QUÍMICA ANALÍTICA APLICADA

GUÍA DE EJERCICIOS
Ing. Leandro Santos
Ing. Macarena
Echeverría
Facultad Regional Buenos Aires
Universidad Tecnológica Nacional
TABLAS ESTADÍSTICAS
Valores de t para distintos niveles de confianza
DISTRIBUCIÓN t DE STUDENT g Niveles de confianza
80% 90% 95% 99% 99.9%
g = Grados de libertad 1 3.08 6.31 12.7 63.7 637
2 1.89 2.92 4.30 9.92 31.6
3 1.64 2.35 3.18 5.84 12.9
4 1.53 2.13 2.78 4.60 8.60
5 1.48 2.02 2.57 4.03 6.86
6 1.44 1.94 2.45 3.71 5.96
7 1.42 1.90 2.36 3.50 5.40
8 1.40 1.86 2.31 3.36 5.04
9 1.38 1.83 2.26 3.25 4.78
10 1.37 1.81 2.23 3.17 4.59
11 1.36 1.80 2.20 3.11 4.44
12 1.36 1.78 2.18 3.06 4.32
13 1.35 1.77 2.16 3.01 4.22
14 1.34 1.76 2.14 2.98 4.14
∞ 1.29 1.64 1.96 2.58 3.29

PRUEBAS ESTADÍSTICAS PARA EVALUAR VALORES ANÓMALOS (OUTLIERS)

Valores críticos de Q
PRUEBA Q DE DIXON N Niveles de confianza
90% 95% 99%
N = Número de observaciones 3 0.941 0.970 0.994
4 0.765 0.829 0.926
5 0.642 0.710 0.821
6 0.560 0.625 0.740
7 0.507 0.568 0.680
8 0.468 0.526 0.634
9 0.437 0.493 0.598
10 0.412 0.466 0.568

Valores críticos de T
PRUEBA DE GRUBBS N Niveles de confianza
90% 95% 99%
N = Número de observaciones 3 1.15 1.15 1.15
4 1.46 1.48 1.49
5 1.67 1.71 1.75
6 1.82 1.89 1.94
7 1.94 2.02 2.10
8 2.03 2.13 2.22
9 2.11 2.21 2.32
10 2.18 2.29 2.41
UV-VIS
LEY DE BOUGUER- LAMBERT-BEER
1) Completar la tabla siguiente, teniendo en cuenta que M analito = 200 g/mol.
A %T  b (cm) c (M) c (ppm) a (cm-1 ppm-1)

0,771 4,33 x 103 1,00

2,68 x 104 2,00 6,66 x 10-4

64,3 1,00 0,104

20,4 4,13 x 103 1,55 x 10-4

ESPECTROS DE ABSORCIÓN - ELECCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA DE MEDICIÓN

2) Los iones dicromato y permanganato presentan los siguientes espectros de absorción:

Decidir qué longitud o longitudes de onda elegiría para cuantificar:

a) Una solución de permanganato de potasio.

b) Una solución de dicromato de potasio.
c) Una solución mezcla de ambos.

3) Si un material absorbente se ve de un determinado color por reflexión o transmisión de la luz

blanca, ello indica que absorbe radiación con mayor intensidad en la zona del espectro
correspondiente al color complementario.
Por ejemplo, el ión Cr2O72- en solución acuosa se ve naranja (rojo+amarillo), porque absorbe con
mayor intensidad en la región del azul.
Pero el ión CrO42-, también cromo(VI), en solución acuosa se ve amarillo, porque absorbe con mayor
intensidad en la región del violeta (azul+rojo).
¿Cuál es el color de una solución:
a) que presenta un máximo de absorción en 526 nm?
b) que presenta un máximo de absorción en 19000 cm-1 (unidades utilizadas en IR)?
c) que presenta un máximo de absorción en 372 nm = 3720 Å?
d) que presenta el espectro de absorción de la figura siguiente?
ESPECTROS DE ABSORCIÓN - ELECCIÓN DEL ANCHO DE BANDA INSTRUMENTAL

4) Dado el siguiente espectro de absorción, indique con cuál ancho de banda instrumental (AA*, BB*
o CC*) se obtiene:

a) Mejor detalle de la estructura fina del espectro de absorción.

b) Mayor sensibilidad.

CUANTIFICACIÓN - MÉTODO DE LA CURVA DE CALIBRACIÓN CON PATRÓN EXTERNO

5) Se quiere determinar el contenido de permanganato de potasio en una muestra. Para ello se

preparan patrones de permanganato a partir de solución de permanganato 10,0 ppm, y se miden a
520 nm, obteniéndose los valores de la tabla siguiente.

