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TRABAJO PRÁCTICO N°1
PRESIÓN OSMÓTICA

OBJETIVO:
1. Determinar la osmolaridad del plasma sanguíneo en forma indirecta, basado en la lectura
de Hematocrito.

FUNDAMENTO:
● La Sangre es un tipo de tejido conectivo especializado, que circula por el organismo.
● Hematocrito: Porcentaje de glóbulos rojos con respecto al total de sangre.
● Valores Normales: Varón: 41-51% - Mujer: 37 - 47 %

M
E
.S
ca
si
fí

● Los glóbulos rojos (GR) se encuentran en equilibrio osmótico con el plasma

sanguíneo adoptando una forma bicóncava.
● La osmolaridad normal del plasma es de 300 mOsm/l
io

Cómo se comportan los GR en un medio hipotónico, isotónico o hipertónico

B
@

● Por lo tanto, al colocar los GR en soluciones hipotónicas e hipertónicas, su volumen

1
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globular (Hto) cambia.
● La osmolaridad del plasma será igual al de la solución cuyo Hto sea igual
al Hto de los eritrocitos en su plasma.

MATERIALES:
● Sangre humana.
● Tubos heparinizados.
● Aguja hipodérmica.
● Tubos de ensayo.
● Gradilla.
● Marcador.
● Jeringa.
● Soluciones de NaCl de diferentes osmolaridades.

M
● Microtubos para hematocrito.
● Papel milimetrado (Abaco).
● Centrífuga.

E
.S
MÉTODO:
1. Colocarla en tubos heparinizados.
2. Colocar la sangre en 7 tubos de ensayo y enumerarlos.
ca
3. Colocar 6 tubos de ensayo en la centrífuga a 3000 rpm durante 15 minutos, dejando
como testigo el tubo n°7.
4. Se extraen los tubos de la centrífuga y se marca el nivel del plasma.
5. Con la jeringa extraer el plasma de los 6 tubos, los cuales serán reemplazados por
soluciones (NaCl) de osmolaridades conocidas.
si

6. Procedemos a homogeneizar cada uno de los tubos de ensayo con las soluciones.
7. Con el contenido de los tubos de ensayo se procede a cargar los microtubos para Hto
(1-7) y se sella uno de los extremos.
fí

8. Se colocan los microtubos para hematocrito en la centrífuga a 3000 rpm durante 15

minutos.
9. Realizamos la lectura del volumen globular (Hto.) con el Abaco, que es el porcentaje
io

de GR en 100 ml de plasma.
B
@

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M
10. Representamos gráficamente los valores, y ubicamos el tubo testigo n°7.

E
.S
ca
si
fí
io
B
@

CONCLUSIONES:
● La presión osmótica es la propiedad coligativa más importante por su
interés biológico, se relaciona directamente con la distribución del agua
en el organismo.
● El volumen de los GR depende de la osmolaridad del plasma.
● El aumento o disminución del volumen de los GR se explica por la entrada o salida de
agua, a través de su membrana por ósmosis, es decir si el medio es Hipotónico
ingresa agua, si es hipertónico sale agua y si es isotónico está en equilibrio
la cantidad de agua que entra con la que sale.

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TRABAJO PRÁCTICO N°2
pH:

OBJETIVO:

1. Determinar el pH de la orina mediante el uso de indicadores (Método Colorimétrico) .

FUNDAMENTO:

● Se basa en la capacidad que tienen los indicadores de virar de color en medios ácidos
y básicos.

● Se caracterizan porque en su forma molecular presentan un color distinto al de su

forma disociada.

M
● Mecanismo de acción de los indicadores:

E
.S
ca
❖ En un medio ácido predomina la forma molecular InH.
❖ En un medio básico predomina la forma disociada In⁻.
si
fí
io
B
@

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MATERIALES:
● Orina.
● Agua destilada.
● Soluciones buffer (ácido cítrico 0,1 M y
fosfato disódico 0,2 M).
● Tubos de ensayo 6 (1ra etapa).
● Tubos de ensayo 7 (2da etapa).
● Pipetas.
● Tabla de indicadores.
● Set de Indicadores.

