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    Practica 8 Bioquimica

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    Roberto Osollo
    Este documento presenta dos experimentos sobre las propiedades químicas de las proteínas. El primero determinó el punto isoeléctrico de la albumina mediante precipitación en tubos con diferentes concentraciones de acetato de sodio y ácido acético. El segundo evaluó la solubilidad de la albumina en presencia de sales como NaCl, ZnSO4 y Zn(C2H3CO2)2 midiendo precipitación. Los resultados mostraron que la albumina precipitó a pH 4.16, su punto isoeléctrico. Las sales afectaron diferencialmente la

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    Practica 8 Bioquimica

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    Este documento presenta dos experimentos sobre las propiedades químicas de las proteínas. El primero determinó el punto isoeléctrico de la albumina mediante precipitación en tubos con diferentes concentraciones de acetato de sodio y ácido acético. El segundo evaluó la solubilidad de la albumina en presencia de sales como NaCl, ZnSO4 y Zn(C2H3CO2)2 midiendo precipitación. Los resultados mostraron que la albumina precipitó a pH 4.16, su punto isoeléctrico. Las sales afectaron diferencialmente la

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    Practica 8 bioquimica (1)

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    Este documento presenta dos experimentos sobre las propiedades químicas de las proteínas. El primero determinó el punto isoeléctrico de la albumina mediante precipitación en tubos con diferentes concentraciones de acetato de sodio y ácido acético. El segundo evaluó la solubilidad de la albumina en presencia de sales como NaCl, ZnSO4 y Zn(C2H3CO2)2 midiendo precipitación. Los resultados mostraron que la albumina precipitó a pH 4.16, su punto isoeléctrico. Las sales afectaron diferencialmente la

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    Este documento presenta dos experimentos sobre las propiedades químicas de las proteínas. El primero determinó el punto isoeléctrico de la albumina mediante precipitación en tubos con diferentes concentraciones de acetato de sodio y ácido acético. El segundo evaluó la solubilidad de la albumina en presencia de sales como NaCl, ZnSO4 y Zn(C2H3CO2)2 midiendo precipitación. Los resultados mostraron que la albumina precipitó a pH 4.16, su punto isoeléctrico. Las sales afectaron diferencialmente la

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    Práctica #8: Propiedades químicas de las proteínas

    UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ – INSTITUTO DE CIENCIAS BIOMÉDICAS


    Licenciatura en Química – Laboratorio de Bioquímica
    Laura Alejandra De La Rosa Carrillo.

    José Gabriel Acosta Espinoza-205081


    Roberto Armando Osollo Morales-194764
    Sebastián García Parra-203398
    Eduardo López García-195724

    Palabras clave: Disociación, Aminoácidos, Asimetría.

    Objetivos: Comprobar el efecto del pH, naturaleza y concentración de los iones, sobre la solubilidad de las proteínas;
    y determinar punto Isoeléctrico mediante precipitación.
    Introducción:
    Funciones de las proteínas (mencionarlas y detallar un poco),
    factores que afectan a las proteínas en disoluciones (a) pH, b) fuerza iónica, c) propiedades dieléctricas del disolvente, y d) la
    temperatura.),
    precipitación isoeléctrica, solubilización y precipitación por salado

    Metodología.
    Experimento 1: Determinación del punto isoeléctrico de la albumina por precipitación

    Se prepararon 2 series de tubos (10) los cuales contuvieron acetato de sodio a 0.1N, ácido acético a 0.1N y ácido
    acético a 0.01N como se muestra en la tabla 1:
    Tabla 1: concentración en volumen de las sustancias agregadas a los tubos de ensayo
    Tubo Acetato de sodio 0.1N Ácido acético 0.1N Ácido acético 0.01N
    1 0.5 9.5 -
    2 1 9 -
    3 1.5 8.5 -
    4 2 8 -
    5 3 7 -
    6 4 6 -
    7 6 4 -
    8 8 2 -
    9 6 - 4
    10 8 - 2

    Posteriormente a la preparación de los tubos de ensayo fue agregado 1 mL de albumina a 10%.


    Se mezclo hasta lograr observar cambios, se determinó si es que en estos existió precipitado y en qué cantidad.
    Conforme a las concentraciones de ácido y base que se mostraron en la tabla 1 se determinó la cantidad de pH en
    cada tubo.
    Estos 2 datos anteriores se introdujeron en la tabla 3.

    Experimento 2: Solubilidad y precipitación por sales


    Se prepararon 9 tubos de ensayo como se muestra en la tabla 2
    Tabla 2: Concentraciones de sales con agua.
    Tubo NaCl 10 % ZnSO4 10 % Co(CH3COO)210% H2O
    1 1 - - -
    2 0.5 - - 0.5
    3 0.1 - - 0.1
    4 - 1 - -
    5 - 0.5 - 0.5
    6 - 0.1 - 0.1
    7 - - 1 -
    8 - - 0.5 0.5
    9 - - 0.1 0.1

    Terminada la preparación de los tubos, se les agrego a cada uno 1 mL de albumina al 10%.
    Se agitaron y se dio observación esperando cambios.
    Pasado el tiempo, se observo un precipitado, con ello se determino un porcentaje de solubilidad en base a las
    observaciones.
    Terminadas las observaciones, fue calculada la fuerza iónica de cada tubo además de proporcionar su porcentaje de
    solubilidad en la tabla 4.