Patrón N° V patrón KMnO4 (mL) Volumen matraz (mL) Absorbancia

Blanco 0,00 50,00 0,000
1 5,00 50,00 0,066
2 10,00 50,00 0,133
3 15,00 50,00 0,210
4 20,00 50,00 0,277
5 25,00 50,00 0,346

a) Graficar la curva de calibración

b) Obtenga la pendiente (ab) y la ordenada al origen por regresión lineal.

De una muestra que contiene permanganato de potasio se tomó una alícuota de 25,00 mL, se llevó
a 250,0 mL en un matraz aforado y se repitió la misma dilución de 25,00 mL en 250,0 mL. Se tomó
una alícuota de 10,00 mL y se transfirió una porción de esta alícuota a una celda de similar a la
utilizada para medir los patrones y se obtuvo una lectura de 0,251 unidades de absorbancia.

c) Calcule la concentración molar del ión permanganato en la muestra.

CUANTIFICACIÓN - MEZCLA DE DOS ANALITOS CON ESPECTROS POCO SUPERPUESTOS

6) Se quiere determinar la concentración de dos sales, Co(NO 3) 2 y Cr(NO3) 2 en una muestra acuosa.
Para ello se realizaron las siguientes mediciones.

A
 (nm) Blanco Co(NO3)2 0,150M Cr(NO3)2 0,0600M Muestra
510 0,000 0,719 0,304 0,406
575 0,000 0,010 0,580 0,582

Calcular la concentración molar de cada sal en la muestra.

CUANTIFICACIÓN - MEZCLA DE DOS ANALITOS CON ESPECTROS MUY SUPERPUESTOS

7) A partir de los siguientes datos, calcular la concentración de Ti (IV) y V (V) en la muestra.

 (nm) A (Ti4+ 1,32 M) A (V5+ 1,89 M) A (mezcla)
390 0,895 0,326 0,651
430 0,880 0,497 0,743
450 0,694 0,528 0,665
470 0,481 0,512 0,547
510 0,173 0,374 0,314

CUANTIFICACIÓN - REACTIVOS FORMADORES DE COLOR

8) En la determinación de urea en suero, la urea se transforma en NH 3 por acción de la enzima

ureasa, según la reacción:
CO (NH 2) 2 + H2O → CO2 + NH3
El NH3 se hace reaccionar con hipoclorito de sodio y fenol para dar azul de indofenol, que presenta
un máximo de absorción a 540 nm.
A 20 µl de suero se le agrega la ureasa, se incuba el tiempo necesario para producir la hidrólisis, se
agregan los reactivos necesarios y se lleva a 10,0 ml con agua destilada.
Paralelamente se prepara una serie de patrones, colocando en cuatro tubos, de ensayo las
siguientes cantidades .de una solución de 70,0 ppm de (NH 4)2S04 y añadiendo luego los mismos
reactivos, con excepción de la ureasa:
Blanco Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
0,000 ml 0,100 ml 0,200 ml 0,300 ml
Se lee en espectrofotómetro a 540 nm, llevando a 0,000 A con el blanco, obteniéndose las
siguientes lecturas:
Muestra Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
0,131 0,061 0,123 0,180

Calcular la concentración de urea en el suero, expresándola en g/l.

PM CO (NH2) 2 PM (NH4)2S04
60,00 132,0
9) Se mide la absorbancia de distintas concentraciones de hierro (II) complejado con 1,10 -
fenantrolina a 510 nm, obteniendose los siguientes resultados.
C hierro (II) (ppm) Absorbancia
0,00 0,000
2,00 0,164
5,00 0,425
8,00 0,628
12,00 0,951
16,00 1,260
20,00 1,582
a) Construir la curva de calibración.
b) Obtenga la ecuación de A vs concentración de hierro por regresión lineal.
c) Se tiene 3 soluciones cuyas lecturas de absorbancia son 0,100 - 0,500 -1,000. Calcular la
concentracion de las tres soluciones en ppm de hierro.
DETERMINACIÓN DE CONSTANTES DE EQUILIBRIO
10) Un complejo CuX22+ tiene un máximo de absorción a 575 nm:
Se realizaron las siguientes experiencias:

Concentración analítica (mol L-1) Absorbancia

Cu2+ X-
-5
3,0 x 10 2,0 x 10-2 0,675
3,0 x 10-5 2,0 x 10-3 0,675
-5
3,0 x 10 2,0 x 10-4 0,366
Calcule la constante de formación Kf del complejo CuX22+.

