0005% p/v).
Los frascos contienen una atmosfera
de N2, O2 y CO2.
Bact – Alert PF
Botella de Hemocultivo Pediátrico

Se han neutralizado
antimicrobianos de las siguientes
familias con el nuevo medio FAN
Plus: penicilina, glicilciclinas,
polienos,macrolidos,triazoles,
equinocandinas, cefazolina,
cefoxitina, ceftarolina,
aminoglicosidos, fluoroquinolonas,
lincosamidas, glicopeptidos y
oxalidinonas no neutralizó
ceftazidime o cefepime y
neutralizacion inferior a
cefotaxima y ceftriaxona.
Tinciones de Gram más claras y
fáciles de leer.

las resinas remueven más de 100 μg por ml de sangre

 Los organismos crecen en el medio mas adecuado, controlado y trazable produciendo
CO2.
 CO2 atraviesa una membrana semipermeable.
 Sensor colorimétrico cambia Permanentemente de color.

CO2 membrana Sensor colorimetrico

semipermeable ( Saturado con agua)

CO2 + H2O H2CO3 H+ + HCO3-

Cambio de pH

Cambio de color del

(-) (-) (+)
sensor de verde
oscuro al amarillo
Tecnología colorimétrica

(-) (-) (+)

 Tecnología colorimétrica
 Uso para hemocultivos, fluídos corporales
y micobacterias.
• Algoritmos Unidades de reflectancia
– Independientes al
tipo de medio
monitoreado. Reflectance Units

6000
– Immediata 5000
notificación de 4000
3

positivos. 1 Sustained acceleration

3000 2 Rate
3 Initial threshold
2000
– Algoritmo de alto 2
1 2
1000
valor inicial.
(ventaja en la 0
0 1 2 3 4 5 6 7
entrada de Days tested
botellas
demoradas). (-) ( - La
) curva de crecimiento
( +es) automáticamente
GRABADA
ANALIZADA
GUARDADA
(-) (-) (+)
Hemocultivos : Sistemas comerciales

BACTEC VERSATREK
 Sistema Versa-Treck

• Mide los cambios de presión en el espacio libre de las

botellas de hemocultivo.
• El crecimiento y metabolismo de los m.o en el medio
resulta ya sea en el consumo de O2 ó la producción de
gases como el C02, N2 e H2.
• Para monitorizar dichos cambios el Sistema Versatrek
utiliza transductores de presión sensibles en la parte
superior de cada posición de botella
• Sistema de Detección por Manometría
 Ventajas del Sistema de Detección
Manométrico

• Método de detección
directa.
• Detección precoz.
• Mayor sensibilidad.
• No hay falsa positividad
por leucocitosis.
 Sistema Versa-Treck
CO2 Variaciones Metabólicas

• Bactec Plus package insert – Consideraciones

generales: “Lecturas falsa negativas podrían
resultar cuando ciertos microorganismos están
presentes los cuales no producen CO2
suficiente para ser detectados por el Sistema.”
• bioMerieux package insert
– Limitaciones de la prueba: “En raras ocasiones los micro,
organismos podrían ser encontrados creciendo en el
medio para crecimiento aerobio o anaerobio pero no
producen suficiente CO2 para ser determinados
como positivos.”
 SISTEMA VOR TREXING

• Mejora la oxigenación
de los gérmenes
aerobios.
• Mayor crecimiento en
menor tiempo.
• Sólo está dirigido para
los frascos de
Hemocultivos para
Aerobios.
Sistema Versa-Treck
Sistema Versa-Treck
 MEDIOS DE CULTIVO PARA
HEMOCULTIVOS AUTOMATIZADOS
• Son medios líquidos a base de caseína soya,
ricos en suplementos y con resinas
removedores de antibióticos; llevan en la base
un sensor de CO2. y en la superficie dos
códigos de barras
Clases de Medios:
– Aérobicos.
– Anaeróbicos.
– Mycolitico.
– F- Lytic
 SISTEMA BACTEC

• Presenta tres formatos el : 9240 (240 fcos), 9120

(120 fcos) y 9050 (50fcos)
• En la base de cada frasco existe un sensor de
CO2 y mediante un mecanismo de sensibilidad
fluorescente detecta el crecimiento del
microorganismo al generar CO2.
• El sistema realiza lecturas cada 10 min.
• Con alarmas de positividad luminosa y sonora
• Sistema de Detección por Fluorometría
SISTEMA BACTEC
 SISTEMA BACTEC

