INFORME DE

RESULTADOS DE
APLICACIÓN DE LA
GUÍA DE PRÁCTICAS
Aprendizaje Práctico
Experimental
FR.01.1-002 / V1.0 / 04-11-2020
 N° del
Informe de Resultados de aplicación de la Guía de Prácticas Reporte
Se deberá generar
de forma secuencial
automática

Datos Generales
NOMBRE DE LA
PRÁCTICA EXTRACCIÓN DE ENZIMAS VEGETAL / ANIMAL
ING EN
FACULTAD FACI CARRERA ASIGNATURA BIOQUIMICA
ALIMENTOS
PROFESOR DE AMBIENTE O
MSC. KATHERINE ROMERO LABORATORIO
PRÁCTICA LABORATORIO
TIEMPO ASIGNADO 2HRA Tipo APE LABORATORIO
UNIDAD: 4 TEMAS:
FECHA DE INICIO 25-26 junio / 2024 FECHA FIN 9/ de julio del 2024

Individual
TIPO DE PRÁCTICA CANTIDAD DE
4
(Marque la opción) ESTUDIANTES
Grupal X

NOMBRE DEL O LOS ESTUDIANTES:

1. NICOLE LISSETH VICUÑA FRANCO 2. LUIS AARON VARGAS RUIZ

3. DULCE DALIA YANEZ MARTINEZ 4. SONIA ANABELA PICON CORDOVA

5. 6.

Desarrollo de la Práctica
OBJETIVO GENERAL:
• Desarrollar habilidades y conocimientos prácticos en técnicas de extracción y
caracterización de enzimas de origen vegetal y animal, optimizando los
procedimientos para maximizar el rendimiento y la actividad enzimática para
comprender su papel biológico y su potencial aplicación biotecnológica.
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
• Investigar la estabilidad de las enzimas bajo diversas condiciones de temperatura,
pH y presencia de inhibidores o activadores.
• Comparar las características y rendimiento de las enzimas extraídas de diferentes
fuentes vegetales y animales para identificar las más eficientes y adecuadas para
distintas aplicaciones.
• Registrar detalladamente los procedimientos, observaciones y resultados
 obtenidos, y comunicar los hallazgos mediante informes y presentaciones
científicas claras y concisas.

INTRODUCCION

Extracción de enzimas de fuentes vegetales y animales

Las enzimas son proteínas complejas que actúan como catalizadores biológicos,
acelerando las reacciones químicas en los seres vivos. Se encuentran en todas las células
y desempeñan funciones cruciales en diversos procesos metabólicos. Debido a su alta
especificidad y eficiencia, las enzimas han ganado gran importancia en diversas industrias,
incluyendo la alimentaria, farmacéutica, textil y de biocombustibles.
La obtención de enzimas a partir de fuentes vegetales y animales es un paso fundamental
para su posterior aplicación. El proceso de extracción de enzimas involucra una serie de
etapas que deben optimizarse cuidadosamente para garantizar la obtención de enzimas
activas y puras.
Fuentes de enzimas:
Las enzimas pueden extraerse de una amplia variedad de materiales vegetales y animales.
Algunas de las fuentes más comunes incluyen:
Vegetales: Frutas, hortalizas, cereales, legumbres y semillas.
Animales: Órganos y tejidos de animales, como el hígado, el páncreas, el estómago y la
leche.
Microorganismos: Bacterias, hongos y levaduras.
Métodos de extracción:
La elección del método de extracción de enzimas depende de la fuente de la enzima, las
propiedades de la enzima deseada y la escala de producción. Algunos de los métodos
más comunes incluyen:
Homogenización y centrifugación: Este método implica la ruptura de las células para
liberar las enzimas, seguido de la separación de las enzimas de los restos celulares
mediante centrifugación.
Precipitación: Las enzimas pueden precipitarse de la solución utilizando sales, solventes
o cambios de pH.
Cromatografía: Este método utiliza columnas de soporte para separar las enzimas en
función de sus propiedades físicas y químicas.
Membranas: Las membranas semipermeables pueden utilizarse para concentrar y
purificar las enzimas.
Factores a considerar:
Durante el proceso de extracción de enzimas, es importante considerar varios factores que
pueden afectar la actividad y pureza de las enzimas, como:
La selección de la fuente: Las diferentes fuentes vegetales y animales contienen
diferentes tipos y cantidades de enzimas.
Las condiciones de extracción: La temperatura, el pH y la presencia de inhibidores o
activadores pueden afectar la actividad de la enzima.
La purificación: La eliminación de impurezas es crucial para obtener enzimas de alta
calidad.
Aplicaciones de las enzimas:
Las enzimas extraídas de fuentes vegetales y animales tienen una amplia gama de
aplicaciones, incluyendo:
Industria alimentaria: Las enzimas se utilizan en la producción de alimentos procesados,
como jugos, cerveza, pan y productos lácteos.
Industria farmacéutica: Las enzimas se utilizan en la producción de medicamentos, como
antibióticos y analgésicos.
Industria textil: Las enzimas se utilizan en el procesamiento de textiles, como el
desengomado y el ablandamiento de las telas
Industria de biocombustibles: Las enzimas se utilizan en la producción de
biocombustibles a partir de biomasa. (Wikipedia contributors, 2024)
MATERIALES
• Vidrio reloj
• Tubo de ensayo
• Mortero
• Filtro de papel o gasa
• 4 botellas de centrífuga (sea de plástico o vidrio)

