ÁMBITO FARMACÉUTICO

GENÉTICA

Animales clónicos para usos biomédicos

SANDRA TORRADES
Bióloga.

Desde que, en julio de 1996, los científicos del Instituto Roslin

comunicaron el nacimiento de la oveja Dolly, la posibilidad de clonar seres
vivos es un tema candente en nuestra sociedad. Los éxitos parciales en
la clonación de embriones humanos han suscitado muchos debates éticos.
Pero, ¿y la clonación de otros mamíferos? ¿Es simplemente un capricho?
Está claro que no. Constituye el punto de partida de una nueva era:
la del uso de las técnicas de la clonación para usos biomédicos.

P roducir organismos genética-

mente idénticos a otros no es
algo nuevo en la naturaleza. Muchos
Cuando el esquej e enraí za, se
obtiene un individuo nuevo gené-
ticamente idéntico a la planta ori-
tas, pueden reproducirse de forma
«sexual». Intercambian material
genético entre ellas mediante la
seres vivos utilizan esta forma de ginal. conj ugación. Est e proceso es
reproducción asexual para perpe- Las bacterias también se pueden imprescindible para aport ar la
tuarse. reproducir de forma asexual, ya diversidad genética necesaria para
El término «clon» procede del que una única bacteria puede dar su supervivencia.
griego y significa «rama». Desde lugar a miles de millones de des- También son clónicos los geme-
hace millones de años las plantas cendientes idénticos, como si se los univitelinos u homocigotos.
pueden reproducirse por clonación tratara de una clonación a escala Son genéticamente idénticos pues-
mediante esquejes. Basta cortar un industrial. Sin embargo, también to que proceden de la división de
t allo o una rama y plant arlo. las bacterias, al igual que las plan- los primeros estadios del embrión.
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Sin embargo, de los 2 millones,

aproximadamente, de especies des- 1 2

critas hasta ahora, sólo alrededor

de 2.000 se reproducen habitual- Oveja Célula 6 7 8 9 10
mente de forma asexual. A la vista adulta
blanca
de tejido
de una
de estas cifras, la pregunta es ¿por mama
qué la mayoría de animales ha ele- Fusión de Célula División de la Implantación Madre adoptiva
gido la reproducción sexual para células mediante fusionada célula nueva del embrión de a luz a un clon
corriente eléctrica y formación en la madre de oveja blanca
perpetuar su especie? La respuesta 3 4 del embrión adopiva
es muy simple: porque la principal 5
ventaja de la reproducción sexual
Oveja Ovoncito no Núcleo extraído
es aportar diversidad genética a la adulta fecundado (material genético)
descendencia y conferir ventaj as de cara
negra
adaptativas y evolutivas.
De una célula, obtenida del tejido mamario de una oveja adulta, se extrae el núcleo.
Conociendo las ventaj as de la Éste se fusiona con un ovocito al que previamente se le ha extraído el núcleo. A partir
reproducción sexual respecto a la de ahí se obtiene un embrión que se implantará en la madre adoptiva. Puesto que el
núcleo (material genético) proviene de una oveja blanca, la madre adoptiva negra dará
asexual, resulta difícil entender lugar a una oveja blanca.
por qué existen algunas especies
que se reproducen de forma ase- Fig. 1. Clonación por transferencia nuclear.
xual, mediante «clonación natu-
ral». La verdad es que las especies
facult at ivas (con capacidad de nar una célula donant e con un lin lograron el nacimiento de dos
reproducción sexual y asexual) ovocito anucleado al que se le ha ovej as — Megan y Morgan—
saben aprovechar muy bien ambos extraído el núcleo previamente. engendradas mediante transferen-