M
E
.S
MÉTODO:
1. Comparamos el color que toma el indicador en nuestra solución problema con
ca
el color que toma el mismo indicador en una serie de soluciones buffer de pH
conocido.
2. Realizamos dos escalas de pH, una con el indicador universal Yamada y la
otra con un indicador mono o dicromático.
3. Utilizamos dos indicadores debido a que el pH de la orina presenta un rango
si

de normalidad entre 4,5 y 8, la gama de valores a encontrarse es

relativamente grande como para ser determinada con un solo indicador.
4. 1ra Etapa:
fí

- Armamos nuestra escala testigo con las soluciones buffer

correspondiente a cada pH, (una unidad de pH), en 5 tubos de ensayo.
- En el tubo n°6 colocar la muestra de orina y la diluimos con 5 ml de
io

agua destilada.
- Agregar a cada tubo de ensayo 5 gotas del indicador Yamada.
- Comparamos el color que toma la orina con los colores de la escala
testigo para conocer el pH aproximado de la muestra. Por ejemplo que
B

vire entre 5 y 6
@

5
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5- 2da Etapa:
- Armamos una nueva escala con las soluciones buffer con un pH más ajustado.
(cada 0,2 unidades de pH).
- Elegir el indicador adecuado para ese rango de pH, utilizando una tabla de
indicadores.
- Agregar en cada tubo de ensayo el indicador elegido. Por ejemplo, que
utilicemos el Rojo de Metilo (pH de la muestra de orina entre 5 y 6).
- El tubo de ensayo cuyo color sea idéntico al color que toma la muestra de
orina nos indicará el pH exacto de la orina.

M
E
.S
ca
CONCLUSIONES:

● El valor obtenido en la muestra de orina durante la 1ra etapa fue de un pH

si

entre 5 y 6.

● La determinación del pH se llevó a cabo utilizando el método colorimétrico,

fí

basado en el uso de indicadores, que nos permite comparar el color que toma
este en una escala de pH conocido con el color que toma en la muestra de
orina analizada.
io

● El indicador elegido fue el rojo de metilo, indicador dicromático.

● La muestra de orina analizada se encuentra dentro de los parámetros

B

normales. Este pH puede variar por situaciones no patológicas como el tipo de

alimentación de un individuo o por razones patológicas ante diferentes
enfermedades de base.
@

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TRABAJO PRÁCTICO N°3

BUFFER

Son mezclas de sustancias que se caracterizan porque pueden

mantener constante, dentro de ciertos límites, el pH de un medio.

OBJETIVOS:

M
1. Demostrar que las soluciones buffer mantienen constante el pH del medio.
2. Demostrar que el pH de un buffer no varía con la dilución.

E
3.Demostrar que el poder amortiguador de un buffer depende de la
concentración absoluta de sal y de ácido.

.S
OBJETIVO N°1 - FUNDAMENTO:

MECANISMO DE ACCIÓN DE UN BUFFER

ca
si
fí
io
B
@

MATERIALES Y MÉTODO:
❖ Preparamos dos tubos de ensayo:

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M
E
❖ Una vez que ambos tubos tengan el mismo color (mismo pH) agregamos NaOH 0,1

.S
N, unas gotas a cada tubo y observamos lo que sucede.
ca
si
fí

CONCLUSIÓN:
io

En el objetivo N° 1 comparamos una Solución Buffer

con una Solución no Buffer(ácido) de igual pH. Al
agregar una base fuerte (NaOH) la solución buffer
mantiene su pH a diferencia de la solución no buffer
B

que si lo modifica.
@

OBJETIVO N°2 - FUNDAMENTO:

Propiedades de los buffer: El pH depende de las concentraciones relativas de la

sal y el ácido y no se modifican con la dilución.
Cuando se añade agua a un sistema las concentraciones de sal y ácido decrecen en la misma
proporción. Por lo tanto, su cociente es constante y el pH no se altera.

MATERIALES Y MÉTODO:
❖ Preparamos dos tubos de ensayos, uno con un buffer concentrado y el otro diluido.

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M
E
.S
❖ Agregar ahora a ambos tubos un indicador, rojo de metilo y observamos:
ca
si
fí

CONCLUSIÓN:
io

En el objetivo N° 2 comparamos soluciones

buffer concentradas y diluidas, para demostrar
que el pH no se modifica con la dilución.
Este depende de las concentraciones relativas de
B

sal y de ácido. Al añadir agua al sistema ambas

concentraciones decrecen en la misma
@

proporción.

OBJETIVO N°3 - FUNDAMENTO:

Propiedades de los buffer: Capacidad amortiguadora o poder amortiguador

La misma en un sistema buffer es la cantidad de ácido o base fuerte (mMol/l) que se debe
agregar para cambiar el pH del buffer en 1 unidad.

MATERIALES Y MÉTODO:
❖ Preparamos dos tubos de ensayos, uno con un buffer concentrado y el otro diluido.

