Inte Iso 14855-1 2019

B
INTE/ISO 14855-1:2019
Determinación de la
biodegradabilidad aeróbica final de
materiales plásticos en condiciones
de compostaje controladas. Método
según el análisis de dióxido de
carbono generado.
Parte 1: Método general.
Ambiente
Correspondencia: Esta norma nacional es idéntica (IDT) a la
norma internacional ISO 14855-1:2012, “Determination of the
ultimate aerobic biodegradability of plastic materials under
controlled composting conditions. Method by analysis of
evolved carbon dioxide. Part 1: General method“
Miembros de Fecha: 2019-08-06

Primera Edición
Secretaría: INTECO
Editada e impresa por ©INTECO
Derechos reservados
ICS 83.080.01
La presente norma técnica pertenece a INTECO en virtud de los instrumentos nacionales e internacionales, y por criterios de
la Organización Mundial de la Propiedad Intelectual (OMPI). Salvo por autorización expresa y escrita por parte de INTECO, no
podrá reproducirse ni utilizarse ninguna parte de esta publicación bajo ninguna forma y por ningún procedimiento, electrónico
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Normalización de INTECO. Las observaciones a este documento dirigirlas a: (506) 2283 4522 / [email protected]
INTE/ISO 14855-1:2019
CONTENIDO PÁGINA
PRÓLOGO INTERNACIONAL ............................................................................................................ 3

PRÓLOGO .......................................................................................................................................... 4
0 INTRODUCCIÓN ......................................................................................................................... 5
1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN ........................................................................................ 6
2 NORMAS DE REFERENCIA ....................................................................................................... 6
3 TÉRMINOS Y DEFINICIONES .................................................................................................... 6
4 PRINCIPIO DEL MÉTODO .......................................................................................................... 8
5 AMBIENTE DE ENSAYO ............................................................................................................. 8
6 REACTIVOS ................................................................................................................................ 9
7 EQUIPOS ..................................................................................................................................... 9
8 PROCEDIMIENTO OPERATORIO ............................................................................................ 10
9 CÁLCULO Y EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS ................................................................. 15
10 VALIDEZ DE LOS RESULTADOS ............................................................................................ 17
11 INFORME DEL ENSAYO .......................................................................................................... 17
12 CORRESPONDENCIA .............................................................................................................. 18
ANEXO A (INFORMATIVO) PRINCIPIO DEL SISTEMA DE ENSAYO ........................................... 19
ANEXO B (INFORMATIVO) EJEMPLO DE REPRESENTACIÓN GRÁFICA DE LA EVOLUCIÓN
DEL DIÓXIDO DE CARBONO Y CURVAS DE BIODEGRADACIÓN .............................................. 21
ANEXO C (INFORMATIVO) EJEMPLO DE DETERMINACIÓN DE LA PÉRDIDA DE MASA......... 23
ANEXO D (INFORMATIVO) ENSAYO INTERLABORATORIO........................................................ 26
ANEXO E (INFORMATIVO) EJEMPLOS DE FORMULARIOS ........................................................ 27
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DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN DE INTECO AUTORIZA USO DE ESTE DOCUMENTO A Programa de las Naciones Unidas para el Desarrollo (PNUD) - Costa Rica
Copia y uso en la web prohíbido
INTE/ISO 14855-1:2019
PRÓLOGO INTERNACIONAL
ISO (Organización Internacional de Normalización) es una federación mundial de organismos
nacionales de normalización (organismos miembros de ISO). El trabajo de preparación de las normas
internacionales normalmente se realiza a través de los comités técnicos de ISO. Cada organismo
miembro interesado en una materia para la cual se haya establecido un comité técnico, tiene el
derecho de estar representado en dicho comité. Las organizaciones internacionales, públicas y
privadas, en coordinación con ISO, también participan en el trabajo. ISO colabora estrechamente
con la Comisión Electrotécnica Internacional (IEC) en todas las materias de normalización
electrotécnica.
Las normas internacionales se redactan de acuerdo con las reglas establecidas en la Parte 2 de las
Directivas ISO/IEC.
La tarea principal de los comités técnicos es preparar normas internacionales. Los proyectos de
normas internacionales adoptados por los comités técnicos se envían a los organismos miembros
para votación. La publicación como norma internacional requiere la aprobación por al menos el 75
% de los organismos miembros que emiten voto.
Se llama la atención sobre la posibilidad de que algunos de los elementos de este documento puedan
estar sujetos a derechos de patente. ISO no asume la responsabilidad por la identificación de
cualquiera o todos los derechos de patente.
La Norma ISO 14855-1 fue preparada por el Comité Técnico ISO/TC 61 Plásticos, Subcomité SC 5,
Propiedades físico-químicas.
Esta segunda edición de la Norma INTE/ISO 14855-1 anula y sustituye a la primera edición (ISO
14855-1:2005), de la cual constituye una revisión menor, que fundamentalmente pretende clarificar
la redacción del cuarto párrafo del apartado 8.1. Adicionalmente, la nota al pie del apartado 6.2
relativa a un posible suministrador de vermiculita del tipo "argamasa" se ha eliminado, puesto que
ya no es válida.
Esta segunda edición también anula y sustituye al corrigendum ISO 14855-1:2005/Cor.1:2009.
La Norma ISO 14855 consiste en las siguientes partes, bajo el título general: Determinación de la
biodegradabilidad aeróbica final de materiales plásticos en condiciones de compostaje controladas.
Método según el análisis de dióxido de carbono generado
- Parte 1: Método general.
- Parte 2: Medición gravimétrica del dióxido de carbono liberado en un ensayo de laboratorio
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INTE/ISO 14855-1:2019
PRÓLOGO NACIONAL
El Instituto de Normas Técnicas de Costa Rica, INTECO, es el Ente Nacional de Normalización,

según la Ley N° 8279 del año 2002. Organización de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya
Misión es “desarrollar la normalización del país con el soporte de los servicios de evaluación de la
conformidad y productos relacionados a nivel nacional e internacional, con un equipo humano
competente, con credibilidad e independencia”. Colabora con el sector gubernamental y apoya al
sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La
representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica está
garantizada por los Comités Técnicos y el periodo de Consulta Pública, este último caracterizado por
la participación del público en general. Esta norma ha sido desarrollada en cumplimiento de los
requisitos de nivel 1 y nivel 2 del Standards Council of Canada (SCC).
Esta norma INTE/ISO 14855-1:2019 fue aprobada por la Comisión Nacional de Normalización de
INTECO en la fecha del 2019-08-06.
Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo
momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuación se mencionan las organizaciones
que colaboraron en el estudio de esta norma a través de su participación en el Comité Técnico CTN
12 GT 04, Plásticos de un solo uso.
Participante Organización
Dirección de Gestión de Calidad Ambiental
Luis Rodríguez
(DIGECA-MINAE)
Arika Hildalgo Cámara de Industrias de Costa Rica (CICR)
Angie Ramírez, Jaime Cerdas, Asociación Costarricense de la Industria del
Erick Blanco Plástico (ACIPLAST)
Diego Richmond, Allen Arias,
ENVASA
Andrea Aguilar
Marco Pacheco
Flextech S.A
Luis Argüello
Marta Ramirez Salmapack
Diego Henriquez
Biofusión
Erick González
Jurek Krogulec Bioware
Elizabeth Gómez Eco Sunrise
Alejandro Fernandez 360 Soluciones verdes
German Gómez PEDREGAL
Roberto Chaves Auto Mercado
Programa de las Naciones Unidas para el
Juan Carlos Pinar
Desarrollo (PNUD)
Laboratorio Nacional de Nanotecnología
José Roberto Vega
(LANOTEC)
Centro de Gestión Tecnológica e Informática
Elizabeth Venegas
Industrial (CEGESTI)
Ricardo Casasola Lambda
Erick Ulate Consumidores de Costa Rica
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0 INTRODUCCIÓN
El método principal especificado en esta parte de la Norma INTE/ISO 14855 utiliza un sistema de
ensayo respirométrico de fase sólida basado en compostaje maduro usado como estrato sólido, una
fuente de nutrientes, y un inóculo rico en microorganismos termófilos. El compostaje maduro es un
material muy heterogéneo y complejo. Por tanto, puede ser difícil cuantificar el material polimérico
residual que queda en el estrato al final del ensayo, para detectar posibles moléculas de bajo peso
molecular liberadas en el estrato sólido por el material polimérico durante la degradación, y calcular
la biomasa. Como resultado, puede resultar difícil realizar un balance de carbono completo. Otra
dificultad que a veces aparece con el compostaje maduro es un "efecto de cebado": la materia
orgánica presente en grandes cantidades en el compostaje maduro puede experimentar degradación
inducida por el polímero, conocida como el "efecto de cebado", que afecta a la medición de la
biodegradabilidad.
Para superar estas dificultades y mejorar la fiabilidad del método, el compostaje maduro puede
reemplazarse por un medio mineral sólido que se usa como estrato de compostaje, facilitándose así
los análisis. Puede usarse esta variante para medir la biodegradación en términos de evolución de
CO2, para cuantificar y analizar la biomasa y los residuos de material polimérico que quedan en el
estrato sólido al final del ensayo, y para realizar un balance de carbono completo. Más aún, el método
no se ve sensiblemente afectado por el efecto de cebado y puede, por tanto, usarse para valorar
materiales conocidos por causar este problema con compostaje maduro. El estrato mineral puede
también someterse a un análisis ecotoxicológico para verificar la ausencia de cualquier actividad
ecotóxica en el sustrato tras la biodegradación.
ADVERTENCIA - Las aguas residuales, los lodos activados, la tierra y el compostaje pueden
contener organismos potencialmente patógenos. Por tanto, deberían tomarse las precauciones
adecuadas cuando se manejen. Deberían manejarse con cuidado los compuestos para ensayos
tóxicos y aquellos cuyas propiedades no se conocen.
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INTE/ISO 14855-1:2019
Determinación de la biodegradabilidad aeróbica final de materiales