11) Porciones de un milimol de un ácido débil HA y su sal NaA, se disuelven en volúmenes de un

litro de diversas soluciones reguladoras. Las absorbancias de las soluciones resultantes a 650 nm y
en una celda de 2.00 cm son:
pH 12,00 10,00 7,00 2,00 1,00
Absorbancia 0,950 0,950 0,677 0,000 0,000
Calcule las absortividades molares de HA y de A- y la constante de disociación del ácido.
12) Se preparó una solución 1,00 x 10 -3 M de una amina RNH2 y se midió su absorbancia a max, a
diferentes valores de pH.
pH 1,00 2,00 7,00 12,00 13,00
A 0,550 0,550 0,420 0,250 0,250
Calcular el pKb de la base.
TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LAS CURVAS DE CALIBRACIÓN
MÉTODO DEL PATRÓN EXTERNO
13) En base a los siguientes datos experimentales:
C (µg/ml) 0.00 x 100 2.00 x 100 4.00 x 100 6.00 x 100 8.00 x 100 1.00 x 101 1.20 x 101
A 2.10 x 10-2 5.00 x 10-2 9.00 x 10-2 1.26 x 10-1 1.73 x 10-1 2.10 x 10-1 2.47 x 10-1

a) Representar gráficamente la curva de calibración.

b) Calcular los parámetros r, b, a, sy/x, sb y sa.

c) Obtener la recta de regresión lineal y = a +bx

Si se midieron 3 muestras cuyas absorbancia son respectivamente 2.90 x10-2,
1.35 x10-1 y 2.30 x10-1;
e) Calcular los parámetros x0 y sx0.

f) Expresar las concentraciones de dichas muestras como intervalos de confianza del 95%.
AAS

ABSORCIÓN ATÓMICA - CURVA DE CALIBRACIÓN CON PATRÓN EXTERNO

1) Para asegurar la prevención de riesgos y protección de la salud de los trabajadores por la
presencia de plomo metálico y sus compuestos iónicos en el ambiente de trabajo, los niveles de
plomo en sangre deben ser inferiores a (40 ± 6) µg/100 ml con un nivel de confianza del 95%.
Una alícuota de 1.00 ml de sangre se recoge en un tubo de polietileno conteniendo EDTA-K 2 como
anticoagulante, luego se diluye a 10.0 ml en un matraz y se mide por absorción atómica con lámpara
de plomo a 283.3 nm.
a) Obtener la ecuación de la curva de calibración correspondiente, por regresión lineal.
b) Determinar si el contenido de plomo en sangre de la muestra es inferior o superior al nivel
permitido.
Soluciones Absorbancia
Patrón 0.00 µg de Pb/100 ml 0.000
Patrón 20.0 µg de Pb/100 ml 0.097
Patrón 40.0 µg de Pb/100 ml 0.199
Patrón 80.0 µg de Pb/100 ml 0.405
Patrón 160 µg de Pb/100 ml 0.818
Muestra 0.147

ABSORCIÓN ATÓMICA - MÉTODO DEL AGREGADO PATRÓN

2) Para la determinación de cobre en cervezas mediante espectroscopía de absorción atómica, se
utiliza el método de adiciones estándar. Para ello se toma una muestra de cerveza desgasificada y
se preparan 5 estándares por adición sucesiva diversas cantidades de cobre sobre un volumen final
de 25.00 ml de cerveza, de forma que se tienen las siguientes disoluciones y las correspondientes
lecturas de absorbancia:

Soluciones Absorbancia
Muestra + 0.000 ppm de cobre 0.070
Muestra + 0.200 ppm de cobre 0.177
Muestra + 0.400 ppm de cobre 0.275
Muestra + 0.600 ppm de cobre 0.376
Muestra + 0.800 ppm de cobre 0.481
a) Obtener la ecuación de la curva de calibración por el método del agregado patrón, por regresión
lineal.
b) Calcular la concentración de cobre en la muestra de cerveza.
3) Una muestra que contiene el elemento X se mezcló con alícuotas de una solución patrón del
elemento X y se determinó el mismo por AA. La concentración del patrón es 800.0 µg/ml de solución.
Se obtuvieron los siguientes resultados:
V muestra (ml) V solución patrón (ml) V total (ml) Absorbancia
10.00 0.00 100.0 0.164
10.00 1.00 100.0 0.242
10.00 2.00 100.0 0.321
10.00 3.00 100.0 0.405
10.00 4.00 100.0 0.482
a) Obtener la ecuación de la curva de calibración por el método del agregado patrón, por regresión
lineal.
b) Calcule la concentración de X en la muestra.
4) Se quiere determinar la concentración del elemento X en una muestra. Con tal propósito, se
prepara una solución madre que contiene 10.0 mg del elemento X en 100.0 ml de solución y
posteriormente, se realizan las siguientes diluciones.
Dilución V solución madre (ml) V agua (ml)
D1 8.0 94.0
D2 15.0 85.0
D3 30.0 70.0
Luego, se mezclan dichas soluciones con muestras que contienen X, se miden en AA a la longitud
de onda adecuada y se obtienen los siguientes resultados.
Muestra (ml) V D1 (ml) V D2 (ml) V D3 (ml) V agua (ml) Absorbancia
50.0 0.0 0.0 0.0 50.0 0.365
50.0 50.0 0.0 0.0 0.0 0.721
50.0 0.0 50.0 0.0 0.0 1.077
50.0 0.0 0.0 50.0 0.0 1.626

a) Obtener la ecuación de la curva de calibración por el método del agregado patrón, por regresión
lineal.
b) Calcule la concentración de X en la muestra en la muestra original, expresada en mg/litro.

ABSORCIÓN ATÓMICA - MEZCLA DE DOS COMPONENTES Y AGREGADO PATRÓN

5) Se desea conocer las concentraciones de oro y platino en una muestra, por AA. Se pesa 98.270 g
de la muestra y se somete a disgregación y extracción, luego se filtra y se lleva el filtrado a 500.0
mL. Se toman 3 alícuotas de 10.00 mL y se colocan en matraces de 50.00 mL junto con el agregado
de patrones de 50.00 ppm de ambos elementos –ver tabla- se lleva a volumen y se mide a 1 y 2.

Muestra Au 50 ppm (mL) Pt 50 ppm (mL) A (1) A (2)

0 0.00 0.00 0.185 0.315
1 1.00 1.00 0.276 0.543
2 2.00 2.00 0.366 0.773
a) Obtener la ecuación de la curva de calibración por regresión lineal, para cada componente.
b) Calcule el % m/m de cada componente en la muestra.
TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LAS CURVAS DE CALIBRACIÓN
MÉTODO DEL AGREGADO PATRÓN
6) La concentración de plata en una muestra, se determinó por espectrometría de absorción atómica
con el método de agregado patrón, obteniendo los siguientes resultados.
C patrón (µg/ml) 0.00 x 100 5.00 x 100 1.00 x 101 1.50 x 101 2.00 x 101 2.50 x 101 3.00 x 101
A 3.20 x 10-1 4.10 x 10-1 5.20 x 10-1 6.00 x 10-1 7.00 x 10-1 7.70 x 10-1 8.90 x 10-1

a) Representar gráficamente A vs C.
b) Calcular los parámetros r, b, a, sy/x, sb y sa.

c) Obtener la recta de regresión lineal y = a +bx

d) Expresar las concentraciones de dichas muestras como intervalos de confianza del 95%.
ICP - AES
1) Una serie de patrones de potasio da las siguientes intensidades de emisión a 404,3 nm. Hallar la
concentración de potasio de la muestra problema.

Emisión relativa
Blanco 0,00
5,00 µg K/ml 124
10,00 µg K/ml 243
20,00 µg K/ml 486
30,00 µg K/ml 712
Muestra 417

2) Se determina litio por emisión atómica usando el método de agregado patrón. El patrón de litio
contiene 1,62 µg/ml. Calcular el contenido de litio en la muestra.

muestra (ml) patrón (ml) volumen final (ml) intensidad de emision (UA)
10,00 0,00 100,0 309
10,00 5,00 100,0 452
10,00 10,00 100,0 600
10,00 15,00 100,0 765
10,00 20,00 100,0 906

3) Con el objeto de determinar plomo en dos muestras acuosas A y B, se preparan 5 soluciones

patrón de plomo. Las disoluciones de muestra y los patrones se preparan con idéntica concentración
de magnesio utilizado como patrón interno. Calcular las concentraciones de plomo en ambas
muestras.

señal de emisión (UA) señal Mg (UA)