PRODUCTO PARA TRABAJAR

• 100 gr Hígado de pollo
• 100 gr Piña fresca

REACTIVO
• 200 ml Buffer fosfato (pH: 7.0)
• Agua destilada
• 100 ml de agua oxigenada (peróxido de hidrógeno) al 3%

PROCEDIMIENTO

Preparación de la materia prima:

1. Seleccionar la fuente vegetal o animal adecuada en función de la enzima deseada
en este caso el higado de pollo.
PARTE SOLIDA
2. Troceamos en partes pequeñas y homegeneas el higado de pollo
3. Colocamos en su respective tubo de ensayo
4. Incluimos 1ml de agua oxigenada a la muestra
5. Rapidamente vimos su reaccion

PARTE LIQUIDA
6. Machacamos muy bien el higado de pollo para que al momento de filtarar no se
complique demaciado
7. Con un filtro de papel o gaza, extraimos el lliquido
8. Absorvimos con la pipeta de Pasteur 1ml de la muestra
9. Colocamos en su respective tubo de ensayo
10. Incorporamos 1ml de agua oxigenada
 11. Vimos su reaccion pero en este caso fue mas lento en reaccionar
SEPARACION DE MUESTRA
12. En este caso utiilizos dos tipos de muestras pero tres diferentes procesos
• Colocacion de agua oxigenada al principio y dejarlos al ambiente
• Colocacion de agua oxigenada despues de haber estado en el baño
termostatico por 10 min
• Colocacion de agua oxigenada despues de haber estado colocado en el
hielo
• Tubo 1: temperatura ambiente (20-25°C)
• Tubo 2: en baño de hielo (0-4°C)
• Tubo 3: en baño maría a 37°C

CALCULO

1. Rendimiento de extracción
• Rendimiento de enzima: Se calcula como la cantidad de enzima obtenida
respecto a la cantidad inicial presente en la materia prima.

Donde:

• Cantidad de enzima obtenida: Puede medirse en términos de masa (por

ejemplo, gramos) o actividad enzimática.
• Cantidad de enzima inicial: Es la cantidad teórica presente en la materia prima
antes de la extracción.

2. Actividad enzimática:

• Actividad específica: Indica la cantidad de actividad enzimática por unidad de

masa de enzima pura
3. Cálculo de la actividad enzimática:

• La actividad enzimática se puede determinar mediante métodos específicos de

ensayo que miden la capacidad de la enzima para catalizar una reacción
particular.

4. Volumen y concentración:

• Volumen de extracto: La cantidad total de volumen obtenida después de la

extracción.
• Concentración de enzima: La cantidad de enzima presente por unidad de
volumen o masa de extracto.

5. Factor de purificación:

• Indica cuánto se ha purificado la enzima durante el proceso de extracción y

purificación.

6. Rendimiento de la purificación:

• Rendimiento de purificación: Se refiere a la fracción de actividad enzimática

 que se conserva después del proceso de purificación

Estos cálculos son esenciales para evaluar la eficiencia del proceso de extracción y
purificación de enzimas vegetales o animales. La exactitud y precisión en estos cálculos
son fundamentales para optimizar los procesos industriales y asegurar la calidad del
producto final.
OBSERVACION

Una observación que se debe realizar durante la práctica sería prestar atención a
cualquier cambio visual en las muestras durante el proceso de extracción, ya sea como
cambios en el color, la claridad o alguna formación de precipitados.
Estos cambios podrían indicar la presencia de impurezas o la desnaturalización de las
enzimas, lo que podría afectar la eficacia de la extracción y la calidad de las enzimas
conseguidas.
Un cambio de color en la muestra mediante la extracción podría indicar la presencia de
compuestos no deseados o impurezas.
Como, por ejemplo, un color oscuro puede sugerir la presencia de fenoles u otros
compuestos que pueden interferir con la actividad enzimática. La claridad de la solución
puede indicar la solubilidad de las enzimas extraídas, una solución clara totalmente
indica que las enzimas están justamente disueltas.
Detectar y corregir estos cambios visuales contribuye a la eficiencia del proceso de
extracción, reduciendo la pérdida de enzimas y mejorando el rendimiento total de la
extracción.
DISCUSION

