Ciclo celular y Cáncer

Foto estática→

Recibe señales del exterior

1. 3 señales, sobrevive→ no hay cambio aparente, pero es
posible q esas señales hagan cosas que pasan
inadvertidos actualmente
2. Otras señales → división
3. Otras→ diferenciación
4. Frente a ciertas señales→ apoptosis: proceso ordenado,
minimizando daños para el resto de las células de
alrededor, reciclan algunos componentes.

Ciclo celular: mitosis

interfase: eventos necesarios para hacer la mitosis
M es la mitosis
Interfase
G1
S: Duplicación del DNA en fase S el ciclo
G2
La flecha es unidireccional

Distintos Check Points:

Situaciones en el tiempo en que la célula tiene que hacer una estimación de

parámetros externos e
internos (procesos bioquímicos) y tomar una decisión de como seguir como el ciclo.
Hay un conjunto de eventos moleculares en red que en determinadas condiciones se
1
mueven hacia seguir adelante con el ciclo celular o
se detienen en cierto punto.
Si no está en condiciones para sobrevivir más allá de
ese checkpoint y sigue muere.

G1 check point para ver si el DNA es lo

suficientemente grande para duplicarse.
El checkpoint de G2 se fija si se duplico todo
el DNA CP metafase→ cromosomas alineados
Cada punto tiene sus elementos de estimación
característicos. Lleva muchos
chequeos de que varios parámetros estén bien.

La G1 es tan larga que se agregó G0 como una "pausa" de G1. G1 es la más variable
de todas las fases.

Imaginando que tenemos solo 3 genes, se

expresan (transcribe y traduce). Las
interacciones y lo que produzcan las proteínas y
sus funciones, determinan funciones y
características de esa célula.
Si solo se expresa A y B es un tipo celular
distinto de C y B. Puede tener varias
combinaciones de expresión génica q exprese
distintos tipos subcelulares.
En realidad, cada gen puede expresarse con distintas intensidades. Por unidad de
tiempo, la A parece ser mayor que la B. Puede haber otro tipo celular que no.
Hay genes constitutivos necesarios para que sea una célula diferenciada, por ej de la
retina. Pero puede cambiar la expresión de genes, según lo que censa del exterior.

Dado un cierto número de genes, de los cuales

algunos se expresan y otros no, los que si en distintos
grados, pueden hacerlo en distintas combinaciones,
cada combinación genera un pool de proteínas
diferentes que conforma una célula diferente. El conj
de células posibles y diferenciaciones posibles a partir
de cierto genoma es prácticamente infinito.
Que una cél tenga determinadas proteínas diferente a
otro tipo celular, que hace que sean distintas? la
distinta colección de proteínas expresadas, pero que
hace que esa colección sea diferente→ diferente en la expresión de los genes, los
genes son los mismos, pero a partir de los mismos se da una expresión diferencial de
proteínas.
Factores de transcripción: dado por factores ambientales (en las cél
existen sistemas para censar el ambiente externo y afectar su propio
funcionamiento → sistema de transducción de señales
Ej: Proteína integral de membrana con 3 dominios → típico receptor
de membrana
transmembrana
Dom citosólico: censa y cambia según si está unido o no el
ligando.
dominio extracelular: la forma es tal q cada receptor genera una "copita" dde se
2
acopla una señal externa, es muy específico. Se produce un acople con el ligando.

3
 Tiene un bolsillo dde se alojan moléc externas. El receptor puede estar ocupado o no por
un ligando (proteína, hormona, fármaco). El ligando-Receptor es una unión específica.
Hay un ligero cambio conformacional que pasa por el dominio transmembrana y cambia
en el citosol. El citosólico cambia diferente según tenga el ligando o no.
Hay proteínas que no tienen afinidad por el dominio citosólico si no tienen un
ligando, si llega el ligando el dominio del exterior cambia, cambia el citosólico que ofrece
otros contornos y ciertas proteínas citosólicas que pasan a ser afines. Esas proteínas
también cambian el citosólico, eso permite interactuar con otras proteínas en cadena
hasta llegar a los efectores:
Enzimas pre existentes dormidas que se activan por cambio de conformación
Citoesqueleto: ensamble y desensambles→ re arreglos en estructura del citoesqueleto.
Factores de transcripción y otras proteínas que regulan la expresión génica: van a inducir
promotores→ cambia el patrón de expresión génica: induce proteínas nuevas en la célula,
o producir más proteínas.
La célula pasa a ser distinta a lo que era antes.
Diferenciación: mientras más diferenciada menos capacidad de dividirse. En tejidos suele
haber células pocas diferenciadas que se encargan de dividirse y dejar nuevas células
diferenciadas y sin diferenciar.
Gland mamaria: detienen su diferenciación hasta que haya gestación.