Frascos de Cultivo BACTEC Peds Plus/F Componentes :

Agua procesada ...............................................................40 mL
Caldo de digerido de soja-caseína.....................................2,75%
p/v Extracto de levadura ...................................................0,25%
p/v Digerido de tejidos animales ........................................0,10%
p/v Piruvato de sodio.........................................................0,10%
p/v Dextrosa ......................................................................0,06%
p/v Sacarosa ......................................................................0,08%
p/v Hemina .........................................................................0,0005%
p/v Menadiona.................................................................0,00005%
p/v Polianetolsulfonato sódico (SPS)..................................0,020%
p/v Piridoxal HCI (Vitamina B6)...........................................0,001%
p/v Resina adsorbente no iónica........................................10,0%
p/v Resina de intercambio catiónico ....................................0,6%
p/v Todos los medios BACTEC se suministran con CO2 añadido.
Hemocultivos : Sistemas comerciales
No solo hemocultivos….
Fluidos corporales naturalmente estériles
LCR
Líquidos Diálisis Peritoneal
Líquido Ascítico
Orina obtenida por PSP
Secreción tomada de cavidad abdominal
durante cirugía
Líquido pleural
Líquido amniótico
Líquido Sinovial
PROCEDIMIENTO EN CASO DE HEMOCULTIVOS POSITIVOS Incubación 35 °C Observacion de crecimientos en los medios

Subcultivo con jeringa Placas a utilizar Incubación 35 °C

• Coloración Gram :
• A partir de la positividad del hemocultivo
para confirmar la presencia de bacterias
u hongos en el frasco.
• Orienta los procedimientos a seguir. Primera
aproximación sobre la etiología de la infección y
por lo tanto debe ser comunicada de forma
inmediata al médico.
• Coloración de Naranja de Acridina
 Utilidad de la coloración de Gram en la
elección del ATB
Gram Nº de Probable impacto del informe
Informe inicial hemocultivos
positivos
Cocos gram + en 2/2 o 3/3 Tratamiento empírico con vancomicina o cefalotina
racimo dependiendo de la resistencia local
Cocos gram + en 2/2 o más Tratamiento dirigido a cubrir Enterococcus, S.viridans y
cadena estreptococos beta hemolíticos.
Ej si se trata de endocarditis ampicilina o vancomicina +
gentamicina o estreptomicina.
Diplococos gram ½ o más Diagnóstico de meningitis, neumonía, PBE: tratamiento
+ lanceolados dirigido a S.pneumoniae
Diplococos gram 1/2 o 2/2 o más Si se trata de sespsis nosocomial, puede indicar la
negativos necesidad de agregar colistin y/o tratamiento con
carbapenemes, acorde a la resistencia local.
Si en cambio es de origen ambulatorio, se orientará hacia
N.meningitidis
Levaduras 1/2 o 2/2 o más Anfotericina B o fluconazol
Bacilos gram 1/2 o 2/2 o más Cefotaxima o ceftazidima o Piperacilina-tazobactama o
negativos ciprofloxacina
Carbapenemes ± aminoglucósidos,
acorde a la etiología y a la resistencia local y al diagnóstico
Identificación de colonias

Identificación y Antibiograma
 Tiempo de recuperación
Bourbeau PP et al. Routine incubation of BacT/ALERT FA and FN blood
culture bottles for more than 3 days may not be necessary. J Clin Microbiol.
2005;43:2506-2509

 74% en Día 1
 20% en Día 2
 4% en Día 3
 2% en Día 4
 1% en Día 5

Estos resultados demuestran que el 98% de los

aislamientos clínicamente significativos fueron
recuperados en los 3 primeros días de incubación y
el 94% dentro de los 2 días de incubación
Agente removedor de antimicrobianos

• Los sistemas comerciales de hemocultivos

automatizados contienes agentes removedores de
antibióticos que es una resina no-especifica absorbe
cualquier agente antimicrobiano presente en la
sangre del paciente.
• Las resinas poliméricas capaces de unirse a las
regiones hidrófobicas de cualquier agente
antimicrobiano.
• Carbón activado Aumenta la recuperación general
adsorción de sustancias inhibitorias del suero .
• Aumenta la recuperación en pacientes bajo
tratamiento ATB por adsorción de los mismos.
 Hemocultivos automatizados

a) Falso Positivo: Se refiere a las botellas que el

instrumento llama positivas, pero que no
muestran microorganismos en el frotis ni en el
subcultivo. (Exceso de Sangre ,Leucocitosis).
b) Falso Negativo: Ocurre cuando el instrumento
no detecta crecimiento, pero el organismo crece
en el subcultivo.
 Fungemia

