QA - Cromatografía Gaseosa
QA - Cromatografía Gaseosa
QA - Cromatografía Gaseosa
Z
X
Sobre las velocidades
Se elige el valor de u
(velocidad lineal de la fase
móvil) tal que H sea mínimo.
¿Qué es A?
Si las partículas de un relleno son muy heterogéneas, una
molécula puede ir por varios caminos diferentes que
conllevarán distintos tiempos, lo cual ensanchará la banda.
Este efecto se llama difusión en remolino,
difusión turbulenta o difusión de eddy, y la
variable A describe su magnitud. En columnas
empacadas muy homogéneas y en columnas
capilares la variable A es despreciable.
¿Qué es B/u?
Es el término asociado a la difusión
longitudinal, donde las moléculas se difunden
desde zonas de alta concentración a zonas
más diluidas, provocando el ensanchamiento
de la banda. Flujos lentos y gases ligeros
fomentan la difusión longitudinal.
¿Qué es Cu?
Si la fase móvil es más rápida que la
difusión a través del flujo (Cm) o la
transferencia de masa entre ambas
fases es lenta (Cs), las moléculas
libres recorren grandes distancias
antes de que se asocien a la fase
estacionaria, ensanchado la banda.
Luego C=Cm+Cs.
Al principio (a) se tiene una
franja de soluto estrecha.
Los solutos más próximos
a las paredes son retenidos
por la fase estacionaria y
los demás fluyen con la
fase móvil. Al final (b) se
produce un aumento del
ancho de banda.
¿Qué hago si no conozco A, B y C?
Generalmente no se conocen los
coeficientes y se deben calcular. Se hacen
al menos tres cromatografías variando la
velocidad del gas. En cada una se saca el
valor de N con el tiempo de retención y el
ancho del pico; luego se obtiene H
haciendo el cociente L/N. Entonces se
tendrán tres ecuaciones de Van Deemter
con tres incógnitas: A, B y C.
Resolución
La resolución de una
columna señala qué tan
separadas están las
bandas con relación a sus
anchos.
Sensibilidad adecuada.
Buena estabilidad y reproductibilidad.
Respuesta lineal en un amplio rango.
Amplio rango de temperaturas de trabajo.
Tiempo de respuesta corto.
Manejo sencillo.
Respuesta semejante para todos los solutos
o respuesta selectiva para un cierto grupo.
No debe destruir la muestra.
Tipos de detectores
Detector de Ionización por
Llama (FID)
Compuestos orgánicos como los
hidrocarburos producen iones y electrones
cuando se pirolizan frente a la llama.
Ventajas
Alta sensibilidad.
Alta selectividad.
No altera la muestra de forma
significativa con relación al FID.
Desventajas
Rango limitado de respuesta lineal.
Estabilidad regular.
Aplicaciones
Determinación de insecticidas clorados
En la práctica se
pueden combinar dos
o más detectores para
compensar
recíprocamente los
defectos de cada uno.
Por ejemplo, combinar
el detector ECD y FID.
¿Qué es el make-up?
La línea base de un
cromatograma está sujeta
a desviaciones de corto
plazo cuya naturaleza es
muy fortuita y que se
conocen como ruido (a).
La desviación (b) se da cuando la lectura se mueve lejos de la horizontal.
Ambos fenómenos se originan por componentes defectuosos del detector o
por fluctuaciones en la velocidad del gas portador. La desviación también se
debe al sangrado de la columna. Gran parte del problema se elimina usando
componentes de buena calidad y trabajando de forma adecuada.
Análisis
Análisis Cualitativo
Muestra en SÍ hay A
columna 1 Puede
haber A
NO hay A
NO hay A
(a) Mezcla de alcoholes desconocidos.
(b) Mezcla estándar de alcoholes.
Métodos de Análisis Cuantitativo
Se usan a la hora de determinar la cantidad
de uno o varios componentes en la muestra.
Normalización de Área.
Más sencillo
Más preciso
Normalización de Área con
factores de respuesta.
Estándar Externo.
Estándar Interno.
C 400 33,3
Total 1200
Normalización de Área con factores de respuesta
A diferencia del método anterior, no es necesario que los analitos
respondan de la misma forma. Se hace un estándar similar a la muestra
y se lo hace pasar por la columna cromatográfica. Se puede obtener dos
datos: el cociente Peso%/Área y el factor de respuesta, donde a uno de
los componentes se le asignará el valor 1, mientras que los demás
tendrán un valor proporcional a su respectivo cociente Peso%/Área.
Luego se pasa a los datos de la muestra (unknown) y se obtiene los
porcentajes en peso al multiplicar el área de cada componente por el
respectivo cociente Peso%/Área y luego normalizar, o al multiplicar a
cada área por el factor de respuesta y luego calcular el porcentaje de
cada área, que será igual al porcentaje en peso.
B
Estándar Externo
C
Se hacen varias muestras y se construye
una curva de calibrado para el analito de A
interés. Conociendo el área que provoca
ese analito en la muestra, se puede
estimar su concentración al ingresar en la
curva de calibrado. A diferencia de los A
métodos anteriores, no es necesario
B
analizar a todos los componentes, pero es
Área
muy sensible a las fluctuaciones en la C
calibración (como no poder mantener el
volumen de inyección constante).
Conc. (ppm)
B
Estándar Externo
C
Debido a la facilidad de reproducir los
volúmenes de inyección de gas con una A
válvula de seis vías y la dificultad de
aplicar la técnica de estándar interno para
muestras de gas, la estandarización
externa es el enfoque preferido para el A
análisis de muestras de gas.
B
Área
C
Conc. (ppm)
B
Estándar Interno IS
C
Es adecuado para estudiar un analito de
A
interés (B) y no exige alta reproducibilidad
como el método de estándar externo. Se
elige una sustancia llamada estándar interno
(IS) que cumpla las siguientes condiciones:
No debe estar presente en la muestra.
No debe superponerse con ningún pico.
Debe eluir cerca del pico de interés.
Debe ser químicamente similar al analito de
interés y no reaccionar con la muestra.
Debe estar disponible en alta pureza.
Estándar Interno
Se realiza una muestra con cantidades conocidas de IS y B, y se calcula
el factor R. Para mayor precisión, se debe elaborar una curva de
calibrado con la razón de área en las abscisas y la razón de peso en la
ordenadas. Si la relación es lineal, la pendiente de la recta será igual a
1/R.
R=Razón de
Razón de Peso Razón de Área
Componente Peso Área Área / Razón de
(B/IS) (B/IS)
Peso
IS 0,3786 4231
1,398 1,345 0,962
B 0,5291 5691
Estándar Interno
Por último se añade una cantidad conocida de IS en la muestra y se
pasa por una columna cromatográfica. Conociendo R, el peso de IS, y la
razón de área, se puede calcular el peso del analito de interés.
B B
IS IS