Tesis - Actividad Microbiana

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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE

LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TESIS:

“ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO ACUOSO


DE Allium porrum L. (PORO)”

PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:


QUÍMICO FARMACÉUTICO

PRESENTADO POR:
VALERY NATTY MARAZA FLORES

ASESORAS:
MSC. ETHEL VANIA MALLQUI BRITO
MG. CECILIA IGNACIO PUNÍN

LIMA, PERÚ, NOVIEMBRE 2018


DEDICATORIA

A Dios, por ser el guía en este largo caminar; a


mi madre, por sus sabias palabras, su confianza
y apoyo incondicional a lo largo de mi carrera
universitaria; a mi padre y abuelita por su apoyo
constante y palabras de aliento; a mi esposo por
su apoyo permanente; a mi hija que fue el motivo
para seguir adelante siempre y nunca dejarme
vencer pese a las adversidades.

ii
AGRADECIMIENTO

A la Universidad Alas Peruanas, por todos los


conocimientos que obtuve a lo largo de mi
carrera universitaria, al Dr. Javier Gómez
Guerreiro y a mis asesoras: la MSc. Vania
Mallqui Brito y la Mg. Cecilia Ignacio Punín; por
su asesoría y orientación durante el desarrollo
de la presente investigación.

iii
ÍNDICE

Dedicatoria ................................................................................................ ii
Agradecimiento ........................................................................................ iii
Índice general .......................................................................................... iv
Índice de cuadros................................................................................... viii
Índice de figuras....................................................................................... ix
Índice de tablas ........................................................................................ xi
Resumen ................................................................................................ xii
Abstract .................................................................................................. xiii
Introducción ........................................................................................... xiv

CAPÍTULO I: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. Descripción de la situación problemática ........................................ 16


1.2. Formulación del problema............................................................... 17
1.2.1. Problema general .................................................................. 17
1.2.2. Problemas específicos........................................................... 17
1.3. Objetivos de la investigación........................................................... 18
1.3.1. Objetivo general .................................................................... 18
1.3.2. Objetivos específicos ............................................................. 18
1.4. Justificación e importancia de la investigación................................ 18
1.4.1. Justificación de la investigación ............................................. 18
1.4.2. Importancia de la investigación ............................................. 19
1.5. Limitaciones del estudio .................................................................. 19

CAPÍTULO II: MARCO TEÓRICO

2.1. Antecedentes .................................................................................. 20


2.1.1. A nivel nacional ..................................................................... 20
2.1.2. A nivel internacional............................................................... 23

iv
2.2. Bases teóricas ................................................................................ 26
2.2.1. Herbolaria ............................................................................. 26
2.2.1.1. Preparados con plantas medicinales ......................... 27
2.2.1.2. Especies de interés medicinal .................................... 28
2.2.2. Allium porrum L. (poro) .......................................................... 29
2.2.2.1. Origen ........................................................................ 29
2.2.2.2. Generalidades ............................................................ 29
2.2.2.3. Clasificación taxonómica ............................................ 31
2.2.2.4. Composición química ................................................. 31
2.2.2.5. Composición nutricional ............................................. 31
2.2.2.6. Usos tradicionales ...................................................... 33
2.2.3. Extracción de recursos vegetales .......................................... 34
2.2.3.1. Métodos de extracción ............................................... 34
2.2.3.2. Extractos .................................................................... 38
2.2.4. Enfermedades transmitidas por alimentos (ETAs) ................ 39
2.2.4.1. Tipos de enfermedades producidas por ETAs ........... 40
2.2.4.2. Causas ....................................................................... 41
2.2.4.3. Prevención de ETAs................................................... 41
2.2.5. Bacterias................................................................................ 42
2.2.5.1. Staphylococcus aureus .............................................. 43
2.2.5.2. Escherichia coli .......................................................... 51
2.2.6. Antibacterianos ...................................................................... 54
2.2.6.1. Mecanismo de acción................................................. 54
2.2.6.2. Resistencia a los antibacterianos ............................... 55
2.2.6.3. Antibacterianos naturales ........................................... 55
2.2.7. Determinación de sensibilidad bacteriana ............................. 56
2.2.7.1. Difusión en agar ......................................................... 56
2.2.7.2. Difusión en pozos ....................................................... 57
2.3. Definición de términos básicos ....................................................... 58

v
CAPÍTULO III: HIPÓTESIS Y VARIABLES

3.1. Formulación de la hipótesis ............................................................ 60


3.1.1. Hipótesis general ................................................................... 60
3.1.2. Hipótesis específicas ............................................................. 60
3.2. Identificación de variables ............................................................... 61
3.3. Operacionalización de variables ..................................................... 61

CAPÍTULO IV: METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN

4.1. Tipo y nivel de investigación ........................................................... 63


4.1.1. Tipo de investigación ............................................................. 63
4.1.2. Nivel de investigación ............................................................ 63
4.2. Método y diseño de la investigación ............................................... 64
4.2.1. Método de la investigación .................................................... 64
4.2.2. Diseño de la investigación ..................................................... 64
4.3. Población y muestra de la investigación ......................................... 64
4.3.1. Población ............................................................................... 64
4.3.2. Muestra.................................................................................. 64
4.4. Técnicas, instrumentos y procedimientos de recolección de
datos ............................................................................................... 64
4.4.1. Técnicas ................................................................................ 64
4.4.2. Instrumentos ......................................................................... 65
4.4.3. Procedimientos ...................................................................... 65

CAPÍTULO V: ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

5.1. Resultados de investigación ........................................................... 69

CAPÍTULO VI: DISCUSIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

6.1. Discusión de la investigación .......................................................... 73

vi
CONCLUSIONES .................................................................................. 77
RECOMENDACIONES .......................................................................... 78
FUENTES DE INFORMACIÓN ............................................................. 79
ANEXOS ................................................................................................ 91

vii
ÍNDICE DE CUADROS

CUADRO Nº 1: Clasificación taxonómica .............................................. 31


CUADRO Nº 2: Composición nutricional del Allium porrum L. (poro) .... 32
CUADRO Nº 3: Características de los tipos de extracción
con disolvente .............................................................. 38
CUADRO Nº 4: Componentes de la estructura de Staphylococcus
aureus .......................................................................... 46
CUADRO Nº 5: Toxinas de Staphylococcus aureus .............................. 48
CUADRO Nº 6: Enzimas de Staphylococcus aureus ............................. 49
CUADRO Nº 7: Identificación de variables ............................................ 61
CUADRO Nº 8: Operacionalización de variables ................................... 62

viii
ÍNDICE DE FIGURAS

FIGURA Nº 1: Allium porrum L. (poro) .................................................. 30


FIGURA Nº 2: Métodos de extracción .................................................. 34
FIGURA Nº 3: Prensa mecánica ........................................................... 35
FIGURA Nº 4: Equipo para destilación por arrastre de vapor ............... 36
FIGURA Nº 5: Método de extracción por soxhlet .................................. 37
FIGURA Nº 6: Factores causantes de contaminación de alimentos ..... 41
FIGURA Nº 7: Medidas para preservar la inocuidad de alimentos ....... 42
FIGURA Nº 8: Formas bacterianas ....................................................... 43
FIGURA Nº 9: Staphylococcus aureus visto por microscopio
electrónico ..................................................................... 45
FIGURA Nº 10: Escherichia coli vista por microscopio
electrónico .................................................................... 51
FIGURA Nº 11: Procedimiento del antibiograma ................................... 57
FIGURA Nº 12: Difusión en pozos ......................................................... 58
FIGURA Nº 13: Flujograma de trabajo ................................................... 68
FIGURA Nº 14: Recolección de Allium porrum L. (poro)........................ 99
FIGURA Nº 15: Selección de Allium porrum L. (poro) ........................... 99
FIGURA Nº 16: Lavado de Allium porrum L. (poro) ............................. 100
FIGURA Nº 17: Obtención de bulbos de Allium porrum L. (poro) ........ 100
FIGURA Nº 18: Rallado de bulbos de Allium porrum L. (poro) ............ 101
FIGURA Nº 19: Obtención del extracto acuoso de Allium porrum L.
(poro) .......................................................................... 101
FIGURA Nº 20: Envasado del extracto acuoso de Allium porrum L.
(poro) .......................................................................... 102
FIGURA Nº 21: Ausencia de halos de inhibición del extracto acuoso
de Allium porrum L.(poro) frente a Escherichia coli..... 103
FIGURA Nº 22: Halos de inhibición a la concentración del 100 % del
extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) frente a
Staphylococcus aureus............................................... 103

ix
FIGURA Nº 23: Halos de inhibición a la concentración del 80 % del
extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) frente a
Staphylococcus aureus............................................... 104
FIGURA Nº 24: Ausencia de halos de inhibición a la concentración
del 40 % del extracto acuoso de Allium porrum L.
(poro) frente a Staphylococcus aureus ....................... 104

x
ÍNDICE DE TABLAS

TABLA Nº 1: Actividad antimicrobiana del extracto acuoso de Allium


porrum L. (poro) frente a Staphylococcus aureus ATCC
6538 .................................................................................. 70
TABLA Nº 2: Actividad antimicrobiana del extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) frente a Escherichia coli ATCC 8739 ..... 71

xi
RESUMEN

El Allium porrum L. (poro) perteneciente a la familia de las Liliáceas, forma


parte del género Allium muy conocidos por sus propiedades
antimicrobianas. Objetivo: Determinar la actividad antimicrobiana del
extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) frente a bacterias tipificadas.
Metodología: Para la elaboración del extracto acuoso se utilizó 500 g de
bulbos de Allium porrum L. (poro), los cuales fueron rallados y exprimidos
hasta obtener el zumo. En la evaluación de la actividad antimicrobiana, se
utilizó el método de difusión en pozos en agar Mueller Hinton sobre el que
se sembró el inóculo bacteriano y para lo cual se trabajó el extracto a tres
concentraciones de 100, 80 y 40 %. Se incubó a 35ºC por 24 horas,
transcurrido el tiempo se procedió a medir los halos de inhibición.
Resultados: Se evidencia que el extracto acuoso de Allium porrum L.
(poro) frente a Staphylococcus aureus ATCC 6538 a las concentraciones
de 100 y 80 % exponen halos promedios de 33.7 mm y 30.3 mm
respectivamente, mientras que a 40 % fue negativo; así mismo ninguna de
las concentraciones mostro actividad frente a Escherichia coli ATCC 8739.
Conclusiones: Se logró determinar que el extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) presento únicamente actividad antimicrobiana frente
Staphylococcus aureus ATCC 6538 a las concentraciones igual y
superiores al 80 %.