plásticos en condiciones de compostaje controladas. Método
según el análisis de dióxido de carbono generado. Parte 1: Método
general.
1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN

Esta parte de la Norma INTE/ISO 14855 especifica un método para la determinación de la
biodegradabilidad aeróbica final de los plásticos, basada en compuestos orgánicos, bajo condiciones
de compostaje controladas mediante la medición de la cantidad de dióxido de carbono generado y
el grado de desintegración del plástico al final del ensayo. Este método está diseñado para simular
las condiciones de compostaje aeróbico de abono de la fracción orgánica de los residuos sólidos
mixtos municipales. El material de ensayo se expone a un inóculo derivado del compostaje. El
compostaje tiene lugar en un ambiente en el cual la temperatura, aireación y humedad están
fuertemente controladas y vigiladas. El método de ensayo está diseñado para proporcionar el
porcentaje de conversión de carbono en el material de ensayo que genere dióxido de carbono así
como la velocidad de conversión.
Los apartados 8.6 y 8.7 especifican una variante de este método, que usa un estrato mineral
(vermiculita) inoculada con microorganismos termofílicos obtenidos de compostaje con una fase de
activación específica, en lugar de compost maduro. Esta variante está diseñada para obtener el
porcentaje de carbono en la sustancia de ensayo convertido a dióxido de carbono y la velocidad de
conversión.
Las condiciones descritas en esta parte de la Norma INTE/ISO 14855 pueden no corresponderse
siempre con las condiciones óptimas para que se produzca el máximo grado de biodegradabilidad.
2 NORMAS DE REFERENCIA
Las siguientes normas contienen disposiciones que al ser citadas en este texto, constituyen
requisitos de esta norma. Las ediciones indicadas estaban en vigencia en el momento de esta
publicación. Como toda norma está sujeta a revisión, se recomienda a aquellos que realicen
acuerdos con base a ellas, que analicen la conveniencia de usar las ediciones recientes de las
normas citadas seguidamente.
ISO 5663, “Calidad del agua. Determinación del nitrógeno Kjeldahl. Método de
mineralización con selenio.”;
ISO 8245, “Calidad del agua. Guías para la determinación del carbono orgánico total (TOC)
y el carbono orgánico disuelto (DOC).”;
3 TÉRMINOS Y DEFINICIONES
Para los fines de este documento, se aplican los términos y definiciones siguientes:
3.1 biodegradabilidad aeróbica final:
descomposición de un compuesto orgánico por microorganismos en presencia de oxígeno en dióxido

de carbono, agua y sales minerales de cualquier otro elemento presente (mineralización) más nueva
biomasa.
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3.2 compostaje:
proceso aeróbico diseñado para producir compost.
Nota. El compost es un acondicionador orgánico del terreno obtenido por biodegradación de una mezcla
consistente principalmente de residuos vegetales, ocasionalmente con otro material orgánico, y que tiene un
contenido mineral limitado.
3.3 desintegración:
descomposición física de un material en muchos fragmentos pequeños.
3.4 sólidos secos totales:
cantidad de sólidos obtenidos tomando un volumen conocido de material de ensayo o compost y

secándolo a unos 105 ºC a masa constante.
3.5 sólidos volátiles:
cantidad de sólidos obtenidos restando el residuo de un volumen conocido de material de ensayo o

compost después de incineración a unos 550 ºC a partir de los sólidos secos totales de la misma
muestra.
Nota El contenido en sólidos volátiles es una indicación de la cantidad de materia orgánica presente.
3.6 cantidad teórica de dióxido de carbono generado, ThCO2:
cantidad máxima teórica de dióxido de carbono generado después de la oxidación completa de un

compuesto químico calculada a partir de su fórmula molecular y expresada en miligramos de dióxido
de carbono generado por miligramo o gramo de compuesto de ensayo.
3.7 fase de demora:
tiempo, medido en días, desde el comienzo de un ensayo hasta que se logra la adaptación y/o
selección de los microorganismos de degradación, y el grado de biodegradabilidad de un compuesto
químico o materia orgánica se ha incrementado hasta aproximadamente un 10 % del nivel máximo
de biodegradabilidad.
3.8 máximo nivel de biodegradación:
grado de degradación, medido en porcentaje, de un compuesto químico o materia orgánica en un

ensayo, sobre el que no ha tenido lugar una posterior biodegradación durante el ensayo.
3.9 fase de biodegradación:
tiempo, medido en días, desde el final de la fase de demora de un ensayo hasta que se ha alcanzado
aproximadamente un 90 % del nivel máximo de biodegradación.
3.10 fase estacionaria:
tiempo, medido en días, desde el final de la fase de biodegradación hasta el final del ensayo.
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3.11 vermiculita activada:
vermiculita colonizada por una población microbiana activa durante una fase de crecimiento
preliminar.
4 PRINCIPIO DEL MÉTODO

El método de ensayo determina la biodegradabilidad total y el grado de desintegración de un material
de ensayo bajo condiciones de simulación de un proceso de compostaje aeróbico intensivo. El
inóculo utilizado consiste en un derivado maduro de compost estabilizado, si es posible, a partir de
compostaje de la fracción orgánica de los residuos sólidos urbanos.
El material de ensayo se mezcla con el inóculo y se introduce en un recipiente de compostaje estático

donde se composta intensivamente bajo condiciones de oxígeno, temperatura y humedad óptimas
durante un período de ensayo de no más de 6 meses.
Durante la biodegradación aeróbica del material de ensayo, el dióxido de carbono, el agua, las sales
minerales y los nuevos constituyentes celulares microbianos (biomasa) son los productos finales de
la biodegradación. El dióxido de carbono generado se comprueba continuamente, o se mide en
intervalos regulares, en recipientes de ensayo y de blanco para determinar la producción acumulada
de dióxido de carbono. El porcentaje de biodegradación se da mediante la relación entre el dióxido
de carbono generado a partir del material de ensayo y la cantidad teórica máxima de dióxido de
carbono que puede producirse a partir del material de ensayo. La cantidad teórica máxima de dióxido
de carbono producida se calcula por medición del contenido de carbono orgánico total (TOC). El
porcentaje de biodegradación no incluye la cantidad de carbono convertido en nueva biomasa celular
que no es metabolizada a dióxido de carbono durante el transcurso del ensayo.
Adicionalmente, el grado de desintegración del material de ensayo se determina al final del ensayo,
y también puede determinarse la pérdida de masa del material de ensayo.
La vermiculita debería usarse en lugar del compost maduro:
a) siempre que la determinación del grado de biodegradación se vea afectada por un efecto de
cebado inducido por el material de ensayo y/o
b) cuando se lleve a cabo un balance del carbono final con la determinación de la biomasa y
recuperación del material de ensayo residual.
El estrato de vermiculita, al ser inorgánico, reduce sustancialmente el efecto de cebado, mejorando

