Bioquímica–I

Grado en Medicina
1. ¿Qué se regula y por qué?
2. Mecanismos de regulación enzimática:
a) Expresión génica de las enzimas
b) Activación o inactivación de las enzimas
c) Regulación alostérica de las enzimas
d) Presencia de diferentes Isoenzimas
 Las rutas metabólicas son procesos dinámicos que se
regulan.

 No todas las rutas se activan al mismo tiempo ni en el

mismo órgano/tejido.
 Ej.: Glc en cerebro sí, ác. grasos en cerebro no.
 Glucogenogénesis cuando hay mucha Glc o glucogenolisis
cuando hay poca Glc.

 La regulación sucede a nivel enzimático.

 No todas las reacciones del metabolismo se regulan.
 Se regulan algunas reacciones de toda una vía: un solo
paso, una sola enzima “reguladora”:
 Suele ser la primera y/o la más lenta.
 Responde a señales: moduladores.

A B C D E F
Enzima 1 Enzima 2 Enzima 3 Enzima 4 Enzima 5
 Se regulan puntos
clave de las rutas.

 Hay diferentes
mecanismos de
regulación.
a) Expresión génica de la enzima por variaciones
externas o demandas metabólicas.

b) Activación o inactivación de las enzimas:

 Irreversible: Cortes proteolíticos.
 Reversible: Covalente (Fosforilación).

c) Regulación alostérica por la unión de moduladores

inductores o inhibidores: no covalente.

d) Presencia de diferentes isoenzimas.

1. ¿Qué se regula y por qué?
2. Mecanismos de regulación enzimática:
a) Expresión génica de las enzimas
b) Activación o inactivación de las enzimas
c) Regulación alostérica de las enzimas
d) Presencia de diferentes Isoenzimas
 1º parte de la glucolisis
 La cantidad de enzima presente en la célula Glucosa
modula si una reacción/ruta metabólica se Hexoquinasa
ATP
pone en marcha. ADP
Glucosa 6-P

 La cantidad aumenta o disminuye según: Fructosa 6-P

ATP
a) La vida media de las enzimas.
ADP
b) La modulación de la expresión génica. Fructosa 1,6-biP

 La transcripción de genes a proteínas se

induce o inactiva mediante señales Dihidroxiacetona P +
extracelulares: “Señalización intracelular”. Gliceraldehído 3-P
 La llegada de señales a la célula produce cambios químicos.
 Respuesta celular suele suceder a través de la expresión génica.

Célula Molécula
Célula receptora
emisora señal o
o célula diana
ligando

División
Diferenciación
Migración
Transducción Supervivencia
de la señal
Expresión génica
 Información o señalización intracelular.
 La llegada de señales a la célula
produce cambios químicos en
cadena → transducción de señal. 1
1. Unión de la señal a un
receptor específicamente. 2 2ºMens

2. Generación de moléculas
intermediarias: segundos 3
mensajeros.
3. Amplificación de la señal.
4. Respuesta celular: expresión
de determinado gen.
 Tipos de señales entre células,
en función de la distancia recorrida

 Señales endocrinas: hormonas

secretadas a la sangre con
efecto lejano.
 Señales paracrinas/autocrinas:
Secretadas con efecto en
células vecinas o sobre sí
mismas.
 Señales dependientes de
contacto célula-célula:
Ligandos expresados en
membranas celulares.
 Tipos de receptores en la célula diana

1.
La unión del ligando al
Receptor induce su activación: α βγ α βγ βγ
α
GDP GTP GTP
1. Por facilitar la unión de GDP
Respuesta celular
otras proteínas: Receptores 2.
acoplados a proteínas G.
2. Por inducir fosforilación en P P

el Receptor: Receptores con P

Respuesta celular
actividad enzimática.
3.
3. Por inducir apertura de
canales iónicos: Células Despolarización
nerviosas, musculares y en Respuesta Transmisión
RE de cualquier célula. celular impulso
nervioso
 Tipos de receptores en la célula diana

La señal se transmite de unas proteínas efectoras a otras o mediante

segundos mensajeros:
Ej. de Proteína efectora: Adenilato ciclasa, PKA.
Ej. de segundo mensajero: AMPc.
La señal se amplifica. Señal

Adenilato
AMPc
Ciclasa

ATP AMPc
AMPc
AMPc
PKA
Activa
 Tipos de receptores en la célula diana

 Algunas proteínas efectoras actúan en cascada:

 Enzimas quinasas: mediante fosforilación activan o
inhiben enzimas transmitiendo la señal. PKA, PKC, JAK,
MAPK…
 Fosfatasas. Revierten efectos de las quinasas.