0,10 mg Pb/l 13,86 11,88
0,12 mg Pb/l 23,49 11,76
0,30 mg Pb/l 33,81 12,24
0,40 mg Pb/l 44,50 12,00
0,50 mg Pb/l 53,63 12,12
muestra A 15,50 11,80
muestra B 42,60 12,40

4) La determinación de sodio y potasio en sangre o suero por emisión de llama se complica debido a
la inestabilidad de la llama y a la complejidad de la matriz. Una manera de evitar estos problemas es
agregar un exceso de litio que sirve a la vez como supresor de la ionización y estandar interno
(puesto que la emisión de litio responde igual que sodio y potasio en la llama. Se realizaron curvas
de calibración para estos dos elementos y los datos de calibración fueron los siguientes:
 concentración (ppm) señal relativa a Na 1,0 ppm
Na K Li Na K Li
0,5 0,5 500 0,43 0,57 31,2
1,0 1,0 500 1,00 1,25 36,3
5,0 5,0 500 4,9 6,4 36,2
10,0 10,0 500 8,8 11,7 31,7

Una muestra de 10,0 µl de sangre se diluyen en 1,00 ml de solución de litio de 5000 ppm. Después,
se vuelve a diluir con agua hasta 10,00 ml y se inyecta al espectrómetro. Las lecturas obtenidas
fueron:
Na 2,9 - K menor al límite de detección - Li 32,5
Se tomó una segunda muestra de 10,0 µl y se diluyó a 2,00 ml con una solución de Li de 500 ppm.
Las lecturas fueron:
Na 13,6 - K 1,34 - Li 30,4
¿Cuáles son las concentraciones séricas de Na y K expresadas en mM? Suponga que Na y K no
interfieren mutuamente.
5) Se determinó cromo en una serie de muestras de acero mediante espectroscopía de emisión de
plasma acoplado por inducción. Los datos de calibración fueron los siguientes:

µg K2Cr2O7/ml Emisión relativa

Blanco 3,1
2,00 21,5
4,00 40,9
6,00 57,1
8,00 77,3

a) Grafique los datos en una hoja de cálculo

b) Determine la ecuación de la recta de regresión
c) Calcule las desviaciones estándar de la pendiente y la ordenada al origen.
d) Los datos siguientes se obtuvieron al reproducir muestras de 1,00 g de cemento en HCl y diluído
a 100,0 ml después de la neutralización. Calcule el porcentaje de Cr2O3 en cada muestra, junto a
sus correspondientes desviaciones estándar.

lecturas de emisión
blanco muestra A muestra B muestra C
réplica 1 5,1 28,6 40,7 73,1
réplica 2 4,8 28,2 41,2 72,1
réplica 3 4,9 28,9 40,2 derramada

6) Se puede determinar oro en soluciones que contienen altas concentraciones de diversos iones,
por ICP. Se transfirieron alícuotas de 50,0 ml de la muestra a 4 matraces de 100,0 ml. Se preparó
una solución que contenía 10,0 mg/l de Au en H2SO4 al 20% y ciertas cantidades de ellas se
añadieron a las soluciones de muestra para obtener:
0,0 mg/l - 2,5 mg/l - 10 mg/l
de Au añadido en cada matraz. Se llevaron a volumen, se mezclaron y se analizaron obteniendo lo
siguiente:

mg Au añadido/l Intensidad
0,0 12568
2,5 19324
5,0 26622
10,0 40021

Calcular la concentración de Au en la muestra.

CROMATOGRAFÍA GENERAL

PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS

1) En un análisis cromatográfico de ácidos carboxílicos de bajo peso molecular, el ácido butírico

eluye con un tiempo de retención de 7,63 min. El tiempo muerto de la columna es de 0,31 min.
Calcule el factor de capacidad para el ácido butírico.
*
t (BUTÍRICO) t (BUTÍRICO)−t
*
m = 7,63 min −0,31 min =23,6
k (BUTÍRICO) = r =r
t t 0,31 min
m m

2) En el mismo análisis cromatográfico para ácidos carboxílicos de bajo peso molecular que el
ejemplo anterior, el tiempo de retención para el ácido isobutírico es de 5,98 min. ¿Cuál es el factor
de selectividad para el ácido isobutírico y el ácido butírico?
t (BUTÍRICO)−t
r
α (BUTÍRICO , ISOBUTÍRICO)= m = 7,63 min −0,31 min =1,29
t (ISOBUTÍRICO)−t 5,98 min −0,31 min
r m

3) En el mismo análisis cromatográfico para ácidos carboxílicos de bajo peso molecular que en los
ejemplos anteriores, si el volumen de la fase estacionaria se estima en un 10 % del volumen de la
fase movil, calcular la constante de distribución para el ácido butírico.