Palabras clave: Extracto acuoso, Allium porrum L., actividad


antimicrobiana.

xii
ABSTRACT

The Allium porrum L. (pore) belonging to the family of the Liliaceae, is part
of the genus Allium well known for its antimicrobial properties. Objective:
To determine the antimicrobial activity of the aqueous extract of Allium
porrum L. (pore) against typified bacteria. Methodology: For the
elaboration of the aqueous extract 500 g of Allium porrum L. (pore) bulbs
were used, which were grated and squeezed until obtaining the juice. In the
evaluation of the antimicrobial activity, the method of diffusion in wells on
Mueller Hinton agar was used, on which the bacterial inoculum was seeded
and for which the extract was worked at three concentrations of 100, 80 and
40%. It was incubated at 35ºC for 24 hours, after which time the inhibition
zones were measured. Results: It is evidenced that the aqueous extract of
Allium porrum L. (pore) against Staphylococcus aureus ATCC 6538 at the
concentrations of 100 and 80% exposed average halos of 33.7 mm and
30.3 mm respectively, while at 40% it was negative; Likewise none of the
concentrations showed activity against Escherichia coli ATCC 8739.
Conclusions: It was determined that the aqueous extract of Allium porrum
L. (pore) showed only antimicrobial activity against Staphylococcus aureus
ATCC 6538 at concentrations equal to and greater than 80% .

Key words: Aqueous extract, Allium porrum L., antimicrobial activity.

xiii
INTRODUCCIÓN

En la actualidad los cambios en el estilo de vida de las personas, les impide


llevar una adecuada alimentación debido a la falta de tiempo, esto ha
provocado la gran aceptación de comidas “rápidas”; lamentablemente con
ello se ven expuestos a poder contraer enfermedades transmitidas por
alimentos (ETAS), como infecciones o intoxicaciones.

Las ETAs se desarrollan de manera diferente en cada organismo,


dependiendo de varios factores entre ellos, el sistema inmunológico el cual
actúa como una barrera. Siendo los niños, mujeres embarazadas y las
personas de tercera edad, los más susceptibles, por lo que hay que tener
bastante cuidado debido a que estas enfermedades aparte de generar
síntomas característicos como, diarrea, vómitos y dolor abdominal, pueden
llegar a producir una grave deshidratación y si no es tratada a tiempo,
desencadenar en la muerte. (1)

A pesar que contamos con antibióticos disponibles para su tratamiento, el


uso excesivo de estos ha producido un problema de resistencia, es por ello
que nuevas investigaciones abren paso al tratamiento natural, es decir la
herbolaria o fitoterapia, que ha sido transmitida de una generación a otra,
debido a que los recursos vegetales contienen diversos principios activos
con los que se puede prevenir y tratar varias enfermedades.

El Perú es reconocido por ser un país que presenta una gran biodiversidad
de especies vegetales utilizadas mayormente por la población rural con
fines terapéuticos siendo uno de los más resaltantes la actividad
antimicrobiana.
Así por ejemplo tenemos a la familia de la Liliáceas, dentro de ella el género
Allium, que es el más representativo, caracterizado por contener
compuestos azufrados que le confiere sus propiedades terapéuticas,
dentro de los más importantes se encuentra el Allium sativum (ajo), y Allium

xiv
cepa (cebolla) los cuales cuentan con investigaciones que han demostrado
su efecto antimicrobiano, antifúngico, antiparasitario, antihipertensivo,
expectorante entre otros; dentro de esta familia se encuentra Allium porrum
L. (poro) que presenta efecto antioxidante, sin embargo se han realizado
pocos estudios científicos validados en relación a la actividad
antimicrobiana. (2)

Por tal motivo, en el presente trabajo se planteó como objetivo determinar


la actividad antimicrobiana del extracto acuoso del Allium porrum L. (poro)
frente a bacterias tipificadas como Staphylococcus aureus y Escherichia
coli, principales causantes de enfermedades transmitidas por alimentos.

xv
CAPÍTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. Descripción de la situación problemática


La herbolaria o fitoterapia es la medicina más antigua y utilizada que
existe a nivel mundial; ha sido un punto de partida muy importante en
el desarrollo de la medicina moderna, el hombre al estar en contacto
con la naturaleza fue adquiriendo poco a poco un conocimiento
empírico que le permitió encontrar medicinas naturales para ayudar a
prevenir y tratar enfermedades del cuerpo humano, antes de que
surgieran los avances tecnológicos. (3)

Sin embargo, fue imprescindible la era de los antibióticos, para el


tratamiento de diversas enfermedades, su uso correcto puede salvar
vidas pero el consumo prolongado de ellos cuando no se necesitan
genera resistencia en las personas. En Estados Unidos una
investigación realizada por el Centro para el Control y Prevención de
Enfermedades (CDC) sobre el uso irracional de antibióticos, calculó
que son 23 mil las muertes y 2 millones las enfermedades generadas
por la mala utilización de estos. (4)

El Perú es un país que cuenta con una basta biodiversidad de climas y


pisos ecológicos donde es muy fácil cultivar y cosechar gran variedad

16
de recursos vegetales, muchos de estos conocidos por sus
propiedades medicinales, el género Allium perteneciente a la familia de
las liliáceas es muy destacado por sus propiedades antimicrobianas,
formando parte de él se encuentra Allium porrum L. (poro), muy
consumido en la alimentación diaria al cual se le atribuye efecto
antioxidante, antianémico, diurético, entre otros, pero cuenta con muy
pocos estudios validados sobre su actividad antimicrobiana. (5)

Un problema de salud actual son las ETAs, producidas por el consumo


de agua o alimentos contaminados por virus, bacterias o parásitos,
estas vienen cobrando víctimas mortales, principalmente cuando el
cuadro clínico se agrava al no ser tratado a tiempo, esto debido a la
falta de conocimiento acerca de estas enfermedades o a la poca
accesibilidad a las medicinas adecuadas por parte de los centros de
salud en zonas alejadas de la ciudad. (6)

Por lo expuesto es importante y muy necesario buscar alternativas de


tratamiento que sean efectivas para combatir a estas bacterias
patógenas, y también que puedan estar al alcance de toda la población.

1.2. Formulación del problema


1.2.1. Problema general
¿Existe actividad antimicrobiana del extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) frente a bacterias tipificadas?.

1.2.2. Problemas específicos


 ¿A qué concentración el extracto acuoso de Allium porrum L.
(poro) presenta actividad antimicrobiana frente a
Staphylococcus aureus?.
 ¿A qué concentración el extracto acuoso de Allium porrum L.
(poro) presenta actividad antimicrobiana frente a Escherichia
coli?.

17
1.3. Objetivos de la investigación
1.3.1. Objetivo general
Determinar la actividad antimicrobiana del extracto acuoso de
Allium porrum L. (poro) frente a bacterias tipificadas.

1.3.2. Objetivos específicos


 Determinar a que concentración el extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) presenta actividad antimicrobiana frente a
Staphylococcus aureus.
 Determinar a que concentración el extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) presenta actividad antimicrobiana frente a
Escherichia coli.

1.4. Justificación e importancia de la investigación


1.4.1. Justificación de la investigación
Los recursos vegetales han sido utilizados desde nuestros
antepasados por ser muy útiles para la prevención y tratamiento
de enfermedades. Con el crecimiento de la población y el avance
de la tecnología surgieron los antibióticos, estos son muy buenos
pero su uso prolongado o irracional puede acarrear problemas
para la salud y generar resistencias.

Según la Organización Mundial de la Salud (OMS) un problema


actual de salud son las ETAs, que se producen por el consumo
de alimentos contaminados los cuales ocasionan infecciones o
intoxicaciones según el agente causal, estas enfermedades si
no son tratadas a tiempo producen deshidratación severa que
puede llevar a la muerte. (7)

Todo ello motiva a investigar exhaustivamente sobre los


recursos vegetales que puedan presentar efecto antimicrobiano,
por ello en la presente investigación se buscó determinar si el

18
extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) presenta actividad
antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus y Escherichia
coli, principales representantes del grupo de bacterias
productoras de ETAs. Esta investigación sirve como un
antecedente y es una base para realizar más investigaciones
que certifiquen y ratifiquen su uso como antimicrobiano. Así
mismo tendrá una contribución social ya que permitirá que la
población pueda usarla en la prevención de ciertas
enfermedades de manera natural.

1.4.2. Importancia de la investigación


La presente investigación tiene gran importancia porque al
demostrarse el efecto antimicrobiano del extracto acuoso de
Allium porrum L. (poro), sirve como referencia para motivar a
realizar más investigaciones y a la vez permitir ampliar el
conocimiento sobre este vegetal, de esta manera incentivar su
consumo en la dieta diaria como preventivo de ciertas
enfermedades.

1.5. Limitaciones del estudio


Carencia de antecedentes sobre investigaciones referente al efecto
antimicrobiano de Allium porrum L. (poro).

19
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO

2.1. Antecedentes

2.1.1. A nivel nacional


Ramos K. EFECTO in vitro DEL EXTRACTO ACUOSO DE
Allium cepa (CEBOLLA) SOBRE CULTIVOS DE Klebsiella
pneumoniae, Pseudomona aeruginosa Y Escherichia coli
PRODUCTORAS DE BETALACTAMASAS DE ESPECTRO
EXTENDIDO (BLEE). Tesis para optar el título profesional de
Médico Cirujano en la Universidad de San Martín de Porres,
Perú, 2018. Buscó determinar si el extracto acuoso de Allium
cepa (cebolla) presentaba efecto antimicrobiano frente a
Pseudomona aeruginosa, Escherichia coli y Klebsiella
pneumoniae (BLEE), para la elaboración del extracto se empleó
50 g de bulbos de cebolla que fueron licuados con una cantidad
mínima de agua 5 ml, el extracto obtenido se consideró a la
concentración de 100 %, luego a partir de esta se procedió a
preparar las concentraciones de 25, 50 y 75 %, para la
determinación del efecto antimicrobiano se utilizó agar Mueller
Hinton y se colocó 1 ml del inóculo bacteriano que fue servido
en placas, se realizaron los pocillos en los cuales se inocularon

20
30 µl de las diferentes concentraciones del extracto, en los
resultados se pudo observar halos de inhibición de 7.6 mm, 9.6
mm, 11.8 mm, y 14.3 mm para las concentraciones de 25, 50,
75 y 100% respectivamente frente a Escherichia coli, para
Pseudomona aeruginosa y Klebsiella neumoniae no se observó
efecto inhibitorio. Se llegó a la conclusión que el extracto de
Allium cepa si presentó actividad frente Escherichia coli BLEE, y
esta dependió de la concentración utilizada. (8)

