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    Seccion 3 Practica Rp2

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    Mariana Ramirez Zarate
    Este documento describe un experimento para modificar los factores que afectan la solubilidad de las proteínas y determinar el punto isoeléctrico de la insulina. Los resultados mostraron que la precipitación de proteínas se produjo con la adición de sales pero no con cambios de pH o solventes. El punto isoeléctrico de la insulina se determinó en el tubo con pH=3, donde la proteína precipitó debido a su menor solubilidad en ese pH. El documento concluye que la solubilidad de las proteínas depende del pH

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    Este documento describe un experimento para modificar los factores que afectan la solubilidad de las proteínas y determinar el punto isoeléctrico de la insulina. Los resultados mostraron que la precipitación de proteínas se produjo con la adición de sales pero no con cambios de pH o solventes. El punto isoeléctrico de la insulina se determinó en el tubo con pH=3, donde la proteína precipitó debido a su menor solubilidad en ese pH. El documento concluye que la solubilidad de las proteínas depende del pH

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    INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

    ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


    BIOQUÍMICA GENERAL
    “PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DE PROTEÍNAS”.
    Arriaga Ramírez Aline Michael
    Domínguez Flores José Raúl
    3IM2 SECCIÓN 3
    OBJETIVOS
    Tubo Punto isoeléctrico
    General: Modificar los factores extrínsecos y analizar 1 No se observa
    su efecto sobre la solubilidad de las proteínas. 2 No se observa
    3 Hubo precipitación
    Específicos 4 No se observa
    5 No se observa
     Separar proteínas por precipitación con sales Tabla 4. Determinación del punto isoeléctrico de la
    para obtener los grupos -R y posteriormente insulina.
    observar los factores extrínsecos.
     Mostrar cómo afecta el pH presente en la DISCUSION
    De acuerdo con los resultados del primer
    mayoría de las proteínas al punto isoeléctrico.
    experimento notamos que en los cuatro casos
     Determinar el pH de la insulina, basándose en (precipitados 1 y 2, sobrenadante 1 y 2), se
    sus propiedades a diferentes valores de pH. obtuvo una proteína, ya que al agregar
    RESULTADOS (NH₄)₂SO₄ existe una competencia entre la
    proteína y los iones de la sal por el agua, por
    Se obtuvieron los siguientes resultados. esta razón al adicionar el reactivo de Biuret se
    observa una coloración violeta/morada que es la
    Muestra Biuret Interpretación
    proteína precipitada.
    Precipitado1 + Coloración morada/violeta
    fuerte, (presencia de proteína). En la determinación del punto isoeléctrico de la
    Sobrenadante1 + Coloración morada/violeta insulina, notamos una reacción en el tubo 3, esto
    opaca, (presencia de proteína). debido a que la proteína presenta una menor
    Precipitado 2 + Coloración solubilidad y por lo tanto la proteína se precipita,
    morada/violeta fuerte, observando el fenómeno de Salting out. Salting
    (presencia de proteína). out. (2022).
    Sobrenadante + Coloración morada/violeta claro,
    2 (presencia de proteína).
    CONCLUSIONES
    Tabla 1. Resultados del Salting-out   En conclusión, con esta práctica podemos
    Clara de huevo filtrada y Adición de Etanol 96° decir que la solubilidad de las proteínas se
    diluida 1:3 ve afectada por ciertos factores que
    provocan cambios físicos y químicos, que
    Tubo Precipitación Tubo Precipitación son sensibles a las fuerzas iónicas y al pH
    del medio, como así mismo a la presencia
    HCl 0.1 N + HCl 0.1 N +
    de solventes y sales disueltas.
    NaOH 0.1N - NaOH 0.1N - REFERENCIAS
     Aula Virtual de Biología. (s/f). Www.um.es.
    Regulador + Regulador + Recuperado el 17 de octubre de 2022, de
    de acetatos de acetatos https://www.um.es/molecula/prot06.htm
    0.1 M, pH 0.1 M, pH
    4.7 4.7  Salting out. (2022). Quimicafacil.net.
    https://quimicafacil.net/tecnicas-de-
    Agua - Agua + laboratorio/salting-out/

    Tabla 2. Precipitación por efecto del pH y solventes

    Tubo Precipitación
    Cloruro de mercurio 5% Positiva 
    Nitrato de plata 2% Positiva 
    Acetato de plomo 5% Positiva 
    Cloruro de sodio 5% Negativa (salting in)
    Agua (testigo) Negativa 
    Tabla 3. Precipitación por metales pesados 
    ANEXOS

    (Operaciones)

    En este caso para calcular el pH en cada tubo y así determinar el ́ punto isoeléctrico de la insulina,
    recurriremos a la ecuación de Henderson-Hasselbalch. 

    pH= pKa + log [A ]/[HA]


    -

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