Informe 4 Inoculacion

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Universidad Católica de Santa María

Escuela Profesional de Medicina Veterinaria y Zootecnia


Microbiología General

INFORME DE PRÁCTICA

A : M V Z. Eloisa Zúñiga Valencia


Docente de Prácticas.

De : Winivere Palacios Valdivia


Alumno

Asunto : Práctica #4: “Inoculación De Medios De Cultivo Para


Aislamiento De Colonias Bacterianas”

Fecha : 24/07/2020
PRÁCTICA #4

“INOCULACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA


AISLAMIENTO DE COLONIAS BACTERIANAS”

1. INTRODUCCIÓN:
Para el correcto estudio de la morfología, fisiología de un microorganismo es
necesario que sean cultivados en un laboratorio de microbiología donde cada
una será aislada con diferentes objetivos de estudio, donde debes modificar su
ambiente para estudiar cada uno de ellos.
La actividad inocular medios de cultivo en el laboratorio es la cuarta etapa,
donde se requieren técnicas y conocimientos de inoculación de muestras en
microorganismo según sea el caso y el tipo de inoculación donde este tendrá
algún fin en especial. Se deben de seguir una serie de fases para que haya un
correcto procedimiento.
Existen diferentes métodos y técnicas para inocular una muestra o inoculo
procedente de un medio ambiente cualquiera en un medio de cultivo solido o
líquido, con el fin de obtener el desarrollo de bacterias en forma separada, que
luego den lugar a la obtención de cultivos puros, paso previo indispensable de
cualquier trabajo de estudio microbiológico en el laboratorio.

2. OBJETIVOS:

A. OBJETIVO GENERAL
 Conocer la importancia y los procedimientos para la
inoculación de muestras en los medios de cultivo en el
laboratorio.

B. OBJETIVOS ESPECIFICOS
 Conocer las diversas técnicas específicas y su finalidad.
 Adquirir habilidad en la ejecución de estas técnicas.
 Adquirir habilidad en el manipuleo adecuado de muestras,
material y medios en el proceso de inoculación.

3. MARCO TEORICO:

El proceso de Inoculación es la cuarta etapa. Las Inoculaciones de medio se tratan


de aislar colonias bacterianas, donde tenemos que esterilizarlo antes, y necesitamos
de técnicas para inocular a las muestras y elegir según el resultado que quiero
obtener. Después de haber inoculado la muestra tenemos que ponerlos a la
incubadora.

 Importancias y procedimientos de inoculación.


 1 fase de Identificación de medios: Tenemos que identificar la placa Petri,
tomamos una cinta masking tape y ahí escribimos una serie de datos.

En la cinta debe estar:

1. Que es lo que he sembrado, tipo de muestra ¿de


qué especie?:
2.- ¿Cuándo se sembró?:
3.- ¿Quién lo hizo? SOLO SIGLAS:
4.- Fecha:

 2 Fase de Atemperamiento: Atemperar es dar la temperatura adecuada, lo que


yo quiero evitar es shock térmico ¿qué es? Cambio brusco de temperatura esto
produce la muerte de algunos microorganismos.

Se tiene que atemperar la placa Petri, necesitamos el mechero, tomamos la placa


Petri y la pasamos por el fuego. La giramos hasta el momento en que no la sienta
fría, solo por unos segundos.

 3 fase de Inoculación o sembrado propiamente dicho: Para inocular utilizare


asas o agujas de platino. Primero tengo que homogenizar la muestra, porque
dentro de esta hay microrganismos en suspensión, en caso de muestras liquidas
giro el frasco, de manera que lo que voy a sembrar represente a todos lo
microrganismos, en el caso de muestras solidas hay que tener en cuenta que son
tejidos, paso a esterilizar el asa de platino unos 5 cm tiene que estar al rojo vivo.
Inserto eso en la muestra y siembro en la Placa Petri

.
 TÉCNICAS DE SEMBRADO O INOCULACIÓN:

Se necesita aislar una célula bacteriana: Necesitamos colonias bacterianas donde


todo ese individuo son de la misma especie.

1. Técnica de Inoculación por estría de agotamiento y dispersión en Placa:


Con el asa coloco una gota de la muestra y esterilizo el asa. Donde a esa gota
la voy a agotar haciendo estrías, con la ayuda del asa. Debemos de hacer 3 a
4 juegos de estrías. Luego cuando ya la placa está sembrada, lo llevamos a la
incubadora. Cuando pasan las 24 hrs hacemos la lectura de los medios
inoculados.

Se le llama cultivo mixto porque existen varias especies de microorganismos, donde


podemos encontrarlos en la naturaleza, en nosotros. Y la muestra es un reflejo de lo
que está pasando en realidad. Solo se puede trabajar con diferenciadas.

2. Técnica de Inoculación por Estría Simple: Tomo cada colonia


diferenciada que creció y se ponen en diferente muestra. Involucra que solo
se hace cultivo de 1 sola especie para poder trabajar con ella más
específicamente. Donde se le llama cultivo puro y cepa bacteriana.
3. Técnica de Inoculación por estría Menuda: Se usa para hacer el
procedimiento de un antibiograma. Se toma muestra del cultivo puro con el
asa esterilizante y se empieza a hacer una estría menuda. Con esto se quiere
obtener un crecimiento uniforme (crecimiento en césped) porque para la
prueba de antibiograma este tiene un disco con antibióticos diferentes, y
estos empezarán a esparcirse y según el poder del antibiótica con e esa
bacteria, habrá lugares de zonas de inhibición.

4. Técnica de Inoculación por Punción: Utilizamos la aguja de inoculación,


se hacen en los tubos de ensayo. Se toma la aguja de platino, se toma la
muestra y se inserta la aguja en el medio de cultivo. Donde en este tipo de
inoculación se demuestra la movilidad bacteriana. Todo esto se realiza en un
medio Inclinado. Cuando se forma una nata en el medio de cultivo se le
llama película donde sería aeróbica. Se puede presentar también el
sedimento sería anaeróbica. En otro caso el medio transparente puede volver
turbio donde se llama turbidez se llaman bacterias facultativas.
4. MATERIALES Y TÉCNICAS:

I.1 EQUIPO
 Estufa.
I.2 MATERIALES
 Medios de cultivo: Agar Sangre, Mac Conkey, Nutritivo.
 Asas de platino.
 Muestras clínicas.
 Cinta adhesiva y lápices.
 Mechero de gas propano.

5. MÉTODOS:

Para esta práctica se simuló una inoculación en casa. Preparando gelatina en nuestra
Placa Petri para simular un medio de cultivo. Lo que se quería imitar era la inoculación
y el proceso que se requiere para un resultado satisfactorio.

El primer paso es donde tenemos que tener un manejo adecuado de la Placa Petri:

La Placa Petri se encuentra volteada, La Placa Petri se encuentra en su


debemos de sujetarla con el dedo posición correcta donde debemos
pulgar y el anular para voltearla sujetarla esta vez con el dedo pulgar
e índice.
Desinfectamos el asa de nuevo y
empezamos a hacer estrías mientras
El dedo pulgar se utilizarágiramos
para las Placa Petri.
levantar la tapa de la Placa Petri y el
índice para sujetarla.

Desinfectamos el asa en el mechero


6. RESULTADOS:
y procedemos a poner muestra en el
medio de cultivo.

7. RESULTADOS:

 Aprendimos la importancia y a como inocular una placa Petri de forma


didáctica para tener práctica en un futuro experimento en el laboratorio de
Microbiología.
 Aprendimos sobre los diferentes medios de cultivo y su función específica.

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