V
m
K (BUTÍRICO)=k* (BUTÍRICO)⋅ =23,6⋅ 10 =236
V
e

4) En un análisis cromatográfico del aceite de limón, un pico de limoneno tiene un tiempo de

retención de 8,36 min con un ancho de línea base de 0.96 min. El -terpineno eluye a los 9,54 min,
con un ancho de 0,64 min. ¿Cuál es la resolución entre los dos picos?

t (TERPINENO)−t (LIMONENO)
r r 9,54 min −8,36 min
R (TERPINENO , LIMONENO) = =2⋅ 0,64 min +0,96 min
1
[w (TERPINENO)+w (LIMONENO)]
2

R (TERPINENO , LIMONENO)= 1,48

5) ¿Qué significa que un analito pasa el triple de tiempo en la fase estacionaria respecto de la fase
móvil?
*
Significa que k (analito)=3
6) Los siguientes datos se aplican a una columna cromatográfica de líquidos:

L columna Caudal VM VS
24,7 cm 0,313 ml/min 1,37 mL 0,164 mL

Un cromatograma de una mezcla de las especies A, B, C y D da los siguientes datos:

tR (min) W (min)
No retenido 3,1 -
A 5,4 0,41
B 13,3 1,07
C 14,1 1,16
D 21,6 1,72

a) Completar la tabla siguiente.

b) Calcular la longitud de columna necesaria para separar B y C con una resolución de 1,5 .
c) Calcular el tiempo necesario para separar B y C con una resolución de 1,5.

A B C D
t R'

A,B

B,C

C,D

RA,B

RB,C

RC,D

<N>

<H>

7) Para el cromatograma siguiente, calcule los parámetros k,  (para pares de picos adyacentes), N
promedio y R (para pares de picos adyacentes).

Compuesto tR (min) W (min)

Aire 1,9 -
Metilciclohexano 10,0 0,76
Metilciclohexeno 10,9 0,82
Tolueno 13,4 1,06
8) Las sustancias A y B tienen tiempos de retención de 16,40 y de 17,63 minutos, respectivamente,
en una columna de 30,0 cm. Una especie que no es retenida pasa por la columna en 1,30 minutos.
Los anchos de pico (en la base) para A y B son 1,11 y 1,21 minutos, respectivamente. Calcule:

a) la resolución entre los compuestos A y B;

b) el número de platos promedio de la columna;
c) la altura de plato;
d) la longitud de la columna necesaria para conseguir una resolución de 1,5;
e) el tiempo necesario para que la sustancia B eluya en la columna que da un valor de R s de 1,5 y
f ) la altura de plato necesaria para obtener una resolución de 1,5 mediante la columna original de
30,0 cm y en el tiempo que se da en un principio.

RESPUESTAS: Skoog, página 777, ejemplo 26.1

9) a) Una columna de cromatografía con una longitud de 10,3 cm y un diámetro interno de 4,61 mm
se empaqueta con una fase estacionaria que ocupa el 61,0 % del volumen. Si el caudal volumétrico
es 1,13 mL/min, encuentre el caudal lineal en cm/min.
b) ¿Cuánto tiempo tarda el solvente en pasar por la columna?
c) Encuentre el tiempo de retención para un soluto con un factor de capacidad de 10,0.

RESPUESTAS: a) 17,4 cm/min b) 0,592 min c) 6,51 min

ECUACIÓN DE VAN DEEMTER

B
10) Dada la ecuación de van Deemter H = A + + c⋅ u , suponga que para un sistema particular
u
de cromatograf!a de gases, los coeficientes son 5 cm2 s-1 , 0.001 cm y 5 x10-4 s.

a) ¿Cuál es A?
b) ¿Cuál es B?
c) ¿Cuál es C?
d) Calcule la velocidad lineal óptima.
e) Calcule Hmin.