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M
E
.S
❖ Agregamos ahora a ambos tubos NaOH 0,1 N y observamos qué pasa:
ca
si
fí

CONCLUSIÓN:
io

En el objetivo N° 3 comparamos un buffer

concentrado y un buffer diluido, para demostrar
que el buffer concentrado tiene mayor poder
B

amortiguador. Al agregar una base fuerte , el

buffer diluido tiene menor capacidad
amortiguadora que el concentrado, debido a que se
@

agota uno de sus componentes.

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TRABAJO PRÁCTICO N°4

COLOIDES:

M
E
OBJETIVOS

.S
1- Demostrar que los coloides no dializan y por lo tanto es posible separar los
coloides de los cristaloides mediante diálisis.
ca
2- Observar el Fenómeno Tyndall en una solución coloidal.

3- Demostrar el poder protector de un coloide hidrófilo.

si

OBJETIVO N°1 - FUNDAMENTO:

fí

Proceso de Diálisis, es aquel que permite separar una solución cristaloide de una solución
coloidal a través de una membrana dialítica. Esto se debe al tamaño de las partículas
io

(micelas) que integran el sistema coloidal.

MATERIALES:
B

• Dispositivo de Diálisis
• Solución Cristaloide (NaCl)
@

• Solución Coloidal (Ovoalbúmina)

• Agua destilada
• Ácido Nítrico (HNO3)
• Nitrato de Plata (AgNO3)
• Tubos de ensayo
• Pipetas

MÉTODO:
❖ En un vaso de precipitación colocamos H2O destilada(Baño Externo)
❖ En un frasco que presenta una membrana dialítica, colocamos ovoalbúmina y NaCl.
(Baño Interno).

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M
E
❖ Antes de la diálisis tomamos muestras de ambos baños(I y E) y luego sumergimos el
baño interno en el externo durante 30 minutos.

.S
❖ Para poner en evidencia la ovoalbúmina utilizamos ácido nítrico con el cual se
desnaturaliza y hay turbidez.
❖ Para poner en evidencia el NaCl utilizamos nitrato de plata con el cual se forma una
reacción de cloruro de plata y precipita.
ca
❖ Después de los 30 min. tomamos muestras del baño externo.
si
fí
io
B
@

❖ Observamos que solo paso a través de la membrana dialítica la solución

cristaloide.

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CONCLUSIÓN: En el objetivo N° 1 demostramos, que las soluciones coloidales
no difunden a través de una membrana dialítica a diferencia de las soluciones
cristaloides debido al tamaño de sus partículas.
OBJETIVO N°2 - FUNDAMENTO:

Propiedades de los Coloides:

Óptica Fenómeno Tyndall Dispersión de la luz por las partículas

Al hacer pasar en forma lateral un rayo de luz a través de un recipiente con una dispersión
coloidal, la luz traza su camino a través del recipiente, debido a que cada micela suspendida
refracta y difunde la luz en todas las direcciones .

M
MATERIALES Y MÉTODO:

❖ Preparamos un tubo 1 con una solución coloidal ( Solución de Mastique + H2O).

E
❖ Preparamos un tubo 2 con una solución cristaloide ( NaCl + H2O).
❖ Hacemos incidir un haz de luz en ambos tubos y observamos:

.S
ca
si
fí
io
B
@

CONCLUSIÓN:
En el objetivo N° 2 observamos, como en una solución coloidal al hacer incidir
un haz de luz la micela suspendida refracta y difunde la luz en todas las
direcciones, formando un sistema ópticamente lleno. Mientras que en la

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solución cristaloide el haz de luz no se refracta y se forma un sistema
ópticamente vacío.

OBJETIVO N°3 - FUNDAMENTO:

Poder protector de los coloides

NÚMERO DE ORO: Es la mínima cantidad en miligramos de emulsoide (gelatina)
necesario para impedir que 10 ml de oro coloidal (suspensoide) precipiten o cambien de
color por la adición de 1 ml de NaCl al 10%.

M
E
.S
ca
MATERIALES Y MÉTODO:
❖ Preparamos un tubo 1 con 1 ml de solución de mastique (liófobo) + 5 ml de H2O.
❖ Preparamos un tubo 2 con 1 ml de solución de mastique (liófobo) + 5 ml de gelatina
si

(liófilo).
fí
io
B
@

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❖ Luego agregamos a ambos tubos 1 ml de NaCl y observamos:

M
E
.S
ca
si
fí
io
B
@

CONCLUSIÓN:
En el objetivo N°3 mostramos, cómo aumentamos la estabilidad de un
suspensoide (liófobo) ante el agregado de un emulsoide (liófilo) o coloide
protector, como la gelatina. Demostramos la acción protectora del coloide
liófilo.

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