así la fiabilidad del método. Otra ventaja del uso de vermiculita es la poquísima cantidad de dióxido
de carbono que se genera en los recipientes de blanco (casi cero), debido al bajo nivel de actividad
microbiana. Esto permite evaluar con precisión niveles de actividad de degradación bajos.
Las velocidades de mineralización obtenidas con la vermiculita activada son idénticas, o muy
similares, a las obtenidas con compost maduro, ambas en términos del nivel de degradación final y
la velocidad de degradación.
5 AMBIENTE DE ENSAYO
La incubación debe realizarse en la oscuridad o en luz difusa, en una cubierta o habitación mantenida
a una temperatura constante de 58 ºC ± 2 ºC y libre de vapores inhibidores de los microorganismos.
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En casos especiales, por ejemplo, cuando el punto de fusión del material de ensayo es bajo, puede
elegirse otra temperatura. Esta temperatura debe mantenerse constante durante el ensayo dentro
de ± 2 ºC. Cualquier cambio en la temperatura debe justificarse e indicarse claramente en el informe
del ensayo.
6 REACTIVOS
6.1 TLC (cromatografía de capa fina) grado celulosa
Se utiliza TLC (cromatografía de capa fina) grado celulosa con un tamaño de partícula de menos de
20 µm como el material de referencia de control positivo.
6.2 Vermiculita
La vermiculita es un mineral arcilloso que se usa en construcción, conocido por ser particularmente
adecuado como portador microbiano, ya que permite la supervivencia y actividad plena de los
microbios. La composición del mineral nativo, antes del tratamiento con calor, es 10 % Al203, 30 %
MgO, 5 % CaO, 50 % SiO2 y 5 % H2O combinada. Cuando se somete al mineral a tratamiento con
calor, pierde el agua combinada y se expande, dando "vermiculita expandida". Debe usarse
vermiculita expandida en forma de copos. La vermiculita expandida tiene una gran capacidad de
almacenar agua, y puede obtenerse en el estrato un contenido de agua comparable al del compost
maduro.
La vermiculita puede clasificarse en los siguientes tres tipos:
Tipo "argamasa": densidad aparente 80 kg/m3 ± 16 kg/m3 (en el momento de empaquetado del
material); tamaño de partícula: 80 % entre 12 mm y 4 mm, 2 % que pase por un tamiz de 0,5 mm.
Tipo "medio": densidad aparente 90 kg/m3 ± 16 kg/m3; tamaño de partícula: 80 % entre 6 mm y 1

mm, 2 % que pase por un tamiz de 0,5 mm.
Tipo "fino": densidad aparente 100 kg/m3 ± 20 kg/m3; tamaño de partícula: 80 % entre 3 mm y 0,7
mm, 5 % que pase por un tamiz de 0,5 mm.
Para los fines de esta parte de la Norma INTE/ISO 14855, se usa el tipo "argamasa".
7 EQUIPOS
Se comprueba que todo el material de vidrio esté completamente limpio y, en particular, libre de
materia orgánica o tóxica.
7.1 Recipientes de compostaje: frascos o botellas de vidrio que permitan una purga de gas
equilibrada en una dirección ascendente.
Se requiere un volumen mínimo de 2 l para cumplir los requisitos especificados en los apartados 8.2
y 8.3. Dependiendo del material de ensayo, puede utilizarse un volumen más pequeño para fines de
revisión. Si va a determinarse la pérdida de masa del material de ensayo, se pesa cada recipiente
de compostaje vacío.
7.2 Sistema de suministro de aire, capaz de suministrar a cada recipiente de compostaje aire seco o
saturado de agua, si es necesario libre de dióxido de carbono, a un flujo pre-fijado que debe ser
suficientemente alto como para proporcionar condiciones realmente aeróbicas durante el ensayo
(véase el ejemplo dado en el Anexo A).
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7.3 Aparatos para la determinación del dióxido de carbono, diseñados para determinar el dióxido de
carbono directamente o por absorción completa en una solución básica y determinación del carbono
inorgánico disuelto (DIC) (véase el ejemplo dado en el Anexo A). Si se mide directamente el dióxido
de carbono en el aire de salida, por ejemplo con un analizador de infrarrojos continuo o un
cromatógrafo de gases, se requiere un control exacto o medición del flujo de aire.
7.4 Tubos herméticos de aire, para conectar los recipientes de compostaje con el suministro de aire
y el sistema de medición del dióxido de carbono.
7.5 Medidor de pH
7.6 Equipo analítico, para la determinación de los sólidos secos (a 105 ºC), sólidos volátiles (a 550
ºC) y el carbono orgánico total (TOC), para el análisis elemental del material de ensayo y, si es
necesario, para la determinación del carbono inorgánico disuelto (DIC).
7.7 Balanza (opcional), para medir la masa de los recipientes de ensayo que contengan el compost
y el material de ensayo, que normalmente se encuentra en el intervalo entre 3 kg y 5 kg.
7.8 Equipo analítico (opcional), para la determinación del oxígeno del aire, humedad, ácidos grasos
volátiles y nitrógeno total (por ejemplo, mediante el método Kjeldahl como se especifica en la Norma
ISO 5663).
7.9 Biorreactores para la activación de la vermiculita: recipientes, con un volumen entre 5 l y 20 l,

que no están aireados activamente. Los contenedores se deben cerrar de modo que se evite un
secado excesivo del contenido. Sin embargo, las aberturas deben permitir el intercambio gaseoso
con la atmósfera y asegurar condiciones aeróbicas durante la fase de activación.
Un ejemplo de biorreactor adecuado consiste en una caja, de polipropileno o de cualquier otro