11) La ecuación de van Deemter para un sistema LC con una columna empaquetada con un
diámetro de partícula de 0,50 µm se obtuvo mediante regresión.
Se obtuvieron los siguientes valores de los coeficientes de la ecuación: 0,0031 s; 0,0014 mm 2 s-1;
0,0074 mm

a) ¿Cuál es A?
b) ¿Cuál es B?
c) ¿Cuál es C?
d) ¿Cuál es la velocidad óptima de la fase móvil?
e) Suponga que redujo el diámetro de partícula a 0,30 µm y que puede despreciar las contribuciones
de Ce a C.
f) ¿Cuál es la velocidad de fase móvil óptima del nuevo sistema?
12) Dados los coeficientes de van Deemter para dos columnas de HPLC (con longitudes en μm y
tiempo en s)

Columna A B C
#1 2,4 5000 1,40 x 10-4
#2 2,7 3500 1,40 x 10-4

a) ¿Cuales son las unidades de A, B y C?

b) Calcule cuál de las dos columnas es más eficiente operando al flujo óptimo.
CROMATOGRAFÍA GASEOSA

CUANTIFICACIÓN POR EL MÉTODO DE PATRÓN EXTERNO

1) Se determinó por cromatografía gaseosa el contenido de n-hexano, benceno, tolueno y n-octano

en una muestra, utilizando patrónes de cada sustancia.

Cromatograma de los patrones Cromatograma de la Muestra

C (µg/mL) Area C (µg/mL) Area
n-hexano 2,00 8542 ? 5421
benceno 1,00 9131 ? 8736
tolueno 2,00 6999 ? 5421
n-octano 1,00 5123 ? 4333

Suponiendo que el volumen de inyección de las muestras fue en ambos casos el mismo, calcule la
concentración de cada componente en la muestra.

MÉTODO DE NORMALIZACIÓN DE ÁREAS

2) Un método para evitar las incertidumbres asociadas con la inyección de la muestra es el método
de normalización de áreas. Para utilizarlo, se requiere la elución completa de todos los componentes
de la muestra.
A partir del cromatograma de una mezcla de patrones de alcoholes butílicos, se obtuvieron los
siguientes datos de áreas (con las correspondientes correcciones debidas a la sensibilidad del
detector):

Alcohol % m/m Área (UA)

n-butanol 25,0 100,0
i-butanol 25,0 50,0
s-butanol 25,0 25,0
t-butanol 25,0 10,0

Posteriormente, se inyectó la muestra y se obtuvieron los siguientes resultados:

Alcohol Área (UA)

n-butanol 75,0
i-butanol 28,0
s-butanol 66,0
t-butanol 32,0

a) Calcular los factores de respuesta relativos.

b) Calcular las áreas corregidas y la concentración de cada componente en la muestra.

3) Se prepara una muestra patrón con volúmenes iguales de A, B y C y se inyectan 10 µl de la

mezcla en el cromatógrafo, obteniéndose los siguientes resultados:

Compuesto Área (UA)

A 0,47123
B 0,49362
C 0,51203
Se toman 20 µl de otra muestra, cuyo contenido se desea determinar, y se inyectan en el
cromatógrafo, en las mismas condiciones, obteniéndose el siguiente cromatograma:

Compuesto Área (UA)

 A 0,38376
B 0,41532
C 0,69311

Calcular el % m/m de cada compuesto en la muestra.

Compuesto  (g cm-3)
A 1,100
B 1,200
C 1,300

MÉTODO DEL PATRÓN INTERNO

4) Una muestra de vino fue analizada por CG para determinar el contenido de etanol. Para ello se
utilizó:

• Solución de 1-propanol como patrón interno (solución 1 = 25 mg /100 ml)

• Solucion patrón del analito etanol (solución 2 = 80 mg /100 ml)

Una alícuota de 2 mL de vino se diluyó a 100 mL (solución 3). Las muestras para análisis se
prepararon tomando:

• Solución patrón: 400 µl de solución 2 + 1000 µl de solución 1

• Solución muestra: 400 µl de solución 3 + 1000 µl de solución 1

Volúmenes de inyección = 1 µl

Calcular el contenido de etanol en vino.

etanol propanol
Cromatograma
tR (min) Área (UA) tR (min) Área (UA)
Solución patrón 1,01 166408 1,62 156402
Solución muestra 0,98 418628 1,60 158168

5) Para la determinación de un principio activo (PA) por CG, utilizando el método del patrón interno
(Pl), se preparan las siguientes soluciones y se inyectan en el cromatógrafo, obteniendo los
resultados correspondientes:

C PA (mg cm-3) C PI (mg cm-3) Area PA (UA) Area PI (UA)

Patrón 1 4,00 4,00 15000 17000
Patrón 2 3,00 6,00 5294 12000
Muestra 0,00 5,00 10000 14000

Calcular la concentración de principio activo en la muestra.