1. "Cél en reposo"
2. factor de crecimiento se une a receptor: acople y
pequeño cambio conformacional que se nota en el
citosol
3. La proteína azul cambia conformación por unión del
receptor
4. Pasaje de información con naranja y luego con
verde.
5. Hasta que algún factor transloca al núcleo e interactúa con cierto factor de transcripción
activándolo y se pega al enhancer y se activa la transcripción de determinado grupo de
genes. Para todos los que fueron blanco por este factor de crecimiento.
Es como una molécula interruptora: encendido o apagado: lo desplaza hacia cierto lado.
Las interacciones desplazan el equilibrio de la molécula activándolo, haciendo que
interactúe con el siguiente componente de transducción de señales aumentando su
afinidad al mismo. Esto sigue en cadena hasta llegar a los efectores.
Molécula transductores de señales de tipo interruptor:
Clases:

1. Por fosforilación: la señal induce fosforilación (unión de un grupo fosfato de modo

covalente) con gasto de ATP. Le confiere una carga negativa extra, induce una ligera
distorsión en la conformación que hace que cambie a activa, puede hacer que la señal
prosiga en la cadena.
2. Unión a nucleótidos de guaninas: Recibe señal en estado inactivo, tiene un bolsillo que
aloja GDP o GTP. GDP (inactivo) → señal→ induce intercambio de nucleótidos de
guanina→ entra GTP. Produce ligera distorsión que produce un cambio conformacional
pasando a estar activa, y gana afinidad por el componente siguiente del camino de
transducción de señales.

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 Para la salud de la célula es crucial que puedan encenderse y apagarse.
1. Fosforilación por quinasas. La inactivación se
produce por desfosforilación → fosfatasas
2. La activación se produce por intercambio de
GDP por GEF (factor de intercambio de
nucleótido), esta remueve GDP y poner GTP.
La inactivación se hace por hidrólisis, al
perderse pasa a ser GDP.
El primer efecto q puede pasar si no se
inactiva es q la célula sea no sensible a
llegada de ligando externo, pq no tiene proteínas inactivas q se activen para activar las
señales, siempre están activas.
Si llega una señal proliferativa como señal de crecimiento se activa el ciclo celular, y se
divide mucho.
Cuando existe una mutación en
cierta proteína
Arriba: "salvaje"
Abajo: "mutación" que cambia una base→
cambia el triplete que cambia el aa. Tiene una
forma distinta. La proteína funcionará diferente.
Es importante en caminos de TS.
Una cél recibe factor de crecimiento
Si una de las proteínas esta mutada puede ser que funcione distinto, como una
ganancia de función
Esa proteína ahora tiende a estar siempre activa. Hace que se transduzca siempre
señales rio abajo, aun en ausencia del ligando factor de crecimiento. Esta proteína
adquiere actividad constitutiva.
TUMOR
En una célula ocurre una mutación q le da carácter de actividad constituva a una
proteína transductora de señales de un camino proliferativo, le dice a factores de
transcripción todo el tiempo que estén activos.
Si es proliferativo y actúa de modo permanente sin ligando, se producirán todo el
tiempo proteínas responsables del avance del ciclo celular, se divide todo el
tiempo. Esto es la base molecular de la formación de un tumor.
La mutación ocurre en proteínas q le confiere carácter de comunicación constitutiva
y encienden el ciclo celular sin freno. No son capaces de inactivarse.