material adecuado, con las siguientes dimensiones, 30 cm x 20 cm x 10 cm (largo, ancho, alto). La
caja debe tener una tapa ajustable para evitar una pérdida excesiva de vapor de agua. En el medio
de las dos caras de 20 cm de ancho, se debe hacer un agujero de 5 mm de diámetro a una altura de
6,5 cm desde el fondo de la caja. Estos dos agujeros son los que permiten el intercambio de gases
entre la atmósfera de dentro de la caja y el ambiente exterior.
8 PROCEDIMIENTO OPERATORIO
8.1 Preparación del inóculo
Como inóculo debe utilizarse un compost bien aireado procedente de una planta de compostaje
aeróbico en funcionamiento. El inóculo debe ser homogéneo y libre de objetos inertes grandes como
vidrio, piedras o piezas de metal. Estos se eliminan manualmente y entonces se tamiza el compost
en una malla de unos 0,5 cm a 1 cm.
Nota 1. Se recomienda que se utilice el compost de una planta que haga compostaje de la fracción orgánica
del residuo sólido municipal o industrial para asegurar la suficiente diversidad de microorganismos. La edad del
compost debería estar preferiblemente entre 2 y 4 meses. Si no está disponible dicho compost, puede utilizarse
el compost de plantas que traten residuos de jardines o corrales o mezclas de residuos de jardín y residuos
sólidos municipales o industriales.
Nota 2. Se recomienda que se utilice compost con suficiente porosidad para permitir que se mantengan las
condiciones aeróbicas durante el mayor tiempo posible. La adición de material estructural como pequeñas
partículas de madera o material inerte o escasamente biodegradable, puede prevenir el apelmazamiento y
obstrucción del compost durante el ensayo.
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Se determina el contenido en sólidos secos totales y en sólidos volátiles del inóculo. El contenido en
sólidos secos totales debe estar entre el 50 % y el 55 % de los sólidos húmedos y los sólidos volátiles
deben ser más de aproximadamente el 15 % de los sólidos húmedos (o el 30 % de los sólidos secos).
Se ajusta el contenido de agua, si es necesario, antes de la utilización del compost mediante la
adición de agua o secado suave, por ejemplo, mediante la aireación del compost con aire seco.
Se prepara una mezcla de 1 parte de inóculo con 5 partes de agua desionizada. Se mezcla mediante
agitación y se mide el pH inmediatamente. Debe estar entre 7,0 y 9,0.
Nota 3. Para la caracterización posterior del inóculo, al principio y al final del ensayo pueden determinarse
opcionalmente parámetros tales como el contenido de carbono orgánico total, el nitrógeno total o los ácidos
grasos.
Se verifica la actividad del inóculo durante el ensayo por medio de un material biodegradable de
referencia (véase el capítulo 6) y por medio de la medición de la generación del dióxido de carbono
en los recipientes en blanco. El material de referencia debe degradarse en un 70 % o más al final del
ensayo (véase el capítulo 10). El inóculo del blanco debe producir entre 50 mg y 150 mg de dióxido
de carbono por gramo de sólidos volátiles en los primeros 10 días del ensayo (véase el capítulo 10).
Si la producción de dióxido de carbono es demasiado alta, se estabiliza el compost por aireación
durante varios días antes de utilizarlo en un nuevo ensayo. Si la actividad es demasiado baja, se
utiliza otro compost para el inóculo.
8.2 Preparación del material de ensayo y el material de referencia
Se determina el carbono orgánico total (TOC) del material de ensayo y de referencia utilizando, por
ejemplo, la Norma ISO 8245 y se anota, preferiblemente, como gramos de TOC por gramo de sólidos
secos totales. Alternativamente, siempre que el material no contenga carbono inorgánico, es posible
determinar el contenido en carbono por análisis elemental. El material de ensayo debe tener
suficiente carbono orgánico para producir dióxido de carbono en cantidad adecuada para la
determinación. Normalmente, se requiere un mínimo de 50 g de sólidos secos totales que contengan
20 g de TOC por recipiente.
Si la pérdida de masa se va a determinar, se determinan los sólidos secos totales y los sólidos
volátiles del material de ensayo.
Nota. La pérdida de masa del material de ensayo y de referencia durante el ensayo puede determinarse,
opcionalmente, como información adicional. En el ejemplo del Anexo C, el contenido en sólidos volátiles del
material de ensayo se determina al principio del ensayo y se compara con el del final del ensayo.
Se utiliza material de ensayo en forma de gránulos, polvo, película o formas simples (por ejemplo,
mancuernas). El área máxima superficial de una pieza individual de material de ensayo debe ser de
unos 2 cm x 2 cm. Si cualquier pieza en el material de ensayo original es más grande, se reduce en
tamaño.
8.3 Puesta en marcha del ensayo
Se preparan al menos el siguiente número de recipientes de compostaje (véase 7.1):
a) tres recipientes para el material de ensayo;
b) tres recipientes para el material de referencia;
c) tres recipientes para el blanco.
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La cantidad de mezcla de ensayo, que contiene el inóculo y el material de ensayo, utilizada en el

ensayo dependerá de la calidad del material de ensayo (véase 8.2) y del tamaño de los recipientes
de compostaje. La relación de la masa seca del inóculo con la masa seca del material de ensayo
debe ser de aproximadamente 6:1. Se comprueba que hay la misma cantidad de compost en cada
recipiente. El material inerte, si se añade (véase la nota 2 de 8.1), no se considera en esta relación.
Se llenan unos tres cuartos del volumen del recipiente de compostaje con la mezcla de ensayo. Se
deja suficiente espacio para permitir la agitación manual de la mezcla de ensayo.
En un caso típico, se preparan los recipientes de compostaje que tienen un volumen de unos 3 l, se
pesa una cantidad de inóculo que contenga 600 g de sólidos secos totales y una cantidad de material
de ensayo que contenga 100 g de sólidos secos y se mezcla bien. La mezcla de ensayo debe tener
el mismo contenido en agua (aproximadamente un 50 %) que el inóculo (véase 8.1). Debería sentirse
algo pegajoso y tener agua libre disponible cuando se presione suavemente con la mano. Se ajusta
el contenido de humedad de la mezcla, si es necesario, mediante adición de agua o por aireación
con aire seco. Se introduce la mezcla en los recipientes de compostaje.
Nota 1. Se recomienda que la relación entre el carbono orgánico y el nitrógeno (relación C/N) de la mezcla de
ensayo se optimice para asegurar un buen proceso de compostaje. La relación C/N para la mezcla de ensayo
debería estar preferiblemente entre 10 y 40. Si es necesario, se puede ajustar con urea. El contenido en carbono
orgánico puede calcularse a partir del TOC del inóculo y el material de ensayo. El contenido de nitrógeno total
puede medirse en una muestra representativa de la mezcla de ensayo, por ejemplo utilizando el método Kjeldahl
como se especifica en la Norma ISO 5663.
Se colocan los recipientes de compostaje en el ambiente de ensayo a 58 ºC ± 2 ºC (véase el capítulo

5) y se inicia la aireación utilizando aire saturado de agua y libre de dióxido de carbono. Esto puede
producirse mediante el paso de aire a través de botellas de lavado llenas de solución de hidróxido
sódico (véase el Anexo A).
Nota 2. Puede utilizarse aire normal, en lugar de aire libre de dióxido de carbono, si la concentración de dióxido
de carbono en el aire de salida se mide directamente. En este caso, se recomienda la medición de la
concentración de dióxido de carbono en la entrada y la salida de cada recipiente de ensayo. Para corrección,
se sustrae la concentración a la entrada de la concentración a la salida (que será mucho mayor).
Se utiliza un flujo suficientemente alto para asegurar que se mantienen las condiciones aeróbicas
durante el ensayo a través de cada recipiente de compostaje. Se comprueba el flujo de aire
regularmente en cada salida, por ejemplo, utilizando botellas de lavado, para asegurarse de que no
hay fugas en ninguna parte del sistema.
Nota 3. La medición regular de la concentración de oxígeno en el aire de salida de los recipientes de compostaje
ayudará al mantenimiento de las condiciones aeróbicas. Si se hace esto no debería permitirse que la
concentración de oxígeno llegue a bajar por debajo de aproximadamente el 6 %. Los niveles de oxígeno
deberían monitorizarse estrechamente durante la primera semana, por ejemplo mediante medición al menos
dos veces al día. Después, la frecuencia de medición puede reducirse. Se ajusta el flujo de aire como sea
necesario.
El material de referencia se maneja de la misma forma que el material de ensayo. Los recipientes
para el blanco contienen sólo el inóculo. Éste debe tener la misma cantidad de sólidos secos totales
que el de los recipientes con material de ensayo.
8.4 Periodo de incubación
Se mide la cantidad de dióxido de carbono generada a partir del aire de salida de cada recipiente de
compostaje a intervalos intermedios de tiempo, utilizando directamente un cromatógrafo de gases,
un TOC o un analizador de infrarrojos o, alternativamente, se mide el dióxido de carbono acumulado
generado como carbono inorgánico disuelto (DIC) después de absorción con solución de hidróxido
sódico utilizando por ejemplo la Norma ISO 8245 (véase el Anexo A).
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La frecuencia de medición dependerá del método de medición utilizado, la precisión deseada de la

curva de biodegradabilidad y la biodegradabilidad de la mezcla de ensayo. Si se utiliza la medición
directa, se mide el dióxido de carbono generado al menos dos veces al día a intervalos de unas 6 h
durante la fase de biodegradación y una vez al día durante la fase de estancamiento. Si se utiliza el
método acumulativo, se mide el DIC una vez al día durante la fase de biodegradación y unas dos
veces a la semana durante la fase de estancamiento.
Se agitan los recipientes de compostaje semanalmente para prevenir una amplia canalización y
asegurar un ataque uniforme de los microorganismos en el material de ensayo.
Nota 1. Se recomienda que el sistema de suministro de aire y el sistema de medición del dióxido de carbono
estén desconectados antes de agitar los recipientes de compostaje.
Se comprueba mediante observación visual que la humedad de la mezcla de ensayo en los

