UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA

(creada por ley Nº 25265)

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA

AGROINDUSTRIAL

GUIA DE PRACTICA Nº 1

MICROSCOPÍA Y MORFOLOGÍA CELULAR

Asignatura: Microbiología
Ciclo: IV
Docente: MSc. Víctor Asunción ZARATE PAUCARPURA
Jefe de practica: Ing. Deniss Yoshira ARECHE MANSILLA
Lugar de ejecución de la práctica: Laboratorio de análisis de alimentos
Semestre: 2023-II

Acobamba - Huancavelica
2023

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I. INTRODUCCIÓN
La microbiología es el estudio de los microorganismos, un grupo grande y diverso de
organismos microscópicos que vive en forma de células aisladas o en grupos de ellas;
también comprende a los virus, que son organismos microscópicos, pero que carecen de
estructuras celulares. Los microorganismos tienen un enorme impacto en la vida y en la
composición física y química de nuestro planeta.
La microbiología es una ciencia maravillosa que estudia un mundo microscópico, con unas
características inigualables que, aún si se observarse a simple vista, si podemos disfrutar de
todos sus beneficios y claro, también de sus efectos perjudiciales. Los microbios son un
grupo diverso, en morfología, metabolismo y distribución. Pueden ser encontrados en el
agua, aire, suelo, dentro y fuera de todos los organismos, cumpliendo una amplia gama de
funciones vitales para el equilibrio de todos los ecosistemas, Sin ellos no existiría la vida que
conocemos Varón, M., et. al. (2023).
Con el nombre de microscopio nos referimos a todo instrumento que nos permite visualizar y
estudiar aquellas estructuras cuyo tamaño se sitúa por debajo del nivel de resolución del ojo
humano, es decir por debajo de las 250 µm.
La célula es la unidad fundamental de la vida. Es la estructura más pequeña del cuerpo,
capaz de realizar todos los procesos que definen la vida: respiración, movimiento, digestión
y reproducción, aunque no todas las células pueden realizar todas estas funciones. La
mayoría de las células son invisibles para el ojo humano. Hasta el óvulo femenino, la célula
más grande del cuerpo, no es más grande que el punto situado al final de esta frase. El
tamaño y la forma varían con las funciones celulares.

II. OBJETIVOS
 Realizar la observación de bacterias de yogurt en el microscopio
 Realizar la observación de microorganismos del agua estancada en microscopio.

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III. FUNDAMENTO TEÓRICO
III.1. Microbiología: es la ciencia que estudia los microorganismos, su desarrollo, forma de
vida, reproducción, metabolismo, fisiología e identificación. A Anton Van Leeuwen hoek,
en el microscopio, observó por primera vez seres vivos presentes tanto en agua y en
materia orgánica, los cuales llamó animálculos, más tarde a medida que continuaban las
investigaciones y los experimentos fueron denominados microorganismos. Cabe
destacar que la microbiología ha ido evolucionando muy rápido de manera satisfactoria
y su importancia es cada vez mayor debido a la presencia de los microorganismos en el
entorno tanto como microbiota normal y patógena, de aquí surge la importancia de la
investigación de estos microorganismos y aplicar técnicas que permitan su identificación
Cabrera, Y. S. (2022).
III.2. Microscopio: El uso del microscopio óptico es fundamental para el laboratorio de
microbiología, ya que la mayoría de los agentes infecciosos no son perceptibles a
simple Vista. El microscopio óptico utiliza luz Visible para observar las muestras, la luz
pasa a través de estas y posteriormente, atraviesa varias lentes de aumento, generando
una imagen mucho mayor a la de la muestra, el aumento total alcanzado depende de
las lentes utilizadas. Además. es necesario la ayuda de las diferentes técnicas de tinción
para que se puedan observar a detalle y tratar de identificar y clasificar los agentes
etiológícos de una manera rápida y relativamente sencilla.
III.2.a. Partes del microscopio