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Otras mutaciones
Mutaciones en región que controla la
expresión de genes y tasa de
producción de proteínas del camino de
transducción de señales, sin alterar los
aminoácidos.
Es decir, puede ser que una de estas
sea sobre expresada. Sí hay una
mutación del promotor del gen se
producirán muchas más proteínas del
tipo rojo en ese camino. Es importante que aún en estado que no están
constitutivamente activas, si están sobre expresadas pueden producir una activación
constitutiva de la proteína verde siguiente.
Pq toda proteína salvaje mantiene por un breve intervalo de tiempo la posibilidad de
pasar espontáneamente al estado activo. La verde se activa casi permanentemente sin
ligando.
También lleva a proliferación celular desmedida, ocupa lugar que dificulta la
funcionalidad de tejidos donde están.
Los estados activos e inactivos están en equilibrio. Una proteína inactiva tiene el
"equilibrio desplazado" hacia el lado inactivo, ante cierta señal desplaza dicho equilibrio
al activo. La inactivación mueve el equilibrio que ocurre por otra señal, pero puede pasar
eventualmente por cambio espontáneo.

Fosforilación
Cambia su conformación
No todos los aa son fosforilados solo los que exponen un grupo
OH.
Solo serina, treoninas y tirosinas.
La proteína fosforilada y no puede ser activa e inactiva o puede
darse al revés, ósea la fosforilación puede inactivar la proteína.
La fosforilación o no da conformaciones alternativas del
interruptor (switch molecular).

La que fosforila se llama quinasa, la que

desfosforila es fosfatasa.

Ras
La inactivación se da por GAP que hidroliza el GTP y
pasa a GDP inactivando la proteína.
No confundir con GAP q tmb significa un intercambio de tiempo
en el ciclo celular.

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Se muestra el mismo
fenómeno:

Dímero: se une el
ligando se produce un
cambio conformacional,
el receptor es una
quinasa, sufre
autofosforilación o fosforilación cruzada ya que un dominio fosforila a tirosinas del
dominio vecino. Así un dominio citosólico se fosforila y se reconocerá proteína
adaptadora GRB2 q puentea con proteína llamada Ras GEF que promueve
intercambio de GDP por GTP en RAS. Ras está asociada de forma periférica a la
membrana por una acilación.
El camino sigue rio abajo.
Además de los factores de transcripción están involucrados factores de
poliadenilación, splicing, traducción, todo factor que altere la expresión de un gen
(cant de proteínas ptes y producidas) se le llama TARGET PROTEIN.
Todo lo que altere la expresión de un gen
puede ser afectado por el camino de TS.
Este es un camino proliferativo, si hay
una mutación los genes de la síntesis de
cada proteína son potenciales
responsables de la formación de un
tumor: se mal llaman oncogenes.

Los productos de los oncogenes son las responsables de

que los organismos crezcan y se desarrollen.
Los tumores ocurren por desregulación de la actividad de esas proteínas que transduce
señales proliferativas.
Se llaman protooncogenes a versiones salvajes que mutadas que dan una proteína
constitutivamente activa se llamarían oncogenes (mutados).
Hay varios ejemplos:
GF: factor crecimiento
Receptores de factor crecimiento
Quinasas→ fosforilan,
RAS
Factores de transcripción

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Protooncogén:

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 Posibilidades de que se transforme en oncogén:
1. Que de una proteína hiperactiva (mutac o delección de un gen) Casos siguientes con
proteína normal pero super producida
2. Amplificación génica → el gen está en forma repetida→ aumentan chances de q la proteína
se haga
3. Rearreglo de cromosomas:
a. Mutaciones en un promotor o rearreglo de cromosomas (que la parte codificante se
reubique rio abajo de la secuencia de un promotor fuerte, entonces se producirá en grandes
cantidades por acción de la alta tasa de transcriptor de ese promotor.
b. Tmb puede ser que se haga una proteína de fusión que debería dificultar las funciones de
proteína original, podría hacer que sea hiperactiva o adquiera nuevas funciones.