Salazar M. “EFICACIA ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO


ACUOSO DE Allium sativum, COMPARADO CON AMIKACINA
EN Escherichia coli. Tesis para optar el título profesional de
Médico Cirujano en la Universidad César Vallejo, Perú, 2016.
Buscó comparar la eficacia del extracto acuoso de Allium
sativum (ajo) con amikacina frente a Escherichia coli, para la
preparación del extracto utilizó bulbos de Allium sativum, los
cuales fueron molidos, disueltos en agua y luego filtrados, se
realizó en 2 fases; en la primera se realizaron las diluciones, para
ello se preparó 10 tubos de ensayo conteniendo
concentraciones del 10 hasta el 100% del extracto, y se procedió
a agregar el inóculo observando a que porcentaje ya no crecia
la bacteria, en la segunda fase, el método aplicado fue de disco
difusión, se sembró el inóculo bacteriano en las placas se hizo 5
hoyos donde se colocó diferentes concentraciones de 20, 40, 60,
80 y 100% del extracto y el disco de amikacina, en los resultados
se pudo observar que el Allium sativum es eficaz contra la
Escherichia coli pero a la vez la amikacina fue más eficaz que el
extracto acuoso de Allium sativum formando un halo de
inhibición promedio de 28.2 mm mientras que los halos formados
por Allium sativum fueron: para la concentración de 20% fue de
7,8, al 40% de 11,1, al 60% de 12,8, al 80% de 15,7 y al 100%
de 17,7 mm. Se llegó a la conclusión de que el extracto acuoso

21
de Allium sativum (ajo) si presentó acción antibacteriana frente
a Escherichia coli y la concentración que mostró mayor efecto
inhibitorio fue al 100% formando un halo de 17.7 mm. (9)

Salazar L. EFECTO ANTIMICROBIANO DE LOS EXTRACTOS


DE Allium sativum L. (AJO) SOBRE EL CRECIMIENTO in vitro
DE Escherichia coli ATCC 25922 Y Staphylococcus aureus
ATCC 25923. Tesis para optar el Título profesional de Bióloga
en la Universidad Nacional de Piura, Perú, 2014. En su
investigación tuvo por objetivo determinar si el extracto acuoso,
etanólico y metanólico de Allium sativum L. presentan actividad
antimicrobiana sobre Escherichia coli ATCCC 25922 y
Staphylococcus aureus ATCC 25923, para la elaboración del
extracto se empleó 600 g. de ajo de los cuales se obtuvo 250 ml
de extracto puro con la ayuda de un extractor, luego se envasó
y dejó en maceración durante 6 días, para obtener el extracto
etanólico se utilizó 90 ml de extracto obtenido y se adicionó 20
ml de etanol al 70 % y para el extracto metanólico se usó 90 ml
de extracto puro con 20 ml de metanol al 80%, ambos se dejaron
macerar, los extractos obtenidos fueron tomados a una
concentración del 100 % y a partir de estos se hicieron las
diluciones para obtener las concentraciones de 75, 50 y 25 %.
Se utilizó el agar Mueller-Hinton como medio de cultivo, para la
concentración mínima inhibitoria (CIM) se trabajó con el método
de dilución en tubo. En los resultados se observó que el mayor
promedio de halo de inhibición frente a Escherichia coli fue de
27 mm a la concentración del 100% del extracto acuoso, para
Staphylococcus aureus fue de 43.3 mm a la concentración del
100% del extracto metanólico. Se llegó a la conclusión que los
extractos metanólico, etanólico y acuoso de Allium sativum en
todas las concentraciones utilizadas si presentaron actividad
frente a las bacterias estudiadas, se determinó a su vez que

22
Staphylococcus aureus presentó mayor sensibilidad que
Escherichia coli frente a la acción del extracto. (10)

2.1.2. A nivel internacional


Pava T. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LOS EXTRACTOS
DE Allium sativum Y Zingiber officinale SOBRE
MICROORGANISMOS DE IMPORTANCIA EN PATOLOGÍAS
INFECCIOSAS DE LA CAVIDAD ORAL. Tesis para optar el título
profesional de Bacterióloga en la Pontificia Universidad
Javeriana, Colombia, 2016. El objetivo de su investigación fue
determinar la actividad antimicrobiana de los extractos de Allium
sativum sobre Staphylococcus aureus, Prevotella intermedia,
Streptococcus mutans, Enterococcus faecalis y Porphyromona
gingivales, empleó 2 metodologías para la obtención del
extracto; en la primera utiliza el material vegetal seco que se
sometió a una extracción con etanol y agua (maceración en frío),
que liofilizó y llevó a rotavapor para eliminar el etanol de ahí
obtuvo el extracto concentrado, en la segunda metodología tomo
90 g de muestra, llevó a una procesadora de alimentos y le
adicionó 600 ml de agua desionizada, estuvo en reposo por 3
horas y se retiró el sobrenadante para realizar las diluciones.
Para el sembrado se usó el medio Mueller-Hinton, se hicieron
perforaciones donde se colocó 30 µl de los extractos, en los
resultados para los extractos que se utilizó la metodología 1 salió
positivo el extracto etanólico de Allium sativum y Zingiber
officinale para Porphyromona gingivalis con un halo de 17.7 mm
y 14.7 mm, a la concentración de 280mg/ml del extracto,
mientras que el extracto acuoso obtenido por la metodología 2 a
una concentración de 150mg/ml solo salió positivo para Allium
sativum exponiendo un halo de 12.3 mm frente a Staphylococcus
aureus, un halo de 10 mm frente a Enterococcus faecalis, y
Escherichia coli un halo de 10.3 mm. Se concluyó que el extracto

23
etanólico de ambos tuvo acción antimicrobiana frente a
Porphyromona gingivalis, también se determinó que el extracto
acuoso de Allium sativum a la concentración de 150mg/ml
mostró actividad frente Staphylococcus aureus, Enterococcus
faecalis y Escherichia coli. (11)

Mnayer D., Sylivie A., Tixier F., Petitcolas E., Hamieh T.,
Nehme N., et al. COMPOSICIÓN QUÍMICA, ACTIVIDAD
ANTIBACTERIAL Y ANTIOXIDANTE DE SEIS ACEITES
ESENCIALES DE LA FAMILIA Alliaceae. Investigación realizada
por la Universidad de Avignon, Francia, 2014. El objetivo de esta
investigación fue determinar la composición química, actividad
antibacterial y antioxidante del aceite esencial de Allium sativum
(ajo), Allium cepa (cebolla), Allium porrum (poro), Allium
tuberosum (cebollin chino), Allium ascalonicum (chalota) y Allium
schoenoprasum (cebolleta), para la obtención de los aceites se
utilizó solo los bulbos de cada vegetal, se extrajeron por el
sistema Braulio Turbo, la actividad antioxidante y de eliminación
de radicales fueron probadas por medio de los ensayos Folin-
Ciocalteu y 2,22-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH), la actividad
antimicrobiana fue probada con 5 bacterias comunes en que se
transmiten por alimentos, para ello se aplicó la técnica de disco
difusión, en los resultados el más eficaz fue aceite esencial de
ajo para Staphylococcus aureus y Listeria monocytogenes que
mostraron zonas de inhibición de 20.0 mm y 23.0 mm, los
siguientes fueron los cebollines chinos y cebolla que inhibieron
4 bacterias los más sensibles fueron Campylobacter jejuni y
Staphylococcus aureus, con la cebolleta se obtuvo zonas de
inhibición de 21.0 y 18.5 mm para Campylobacter jejuni y
Staphylococcus aureus mientras que los aceites esenciales del
puerro y cebollino fueron activos en 2 bacterias, con zonas de
inhibición para Staphylococcus aureus de 10.0 y 11.5 mm

24
respectivamente y para Campylobacter jejuni de 9.3 y 10.3 mm,
se llegó a la conclusión que los miembros del género Allium son
antibacterianos pero el ajo, cebolla y cebollino son más fuertes
posiblemente por la presencia de los compuestos de azufre en
sus composiciones. (12)

Dávila R., Sosa R., Navarro A., Téllez V. y Lazcano M.


EVALUACIÓN in vitro DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA
DE UN EXTRACTO OLEOSO DE PORO (Allium ampeloprasum
var. porrum). Investigación realizada por la Universidad
Autónoma de Puebla, México, 2013. Tuvieron por objetivo
determinar si el extracto oleoso de Allium ampeloprasum var.
porrum (poro) presenta actividad frente a Escherichia coli,
Staphylococcus aureus y Bacillus cereus, utilizaron los bulbos
previamente desecados, se elaboró un extracto etanólico y un
extracto oleoso, para determinar la actividad antibacteriano se
utilizó la difusión en agar siguiendo el método Kirby Bauer, se
emplearon penicilindros conteniendo 100µl del extracto al 10%.
Para evaluar la cinética de crecimiento se utilizó un baño con
agitación de 50 rpm y se midió las absorbancias cada hora por 9
horas. En la evaluación para el extracto etanólico, no mostró
actividad antibacteriana, en el caso del extracto oleoso destacó
un halo de 8.4 cm para Escherichia coli mientras que para
Staphylococcus aureus se obtuvo un halo de 7.4 cm, para
evaluar las cinéticas de crecimiento se trabajarón 3
concentraciones 0.4%, 0.2% y 0.1% la mejor concentración para
Escherichia coli fue de 0.2% con un porcentaje de 91.89%, y la
mejor concentración fue de 0.4% con un 72.65 y 65.13% frente
a Staphylococcus aureus y Bacillus cereus respectivamente, con
todo ello se llegó a la conclusión de que el poro contiene
principios antimicrobianos de origen no polar, por ello el extracto
oleoso mostró mejores resultados, también se concluye que la

25
bacteria más sensible al extracto oleoso de poro fue Escherichia
coli que fue inhibida en un 91%. (13)

2.2. Bases teóricas

2.2.1. Herbolaria
La herbolaria fue el primer sistema médico utilizado por el
hombre, el conocimiento acerca del uso de ciertas plantas se
transmitió de forma oral de una generación a otra, se cree que
los primeros libros sobre hierbas los hicieron los caldeos, hace
aproximadamente 5000 a.C. (14)

La medicina como oficio inició con los egipcios, quienes poseían


un conocimiento más amplio sobre la utilización de ciertas
plantas con fines medicinales prueba de ello están los textos
médicos como el Papiro Edwin Smith que data del año 2980-
2700 a.C. en él se encontraron cerca de 700 fórmulas
magistrales. (14)

Uno de los sistemas medicinales más antiguos es la ayurveda,


originado en la India, este buscaba el equilibrio entre cuerpo
mente y espíritu, y los remedios que emplearon fueron a base
de hierbas. (14,15)
La herbolaria es un conjunto de conocimientos o saberes
aplicados a la utilización de hierbas y recursos vegetales tanto
para la prevención como tratamiento de ciertas enfermedades,
en varios lugares se conoce como medicina herbal, fitoterapia o
medicina alternativa, es usada mayormente en el tratamiento de
infecciones respiratorias, enfermedades crónicas como
hipertensión, diabetes y algunos tipos de gastritis. (15)

26
La herbolaria tiene sus bases en el conocimiento tradicional que
fue asimilando el hombre al estar en contacto con la naturaleza
y por la necesidad que este tuvo, este conocimiento adquirido ha
ido desarrollándose con el pasar de los años, se han investigado
de manera más amplia, con el fin de mejorar la forma y uso y
hoy en día la ciencia es capaz de confirmar la presencia de
ciertas sustancias y compuestos químicos con acciones
farmacológicas en ellos. (16)