La extracción de enzimas vegetales y animales es un proceso fundamental en la

biotecnología y la industria alimentaria. Las enzimas son proteínas específicas que
actúan como catalizadores de reacciones bioquímicas en los seres vivos. Su extracción
se realiza a partir de tejidos vegetales o animales, y su aplicación abarca una amplia
gama de sectores industriales. En el caso de las enzimas vegetales y animales, su
extracción se lleva a cabo a partir de microorganismos seleccionados por cribado y
posteriormente cultivados por fermentación. A partir de los caldos de cultivo, se procede
a la purificación de la enzima que cataliza la reacción de interés. Estas enzimas poseen
una elevada especificidad, trabajan en condiciones suaves y son fácilmente accesibles,
lo que las hace muy atractivas para su uso en la industria alimentaria, de detergentes,
productos químicos, farmacéuticos y de diagnóstico.En el ámbito de la alimentación
animal, las enzimas desempeñan un papel crucial. Por ejemplo, el uso de enzimas en la
alimentación animal puede ayudar a mejorar la digestibilidad y la utilización de nutrientes,
especialmente en fuentes de proteína vegetal. Estas enzimas pueden abordar los
sustratos de la dieta y optimizar la digestibilidad, lo que contribuye a mejorar el
rendimiento productivo.

PREGUNTAS DE AUTOEVALUACION

1. ¿Cómo afecta la actividad de la enzima catalasa presente en el hígado de pollo?

La catalasa es una enzima antioxidante presente en la mayoría de los organismos
aerobios.
La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras moléculas. Los inhibidores
enzimáticos son moléculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas,
mientras que los activadores son moléculas que incrementan dicha actividad. Asimismo,
gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. (AL, 1997)
La catalasa al reaccionar tanto con el alcohol al 96 % y el peróxido de hidrogeno esta la
neutraliza. Lo cual, una vez realizada la reacción química, la enzima (hígado de pollo)
tiende a reutilizarse.
“La enzima catalasa del hígado, al tener contacto con el peróxido de hidrogeno rompe la
molécula liberando oxígeno; durante la reacción salen burbujas a la superficie, pero el
frasco impide que estas salgan quedando el gas adentro." (Salgado, Ramírez y
Hernández, 1993)
Si agregas agua oxigenada al hígado crudo, la catalasa aumenta la velocidad de la
reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno, por lo que se obtienen agua y
moléculas de oxígeno que se liberan en forma de gas (O2), como evidencia observarás
el burbujeo en tu experimento.
2. ¿Qué descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno en el hígado de
pollo?
El peróxido de hidrógeno (H2O2) se descompone en agua (H2O) y oxígeno (O2) en el
hígado de pollo debido a la presencia de la enzima catalasa. Esta enzima cataliza la
descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno, lo que produce burbujas
de oxígeno. La reacción química es la siguiente: H2O2 → H2O + O2. La catalasa,
presente en abundancia en las células.
Esta capacidad de la enzima catalasa para descomponer el peróxido de hidrógeno en
agua y oxígeno es fundamental en el proceso de metabolización del alcohol en el hígado.
Además, la presencia de la catalasa puede ser utilizada como indicador de daño
hepático debido al consumo de alcohol, y la medición de su actividad es útil en la
evaluación de los efectos negativos del consumo excesivo de alcohol en la salud
(Higado de Pollo y Peroxidasa - Informe de Libros - Valemartinezpp, s. f.)
3. ¿Qué es lo que indica la presencia de burbujas de oxígeno en el hígado de pollo?
Las burbujas en el hígado se producen tras manipularlo con agua oxigenada debido a
que la catalasa descompone el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. Sin
embargo, no hay reacción cuando se usa hígado previamente cocido, ya que el calor
desnaturaliza a la catalasa. (Resultados Catalasa, 2012)
4. ¿De qué manera afecta las diferentes temperaturas aplicadas en la actividad
enzimática?
Aumentar la temperatura generalmente acelera una reacción, y bajar la temperatura
la hace más lenta. Sin embargo, temperaturas extremadamente altas pueden causar
que una enzima pierda su forma (se desnaturalice) y deje de trabajar. (Repaso de
Enzimas (Artículo) | Khan Academy, s. f.)
ANEXOS: (Gráficos, Fotografías y/o Dibujos de la Práctica en Realización)

Ilustración 1 TEMPERATURA Ilustración 2 COLOCANDO LOS Ilustración 3 MUESTRA

INICIAL DEL LABORATORIO TROZOS DE HIGADO EN LOS TUBOS
DE ENSAYOS
Ilustración 4 COLOCACION DE AGUA Ilustración 5 REACCION Ilustración 6 MUESTRA #2
OXIGENADA AL TUBO DE ENSAYO INMEDIATAMENTE MACHACAR EL HIGADO
CON LA MUESTRA DE HIGADO
HECHO TROZOS