Kinasas

On Off Pi

Off On Pi

Fosfatasas
 Tipos de receptores en la célula diana

 Las quinasas fosforilan en

2
cascada. Ej.: 3 1
1. Receptor Insulina. 4
2. PI3K (Fosfatidil Inositol 3
quinasa).
3. PDK-1 (Quinasas 5
dependiente de PIP3).
4. PKB (Proteín quinasa B).
5. GSK3 (Glucógeno sintasa
quinasa-3).
 Tipos de receptores en la célula diana

 La señalización
intracelular permite la
regulación de la
expresión génica:
 Se activan Factores de
Transcripción.
 Se potencia o se
inhibe la expresión de
las enzimas.
1. ¿Qué se regula y por qué?
2. Mecanismos de regulación enzimática:
a) Expresión génica de las enzimas
b) Activación o inactivación de las enzimas
 Irreversible
 Reversible: Covalente (Fosforilación)

c) Regulación alostérica de las enzimas

d) Presencia de diferentes Isoenzimas
 Zimógenos. Son precursores enzimáticos, también
llamados pro-enzimas.

 Su activación se debe a una modificación irreversible

covalente: a un corte proteolítico.

 Las enzimas activas se convierten en reguladores de otras.

 Ejs.: Enzimas digestivas, factores de coagulación, proteínas
del complemento (sistema inmune).
 La tripsina es un zimógeno que corta a pro-enzimas para
convertirlas en otros zimógenos.
 Quimotripsinógeno Tripsinógeno
(inactivo) (inactivo)
 El corte proteolítico da 1 245 1 245
lugar a la enzima activa. Tripsina Enteropeptidasa
1-6 Tripsina
π-Quimotripsina (activa)
(activa) 7 245
 Sucede en los lisosomas 1 15 16 245
celulares.
π-Quimotripsina
14-15, 147-148
 Las enzimas activas a su α-Quimotripsina
vez cortan a otras. 1-13 16 146 149
(activa)
245

 Muchos zimógenos se secretan en los jugos digestivos:

intestinales, pancreáticos…
 La coagulación sanguínea actúa mediante la
degradación en cascada de zimógenos que se
transforman en proteínas activas.
 El Factor I pasa de ser soluble (inactivo) a ser
fibroso e insoluble (activo).

 Hemofilia: uno de los factores de coagulación

no se corta.
 No se forma
producto activo.
1. ¿Qué se regula y por qué?
2. Mecanismos de regulación enzimática:
a) Expresión génica de las enzimas
b) Activación o inactivación de las enzimas
 Irreversible
 Reversible: Covalente (Fosforilación)

c) Regulación alostérica de las enzimas

d) Presencia de diferentes Isoenzimas
 Reversible. El modulador modifica covalentemente a
la enzima de modo reversible.
 Ej.: Fosforilación/ defosforilación. Característico de la
señalización intracelular.
Kinasa
Pi
Off On

Fosfatasa

Kinasa
Pi
On Off

Fosfatasa
  Ej.: Glucógeno fosforilasa-b implicada en la degradación del
Glucógeno
Glucógeno → Glc

 La enzima fosforilada modifica su estructura, y se activa.

Glucógeno fosforilasa b - Pi
(activa)
Glucógeno fosforilasa b
(inactiva)
Fosforilación
ATP ADP
Enzima Enzima–Pi

Adenilación
ATP PPi
Enzima Enzima–PO3––Ribosa–Adenina

Metilación
S-adenosil- S-adenosil-  Si el nuevo grupo funcional es
metionina homocisteína hidrofóbico, provoca la
Enzima Enzima–CH3 localización en membrana.
1. ¿Qué se regula y por qué?
2. Mecanismos de regulación enzimática:
a) Expresión génica de las enzimas
b) Activación o inactivación de las enzimas
c) Regulación alostérica de las enzimas
d) Presencia de diferentes Isoenzimas
 Alostérica «otra forma». Las enzimas cambian de forma:
 Forma tensa (T): menos eficiente.
 Forma relajada (R): más eficiente.
 Son proteínas con estructura cuaternaria y varios centros
activos.
 El cambio de forma puede ser: concertado o secuencial.

Ej.: La Hemoglobina es
una enzima alostérica
con forma T y forma R.
  Concertado: todas las subunidades cambian de forma a
la vez (a).
 Secuencial: el cambio de forma de una subunidad induce
el cambio de forma del resto de subunidades
secuencialmente (b).
a)

b)
 La velocidad deja de representarse con gráfica
hiperbólica y pasa a tener forma de S, sigmoidea.

Vo (μM/min) Vmáx

½ Vmáx

Km
[S] (mM)
Hay dos tipos de enzimas alostéricas según quién sea el
modulador:

 Enzimas homotrópicas: el sustrato y el modulador son

la misma molécula.
 Cooperatividad por sustrato.

