Extracción de ADN

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Extracción de ADN (experimento casero)

El ácido desoxirribonucleico o ADN es el material genético de los seres vivos. La


extracción de ADN se realiza con la finalidad de hacer estudios genéticos, de forense y
biología molecular. Nosotros podemos extraer ADN de forma fácil con productos
caseros y un poco de cuidado.

Para los estudios genéticos más profesionales, se requieren protocolos especiales con
diversos pasos y materiales que pueden ser contaminantes. Sin embargo, podemos hacer
una extracción de ADN a partir de materiales que tenemos en casa, o que podemos
hacer en el laboratorio de biología del colegio.

Objetivos de la extracción de ADN


El ADN está constituido por dos cadenas de nucleótidos, unidas entre sí formando una
doble hélice. El esqueleto presenta grupos fosfato que están cargados negativamente y
son polares, lo que le confiere al ADN una carga neta negativa. Dentro del núcleo, esta
molécula se encuentra empacada con proteínas a su alrededor.

Los objetivos de esta extracción de ADN son:

1. Aplicar una técnica sencilla para obtener ADN de células vegetales.


2. Comprender el proceso necesario para la extracción del ADN.

El aislamiento del ADN usando el protocolo con sal común y lavaplatos es una
alternativa simple, fácil, rápida, económica y no contaminante. Se basa en las
características fisicoquímicas del ácido nucleico.

Materiales para realizar la extracción casera de


ADN
 Material vegetal, preferiblemente fresas (Fragaria vesca), kiwi (Actinidia chinensis) o
plátanos (Musa sp.).
 Mortero o licuadora.
 Bisturí o cuchillo.
 Baño de María (37ºC).
 Gasa o algodón.
 Probeta de 100 ml o taza para medir.
 Tubo de ensayo o frascos pequeños.
 Agua destilada.
 Detergente lavaplatos.
 Sal de cocina o cloruro de sodio NaCl.
 Papel de filtro y colador.
 Etanol o alcohol isopropílico con una concentración mayor a 70%, frío (5ºC).
Pasos para la extracción de ADN
El procedimiento para realizar el aislamiento del ADN sigue los siguientes pasos:

Paso 1: preparación de solución salina-jabonosa


Preparamos una solución salina-jabonosa compuesta con 100 ml de agua (media taza),
10 ml de detergente lavaplatos (1 cucharada) o 20 ml de champú (sin acondicionador,
dos cucharadas) y 13 gr de NaCl o sal de cocina (una cucharada).

Paso 2: preparación de las frutas


Si usamos kiwi o plátano, lo pelamos y cortamos en cubos pequeños, luego lo
trituramos en un mortero o licuamos. Si utilizamos fresas, las podemos colocar en una
bolsa con cierre hermético y las machacamos.

Paso 3: adición de la solución de sal y detergente a la fruta


En el mortero con la fruta triturada (o en la bolsa con las fresas) vertemos la solución
salina-jabonosa y continuamos el proceso de romper las frutas. Opcionalmente,
podemos colocar el preparado en un baño de María a 37ºC durante 15 minutos para
facilitar la extracción

Paso 4: separación del material sólido, proteínas y lípidos


Pasamos por un colador o papel de filtro para retirar el grueso de la sopa de fruta y
luego, a través de la gasa o algodón, hasta obtener 5 ml del líquido filtrado en un tubo
de ensayo o 50 ml en un frasco.

El jugo de fruta salado-jabonoso se cuela y se filtra para quitarle los sólidos, proteínas y
lípidos a la solución acuosa del ADN.

Paso 5: precipitación del ADN por acción del alcohol


Sobre el jugo de fruta, vertemos lentamente por las paredes del tubo de ensayo etanol o
isopropanol frío. Dejamos reposar unos minutos. Debe aparecer una capa blanquecina
gelatinosa.

Si introducimos una varilla de vidrio o un palito de madera, con movimientos circulares


podremos recuperar el ADN enrollado en la varilla.

