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    Practica 1. Extracción de Proteinas

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    Los estudiantes aprenderán métodos para extraer proteínas de diferentes fuentes utilizando solventes como agua, solución salina, etanol al 70% y acetona fría. Realizarán extracciones con cada solvente y compararán la eficacia. Desarrollarán un protocolo de extracción, describirán los extractos obtenidos y concluirán lo aprendido sobre los fundamentos de la extracción de proteínas.

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    Los estudiantes aprenderán métodos para extraer proteínas de diferentes fuentes utilizando solventes como agua, solución salina, etanol al 70% y acetona fría. Realizarán extracciones con cada solvente y compararán la eficacia. Desarrollarán un protocolo de extracción, describirán los extractos obtenidos y concluirán lo aprendido sobre los fundamentos de la extracción de proteínas.

    Descripción original:

    Práctica

    Título original

    Practica 1. Extracción de proteinas

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    Los estudiantes aprenderán métodos para extraer proteínas de diferentes fuentes utilizando solventes como agua, solución salina, etanol al 70% y acetona fría. Realizarán extracciones con cada solvente y compararán la eficacia. Desarrollarán un protocolo de extracción, describirán los extractos obtenidos y concluirán lo aprendido sobre los fundamentos de la extracción de proteínas.

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    Los estudiantes aprenderán métodos para extraer proteínas de diferentes fuentes utilizando solventes como agua, solución salina, etanol al 70% y acetona fría. Realizarán extracciones con cada solvente y compararán la eficacia. Desarrollarán un protocolo de extracción, describirán los extractos obtenidos y concluirán lo aprendido sobre los fundamentos de la extracción de proteínas.

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    Unidad de Aprendizaje: Enzimología

    Competencia: Analizar los criterios de aislamiento y purificación de enzimas para sentar


    las bases de la caracterización bioquímica de las enzimas de importancia biotecnológica.
    Tema: Métodos de extracción de proteínas.
    Nombre de la Práctica: Métodos de extracción de proteínas (enzimas) a partir de
    diferentes fuentes.
    Lugar: Laboratorio de Biotecnología

    Propósito: El alumno aprenderá a desarrollar métodos de extracción de proteínas


    comparará la eficacia de cada solvente usado.

    Introducción: El alumno desarrollará una introducción a la práctica que le sirva


    como marco teórico de referencia al reporte. La extensión deberá ser de una
    cuartilla.

    Materiales biológicos y reactivos:

    • Diferentes fuentes enzimáticas.


    • Agua destilada
    • 100 ml de etanol al 70%
    • 100 ml de solución de 0.1M Tris HCl pH 6.8 con NaCl al 0.5 M
    • Acetona fría

    Equipos y Materiales:

    • Micropipetas,
    • tubos de 15 mL
    • Centrífuga refrigerada
    • Incubadora
    • Vortex
    • Termómetro
    • Gradilla para tubos
    • Hielo.

    Metodología:

    1. Pesar 1 g de material (en caso de que sea sólido), resuspender el material


    en 4 ml de agua y agite por 10 min.
    2. Centrifugue los tubos a 10,000 g a 4 ºC por 5 min.
    3. Descarte el precipitado y recupere el sobrenadante, almacene en frío hasta
    su uso.
    4. Repita el procedimiento con el resto de la harina, pero use la solución salina
    y etanol 70%
    5. Una vez que tenga las tres muestras proceda a precipitar las proteínas
    usando acetona fría (Para esto se coloca acetona a -70 ºC). Agregue 4 ml
    de acetona por cada ml de extracto.
    6. Deje reposar por 10 min y proceda a precipitar usando centrifugación.
    7. Descarte el sobrenadante y resuspenda el precipitado en un volumen de
    500 µl. El precipitado resuspendido será la fuente de proteínas (enzima).

    Resultados:

    • Descripción de los extractos obtenidos discutir el protocolo realizado,


    modificaciones, puntos críticos.
    • Descripción de los resultados, volumen de los extractos obtenidos,
    características, etc.
    • Diagrama de flujo del proceso de extracción.

    Conclusión

    El alumno remarca lo aprendido durante el desarrollo de la actividad práctica. Aquí


    puede hacer énfasis en los fundamentos prácticos.

    Anexo

    Cuestionario

    1. ¿Cuáles son los criterios que se deben de considerar en los procesos de


    extracción de proteínas?
    2. ¿Por qué cree usted que debe haber variaciones en el proceso de
    extracción dependiente del solvente?
    3. Si usted evaluará varios solventes para establecer un método de extracción
    de proteínas (enzimas), ¿que criterios tomaría en cuenta para su selección?
    4. Si usted quisiera a partir de los extractos seleccionados purificar su proteína
    (enzima), ¿que criterios tomaría en cuanta para seleccionar el tipo de
    técnicas cromatográfica
    Referencias

    Se enlistarán las fuentes bibliográficas consultadas en formato APA. Ejemplo:

    Buchannan B. B., W. Gruissem and R. L. Jones (Eds.). 2002. Biochemistry and


    Molecular Biology of Plants. American Society of Plant Physiologists

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