tipos de reproducción dependien- Se realizó con éxito por primera cia nuclear de células de embrio-
do de las condiciones ambientales vez en 1952 con anfibios. Desde nes tempranos cultivadas in vitro
de cada momento. entonces, se ha utilizado de forma durante varios meses.
Esto es lo que están haciendo los habitual para estudiar el desarrollo Éste fue el inicio de las investi-
científicos. Aunque saben que la embrionario de éstos. Así, se demos- gaciones con distintos tipos celula-
mejor opción para la perpetuación tró la totipotencia (células capaces res derivados de embriones con
de una especie es la reproducción de originar cualquier linaje celular estadios más tardíos. Y en febrero
sexual, la técnica de la clonación adulto) de las células resultantes de de 1997 se publicó en la prestigio-
animal puede ofrecer ventajas en la primera división del ovocito. sa revista Nature el nacimiento de
aspectos muy concretos que vamos Sin embargo, la transferencia un cordero clonado por transferen-
a comentar más adelante. nuclear en mamíferos es mucho cia nuclear a partir de una célula
más compleja. La investigación en mamaria adulta, la oveja Dolly. Se
el campo de la transferencia nucle- confirmó su origen por medio del
Técnicas de clonación animal ar en especies estabuladas y, en análisis de marcadores de ADN.
particular, en el ganado vacuno ha
A finales de la década de los seten- sido alentada por los beneficios
ta y principios de los ochenta, los económicos que se derivan de la Paradigma de la reprogramación
científicos ya consiguieron obtener multiplicación — ilimitada— de nuclear
ovejas, vacas, caballos y otros ani- embriones con un «interés espe-
males genét icament e iguales. cial», como por ejemplo, obtener El nacimiento de Dolly cuestiona
Desarrollaron experimentalmente de forma ilimitada animales trans- uno de los principios fundamenta-
lo que ocurre de forma natural génicos. les de la biología evolutiva, puesto
cuando se originan los gemelos A mediados de los años ochenta que la mayoría de los científicos
univitelinos. varios grupos de invest igación creían que la diferenciación celular
Esta técnica consiste en dividir habían conseguido clonar ovejas y era irreversible; es decir, se creía
un embrión y los productos de esta otras especies de ganado vacuno que una vez las células embriona-
división se introducen en el útero transfiriendo directamente núcleos rias totipotentes inician la diferen-
donde se desarrollan los gemelos. de embriones muy tempranos. Sin ciación a un linaje celular específi-
Así se pueden obtener dos, cuatro embargo, para lograr una «substi- co, el proceso ya no es reversible. El
y hasta ocho individuos clónicos tución dirigida de genes» (para nacimiento de una oveja a partir de
(gemelos), pero de este modo, el obt ener animales modificados una célula adulta puso en entredi-
número de clónicos se limita al genéticamente) en especies estabu- cho esta teoría. A partir de este
número de células que se puede ladas se debía de producir anima- experimento muchos investigadores
dividir el embrión. La alternativa les vivos a partir de células proce- han demostrado que existen distin-
es la clonación por transferencia dentes de cultivos in vitro (en el tos linajes celulares, como las célu-
nuclear, puesto que permite pro- laboratorio). las epiteliales o las células neurona-
ducir un número ilimitado de clo- No fue hasta 1 9 9 6 cuando lo les capaces de ser reprogramadas y
nes. Esta técnica consiste en fusio- consiguieron. En el Instituto Ros- originar otro tipo celular distinto.
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El caso de la ovej a Dolly ha