Las áreas hospitalarias donde suelen presentarse con mayor frecuencia son las unidades de cuidados
intensivos (neonatales y pediátricas), considerándose que el 1,2% de los pacientes ingresados en estas
unidades desarrollan una candidemia.
Rev Iberoam Micol 2001; 18: 51-55

Aunque pueden originarse a partir de focos semejantes a los que ocasionan las bacteriemias,
frecuentemente tienen su origen en la infección de catéteres.
 Interpretación
de los resultados
Principales agentes de la Bacteremia
 Interpretación de los resultados

• La interpretación adecuada requiere el

conocimiento de la situación clínica del
paciente, factores predisponentes y
tratamientos antimicrobianos previos.
Probabilidad de hemocultivo positivo acorde a foco

ORIGEN %

-MENINGITIS PRIMARIA 50-80

SHUNTS 10-15
-NEUMONIA
ADULTOS 20-30
PEDIATRIA 10-12
INTRAHOSPITALAR. <10
-ARTRITIS 30-50
-OSTEOMIELITIS 50
-PBE 60
-PERITONITIS SECUNDARIA 20-30
-ABSCESOS 10
HEPATICO 50
ESPLENICO 14-70
TUBO-OVARICO 10
INTRABDOMINAL 20-30
-HERIDA QUIRURGICA 10
-MEDIASTINITIS 50-60
 Interpretación de Hemocultivos +

TIEMPO DE OBTENCION DE UN HEMOCULTIVO +

Crecimiento de SCN en < de 48h esta más
significativamente asociado con bacteremia en vez
de contaminación.
Si hemocultivos se incuban por mas de 5 dias, la
mayoria de hemocultivos + son contaminantes
La significancia de un contaminante de piel se
incrementa si es aislado en las primeras 48 h.
 Interpretación de Hemocultivos +
PATRONES DE POSITIVIDAD EN HEMOCULTIVOS +

Weinstein M, Reller L. Murphy J. The clinical significance of positive blood culture: A comprehensive
analysis of 500 episodes of bacteremia and fungemia in adults.Rev, Infect Dis 1983; 5:35-53.
PRINCIPALES AGENTES PATÓGENOS:

Blood culture-based diagnosis of bacteraemia: state of the art

Clinical Microbiology and Infection, Volume 21 Number 4, April 2015
 CRITERIOS DE INTERPRETACION
TIPO DE MICROORGANISMO

PRINCIPALES
AGENTES
PATÓGENOS:
CRITERIOS DE INTERPRETACION
TIPO DE MICROORGANISMO
CRITERIOS DE INTERPRETACION
TIPO DE MICROORGANISMO
CRITERIOS DE INTERPRETACION
TIPO DE MICROORGANISMO
 Para tener en cuenta….

Se espera que la tasa de contaminación sea

menor al 3%
La tasa de falsos positivos debe ser menor al 1%
La misma se ve incrementada por:
 Alto recuento de leucocitos
 Botellas con exceso de volumen de sangre
(hematíes)
 Fluctuaciones de T°C ambiental
 Fluctuaciones de energía
 Flujo de trabajo
 Para tener en cuenta….

tasa de recuperación de positivos debería ser de

alrededor del 10%
Si la tasa es demasiado baja, las causas posibles
son:
- Volumen de muestra muy escaso (= pobre
recuperación).
- Sobreutilización del recurso (los médicos están
ordenando hemocultivos sin tener una justificación
clínica que lo amerite).
- S. pneumoniae y autolisinas falso negativo por
descarga tardía .
 Diferenciación entre infeccion versus
contaminación

• Se acepta un porcentaje de contaminación que

varía entre 2 a 3%.
• Esta contaminación se atribuye principalmente
a problemas durante la toma de la muestra.
• La presencia de un solo hemocultivo positivo de
2 extracciones seriadas o más en un corto
período indica una contaminación.
• El tiempo en que el hemocultivo se detecta
como positivo.