Ilustración 7 FILTRARCION DEL Ilustración 8 EXTRACCION DE Ilustración 9 INSERTAR AL TUBO DE

HIGADO TRITURADO UNA CANTIDAD ENSAYO
 Ilustración 10 COLOCACION DE Ilustración 11 REACCION Ilustración 12 MUESTRAS
AGUA OXIGENADA A LA MUESTRA INSTANTENEA COLOCADAS EN AGUA CON HIELO
LIQUIDA

Ilustración 13 PONER LAS MUESTRA A Ilustración 14 REACCION ANTES Ilustración 15 REACCION DESPUES
LA CENTRIFUGA POR 10 MIN
 Ilustración 18 MUESTRA PATRON DEL
Ilustración 16 MUESTRA EN BAÑO Ilustración 17 RESULTADO
HIGADO TANTO LIQUIDO COMO
MARIA
SOLIDO

Ilustración 19 RESULTADO FINAL DE LAS MUESTRAS

Resultados Obtenidos

Al realizar el procedimiento de la toma de muestra para la extracción enzimática, se

procede a configurar la centrifuga, y su configuración fue de 5,0000 rpm, 25 minutos y 4°c
al colocar los recipientes en la centrifuga y después del tiempo trascurrido existe la
presencia de sobre nadante y sedimento, separando los sólidos con lo liquido resultando
así la extracción enzimática como un éxito, y debido al tiempo y velocidad se observó
mayor concentración de enzimas y poca degradación de sedimento
Los resultados obtenidos son cruciales para evaluar la viabilidad comercial y la eficiencia
del proceso de extracción de enzimas. Estos datos son fundamentales para optimizar los
métodos de producción, mejorar la calidad del producto final y entender la eficiencia de las
fuentes de enzimas vegetales y animales para aplicaciones industriales, farmacéuticas y
alimentarias.

Conclusiones y Recomendaciones
CONCLUSIONES
1. La centrifugación ha demostrado ser un método eficaz para la extracción de
enzimas de piña, posibilitando una separación nítida entre el extracto enzimático y
los residuos sólidos. La alta velocidad de la centrífuga ha facilitado la obtención de
un extracto enzimático puro y de alta calidad.
2. La configuración de la centrifuga, como la velocidad y el tiempo, importantes para
maximizar el rendimiento enzimático, dependiendo de la muestra variara el rpm,
temperatura como su tiempo. En esta práctica, se identificó que una velocidad de
5,000 rpm durante 25 minutos a una temperatura de 4°C que fue óptima para
obtener una alta concentración de enzimas sin causar degradación significativa
3. El proceso de centrifugación permitió obtener un extracto enzimático con alta
pureza, reduciendo la presencia de contaminantes y otros componentes
indeseados.
4. Esta práctica no solo es aplicable a la extracción de enzimas de piña, sino que
también puede ser adaptada para la obtención de enzimas de otras fuentes
biológicas.

RECOMENDACIONES
1. Utilizar equipos de protección personal adecuados, como guantes, gafas y bata de
laboratorio, durante la manipulación de materiales y productos químicos.
 2. Seguir las normas de seguridad del laboratorio para evitar accidentes y riesgos para
la salud.
3. Disponer adecuadamente de los residuos generados durante el proceso de
extracción.

BIBLIOGRAFIAS
Resultados catalasa. (2012, 8 febrero). [Diapositivas]. SlideShare.
https://es.slideshare.net/slideshow/resultados-catalasa/11489786

Repaso de enzimas (artículo) | Khan Academy. (s. f.). Khan Academy.

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-energetics/environmental-
impacts-on-enzyme-function/a/hs-enzymes-
review#:~:text=Temperatura%3A%20aumentar%20la%20temperatura%20general
mente,un%20rango%20%C3%B3ptimo%20de%20pH.

Principles and techniques of enzyme purification. (s. f.).

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3963083/

Wikipedia contributors. (2024, 8 julio). Enzyme. Wikipedia.

https://en.wikipedia.org/wiki/Enzyme
Sep. (s. f.). ¿Cómo explico la rapidez de las reacciones?

https://nuevaescuelamexicana.sep.gob.mx/detalle-ficha/33898/

Resultados catalasa. (2012, 8 febrero). [Diapositivas]. SlideShare.

https://es.slideshare.net/slideshow/resultados-catalasa/11489786

https://es.scribd.com/document/600216709/informe-de-practica-Actividad-enzimatica-de-

la-catalasa-en-el-higado-de-pollo

Higado De Pollo Y Peroxidasa - Informe de Libros - valemartinezpp. (s. f.).

https://www.clubensayos.com/Ciencia/Higado-De-Pollo-Y-
Peroxidasa/2618318.html