recipientes de compostaje no sea ni demasiado alta ni demasiado baja. No debe presentar agua libre
estancada o agrupamientos de material. Las condiciones muy secas se observan típicamente por la
ausencia de condensado en el espacio superior del recipiente de compostaje. La humedad puede
también medirse opcionalmente mediante instrumentos adecuados. En este caso, el contenido en
humedad debería mantenerse en un 50 % (véase 8.1). El contenido de humedad deseado se
consigue mediante aireación con aire seco o humidificado. Puede obtenerse un cambio más drástico
en el contenido de humedad mediante la adición de agua o mediante una vía de drenaje en la entrada
de aire. El agitado semanal de los recipientes de compostaje ayuda a asegurar una distribución
uniforme y homogénea de humedad. Si se realizan ajustes, se monitoriza estrechamente la evolución
del dióxido de carbono.
Durante la agitación semanal de los recipientes de compostaje y al final del periodo de ensayo, se
anota cualquier observación visual en relación con la apariencia del compost, tales como su
estructura, el contenido en humedad, el color, el desarrollo de hongos, olor del aire de salida y
desintegración del material de ensayo.
Se incuban los recipientes de compostaje durante un periodo que no exceda de 6 meses a una
temperatura constante de 58 ºC ± 2 ºC que es representativa del compostaje de fondo de escala. El
periodo de incubación puede extenderse hasta que se alcance una fase de estancamiento constante,
si se está observando todavía biodegradación significativa. Alter- nativamente, puede acortarse el
periodo de incubación si la fase de estancamiento se alcanza antes.
Se mide el pH a intervalos regulares, como al principio del ensayo (véase 8.1).
Nota 2. Si el pH es menor de 7,0, la biodegradación podría inhibirse debido a la acidificación del compost por
la rápida degradación de un material de ensayo fácilmente degradable. En este caso, se recomienda la medición
del espectro de los ácidos grasos volátiles para verificar la acidificación de los contenidos del recipiente de
compostaje. Si se ha formado más de 2 g de ácidos grasos volátiles por kilogramo de sólidos secos totales,
entonces el ensayo debe considerarse invalidado debido a la acidificación e inhibición de la actividad
microbiana. Para evitar la acidificación, se añade más compost a todos los recipientes o se repite el ensayo
utilizando, por ejemplo, menos material de ensayo o más compost.
8.5 Terminación del ensayo
Si la pérdida de masa del material de ensayo se va a determinar (véase la nota del apartado 8.2), se
pesan los recipientes de compostaje con su mezcla de ensayo. Se toman muestras de la mezcla de
ensayo de todos los recipientes. Se determinan los sólidos secos totales y los sólidos volátiles.
Se anota cualquier observación visual en relación con la apariencia del material de ensayo para
determinar su grado de desintegración.
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Nota. Se recomienda que las investigaciones posteriores se lleven a cabo con cualquier material de ensayo
remanente, tales como la medición de las principales propiedades físicas, análisis químico y fotografías.
8.6 Uso de vermiculita
Si se utiliza vermiculita en lugar de compostaje, se activa primero la vermiculita inoculándole una

solución que contenga nutrientes orgánicos e inorgánicos y compost maduro. La composición de la
solución de inóculo utilizado debe ser como se da en la tabla 1, 2 y 3. La relación de vermiculita y la
solución de inóculo deben ser de 1:3 (masa/volumen).
Se prepara el extracto de compost utilizado en la solución de inóculo mediante una mezcla de

compost maduro con agua desionizada (20 % masa/volumen) durante una media hora, y se filtra el
compuesto acuoso con un filtro (con un tamaño de abertura sobre 1 mm). Se puede realizar una
filtración adicional a través de un filtro de papel o por centrifugación a unas 1 000 r.p.m. durante 15
min.
Tabla 1 - Composición de 1 l de solución de inóculo
Solución de mineral Caldo nutriente Almidón de Extracto de

Componente (véase la tabla 2) apropiado Urea grano Celulosa compost
Cantidad 500 ml 13 g 5,8 g 20 g 20 g 500 ml
Tabla 2 - Composición de 1 l de solución mineral
NaCl Solución de
Sustancia CaCl2 oligoelemento
KH2P04 MgS04 (Solución al 10
química (solución al 10 %) (véase la tabla 3)
%)
Cantidad 1g 0,5 g 1 ml 1 ml 1 ml
Tabla 3 - Composición de 1 l de solución de oligoelemento
Sustancia
química H3BO3 KI FeCl3 MnSo4 (NH4)6Mo7O24 FeSO4
Cantidad 500 mg 100 mg 200 mg 400 mg 200 mg 400 mg
Se mezclan las cantidades necesarias de vermiculita y la solución de inóculo para dar una mezcla
homogénea y la mezcla se reparte en los biorreactores (sobre 1 kg de mezcla en cada uno). Se pesa
cada biorreactor con el contenido y se incuba a 50 °C ± 2 ºC durante tres/cuatro días.
Los biorreactores se pesan diariamente y, si es necesario, se vuelve al valor de masa original

mediante adición de agua con cloro libre, agua desionizada o destilada. Además, diariamente, se
mezcla el contenido de cada biorreactor con una espátula o con una cuchara ordinaria para asegurar
la aireación.
La vermiculita tratada de esta manera se denomina "vermiculita activada" y puede colocarse en los
recipientes de compostaje para utilizar como sustrato sólido en vez de un inóculo de compost maduro
(véase 8.1). Para evaluaciones normales, se utilizan 800 g de vermiculita activada en cada recipiente
de compostaje.
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Las cantidades de vermiculita activada y el material de ensayo utilizado en el ensayo dependerán

del tamaño del recipiente de compostaje. La relación entre la masa seca de la vermiculita activada y
la masa seca del material de ensayo debería ser preferiblemente sobre 4:1. Sobre la mitad del
volumen del recipiente de compostaje debería llenarse con la mezcla de ensayo. Se requiere
suficiente espacio para ser capaz de agitar manualmente la mezcla de ensayo.
Para evaluaciones normales, se utilizan recipientes de compostaje que tengan un volumen de 3 l. A

parte se pesa una cantidad de vermiculita activada correspondiente a 200 g de sólidos secos y una
cantidad de material de ensayo correspondiente a 50 g de sólidos secos, y se mezcla bien antes de
introducir la mezcla en los recipientes.
8.7 Procedimiento de recuperación y balance de carbono cuando se utiliza

vermiculita
Al final del ensayo, los estratos de vermiculita pueden extraerse para recuperar y determinar
cuantitativamente la cantidad de material de ensayo que queda y la cantidad de biodegradación por
los productos y/o biomasa que presente. El estrato en cada recipiente de compostaje puede
analizarse independientemente o unido juntando el contenido de toda la serie de recipientes de
compostaje. Se pueden utilizar los valores obtenidos para la cantidad de biomasa, la cantidad
restante de material de ensayo y la cantidad de subproductos, junto con la cantidad de carbono
generado como CO2 durante el ensayo, para realizar un balance de carbono final. La cantidad de
carbono presente en el material de ensayo original se compara con la cantidad de carbono generado
como CO2 durante el ensayo, la cantidad de carbono transformado en biomasa, y la cantidad de
carbono restante en el material de ensayo y en la degradación de subproductos, al final del ensayo.
De esta manera, es posible validar el resultado obtenido para el grado de biodegradación.
Las extracciones pueden realizarse en secuencia utilizando agua y/o disolventes orgánicos,
dependiendo de la naturaleza del material de ensayo. Para este propósito, se realizan pruebas de
solubilidad al material de ensayo para elegir el disolvente adecuado.
Los procedimientos analíticos que pueden utilizarse son la espectroscopia (IR, UV-visible, NMR,
etc.), cromatografía, análisis gravimétrico, análisis elemental, etc. Estos procedimientos pueden
aplicarse directamente a los extractos y/o a las concentraciones de los extractos. El extracto puede
ser también sometido a un ensayo ecotoxicológico.
9 CÁLCULO Y EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS
9.1 Cálculo de la cantidad teórica de dióxido de carbono
Se calcula la cantidad teórica de dióxido de carbono ThCO2, en gramos por recipiente, que puede
producirse por el material de ensayo utilizando la ecuación (1):
(1)
donde
MTOT son los sólidos secos totales, en gramos, en el material de ensayo introducido en los
recipientes de compostaje al principio del ensayo;
CTOT es la proporción de carbono orgánico total en los sólidos secos totales en el material de
ensayo, en gramos por gramo;
44 y 12 son la masa molecular del dióxido de carbono y la masa atómica del carbono,
respectivamente.
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9.2 Cálculo del porcentaje de biodegradación
A partir de la cantidad acumulada de dióxido de carbono liberada, se calcula el porcentaje de