DESDE EL LABORATORIO A LA CLÍNICA El hemocultivo pediátrico: indicaciones y técnica M. de

Cueto y A. Pascual -An Pediatr Contin. 2007;5(5):279-82
 TIEMPO DE POSITIVIZACION COMO
CRITERIO DE JERARQUIZACION

BACTERIEMIA CONTAMINANTE

SCN 25,2 28,5

S.viridans 13,9 21,1
Corynebacterium 13,8 34
E.faecalis 15 22
Micrococcus - 35
P.acnes - 127
Bacillus spp - 16,4
BNF (no Pae) 19,2 36,7
 Contaminación

• Ocasiona uso innecesario de antibióticos , una

estancia más larga del hospital, pruebas
adicionales de diagnóstico y los costos
agregados.
• Causa el aumento de días de estancia
hospitalaria en 4,5 días y que el gasto
asociado era de 6.000 dólares por paciente (1)
• En la actualidad, la tasa de contaminación de
los hemocultivos constituye un indicador de
calidad en la toma de muestra.

(1) Pruebas microbiológicas en las neumonías comunitarias Pneuma

2007; 8: 30 - 32
 Resultado falso positivo
Difícil determinar si la bacteria es patógeno REAL o si
bacterias de piel han contaminado el cultivo .
Causas :
1. Personal entrenado.
2. El agente antiséptico.(El mejor gluconato de clorhexidina 2%).
3. Medio por el cual se obtiene la sangre para cultivo. (obtención
de cultivos de sangre de catéteres intravenosos u otros
dispositivos de acceso, que por punción venosa periférica ).
4. Los sistemas de cultivo moderno de sangre incorporan resinas
de unión a antibióticos o carbón activado, también se ha
demostrado que aumentan considerablemente la detección de
SCN, los contaminantes más comunes del cultivo de sangre.
Antibiograma directo del frasco de
hemocultivo para
bacilos gram negativos utilizando
el sistema Vitek 2C.
Correlación con la metodología
estandarizada.

Soloaga,R; Carrion,N; Pidone,J; Mendez Aranibia, M;

Giovanakis,M; Sujemecki,A;
Bondulich,C; Guelfand,L; Margari,A.
Control de Calidad

pH
Esterilidad
• Control de crecimiento :
• a. Botellas aerobias
(1) Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)
(2) Streptococcus pneumoniae (ATCC 6305)
• b. Botellas anaerobias
• (1) Bacteroides fragilis (ATCC 25285)
• (2) S. pneumoniae (ATCC 6305)
• c. Método de prueba
• (1) Preparar un caldo de cultivo con microorganismo
equivalente a 0.5 de
• McFarland.
• (2) Inocular cada botella con 0.01 ml (10 ul) de la suspensión.
• (3) Incubar por hasta 5 días y observar crecimiento visible.
BIOSEGURIDAD

• Cabinas de bioseguridad
– Presión en frascos positivos
• Guantes
• Heridas por agujas
– Al momento de poner protector de plástico de
la aguja
– Descartar en envases apropiados
• Agentes microbianos
– Brucella
– Hepatitis
SEGURIDAD EN LA CALIDAD

• Incluir todas las partes del proceso

– Obtención
– Transporte
– Procedimientos de laboratorio
• Aislamiento
• Identificación
• Pruebas de susceptibilidad
• Control de calidad de medios y equipos
– Reporte
• Rapidez
• Exactitud
 Conclusión

• La detección de la bacteriemia y la fungemia

constituye una de las prioridades del Servicio de
Microbiología Clínica, dada su importancia
diagnóstica y pronóstica.
• La precocidad en instaurar un tratamiento
adecuado tiene repercusiones en la mortalidad
• Los hemocultivos siguen siendo el método
estándar para la detección de la bacteriemia en
la evaluación de los lactantes y niños enfermos.
• El empleo de una técnica de extracción aséptica y
el cultivo de un volumen adecuado de sangre son
factores determinantes para mejorar la rentabilidad
del hemocultivo.
• La exclusión de bacteriemia permite el cese del
tratamiento con antibióticos, en consecuencia
reduce la duración y costo de la estancia
hospitalaria, así como disminuir el desarrollo de la
resistencia a los antimicrobianos.
• El conocimiento de las características
epidemiológicas del enfermo permite
adecuar el tratamiento empírico. La
información microbiológica acompañada
del consejo clínico mejora los resultados.