2.2.1.1. Preparados con plantas medicinales

 Aceites medicinales: Generalmente se emplea el


de oliva, y se le incorpora el tipo de planta del que
se necesite el efecto, la absorción por el cuerpo es
más rápida. (17)
 Extractos: Se combina la hierba con un disolvente
y se deja reposar unos días, luego se procede a
filtrar. (17)
 Maceración: Consiste en introducir la planta en
agua o aceite para poder extraer sus principios
activos solubles. (18)
 Jarabes: Son preparados de distintas hierbas
maceradas en un almíbar suave. Con un agradable
sabor dulce especialmente diseñados para niños,
consiste en integrar el extracto vegetal ya sea
obtenido por infusión, decocción a un jarabe simple,
preparado previamente. (19)
 Polvo: Se seca la hierba y se tritura hasta conseguir
el polvo, este luego es encapsulado. (19)
 Tinturas: Compuesta por alcohol, agua y la hierba,
el alcohol actúa como conservante por lo que puede

27
durar años. Son una excelente opción para
preservar las propiedades de las hierbas. (20)
 Infusiones: Se mezcla la hierba en agua hirviendo
dejando reposar unos minutos. (21)
 Cataplasma: Las hierbas se someten a una
pequeña cocción se envuelven en gasas y son
aplicadas directamente sobre la parte afectada. (21)

2.2.1.2. Especies de interés medicinal


Las especies del género Allium pertenecientes a la
familia de las liliáceas, han sido muy empleadas en la
medicina tradicional, son plantas perennes y vivaces
muy polimorfas con rizomas y bulbos, se caracterizan
por contener aceites esenciales y compuestos
sulfurados que sintetizan numerosos alcaloides. (22)

Muestran una gran utilidad para el hombre como plantas


medicinales, comestibles y algunas que se pueden
utilizar en la industria, los usos tradicionales que se les
otorga son: adelgazante, cardiotónicos, sirve en
afecciones respiratorias, hepáticas, tratamiento de
anemia, antihelmíntico, antimicóticos, expectorante,
antiprurriginoso, antirreumático, para tratamiento de
estreñimiento, sus propiedades se deben a la presencia
de fructosanas, además del aceite esencial, rico en
compuestos azufrados, inulina, sales minerales como:
calcio, hierro, sodio, azufre, potasio, fósforo,
flavonoides, taninos, ácido glicólico, y trazas de
vitaminas A, B y C. (23)

28
2.2.2. Allium porrum L. (poro)

2.2.2.1. Origen
El origen del Allium porrum L. (poro) es incierto, al
parecer procede de Europa y Asia Occidental,
distribuido a lo largo de las regiones del hemisferio norte,
aproximadamente hace unos 3000 a 4000 años a.C.
habría sido empleado como alimento y medicina en
tiempo de los celtas, en zonas de Egipto, Mesopotamia
e Israel y en la edad media su consumo se extendió por
toda Europa y de allí prosiguió extendiéndose su
consumo a los demás países del mundo. (24)

2.2.2.2. Generalidades
El Allium porrum L. (poro), también se le conoce como
puerro o ajoporro, perteneciente a la familia de liliáceas
al género Allium el cual agrupa también a la cebolla, ajo,
y cebollino. El poro tiene una altura de 50 cm
aproximadamente y un grosor que varía de 3 a 5 cm, sus
hojas son lanceoladas y largas que forman un cilindro,
poseen un bulbo de color blanco membranoso de forma
oblonda, donde se nota pequeñas raicillas color blanco
que pueden llegar a medir hasta 20 cm. (25)

Es una planta anual, da en cualquier época,


normalmente se desarrolla en climas templados y
húmedos, pero también puede resistir climas fríos, para
su cultivo el suelo debe ser profundo y bien drenado para
que permita el correcto desarrollo de los bulbos, además
de ser rico en materia orgánica, para que absorba los
nutrientes necesarios para su crecimiento, se cosecha

29
según la necesidad, pero tiene que alcanzar una altura
mínima de 25 cm. (25,26)

A continuación en la Figura Nº 1 se muestra el Allium


porrum L. (poro).

Figura Nº 1: Allium porrum L. (poro)


Fuente: https://www.buenasalud.net/2013/11/22/los-nutrientes-del-
puerro.html. 2018.

30
2.2.2.3. Clasificación taxonómica
El cuadro Nº 1 presenta la clasificación taxonómica del
Allium porrum L. (poro).

Cuadro Nº 1
Clasificación taxonómica

Fuente: Museo de recursos naturales Universidad Nacional


Mayor de San Marcos 2018.

2.2.2.4. Composición química


Los principales componentes de Allium porrum L. (poro)
son: el disulfuro de dipropilo, dipropilo trisulfuro,
disulfuro de propilmetil y metiltrisulfuro de propilo. (27)

2.2.2.5. Composición nutricional


El Allium porrum (poro) es un vegetal que presenta gran
aporte en vitaminas y minerales.

31
A continuación el Cuadro Nº 2 detalla la composición
nutricional de Allium porrum L. (poro).

Cuadro Nº 2
Composición Nutricional de Allium porrum L. (poro)

Fuente: http://www.fen.org.es/mercadoFen/pdfs/puerro.pdf. 2018.

32
El poro contiene gran cantidad de folatos los cuales
previenen la anemia, disminuyen también las
probabilidades de presentar enfermedades
cardiovasculares, mantiene la piel saludable, ayudan
también a la síntesis de anticuerpos para mejorar la
respuesta del sistema inmune al igual que la vitamina C,
que es un potente antioxidante que ayuda a la
elaboración de colágeno, a la vez mejora apariencia de
piel y mantiene en buen estado las articulaciones,
además permite una mejor absorción de hierro
contenidos en los alimentos. (28,29)

El potasio que contiene es necesario para la transmisión


nerviosa y también para la actividad muscular, el
magnesio ayuda a regularizar el metabolismo del
cuerpo, interviene en el buen funcionamiento de
músculos y nervios. (29)

2.2.2.6. Usos tradicionales


Por su alto contenido en fibra permite saciar el
organismo de esta manera ayuda a la reducción de peso
y también se utiliza para casos de estreñimiento debido
a los mucílagos que contiene y gracias a su aporte de
calcio ayuda a preservar los huesos sanos. (30)

El bulbo es un buen antihelmíntico, expectorante,


antiasmático y antiséptico, también es usado para la
hemorragia nasal. (30)

Su contenido en azufre hace que el poro sea un buen


diurético dentro de estos compuestos sulfurados que

33
posee se encuentra la alicina la cual ayuda a eliminar el
colesterol del organismo, a su vez se le atribuye
propiedades como: antibacteriano, hipotensor e
hipoglucemiante; este compuesto por acción de la
enzima alicinasa se convierte a aliína componente que
aún conserva las propiedades antimicrobianas, esta
enzima al parecer se activa al cortar o machacar el
vegetal y posee una vida media de 2 a 4 días; el poro a
su vez presenta quercetina, un flavonoide que cumple
función antioxidante, retardando el envejecimiento
celular. (30,31)

2.2.3. Extracción de recursos vegetales


Es una operación o técnica utilizada para separar una materia
orgánica de su fuente natural o de una mezcla. (32)

2.2.3.1. Métodos de extracción


La Figura Nº 2 muestra los diferentes métodos de
extracción.

Figura Nº 2: Métodos de extracción


Fuente: https://es.slideshare.net/Rennie533/extraccin-de-
principios-activos-de-planta. 2018.

34
A. Extracción mecánica
Consiste en sustraer principios activos adheridos en
los tejidos vegetales, se puede realizar por 2
métodos: el primero es por incisión, en el cual se
realiza cortes en la superficie de la planta para
extraer el zumo; y el método por expresión, el cual
consiste en presionar fuertemente la droga para así
poder obtener sus jugos, para este tipo de extracción
puede utilizarse prensas o exprimidores. (33)

La Figura Nº 3 muestra una prensa mecánica.

Figura Nº 3: Prensa mecánica


Fuente:https://www.researchgate.net/figure/Prensa-
mecanica-de-tornillo-para-extraccion. 2018.

B. Extracción por destilación


Comprende el método por hidrodestilación y arrastre
de vapor este método emplea fuente de calor que
favorece la separación de componentes debido a sus
diferentes volatilidades, en el los vapores producidos
se dirigen hacia un condensador, donde el vapor se

35
refresca para luego condensarse, de tal manera que
el destilado obtenido no es puro. (33)

En la Figura Nº 4 se muestra el equipo para


destilación por arrastre de vapor.

Figura Nº 4: Equipo para destilación por arrastre con vapor


Fuente: https://fernandoramossuarez.wordpress.com/. 2018.

C. Extracción con disolventes


Consiste en el contacto directo de una droga con el
disolvente en el cual sea soluble, este puede ser
agua, mezclas hidroalcohólicas y otros disolventes
orgánicos como: acetona, éter, propilenglicol entre
otros, es preferible trabajar con la droga desecada
para asegurar una máxima extracción de sus
principios activos. Entre los tipos tenemos a las
discontinuas o simultáneas, en las cuales se
introduce la droga en el disolvente y se dispersaran
los principios activos en todas las direcciones, en

36
estas se incluye la maceración, infusión y decocción;
el otro tipo es la extracción continua o también
conocida como progresiva, en esta el disolvente se
va renovando y la liberación de principios activos se
da solo en una dirección, permite mayor obtención de
principios activos, en este grupo se encuentra el
método de percolación y soxhlet. (34)

En la Figura Nº 5 se muestra el método de extracción


por Soxhlet.

Figura Nº 5: Método de extracción por soxhlet


Fuente: http://kimikohuaxtla.blogspot.com/2009/06/equipo-
soxhlet.html. 2018

37
El Cuadro Nº 3 muestra las características de cada
tipo de extracción con disolventes.

Cuadro Nº 3
Características de los tipos de extracción con
disolventes

Fuente: https://claravalenzuela.com/plantas-medicinales/.
2018.