biodegradación Dt del material de ensayo para cada intervalo de medición utilizando la ecuación (2):
(2)
donde
(CO2)T es la cantidad acumulada de dióxido de carbono generado en cada recipiente de

compostaje que contiene el material de ensayo, en gramos por recipiente;
(CO2)B es la cantidad acumulada media de dióxido de carbono generado en los recipientes del
blanco, en gramos por recipiente;
ThCO2 es la cantidad teórica de dióxido de carbono que puede producir el material de ensayo, en
gramos por recipiente.
Si las diferencias entre los resultados individuales son menores del 20 %, se calcula el porcentaje
de biodegradación medio. Si éste no es el caso, se utilizan los valores de cada recipiente de
compostaje.
Se utiliza la misma ecuación para calcular el grado de biodegradabilidad del material de referencia.
9.3 Cálculo de la pérdida de masa
En el Anexo C se da un ejemplo de los cálculos opcionales de la pérdida de masa, basado en el

contenido de sólidos volátiles.
9.4 Expresión de los resultados
Se reúnen tablas que contengan los datos de medida y cálculos en el material de ensayo, el material
de referencia y los blancos para cada día de medición. Los ejemplos de formularios para este fin se
dan en el Anexo E.
Se dibuja la cantidad acumulada de dióxido de carbono generado por cada recipiente de compostaje
conteniendo el blanco, el material de ensayo y el material de referencia como una función del tiempo
(véase el ejemplo dado en el Anexo B). Se dibuja una curva de biodegradación (porcentaje de
biodegradación como función del tiempo) para el material de ensayo y el material de referencia
(véase el ejemplo dado en el Anexo B). Se utilizan valores medios si las diferencias entre los valores
individuales son menores del 20 %. Si no es este el caso, se dibujan las curvas de biodegradación
para cada recipiente de compostaje.
Se lee el grado medio de biodegradación a partir de la fase estacionaria de la curva de

biodegradación y se anota este valor como el resultado final del ensayo.
Si el material de ensayo consiste en piezas discretas, se describe cualitativamente el grado de

desintegración del material. Se añade información adicional como fotografías o valores medidos de
las principales propiedades físicas si están disponibles.
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10 VALIDEZ DE LOS RESULTADOS

El ensayo se considera válido si
a) el grado de biodegradación del material de referencia es más del 70 % después de 45 días;
b) la diferencia entre el porcentaje de biodegradación del material de referencia en los recipientes

de compostaje es menor del 20 % al final del ensayo;
c) el inóculo en el blanco ha generado más de 50 mg pero menos de 150 mg de dióxido de carbono

por gramo de sólidos volátiles (valores medios) después de 10 días de incubación.
11 INFORME DEL ENSAYO

El informe del ensayo debe incluir toda la información pertinente, y particularmente la siguiente:
a) una referencia a esta parte de la Norma INTE/ISO 14855;
b) toda la información necesaria para identificar y describir el material de ensayo, como el contenido
de sólidos volátiles, el contenido en carbono orgánico, forma o apariencia visual;
c) cualquier información necesaria para identificar y describir el material de referencia y su

contenido en carbono orgánico;
d) el volumen de los recipientes de compostaje, la cantidad de inóculo, el material de ensayo y de

referencia, y las características principales de los equipos utilizados para determinar el dióxido
de carbono y la utilizada para determinar el carbono;
e) información del inóculo, como fuente, edad, fecha de recogida, almacenamiento, manejo,
estabilización, sólidos secos totales, sólidos volátiles, pH de la suspensión, contenido de
nitrógeno total o ácidos grasos volátiles, como sea apropiado;
f) los resultados obtenidos para el dióxido de carbono generado y el porcentaje de biodegradación

para cada recipiente de compostaje y las medias, de forma tabular y gráfica, así como el grado
final de biodegradación del material de ensayo y del material de referencia y la actividad del
inóculo (CO2 generado después de 10 días en el blanco);
g) los resultados de las observaciones visuales en el inóculo y el material de ensayo durante y al

final del ensayo, tales como el contenido de humedad, el desarrollo de hongos, estructura, color,
olor y grado de desintegración, así como las medidas físicas y/o fotografías;
h) la masa de cada recipiente de compostaje al inicio y al final del ensayo, y los detalles de cualquier
medición de pérdida de masa, si se realiza;
i) las razones para el rechazo de cualquiera de los resultados de ensayo;
j) Información de la fuente, tipo y cantidad de vermiculita utilizada (si se aplica);
k) Si se realizan, los resultados de la determinación del balance de carbono.
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12 CORRESPONDENCIA
Esta norma nacional es idéntica (IDT) a la norma internacional ISO 14855-1:2012, “Determination
of the ultimate aerobic biodegradability of plastic materials under controlled composting conditions.
Method by analysis of evolved carbon dioxide. Part 1: General method“
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ANEXO A
(INFORMATIVO)
PRINCIPIO DEL SISTEMA DE ENSAYO
El aire sintético libre de dióxido de carbono o el aire comprimido se suministra a una presión baja
constante. Si se utiliza el aire comprimido, se elimina el dióxido de carbono mediante el paso de aire
a través de un sistema de absorción de dióxido de carbono adecuado. Si se utiliza una solución de
hidróxido sódico en agua como sistema de absorción, el aire se humedece al mismo tiempo. Puede
utilizarse una segunda trampa que contenga solución de hidróxido de bario para indicar la ausencia
de dióxido de carbono.
Leyenda
1 Aire 6 Solución de NaOH
2 Aire libre de CO2 7 Sistema de eliminación de CO2
3 Aire de salida 8 Recipiente de compostaje
4 Espacio superior 9 Sistema de determinación del CO2
5 Mezcla de ensayo
Figura A.1 - Disposición del sistema de ensayo
El aire utilizado para airear la mezcla de ensayo en los recipientes de compostaje debería ser
introducida preferiblemente por la parte inferior del recipiente y distribuirse lo más uniformemente
posible. Si la biodegradación tiene lugar, el dióxido de carbono se produce y se arrastra con el aire
de salida.
El CO2 en el aire de salida puede medirse directamente, por ejemplo con un analizador de infrarrojos
continuo o un cromatógrafo de gases. En este caso, es necesaria la medición exacta del flujo de aire.
Dependiendo del instrumento de medición, puede ser necesario eliminar el agua del aire, por ejemplo
por enfriamiento. Si varios recipientes de compostaje están conectados a un único instrumento de
medición, puede necesitarse un selector adecuado de gas.
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El aire de salida procedente de cada recipiente de compostaje puede absorberse también en una
trampa de dióxido de carbono que contenga por ejemplo una solución de 20 g/l de hidróxido de
sodio en agua y el CO2 medido como carbono inorgánico disuelto (DIC), por ejemplo en un
analizador T0C adecuado (utilizando, por ejemplo, la Norma ISO 8245).
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ANEXO B
(INFORMATIVO)
EJEMPLO DE REPRESENTACIÓN GRÁFICA DE LA EVOLUCIÓN DEL
DIÓXIDO DE CARBONO Y CURVAS DE BIODEGRADACIÓN
Leyenda
X Tiempo (días)
Y Producción de CO2 (g/recipiente)
1 Material de ensayo
2 Blanco
Figura B.1 - Curva de la evolución de CO2
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Leyenda
X Tiempo (días)
Y Grado de biodegradación (%)
1 Fase de demora
2 Fase de degradación
3 Fase estacionaria
4 Grado medio de biodegradación (65 %)
Figura B.2 - Curva de biodegradación
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ANEXO C
(INFORMATIVO)
EJEMPLO DE DETERMINACIÓN DE LA PÉRDIDA DE MASA
La determinación de la pérdida de masa de la materia orgánica en un material de ensayo durante un