Cascada de fosforilaciones
Receptor
otra proteína creo
GRF2
GEF
G
Pasaje de info de la cascada de quinasas, pq una
proteína fosforila a la otra en cadena. Hasta
fosforilar al factor de transcripción.

Se ve una proteína que es un tipo de receptor

particular de 7 pasos de membrana que están
acoplados a proteínas G heterotriméricas que
interactúan con G (estilo Ras) que llevan luego la
cascada de fosforilación.
Laboratorio: Cultivo de células
Crecen pegadas a la placa y se dividen hasta que cubren toda la superficie. Por
inhibición por contacto dejan de dividirse. Se forma una monocapa de células
normales.
Célula transformada:
Célula en la que se activa de modo constitutivo un camino de transducción de
señales proliferativas, se dice q esta transformada o camino a.
La célula empieza a no responder a ciertas características.

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 Por ej en cultivo crecen en monocapas, las
transformadas deja de responder a inhibición por
contacto, se forma una multicapa, no les importa el
contacto por inhibición. Así se pueden estudiar en
laboratorio.
Foto real dde se ve la montaña. Una célula se
transforma y se duplica mil veces, se llama foco de
transformación. Ese foco se ve a ojo desnudo como
un pequeño punto negro que se diferencia de la
monocapa. Se diferencia bien al microscopio.
Podríamos retirar este foco y generar una línea de
células transformadas para estudio y se estudia en
contraposición con las células normales.
Estas células eucariotas están transformadas pq no se comportan como normales.
Crece sin inhibición. Son un pre modelo de cáncer.
En procariotas se dice que se transforma cdo se coloca DNA foráneo. Una eucariota
se dice que esta transfectada.
Homeostasis
En condiciones de salud hay un balance entre ritmo normal de división y apoptosis.
Un tumor q se da por aumento de división celular, hará que haya más células de las
convenientes y q dificulte la funcionalidad de cierto tejido.
Puede devenir de dos fenómenos diferentes:
Más división en apoptosis normal
Se afectan procesos de apoptosis frente a tasa de división normal. Mueren menos
células, tmb lleva a que haya más células de lo normal para la vida de ese tejido.
Dará lugar a un tumor.
Se da igual importancia ambos. Es el
balance lo que lleva a homeóstasis, si
cualquiera se cambia lleva a un tumor. Los
genes mutados de un tumor pueden ser de
cualquiera de los dos tipos.
Una ganancia de función en genes de
proliferación o perdida de función en
proteínas que llevan a apoptosis. Pueden
ocurrir las dos situaciones a la vez.

Maligno o benigno
Benigno: crecen encapsuladas→ será notable
→ no altera el funcionamiento del tejido
Maligno: Las células tarde o temprano se
separan del grupo original pq secretan
proteasas y romper matriz extracelular
invadiendo otros tejidos.

Pueden ganar cada vez más mutaciones →

más malignas → crecen más de lo debido inclusive, invadiendo el tejido hacia
dentro. El grado de mutaciones progresivo determina un aumento en la

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agresividad del tumor.

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 Desde epitelial normal hasta un carcinoma invasivo.
1. Cél creciendo por encima de lámina basal
2. atraviesan lamina basal y a traviesan el tejido
3. llegan a vasos sanguíneos. Viajan por capilares 1 de cada mil sobrevive
(tiene capacidad migratoria)
4. Da crecimiento secundario, secretan proteasas para penetrar a otro
tejido.
5. Ahora forman un tumor secundario (metástasis)
6. Pueden terminar siendo más malignas que el tumor original

Puede haber mutaciones en proteínas con control de daños, afectando de modo

indirecto la aparición de otras mutaciones, entonces se puede terminar afectando de
forma indirecta a nuevas mutaciones del camino de TS.
Duración de ciclo de celular

Ovocitos con ciclo celular activo:

Se adquiere material intracelular de estos y se coloca en ovocitos quiescentes. Ese
material promueve el disparo de división celular. Este experimento es seminal en
MPF (factor promotor de mitosis) de composición molecular no definida. La
observación de actividad de MPF que varía según el estado del ciclo celular. Esa
condición de actividad de MPF se correlacionó con una proteína que oscilaba entre
ausente y presente en pico de actividad, esto tiene una frecuencia que coincide con
fases y duración del ciclo.
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Ese ritmo repetido y coincidente con el ciclo celular hizo que esta proteína se llame
"Ciclina". Existen familias de ciclinas, generan el mismo fenómeno de mínimo y máximo
de expresión. No coinciden con todas las ciclinas, todas presentan funcionamiento similar
pero los picos no coinciden entre ellas. Hay ciclinas con diferentes picos de expresión en
diferentes momentos del ciclo celular, es decir, tienen funciones en esos momentos del
ciclo celular donde aparecen.
Las ciclinas funcionan asociadas a proteínas con act fosforilación → quinasas, su act es
dependiente de ciclinas. CDK→ quinasa dependiendo de ciclina → su expresión es
constante, su actividad no, la actividad de quinasas varía dependiendo
de las ciclinas.
Ciclo celular
Hay ciclinas específicas de cada fase. Las CDK están
siempre. Las ciclinas son degradadas por el
proteasoma una vez que paso el tiempo en que la
ciclina actúa son marcadas para degradarlas.
No hay una única CDK, cada CDK puede interactuar
con varias ciclinas, y las ciclinas con varios CDK. Hay
mucha especificidad en esto.

Proliferación celular:
Hay genes a los cuales se unen los factores de
transcripción activados por caminos de TS disparados
por F
Crecim q promueven división y crecimiento de la
célula.
Los genes involucrados en la proliferación celular
son los que producen las ciclinas.
Esos factores de transcripción que son efectores ¿a
qué promotores se pegan?
Terminan directa o indirectamente activando los
promotores de ciclinas.
Esa ciclina D se une a su CDK (en este caso CDK 4 o
6), este complejo fosforila una proteína llamada RB.
RB en su estado no fosforilado (ACTIVO) mantiene reprimida a proteína E2F. RB
fosforilado se inactiva en su rol de represor, entonces deja que algo se active.
E2F es un factor de transcripción que se pega a
promotores de genes que son necesarios para que
prosiga el proceso de proliferación celular.
RB→ gen supresor de tumor, la presencia de RB
funcional frena el ciclo celular.

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La activación de complejos CDK: Hay
un componente necesario para activar CDK-
ciclinas. El evento adicional para esto
es una doble fosforilación que ocurre sobre la
molécula CDK. Tiene un efecto de
inactivar los complejos CDK-C. Si saca uno de los
fosfatos se activa el complejo.
Los niveles de CDK son constantes, los de ciclina
varían según estadio.
Una determinada CDK y su ciclina está en su instancia de menor expresión posible, se
forma ciclina.
Alguna ciclina producidas de novo
interactúan con CDK presentes. Esas CDK si se activasen inmediatamente tendríamos
una actividad paulatina.
Pero se necesita un encendido más inmediato.
Entonces los complejos no se activan de modo
instantáneo sino
que son fosforilados de modo doble inhibiendo
transitoriamente.
Se "acopia" material y luego se comienza a
construir como en una obra de construcción para
hacer la casa. Se inhiben hasta que llegue la
instancia correcta para que actúen, cdo llega el
momento la fosfatasa hidroliza un fosfato haciendo
que se active el complejo.
Un paso simple entonces es lo que dispara la
activación de los complejos, sino se activarían de
modo paulatino y lento.

Elemento inhibitorio:
Por más que este en su forma activa si
se une el componente del complejo
terciario impide el funcionamiento del
complejo. El inhibidor previene el
contacto del complejo con sus targets.
Sirve como salvaguarda cdo se
necesita inhibir el funcionamiento de los
complejos para detener el ciclo celular.

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 CDKD → CD4→ fosforila RB→ se inactiva→ Libera a E2F→ varias más → va pasando a
sig fase.

Arriba ciclo celular.

Verde: promueve el ciclo celular
Rojo frenan ciclo celular
Azul izquierda: llegan señales
proliferativas: activa Ciclina.
De izq a derecha hay diferentes
complejos
CDK-ciclinas en distintas fases.
Daño al DNA→ P53→complejo
ciclina CDK→ activa P53 (es multi
fosforilable)→induce genes de P21q
es un inhibidor de todos los
complejos para frenar al ciclo hasta
q sea solucionado el daño.