6) La Norepinefrina (NE) excretada en la orina humana, se determina por cromatografía de par
iónico, utilizando una fase estacionaria ODS y octal-sulfato de sodio como aditivo, con un detector
electroquímico y con 2,3-dihidroxibencilamina (DHBA) como patrón interno.
Una muestra de orina que contiene NE y una concentración de 10 ng/ml de DHBA, presenta picos
con áreas (en unidades arbitrarias) de 1246 y 997, respectivamente.
Luego se preparan soluciones que contienen la misma cantidad de muestra, DHBA y cantidades
variables de patrón de NE, según la tabla:

Concentraciones (ng/ml) Areas (UA)

NE DHBA NE DHBA
12 10 1315 1833
24 10 3156 2016
36 10 4734 2383
48 10 5786 1925

Calcule la concentración de NE en la muestra de orina.

7) De acuerdo a los datos de las tablas siguientes, calcule la concentración de todas las especies en
mg/ml.

Cromatograma PA C PA C PI Vi tR PA tR PI A PA A PI
N°1 Etanol 10 mg/ml 10 mg/ml 1 µl 1,34 2,01 9157 15341
N°2 Etanol 5 mg/ml 10 mg/ml 1 µl 1,32 2,01 4579 15343
N°3 Propanol 10 mg/ml 10 mg/ml 1 µl 1,56 2,03 12251 15338
N°4 Propanol 5 mg/ml 10 mg/ml 1 µl 1,55 2,02 6124 15335
N°5 Butanol 10 mg/ml 10 mg/ml 1 µl 2,45 2,01 19682 15336
N°6 Butanol 5 mg/ml 10 mg/ml 1 µl 2,42 1,98 9838 15332

donde Vi = volumen de inyección

Cromatograma N° 7 = muestra
Volumen de inyección = 1 µl
Concentración del PI = 10 mg/ml

tR 1.35 1.57 2.03 2.47

Area 6256 8146 15334 13562

Todos los tiempos de retención se expresan en minutos y las áreas, en unidades arbitrarias.
HPLC

CUANTIFICACIÓN POR EL MÉTODO DE PATRÓN EXTERNO

1) Con los siguientes cromatogramas, calcule la concentración -expresada en µg/L- de paracetamol,

cafeína y aspirina en una solución. Suponga que la eficiencia del inyección en ambos
cromatogramas es del 100 % y que el volumen de inyección en ambos casos es de 10.0 µL.

Patrones de 2,00 µg/L tR (min) Area (unidades arbitrarias)

Paracetamol 1,51 78426
Cafeína 2,10 31205
Aspirina 2,65 72345

muestra de tableta tR (min) Area (unidades arbitrarias)

Pico n°1 1,54 68994
Pico n°2 1,75 25382
Pico n°3 2,11 19050
Pico n°4 2,70 53480
Pico n°5 3,80 84922

2) Ohta y Tanaka (Anal. Chim. Acta 1998, 373, 189–195) han publicado un método para el análisis
simultáneo de varios aniones inorgánicos y los cationes Mg2+ y Ca2+ en agua por cromatografía de
intercambio iónico. La fase móvil contiene 1,2,4-benceno tricarboxilato que permite la detección
indirecta de los iones.
Una solución patrón conteniendo NaHCO3 1,00 mM, NaNO2 0,200 mM, MgSO4 0,200 mM, CaCl2
0,100 mM, y Ca(NO3)2 0,100 mM y la muestra ambiental correspondiente dan las siguientes áreas
en unidades arbitrarias:

– – – –
HCO 3 Cl NO2 NO3 Ca2+ Mg 2+ SO 42-
PATRONES 373,5 322,5 264,8 262,7 458,9 352,0 341,3
MUESTRA 310,0 403,1 3,97 157,6 734,3 193,6 324,3

a) Calcule los factores de respuesta correspondientes.

b) Determine la concentración de cada ión en la muestra.

RESPUESTA

HCO3–
–
Cl NO2– NO3– Ca2+ Mg2+ SO42-
1,00 mM 0,20 mM 0,20 mM 0,20 mM 0,20 mM 0,20 mM 0,20 mM
PATRONES 373,5 322,5 264,8 262,7 458,9 352,0 341,3
MUESTRA 310,0 403,1 3,97 157,6 734,3 193,6 324,3
FACTOR 2,68E-3 6,20E-4 7,55E-4 7,61E-4 4,36E-4 5,68E-4 5,86E-4
MUESTRA 0,83 mM 0,25 mM 0,003 mM 0,12 mM 0,32 mM 0,11 mM 0,19 mM