ensayo de compostaje puede proporcionar una información cuantitativa útil como soporte del grado
de biodegradación determinado fundamentalmente a partir de las mediciones de la evolución del
CO2. Los siguientes procedimientos dan un método de cálculo de esta pérdida a partir de la medición
de los sólidos volátiles del material de ensayo y el inóculo del compost al principio y al final del
ensayo.
Abreviaturas: com = inóculo del compost, mat = material de ensayo, mix = mezcla de material de
ensayo e inóculo, ves = recipiente de ensayo, wat = agua.
Subíndices: w = material húmedo, d = sólidos secos totales, v = sólidos volátiles, d/w = relación
entre sólidos secos totales y masa húmeda, v/d = relación entre sólidos volátiles y
sólidos secos totales, deg = material de ensayo degradado, f = recipiente de ensayo,
s = comienzo del ensayo, e = final del ensayo, y = recipiente de ensayo vacío (tara),
a = verificación de adición, add = agua añadida, B = blanco (sólo inóculo), m = mezcla
de material de ensayo e inóculo, media = valor medio.
a) Se pesa cada recipiente de ensayo vacío para obtener la tara (ves y) en gramos.
b) Se determina la masa húmeda (matw), los sólidos secos totales (matd) y los sólidos volátiles
(matv) de unos 10 g de material de ensayo y se calcula la relación entre los sólidos secos totales
y la masa húmeda (matd/w) y entre los sólidos volátiles y los sólidos secos totales (matv/d).
c) Se utiliza el valor obtenido para la masa húmeda del material de ensayo introducido en cada
recipiente de ensayo al principio del ensayo (matwfs) para calcular los sólidos volátiles totales
(matvfs) en cada recipiente de ensayo de acuerdo con la ecuación (C.1), expresando el resultado
en gramos por recipiente:
(C.1)
d) Se determina, antes de empezar el ensayo, la masa húmeda (com ws), los sólidos secos totales
(comds) y los sólidos volátiles (com vs) de unos 10 g del compost utilizado como inóculo. Se calcula
la relación entre los sólidos secos totales y la masa húmeda (com ds/ws) y entre los sólidos volátiles
y los sólidos secos totales (com vs/ds).
e) Se utiliza el valor obtenido para la masa húmeda del compost introducido en cada recipiente de
ensayo al principio del ensayo (com wfs) para calcular los sólidos volátiles totales en el compost
(comvfs) en cada recipiente de ensayo de acuerdo con la ecuación (C.2), expresando el resultado
en gramos por recipiente:
(C.2)
f) Se pesa cada recipiente de ensayo con la mezcla de ensayo de inóculo y material de ensayo y
cada recipiente de blanco que contenga sólo el compost al principio (vesms y vesBs) y al final
(vesme y vesBe) del ensayo, expresando el resultado en gramos por recipiente.
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INTE/ISO 14855-1:2019
g) Se verifica que se han añadido las cantidades correctas de material de ensayo (mat wfs), inóculo
(comwfs) y agua (watadd) a los recipientes de compostaje utilizando la ecuación (C.3) para las
mezclas de ensayo (vesam) y la ecuación (C.4) para los blancos (vesaB):
(C.3)
(C.4)
h) Para cada recipiente de ensayo, se calcula la cantidad de mezcla húmeda de material de ensayo
e inóculo remanente al final de ensayo (mix wfe) utilizando la ecuación (C.5) y para cada blanco se
calcula la cantidad de inóculo (com wBe) remanente utilizando la ecuación (C.6), expresando los
resultados en gramos por recipiente:
(C.5)
(C.6)
i) Se toman muestras representativas de unos 1O g de la mezcla de material de ensayo e inóculo a

partir de cada recipiente de ensayo al final del ensayo. Se determina la masa húmeda (mix we), los
sólidos secos totales (mixde) y los sólidos volátiles (mixve) y se calcula la relación entre los sólidos
secos totales y la masa húmeda (mixde/we) y entre los sólidos volátiles y los sólidos secos totales
(misve/de). Se utiliza el mismo procedimiento para determinar la relación entre los sólidos secos totales
y la masa húmeda (comde/we) y entre los sólidos volátiles y los sólidos secos totales (com ve/de) en los
blancos.
j) Se calculan los sólidos volátiles en cada mezcla de ensayo al final del ensayo (mix vfe) utilizando la
ecuación (C.7) y los sólidos volátiles en el compost del inóculo en cada recipiente del blanco (com vBe)
utilizando la ecuación (C.8), expresando los resultados en gramos por recipiente:
(C.7)
(C.8)
k) Se calcula el valor medio de los sólidos volátiles en los blancos al final del ensayo com vBe,mean).
l) Se calculan los sólidos volátiles en el material de ensayo en cada recipiente de ensayo al final del
ensayo (matvfe) utilizando la ecuación (C.9), expresando los resultados en gramos por recipiente:
(C.9)
m) A partir de los sólidos volátiles, se calcula la cantidad de material de ensayo degradada (mat deg)
en cada recipiente de ensayo utilizando la ecuación (C.1O), expresando los resultados en gramos
por recipiente:
(C.10)
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INTE/ISO 14855-1:2019
n) Para cada recipiente de ensayo, se calcula el porcentaje de pérdida de masa del material de
ensayo, es decir, el grado de porcentaje de biodegradación Dv calculado a partir de la pérdida de
sólidos volátiles, utilizando la ecuación (C.11):
(C.11)
o) Se calcula el valor medio Dv,mean del grado de biodegradación.
p) Se determina de la misma forma el grado de biodegradación calculado a partir de la pérdida de

masa del material de referencia, si es necesario.
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INTE/ISO 14855-1:2019
ANEXO D
(INFORMATIVO)
ENSAYO INTERLABORATORIO
Se ha llevado a cabo un ensayo interlaboratorio para validar este método. Los materiales de ensayo
utilizados fueron papel y un copolímero de poli-β-hidroxibutirato y poli-β-hidroxivalerato. Como
material de referencia se utilizó celulosa con un tamaño de partícula de menos de 20 μm. Los
resultados de ensayo y comentarios de los participantes demostraron que el método es adecuado y
practicable y proporciona resultados de ensayo de valor predictivo alto. Los resultados de ensayo se
publicaron en la referencia [6] (véase la Bibliografía)
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ANEXO E
(INFORMATIVO)
EJEMPLOS DE FORMULARIOS
Norma INTE/ISO 14855-1 Ensayo de compostaje en condiciones aeróbicas controladas –

Informe de ensayo
Material de ensayo: Material de referencia:
Origen del compost: Edad del compost:
Volumen de los recipientes de ensayo: Método de determinación del CO2:
Resultados de ensayo
Biodegradabilidad Biodegradabilidad media

media calculada a partir calculada a partir de la Duración
del CO2 generado masa de materia del ensayo Observaciones
orgánica días
% %
Material de ensayo
Material de referencia
Criterios de validez
¿Grado de biodegradación del material de referencia después de 45 días > 70 %? ○ Sí ○ No
¿Diferencia entre el porcentaje de biodegradación del material de referencia en los

diferentes recipientes al final del ensayo < 20 %? ○ Sí ○ No
¿Media de producción de CO2 en los recipientes de blanco después de 10 días en el

intervalo de 50 mg a 150 mg de CO2/g de sólidos volátiles? ○ Sí ○ No
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Norma INTE/ISO l4855-1 Ensayo de compostaje en condiciones aeróbicas controladas

Grado de biodegradación calculado a partir de la evolución del CO2
Material de ensayo/material de referencia: TOC: ___________g/g