2.2.3.2. Extractos
Preparaciones obtenidas por concentración de líquidos
extractivos, existen varios tipos según sea la
concentración y consistencia, entre ellos tenemos:

A. Tinturas: Son soluciones hidroalcohólicas o


alcohólicas que contienen a los principios activos
obtenidas a temperatura ambiente. (36)

38
B. Extractos fluidos: Son preparaciones liquidas de los
principios activos concentrados, presentan similar
concentración de la droga de origen, los disolventes
pueden ser etanol o agua. (37)

C. Extracto blando: Contiene al principio activo en una


superior a la droga, pero son poco estables, y de difícil
manipulación. (38)

D. Extracto seco: Tiene consistencia de polvo, son


estables y manipulables, pero fotosensibles. (39)

E. Preparados con soluciones extractivas: Son


obtenidas por agotamiento de drogas vegetales con
solventes adecuados (39), entre ellos tenemos:

 Extracto hidroalcóholico: Se emplea como


solvente alcohol puro de 96º y agua, la función del
alcohol es extraer la máxima cantidad de
sustancias que le dan las propiedades a la planta,
son bastante concentrados y contienen
sedimentos característicos de la planta como
aroma y color. (40)

 Extracto acuoso: El solvente empleado es el


agua, su concentración es menor que el
hidroalcóholico, el color y aroma son suaves y no
presenta sedimento. (40)

2.2.4. Enfermedades transmitidas por alimentos (ETAs)


Las ETAs son adquiridas por las personas al consumir un
alimento contaminado por microorganismos como, virus,
bacterias o parásitos, comenzarán a presentar los primeros

39
síntomas alrededor de 2 a 6 horas, el tiempo de aparición varía
dependiendo del tipo de microorganismo que entró en contacto
con el organismo. (41)

Según la OMS, los alimentos involucrados con más frecuencia


en casos de ETAs son aquellos de origen animal como: carne
bovina, carne de cerdo, carne de aves, huevos, pescados,
crustáceos, moluscos y productos lácteos. (42)

Para que una ETA ocurra no basta con haber consumido el


patógeno o sus toxinas en el alimento, también dependerá de
haber consumido la cantidad suficiente del patógeno para que
desencadene la enfermedad, además el alimento contaminado
debe tener características óptimas para el desarrollo del
patógeno y debe haber estado sometido a temperaturas ideales
para que el patógeno se multiplique o produzca sus toxinas. (43)

2.2.4.1. Tipos de enfermedades producidas por ETAs

A. Infecciones: Se origina por la ingesta de alimentos


que contienen organismos vivos perjudiciales, como
virus, bacterias, parásitos. (44)

B. Intoxicaciones: Son producidas por ingerir


alimentos que contienen venenos o tóxicos
producidos por bacterias, hongos, consumidos de
forma accidental. (44)

C. Toxi-infecciones: Son originadas por la ingestión de


alimentos con contenido de microorganismos los
cuales son productores de toxinas. (44)

40
2.2.4.2. Causas
La causa principal de una ETA es la contaminación de
los alimentos que se debe a la mala manipulación y
conservación de estos, los grupos más vulnerables son
niños, ancianos y embarazadas. (45)

La Figura Nº 6 muestra algunos factores que causan la


contaminación de los alimentos.

Figura Nº 6: Factores causantes de contaminación de alimentos


Fuente:https://elclubdelasalud.wordpress.com/2011/08/07/contami
nacion-de-los-alimentos/. 2018.

2.2.4.3. Prevención de ETAs


Los alimentos antes de su consumo pueden
contaminarse en diferentes etapas, por ello la OMS
recomienda realizar 5 pasos:

41
 Mantener la limpieza de sitios donde se preparan
los alimentos y la higiene de las manos.
 Separar alimentos crudos de los cocidos, debido a
que pueden contaminarse.
 Cocinar adecuadamente los alimentos, evitando
consumir comidas recalentadas.
 Mantener los alimentos a temperaturas debidas
para evitar la proliferación de microorganismos.
 Utilizar alimentos seguros, que estén dentro de la
fecha de validez. (46)

A continuación la Figura Nº 7 muestra las medidas para


preservar la inocuidad de los alimentos.

Figura Nº 7: Medidas para preservar la inocuidad de alimentos


Fuente:http://www.laloncherademihijo.org/padres/inocuidad-
alimentos-salud.asp. 2018.

2.2.5. Bacterias
Son microorganismos unicelulares procariotas, el tamaño de las
bacterias es variable de 1 a 20 μm aproximadamente, algunas
pueden modificar su tamaño debido a factores exógenos como,
edad de cultivo o nutrientes disponibles, presentan forma
esférica, espiral o abastonada, dependiendo de su pared celular,

42
que es la encargada de brindarles elasticidad y rígidez, pueden
encontrarse formando cadenas, cúmulos o simplemente como
células aisladas. (47)

La Figura Nº 8 muestra las distintas formas bacterianas.

Figura Nº 8: Formas bacterianas


Fuente:http://profesamaniego.blogspot.com/2016/08/principales-formas-de-
las-bacterias.html. 2018.

2.2.5.1. Staphylococcus aureus

A. Generalidades
Son cocos Gram positivos, anaerobios facultativos,
forman colonias grandes, son β-hemolíticos, catalasa
positivo y coagulasa positivo, fermentan
carbohidratos, están dispuestos en forma de racimo,
suelen tolerar concentraciones elevadas de sal. (48)

43
Su tamaño varia de 0,8 a 1,5 μm de diámetro, forma
parte de la flora normal, son sensibles a temperaturas
elevadas, en superficies secas pueden sobrevivir
largo tiempo sin ningún problema, se encuentra hasta
un 25% en el cuerpo, formando parte de la microflora
normal, tienden a prevalecer más en personas con
infección de piel, nariz, ojos y garganta, puede
producir desde una leve intoxicación alimentaria o
alguna infección en la piel hasta infecciones graves
diseminadas como: bacteriemia y endocarditis, la
intoxicación alimentaria es muy frecuente debido a la
contaminación de los alimentos producida por una
mala manipulación o contaminados en el proceso de
elaboración, o una mala conservación, por ello es
necesario una adecuada cocción y pasteurización de
los alimentos. (48)

Las fuentes de contaminación son las ensaladas


crudas, productos de pastelería, carnes, huevos y
leche sin proceso de pasteurización. (49)

44
La Figura Nº 9 muestra al Staphylococcus aureus
visto por microscopio electrónico.

Figura Nº 9: Staphylococcus aureus visto por microscopio


electrónico.
Fuente: https://media.gettyimages.com/. 2018.

B. Mecanismo de acción
Staphylococcus aureus produce variedad de
proteínas de superficie que son las causantes de la
adherencia de las bacterias en el tejido hospedador y
originan destrucción tisular mediante la fabricación de
sus toxinas y enzimas hidrolíticas, todo ello favorece
su capacidad para colonizar y causar enfermedades
en el ser humano. (50)

El Cuadro Nº 4 muestra los componentes de la


estructura de Staphylococcus aureus y sus efectos
biológicos.

45
Cuadro Nº 4
Componentes de la estructura de
Staphylococcus aureus

Fuente: https://es.slideshare.net/marjacobo/staphylococcus-
streptococcus. 2018.

Entre las toxinas estafilocócicas tenemos:

 Citotoxinas: Producen la alteración de la


musculatura lisa de los vasos sanguíneos y suele
ser tóxica para las células sanguíneas y
hepatocitos (50)

 Enterotoxinas: Tienen un diseño ideal para


provocar enfermedades de origen alimentario, son
estables y soportan la hidrólisis por las enzimas

46
gástricas y yeyunales, estas toxinas estimulan a los
mastocitos para que haya una liberación de
mediadores de la inflamación, esto hace
incrementar el peristaltismo intestinal y por ende
provoca la pérdida de líquidos, induciendo también
a vómitos. (50)

 Exfoliativas: Estas toxinas se caracterizan por


romper puentes intercelulares de la serina de la
epidermis, lo que produce una dermatitis
exfoliativa. (51)

 Leucocidina: Es una exotoxina, esta actúa


originando poros que alteran la permeabilidad
celular para el potasio entre otros cationes. (51)

 Toxina del shock tóxico (TSST-1): Implicada en


la patogenia del mismo nombre que conlleva a
evacuaciones continuas y deshidratación. (51)

El Cuadro Nº 5 muestra las toxinas de


Staphylococcus aureus y sus efectos biológicos.

47
Cuadro Nº 5
Toxinas de Staphylococcus aureus

Fuente: https://es.slideshare.net/marjacobo/staphylococcus-
streptococcus. 2018.

Entre las enzimas más importantes tenemos:

 Hialuronidasa: Actúa a nivel del tejido conjuntivo


hidrolizando los ácidos hialurónicos produciendo
de esta manera la diseminación. (52)

 Coagulasa: Convierte el fibrinógeno en fibrina,


puede generar alrededor del absceso
estafilocócico una capa de fibrina de tal forma que
estos microorganismos quedan protegidos de la
fagocitosis. (53)

48
 Estafiloquinasas: Se encargan de degradar la
fibrina y de esta manera contribuyen a la invasión
de tejidos vecinos. (53)

 Lipasas: Ayudan en la diseminación del


microorganismo por el tejido cutáneo y
subcutáneo. (53)

El Cuadro Nº 6 muestra las enzimas de


Staphylococcus aureus y sus efectos biológicos.

Cuadro Nº 6
Enzimas de Staphylococcus aureus

Fuente: https://es.slideshare.net/marjacobo/staphylococcus-
streptococcus. 2018.

C. Enfermedades que produce


 Infecciones de la piel: Como forúnculos que son
la acumulación de pus formado en una glándula
sebácea o un folículo piloso, el impétigo que es una
erupción cutánea caracterizada por la aparición de

49
ampollas grandes, también se encuentra la celulitis
que es una infección en las capas profundas de la
piel y la dermatitis estafilocócica que ataca
mayormente a bebes y niños provoca fiebre y
erupción cutánea. (54)

 Septicemia: Es cuando la bacteria ingresa en el


torrente sanguíneo pudiendo alcanzar al cerebro,
pulmones, corazón y huesos. (55)

 Endocarditis: Es una enfermedad febril, que va


acompañada de abscesos viscerales, pericarditis,
embolia y hemorragia de las conjuntivas, se puede
desarrollar principalmente en adictos a las drogas
intravenosas y en pacientes con prótesis de
válvulas cardíacas. (55)

 Síndrome de la piel escaldada: Originada por la


acción de toxinas exfoliatinas, es una dermatitis
que produce descamación en la capa superior de
la piel y la formación de grandes ampollas,
generalmente se desarrolla en bebes y niños
menores de 5 años. (55)

 Síndrome del choque tóxico: Es causada por las


toxinas que originan algunas especies de
estafilococos está asociado con cirugías y heridas
en la piel. (56)

 Intoxicación alimentaria: Los estafilococos son la


causa más frecuente de intoxicación, los síntomas
aparecerán de 1 a 6 horas, son de comienzo
brusco y pueden durar hasta las 48 horas, hay

50
presencia de náuseas, vómitos, diarrea, dolor
abdominal, fiebre y pérdida de apetito, el
tratamiento estará enfocado en reponer líquidos y
electrolitos perdidos por el vómito y diarrea,
generalmente no se requieren antidiarreicos, los
niños pequeños pueden necesitar líquidos
intravenosos. (57)

2.2.5.2. Escherichia coli

A. Generalidades
Es una bacteria de la familia Enterobacteriaceae,
bacilo Gram negativo, anaerobio facultativo, no forma
esporas, fermentador de azúcares, produce la
fermentación de la lactosa con elaboración de ácido y
gas. (58)

La Figura Nº 10 muestra a Escherichia coli vista por


microscopio electrónico.

Figura Nº 10: Escherichia coli vista por microscopio electrónico.