 Enzimas heterotrópicas: el sustrato y el modulador son

diferentes moléculas.
 Poseen varios sitios de unión: del Sustrato (Centros activos) y
de los moduladores.
 La hemoglobina tiene un modulador positivo: el O2.
 El O2 es sustrato y modulador.
 La glucógeno fosforilasa cataliza Sustrato
Modulador positivo
la degradación del glucógeno para
Dominio Dominio
liberar Glc, tiene un modulador Catalítico Regulador
positivo: el AMP.
C R Enzima poco activa
 Cuando hay requerimiento
energético hay poco ATP y más
AMP: es necesario liberar Glc
para obtener más ATP.
C R
 AMP es un modulador positivo. Enzima muy activa

C R Complejo ES
 La hemoglobina tiene un
modulador negativo:
el 2,3bi-P-glicerato.

 Disminuye la afinidad de la
Hemoglobina por el O2 ...

 ... por lo que lo disocia bien y lo

libera en los tejidos.

 Función en situaciones de
hipoxia ( [O2]).
 La regulación alostérica, inhibidora o activadora sucede
frecuentemente en enzimas clave de rutas metabólicas.
 Ej.: al principio de la vía, Z modula
el paso de B a X, regulando así su A B C
propia síntesis.
 El modulador es diferente al X
sustrato: heterotrópico. Regulación
negativa
 Se denomina regulación feed-back. Y

 Puede ser feed-back positivo o

negativo. Z
L-Thr
E1
A
E2
B
E3
C
E4
D
E5
L-Ile
1. ¿Qué se regula y por qué?
2. Mecanismos de regulación enzimática:
a) Expresión génica de las enzimas
b) Activación o inactivación de las enzimas
c) Regulación alostérica de las enzimas
d) Presencia de diferentes Isoenzimas
 Moléculas diferentes que catalizan la misma reacción.
 La secuencia de Aa puede variar:
 Diferente localización en la misma célula: en membrana,
citoplasma.
 Diferente estructura.
 Diferente molécula en distinto tejido ...
pKC-η pKC- η activada

JBC, Goodnight et al

En membrana En citoplasma
 Diferente nº de subunidades o diferente estructura, ej.:
Aldehído deshidrogenasa cataliza Etanol → Acetaldehído.
 Diferente tejido.
 Creatin kinasa o FosfoKinasa (CK):
 Proteína dimérica formada por las subunidades B (brain) o M (muscle).
Proteína Localización principal Daño si presencia en sangre
CK1 (CK-BB) Cerebro y pulmón Cerebral: crisis epiléptica, infarto,
cáncer, trauma o lesión cerebral., ...
CK2 (CK-BM) Músculo cardiaco Cardiaco: infarto, trauma, lesiones
por electricidad, desfibrilación,
miocarditis, ...
CK3 (CK-MM) Músculo esquelético Lesión o fatiga muscular:
aplastamiento, distrofia muscular,
miositis, ...

 Se miden como enzimas de escape para diagnóstico.

 Pueden diferir en:

 Propiedades cinéticas: Km y kcat.

 Propiedades reguladoras. Distinta sensibilidad a moduladores.

 Cofactores o coenzimas.
 Lactato deshidrogenasa (LDH): Fermentación del lactato:

LDH1 – H4 Corazón y eritrocito

LDH2 – MH3 Corazón y eritrocito
LDH LDH3 – M2H2 Cerebro y riñón
LDH4 – M3H Músculo esquelético e hígado
LDH5 – M4 Músculo esquelético e hígado

Lactato → Piruvato
 LDH: las H se inhiben por piruvato.
 LDH para diagnóstico de infarto de miocardio y en
hepatitis vírica aguda, según la isoenzima y el tiempo.
 Hexoquinasa y Glucoquinasa catalizan la misma reacción
de Glucogenogénesis pero con diferente eficiencia:

Glucosa + ATP → Glucosa-6P + ADP

a) Hexoquinasa: baja Km, Glc-6P: modulador negativo.
En músculo. OK con glucemia normal.

b) Glucoquinasa: alta Km, y no inhibida por Glc-6P.

En hígado. Solo con alta glucemia (tras la ingesta).
Hexoquinasa posee baja Km ~0.05 mM por la Glc,
Glucoquinasa exhibe una cinética sigmoidal con una Km de ~5 mM.
Tras una extensa comida, la [Glc] en la vena porta hepática se
aproxima a 5 mM.
¿Cuál de las siguientes circunstancias es correcta?
Hexokinasa Glucokinasa
A. No activa No activa
B. v 1⁄2 Vmáx No activa
C. v Vmáx No activa
D. v Vmáx v 1⁄2 Vmáx
E. v Vmáx v Vmáx
 LIBROS:  IMÁGENES:
 Baynes (Elsevier)  Lehninger (Omega)
 Lehningher (Omega)  Feduchi (Elsevier)
 Manual Moderno
 enfermeriaaa.blogspot.com
 www.diariomedico.com
 www.manan.dk
 www.molbiocell.org