Daño al DNA
Censado por ciertas proteínas, se induce camino
transductor de señales desde dentro de las células.
Inducen un pasaje de
información hasta fosforilación de P53 que es
preexistente y está unido a un inhibidor. Al fosforilarse se
libera y se pega a promotores de ciertos genes, como P21
q es una proteína inhibitoria de complejos CDKs.
Así P53 puede detener el ciclo celular hasta que el daño
del DNA este reparado y el ciclo puede proseguir.
No sería conveniente q siga ya que las células hijas
podría sufrir las consecuencias.

Si el daño al DNA no se puede reparar:

P53 es sensible a la inducción al cambio al DNA. Puede producirse fosforilaciones
diferenciales al P53, activaran P21 para q detenga el ciclo. Si el daño es extensivo, los
caminos q censan este daño fosforilan a P53 en varios ciclos. Esto activa la
apoptosis. Esto es conveniente para no tener una célula mutada o con DNA mal en el
tejido.
RB se inactiva espontáneamente:
E2F se libera, y esa liberación lleva a proliferación del ciclo celular aún en ausencia de un
factor de crecimiento externo.
P53→ falta
Faltaría que la célula sea incapaz de hacer inhibidores de CDKs, haría q proliferara en
desmedida.
Causas:
Puede darse por ganancia de función (Ras, etc) como pérdida de función de
proteínas guardianes como RB y P53.

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 Tipos de mutaciones:
a. Mutaciones q hacen que ganen función : una simple mutación puede crear un
oncogén. La mutación permite estimular la proliferación celular.
Ambas células son diploides, por lo que habrá dos copias para cada gen. Una sola es
suficiente con q se produzca en uno de los dos alelos. Es un mutante dominante.
b. Perdida de función en RB o P53 si ocurre en uno de los dos alelos no es suficiente
para proliferación anormal. Es necesario que sean ambos los mutados, al tener
perdida de función el otro alelo cubre esa función. Pueden ser mutaciones distintas
(mutación pequeña sobre proteína RB y una q destruya todo el gen)

Se pueden encontrar ambos tipos de mutación, de ganancia (proteínas q promueven

proliferación) y perdida de función (proteínas q frenan el ciclo).
Apretamos acelerador y freno a la vez→ desastre.

Mecanismo gral de regulación de la activación génica en

cél en cadena de los genes
Receptor al cual se une un ligando, induce
camino de TS, que activa un efector q es un
factor de transcripción, promoviendo la
producción de proteínas verdes que se
unirán a otros promotores induciendo que se
produzcan otras proteínas, a la vez las
azules pueden ser nuevamente factores de
transcripción o funciones diversas.
Estos fenómenos de oleadas sucesivas de
activación de la expresión génica son muy
comunes en las células.

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 Reciben un ligando, estos caminos TS provocan activación
directa o indirecta de complejos ciclinas-CDK.
1. Se une ligando externo→ mitógeno, FC puede ser un
mitógeno, pero mitógeno tmb puede ser algo agregado de
forma artificial.
2. Cambios conformacionales q activan Ras
3. Activa MAP quinasa q fosforila algún factor de transcripción
4. El factor se une al gen myc (oncogén).
5. Myc

a. Activa el promotor de ciclina D→ se forma complejo

con CDK4, típico de etapa G1, lleva a fosforilación
de RB, libera E2F, la actividad de E2F permite la
entrada a siguiente fase del ciclo celular
b. Va al promotor de SCF q aumenta la degradación de
P27, se reduce posibilidad de q se inhiban complejos
CD4, tendremos más actividad ciclina- CDK,
contribuye a fosforilación de RB, liberación de E2F y
a mayores posibilidades de entrar en fase S
c. Aumenta síntesis de E2F, provocando que se
entre en la fase siguientes del ciclo
Fosforilan laminas para que se desensamble la
membrana nuclear:

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