Fuente: http://semibactescherichiacoli.blogspot.com. 2018.

51
B. Grupos patógenos productores de gastroenteritis

 E. coli enterotoxigénica (ECET)


Se origina principalmente por el consumo de
alimentos y agua que fueron contaminados por
heces, con mayor incidencia en niños pequeños,
se caracteriza por ocasionar la diarrea del viajero,
esta bacteria produce enterotoxinas que inducen a
una hipersecreción de agua y electrolitos dentro del
lumen intestinal, originando diarreas acuosas,
vómitos, espasmos abdominales y náuseas. (59)

 E. coli enteropatógena (ECEP)


Son la principal causa de diarreas infantiles en
países pobres, la transmisión se da de persona a
persona, la enfermedad se caracteriza por
constantes evacuaciones acuosas o
sanguinolentas que llegan a ser graves y
prolongadas, la infección se da por la destrucción
de microvellosidades del intestino delgado esto
debido a la adhesión de estas bacterias a las
células epiteliales. (59)

 E. coli enteroagregativa (ECEA)


Se encuentra asociada con la diarrea acuosa
crónica con presencia de moco y fiebre en niños,
se caracteriza por la producción de estructuras
denominadas fimbrias de adherencia, las cuales se
adhieren a las células del intestino originando una
reducción del tamaño de las vellosidades, o
también produciendo una necrosis hemorrágica y a
su vez la respuesta inflamatoria que conlleva a la

52
estimulación del intestino para incrementar la
secreción de moco la cual permite la formación de
una biopelícula alrededor de las bacterias que les
sirve como protección. (59)

 E. coli enterohemorrágica (ECEH)


Es más frecuente en meses templados, la infección
se da por el consumo de carnes poco cocidas,
leche no pasteurizada, alimentos contaminados
por heces, la enfermedad provocada por esta
bacteria va desde una diarrea leve hasta una colitis
hemorrágica en la cual hay presencia de dolor
abdominal intenso y diarrea sanguinolenta, los
síntomas en pacientes no tratados y sin
complicaciones pueden desaparecer de 4 a 10
días, sin embargo se puede complicar el cuadro,
produciéndose el síndrome hemolítico urémico
(SHU), que es un transtorno caracterizado por
insuficiencia renal aguda y trombocitopenia que
puede llevar a la persona a la muerte. (60)

 E. coli enteroinvasiva (ECEI)


Esta bacteria causa la conocida disentería bacilar,
esta infección se caracteriza por presencia de
sangre y moco en las heces, acompañado de
calambres abdominales, malestar general y fiebre,
el cuadro es parecido al de infecciones producidas
por Shigella, sin embargo esta bacteria puede
ingresar y proliferar en las células epiteliales de la
mucosa del colon, incluso puede llegar a matar las
células. (60)

53
D. Infecciones extraintestinales

 Infecciones del tracto urinario (ITU)


Se originan porque la mayoría de bacilos que
producen ITU se encuentran en el colon, ascienden
hasta la vejiga contaminando la uretra, pudiendo
alcanzar el riñón o próstata, esto se origina gracias
a la producción de adhesinas que se unen a las
células que recubren la vejiga y tracto urinario
superior, evitando así ser eliminadas durante la
micción, son productoras de hemolisina, la cual lisa
los eritrocitos originando la estimulación de la
respuesta inflamatoria. (61)

 Septicemia
Se produce por las bacterias provenientes de
infecciones del tracto urinario o digestivo las cuales
producen una infección intraabdominal pudiendo
ser originados por una fuga gastrointestinal. (61)

2.2.6. Antibacterianos
Es un principio activo capaz de inhibir el crecimiento o eliminar
las bacterias o interferir en las funciones vitales de la bacteria sin
dañar al organismo infectado, puede ser de origen biológico,
semisintético o sintético, según el efecto que causan en la
bacteria pueden ser: bactericida, cuando son capaces de acabar
por completo a la bacteria, o bacteriostático, cuando inhiben el
crecimiento bacteriano. (62)

2.2.6.1. Mecanismo de acción


 Actúan sobre la pared celular de la bacteria: para
impedir su crecimiento.

54
 Actúan sobre la membrana celular: la vuelven
permeable y de esta manera los principios activos
son capaces de ingresar.
 Actúan sobre el ADN de las bacterias: de manera
que las bacterias quedan dañadas y mueren.
 Actúan sobre los ribosomas: que son los encargados
de sintetizar las proteínas. (63)

2.2.6.2. Resistencia a los antibacterianos


La resistencia a los antibacterianos se produce cuando
las bacterias están expuestas a estos y sufren cambios
generalmente por modificaciones genéticas, este
proceso en el organismo humano se ve acelerado por el
uso inadecuado o excesivo de antibacterianos que están
en constante contacto con las bacterias. (64)

La resistencia a los antibacterianos es un peligro para la


prevención y el tratamiento de diversas infecciones por
la prolongación de las enfermedades, la necesidad de
realizar más pruebas y la utilización de nuevos fármacos
con precios elevados aumentan el costo de la atención
sanitaria y por ende personas de escasos recursos no
podrán tener acceso. (64)

2.2.6.3. Antibacterianos naturales


Son aquellos que proceden del reino vegetal y son
capaces de prevenir o curar enfermedades, a su vez
estimulan las defensas naturales del organismo, no
dañan la flora bacteriana normal, son más económicos y
fáciles de conseguir. (65)

55
2.2.7. Determinación de la sensibilidad bacteriana: Difusión

Para determinar la sensibilidad bacteriana se utiliza el método


de difusión del antibacteriano para ello se utilizan métodos de
cilindro vertical, disco o excavación a través de un sembrado
sobre agar contenido en una placa Petri. Debido a que todas las
bacterias no poseen la misma sensibilidad frente a los distintos
tipos de sustancias antibacterianas, la evaluación de esta
sensibilidad ayuda para hacer una mejor selección del
compuesto más apropiado para el tratamiento de una infección
bacteriana. (66)

2.2.7.1. Difusión en agar


El antibiograma realizado por el método de difusión en
agar consiste en el enfrentamiento de una bacteria
inoculada sobre la superficie de una placa de agar con
una solución o extracto con propiedades antibacterianas
contenidas en discos de papel, el medio de cultivo
mayormente empleado es el de Mueller-Hinton, el pH
adecuado del medio debe estar entre 7.2 y 7.4, el grosor
de los discos debe estar entre un promedio de 4 y 6 mm,
deben estar protegidos de la humedad y el inóculo
bacteriano debe tener una turbidez similar al 0.5 de la
escala McFarland. Los discos que contienen la solución
se colocan sobre la superficie del agar, estos deben
estar a una distancia de 20 mm y no deben estar a
menos de 15 mm de los bordes de la placa Petri, una
vez colocada la solución sobre la placa se deja 15
minutos a temperatura ambiente para que se pueda
difundir el antibiótico, la incubación debe ser a 37 ºC por
un lapso de 18 a 24 horas. (67)

56
La Figura Nº 11 muestra el procedimiento del
antibiograma.

Figura Nº 11: Procedimiento del antibiograma


Fuente:https://es.slideshare.net/nataliaizurieta/laboratorio-no4-
antibiograma. 2018.

2.2.7.2. Difusión en pozos


Este método consiste en depositar el inóculo bacteriano
el cual debe poseer la turbidez de 0.5 en escala
McFarland, sobre la superficie del agar Mueller Hinton,
seguidamente se hacen las perforaciones o también
llamados pozos, sobre la superficie con ayuda de un
sacabocados estéril el cual posee 6 mm de diámetro y
en cada uno de ellos se deposita de 10 a 25 µl de los
antibacterianos a evaluar, se deja reposar por espacio
de 30 minutos para que seque, finalmente se lleva a
incubar a una temperatura de 35 ºC por 24 horas,
posteriormente se miden los halos de inhibición. (68,69)

57
La Figura Nº 12 muestra el método de difusión en pozos.

Figura Nº 12: Difusión en pozos


Fuente: http://repository.lasallista.edu.co/dspa
ce/bitstream/10567/77/1/367-394.pdf. 2018.

2.3. Definición de términos básicos

 Herbolaria: Es el estudio de propiedades y la forma de aplicación


de plantas medicinales. (14)
 Rizoma: Tallo subterráneo que contiene varias yemas que crecen
de forma horizontal las cuales poseen nudos desde donde nacen
las raíces y brotes. (22)
 Antihelmíntico: Usado en el tratamiento de parásitos intestinales
como helmintos y lombrices. (23)
 Mucílago: Sustancia de consistencia viscosa que contienen
algunos vegetales. (30)
 Antiséptico: Sustancia capaz de destruir gérmenes. (30)
 Bulbos: Órgano vegetal protuberante mayormente subterráneo
formado por un brote redondeado. (30)
 Solvente: Sustancia en la que se diluye un soluto. (40)
 Patógeno: Agente causante de enfermedades. (43)

58
 Proliferación: Incremento de la cantidad de un organismo vivo de
forma rápida. (46)
 Catalasa: Enzima que cataliza la reacción de descomposición del
peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. (52)
 Pasteurización: Procedimiento por el cual se somete un alimento
generalmente líquido a 80 ºC durante un período corto para luego
enfriarlo rápidamente, con la finalidad de destruir microorganismos
sin alterar el producto. (53)
 Toxina: Sustancia tóxica producida en el cuerpo humano por
acción de ciertos microorganismos. (55)
 Septicemia: Infección grave y generalizada por todo el organismo
por el paso de patógenos a la sangre. (59)
 Resistencia: Estado firme, soportar una fuerza de oposición por un
tiempo determinado. (64)
 Antibiograma: Método por el cual se determina la sensibilidad de
los gérmenes a los antibióticos. (67)
 Inóculo: Suspensión de microorganismos que se administran a un
tejido vivo o aun medio de cultivo. (68)

59
CAPÍTULO III
HIPÓTESIS Y VARIABLES

3.1. Formulación de hipótesis

3.1.1. Hipótesis general


El extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) presenta actividad
antimicrobiana frente a bacterias tipificadas.

3.1.2. Hipótesis específicas


 El extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) a diferentes
concentraciones presenta actividad antimicrobiana frente a
Staphylococcus aureus.
 El extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) a diferentes
concentraciones presenta actividad antimicrobiana frente a
Escherichia coli.

60
3.2. Identificación de variables

El Cuadro Nº 7 muestra la identificación de las variables.

Cuadro Nº 7
Identificación de variables

VARIABLE INDEPENDIENTE Extracto acuoso de Allium porrum L.


(poro)

VARIABLE DEPENDIENTE Actividad antimicrobiana

Fuente: Elaboración propia 2018.

3.3. Operacionalización de variables

El Cuadro Nº 8 detalla la operacionalización de variables.