ThCO2:_____________-g/recipiente
(CO2)B1 (CO2)B2 (CO2)B3 (CO2)B,mean (CO2)tl (CO2)t2 (CO2)t3 Dt1 Dt2 Dt3 Dt,mean
Fecha Día g/recipiente g/recipiente g/recipiente g/recipiente g/recipiente g/recipiente g/recipiente % % % %
(CO2)B = producción de CO2 acumulado medida por blanco
(CO2)t = producción de CO2 acumulado medida por material de ensayo o material de referencia a
tiempo t
Cálculos:
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INTE/ISO 14855-1:2019
Norma INTE/ISO 14855-1 Ensayo de compostaje en condiciones aeróbicas controladas

Grado de biodegradación calculada a partir de la pérdida de masa de la materia orgánica
Material de ensayo:
Material de referencia: _________________________
Material de ensayo (mat) matw (g): matd (g): matv (g): matd/w: matv/d:
Inóculo, principio (coms) comws (g): comds (g): comvs (g): comds/ws: comvs/ds:
Mezcla de ensayo, final (mixe) mixwe (g): mixde (g): mixve (g): mixde/we: mixve/de:
Inóculo, final (come) comwe (g): comde (g): comve (g): comde/we: comve/de:
Material matwfs matvfs matadd vesms vesam vesy vesme mixwfe mixvfe matvfe matdeg Dv
de ensayo g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. g/recip. %
mat 1
mat 2
mat 3
matmean
comwBs comvBs watadd vesBs vesaB vesy vesBe comwBe comvBe

Blanco g/recipient g/recipient g/recipient g/recipient g/recipient g/recipient g/recipient g/recipient g/recipient
com 1 e e e e e e e e e
com 2
com 3
commea
n
Abreviaturas: com = inóculo del compost, mat = material de ensayo, mix = mezcla de material de
ensayo e inóculo, ves = recipiente de ensayo, wat = agua.
Subíndices: w = material húmedo, d = sólidos secos totales, v = sólidos volátiles, d/w = relación entre
sólidos secos totales y masa húmeda, v/d = relación entre sólidos volátiles y sólidos secos totales,
deg = material de ensayo degradado, f = recipiente de ensayo, s = comienzo del ensayo, e = final del
ensayo, y = recipiente de ensayo vacío (tara), a = verificación de adición, add = agua añadida, B =
blanco (sólo inóculo), m = mezcla de material de ensayo e inóculo, mean = valor medio.
Se calcula el grado de degradación basado en los sólidos volátiles: Dv = mat deg x 100/matvfs
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INTE/ISO 14855-1:2019
BIBLIOGRAFÍA
[1] PESENTI-BARILI, B., FERDANI, E., MOSTI, M., DEGLI-INNOCENTI, F. Survival, F. Survival
of Agrobacterium radiobacter K84 on various carriers for crown gall control, Applied and Environ.
Microbiology, 57, pp. 2047-2051 (1991).
[2] BELLIA, G., TOSIN, M., FLORIDI, G., DEGLI-INNOCENTI, F. Activated vermiculite, a solid
bed for testing biodegradability under composting conditions, Polymer Degradation and Stability, 66.
pp. 65-79 (1999).
[3] BELLIA, G., TOSIN, M., DEGLI-INNOCENTI, F. The test method of composting in vermiculite
is unaffected by the priming effect, Polymer Degradation and Stability, 69, pp. 113-120 (2000)
[4] DEGLI-INNOCENTI, F., TOSIN, M., BELLIA, G. Degradability of plastics. Standard method
developed in Italy, Presented at the International Conference "Biodegradable Polymers. Production,
marketing, utilisation and residue management", Wolfsburg (Germany), 4-5 Sept. 2000.
[5] DEGLI-INNOCENTI, F., BELLIA, G., TOSIN, M., KAPANEN, A., ITAVAARA, M. Detection of
toxicity released by a biodegradable plastic after composting in activated vermiculite, Polymer
Degradation and Stability, 73, pp. 101-106 (2001).
[6] PAGGA, U., BEIMBORN, D.B., BOELENS, J., and DE WILDE, B., Determination of the Aerobic
Biodegradability of
Polymeric Material in a Laboratory Controlled Composting Test, Chemosphere, 31 (1995), pp.
4475-4487.
30 | 30

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Inte Iso 14855-1 2019

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B

Miembros de Fecha: 2019-08-06

PRÓLOGO INTERNACIONAL ............................................................................................................ 3

Esta segunda edición también anula y sustituye al corrigendum ISO 14855-1:2005/Cor.1:2009.

- Parte 1: Método general.

- Parte 2: Medición gravimétrica del dióxido de carbono liberado en un ensayo de laboratorio

El Instituto de Normas Técnicas de Costa Rica, INTECO, es el Ente Nacional de Normalización,

Determinación de la biodegradabilidad aeróbica final de materiales

1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN

3.1 biodegradabilidad aeróbica final:

descomposición de un compuesto orgánico por microorganismos en presencia de oxígeno en dióxido

proceso aeróbico diseñado para producir compost.

descomposición física de un material en muchos fragmentos pequeños.

3.4 sólidos secos totales:

cantidad de sólidos obtenidos tomando un volumen conocido de material de ensayo o compost y

3.5 sólidos volátiles:

cantidad de sólidos obtenidos restando el residuo de un volumen conocido de material de ensayo o

3.6 cantidad teórica de dióxido de carbono generado, ThCO2:

cantidad máxima teórica de dióxido de carbono generado después de la oxidación completa de un

3.7 fase de demora:

3.8 máximo nivel de biodegradación:

grado de degradación, medido en porcentaje, de un compuesto químico o materia orgánica en un

3.9 fase de biodegradación:

3.10 fase estacionaria:

3.11 vermiculita activada:

4 PRINCIPIO DEL MÉTODO

El material de ensayo se mezcla con el inóculo y se introduce en un recipiente de compostaje estático

La vermiculita debería usarse en lugar del compost maduro:

El estrato de vermiculita, al ser inorgánico, reduce sustancialmente el efecto de cebado, mejorando

6.1 TLC (cromatografía de capa fina) grado celulosa

La vermiculita puede clasificarse en los siguientes tres tipos:

Tipo "medio": densidad aparente 90 kg/m3 ± 16 kg/m3; tamaño de partícula: 80 % entre 6 mm y 1

7.9 Biorreactores para la activación de la vermiculita: recipientes, con un volumen entre 5 l y 20 l,

Un ejemplo de biorreactor adecuado consiste en una caja, de polipropileno o de cualquier otro

8.1 Preparación del inóculo

8.2 Preparación del material de ensayo y el material de referencia

8.3 Puesta en marcha del ensayo

Se preparan al menos el siguiente número de recipientes de compostaje (véase 7.1):

a) tres recipientes para el material de ensayo;

b) tres recipientes para el material de referencia;

c) tres recipientes para el blanco.

La cantidad de mezcla de ensayo, que contiene el inóculo y el material de ensayo, utilizada en el

Se colocan los recipientes de compostaje en el ambiente de ensayo a 58 ºC ± 2 ºC (véase el capítulo

8.4 Periodo de incubación

La frecuencia de medición dependerá del método de medición utilizado, la precisión deseada de la

Se comprueba mediante observación visual que la humedad de la mezcla de ensayo en los

Se mide el pH a intervalos regulares, como al principio del ensayo (véase 8.1).

8.5 Terminación del ensayo

8.6 Uso de vermiculita

Si se utiliza vermiculita en lugar de compostaje, se activa primero la vermiculita inoculándole una

Se prepara el extracto de compost utilizado en la solución de inóculo mediante una mezcla de

Tabla 1 - Composición de 1 l de solución de inóculo

Solución de mineral Caldo nutriente Almidón de Extracto de

Cantidad 500 ml 13 g 5,8 g 20 g 20 g 500 ml

Tabla 2 - Composición de 1 l de solución mineral

Tabla 3 - Composición de 1 l de solución de oligoelemento

Los biorreactores se pesan diariamente y, si es necesario, se vuelve al valor de masa original

Las cantidades de vermiculita activada y el material de ensayo utilizado en el ensayo dependerán

Para evaluaciones normales, se utilizan recipientes de compostaje que tengan un volumen de 3 l. A