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III.2.b. Uso del microscopio
Se deben seguir los siguientes pasos de rutina para la observación al
microscopio y, de esta manera, garantizar su uso correcto y eficiente
(Cappuccino y Welsh, 2019).
1. Coloque el portaobjetos dentro de los clips de la platina, mueva el
portaobjetos para centrar la muestra directamente sobre la fuente de luz para
facilitar el enfoque.
2. Mueva el carro (donde se encuentra la platina), usando el tornillo
macrométrico del microscopio, tanto como sea posible, gire el objetivo de 4X
a su posición y ajuste con este mismo tornillo mientras mira a través de la
lente ocular.
3. Mientras mira a través de la lente ocular, ajuste el micrométrico, girándolo
ligeramente hacia adelante y hacia atrás, para enfocar la muestra con
nitidez.
4. Ajuste el condensador hasta tener un mejor enfoque.
5. Ajuste la intensidad de la luz mediante el condensador y/o el diafragma.
6. La mayoría de los microscopios son parafocales, lo que significa que cuando
una lente está enfocada, otras lentes también tendrán la misma distancia
focal y se pueden girar a su posición sin mayores ajustes, en la práctica
normalmente se necesita media vuelta del micrométrico en cualquier
dirección para un enfoque nítido.
7. Una vez que haya enfocado la muestra con nitidez con el objetivo 40X, se
pueden hacer los preparativos para visualizar la muestra con aceite de
inmersión, coloque una gota de aceite en el portaobjetos directamente sobre
el área a visualizar, gire el revolver hasta que el objetivo de inmersión encaje
en su posición,
III.2.c. Manipulación y cuidado del microscopio
Los microscopios están almacenados en armarios especiales y los usuarios
deben trasladarlos a sus mesas de laboratorio, la forma correcta y aceptable de
hacer esto es agarrar el brazo del microscopio firmemente con la mano derecha y
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la base con la mano izquierda, y levantar el microscopio del estante del gabinete,
llévelo cerca del cuerpo y colóquelo suavemente sobre la mesa de laboratorio,
esto evitará la colisión con muebles o compañeros de trabajo, y lo protegerá
contra daños y desajustes.
Limpiar todos los sistemas de lentes; la menor cantidad de polvo, aceite, pelusa o
pestañas disminuirá la eficiencia del microscopio, las lentes oculares, de
escaneo, de baja potencia 4X, 10X y de alta potencia 40X, se pueden limpiar
inicialmente soplando con una pera de succión y, posteriormente, frotando varias
veces con un paño para lentes o papel de arroz, nunca use toallas de papel o
trapos sobre la superficie de una lente, si la lente de inmersión en aceite está
pegajosa, se usa un trozo de papel para lentes humedecido con xilol o alcohol
isopropílico para limpiarla, el xilol se elimina inmediatamente con un pañuelo
humedecido con alcohol al 95% y la lente se seca con papel para lentes.
III.3. Morfología celular: la morfología celular se estudia mediante observación de una
preparación en fresco al microscopio óptico a partir de un cultivo joven cultivado en
placa o en líquido. Esta observación permite determinar no solo la forma, sino el tamaño
de las células.
Las células eucariotas y procariotas son organismos vivos, que, aunque presentan
diferencias, comparten en común que son células y por Io tanto poseen:
 Membrana celular que regula eI flujo de nutrientes, separa eI medio externo del
interno y permite la comunicación intercelular.
 DNA y RNA como material genético.
 Compuestos químicos básicos: carbohidratos, proteínas, lípidos, ácidos nucleicos,
vitaminas y minerales.
 Enzimas necesarias para la replicación y la producción de energía.
IV. MATERIALES Y METODOS.
IV.1. MATERIALES
 Microscopio
 Porta y cubre objeto
 Cristal violeta o azul de metileno
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 Placas Petri
 Asa de siembra
 Mechero de bunsen
 Pizeta
 Etanol al 96 %
 Agua estancada y yogurt
IV.2. METODOLOGIA
IV.2.a. Visualización de los microorganismos de agua estancada
1. Colocar media gota de agua estancada en porta objeto
2. Cubrir con el cubre objeto
3. Colocar al microscopio y observar
IV.2.b. Visualización de los microorganismos del yogurt
1. Flamear el aza de siembra con un mechero de bunsen (esterilizar)
2. Dejar enfriar
3. Abrir el yogurt y sacar una muestra pequeña de yogurt (parte del suero)
4. Esparcir la muestra por el porta objeto
5. Fijar la preparación a la llama evitando por unos segundos evitando acercar
demasiado a la llama.
6. Una vez seca, tapar el mechero.
(si se puso mucha muestra de yogurt es conveniente hacer un lavado con etanol al
96 % para reducir la grasa del yogurt)
7. Proceder a la tinción con azul de metileno sobre la muestra y esperar 2
minutos.
8. Lavar la preparación y dejar secar en el aire
9. Colocar el cubreobjeto encima de la muestra
10.Llevar la muestra al microscopio
11.Prender el microscopio y con los tornillos de deslizamiento colocar donde se va
a observar.
12.Empezar con el objetivo de menor aumento de 4X y pasar a los demás
objetivos.
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13.Para pasar al objetivo 100x usar aceite de inmersión
V. BIBLIOGRAFIA
Cabrera, Y. S. (2022). Manual de prácticas de laboratorio de Microbiología. 1. Santiago de
Los Caballeros, Universidad Abierta para Adultos (UAPA). Recuperado de
https://elibro.net/es/ereader/bibliounh/230218?page=10.
Egaña, M. (2009). Tema: célula. Morfología celular. Teoría celular. Santa Fe, Argentina,
Argentina: El Cid Editor | apuntes. Recuperado de
https://elibro.net/es/ereader/bibliounh/28453?page=4.
Gómez Jurado, G. J. y Gómez Meza, J. E. (2011). Laboratorio de microbiología. 1. Bogota
D.C, Universidad de La Salle - Ediciones Unisalle. Recuperado de
https://elibro.net/es/ereader/bibliounh/221570?page=14.
Varón López, M. Ocampo Guerrero, M. L. y Gallego Santos, J. E. (2023). Manual de
laboratorio en microbiología general. 1. Sello Editorial Universidad del Tolima.
Recuperado de https://elibro.net/es/ereader/bibliounh/232952?page=19.
VI. LOGRO DE APRENDIZAJE DE LA PRACTICA
Al finalizar la práctica los alumnos deben de haber aprendido la importancia de la práctica.

VII. ANEXOS
Considerar instrumentos que se usaran en la práctica.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el objetivo de tener orden, cuidado y limpieza del microscopio?
2. Dibuja el microscopio y sus partes describiendo la función de cada uno
3. Profundizar sobre:
 Infección, Sepsis, Asepsia, Contaminación, Esterilizantes, Desinfectantes.
4. Que microrganismo encontramos en el agua estancada.