abierto nuevas líneas de investiga-
ción, quizá más interesantes que la
propia clonación, como conocer
cómo afectan las mutaciones somá-
ticas en el proceso de envej eci-
miento e incluso el desarrollo de
los tumores.
Entender los procesos de «repro-
gramación» podrá aportar nuevos
datos sobre el control de la expre-
sión génica en células diferencia-
das y abrir nuevas perspectivas en
la terapia celular.

Clonar animales transgénicos

El inst it ut o R oslin es t ambién

líder en el desarrollo de la tecnolo-
gía de animales transgénicos. A
mediados de los años ochenta, el
D r. Clark y sus colaboradores
demostraron que era posible diri-
gir la expresión de un gen humano
en la glándula mamaria de otro
mamífero.
Este éxito y la síntesis de una
oveja transgénica, Tracy, que secre-
taba 35 g de una proteína huma-
na, la alfa-1-antitripsina (AAT) en
cada litro de leche, proporcionó la
creación de PPL Therapeutics.
PPL se dedica hoy a la producción
de proteínas recombinantes huma-
nas, entre ellas la AAT sintetizada a
gran escala por animales transgéni-
cos. Esta molécula se está probando
en ensayos clínicos para el trata-
miento de la fibrosis quística.
En un principio, la única manera
de conseguir animales de granj a
modificados genéticamente era
mediante el método de la inyec-
ción pronuclear. Consiste en inyec- Fig. 2. Xenotransplantes.
tar directamente en óvulos recién
fecundados de 200 a 300 copias del
gen que se desea transferir. Poste- incorporar genes. En cambio, la Finalidades biomédicas
riormente, las células microinyec- manipulación genética de células
t adas se implant an en madres en cultivo permite realizar modifi- La industria biotecnológica parece
adoptivas. Pero sólo el 2-3% de los caciones mucho más complej as, que, de momento, es la más bene-
animales que nacen son transgéni- como la substitución o deleción de ficiada del conocimiento de las
cos de línea germinal (es decir, genes concretos. técnicas de transferencia nuclear,
transmiten el gen incorporado a la La metodología de «substitución puesto que proporciona métodos
siguiente generación) y además, dirigida de genes», conocida como más fiables para conseguir anima-
sólo una pequeña proporción de gene targeting, se utiliza de forma les transgénicos y reducir el núme-
éstos, muestran valores suficiente- rutinaria en células madre embrio- ro de animales necesarios para
mente altos de expresión del gen narias de ratón. Pero el Instituto establecer una línea transgénica.
transmitido para ser comercial- Roslin ha sido pionero en la trans- Los científicos del Instituto Ros-
mente interesantes. ferencia nuclear con obj et o de lin, usando células embrionarias
La inyección pronuclear es sim- diseñar una ruta alternativa al gene clónicas en cultivo, lograron incor-
plemente una metodología para targeting en ganado. porarles el gen del fact or I X
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humano, proteínas de la coagulación Finalmente, ya en un marco dis- ca del Instituto W hitehead obser-
sanguínea usadas para el tratamiento tinto del biomédico, la clonación vó que clones que parecían norma-
de la hemofilia B. Así, nacieron, en por t ransferencia nuclear est á les presentaban graves anomalías
1997, las primeras ovejas clónicas abriendo nuevas perspectivas para que afectan a la expresión genética
transgénicas, como Polly. los animales de granja (con el fin y que no se manifiest an en las
Estas ovejas son capaces de segre- de mantener linaj es que tienen caract eríst icas ext ernas. Est os
gar esta proteína humana como si características como la alta pro- investigadores se han centrado en
fuera un componente normal de su ducción de leche), la clonación de analizar los mecanismos de la esca-
leche. Ello demostró que mediante animales de compañía e incluso la sa supervivencia y el sobrecreci-
la clonación se pueden introducir clonación de especies en extinción. miento de los animales clonados.
genes específicos de otros mamífe- Mediante ratones clonados obteni-
ros y, también, la posibilidad de dos a partir de células embriona-
obtener verdaderos rebaños porta- Obstáculos en la clonación rias, monitorizaron la actividad de
dores y capaces de expresar los estos genes impresores. El estudio
genes exógenos. Aunque cada semana escuchamos sirvió para discernir si los proble-
A part ir de ahí empezó una los logros en distintos centros de mas de los clones venían dados por
carrera, llena de obstáculos, para investigación de la obtención de un alteraciones en las células donantes
conseguir otros animales de gana- clon de vacuno, un clon de caballo o en el procedimiento de la clona-
do vacuno y porcino mediante la o un clon de gato, lo cierto es que ción. Y observaron que muchos de
técnica del gene targeting y la trans- aún quedan muchos problemas los problemas procedían de las
ferencia nuclear, puesto que los técnicos por resolver. Los investi- células madre donantes, puesto
beneficios pueden ser enormes, tal gadores aún se mueven, en gran que provenían de cultivos extre-
como veremos a continuación. part e, de modo empírico, con madamente inestables.
Una de las posibilidades que numerosas tentativas de ensayo y En definitiva, la clonación aún
ofrece la técnica de la clonación error para mejorar los protocolos. no es una técnica eficaz, pero pare-
por transferencia nuclear son los Por un lado, se da una alta inci- ce que puede ofrecer importantes
xenotrasplantes. Las reacciones dencia de nacimientos muertos y oport unidades médicas. Como
inmunitarias hiperagudas imposi- abortos. Wilmut et al han descrito sociedad, debemos adoptar actitu-
bilitan, por ahora, los trasplantes que existe un patrón de muertes des críticas ante los cambios que se
de órganos de origen animal. durante el desarrollo embrionario nos avecinan, pero, por otro lado,
Mediante las técnicas de manipu- y fetal, llegando al término sólo 1-2% no debemos desaprovechar las
lación genética se pretende elimi- de los embriones. Por otro lado, posibilidades que nos ofrece la
nar la reacción autoinmunitaria. A también se dan malformaciones y ciencia para mejorar nuestra cali-
partir de ahí, se podrían obtener anomalías en el desarrollo. En el dad de vida y la de las generacio-
animales clónicos, como el cerdo, ganado bovino los intentos de clo- nes futuras. ■
con órganos trasplantables a pacien- nación se saldan, a menudo, con
tes humanos. gestaciones complicadas, abortos y
Otra de las posibilidades de la nacimientos de terneros con tama-
clonación es la obtención de mode- ño anormalmente grande. De los Bibliografía general
los animales con enfermedades terneros clónicos de tamaño anor-
humanas. En ocasiones la inserción mal, muchos presentan hipercale- Casado M. González-Duarte R. Los retos
de mutaciones específicas en rato- mia (alta concentración de potasio) de la genética en el siglo X X I: genética
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Disponible en: www.ciencia.cl/Cien-
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