61
Cuadro Nº 8
Operacionalización de variables

VARIABLE DEFINICIÓN DIMENSIONES INDICADORES UNIDAD DE


INDEPENDIENTE CONCEPTUAL MEDIDA

Extracto acuoso Extracto líquido Concentración 100 % Porcentaje


de Allium cuyo solvente es (mg/ml)
porrum L. (poro) el agua 80 %

40 %

VARIABLE DEFINICIÓN DIMENSIONES INDICADORES UNIDAD DE


DEPENDIENTE CONCEPTUAL MEDIDA

Actividad Capacidad de Halo de Diámetro de mm


antimicrobiana destruir inhibición halo de
bacterias o inhibición
inhibir su
crecimiento

Fuente: Elaboración propia 2018.

62
CAPÍTULO IV
METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN

4.1. Tipo y nivel de investigación

4.1.1. Tipo de investigación


 Analítica: Porque busco establecer la relación entre las
variables, con el ánimo de contribuir al desarrollo del
conocimiento científico.
 Longitudinal: Porque la variable independiente es medida
en varios momentos.
 Prospectiva: Porque la recolección de datos
correspondiente a los hechos se dió una vez iniciada la
investigación.

4.1.2. Nivel de investigación


 Explicativo: Ya que busca explicar las razones que
ocasionan ciertos fenómenos, identificando y analizando los
causales y sus resultados.

63
4.2. Método y diseño de la investigación

4.2.1. Método de la investigación


 Deductivo: Porque va de lo general a lo específico.

4.2.2. Diseño de la Investigación


 Experimental: Esta investigación responde a un diseño
experimental porque se manipula la variable independiente.

4.3. Población y muestra de la investigación

4.3.1. Población
Constituido por Allium porrum L. (poro) proveniente de El
Pedregal, departamento Arequipa, provincia de Caylloma,
distrito de Majes.

4.3.2. Muestra
La muestra fue de 30 ml de extracto acuoso que se logró extraer
de 500 g. de bulbos de Allium porrum L. (poro).

4.4. Técnicas e instrumentos de recolección de datos

4.4.1. Técnicas
 Extracción por expresión: Esta técnica es utilizada
principalmente para obtener principios activos que se
encuentran disueltos en los fluidos propios de la planta, sin
causarles alteración alguna en su composición. (33)
 Difusión en pozos: Técnica para evaluar la actividad
antibacteriana de plantas medicinales, que permite un mayor
contacto de la bacteria con la sustancia en estudio. (68, 69)
 Observación directa: Consiste en registrar la información
clave en las fichas de análisis.

64
4.4.2. Instrumentos
Ficha de recolección de datos. Ver el ANEXO Nº 2.

4.4.3. Procedimientos

4.4.3.1. Recurso vegetal


A. Recolección del recurso vegetal
Se recolectó 1.5 kg de Allium porrum L. (poro) de El
Pedregal, distrito de Majes, provincia de Caylloma, en
la ciudad de Arequipa, en el mes de agosto del
presente año.

B. Determinación botánica de la especie


Se realizó en el Museo de Historia Natural de la
Universidad Mayor de San Marcos.
Ver el ANEXO Nº 3

C. Obtención de la muestra
Se seleccionó el recurso vegetal a utilizar Allium
porrum L. (poro), luego se procedió a cortar las hojas y
las raicillas, la parte del bulbo y tallo se lavó con agua
destilada y se procedió a cortar solo la parte del bulbo
que fue la parte utilizada.

D. Elaboración del extracto acuoso


Se utilizó la técnica de extracción por compresión, para
lo cual se tomó 500 g de los bulbos de Allium porrum
L. (poro) y se procedió a rallar, luego se colocó sobre
una gasa estéril haciendo presión para extraer todo el
zumo, este fue recolectado en un vaso de precipitados
luego se procedió a filtrar con papel Whatman Nº3,

65
posteriormente del filtrado se envasó en un frasco de
vidrio color ámbar y se rotuló. (33)

E. Preparación de las concentraciones


El extracto acuoso que se logró obtener fue
considerado como la concentración al 100 % de allí se
procedió a realizar las diluciones con agua destilada
estéril para obtener las concentraciones de 80 y 40 %.

4.4.3.2. Determinación de la actividad antimicrobiana


El procedimiento se llevó a cabo en el Centro de Control
Analítico de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos
(CENPROFARMA). Ver el ANEXO Nº 4.

Se trabajó con cepas estándar ATCC (American Type


Culture Collection) de Staphylococcus aureus ATCC
6538 y Escherichia coli ATCC 8739. Ver el ANEXO Nº 5
y 6.

Primero se preparó la suspensión del inóculo, se


seleccionó las colonias pueden ser de 3 a 5, luego se
transfirió a un tubo conteniendo 5 ml de Mueller Hinton
con ayuda de un asa de siembra, seguidamente se
incubó a 35ºC para alcanzar una turbidez de 0.5 en la
escala de Mac Farland. (68)

Transcurridos 15 minutos de haber ajustado la turbidez


de la suspensión, se procedió a sumergir un hisopo
estéril en ella, seguidamente se inoculó sobre la
superficie con agar Mueller Hinton, de forma
homogénea. (68,69)

66
Se procedió a hacer los pozos en la superficie del agar
con ayuda de un sacabocado estéril de 6 mm de
diámetro, y en cada uno de ellos se vertieron 25 µl de
cada concentración del extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) y por triplicado, se dejó reposar por 30
minutos.

Posteriormente, se incubaron las placas a una


temperatura de 35ºC por un lapso de 24 horas,
transcurrido este tiempo, se procedió a observar si hubo
formación de halos de inhibición. (68,69)

La metodología de trabajo utilizada se resume en la


Figura Nº 13.

67
Figura Nº 13: Flujograma de trabajo
Fuente: Elaboración propia 2018.

68
CAPÍTULO V
ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

4.1. Resultados de investigación

Los resultados de la evaluación de la actividad antimicrobiana del


extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) utilizando diversas
concentraciones frente a Staphylococcus aureus ATCC 6538 y
Escherichia coli ATCC 8739, realizada en Centro de Control Analítico
de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos (CENPROFARMA) se detallan a continuación.

69
Tabla Nº 1

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO ACUOSO DE Allium


porrum L. (PORO) FRENTE A Staphylococcus aureus ATCC 6538

Cepa Staphylococcus aureus ATCC 6538

Concentración Halos de inhibición (mm)


del extracto
acuoso de
Allium porrum
n ̅
𝐗
L. (poro)
(%)
1 2 3

100 % 33 34 34 33.7

80 % 31 30 30 30.3

40 % - - - -

Fuente: Elaboración propia 2018.

n: número de ensayos microbiológicos


̅: promedio
𝐗
- : no presentó halo de inhibición

En la tabla Nº 1 se observa que el extracto acuoso de Allium porrum L.


(poro) presentó actividad antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus
ATCC 6538 a la concentración del 100 % obteniendo un halo de inhibición
promedio de 33.7 mm y al 80 % con un halo promedio de 30.3 mm, sin
embargo no hubo presencia de halo de inhibición a la concentración del
40 %.

70
Tabla Nº 2

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO ACUOSO DE Allium


porrum L. (PORO) frente a Escherichia coli ATCC 8739

Cepa Escherichia coli ATCC 8739

Concentración Halos de inhibición (mm)


del extracto
acuoso de
Allium porrum
n ̅
𝐗
L. (poro)
(%)
1 2 3

100 % - - - -

80 % - - - -

40 % - - - -

Fuente: Elaboración propia 2018.

n: número de ensayos microbiológicos


̅: promedio
𝐗
- : no presentó halo de inhibición

En la tabla Nº 2 se observa que el extracto acuoso de Allium porrum L.


(poro) a las concentraciones de 100%, 80% y 40% no presentaron halos de
inhibición en los tres ensayos microbiológicos que se realizaron, por lo tanto
no mostró actividad antimicrobiana frente a Escherichia coli ATCC 8739.

71
Para el análisis estadístico de datos obtenidos se aplicó la prueba de
ANOVA en la cual se encontró que hay significancia en las muestras del
extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) frente a Staphylococcus aureus
a las concentraciones de 100 y 80 %, al tener un valor menor al 0.05,
además la concentración al 100% del extracto acuoso presentó mayor
actividad antimicrobiana con una media de 33.7 mm de halo de inhibición
frente a Staphylococcus aureus ATCC 6538. Ver el ANEXO Nº 11.

72
CAPÍTULO VI
DISCUSIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

5.1. Discusión de la investigación

Con el presente trabajo de investigación se logró realizar la evaluación


del efecto antimicrobiano del extracto acuoso de Allium porrum L. (poro)
frente a Staphylococcus aureus y Escherichia coli, bacterias de
importancia médica, por ser principales causantes de enfermedades
transmitidas por alimentos.

A pesar de que se han hecho estudios de la actividad antimicrobiana


del aceite esencial de Allium porrum L. (poro) en otras partes del
mundo, cabe resaltar que nuestro país no cuenta con estudios sobre
esta propiedad, sin embargo pertenece al género Allium muy
reconocido por sus propiedades antibacterianas, por lo que es
necesario realizar investigaciones para ahondar los conocimientos que
se tienen sobre esta especie y dar a conocer sus propiedades, para
que pueda ser utilizado como medicina natural al alcance de la
población tanto para la prevención como para el tratamiento de
enfermedades.

73
Con respecto a la actividad antimicrobiana del extracto acuoso de
Allium porrum L. (poro) no presentó efecto antibacteriano frente a
Escherichia coli, sin embargo en el estudio realizado por Ramos K.
refiere que el extracto acuoso de Allium cepa (cebolla) presenta
actividad antibacteriana frente a Escherichia coli productora de
betalactamasas de espectro extendido (BLEE), formando halos de
inhibición de 14.3 mm a una concentración de 100%, pese a que la
metodología aplicada en dicha investigación fue similar a la utilizada,
esta diferencia puede deberse principalmente a la concentración de los
compuestos azufrados que posiblemente varían según la especie y son
los responsables de la actividad antibacteriana, además esta bacteria
al ser Gram negativa tiene la particularidad de poseer una membrana
de fosfolípidos y lipopolisacáridos que sirve de barrera de defensa
frente a la acción de antimicrobianos.

Asimismo, en la investigación realizada por Salazar M. que trabajó con


el extracto acuoso de ajo perteneciente a la misma familia del poro, se
logró obtener un halo de inhibición de 17.7 mm a la concentración del
100 %, 15.7 mm al 80 % y 11.1 mm a la concentración del 40 % frente
a Escherichia coli, sin embargo en la presente investigación a las
concentraciones del 100, 80 y 40 % del extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) no hubo formación de halos de inhibición, dicho
resultado puede deberse a que los principios activos antimicrobianos
en el Allium porrum L. (poro) se encuentran más disueltos por su gran
contenido en agua en este vegetal.