Explicación de las etapas de la extracción de


ADN
Cuando realizamos un experimento en ciencia, siempre es indispensable entender
el fundamento de las técnicas y por qué suceden los fenómenos. Veamos la
explicación de cada etapa.
Elección del material vegetal
Las plantas poseen tres tipos de ADN: el nuclear, el mitocondrial y el cloroplástico.
Además, la mayoría de las plantas presentan poliploidia, esto es, la condición de
algunas células u organismos de poseer más de un conjunto de cromosomas.

Por ejemplo, los seres humanos tenemos dos pares de 23 cromosomas (23 x 2 = 46
cromosomas en total), es decir, somos diploides. Mientras que las plantas pueden ser
triploides (3 conjuntos de cromosomas), tetraploides (4 veces la cantidad de
cromosomas) o más.

Las fresas cultivadas (Fragaria x ananassa) maduras son un material excelente para
extraer ADN. Son fáciles de triturar y contienen enzimas, llamadas pectinasas y
celulasas, que ayudan a romper las paredes celulares. Además, las fresas son
octoploides (7 cromosomas x 8 = 56 cromosomas), es decir, tienen ocho copias de cada
cromosoma, lo cual proporciona más ADN que la banana o el kiwi.

El kiwi tiene 29 cromosomas y es tetraploide. La banana o plátano tiene 11 cromosomas


y la mayoría es triploide. Pero también se puede hacer este experimento con cebollas,
lentejas u otro vegetal.

Ruptura de tejidos, paredes y membranas celulares


Mediante fricción con el mortero o por el licuado del material, se rompen las uniones
entre las células y la pared celular. Esta homogeneización facilita el efecto de lisis o
ruptura que ayuda a liberar el material genético.

El jabón o detergente líquido ayuda a romper las membrana celulares, que están
compuestas por lípidos. Las moléculas de detergente ayudan a romper las membranas
celulares y liberar el ADN del núcleo.

Eliminación de proteínas y lípidos


Los componentes no solubles como el material fibroso y las proteínas se separan del
ADN por filtración.

Precipitación del ADN


El ADN se muestra como unas hebras blanquecinas entre el etanol y la
solución acuosa.

Después que son eliminados los lípidos y las proteínas, los grupos fosfato del ADN
están cargados negativamente y son polares. El ADN se disuelve en soluciones acuosas,
pero es insoluble en alcohol.

La adición de etanol y altas concentraciones de iones sodio que se unen a los grupos
fosfato, reduce las fuerzas repulsivas entre las cadenas y permite que el ADN se pliegue
sobre sí mismo haciéndolo insoluble. De esta forma precipita y forma una malla
filamentosa blanquecina que contienen proteínas y otros materiales.

¿Cuál es el papel de la trituración?


Romper las paredes celulares y separar las células.

¿Cuál es el papel de la adición del detergente?


El lavaplatos o el champú ayuda a disolver la membrana celular que es una bicapa
lipídica.

¿Cuál es el papel de la sal cloruro de sodio?


El cloruro de sodio o sal de cocina ayuda a separar algunas de las proteínas que están
unidas al ADN. También mantiene las proteínas disueltas en la capa acuosa de forma a
impedir que estas precipiten también con el alcohol, junto con el ADN.
Los iones sodio y cloruro neutralizan las cargas negativas del ADN. Adicionalmente,
los cationes sodio (Na+) contrarrestan las cargas negativas de los fosfatos del ADN.

¿Para qué sirve el alcohol en la extracción del ADN?


El alcohol disminuye la constante dieléctrica de la solución acuosa. El etanol frio
provoca que el ADN se separe del agua y precipite. Cuando el ADN se separa de la
solución acuosa, tiende agruparse, lo que hace que sea visible. Las largas cadenas del
ADN se enrollarán alrededor de la varilla al revolver la interfase entre las dos capas.

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