    Resultados

    Experimento 1: Determinación del punto isoeléctrico por medición de ácido que en este caso se presentaron
    ciertos cambios determinados en cada tubo como lo muestran la siguiente tabla No. 3 e imagen.
    Tabla 3. Características observadas en los tubos durante la prueba de determinación de solubilidad.
    Tubo Acetato de sodio Ácido Acético Ácido Acético pH Precipitación
    0.1 M 0.1 M 0.0
    1 0.5 9.5 3.48 +
    2 1 9 3.81 ++
    3 1.5 8.5 4.01 ++
    4 2 8 4.16 +++
    5 3 7 4.39 ++
    6 4 6 4.58 +
    7 6 4 4.94 -
    8 8 2 5.36 -
    9 6 4 5.94 -
    10 8 2 6.36 -
    pk 4.76
    PH=pi= 4.16

    Imagen 1. Diferentes volúmenes y concentraciones en cada tubo presente 1 al 7 presenta visibilidad transparente la
    mayoría representa diferentes porcentajes como se muestran en la tabla 3.

    Experimento 2. Solubilización y precipitación por sales. al igual en este experimento se observó el cambio de
    coloración y se sacó tanto el porcentaje de solubilidad y de precipitado, peso molecular y fuerza iónica como lo
    muestra la tabla.

    Tabla 4. Resultados experimento 2.


    Adjuntando tabla de Excel.

    Imagen 2. Tubos en concentraciones de sales con diferentes precipitados y pigmentación cada uno de ellos.

    Imagen 3. Fuerza iónica de Zn (CH3COO)2.

    Imagen 4. Calibración de fuerza iónica del ZnSO4


    Imagen 5. Calibración de fuerza iónica del NaCl

    Discusión:
    El punto isoeléctrico del albuminato de sodio teóricamente es de 4.16 y el pKa del acetato de sodio y ácido acético
    es de 4.76. En teoría el albuminato de sodio debería haber precipitado en todos los tubos sino es que en la mayoría
    de ellos ya que el punto isoeléctrico es un pH en el cual una proteína o aminoácido se vuelve totalmente soluble, por
    tanto, considerando el pKa del ácido acético y el acetato de sodio, el albuminato seria insoluble a ese pH por lo cual
    se debería de tener un precipitado.

    La razón por la cual el precipitado no se observo es debido a las concentraciones de ácido acético y acetato de sodio,
    que resultan ser muy bajas. En la prueba de solubilidad para la albumina se observó precipitado en los tubos de
    ensayo que contenían ZnSO4 y Zn(C2H3CO2)2 , esto posiblemente por la similitud de un elemento entre estos
    compuestos, el Zinc. Sin embargo, también tienen que ver las interacciones de los aniones en estos dos distintos
    compuestos, en los tubos de ensayo con ZnSO4 precipitaron todas las soluciones, esto debido a que el ion sulfato es
    menos afín con el agua, debido a que interfiere el azufre en dicha interacción, mientras que el ion acetato es más afín
    con el agua y tiene la capacidad de formar puentes de hidrogeno.

    En uno de los tubos que contenía Zn(C2H3CO2)2 marcado con el numero 7,8 y 9 no se notó precipitado, pero si una
    turbidez, esto pudo haber pasado porque falto agitación al tubo. En el caso de la prueba donde se adiciono NaCl al
    10% pudo ser que el cloro interfiriera ya que este se ioniza muy fácilmente en agua, debido a que es un electrolito,
    y por lo tanto interfiere en las interacciones electrostáticas de las proteínas o aminoácidos.

    Conclusiones:
    Durante el precipitado del experimento 1 se puede observar que al tener una cantidad mayor de acetato de sodio este
    diluye por completo la albumina por lo que esta no genera precipitados además que se muestra cómo es que el pH
    aumenta en relación a esto. La concentración del ácido acético crea precipitado en grandes cantidades, en cuestión
    al estar en un estado de equilibrio de la albumina que es cuando la albumina tiene una carga en cero, como se muestro
    en la tabla de resultados la pka correspondió a 4.16.
    Durante el experimento 2 se logra observar que el NaCl interacciona con el H2O, ya que el NaCl tiene una carga
    positiva en este caso el sodio, y el oxígeno al ser negativo se da una reacción en la que se desprotona, perdiendo H y
    adhiriendo el Na a su composición dando un resultado de NaOH
    Bibliografía:

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