En otra investigación realizada por Salazar L. sobre el efecto


antimicrobiano de los extractos acuoso de Allium sativum L. (ajo) sobre
Escherichia coli y Staphylococcus aureus, se logró obtener un halo de
inhibición de 43.3 mm para la concentración al 100 % frente a
Staphylococcus aureus, y un halo de 27 mm frente a Escherichia coli,
concluyendo que el extracto acuoso de Allium sativum (ajo) presentó

74
actividad antimicrobiana frente a las dos cepas, sin embargo en
Staphylococcus aureus se presentó mayor sensibilidad, comparado
con la presente investigación al evaluar el extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) a la concentración del 100% se obtuvo un halo de
inhibición promedio de 33.7 mm, demostrando actividad, sin embargo
los resultados obtenidos con la cepa Escherichia coli difieren con los
del presente estudio ya que no mostró sensibilidad alguna.

En otro estudio realizado por Pava T. sobre la actividad antimicrobiana


de los extractos de Allium sativum y Zingiber officinale sobre
microorganismos de la cavidad oral, trabajó el extracto acuoso de
Allium sativum llevándolo a una procesadora de alimentos donde le
adicionó 600 ml de agua desionizada, dejándolo en reposo por tres
horas, al evaluar la actividad antimicrobiana expusieron un halo de
inhibición de 12.3 mm frente a Staphylococcus aureus, comparando
con la presente investigación en que el extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro) se trabajó puro sin adición de agua, se obtuvo un halo
de inhibición promedio de 33.7 mm a la concentración del 100 % frente
a Staphylococcus aureus, ambos resultados muestran que hubo efecto
antimicrobiano, pero este fue mayor en el extracto acuoso de Allium
porrum L. (poro).

En la investigación de Mnayer D., Sylivie A., Tixier F., Petitcolas E.,


Hamieh T., Nehme N., et al. evaluaron la composición química,
actividad antibacterial y antioxidante de seis aceites esenciales de la
familia Alliaceae, para la actividad antibacterial trabajaron el método de
difusión de disco de papel y obtuvieron halos de inhibición de 20.0 mm
para el ajo, 18.5 mm para la cebolla, 10.0 mm para el poro y 10.3 para
el cebollino frente a Staphylococcus aureus, mientras que en la
presente investigación sobre la actividad antimicrobiana del extracto
acuoso de Allium porrum L. (poro) también se observó formación de
halos de inhibición promedio de 33.7 mm a la concentración del 100 %

75
y 30.3 mm a la concentración de 80 %, estos halos de inhibición fueron
mayores, esto puede deberse a la polaridad de los compuestos
azufrados que son más solubles en agua que en aceite.

En otro estudio realizado por Dávila R., Sosa R., Navarro A., Téllez V.
y Lazcano M. realizaron 2 extractos uno oleoso y otro etanólico en los
cuales se utilizó los bulbos previamente desecados de Allium
ampeloprasum var. porrum (poro), para determinar la actividad
antibacteriana se aplicó el método de Kirby Bauer en agar Mueller
Hinton, al evaluar el efecto antimicrobiano del extracto etanólico, este
no mostró actividad frente a ninguna bacteria, mientras que el extracto
oleoso presentó halos de inhibición de 8.4 cm frente a Escherichia coli
y 7.4 cm frente a Staphylococcus aureus, por ello llegaron a la
conclusión de que el poro contiene principios activos antimicrobianos
de origen no polar, sin embargo en la presente investigación el extracto
acuoso de Allium porrum L. (poro) expuso halos de inhibición promedio
de 33.7 mm y 30.3 mm a las concentraciones de 100 y 80 %
respectivamente, frente a Staphylococcus aureus, por tanto los
principios activos antimicrobianos si fueron solubles en agua que es
una molécula polar.

76
CONCLUSIONES

 Al evaluar la actividad antimicrobiana del extracto acuoso de Allium


porrum L. (poro) frente a bacterias tipificadas, se determinó que solo
presentó efecto antimicrobiano frente a Staphylococcus aureus
ATCC 6538.

 Se logró determinar que el extracto acuoso de Allium porrum L.


(poro) presentó actividad antimicrobiana frente a Staphylococcus
aureus ATCC 6538 en las concentraciones de 100 y 80 % formando
halos de inhibición promedio de 33.7 mm y 30.3 mm
respectivamente, más no presentó actividad antimicrobiana a la
concentración del 40 %.

 Se logró determinar que el extracto acuoso de Allium porrum L.


(poro) utilizado a concentraciones de 100, 80 y 40 % no mostró
actividad antimicrobiana frente a Escherichia coli ATCC 8739.

77
RECOMENDACIONES

 Se recomienda hacer la evaluación del efecto antimicrobiano del


extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) utilizando otras bacterias
de la línea de Gram positivas.

 Se recomienda realizar estudios utilizando otro tipo de extractos u


otra parte de la planta.

 Realizar estudios de los principales compuestos químicos que


determinan su efectividad antibacteriana.

78
FUENTES DE INFORMACIÓN

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90
ANEXOS

91
ANEXO Nº 1: MATRIZ DE CONSISTENCIA
Título: Actividad antimicrobiana del extracto acuoso de Allium porrum L. (poro).
METODO Y
PROBLEMA GENERAL OBJETIVO GENERAL HIPÓTESIS GENERAL TIPO Y NIVEL DE DISEÑO DE VARIABLES POBLACIÓN Y
INVESTIGACIÓN INVESTIGACIÓN MUESTRA

¿Existe actividad Determinar la actividad El extracto acuoso de Tipo de Investigación: Método de la Variable Población:
antimicrobiana del antimicrobiana del Allium porrum L. (poro) Investigación: Independiente (x) Constituido por
extracto acuoso de extracto acuoso de presenta actividad Analítica: Porque buscó Allium porrum
Allium porrum L. (poro) Allium porrum L. (poro) antimicrobiana frente a establecer la relación entre Deductivo: Va de Extracto acuoso (poro)
frente a bacterias frente a bacterias bacterias tipificadas. las variables, con el ánimo lo general a lo de Aliium porrum proveniente de
tipificadas?. tipificadas. de contribuir al desarrollo del específico. L. (poro) El Pedregal,
conocimiento científico. departamento
Indicadores: Arequipa,
Longitudinal: La variable provincia de
independiente es medida en x1: 100 % Caylloma,
diferentes momentos. x2: 80% distrito de
Problemas Específicos Objetivos Específicos Hipótesis Especificas x3: 40% Majes.
Prospectiva: Porque la
P.E.1: ¿A qué O.E.1: Determinar a que H.E.1: El extracto recolección de datos
concentración el concentración el acuoso de Allium porrum correspondientes a los
extracto acuoso de extracto acuoso de L. (poro) a diferentes hechos se dió una vez
Allium porrum L. (poro) Allium porrum L. (poro) concentraciones iniciada la investigación. Diseño de la Variable Muestra:
presenta actividad presenta actividad presenta actividad Investigación: Dependiente (y) 30 ml de
antimicrobiana frente a antimicrobiana frente a antimicrobiana frente a extracto acuoso
Staphylococcus Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus. Nivel de Investigación: Experimental: Actividad obtenido de 500
aureus?. Esta investigación antimicrobiana. g. de bulbos de
O.E.2: Determinar a que H.E.2: El extracto Explicativo: Ya que busco responde a un Allium porrum L.
P.E.2: ¿A qué concentración el acuoso de Allium porrum explicar las razones que diseño Indicadores: (poro).
concentración el extracto acuoso de L. (poro) a diferentes ocasionan ciertos experimental
extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) concentraciones fenómenos, identificando y porque se y1: Diámetro de
Allium porrum L. (poro) presenta actividad presenta actividad analizando los causales y manipula la halo de inhibición
presenta actividad antimicrobiana frente a antimicrobiana frente a sus resultados. variable (mm).
antimicrobiana frente a Escherichia coli. Escherichia coli. independiente.
Staphylococcus
Escherichia coli?.

Fuente: Elaboración propia 2018.

92
ANEXO Nº 2

FICHA DE RECOLECCIÓN DE DATOS


EVALUACIÓN DE ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO
ACUOSO DE Allium porrum L. (PORO)

Staphylococcus Escherichia coli


Cepas aureus

Halos de Halos de
inhibición (mm) inhibición (mm)
Concentración
del extracto n ̅
𝐗 n ̅
𝐗
acuoso de
Allium porrum L.
(poro) 1 2 3 1 2 3

(%)
40
80
100

Fuente: Elaboración propia 2018.

93
ANEXO Nº 3

CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA DE Allium porrum L. (PORO)

94
ANEXO Nº 4

CONSTANCIA DE ELABORACIÓN DE EXTRACTO ACUOSO Y


EFICACIA ANTIMICROBIANA DE Allium porrum L. (PORO)

95
ANEXO Nº 5

CERTIFICADO DE CALIDAD DE Staphylococcus aureus ATCC 6538

96
ANEXO Nº 6

CERTIFICADO DE CALIDAD DE Escherichia coli ATCC 8739

97
ANEXO Nº 7

PROTOCOLO DE RESULTADOS DE ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA


DE Allium porrum L. (PORO)

98
ANEXO Nº 8

RECOLECCIÓN Y SELECCIÓN DE MUESTRA DE Allium porrum L.


(PORO)

Figura Nº 14: Recolección de Allium porrum L. (poro)


Fuente: Elaboración propia 2018.

Figura Nº 15: Selección de Allium porrum L. (poro)


Fuente: Elaboración propia 2018.

99
ANEXO Nº 9

ELABORACIÓN DEL EXTRACTO ACUOSO DE Allium porrum L.


(PORO)

Figura Nº 16: Lavado de Allium porrum L. (poro)


Fuente: Elaboración propia 2018.

Figura Nº 17: Obtención de bulbos de Allium


porrum L. (poro)
Fuente: Elaboración propia 2018.

100
Figura Nº 18: Rallado de bulbos de Allium
porrum L. (poro)
Fuente: Elaboración propia 2018.

Figura Nº 19: Obtención del extracto acuoso de


Allium porrum L. (poro)
Fuente: Elaboración propia 2018.

101
Figura Nº 20: Envasado del extracto acuoso
de Allium porrum L. (poro)
Fuente: Elaboración propia 2018.

102
ANEXO Nº 10

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL EXTRACTO ACUOSO DE Allium


porrum L. (PORO)

Figura Nº 21: Ausencia de halos de inhibición de extracto acuoso de Allium porrum


L. (poro) frente a Escherichia coli.
Fuente: Elaboración propia 2018.

Figura Nº 22: Halos de inhibición a la concentración del 100% del extracto acuoso
de Allium porrum L. (poro) frente a Staphylococcus aureus.
Fuente: Elaboración propia 2018.

103
Figura Nº 23: Halos de inhibición a la concentración del 80 % del extracto acuoso
de Allium porrum L. (poro) frente a Staphylococcus aureus.
Fuente: Elaboración propia 2018.

Figura Nº 24: Ausencia de halos de inhibición a la concentración del 40 % del


extracto acuoso de Allium porrum L. (poro) frente a Staphylococcus aureus.
Fuente: Elaboración propia 2018.

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ANEXO Nº 11

ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE DATOS: ANOVA

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